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UNIVERSIDAD SIMN BOLVAR

DECANATO DE ESTUDIOS PROFESIONALES


COORDINACIN DE INGENIERA QUMICA

VALIDACIN DE MTODOS DE ENSAYO PARA ANLISIS DE GASES EN


PRAXAIR, S.C.A.

Por:
Katherine Ysabel Hidalgo Colmenares

INFORME DE PASANTA
Presentado ante la Ilustre Universidad Simn Bolvar
como requisito parcial para optar al ttulo de
Ingeniero Qumico

Sartenejas, Marzo de 2011

UNIVERSIDAD SIMN BOLVAR


DECANATO DE ESTUDIOS PROFESIONALES
COORDINACIN DE INGENIERA QUMICA

VALIDACIN DE MTODOS DE ENSAYO PARA ANLISIS DE GASES EN


PRAXAIR, S.C.A.

Por:
Katherine Ysabel Hidalgo Colmenares

Realizado con la asesora de:


Tutor Acadmico: Prof. Janneth Garca
Tutor Industrial: Ing. Nelmar Santander

INFORME DE PASANTA
Presentado ante la Ilustre Universidad Simn Bolvar
como requisito parcial para optar al ttulo de
Ingeniero Qumico

Sartenejas, Marzo de 2011

RESUMEN

El objetivo principal del presente trabajo fue lograr la validacin de algunos de los mtodos de
anlisis de concentraciones de gases llevados a cabo en el Laboratorio de Gases Especiales de
Praxair de Venezuela S.C.A, sucursal Cagua. Para ello se realiz el estudio de los principales
parmetros que caracterizan el desempeo de los mtodos como son: la linealidad, precisin,
veracidad, e incertidumbre. Los mismos fueron evaluados mediante la aplicacin de estudios
estadsticos como pruebas de t y anlisis de varianza, con la finalidad de determinar el
cumplimiento de la especificacin de cada parmetro establecido en el proceso de validacin. Los
mtodos de anlisis de concentraciones de gases evaluados durante este proceso fueron: anlisis
para determinar oxgeno en ppm por el mtodo electroqumico, anlisis para determinar oxgeno
en porcentaje por el mtodo paramagntico, anlisis para determinar monxido de carbono en
ppm por el mtodo espectrofotomtrico infrarrojo no dispersivo, anlisis para determinar
nitrgeno en argn en ppm por el mtodo espectrofotomtrico y anlisis de monxido de
carbono, dixido de carbono y metano en porcentaje por cromatografa de gases mtodo
ionizacin de la llama. Por medio del anlisis de Materiales de Referencia Certificados (MRC) de
componentes y rangos de concentraciones apropiados, se logr determinar para todos los
mtodos: valores del coeficiente de determinacin (r2) mayores a 0,995 en el estudio de
linealidad, valores porcentuales de la desviacin estndar relativa menores al 2% en el estudio de
repetibilidad y porcentajes de recuperacin aparente entre 80% y 120% del valor de la
concentracin de referencia en el estudio de veracidad. Finalmente, se evalu la incertidumbre de
los mtodos por medio del uso de la informacin obtenida en el proceso de validacin y se
determin que las principales fuentes de incertidumbre de los resultados estn incluidas en la
precisin intermedia de los mtodos de anlisis y en la trazabilidad hacia los MRC. A partir de
estos estudios, se comprob el cumplimiento de las especificaciones de cada uno de los
parmetros, asegurndose as la linealidad, precisin y veracidad en los resultados reportados por
cada uno de los mtodos evaluados. Como principales recomendaciones del trabajo se
presentaron: la elaboracin de una agenda de validacin con la finalidad de planificar las
actividades del proceso en lapsos de tiempos controlados y la aplicacin de un formato especial
para el registro de los resultados obtenidos.
Palabras claves: validacin, linealidad, precisin, incertidumbre, mtodos de anlisis.
iv

A mi mam Sonia, la fuerza de mi espritu.


A mi mam Mireya, la luz de mi corazn.

AGRADECIMIENTOS

En primer lugar debo agradecer a Dios nuestro Seor por permitirme cumplir esta meta tan
importante en mi vida, por haberme llenado de bendiciones a lo largo de toda mi carrera y poder
compartir este xito con mi familia, a ellos debo agradecer especialmente, a mi madre por su
amor y apoyo incondicional siempre que lo he necesitado, sin ella nada de esto sera posible, todo
lo que soy y lo que he logrado se lo debo a ella. A mi ta amada que siempre llevar en mi
corazn y que s estara orgullosa de verme alcanzar el sueo que alguna vez compartimos,
gracias por tu apoyo, amor y lealtad, tu luz siempre ser mi gua, te amar por siempre. A mi
padre tambin le agradezco su comprensin y la fuerza que me ha brindado durante todos estos
aos de lucha y esfuerzos. A mis dos hermanas por todo su cario, apoyo y f que siempre han
tenido en m. A mi ta Cristina por todas sus atenciones, su comprensin, amor y cuidados,
siempre estar agradecida por todo lo que has hecho por m. A mi abuela Victoria, mi otra madre,
gracias por ensearme todo lo que se necesita para salir adelante, gracias por tu fuerza. A mis
primos y primas, compaeros de risas y lgrimas, sobretodo Cecilia, mi hermana del alma, mi
protectora, mi hombro, este xito lo comparto contigo. A mis amigos y compaeros de este viaje,
Mari, Olga, ngel y Daniela, gracias por los buenos momentos, por su cario incondicional y por
el apoyo, siempre sern hermanos para m. Tambin quisiera agradecer a la profesora Janneth por
haberme guiado durante todo este proceso y por su compromiso de siempre ayudarme, muchas
gracias. Finalmente quisiera agradecer a Jos Gregorio, mi maestro, amigo y compaero, gracias
por tu dedicacin y a todo el Departamento de Gases Especiales, por haberme brindado la
oportunidad de realizar este trabajo con ustedes, fue una experiencia muy enriquecedora, gracias
por su paciencia y por todo lo aprendido.

vi

NDICE GENERAL
NDICE GENERAL

vii

NDICE DE TABLAS

xi

NDICE DE FIGURAS

xiv

LISTA DE SMBOLOS

xvii

LISTA DE ABREVIATURAS

xviii

INTRODUCCIN ..

Antecedentes..

Justificacin del Trabajo....

Objetivo General...

Objetivos Especficos

CAPTULO 1- DESCRIPCIN DE LA EMPRESA ..

1.1.

Visin de la

Empresa...
1.2.

Misin de la

Empresa..
1.3.

Valores de la

Empresa.
CAPTULO 2- MARCO TERICO

2.1. Definicin de Gases Especiales..

2.2. Mtodos Electroqumicos.......

2.3. Mtodos Espectrofotomtricos...

2.4. Mtodos Cromatogrficos......

2.4.1. Cromatografa de Gases.

10

2.5. Validacin de los Mtodos de Anlisis..

11

2.6. Trazabilidad

13

2.7. Veracidad

15

2.7.1. Materiales de Referencia Certificados.....

15

2.7.2. Materiales de Referencia/ Materiales de Trabajo....

16

vii

2.7.3. Mtodos de Referencia....

16

2.7.4. Ejercicios Interlaboratorios..

16

2.7.5. Muestras Adicionadas.....

17

2.8. Precisin.

17

2.8.1. Repetibilidad

18

2.8.2. Precisin Intermedia

18

2.8.3. Reproducibilidad.

18

2.9. Robustez.

19

2.10. Exactitud..

19

2.11. Linealidad.

20

2.12. Selectividad......

20

2.13. Lmite de Deteccin.....

22

2.14. Lmite de Cuantificacin.....

22

2.15. Incertidumbre...

23

2.15.1. Evaluacin Tipo A.....

24

2.15.2. Evaluacin Tipo B..

25

2.15.3. Incertidumbre Combinada.....

26

2.15.4. Incertidumbre Expandida......

27

2.15.5. Incertidumbre en los Mtodos de Validacin....

27

2.16. Anlisis Estadsticos.....

30

2.16.1. Coeficiente de Correlacin de Pearson......

31

2.16.2. Pruebas de t de Student...

31

CAPTULO 3- MARCO METODOLGICO ....

33

3.1. Anlisis de Gases Especiales..

33

3.1.1. Anlisis de Gases Puros...

33

3.1.2. Anlisis de Mezclas Gaseosas.................................................

35

3.2. Procedimiento General de Anlisis de Gases Durante la Validacin.

36

3.3. Anlisis de Concentracin de los MRC......

37

3.4. Materiales de Anlisis Utilizados...

40

3.5. Equipos de Anlisis....

44

3.5.1. Teledyne 306 WA

44

viii

3.5.2. Servomex 244 A..

45

3.5.3. Horiba VIA-510...

47

3.5.4. CLD-2..

48

3.5.5. Cromatgrafo de Gases Agilent GC6890

48

3.5.5.1. Detector de Ionizacin de Llama (FID)

49

3.5.5.2. Detector de Conductividad Trmica (TCD).

49

3.6. Medicin de la Concentracin del Gas...

50

3.7. Reporte y Documentacin de Resultados...

51

3.8. Anlisis Estadstico de los Resultados...

51

3.8.1. Linealidad

51

3.8.2. Repetibilidad

52

3.8.3. Precisin Intermedia

52

3.9. Incertidumbre.....

54

CAPTULO 4- RESULTADOS Y DISCUSIN .

55

4.1. Linealidad..

55

4.1.1. Grficos Residuales.

58

4.2. Precisin.

60

4.2.1. Repetibilidad

60

4.2.2. Precisin Intermedia

62

4.2.2.1. Anlisis de Varianza.

62

4.3. Veracidad

65

4.4. Incertidumbre.....

68

4.4.1. Evaluacin de la Incertidumbre para el Mtodo de Anlisis de Concentracin de


Monxido de Carbono en ppm..

69

4.4.2. Evaluacin de la Incertidumbre para los Mtodos de Anlisis de Concentracin de


Gases......

73

CONCLUSIONES ..

76

RECOMENDACIONES

78

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS .....

79

ix

APNDICES ...

81

APNDICE A .

82

1. Procedimiento de Anlisis para Determinar la Concentracin de los Gases: Oxgeno en


porcentaje, Oxgeno en ppm, Monxido de Carbono en ppm, Nitrgeno en Argn en ppm.

82

1.1.

82

Toma y Preparacin de

Muestra......
1.2.

Calibracin del

84

Equipo....
1.3.

Entrada de la Muestra al Rack de

84

Analizadores..
1.4.

Registro de la

85

Lectura......
1.5.

Retiro de la

85

Muestra....
2.Procedimiento de Anlisis para Determinar la Concentracin de los Gases: Monxido
de Carbono, Dixido de Carbono y Metano en porcentaje por el Mtodo de Cromatografa

85

2.1.Toma y Preparacin de Muestra......

85

2.2.

86

Calibracin del

Cromatgrafo.....
2.3.

Anlisis de la

86

Muestra.....
2.4.

Retiro de la

87

Muestra...
APNDICE B ..

88

1.Clculo de Valores Residuales...

88

2.Grficos Residuales. ..

88

3.Anlisis de Repetibilidad...

91

4.Anlisis de Varianza (ANOVA) para el Clculo de Precisin Intermedia....

94

5. Valores de Precisin Intermedia para los Mtodos de Anlisis de Concentracin de


Gases.
x

96

6. Pruebas de t

98

7. Grficos de Porcentaje de Recuperacin Aparente para el Anlisis de Veracidad

100

8. Incertidumbre Debida a la Recta de Calibracin...

103

APNDICE C.......................................................................................................................

105

1.Certificado de un Material de Referencia Certificado.

105

2.Cromatogramas...

105

3.Formato para el Registro de Resultados en las Validaciones.

105

xi

NDICE DE TABLAS

CAPTULO 3- MARCO METODOLGICO


Tabla 3.1. Tipos de Gases Puros y sus requerimientos mnimos de impurezas.....

34

Tabla 3.2. Anlisis de concentraciones de gases y rangos de trabajo evaluados durante el


proceso de validacin.

38

Tabla 3.3. Materiales de Referencia Certificados inorgnicos utilizados en las


validaciones de los mtodos de anlisis.....

41

Tabla 3.4. Materiales de Referencia Certificados orgnicos utilizados en las validaciones


de los mtodos de anlisis..

43

Tabla 3.5. Anlisis de varianza para el diseo anidado de la aplicado durante el anlisis de
precisin intermedia..

53

Tabla 3.6. Clculo de varianzas obtenidas a partir del ANOVA de los resultados
obtenidos para el diseo anidado..

54

CAPTULO 4- RESULTADOS Y DISCUSIN


Tabla 4.1. Clculo del coeficiente de correlacin y determinacin para el anlisis de
concentracin de monxido de carbono en ppm.

