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PROTOCOLO NORMALIZADO DE TRABAJO PARA EL


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UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA


FACULTAD DE CIENCIAS - DEPARTAMENTO DE QUMICA
PROTOCOLO NORMALIZADO DE TRABAJO (PNT) PARA EL
ESPECTROFOTOMETRO LAMDA 2S
1. OBJETIVOS.
Suministrar a la comunidad universitaria una gua rpida para manejar
correctamente el espectrofotmetro Lada 2S, sin necesidad de recurrir a los
instructores o manual de fbrica.
2. OPERACIN BASICA DEL EQUIPO
Es claro que para poder usar un dispositivo electrnico hay que conectarlo a una
fuente elctrica; a continuacin se dar a conocer en primera instancia como es el
sistema que tiene frente a usted el cual debe inspeccionar muy bien. La siguiente
figura muestra el conjunto del equipo a utilizar:
Figura 1. Sistema bsico acoplado espectrofotmetro Lambda 2S.

Monitor
Espectrofotmetro
Lambda 2s

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Estabilizador

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Figura 2. Espectrofotmetro Lambda 2S

Compartimiento
para la muestra

Botn de
Encendido

Luego de identificar plenamente cada uno de los dispositivos que componen el


sistema a utilizar, siga los siguientes pasos para encender todo el conjunto mostrado en la Figura 1:
I. Conecte el estabilizador a la toma de corriente.
II. Encienda el estabilizador ubicando el botn de encendido del mismo.
III. Encienda la CPU que compone el sistema de manera habitual como lo hace
con un computador.
IV. Encienda el monitor
V. Ubique el botn de encendido del espectrofotmetro (ver Figura 2) y encindalo.
Con el sistema encendido el siguiente paso es aprender a usar el equipo; en el
presente PNT se darn algunas indicaciones bsicas sobre el manejo, suficientes
para que el operario o estudiantes este en la capacidad de iniciar la adquisicin de
destreza en el manejo del mismo.
3. OPERACIN DEL SISTEMA
Cuando se ha encendido correctamente el sistema, cargar como usuario de Windows XP Analtica; una vez en el escritorio dar click en el icono PECSS Lambda
2S. Esperar un momento y a continuacin se abrir un programa mostrando temporalmente el siguiente mensaje:
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Figura 3. Pantalla de bienvenida del software del equipo Lambda 2S

Esperar un momento y a continuacin se presentara una pantalla como la siguiente:


Figura 4. Ventana de trabajo o men principal del software

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En la ventana anterior se muestra la lista completa de comandos que presenta el


equipo y que a su vez estn disponibles para su uso; es de anotar que si se tiene
alguna duda sobre alguno de estos, se puede presionar la combinacin Alt+F1, la
cual muestra una ayuda en pantalla y que permite obtener informacin sobre cada
uno de estos con solo oprimir la letra que lo identifica.

4. CALIBRACIN DEL EQUIPO, MEDIDA DE ABSORBANCIA Y OBTENCIN


DE UNA ESPECTRO DE MUESTRA PROBLEMA
Para realizar este procedimiento deben seguirse atentamente los siguientes pasos:
I.

Encienda el equipo, como se dio a conocer en el numeral 2.

II.

Espere unos instantes a que aparezca la pantalla de bienvenida y la de comandos, las cuales se muestran en las Figuras 3 y 4.

III.

A continuacin lleve a cabo la calibracin del equipo para ello siga el procedimiento:
a. Introduzca las celdas de referencia y muestra vacas (si su blanco es
aire), o con el blanco del procedimiento1.
b. A continuacin digite en la ventana de comandos , la palabra AZERO
con lo cual aparecer la siguiente lnea en la parte inferior de la pantalla:

AZERO mode B strt 400.0 end 200.0 speed 480 rec 1


Figura 5. Comando AZERO

Es de aclarar que el equipo no requiere cuerpo negro y que adems es de doble canal lo cual hace necesario
el uso de blancos de calibracin, los cuales se deben introducir en los compartimientos sealados.
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En donde se puede definir el intervalo de longitudes de onda, sobre el cual


se realizara la calibracin desplazndose con las flechas sobre la ubicacin
de los valores subrayados y realizando las modificaciones respectivas; luego de esto, simplemente oprima la tecla Enter y espere que se realice la calibracin deseada, espere el sonido del equipo al terminar la calibracin.
IV.

