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Biopatologa Clnica:
Laboratorio de Androloga
Jos Luis Girela Lpez
Dpto. de Biotecnologa
Universidad de Alicante
girela@ua.es
MEIOSIS
VALORACIN ENDOCRINA:
Hipotlamo
GnRH
Hipfisis
anterior
LH / ICSH
FSH
FSH
Leydig
Testosterona
Funciones
Sistmicas de la
testosterona
Sertoli
ABP
Inhibina B
Espermatognesis
y maduracin espermtica
FSH
LH
TESTOSTERONA
PROLACTINA
Espermatognesis normal
Normal
Normal
Normal
Normal
Hipogonadismo
hipogonadotropo
Baja
Baja
Baja
Normal
Espermatognesis
anormal
Alta/Normal
Normal
Normal
Normal
Fallo testicular.
Hipogonadismo
hipergonadotropo
Alta
Alta
Normal/Baja
Normal
Tumor hipofisario
productor de prolactina
Normal/Baja
Normal/Baja
Baja
Alta
ANLISIS DE SEMEN:
SEMEN:
Fluido biolgico que se observa tras la estimulacin
sexual y que recibe el nombre de eyaculado.
El eyaculado esta compuesto por:
Un componente slido: los espermatozoides.
Un componente lquido: el plasma seminal, que
tiene origen multiglandular y que vehiculiza al
anterior.
Glndula
Componentes
fundamentales
Volumen (%)
Uretral y
bulbouretral
Mucoproteinas
0,1-0,2 ml
Prstata
Ac. Ctrico.
Fosfatasas.
Esoermina.
Iones.
-amilasa...
0,5-1 ml.
15-30%
Glicerilfosforilcolina.
Ac. Silico.
Fosfolpidos.
Carnitina.
Proteinas.
ESPERMATOZOIDES
0,1-0,3 ml.
10%
Fructosa. Proteinas.
prostaglandinas
2-2,5 ml.
50-80%
Epiddimo.
Deferente.
Ampolla deferencial
Vesculas seminales
pH
cido
Alcalino
Examen microscpico
Aspecto.
Concentracin.
Viscosidad.
Motilidad.
pH.
Viabilidad.
Volumen.
Morfologa.
NORMAL
TRANSPARENTE
NORMAL
AUMENTADA
Hilos de filancia
10
pH
< 6,9
6,9-8
Licuefaccin
>8
Retardada
Coagulacin
Normal
Retardada
Volumen
<1,5ml
>1,5ml
Insuficiencia Prosttica
Vesiculitis Prosttica
Normal
Insuficiencia o agenesia de
vesiculas seminales
Fructosa
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EXAMEN MICROSCPICO:
En el que se valora:
Motilidad.
Viabilidad.
Recuento de espermatozoides y
clulas redondas (Concentracin).
Presencia de aglutinaciones.
Ensayo hipoosmtico (HOS-test).
MOTILIDAD:
Podemos encontrar 4 patrones de motilidad
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MOTILIDAD (II):
Los valores de referencia son:
Al menos un 25 % de tipo +++ o
al menos un 50 % suma de tipos ++ y +++
En caso de no cumplir estos valores la muestra se
denomina ASTENOZOOSPERMIA.
VIABILIDAD:
Muestra el % de espermatozoides vivos.
Existen diferentes tcnicas para valorarla. Las
principales son:
Tincin supravital.
Marcadores del ncleo.
HOS test
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VIABILIDAD (II):
TINCIN SUPRAVITAL
(Eosina-Nigrosina)
Eosina: Colorante vital.
Penetra en las clulas
muertas que tienen la
membrana daada.
Nigrosina: Colorante
para realzar el contraste.
VIABILIDAD (III):
MARCADORES DEL NCLEO
Bromuro de Etidio.
Naranja de Acridina.
Observacin en
el
microscopio
de fluorescencia
a 500 nm de
longitud de onda.
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VIABILIDAD (IV):
HOS Test: Prueba de la
hinchazn
de
los
espermatozoides
en
medio hipoosmtico.
Interpretacin:
HOS +: Cola arrollada.
HOS -: Cola recta.
VIABILIDAD (V):
La viabilidad debe ser del 75% o superior.
Si todos los espermatozoides de la muestra estn muertos
la muestra se denomina NECROZOOSPERMIA.
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CONCENTRACIN:
Se expresa en millones de espermatozoides por
mililitro (mill/ml), y se valora mediante una
cmara de recuento Makler.
CONCENTRACIN (II):
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CONCENTRACIN (III):
N SPZ
l
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PRESENCIA DE AGLUTINACIONES:
Consiste en la unin especfica espermatozoideespermatozoide. Pueden ser de varios tipos:
Cabeza-Cabeza.
Pieza Intermedia-Pieza Intermedia.
Cola-Cola.
Otras combinaciones.
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MORFOLOGA ESPERMTICA
2,0 ml
pH
7,2 o superior
Concentracin
20 x 106 / ml
N total de espermatozoides
40 x 106
Motilidad
50%
con
movilidad
progresiva (tipos +++ y ++)
25% con progresin rpida
(tipo +++) a los 60 minutos de
la eyaculacin
Viabilidad
75% de espermatozoides
vivos
Leucocitos
< 1 x 106 / ml
19
0,4
Concentracin
(mill /ml) > 20
Motilidad
(%) > 50
Morfologa
normal
(%) > 14
100
35
Comentarios
Posible causa
Fructosa 1 mol/l
(Baja)
pH 6,5 (cido)
Fructosa 15
mol/l
70% vivos
Flagelos inmoviles.