56

Tabla 4.2. Valores de los coeficientes de correlacin y determinacin obtenidos durante el


estudio de linealidad de los mtodos de anlisis....

57

Tabla 4.3. Determinacin de los valores residuales (ei) para la recta de calibracin del
anlisis de monxido de carbono en ppm....

58

Tabla 4.4. Anlisis de Repetibilidad para el mtodo de anlisis de nitrgeno en argn en


ppm..

61

Tabla 4.5. Prueba de Cochran aplicada al mtodo de anlisis de nitrgeno en argn en


ppm

63

Tabla 4.6. ANOVA para el anlisis de precisin intermedia de das-analistas diferentes


para el mtodo de anlisis de concentracin de monxido de carbono en ppm.

64

Tabla 4.7. Valores de varianza obtenidos a partir del ANOVA para el anlisis de precisin
intermedia para el mtodo de anlisis de concentracin de monxido de carbono en ppm.
Nivel de concentracin 4,8 ppm.
xii

65

Tabla 4.8. Anlisis de veracidad por medio del clculo del sesgo para el mtodo de
anlisis de monxido de carbono en ppm..

66

Tabla 4.9. Prueba de t para el anlisis de exactitud del mtodo de anlisis de monxido de
carbono en ppm..

67

Tabla 4.10. Incertidumbre debida a la evaluacin de la linealidad para el mtodo de


anlisis de concentracin de monxido de carbono en ppm..

70

Tabla 4.11. Fuentes de incertidumbre asociadas al clculo de concentracin de monxido


de carbono en ppm, utilizando el mtodo espectrofotomtrico infrarrojo no dispersivo
para una lectura del instrumento igual a 4,92 ppm

72

Tabla 4.12. Resumen de las fuentes de incertidumbre asociadas al clculo de


concentracin de gases...

74

Tabla 4.13. Resumen de las fuentes de incertidumbre asociadas al clculo de


concentracin de gases para los mtodos cromatogrficos

75

APNDICE B
Tabla B.1. Anlisis de Repetibilidad para el mtodo de anlisis de oxgeno en ppm

91

Tabla B.2. Anlisis de Repetibilidad para el mtodo de anlisis de oxgeno en porcentaje..

92

Tabla B.3. Anlisis de Repetibilidad para el mtodo de anlisis de monxido de carbono


en ppm....

92

Tabla B.4. Anlisis de Repetibilidad para el mtodo de anlisis de monxido de carbono


en porcentaje..

93

Tabla B.5. Anlisis de Repetibilidad para el mtodo de anlisis de dixido de carbono en


porcentaje 93
Tabla B.6. Anlisis de Repetibilidad para el mtodo de anlisis de metano en porcentaje...

94

Tabla B.7. Datos de concentraciones por analistas y das para el ANOVA de das-analista
diferentes del anlisis de concentracin de monxido de carbono en ppm 95
Tabla B.8. Valores de varianza obtenidos a partir del ANOVA para el anlisis de
precisin intermedia para el mtodo de anlisis de oxgeno en pm. Nivel de concentracin
1ppm..

xiii

97

Tabla B.9. Valores de varianza obtenidos a partir del ANOVA para el anlisis de
precisin intermedia para el mtodo de anlisis de oxgeno en porcentaje. Nivel de
concentracin 0,5%........................................................................................

97

Tabla B.10. Valores de varianza obtenidos a partir del ANOVA para el anlisis de
precisin intermedia para el mtodo de anlisis de nitrgeno en argn en ppm. Nivel de
concentracin 17 ppm

97

Tabla B.11. Valores de varianza obtenidos a partir del ANOVA para el anlisis de
precisin intermedia para el mtodo de anlisis de monxido de carbono en porcentaje.
Nivel de concentracin 0,1%.............................................................................................. 98
Tabla B.12. Valores de varianza obtenidos a partir del ANOVA para el anlisis de
precisin intermedia para el mtodo de anlisis de dixido de carbono en porcentaje.
Nivel de concentracin 0,1%.............................................................................................. 98
Tabla B.13. Valores de varianza obtenidos a partir del ANOVA para el anlisis de
precisin intermedia para el mtodo de anlisis de metano en porcentaje Nivel de
concentracin 0,1%...................................................................................

98

Tabla B.14. Prueba de t para el anlisis de veracidad del mtodo de anlisis nitrgeno en
argn en ppm..

99

Tabla B.15. Prueba de t para el anlisis de veracidad del mtodo de anlisis oxgeno en
porcentaje....

99

Tabla B.16. Prueba de t para el anlisis de veracidad del mtodo de anlisis de monxido
de carbono en porcentaje..

99

Tabla B.17. Prueba de t para el anlisis de veracidad del mtodo de anlisis dixido de
carbono en porcentaje..

99

Tabla B.18. Prueba de t para el anlisis de veracidad del mtodo de anlisis metano en
porcentaje..

xiv

100

xv

NDICE DE FIGURAS

CAPTULO 1-DESCRIPCIN DE LA EMPRESA


Figura 1.1 Estructura Organizacional de Praxair VenezuelaS.C.A .

CAPTULO 2- MARCO TERICO


Figura 2.1. Esquema de un cromatgrafo de gases..

11

CAPTULO 3- MARCO METODOLGICO


Figura 3.1. Diagrama General del proceso de anlisis de gases aplicado en la validacin

37

Figura 3.2. Analizador de trazas de oxgeno Teledyne 306WA. 45


Figura 3.3. Analizador de pureza de oxgeno Sermovex 244A.. 46
Figura 3.4. Analizador de trazas de monxido de carbono Horiba VIA-510. 47
Figura 3.5. Analizador de trazas de nitrgeno en argn CLD-2. 48
Figura 3.6. Esquema de los diseos anidados aplicados durante el anlisis de precisin
intermedia.

52

CAPTULO 4- RESULTADOS Y DISCUSIN


Figura 4.1. Grfico de residuos en funcin de la concentracin del MRC para el anlisis
de concentracin de monxido de carbono en ppm...

59

Figura 4.2. Grfico de residuos en funcin de la concentracin del MRC para el anlisis
de concentracin de monxido de carbono en porcentaje....

60

Figura 4.3. Grfico del porcentaje de recuperacin aparente para los distintos niveles de
concentracin de los MRC medidos por el mtodo de anlisis de monxido de carbono en
ppm..

67

Figura 4.4. Diagrama de causa efecto de las fuentes de incertidumbre para el anlisis de
concentracin de monxido de carbono en ppm, utilizando el mtodo espectrofotomtrico
infrarrojo no dispersivo..

73

APNDICE A
Figura A.1. Central doble de anlisis de gases puros..
xvi

83

Figura A.2. Conexiones de los cilindros al rack de analizadores en los puertos de anlisis
SC1 y SC2...

83

Figura A.3. Rack de analizadores del Laboratorio de Gases Especiales

84

APNDICE B
Figura B.1. Grfico de residuos en funcin de la concentracin del MRC para el anlisis
de concentracin de nitrgeno en argn en ppm...

89

Figura B.2. Grfico de residuos en funcin de la concentracin del MRC para el anlisis
de concentracin de dixido de carbono en porcentaje..

89

Figura B.3. Grfico de residuos en funcin de la concentracin del MRC para el anlisis
de concentracin de metano en porcentaje...

90

Figura B.4. Grfico de residuos en funcin de la concentracin del MRC para el anlisis
de concentracin de oxgeno en porcentaje..

90

Figura B.5. Grfico de residuos en funcin de la concentracin del MRC para el anlisis
de concentracin de oxgeno en ppm....

91

Figura B.6. Grfico del porcentaje de recuperacin aparente para los distintos niveles de
concentracin de los MRC medidos por el mtodo de anlisis de oxgeno en ppm.

100

Figura B.7. Grfico del porcentaje de recuperacin aparente para los distintos niveles de
concentracin de los MRC medidos por el mtodo de anlisis de oxgeno en porcentaje...

101

Figura B.8. Grfico del porcentaje de recuperacin aparente para los distintos niveles de
concentracin de los MRC medidos por el mtodo de anlisis de nitrgeno en argn en
ppm

101

Figura B.9. Grfico del porcentaje de recuperacin aparente para los distintos niveles de
concentracin de los MRC medidos por el mtodo de anlisis de monxido de carbono en
porcentaje

102

Figura B.10. Grfico del porcentaje de recuperacin aparente para los distintos niveles de
concentracin de los MRC medidos por el mtodo de anlisis de dixido de carbono en
porcentaje

102

Figura B.11. Grfico del porcentaje de recuperacin aparente para los distintos niveles de
concentracin de los MRC medidos por el mtodo de anlisis de metano en porcentaje..

xvii

103

APNDICE C
Figura C.1. Certificado de un Material de Referencia Importado

106

Figura C.2 Cromatograma del anlisis de monxido de carbono, dixido de carbono y


metano en porcentaje

108

Figura C.3. Formato para el registro de resultados de anlisis durante la validacin

109

xviii

LISTA DE SMBOLOS

a
b
ei
k
r2
s
sA2
sD2
Se
sI(D)2
sI(D+A)2
sr2
SXX
U
uc
uprecisin
utrazabilidad

Intercepto de la recta de calibracin.


Pendiente de la recta de calibracin.
Valores residuales.
Factor de cobertura.
Coeficiente de determinacin.
Desviacin estndar.
Varianza entre analistas.
Varianza entre das.
Desviacin estndar residual.
Varianza de precisin intermedia de das diferentes.
Varianza de precisin intermedia de das/analistas diferentes.
Varianza de la repetibilidad.
Suma de cuadrados.
Incertidumbre expandida.
Incertidumbre combinada.
Incertidumbre debida a la precisin intermedia.
Incertidumbre debida a la trazabilidad.

xix

LISTA DE ABREVIATURAS

ANOVA:
EMP:
FID:
ISO:
MS:
MRC:
SENCAMER:
TCD:

Anlisis de varianza.
Error mximo permisible.
Detector de ionizacin de llama.
Organizacin Internacional para la Estandarizacin.
Cuadrados medios.
Material de Referencia Certificado.
Servicio Autnomo Nacional de Normalizacin, Calidad, Metrologa y
Reglamentos Tcnicos.
Detector de conductividad trmica.

xx

xxi

INTRODUCCIN

En el Laboratorio de Gases Especiales de Praxair Venezuela sucursal Cagua, se realizan una


serie de anlisis de componentes de mezclas gaseosas e impurezas de gases puros en un amplio
rango de concentraciones. Dependiendo de la composicin del producto gaseoso existen
numerosas aplicaciones industriales asociadas al mismo. Por ello, el laboratorio necesita asegurar
la validez de los resultados reportados, mediante la evaluacin del desempeo de los mtodos de
anlisis aplicados. Para lograrlo el laboratorio debe llevar a cabo un proceso de validacin de los
mtodos de anlisis, mediante el cual se verifique el cumplimiento de ciertos parmetros
caractersticos establecidos en las normativas internas del laboratorio.
Durante la pasanta desarrollada en el Laboratorio de Gases Especiales, se llev a cabo el
proceso de validacin de los mtodos de anlisis de concentraciones de gases ms comunes
aplicados en el laboratorio. Durante este proceso se analizaron algunos de los parmetros
caractersticos de los mtodos como: la repetibilidad, la precisin intermedia, la veracidad y la
incertidumbre.
En las siguientes secciones, se describen los antecedentes del trabajo, la justificacin y los
objetivos generales y especficos del proyecto planteado. Asimismo, en los captulos siguientes se
muestran: la descripcin de la empresa, los fundamentos tericos en los cuales se fundament el
proyecto, la metodologa empleada para llevar a cabo el proceso de validacin, los resultados
obtenidos y la discusin de los mismos, las conclusiones y finalmente las recomendaciones.