Luego de realizar la calibracin del instrumento, retire la celda vaca o con


blanco del compartimiento de muestra (aquel que esta ms cerca a usted) e
introduzca la muestra a analizar.

V.

A continuacin, en la lnea de comandos de la ventana principal digite la palabra SCAN (este paso deber realizarlo cada vez que desee comenzar una nueva corrida) y
espere unos instantes.
Figura 6. Comando SCAN

VI.

Acto seguido , le aparecer un cuadro de dialog el cual le permite establecer el intervalo de longitud de onda, velocidad del barrido, identificacin o
nombre de la muestra a analizar, entre otras serie de opciones que el ope-

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rario puede definir ubicndose sobre estas y escogiendo la opcin deseada


de las disponibles:
Figura 7. Cuadro de dialogo Comando SCAN

Luego de establecer los parmetros deseados oprima ENTER, a continuacin aparecer:


Y(es), N(o), A (utozero/background correction), C (hange parameters).

VII.

En vista de que usted ya calibro el equipo, simplemente oprima la tecla Y y


espere unos instantes a que el sistema realice el barrido respectivo y produzca el espectro de la muestra deseada.

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Figura 8. Espectro de la muestra

VIII.

Luego de la medicin aparece nuevamente en la parte inferior de la pantalla


Y(es), N(o), A (utozero/background correction), C (hange parameters). Como se observa en la Figura 8, si desea toma nuevamente el espectro presione la tecla ENTER, si desea introducir una nuevo comando guarde los
datos obtenidos del programa (ver seccin guardar datos) y presione la tecla ESC.

4.1.

MEDICIN CON UNA VALOR FIJO DE LONGITUD DE ONDA

Adems de lo anterior si solamente requiere medir la absorbancia de la muestra a


un solo valor de longitud de onda, siga los siguientes pasos:
I.

Si an no ha encendido y calibrado su equipo siga los pasos I, II y III del anterior procedimiento.

II.

Introduzca la muestra problema en el compartimiento de muestra respectivo

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III.

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Presione F9 (o escribir GOTO en la lnea de comandos). Luego de esta accin aparecer sobre la lnea de comandos lo siguiente:
GOTO abs. 500.0
Enter abscissa value Home/ End step size 1.00 nm

IV.

Introduzca el valor de longitud de onda deseada

V.

Espere unos instantes y a continuacin el equipo mostrara el valor de absorbancia deseado en la parte inferior derecha de la pantalla.

NOTA: si requiere efectuar una operacin diferente a las mostradas con anterioridad, puede consultar de manera rpida el anexo 1 donde encontrara informacin bsica sobre cada uno de los comandos que presenta el equipo.
5. GUARDAR INFORMACIN
Para guardar la informacin proporcionada por el equipo digite la palabra JCAMP
en la ventana de comandos y oprima enter, esta utilidad permitir dar un formato
especial a los espectros archivados para para que sean decodificados en formato
EXCEL.
Figura 9. Comando JCAMP

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Es necesario guardar los datos cada vez que se realice una corrida antes de pulsar la tecla ESC, en la figura 9 puede observarse que la carpeta destino de los archivos es USER002.
Es probable que los datos se almacenen en el formato Excel dentro de una misma
columna, para visualizar de forma correcta los datos abra el archivo Excel, presione la opcin DATOS seguida del icono texto en columnas

Aparecer una ventana como la que se muestra en la figura 10 a) , de click en siguiente , aparecer una ventana como la mostrada en la figura 10 b) , seleccione
la opcin tabulacin y de click en siguiente.
Figura 10. Divisin de datos en columnas

a)

b)

6. USO DE CELDAS.
Se usan principalmente dos tipos de celdas, celdas de plstico y celdas de cuarzo.
Las celdas de cuarzo se usan para tomar un espectro en la zona ultravioleta,
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mientras que en la zona del espectro visible pueden ser usadas celdas de los dos
tipos.
Cada celda tiene dos caras lisas y dos caras rugosas, la manipulacin de las celdas se realiza sujetando la parte rugosa, la parte lisa debe permanecer lo ms
limpia posible para no interferir con el paso de luz. Las celdas se disponen en el
porta muestra de tal manera que la parte rugosa sea sujetada por el porta muestra
y la parte lisa permita el paso del haz de luz.
Figura 9. Uso de celdas a) parte rugosa y lisa de las celdas. b) ubicacin en el portaobjetos.