Contaminacin o recogida
mediante condon.
Concentracin
(mill /ml) > 20
Motilidad
(%) > 50
Morfologa
normal
(%) > 14
Comentarios
100
35
20% vivos
Contaminacion o tiempo
excesivo antes del anlisis.
Necrozoospermia.
Autoinmunidad.
100
65
Pequeas
cabezas
redondas
Teratozoospermia
Globozoospermia
Astenozoospermia idioptica.
Autoinmunidad.
Prostatitis.
Tiempo excesivo antes del
anlisis.
100
25
10
Licuefaccin
incompleta.
Aglutinaciones.
40% vivos
> 1 mill/ml de
leucocitos.
30
10
Morfologa
anormal.
<1
Espermatozoides
moviles.
Posible causa
Oligozoospermia.
Criptozoospermia.
Fallo 1 tbulos seminiferos.
Obstruccin parcial.
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AZOOSPERMIA
FSH
Normal o ligeramente
aumentada o disminuida
Patologa
testicular 1.
LH, T.
IAD.
Resignacin
Biopsia ?. PAAF ?
Diagnstica teraputica
Bloqueo de la
espermatognesis
Sospecha de
alteracin
gentica
Disminuida
Espermatognesis
conservada
No respuesta
IAD.
Resignacin
REP
Tratamiento
sustitutivo
FSH-LH
Vol.< 1ml
Vol. normal
FSH-LH
Cariotipo
Hipogonadismo
hipogonadotropo
Agenesia
vesculas
seminales
Obs. eyaculadores
TRA
TRA
REP
OLIGOZOOSPERMIA
Moderada-severa
(<10 mill./ml.)
Leve.
(>10mill./ml)
FSH
FSH
Aumentad
a. >2 veces
Patologa
testicular
primaria
Disminuida
Hipogonadismo
hipogonadotropo
FSH-LH
Test de
seleccin
espermtica
TRA
Normal.
Descartar factores
asociados: Infeccin,
Txicos, Varicocele,
Alt. Citogenticas....
Test de
seleccin
espermtica
Idioptica.
Biopsia???.
Tratamiento???
TRA
Test de seleccin
espermtica
Aumentada
Test de
seleccin
espermtica
TRA: IAC
Ligeramente
FSH-LH
Test de
seleccin
espermtica
TRA: IAC
TRA
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ASTENOZOOSPERMIA
DESCARTAR PATOLOGAS
ASOCIADAS MS FRECUENTES:
ALTERACIONES MICROESTRUCTURALES
DEL CITOESQUELETO:
Varicocele.
-Ausencia de mitocondrias.
Va unida frecuentemente a
teratozoospermia.
ASPERMIA
HIPOSEPERMIA
Seminograma
Azoospermia
AUSENCIA de
espermatozoides
PRESENCIA de
espermatozoides
FSH
Estudio y tratamiento de
las causas (si es posible)
Protocolo de
Azoospermia
Eyaculacin
con vejiga llena
No emisin
Recuperacin espermtica de
la orina post-orgasmo.
TRA: ICSI
Emisin de esp.
TRA
REP- PAAF
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ASPERMIA
EYACULACIN RETRGRADA
AZOOSPERMIA
OBSTRUCTIVA:
Se mantiene la produccin de espermatozoides
en los tbulos seminferos.
FALLO TESTICULAR PRIMARIO:
Generalmente asociado a factores genticos.
Arresto de la espermatognesis.
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AZOOSPERMIA
TCNICAS
QUIRURJICAS
ESPERMATOZOIDES:
PARA
LA
OBTENCIN
DE
AZOOSPERMIA
1. MESA, Microsurgical epididymal sperm aspiration
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AZOOSPERMIA
2. PESA, Percutaneous epididymal sperm aspiration
AZOOSPERMIA
3. TESA, Percutaneous testicular sperm aspiration
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AZOOSPERMIA
4. TESE, Testicular sperm extraction
26
BARRERA HEMATO-TESTICULAR
BARRERA HEMATO-TESTICULAR
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Inmunologa
Otros mecanismos inmunosupresores:
Tolerancia inmunolgica inducida por la escasa presencia de
antgenos espermticos.
Mecanismos inmunomoduladores en los testculos. (Esteroides,
macrofagos, T-supresoras,)
Inmunomodulacin fuera del testculo (T-supresoras
epiddimo, efecto inmunosupresor del plasma seminal,)
en
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29
la
fagocitacin
de
espermatozoides
por
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Examen microscpico
Aspecto.
Concentracin.
Viscosidad.
Motilidad.
pH.
Viabilidad.
Volumen.
Morfologa.
Cabeza-Cabeza.
Pieza Intermedia-Pieza Intermedia.
Cola-Cola.
Otras combinaciones.
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Ms del 20 % positivo.
32
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Tcnicas avanzadas en el
laboratorio de Androloga.
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TCNICAS AVANZADAS EN EL
LABORATORIO DE ANDROLOGA.
CAPACITACIN:
Serie de cambios bioqumicos y fsicos, que afectan a las
membranas y al metabolismo energtico, requeridos por el
espermatozoide para estar en condiciones de liberar el
contenido acrosomal.
35
36
37
38
GRADIENTES:
Los mejores espermatozoides (morfologa) sern
capaces de atravesar los gradientes de densidad y
llegar al fondo del tubo.
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Comprobacin de la Capacitacin:
Hiperactivacin espermtica
Fosforilacin de residuos de tirosina
Contenido de Glucosa-6-fosfato
Contenido de NADPH
40