Antecedentes
La validacin de los mtodos de anlisis de concentraciones de gases es un procedimiento
acostumbrado a realizarse en el Laboratorio de Gases Especiales. El mismo, comnmente llevado
a cabo por el Analista del Laboratorio de Gases Especiales, forma parte de la poltica de control y
aseguramiento de la calidad a travs del cumplimiento de la Norma ISO/IEC 17025. En el ao
2003, el laboratorio logr obtener la acreditacin vlida durante tres aos, por haber cumplido
con los criterios establecidos por la Norma ISO/IEC 1705:1999, otorgada por el Servicio
Autnomo Nacional de Normalizacin, Calidad, Metrologa y Reglamentos Tcnicos

(SENCAMER), gracias al cumplimiento del proceso de validacin de los mtodos de anlisis, el


cual es, entre otros, un requisito para la aprobacin de esta norma.
El ltimo proceso de validacin de mtodos de anlisis llevado a cabo en el laboratorio, fue
realizado en el ao 2009. En dicho proceso fueron validados los siguientes mtodos de anlisis:
Anlisis de monxido de carbono por el mtodo espectrofotomtrico infrarrojo no
dispersivo.
Anlisis de gases por cromatografa gaseosa por el mtodo de conductividad trmica
(TCD).
Anlisis de gases por cromatografa gaseosa por el mtodo de ionizacin de la llama
(FID).
Anlisis de humedad por el mtodo electroltico.
Anlisis de nitrgeno en argn por el mtodo espectrofotomtrico.
Anlisis de oxgeno por el mtodo paramagntico.
Anlisis de oxgeno por el mtodo electroqumico.
Anlisis de contenido de hidrocarburos totales por el mtodo de ionizacin de llama.
Durante la validacin se realizaron anlisis de concentracin de los Materiales de Referencia
Certificados de composicin adecuada al alcance del mtodo. Posteriormente, se realizaron
anlisis estadsticos para evaluar el cumplimento de los criterios de aceptacin de los siguientes
parmetros: linealidad, repetibilidad, precisin intermedia, selectividad, incertidumbre expandida,
entre otros.
A partir de la informacin reportada en los informes de validacin de los mtodos
anteriormente mencionados, se fundamentaron las bases del proceso de validacin llevado a cabo
en este trabajo. Especficamente, en trminos de la metodologa a emplearse, y de los criterios de
aceptacin que deban ser alcanzados por algunos de los parmetros caractersticos de los
mtodos.

Justificacin del Trabajo


La validacin de un mtodo de anlisis es un proceso mediante el cual un laboratorio confirma
la validez de los resultados obtenidos por el mtodo, por medio del ajuste a requisitos
previamente establecidos (Maroto, 2002). Por medio de este proceso se evidencia el compromiso

por parte del laboratorio, con el aseguramiento de la calidad mediante el cumplimiento de las
normas del la Organizacin Internacional para la Estandarizacin (ISO), especficamente de la
Norma ISO 17025 sobre los Requisitos Generales para la Competencia de los Laboratorios de
Ensayo y Calibracin, en la cual se establece la validacin de los mtodos utilizados en el
laboratorio como un requisito para lograr la acreditacin de la norma. La obtencin de dicha
acreditacin, demuestra la competencia tcnica del laboratorio para proveer resultados vlidos lo
que genera un alto nivel de confianza en sus clientes. En Venezuela, SENCAMER es la
institucin encargada de otorgar la acreditacin de la norma en cuestin a los laboratorios de
ensayos y calibracin.

Objetivo General
Lograr la validacin de los mtodos de anlisis de concentracin de gases ms comunes
empleados en el Laboratorio de Gases Especiales.

Objetivos Especficos
Para dar cumplimiento al objetivo general de la validacin de los mtodos de anlisis, se
plantearon los siguientes objetivos especficos:
1. Actualizar los Manuales de Procedimientos e Instrucciones del Laboratorio.
2. Revisar los Materiales de Referencia Internos.
3. Validar los mtodos de anlisis por medio del estudio estadstico de los siguientes
parmetros:
3.1.

Anlisis de linealidad.

3.2.

Anlisis de precisin.

3.3.

Anlisis de veracidad.

3.4.

Anlisis de incertidumbre.

CAPITULO 1
DESCRIPCIN DE LA EMPRESA

Praxair es la mayor empresa de gases del continente y la segunda ms grande del mundo. Sirve
a miles de industrias de los sectores ms variados a travs de la produccin, ventas y distribucin
de gases atmosfricos (Oxgeno, Nitrgeno y Argn), gases procesados (Dixido de carbono) y
gases especiales (gases puros y mezclas de gases certificados).
El nacimiento de Praxair Venezuela S.C.A, se produjo en el ao 1996 cuando Praxair
Latinoamrica asume el control de la empresa Liquid Carbonic Venezolana. Gracias a esta
transaccin, se logr introducir en el mercado venezolano, una oferta ms amplia en materia de
gases industriales a travs de diversos productos y servicios con altos estndares de calidad y
seguridad apoyados por una estructura mundial sumamente fuerte e innovadora en materia de
tecnologa y servicio.
Praxair de Venezuela, cuenta con un gran nmero de unidades de negocios y plantas de gases
del aire, hielo seco y gases especiales, a lo largo del territorio nacional, entre ellas se encuentran
las sucursales de la empresa en las ciudades: Caracas, Cagua, Barquisimeto, Barcelona, Maturn,
Maracaibo, Punto Fijo, Puerto Ordaz, Porlamar y San Cristbal. En la Figura 1.1 se muestra la
estructura organizacional de la empresa.
La sucursal de Praxair de Venezuela en Cagua constituye actualmente la oficina principal
administrativa de la empresa en el pas. La misma est conformada por una planta de Dixido de
Carbono, Hielo Seco, Gases Especiales, Prueba Hidrosttica de cilindros y una Estacin de
llenado.

Figura 1.1. Estructura Organizacional de Praxair Venezuela S.C.A.

En la planta de Gases Especiales, se realiza el llenado de los gases de alta pureza: Argn,
Nitrgeno, Helio y Oxgeno. As como el llenado de Helio Lquido, Aire Medicinal, Aire
Sinttico y la preparacin de numerosas mezclas en concentraciones en porcentaje y ppm, de
distintas composiciones de hidrocarburos y gases permanentes, preparadas por diversos mtodos
dependiendo de la especificacin requerida (gravimetra, presiones parciales o volumetra). La
mayora de los productos se entregan con un certificado de anlisis emitido por la unidad de
Laboratorio de Gases Especiales. En las siguientes secciones se describen la visin, misin y los
valores de Praxair de Venezuela S.C.A.

1.1. Visin de la Empresa


Praxair de Venezuela S.C.A, tiene como visin ser la empresa de mejor desempeo reconocida
por sus clientes, accionistas, empleados y por las comunidades donde acta. (Praxair, 2006)

1.2. Misin de la Empresa


Praxair de Venezuela S.C.A, tiene como misin (Praxair, 2006):
Producir, comercializar, instalar y distribuir gases industriales, especiales, medicinales y productos
relacionados con la aplicacin de stos para diversos sectores del mercado nacional e internacional, con la
satisfaccin de nuestros clientes, cumpliendo con los ms altos estndares de calidad y de seguridad, de
acuerdo a directrices, polticas y normas establecidas por nuestra casa matriz.

1.3. Valores de la Empresa


Los principales valores de Praxair de Venezuela S.C.A, son: orientacin hacia resultados,
enfoque al cliente, excelencia personal, integridad, aumento de las ganancias del accionista,
seguridad y conciencia ambiental. (Praxair, 2006)

CAPITULO 2
MARCO TERICO
A continuacin se exponen las bases tericas bajo las cuales se fundament el desarrollo del
proyecto de la pasanta. Para ello, se presentan inicialmente, algunas definiciones de trminos
asociados a los procesos de anlisis de muestras llevados a cabo en el Laboratorio de Gases
Especiales. Posteriormente, se hace referencia a los fundamentos tericos y definiciones
relacionados con el procedimiento de validacin de los mtodos y finalmente se describen
algunos de los anlisis estadsticos aplicados en la evaluacin de datos en el proceso de
validacin.

2.1. Definicin de Gases Especiales


Los gases especiales se refieren a gases de alta pureza, es decir, que poseen una rigurosa
especificacin en cuanto a la presencia de bajas concentraciones de contaminantes. En el caso de
las mezclas, stas poseen mnimas variaciones de las concentraciones. La especificacin se logra
por medio de la seleccin y purificacin de la materia prima, el arduo tratamiento interno de los
cilindros que contienen el producto y el correcto uso de equipos y accesorios. Los dos tipos de
productos elaborados en Gases Especiales incluyen: gases puros y mezclas gaseosas. A
continuacin se definen cada uno de ellos. (Cirino, 2002)
Gases puros: tipo de gas especial que se diferencia de los gases industriales por tener un
alto grado de pureza, cuyos contaminantes son conocidos y cuantificados. Adems
cuentan con un certificado de anlisis, como garanta del cumplimento de las
especificaciones, emitido por el Laboratorio de Gases Especiales (Cirino, 2002).
Mezclas gaseosas: se define como la colocacin de dos o ms gases en un cilindro, en
concentraciones conocidas y con tolerancias especficas. Los gases que componen la
mezcla se denominan componentes minoritarios, el gas de mayor concentracin y que
completa el volumen de la mezcla, es llamado gas balance. (Cirino, 2002).

En el Laboratorio de Gases Especiales, se especifican los grados de pureza de los gases por
medio de dos nmeros, el primero de ellos se refiere a cuantos nueve posee la pureza y el
segundo nmero se repite tal cual est indicado. Por ejemplo, el Argn 5.0, tiene una pureza igual
a 99,9990% (cinco nueve), el Nitrgeno 4.6 tiene una pureza del 99,996 % (cuatro nueve y el
seis). El porcentaje restante de estos grados de pureza, lo constituyen el contenido de impurezas
en el gas. Generalmente, se analizan los contaminantes crticos de los gases, especificados en
unidades de ppm, es decir, en el orden de 0,0001%. (Cirino, 2002).
La determinacin de las concentraciones de los contaminantes crticos de los gases o de los
componentes minoritarios de una mezcla, se realizan por medio de la aplicacin de algunos
mtodos de anlisis basados en ciertas propiedades de estos compuestos. En las siguientes
secciones se describen algunos de los mtodos de anlisis de concentraciones de gases
comnmente empleados.

2.2. Mtodos Electroqumicos


Los mtodos electroqumicos se basan en la determinacin de propiedades electroqumicas, y
su relacin lineal con la concentracin de una sustancia presente en la disolucin. Por ejemplo, la
medicin del potencial en una celda qumica manteniendo un estado estable o equilibrio y su
relacin con la concentracin de una especie involucrada en el intercambio de iones, utilizando la
ecuacin de Nerst, es la base de la potenciometra. Otras tcnicas de medicin basadas en las
propiedades electroqumicas son: la voltametra, coulometra y electrogravimetra. (Gennaro,
2003)
Este tipo de mtodos involucran reacciones electroqumicas del tipo oxidacin-reduccin, en
las cuales se produce un intercambio de electrones entre oxidantes y reductores. La reaccin tiene
lugar en un electrodo, el ctodo, es el electrodo donde se lleva acabo la reduccin, y en el nodo
se produce la oxidacin. En este tipo de reacciones, generalmente se encuentra asociado el
fenmeno de electrolisis, en el cual intervienen: una clula electroltica o recipiente donde se
lleva a cabo el proceso, una fuente de corriente continua, instrumentos de medicin como
microampermetos o milivoltmetros y los electrodos. (Hernndez y Gonzlez, 2002)
La ventaja de la aplicacin de los mtodos electroqumicos radica en que ofrecen una mayor
especificidad para un determinado estado de oxidacin de un elemento. Pueden proporcionar
informacin no slo sobre la concentracin, sino tambin sobre la actividad de una determinada

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especie. Finalmente, el costo de la instrumentacin asociada, es bajo. (Hernndez y Gonzlez,


2002)

2.3. Mtodos Espectrofotomtricos


Forman parte de los mtodos pticos de anlisis, y se fundamentan en la espectrofotometra
como tcnica de medicin de la radiacin que llega a un detector debido al fenmeno de
absorcin de luz por parte de una sustancia absorbente. Estas mediciones se realizan en los
espectros comprendidos entre 220 y 800 nm (visible y ultravioleta). Estos fenmenos se rigen por
las leyes de absorcin, en las cuales se relaciona la cantidad de absorbente en una solucin y el
grado de absorcin de luz de dicha solucin. La ley de Lambert-Beer constituye la base de los
anlisis cuantitativos de espectrofotometra. En dicha ley se relacionan el grado de absorbancia
de una solucin con la concentracin y la longitud del paso del haz de luz a travs de la solucin.
Siendo la relacin entre la absorbancia y la concentracin del absorbente, directamente
proporcionales. Es importante mencionar, que la aplicacin de esta ley est restringida para el
rango de concentraciones bajas o soluciones diluidas (menores a 0,02M) (Silva y Garca, 2006).
El anlisis cuantitativo de los mtodos espectrofotomtricos tienden a ser menos exactos que
los mtodos clsicos de anlisis. Sin embargo, tienen una mayor sensibilidad y rapidez, por lo
que muchas veces compiten en aplicaciones con los mtodos clsicos. (Hernndez y Gonzlez,
2002)

2.4. Mtodos Cromatogrficos


La cromatografa es una tcnica de separacin fsico-qumica en la cual, los compuestos que se
van a separar se distribuyen en dos fases: una estacionaria, de gran desarrollo superficial, y otra
mvil que pasa a travs de la fase estacionaria. Cuando una mezcla de distintos componentes
entra al sistema, se produce una distribucin de magnitud diferente, para cada componente entre
las fases. Esto conlleva a la separacin de los componentes al desplazarse a una velocidad
especfica dentro del sistema. (Menndez, 2008)
Existen diferentes tipos de cromatografas dependiendo del estado fsico de las fases
estacionaria y mvil:

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Cromatografa de gas-slido: la fase estacionaria

es slida y la mvil gaseosa.