Zona
rugosa
Zona
lisa

Haz
De luz

Zona
rugosa

(a)

(b)

7. APAGADO DEL SISTEMA.


Luego de retirar las celdas blanco y referencia de los compartimientos siga las siguientes instrucciones para apagar el equipo:
I.

Para salir del programa digite STOP y oprima ENTER

II.

Apagar el espectrofotmetro usando el botn con el cual este se enciende

III.

Apagar el computador desde la funcin apagar del men de inicio del equipo

IV.

Apagar el monitor y a continuacin la CPU

V.

Apagar y desconectar el estabilizador.

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ANEXO 1.
Comando

Funcin

GOTO

Permite mover el monocromador a una longitud de onda


preseleccionada y LEER ABSORBANCIA

AZERO
AUTOZERO
BACKGROUND
CORRECTION

Pone la lnea base a 0.oooA, 100%T en el intervalo de


longitudes seleccionado.
Pone la lnea base 0.000A, 100%T a travs del rango de
longitudes de onda seleccionada.

SCAN

Obtener medidas espectrales, obtener espectros en A


o %T.

CALIB

Permite realiza una mtodo de calibracin, medir una serie de soluciones de referencia y establecer una curva de
calibracin.

CONC

Se usa para determinar concentraciones de muestras


haciendo uso de una calibracin determinada.

CONTENT

Permite examinar el directorio con los datos y listar los


archivos de datos y espectros por sus nombres y contenidos de datos

COPY

Los datos espectrales guardados en cualquiera de las


regiones se guardan en la respectiva regin, El comando
permite salvar estos datos permanentemente en el disco
duro, copiar datos de una regin de memoria a otra, copiar datos de disco a una regin de memoria, de un archivo a otro en el disco duro.

CURSOR

Trae un cursor vertical a las grficas. Puede solo llamarlo


cuando los datos espectrales estn dispuestos grficamente n la pantalla

VIEW

Presenta la informacin del estatus de los datos una regin de la memoria y muestra los datos espectrales grficamente en la pantalla

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PRINT

Permite imprimir el contenido de la pantalla en una impresora asociada

STATUS

Muestra la informacin sobre los datos en la memoria


X,Y, y Z. La informacin mostrada incluye: nombre de la
regin de la memoria; nombre del archivo con los datos;
parmetros como rango en la abscisa, nmero de puntos,
intervalo de datos etc.; lnea de informacin, fecha y hora.
Calcula la primera, segunda, tercera y cuarta derivada de
los datos espectrales contenidos en la memoria usando el
mtodo Savitzky- Golay.

DERIV

Un parmetro importante de este comando es: delta, selecciona el intervalo para ser usado en el clculo de las
derivadas. Rango 1-8 o automtico delta 1 2 3 4 5 6 7 8
Intervalo de puntos 5 9 13 19 25 37 49 149 Delta =Auto.
El sistema usa el intervalo ms cercano al valor calculado
de slit*4/(intervalo)

LIST

Genera la lista de valores (X, Y) de un conjunto determinado de datos espectrales. Esta lista puede ser mostrada
en la pantalla o guardada en un disco como archivo de
texto ASCII.

PEAK

Determina el mximo o el mnimo de un espectro y hace


una lista de todos los picos que exceden un valor preseleccionado de treshold.

CLEAR

Permite borrar la pantalla

LABEL

Permite insertar anotaciones de texto u otros caracteres


en los graficos.

STOP

Permite salirse del programa PECSS y volver al ambiente


DOS.

MSETUP

Se usa para definir los parmetros de un anlisis multicomponentes y para realizar la calibracin.

MULT

Se usa para determinar la concentracin de los componentes de una muestra del espectro de la muestra. se

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usa un mtodo de anlisis de multicomponentes previamente establecido


JCAMP

Permite dar un formato especial a los espectros archivados para copiarlos en un disco y abrirlos en un programa
que tenga sistema grafico como EXCEL

BIBLIOGRAFIA
1. Perkin Elmer. Lambda 2S UV/VIS Spectrometer User Documentation. Copyright 1989.
2. Guas de laboratorio qumica analtica II. Universidad Nacional de Colombia
Facultad De Ciencias. Departamento de qumica.

___________________FIN DEL DOCUMENTO_____________________

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