Cromatografa

de

lquido-slido:

fase

estacionaria lquida y la fase mvil gaseosa.


Cromatografa lquido-lquido: ambas fases en

estado lquido.

Cromatografa de gas-lquido: fase estacionaria

lquida y la fase mvil gaseosa.

A continuacin se describe brevemente la tcnica de cromatografa de gases, la cual fue


utilizada en algunos de los anlisis de concentracin realizados durante la pasanta.

2.4.1 Cromatografa de Gases


En este tipo de cromatografa, la fase mvil es una corriente de gas y la estacionaria puede ser
lquida o slida. La muestra se inyecta a un bloque que se encuentra a temperatura constante y
all se vaporiza la mezcla, para luego ser arrastrada por el gas portador a lo largo de una columna,
en la cual los componentes son separados en funcin de las caractersticas fsico-qumicas de
cada uno de ellos. El sistema de cromatografa est formado por los siguientes equipos:
Fuente de gas portador: generalmente una

bombona de gas a presin que contiene el gas de la fase mvil (helio o nitrgeno son los
ms comunes).
Inyector: dispositivo que permite la entrada de la

muestra a la corriente del gas portador.

Columna cromatogrfica: en ella se lleva a cabo

la separacin fsica de los componentes. Est constituida por un tubo que puede ser de
vidrio o metal (aluminio, acero inoxidable, etc.). Su longitud vara normalmente entre 120 m y el dimetro oscila entre 0,1-25 mm. Existen columnas rellenas, donde la fase
estacionaria est formada por micropartculas slidas o columnas capilares, donde el
dimetro interno es menor a 1mm y estn recubiertas en su interior por la fase
estacionaria.

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Horno: recinto que se encuentra a temperatura

controlada, dotado unas resistencias elctricas y controles termostticos. En su interior se


encuentra la columna en forma de espiral.
Detector: sensor que mide de forma continua

alguna propiedad fsica del gas portador, las cuales varan con la presencia de la sustancia
a analizar. Tambin pueden medir directamente la muestra problema en relacin a alguna
de sus propiedades.
La Figura 2.1 muestra de manera esquemtica de todos los equipos que conforman el sistema
de un cromatgrafo de gases.

Figura 2.1. Esquema de un cromatgrafo de gases. (Menndez, 2008)

Los resultados reportados por un anlisis cromatogrfico, se presentan en un cromatograma, el


cual es una representacin grfica de la curva de alguna funcin concentracin de cada
componente de la mezcla en funcin del tiempo. Realizada de forma sucesiva y caracterizando el
tiempo de retencin desde que se inyect la muestra y que corresponde con la punta de mxima
concentracin de salida. El rea bajo la curva correspondiente a cada componente, es
proporcional a la concentracin del mismo. Las posiciones de los picos en el eje de los tiempos se
pueden utilizar para identificar los componentes de la mezcla. (Menndez, 2008)
A lo largo de las secciones anteriores, se han descrito y explicado algunos de los conceptos ms
empleados en el Laboratorio de Gases Especiales y que sirven de base para entender el proceso

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de anlisis que se lleva a cabo en dicho laboratorio. A continuacin se presentan las definiciones
y bases tericas del proceso de validacin de los mtodos de anlisis.

2.5. Validacin de los Mtodos de Anlisis


Son muchos los tipos de mediciones que se pueden realizar en un determinado laboratorio, y las
diferentes aplicaciones que se les pueden atribuir a los resultados reportados por stos. Es por
ello, que sin importar el tipo de medicin que se realice, el laboratorio que estime dichos
resultados es responsable de asegurar que los mismos son, en cierto rango, los ms cercanos
posibles al valor verdadero y que los mtodos aplicados para obtenerlos, han sido correctamente
validados a fin de cumplir con las exigencias de sus clientes, y adems que se encuentran
debidamente adaptados al rango de aplicacin que stos requieran.
Un mtodo de medicin en s, consiste en una secuencia lgica de mediciones, descritas
genricamente, utilizadas en la realizacin de una medicin. (EURACHEM Guide, 1988)
Dependiendo de la naturaleza de la magnitud que se desea medir, pueden existir diferentes
tcnicas, cuyos procedimientos debidamente adaptados, permitan determinar con exactitud la
magnitud desconocida. Por ejemplo, la espectrofotometra, la ionizacin de llama y la absorcin
infrarroja, constituyen mtodos de medicin y anlisis de gases.
Para demostrar la confiabilidad de los resultados reportados por los mtodos de medicin, y
asegurar que son adecuados para su finalidad o propsito perseguido, es necesario, realizar la
validacin de los mtodos de anlisis a fin de cumplir con una parte necesaria del sistema de
aseguramiento de la calidad. La validacin de un mtodo es la confirmacin a travs del examen
y el aporte de evidencias objetivas, que se cumplen los requisitos particulares para un uso
especfico previsto (Boqu et al., 2002) Esto se puede interpretar como un proceso en el que se
define un requerimiento analtico, y se confirma que el mtodo tomado bajo consideracin
presenta capacidades de rendimiento consistentes con los requerimientos de su aplicacin
(EURACHEM Guide, 1988)
Los requisitos particulares que deben satisfacer la aplicacin del mtodo pueden depender de
los requerimientos especficos establecidos por el cliente, los cuales, en algunas ocasiones y de
acuerdo al rea de aplicacin de los resultados, pueden ser establecidos directamente por alguna
legislacin correspondiente. Es importante acotar, que el laboratorio que lleve a cabo la
validacin de los mtodos, adecue a los mismos para que cumplan con dichos requisitos

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preestablecidos. Cuando los requerimientos para un anlisis en especfico no son establecidos por
los clientes, el analista debera caracterizar el alcance del mtodo a fin que se cumplan los
requisitos bsicos metrolgicos.
Una vez definidos los requerimientos que debe cumplir el mtodo, el laboratorio tiene que
decidir cules son los parmetros de rendimiento que necesitan ser caracterizados para validar el
mtodo. Este proceso de caracterizacin puede verse limitado por consideraciones de tiempo y
costo. Sin embargo, comenzar con una especificacin analtica cuidadosamente considerada,
constituye una buena base para la planificacin del proceso de validacin. (EURACHEM Guide,
1988)
En los estudios de validacin de los mtodos de anlisis cuantitativos, se suelen determinar
algunos parmetros esenciales, que pueden aportar informacin sobre el cumplimiento de ciertas
caractersticas del mtodo, algunos de ellos derivados del uso de estudios estadsticos. Entre stos
se pueden mencionar: veracidad, precisin, linealidad, selectividad, robustez, reproducibilidad,
repetibilidad, lmite de deteccin y lmite de cuantificacin. (Boqu et al., 2002)
Adems de estos parmetros, existen criterios de calidad que deben verificarse durante el
proceso de validacin, ellos son: la trazabilidad y la incertidumbre. De esta forma se asegura que
los resultados obtenidos por el mtodo son trazables y comparables.
A continuacin se presenta una breve descripcin de cada uno de los parmetros y criterios de
calidad mencionados:

2.6. Trazabilidad
La trazabilidad se define como la propiedad del resultado de una medicin o el valor de un
patrn, por el cual puede ser relacionado con los patrones de referencia, usualmente patrones
nacionales o internacionales, a travs de una cadena ininterrumpida de comparaciones, teniendo
establecidas las incertidumbres (COVENIN 2552:1999, 1999).
Por lo general, la cadena ininterrumpida de comparaciones conlleva a patrones nacionales o
internacionales, que idealmente constituye el Sistema Internacional de Unidades, con lo cual se
asegura que todos los laboratorios utilicen la misma escala de medicin o los mismos puntos de
referencia que permitan comparar confiablemente, los resultados obtenidos por los distintos
laboratorios.

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En los anlisis qumicos, usualmente se trata de comprobar la trazabilidad global de los


resultados obtenidos por un procedimiento analtico a un valor de referencia, para as evaluar si
los resultados son comparables al valor de la referencia utilizada. Esto se puede lograr
combinando los siguientes procedimientos: calibracin del equipo de medicin utilizando
patrones trazables, comparacin de los resultados a un mtodo primario, uso de un material de
referencia, un material de referencia certificado o un procedimiento bien definido y aceptado
(EURACHEM CG4, 2000)
La calibracin del equipo de medicin debe ser trazable a los patrones apropiados. En la etapa
de cuantificacin de los procedimientos analticos, usualmente en la calibracin se utiliza una
sustancia pura como material de referencia, cuyos valores son trazables al sistema internacional
(S.I). Por lo que esta parte del procedimiento, provee a los resultados una trazabilidad al S.I. Sin
embargo, es igualmente necesario establecer para los resultados la trazabilidad de las operaciones
anteriores a la etapa de cuantificacin, tales como extracciones y limpieza de la muestra,
mediante el uso de procedimientos adicionales.
Un mtodo de medicin primario, es aquel que posee la ms alta cualidad metrolgica, cuyas
operaciones estn completamente descritas y entendidas en trminos del SI de unidades y los
resultados son aceptados sin la referencia a un patrn de la misma cantidad. Los mtodos
primarios, usualmente son implementados, nicamente por el Instituto Nacional de Mediciones y
raramente son aplicados a pruebas de rutinas o calibraciones. (EURACHEM CG4, 2000)
La trazabilidad puede ser demostrada por la medicin de una muestra que contenga o est
compuesta de una cantidad conocida de una sustancia pura (Material de referencia). Esto se
puede lograr por medio de la adicin de patrones. Sin embargo, siempre es necesario evaluar la
diferencia en la respuesta del sistema de medicin al patrn aplicado y la muestra sometida a
prueba. Desafortunadamente, para muchos anlisis qumicos y en el caso particular de la adicin
de patrones, tanto la correccin en la diferencia de la respuesta y su incertidumbre, pueden ser
grandes con lo cual no se puede establecer la trazabilidad de los resultados al S.I (EURACHEM
CG4, 2000).
Otra forma de establecer la trazabilidad es por medio de la comparacin de los resultados a una
matriz de Materiales de Referencia Certificados (MRC) con valores certificados. En este
procedimiento, la incertidumbre puede reducirse en comparacin al uso de un material de
referencia (MR). Si el valor del material de referencia certificado es trazable al S.I, entonces los

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resultados tambin sern trazables a este sistema. Sin embargo, en este caso, igualmente pueden
obtenerse valores grandes de incertidumbre en los resultados, o incluso no cuantificables,
particularmente si no existe una buena coincidencia entre la composicin de la muestra y el
material de referencia (EURACHEM CG4, 2000).
Finalmente, una comparacin adecuada, usualmente slo puede ser lograda a travs del uso de
un procedimiento bien definido y aceptado en general. Dicho procedimiento, normalmente estar
definido en trminos de los parmetros de entrada, por ejemplo una serie de tiempos de
extraccin especficos, tamaos de partculas, etc. Los resultados de la aplicacin de este
procedimiento son considerados trazables cuando los valores de los parmetros de entrada son
trazables a las referencias indicadas de la manera usual (EURACHEM CG4, 2000).

2.7. Veracidad
La veracidad se refiere a la cercana entre el valor promedio obtenido a partir de numerosas
mediciones y un valor de referencia aceptado como verdadero. Normalmente, la medicin de la
veracidad se expresa en trminos del sesgo, el cual es determinado mediante el anlisis de
muestras de referencia. Por lo tanto, asegurar la veracidad del resultado obtenido, es equivalente a
afirmar su trazabilidad con respecto a la referencia utilizada. (Maroto, 2002)
Existen diferentes tipos de muestras de referencia utilizadas para evaluar el sesgo, las cuales
tienen distintos niveles de trazabilidad, por lo que, la muestra de referencia utilizada debera
seleccionarse dependiendo del nivel de trazabilidad que se requiera para el propsito establecido.
En la siguiente lista se enumeran las referencias comnmente utilizadas en los anlisis qumicos,
ordenadas de acuerdo a su nivel de trazabilidad: (Maroto, 2002)
Materiales de referencia certificados (MRC)
Materiales de referencia (MR)/ Materiales de trabajo
Mtodos de referencia
Ejercicios interlaboratorios
Muestras adicionadas
A continuacin se definen cada una de las referencias mencionadas.

2.7.1 Materiales de Referencia Certificados

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Es un material de referencia acompaado de un certificado, en el cual uno o ms valores de sus


propiedades estn certificados por un procedimiento, que establece la trazabilidad para una
realizacin exacta de las unidades en las que estn expresados los valores de la propiedad y para
los cuales cada valor certificado, est acompaado por una incertidumbre para un nivel de
confianza establecido (COVENIN 2552:1999, 1999)
Los MRC tienen un alto nivel de trazabilidad, ya que el valor de referencia se obtiene a partir
de los resultados proporcionados por un laboratorio, que ha utilizado varios mtodos de
referencia. Por ello, pueden emplearse para la validacin de mtodos analticos, la calibracin de
un instrumento o para asignar valores a un material.

2.7.2 Materiales de Referencia/ Materiales de Trabajo


Un material de referencia es un material o sustancia, en el cual, uno o ms valores de sus
propiedades son suficientemente homogneos y bien establecidos, para ser utilizados en la
calibracin de un aparato, la evaluacin de un mtodo de medicin o para asignar un valor a un
material.
Los materiales de referencia de trabajo tienen un menor nivel de trazabilidad, ya que la
concentracin de referencia la obtiene un laboratorio acreditado, que ha analizado el material de
referencia de trabajo con un solo mtodo previamente validado.
En general el uso de los MRC, materiales de referencia o materiales de trabajo estn limitados
al alto costo de los mismos y al variado rango de las muestras reales, la variedad de los
mensurandos y de los niveles de concentracin, por lo que el uso de los mismos para verificar la
trazabilidad est restringido en un bajo porcentaje de las determinaciones analticas. (Maroto,
2002)

2.7.3 Mtodos de Referencia


La veracidad y trazabilidad se puede asegurar cuando el laboratorio analiza muestras
representativas utilizando un mtodo de referencia bien conocido, mtodo normalizado u oficial
de anlisis, y el mtodo que se quiere validar. La comparacin de ambos mtodos ser vlida
siempre que se aplique en condiciones de aseguramiento de la calidad (Maroto, 2002).

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2.7.4 Ejercicios Interlaboratorios


En este caso el valor de referencia corresponde al valor de consenso obtenido por medio de la
ejecucin de ejercicios por diferentes laboratorios. Dichos ejercicios pueden realizarse mediante:
ensayos de aptitud, ejercicios colaborativos o ejercicios de certificacin. Los ensayos de aptitud
corresponden aquellos en los que cada laboratorio participante analiza la muestra mediante su
propio mtodo analtico, sin la necesidad de demostrar previamente su competencia, por lo que el
nivel de trazabilidad obtenido mediante estos ensayos es relativamente bajo. En los ejercicios
colaborativos, los diferentes laboratorios someten a anlisis una muestra concreta utilizando un
mtodo nuevo o recientemente modificado, para ello los laboratorios deben previamente
demostrar su competitividad realizando anlisis de repetibilidad y reproducibilidad, con lo cual se
obtiene un mayor nivel de trazabilidad de los resultados obtenidos. (Maroto, 2002).
Finalmente, mediante los ejercicios de certificacin, los laboratorios obtienen mediante
diferentes mtodos de anlisis, cuya exactitud haya sido verificada previamente, el valor de
referencia y la incertidumbre de la propiedad de un material de referencia, por lo tanto son los
ejercicios que brindan un mayor nivel de trazabilidad (Maroto, 2002).

2.7.5 Muestras Adicionadas


En los casos en los que no se disponen de otras referencias, las muestras adicionas constituyen
una de las referencias mayormente utilizadas, sin embargo, proporcionan el nivel ms bajo de
trazabilidad, ya que el analito adicionado puede presentar un comportamiento diferente al
contenido en la muestra, por lo que el sesgo puede estimarse incorrectamente (Maroto, 2002).

2.8. Precisin
La precisin es el grado de concordancia entre los resultados de ensayos independientes de
una misma magnitud obtenidos bajo condiciones especficas (JCGM 200:2008, 2008).
Numricamente, la medicin de la precisin es expresada por medio de parmetros como: la
desviacin estndar, la varianza o el coeficiente de variacin bajo condiciones especficas de
medicin. Estas condiciones dependen de diferentes factores que pueden cambiarse entre cada
resultado de la prueba. Entre estos factores se encuentran:

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El procedimiento de medicin.
El instrumento de medicin, utilizado bajo condiciones especificas.
El operador.
El laboratorio.
La repeticin en un corto intervalo de tiempo.
Dependiendo del cambio de alguno de estos factores, se pueden distinguir tres tipos de
precisin: la repetibilidad, la precisin intermedia y la reproducibilidad (Boqu et al., 2002). A
continuacin se definen cada uno de ellas.

2.8.1. Repetibilidad
Aporta la menor variabilidad, ya que los resultados son obtenidos bajo condiciones de
repetibilidad, es decir, aquellas donde se mantienen constantes todos los factores mencionados
anteriormente en cada una de las mediciones realizadas (Boqu et al., 2002).

2.8.2.Precisin Intermedia
Se refiere a la variacin en los resultados cuando uno o ms factores como, el tiempo,
instrumento o el operador son cambiados en un mismo laboratorio. De acuerdo a estos cambios,
se pueden estimar diferentes tipos de precisin intermedia. Por ejemplo, se hace referencia a la
precisin intermedia de das diferentes, cuando los resultados son obtenidos en diferentes das, si
los resultados son obtenidos en das diferentes, y por operadores diferentes, entonces se obtiene la
precisin intermedia de das-operadores diferentes. Si el laboratorio obtiene los resultados
variando todos los factores que puedan afectarlos (das, operadores, instrumentos, calibracin,
etc.) entonces se obtiene la precisin intermedia de series diferentes. Este tipo de precisin
intermedia, es particularmente til para los laboratorios, ya que proporciona la informacin
acerca de la variabilidad que el laboratorio pueda esperar sobre sus resultados, es decir, es un
estimado de la reproducibilidad interna del laboratorio. Adems, es un componente esencial
para evaluar la incertidumbre final de los resultados. (Boqu et al., 2002).

2.8.3. Reproducibilidad

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La reproducibilidad puede definirse como el grado de concordancia entre el resultado de


mediciones de la misma magnitud, llevadas a cabo bajo distintas condiciones. (COVENIN
2552:1999, 1999) Este tipo de precisin, aporta la mayor variabilidad debido a que todos los
factores que pueden afectar los resultados son diferentes, incluyendo el laboratorio, por lo que la
estimacin de la reproducibilidad slo puede ser obtenida mediante estudios interlaboratorios
(Boqu et al., 2002).

2.9. Robustez
Normalmente, cuando distintos laboratorios utilizan un mismo mtodo de anlisis, cada uno de
ellos introduce alguna pequea variacin en el procedimiento, lo cual puede afectar
significativamente los resultados del mtodo. Para contrarrestar esto, individualmente cada
laboratorio debera realizar un estudio de robustez, llevado a cabo en las etapas iniciales del
desarrollo del mtodo analtico y antes de la participacin del laboratorio en ensayos
colaborativos. En estos estudios, se mide la capacidad del mtodo analtico de no ser afectado por
pequeas, pero deliberadas variaciones de algunos parmetros del mtodo. Por lo tanto, se
proporciona una indicacin de la fiabilidad del mtodo durante el anlisis de muestras de rutina.
(Boqu et al., 2002).
Para la realizacin de los estudios de robustez, se deben utilizar muestras que sean
representativas de las muestras de rutina, preferiblemente materiales de referencia. Adems, se
deben identificar todos aquellos parmetros que puedan afectar el mtodo analtico, los cuales no
hayan sido variados lo suficientemente durante el anlisis de precisin intermedia.
Posteriormente, deben establecerse los valores nominales de estos parmetros, as como sus
valores mximos y mnimos. Despus, se debe escoger el diseo experimental para evaluar
dichos factores, para ello se han desarrollado tcnicas para los estudios de robustez, que permiten
evaluar la influencia de ciertos parmetros en un nmero limitado de experimentos. Con esta
informacin, se deberan realizar anlisis estadsticos o grficos para obtener conclusiones
relevantes y, si es necesario, tomar acciones que mejoren el desempeo del mtodo. (Boqu et
al., 2002).

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2.10. Exactitud
La exactitud se define como el grado de concordancia entre el resultado de una medicin y un
valor verdadero de la magnitud a medir (Maroto, 2002). Este trmino considera tanto los errores
sistemticos como los errores aleatorios que siempre estn presentes en el resultado de una
medicin. El error sistemtico se define como la media que resultara de un nmero infinito de
mediciones de la misma magnitud a medir llevadas a cabo bajo condiciones de repetibilidad,
menos un valor verdadero de dicha magnitud. Por su parte, el error aleatorio se define como la
diferencia entre el resultado de una medicin y el error sistemtico (COVENIN 2552:1999,
1999). Por lo tanto, la exactitud incluye dos definiciones: la veracidad y la precisin, es decir, un
resultado se considera exacto si paralelamente es veraz, se encuentra libre de errores sistemticos,
y preciso, los errores aleatorios son aceptables (Maroto, 2002).

2.11. Linealidad
La linealidad es una propiedad de los mtodos muy importante, utilizada para realizar
mediciones en cierto rango de concentraciones. Puede ser determinada para la respuesta a
patrones puros y muestras reales. Generalmente, esta propiedad no puede ser cuantificada, por lo
que se trata de verificar por medio de una inspeccin o el uso de pruebas de significacin de nolinealidad. Por ejemplo, la linealidad puede ser probada por medio de la revisin de un grfico de
residuos producidos por una regresin lineal a la respuesta de las concentraciones en un
determinado rango de calibracin. Cualquier patrn de curva sugiere la falta de ajuste debido a
una funcin de calibracin no lineal. Para la elaboracin de dicha curva, se sugieren algunas
especificaciones (IUPAC, 2002):
Deberan utilizarse seis o ms patrones de calibracin.
Las concentraciones de los patrones de calibracin debera estar equiespaciados a lo largo
del rango de concentracin de inters.
El rango debera englobar entre un 0-150% o 50-150% de la concentracin que pueda
encontrarse, dependiendo de cul de ellos es el ms adecuado.
Finalmente, los patrones de calibracin deberan analizarse al menos por duplicado o
preferiblemente por triplicado.

22

De igual forma, puede llevarse a cabo una prueba para un intercepto muy diferente de cero
cuando la falta de ajuste lineal es insignificante. (IUPAC, 2002)

2.12. Selectividad
La selectividad es el grado en el cual, un mtodo puede cuantificar de manera exacta al analito
ante la presencia de interferencias. Durante la etapa de medicin, es necesario establecer que la
propiedad que est sometida a anlisis, la cual es atribuida nicamente al analito, es debida
solamente al mismo y no a la presencia de otro compuesto similar fsica o qumicamente, o que
surja como una coincidencia. Si las interferencias presentes no pueden ser separadas del analito
de inters, o si el analista no est consciente de la presencia de dichas interferencias, stas tendrn
ciertos efectos. Dependiendo de cmo se establezca la identidad del analito, las interferencias
pueden inhibir esta confirmacin, por ejemplo, puede ocurrir una distorsin de las seales propias
del analito, o tal vez que la concentracin del analito se perciba aparentemente mejorada debido
a una contribucin a la seal atribuida al analito, o de manera contraria, la concentracin puede
verse reducida para el caso en que la interferencia contribuya de manera negativa a la seal.
(EURACHEM Guide, 1988)
Las interferencias usualmente afectaran la pendiente de la curva de calibracin del mtodo de
manera diferente al analito de inters. Este efecto tiene la potencialidad de indicar la presencia de
interferencias ocultas, pero no es aplicable cuando la curva de recuperacin es no lineal.
(EURACHEM Guide, 1988)
La selectividad del mtodo puede establecerse por medio del estudio de su habilidad para medir
el analito comparando mtodos o tcnicas independientes. Por ejemplo: un pico en un
cromatograma puede ser identificado debido a la presencia del analito de inters basndose en
que un material de referencia que contenga al analito, genera una seal en el mismo punto en el
cromatograma. Sin embargo, esta seal puede producirse bien sea por la presencia del analito o
bien por algn componente adicional que coincide con l. De cualquier manera, la identificacin
del analito utilizando este anlisis, es poco confiable, por lo que es necesaria el aporte de alguna
evidencia que respalde la identificacin. Por ejemplo, la cromatografa se puede repetir utilizando
una columna con una polaridad diferente para comparar si la seal del analito y la generada por el
material de referencia, siguen apareciendo en los mismos tiempos. El uso de una columna con
una polaridad diferente es un buen mtodo para separar componentes cuando los picos se deben a

23

la presencia de ms de un componente. Si se tiene disponible, se puede utilizar la cromatografa


de gases con espectrometra de masas para confirmar la identidad del analito de estar presente en
una muestra. Algunos detectores tambin pueden monitorear la pureza de los picos.
(EURACHEM Guide, 1988)
De forma ideal, la selectividad debera ser evaluada para cualquier interferencia que pueda
estar presente en la muestra. Es particularmente importante, revisar las interferencias que,
basndose en principios qumicos, puedan responder a las pruebas. Puede resultar poco prctico
considerar o someter a prueba todas las interferencias potenciales, por lo que es recomendable
revisar los peores casos ms probables. De forma general, la selectividad debera ser lo
suficientemente buena como para considerar despreciable cualquier interferencia. (IUPAC, 2002)
2.13. Lmite de Deteccin
Cuando las mediciones son realizadas en niveles bajos de concentracin de analito o de alguna
otra propiedad, es importante conocer los valores ms bajos de concentracin o de la propiedad,
que puedan confiablemente ser detectados por el mtodo. Es decir, durante la validacin de un
mtodo, el lmite de deteccin es determinado slo para establecer el extremo inferior del rango
de operacin prctica de un mtodo. El lmite de deteccin, se define como la cantidad o
concentracin mnima de una sustancia que pueda ser confiablemente determinada por un
determinado mtodo analtico (Boqu et al., 2002). Actualmente, la ISO emplea en lugar de
lmite de deteccin, el trmino mnimo de concentracin neto detectable que se define como
la verdadera concentracin neta o cantidad de analito en el material de anlisis el cual llevar, con
determinada probabilidad, a la conclusin que la concentracin o cantidad de analito en el
material analizado es mayor que aquel en el material en blanco. (EURACHEM Guide, 1988)
Para el propsito de la validacin, generalmente es suficiente suministrar una indicacin del
nivel en el cual existen problemas de deteccin, para ello se puede establecer el lmite de
deteccin como tres veces la desviacin estndar de las concentraciones en una matriz en blanco
o en una muestra que contenga el analito en un nivel bajo de concentracin. Es recomendado
realizar al menos diez experimentos independientes para la determinacin de la concentracin
(Boqu et al., 2002).

2.14. Lmite de Cuantificacin

24

El lmite de cuantificacin es una caracterstica del desempeo del mtodo, que determina la
habilidad de un procedimiento de medicin de cuantificar adecuadamente un analito, y se define
como la cantidad o concentracin de analito ms baja, que puede ser determinada con un
aceptable nivel de precisin y veracidad. En la prctica, usualmente el lmite de cuantificacin se
expresa como la concentracin que puede ser determinada con un valor especifico de desviacin
estndar relativa (Boqu et al., 2002). Es decir:

Donde kq es igual a 10 si el valor de desviacin estndar relativa requerido es 10%, q


representa la desviacin estndar de las mediciones realizadas en el nivel del lmite de
cuantificacin, para ello se deben llevar a cabo diez o ms determinaciones de muestras, que
contenga al analito en una concentracin cerca del lmite de cuantificacin Lq, como este lmite
no es conocido, se recomienda analizar muestras con contenidos de analito entre dos o cinco
veces el valor estimado en el lmite de cuantificacin. (Boqu et al., 2002).
Generalmente, la estimacin del lmite de cuantificacin se lleva a cabo como parte del estudio
para determinar el rango de trabajo del mtodo analtico, y es una prctica comn fijar el lmite
de cuantificacin como la concentracin ms baja del rango de calibracin (Boqu et al., 2002).

2.15. Incertidumbre
La expresin del resultado de una medicin est incompleta a menos que incluya el valor de la
incertidumbre asociada. La incertidumbre del resultado de una medicin es un parmetro que
caracteriza la desviacin de los valores que puede ser razonablemente atribuidos al mesurando
(Namas, 1995). Para determinar el valor de la incertidumbre de un resultado es necesario conocer
el valor de la magnitud que se desea medir (el mesurando), el modelo fsico y matemtico que
expresa la relacin entre las magnitudes de entrada y la magnitud de salida (el mesurando)
representada como una funcin y las posibles fuentes de incertidumbre involucradas en la
medicin (Schmid y Martnez, 2000).
Pueden existir numerosas fuentes de incertidumbre que afecten el resultado de medicin, por
ejemplo: los resultados de la calibracin de un instrumento, la incertidumbre del patrn o material

25

de referencia, la repetibilidad, la reproducibilidad de las mediciones, las condiciones ambientales,


el modelo particular de medicin, el objeto a ser medido las caractersticas del instrumento de
medicin como la resolucin, histresis, deriva, etc. (Schmid y Martnez, 2000).
De ser posible debera considerarse todas las posibles fuentes de incertidumbre y no descartar
ninguna de ellas hasta determinarse la mnima contribucin de la misma al valor de
incertidumbre, sin embrago, en muchas ocasiones, la experiencia y conocimientos del analista
permiten calificar de irrelevantes algunas de ellas (Schmid y Martnez, 2000).
Para cuantificar la contribucin de cada una de las fuentes de incertidumbres existen dos
aproximaciones para estimarlas. A continuacin se definen cada una de ellas:
2.15.1 Evaluacin tipo A
Una evaluacin tipo A se realiza utilizando mtodos estadsticos, normalmente a partir de
mediciones repetidas. Puede utilizarse para obtener valores de repetibilidad o aleatoriedad de un
proceso de medicin. Para algunas mediciones, la componente aleatoria de la incertidumbre
puede ser insignificante en relacin con otras contribuciones a la incertidumbre. Sin embargo, es
deseable para cualquier tipo de medicin que se establezca la relativa importancia de los efectos
aleatorios. Cuando existe una significativa desviacin de los resultados de una medicin, debera
calcularse la media aritmtica o promedio de los resultados. Si existen n valores independientes
repetidos para un mesurando entonces el valor promedio

Donde

viene dado por:

es el k-simo valor medido de la cantidad x.

La desviacin en los resultados, indica la repetibilidad del proceso de medicin y depende del
instrumento utilizado, el mtodo y en algunas ocasiones de la persona que ejecuta la medicin. La
estadstica ms utilizada por ejemplo, es la desviacin estndar s de los n valores que comprende
la muestra, y viene expresado por:

26

s( xk )

La incertidumbre estndar u(

1 n
(
x
x

k )2
n 1 k 1

) de la cantidad x, se obtiene mediante el clculo de la

desviacin estndar experimental de la media:

u ( x k ) s ( x)

s( xk )
n

En general, es recomendable aumentar el nmero de mediciones n, ya que esto resulta en una


reduccin del valor de este tipo de incertidumbre. Por ejemplo, cuando se caracterizan patrones o
instrumentos o se realizan calibraciones, se requiere un valor de n mayor o igual a 10. (Schmid y
Martnez, 2000).
La evaluacin tipo A tambin es utilizada para evaluar otras fuentes de incertidumbre como la
reproducibilidad y la linealidad (Schmid y Martnez, 2000).

2.15.2 Evaluacin Tipo B


Para cuantificar las fuentes de incertidumbre tipo B se utiliza informacin externa u obtenida
por previa experiencia, por ejemplo, certificados de calibracin, las especificaciones de los
fabricantes, clculos y mediciones previas, etc. A diferencia de la evaluacin tipo A que depende
del azar, las evaluaciones tipo B son sistemticas. (Schmid y Martnez, 2000).
Una vez identificadas las fuentes de incertidumbre sistemticas, las mismas deberan
caracterizarse en trminos de la desviacin estndar basadas en la distribucin asignadas a cada
fuente. Por ejemplo, la incertidumbre obtenida a partir de un certificado de calibracin, en el cual
es reportado el factor de cobertura k y el valor de incertidumbre expandida U, siguiendo una
probabilidad de distribucin normal, la incertidumbre estndar se encuentra dada por:

27

u( xk )

U
k

Por otro lado, cuando un instrumento ha sido certificado en conformidad con una
especificacin, entonces debera tomarse en cuenta la incertidumbre debida a la calibracin, para
este caso, puede asumirse una distribucin tipo rectangular para el clculo de la incertidumbre
estndar de acuerdo a:

Donde a es el semiancho del intervalo lmite de tolerancia. Una aplicacin tpica de este tipo
de distribucin es la resolucin de un instrumento digital, en la cual a corresponde al ltimo
dgito significativo (Schmid y Martnez, 2000). Este tipo de evaluacin tambin puede aplicarse
para el clculo de la incertidumbre asociada al error mximo permisible del instrumento (EMP),
en tal caso la ecuacin 2.1 se sustituye por:

Una vez cuantificadas las posibles fuentes de incertidumbre, stas pueden combinarse para
obtenerse un nico valor que las englobe a todas, esto se logra por medio del clculo de la
incertidumbre combinada y la incertidumbre expandida. A continuacin se define estos dos tipos
de incertidumbre.

2.15.3 Incertidumbre Combinada


La incertidumbre estndar combinada u i ( y ) , representa el resultado de la combinacin de las
contribuciones de todas las fuentes de incertidumbre junto con el impacto de la fuente sobre el
mesurando, representado por el coeficiente de sensibilidad c i :

28

u k ( y) ck u ( xk )

El coeficiente de sensibilidad refleja que tan sensible es el mesurando con respecto a las
variaciones de la magnitud de entrada correspondiente y puede determinarse por distintos
mtodos dependiendo de que exista o no una relacin funcional entre las magnitudes de entrada y
de salida. (Schmid y Martnez, 2000).
Para el caso de magnitudes no correlacionadas, la incertidumbre combinada puede expresarse
como la suma geomtrica de las contribuciones de cada fuente incertidumbre (Schmid y
Martnez, 2000):
n

u c2 ( y ) u k2 ( y )
k 1

2.15.4 Incertidumbre Expandida


Debido a que la incertidumbre estndar combinada slo representa un intervalo centrado con
una probabilidad del 68% aproximadamente de contener el valor verdadero del mesurando, es
necesario expandir el intervalo para as de aumentar la probabilidad (Schmid y Martnez, 2000).
Para ello se utiliza el factor de cobertura k, con lo cual se obtiene la incertidumbre expandida U:

U k uc

Expresada de esta manera, la incertidumbre expandida representa el intervalo con cierta


probabilidad de los valores que pueda tomar el mesurando. Por ejemplo, para una distribucin
normal, k es igual a 1 y corresponde a una probabilidad del 68,27%, para k igual a 2 la
probabilidad es del 95,45%, sta es normalmente la reportada en los certificados de calibracin.
(Schmid y Martnez, 2000)
Debido a la complejidad que involucra el proceso de identificacin y cuantificacin de todas las
posibles fuentes de incertidumbre que puedan afectar el resultado de una medicin. Se han

29

desarrollado aproximaciones al clculo de este factor de una forma ms global, es decir,


agrupando en la medida posible, diversas fuentes de incertidumbre. Una de estas aproximaciones,
involucra el uso de la informacin generada en los procesos de validacin de los mtodos de
anlisis, para el clculo del valor final de incertidumbre. A continuacin se presenta una
descripcin sobre esta aproximacin.

2.15.5 La Incertidumbre en los Mtodos de Validacin


La incertidumbre de los resultados tambin puede calcularse utilizando la informacin generada
por la validacin de los mtodos analticos, resulta especialmente til la conocer la evaluacin de
la veracidad, robustez y precisin del mtodo. Siempre que los materiales de referencia utilizados
para evaluar dichos parmetros en la validacin, abarquen el rango de anlisis con el que
generalmente se trabaja el mtodo, y que adems se conserven las mismas condiciones en el
laboratorio, entonces la incertidumbre de los resultados puede relacionarse con la de los
resultados de las pruebas de rutina. (Maroto, 2002).
De manera general, la incertidumbre puede calcularse como la suma algebraica de cuatro
trminos:

El primero de los trminos de la ecuacin 2.3, uprecisin2, corresponde a la incertidumbre


estndar debida a la precisin intermedia de diferentes corridas obtenida al variar las condiciones
de medicin como los das, el analista, los equipos, etc. Por medio de este valor, se evala la
variabilidad experimental de procedimiento de anlisis (Maroto, 2002). Esta incertidumbre puede
calcularse como:

30

Donde SI se refiere a la precisin intermedia del mtodo y N al nmero de veces que se analiza
la muestra de rutina, generalmente N es igual a 1.
El segundo trmino de la ecuacin 2.3, utrazabilidad2, considera la incertidumbre asociada a
asegurar que el mtodo proporciona resultados trazables a un MRC, para ello se considera tanto
la incertidumbre propia del material, como la precisin intermedia del procedimiento de anlisis
(Maroto, 2002). La expresin para este trmino de la incertidumbre, viene dada por:

Donde, UCRM se refiere a la incertidumbre del MRC, reportada en el certificado del mismo, k
corresponde al factor de cobertura asociado a dicha incertidumbre, y que tambin se reporta en el
certificado. Usualmente este valor es igual a 2. El trmino n se refiere al nmero de veces que se
analiz el MRC siguiendo el procedimiento de anlisis. (Maroto, 2002). (Puglisi y Kornblit)
El tercer trmino de la ecuacin 2.3, u 2pretratamientos , se refiere a la incertidumbre debida a la
heterogeneidad de la muestra y a los pre tratamientos que no se hayan tomado en cuenta durante
2
la evaluacin de la veracidad del mtodo. Finalmente, el cuarto trmino uotroster
min os , considera

todos los dems trminos de incertidumbre que no fueron tomados en cuenta durante la
validacin del mtodo (Maroto, 2002).
Entre la incertidumbre asociada a otros trminos, se puede incluir aquella debida a la
calibracin analtica del instrumento, sta se conoce como la incertidumbre debida a la recta de
calibracin y est asociada a la aproximacin lineal del modelo de la respuesta del instrumento a
los valores de concentraciones de referencia de los MRC (Puglisi y Kornblit). El clculo de esta
incertidumbre parte de los datos obtenidos para la recta de calibracin que viene dada por:

31

Donde x e y corresponden a los n datos de las concentraciones de los MRC y la respuesta del
instrumento respectivamente, a es el intercepto de la recta y b la pendiente. La estimacin usual
de estos parmetros puede obtenerse aplicando el mtodo de mnimos cuadrados. La expresin
para el clculo de la incertidumbre de la recta de calibracin puede obtenerse por medio de la
siguiente expresin:

Donde Se es la desviacin estndar residual y viene dada por:

En la ecuacin 2.7, ei es el i-simo residuo respecto a la recta, es decir, la diferencia en


direccin del eje de las ordenadas, entre el punto (xi, yi) y la recta de calibracin. Los valores del
residuo se calculan de acuerdo a:

El trmino Sxx es la suma de cuadrados y se calcula como:

El trmino x0 representa el resultado de la medicin, o concentracin incgnita y se calcula


como:

32

Donde

corresponde al promedio de las respuestas del instrumento, repetidas m veces, al

medir la concentracin de la muestra. (Puglisi y Kornblit)

2.16. Anlisis Estadsticos


En las siguientes secciones se presentan las definiciones de algunos de los anlisis estadsticos
empleados en la evaluacin de algunos de los parmetros descritos en las secciones anteriores.

2.16.1. Coeficiente de Correlacin de Pearson


Este coeficiente mide el grado de asociacin lineal entre dos variables medidas a nivel de
intervalo. El coeficiente de correlacin de Pearson puede tomar valores entre -1 y 1. El signo del
coeficiente puede interpretarse de acuerdo a lo siguiente: valores positivos del coeficiente
significa que a medida que crecen los valores de la variable x, crecen los valores de la variable y.
Si el signo del coeficiente es negativo, esto indica, que la relacin entre las variables es inversa,
es decir, por ejemplo a valores altos de x le corresponden valores bajos de y. Asimismo el valor
numrico del coeficiente de Pearson, indica una mayor relacin lineal entre las variables para
valores cercanos a -1 o 1. (Garrido y Estramiana, 1995)
El coeficiente de Pearson rxy puede calcularse como:

2.16.2. Pruebas de t de Student

33

Es una prueba utilizada para comparar las medias de dos muestras. Determina la superposicin
de las distribuciones de probabilidad. Se puede calcular mediante la siguiente ecuacin:

Donde

representan los valores promedios de cada muestra, s1 y s2 se refieren a sus

respectivas desviaciones estndar y n1 y n2 constituyen la cantidad de datos de cada muestra. La


ecuacin anterior proporciona un valor de t calculado, el cual se compara con el valor de t
tabulado para (n1+n2-2) grados de libertad y igual 0,05, para una probabilidad del 95%. Si el
valor de t calculado es mayor que el reportado en la tabla, entonces existe una diferencia
estadsticamente significativa. La ecuacin anterior se modifica cuando las muestras son
pareadas, obtenindose la siguiente expresin:

Donde y es la media de las diferencias entre las dos muestras, Sy es la varianza y n la cantidad
de datos, iguales para cada muestra (Gonzlez, 2005).
Las pruebas de t tambin pueden aplicarse cuando se desea comparar los valores promedios de
obtenidos por un mtodo de medicin, con un valor de referencia. Si el valor de t calculado es
menor que el valor de t tabulado se puede asegurar la veracidad del mtodo ya que se comprueba
que no existen diferencias significativas entre el valor promedio medido por el mtodo y el valor
de referencia (Boqu et al., 2002). Para este caso, la expresin para calcular el valor de t viene
dado por:

34

Donde cref es la concentracin de referencia (generalmente la concentracin de un MRC


reportada en el certificado), c, es el promedio de la concentracin medido n veces por el mtodo y
s es la desviacin estndar de los valores medidos. El trmino u(cref) es la incertidumbre de
referencia y se calcula como:

Siendo U(cref) la incertidumbre de la concentracin del MRC y k el factor de cobertura


reportados en el certificado. (Boqu et al., 2002).

CAPITULO 3
MARCO METODOLGICO
El siguiente captulo presenta una descripcin detallada del procedimiento de validacin de los
mtodos de anlisis de gases realizados durante la pasanta, as como de los equipos y materiales
utilizados en los anlisis. En cada una de las secciones presentadas a continuacin, se profundiza
sobre las tcnicas y mtodos efectuados a fin cumplir con el objetivo final de la validacin.

3.1. Anlisis de Gases Especiales


En el Laboratorio de Gases Especiales se realizan diversos anlisis qumicos para determinar
las impurezas de un gas puro, o bien las concentraciones de los componentes minoritarios de una
mezcla de gases. Segn sea el caso, existen ciertos componentes gaseosos especficos,
determinados usualmente en el anlisis de muestras del laboratorio.

3.1.1 Anlisis de Gases Puros


Existen cinco gases puros principales analizados en el Laboratorio de Gases Especiales, cada
uno de ellos, posee un mnimo de impurezas que deben ser determinadas a fin de cumplir con las
especificaciones de los clientes. De esta manera, el objetivo de los anlisis qumicos realizados a
los gases puros, es determinar cada una de las impurezas mnimas del gas, de acuerdo al grado de
pureza que se requiera. En la Tabla 3.1 se listan las concentraciones mnimas de impurezas
presentes en cada gas puro de acuerdo al grado de pureza especificado. La informacin reportada
en esta tabla se obtuvo a partir del Catlogo de Gases Especiales y Equipos Praxair.

36

Tabla 3.1. Tipos de Gases Puros y sus requerimientos mnimos de impurezas


Gas Puro

Grados de Pureza

Impurezas Mnimas (ppm)

Argn

6.0

H2O<0,5-O2<0,3-THC<0,1

5.0 Analtico

N2<3-H2O<2-O2<1-THC<0,5
CO2<1-CO<1

Helio

5.0 Plasma

N2<3-H2O<2-O2<1-THC<0,5

4.8

H2O<3-O2<3

6.0

H2O<0,5-O2<0,5-THC<0,1

5.0 Analtico

N2<5-H2O<2-O2<1-THC<0,5
CO2<1-CO<1

Oxgeno

Hidrgeno

4.5 FID

THC<0,5

4.5 Lser

H2O<5-THC<1

4.5

H2O<5-O2<3

4.6 Lser

H2O<0,5-THC<1

4.6

H2O<5-O2<5

6.0

N2<0,8-H2O<0,5-THC<0,1

4.0 Analtico

N2<20-H2O<3-Ar<20

2.8 Analtico

THC<0,5

2.8

H2O< 5

6.0

H2O<0,5-O2<0,2-THC<0,1

5.0 Analtico

N2<5-H2O<2-O2<1-THC<0,5
CO2<1-CO<1

Nitrgeno

4.5 FID

THC<0,5

4.5

H2O<5-O2<3

4.0

H2O<10-O2<5

6.0

H2O<0,5-O2<0,3-THC<0,1

5.0 Analtico

H2O<2-O2<1-THC<0,5
CO2<1-CO<1

4.6 Emisin

THC<1-CO2<20-CO<1 NOx<0,1

4.6 FID

THC<0,5

4.6 Lser

H2O<0,5-THC<1

4.6

H2O<5-O2<5

37

De acuerdo a la Tabla 3.1, el rango de concentraciones que abarcan los anlisis de impurezas de
los gases puros se encuentra de manera general entre 0,1-20 ppm (trazas), para determinar niveles
tan bajos de concentracin es necesario el uso de equipos altamente sensibles y selectivos. Los
procedimientos de anlisis de stos y otros gases puros realizados en el laboratorio se especifican
en el Manual de Procedimientos e Instrucciones del Laboratorio, en dicho manual, se presenta
una informacin detallada sobre la realizacin de los anlisis para cada gas puro, los mtodos que
deben aplicarse, los equipos a utilizar a fin de determinar las impurezas correspondientes de cada
gas y las instrucciones de preparacin de muestras y calibracin de equipos.
Se realiz una revisin bibliogrfica del Manual de Procedimientos e Instrucciones del
laboratorio, a fin de conocer a fondo los procesos de anlisis de gases que posteriormente iban a
ser evaluados durante la validacin. Sin embargo, debido a la gran cantidad de procedimientos
descritos en el manual, los cuales, en ocasiones se repetan para distintos gases, se logr, con la
ayuda del supervisor y el analista del Laboratorio, la unificacin de muchos de los
procedimientos de anlisis de impurezas comunes en cada gas puro. Con esto, se reestructur la
organizacin del manual por anlisis de impurezas en lugar de la antigua organizacin por
anlisis de gases puros.

3.1.2 Anlisis de Mezclas Gaseosas


El anlisis de una mezcla gaseosa puede ejecutarse de tres maneras diferentes, segn se
especfica a continuacin (Cirino, 2002):
Anlisis de Componente Minoritario: este tipo

de anlisis es el ms utilizado, en donde se determina la concentracin del componente


minoritario por medio de la comparacin con un patrn adecuado, de acuerdo a la
aplicacin.

Impureza Especfica: en este tipo de anlisis se


determinan cualquier tipo de impureza que el cliente requiera as como tambin las
concentraciones de los componentes minoritarios de la mezcla.

Anlisis Completo: se determinan tanto las


concentraciones de los componentes minoritarios como las impurezas especficas, esto se
realiza en caso que el cliente as lo solicite.

38

De la misma forma que en los anlisis de gases puros, los anlisis de mezclas gaseosas se
especifican en el Manual de Procedimientos e Instrucciones del Laboratorio. Tanto los
componentes, como las concentraciones de los mismos, dependen exclusivamente de las
especificaciones del cliente. Por lo que, los rangos de concentraciones de las mezclas gaseosas
pueden abarcar desde concentraciones bajas (en ppm) hasta concentraciones altas (en porcentaje).
Dependiendo del componente de la mezcla y de su concentracin, se aplica el mtodo de anlisis
apropiado para ese componente.

3.2 Procedimiento General de Anlisis de Gases Durante la Validacin


Para la validacin de los mtodos de anlisis de gases, se realizaron anlisis de muestras de
diferentes gases en determinadas concentraciones, aplicando un mtodo de anlisis especfico,
utilizando los equipos apropiados y en condiciones de operacin y anlisis determinadas, as
como tambin siguiendo el Manual de Procedimientos e Instrucciones del Laboratorio de Gases
Especiales de Praxair Venezuela sucursal Cagua. En la Figura 3.1 se muestra un diagrama
esquemtico con los procedimientos generales aplicados en el anlisis de gases durante la
validacin de los mtodos. El mismo, sigue los lineamientos del proceso de medicin de anlisis
de gases reportados en el Manual de Procedimientos e Instrucciones del Laboratorio de Gases
Especiales Praxair Venezuela Sucursal Cagua. Esto con la finalidad de asegurar que la validacin
del mtodo de anlisis empleado, realmente evala los procedimientos y tcnicas de medicin
aplicados cotidianamente en el Laboratorio de Gases Especiales. La diferencia del procedimiento
de anlisis aplicado durante la validacin y el ejecutado cotidianamente en el laboratorio, radica
en que las muestras de rutina analizadas se sustituyen por Materiales de Referencia Certificados
(MRC), cuyas concentraciones son representativas a las analizadas dentro del rango de trabajo
cotidiano.
Asimismo, a diferencia del anlisis usual aplicado en el laboratorio, durante los anlisis
aplicados en la validacin, luego de obtener los resultados experimentales, se realiz un anlisis
estadstico de los mismos, a fin de determinar los parmetros caractersticos que aportan
informacin sobre el comportamiento del mtodo (linealidad, repetibilidad, precisin intermedia,
etc.). En las siguientes secciones, se describen los pasos generales descritos en la Figura 3.1.

39

Figura 3.1. Diagrama General del proceso de anlisis de gases aplicado en la validacin.

3.3 Anlisis de Concentracin de los MRC


Los anlisis de los MRC aplicados durante la validacin se planificaron con base a lo
especificado en la seccin 3.1, es decir, con respecto a los anlisis ms comunes realizados en el
Laboratorio de Gases Especiales, adems en los rangos de concentraciones ms adecuados. A
continuacin se mencionan los siete anlisis de concentraciones de los gases ms comunes
seleccionados para el proceso de validacin y el rango de trabajo de concentraciones. En el
apndice A se muestra el procedimiento de anlisis de concentraciones de gases aplicados en el
Laboratorio.

40

Tabla 3.2. Anlisis de concentraciones de gases y rangos de trabajo evaluados durante el proceso
de validacin.
Anlisis

Mtodo de anlisis empleado

Rango de trabajo

Anlisis para determinar

Mtodo electroqumico

(1-80) ppm

Mtodo paramagntico

(0,5-99,8)%

Mtodo espectrofotomtrico

(17-156) ppm

Anlisis para determinar

Mtodo espectrofotomtrico

(4,8-1001) ppm

Monxido de Carbono en ppm

infrarrojo no dispersivo

Anlisis para determinar

Cromatografa gaseosa por el

Monxido de Carbono en

Mtodo de Ionizacin de la

porcentaje

llama

Anlisis para determinar

Cromatografa gaseosa por el

Dixido de Carbono en

Mtodo de Ionizacin de la

porcentaje

llama

Anlisis para determinar

Cromatografa gaseosa por el

Metano en porcentaje

Mtodo de Ionizacin de la

Oxgeno en ppm
Anlisis para determinar
Oxgeno en porcentaje
Anlisis para determinar
Nitrgeno en Argn en ppm

(0,1-19,9)%

(0,1-20,2)%

(0,1-20,3)%

llama

A continuacin se presenta una breve descripcin de los mtodos listados en la Tabla 3.2:
Mtodo electroqumico para determinar concentraciones de oxgeno: anlisis basado en la
reaccin electroqumica que experimenta el gas de muestra. Cuando se hace pasar una
muestra gaseosa a travs de una celda, constituida por un ctodo y un nodo, la presencia
de oxgeno genera una reaccin electroqumica debido a que se producen cuatro
electrones en el nodo y luego se reducen en el ctodo. La reaccin puede ser descrita de
la siguiente manera:
4e- + O2+ 2H2O 4OH- (semireaccin catdica)
Pb + 2OH- PbO+ H2O +2e- (semireaccin andica)
La reaccin completa viene dada por:

41

O2+ 2 Pb2PbO
Durante este proceso se genera una corriente elctrica que es directamente proporcional a
la cantidad de oxgeno presente en la muestra. En ausencia de oxgeno no hay reaccin
electroqumica y no se generar ninguna corriente.
Mtodo paramagntico para determinar concentraciones de oxgeno: anlisis donde se
mide la susceptibilidad paramagntica de una muestra gaseosa que contiene oxgeno por
medio de una celda magneto-dinmica. Basndose en que la susceptibilidad
paramagntica del oxgeno es mayor que la de la mayora de los gases comunes, entonces
las molculas de oxgeno son ms afectadas por la accin de un campo magntico que la
de otros gases, los cuales en su mayora son diamagnticas (repelidas por un campo
magntico). De acuerdo al mtodo de Faraday para la determinacin de la susceptibilidad
magntica de un gas, se mide la fuerza desarrollada por un campo magntico sobre un
cuerpo de prueba diamagntico suspendido en una muestra de gas.
Mtodo espectrofotomtrico para determinar

concentraciones de nitrgeno en argn: en este anlisis la muestra de argn pasa a travs


de un tubo el cual posee dos electrodos metlicos, los cuales estn conectados a una
fuente de alto voltaje que proporciona una descarga elctrica suficiente para ionizar el
gas. Si hay nitrgeno presente es adicionado al espectro de luz generado por la ionizacin.
La luz es pticamente filtrada y solamente la lnea de emisin del espectro del nitrgeno
es visible, luego es detectada por un foto-multiplicador y su intensidad es proporcional a
la cantidad de nitrgeno presente en la muestra de argn.
Mtodo espectrofotomtrico no dispersivo para

determinar la concentracin de monxido de carbono:

anlisis

basado

en

la

absorcin de la radiacin infrarroja en bandas de longitud de ondas especficas para el


monxido de carbono. Durante el anlisis una porcin de la radiacin infrarroja es
absorbida por el componente de inters (CO) en la muestra siendo esta cantidad de
radiacin absorbida, proporcional a la concentracin del componente. El cambio de
energa producido por la absorcin de la radiacin se convierte en un cambio de
capacitancia, dicho cambio de capacitancia es directamente proporcional a la
concentracin del componente de inters.
Cromatografa por el mtodo de ionizacin de llama: basndose en la tcnica de
cromatografa gaseosa, se utiliza un detector por ionizacin a la llama, el cual responde a

42

compuestos que producen iones cuando son quemados en una llama Hidrgeno-Aire. Esto
incluye todos los compuestos orgnicos y los gases de combustin (CO y CO2)

3.4.Materiales de Anlisis Utilizados


A fin de evaluar los parmetros estadsticos que representan el comportamiento de un mtodo
de anlisis, durante la validacin de los mismos, se emplearon Materiales de Referencia
Certificados, todos ellos emitidos por diferentes laboratorios de Praxair y algunos inclusive por el
propio Laboratorio de Gases Especiales, sucursal Cagua. A partir de los anlisis de concentracin
especificados en la seccin anterior, se realiz la seleccin de los MRC, dependiendo de los
componentes de inters, del rango de concentraciones que se deba abarcar durante los anlisis y
de la disponibilidad de los mismos en el laboratorio. Los MRC utilizados en el Laboratorio de
Gases Especiales, se clasifican en dos tipos: inorgnicos y orgnicos. Los MRC inorgnicos
tienen en su composicin una variedad de gases que no necesariamente incluyen al carbono, por
ejemplo: O2, N2, Ar, He, H2, etc. Por su parte, los MRC orgnicos estn compuestos
principalmente por hidrocarburos y gases de combustin, por ejemplo: CO, CO2, CH4, C2H6,
C2H2, etc. Bajo esta clasificacin, los MRC en el Laboratorio de Gases Especiales se identifican
con un cdigo interno de nmeros y letras., la primera letra indica el tipo de compuestos del
MRC (I inorgnicos u O orgnicos), lo siguiente es un correlativo de tres nmeros asignados
a cada material slo con el propsito de identificacin.
Por otra parte, en el certificado de anlisis del MRC, se especifica adems de la composicin
del material, la incertidumbre expandida (Uref) de dicha composicin para un factor de cobertura
k igual a 2. De igual forma, en el certificado se expresa el grado de trazabilidad de dicho material
con respecto a otros MRC utilizados por el laboratorio a fin de comparar sus propiedades con una
referencia adecuada. Otra informacin reflejada en el certificado incluye: los equipos utilizados
en el anlisis de la concentracin del material, el mtodo de anlisis, la fecha de caducidad del
mismo, la presin mnima estable, etc. En el apndice C se muestra un ejemplo de un certificado
de un MRC.
En la Tabla 3.3 se presenta una lista con los MRC inorgnicos utilizados durante las
validaciones, con las concentraciones de sus componentes, sus incertidumbres y el fabricante del
material. La misma informacin se reporta en la Tabla 3.4, pero para los MRC orgnicos
utilizados.

43

Tabla 3.3. Materiales de Referencia Certificados inorgnicos utilizados en las validaciones de los
mtodos de anlisis.
MRC (cdigo

Componentes

Concentracin

Uref

Fabricante

O2

21,18%

0,28%

Interno

N2

Balance

---

O2

80,00ppm

1,85ppm

N2

Balance

---

O2

1,00 ppm

0,02ppm

Ar

Balance

---

O2

59,0 ppm

1,4 ppm

N2

Balance

---

O2

10,30%

0,12%

N2

10,10%

He

Balance

---

O2

7,30ppm

0,17 ppm

N2

18,45 ppm

0,43ppm

Ar

Balance

---

O2

27,00 ppm

0,62 ppm

N2

Balance

---

O2

0,5%

0,1%

N2

Balance

---

N2

39,2 ppm

0,9 ppm

Ar

Balance

---

Praxair)
I-002

I-004

I-013

I-022

I-030

I-033

I-059

I-061

I-064

Praxair
Internacional
Interno

Interno

Praxair
Internacional

Interno

Interno

Interno

Interno

44

Tabla 3.3. Materiales de Referencia Certificados inorgnicos utilizados en las validaciones de los
mtodos de anlisis. Cont.
MRC (cdigo

Componentes

Concentracin

Uref

Fabricante

O2

3,06%

0,35%

Interno

N2

3,00%

He

Balance

---

O2

80,00 ppm

1,85 ppm

N2

156 ppm

11 ppm

Ar

Balance

---

O2

7,91 ppm

N2

17,00 ppm

1,36 ppm

Ar

Balance

---

O2

3,07%

0,40%

N2

3,02%

He

Balance

---

O2

4,78%

0,55%

N2

Balance

---

O2

99,8%

1,2%

Praxair)
I-075

I-082

I-084

I-089

I-094

2324473Y

Praxair Mxico

Praxair Mxico

Interno

Interno

Interno

45

Tabla 3.4. Materiales de Referencia Certificados orgnicos utilizados en las validaciones de los
mtodos de anlisis.
MRC (cdigo

Componentes

Concentracin

Uref

Fabricante

CO

4,80 ppm

0,11 ppm

Praxair Mxico

CO2

5,6 ppm

CH4

5,2 ppm

N2

Balance

---

CO

19,900%

0,398 %

CO2

20,200%

0,404%

CH4

20,300%

0,406%

N2

Balance

---

CO

1001 ppm

20 ppm

CO2

1002 ppm

20 ppm

CH4

1013 ppm

20 ppm

N2

Balance

---

CO

19,100 ppm

0,398 ppm

CO2

19,7 ppm

CH4

20 ppm

N2

Balance

Praxair)
O-132

O-134

O-135

O-136

---

Praxair Mxico

Praxair Mxico

Praxair Mxico

46

Tabla 3.4. Materiales de Referencia Certificados orgnicos utilizados en las validaciones de los
mtodos de anlisis. Cont.
MRC (cdigo

Componentes

Concentracin

Uref

Fabricante

CO

1,010%

0,040%

Praxair Mxico

CO2

0,987%

0,0197%

CH4

1,010%

0,0202%

N2

Balance

---

CO

10,0%

0,2%

CO2

10,100%

0,202%

CH4

10,200%

0,204%

N2

Balance

---

CO

243,0 ppm

5,6 ppm

Aire

Balance

---

Praxair)
O-137

O-138

O-259

Praxair Mxico

Interno

3.5 Equipos de Anlisis


Durante el proceso de validacin, los anlisis de los MRC se realizaron utilizando diferentes
equipos de medicin especificos, para determinar la concentracin de un componente gaseoso en
particular. A continuacin, se hace referencia a las caracterisiticas de cada uno de los equipos
utilizados. La informacin reportada se obtuvo a partir de los manuales de operacin de cada
equipo.

3.5.1 Teledyne 306 WA


Este equipo est diseado para detectar concentraciones en trazas de oxgeno. Utiliza como
principio de operacin el mtodo electroqumico. Los componentes del analizador incluyen: una
vlvula de estrangulamiento, un medidor de flujo para el control de flujo de la muestra, un
humidificador (humidifier) para condicionar la muestra, la celda de medicin que est asociada a

47

un circuito y un calibrador para ajustar la sensibilidad del analizador para un rango de medicin
deseado. Este equipo cuenta con tres rangos de medicin: 0-1 ppm, 0-10 ppm y 0-100 ppm. Tiene
una exactitud de 2% de la escala completa, una resolucin de 0,1 ppm y un error mximo
permisible (EMP) de 0,003 ppm para el rango de 0-1 ppm y del 2% de la lectura para el rango de
1-200 ppm. En la Figura 3.2 se muestra una fotografa de la parte interna y externa del
analizador.
Bsicamente, la medicin dentro del equipo se realiza de la siguiente manera: la muestra se
introduce directamente a travs de las pantallas del ctodo, inicindose una reaccin
electroqumica. Cuatro electrones son generados por la oxidacin en el nodo, y luego son usados
para reducir el oxgeno en el ctodo. El flujo de electrones entre el nodo y el ctodo crea una
corriente elctrica que es directamente proporcional a la concentracin de oxgeno en la muestra.

Figura 3.2. Analizador de trazas de oxgeno Teledyne 306WA

3.5.2 Servomex 244A


Este analizador est diseado para determinar la pureza del gas oxgeno en el rango de 0 a
100% de concentracin de oxgeno. El equipo es utilizado para comparar la pureza desconocida
de un gas con la de un gas estndar cuya pureza ha sido exactamente determinada por un mtodo

48

absoluto de anlisis. El analizador utiliza como principio de operacin la susceptibilidad


paramagntica de una muestra de gas por medio de una celda de medicin tipo magnetodinmica. Para el oxgeno esta susceptibilidad paramagntica es mucho mayor que la de
cualquier otro gas, lo que significa que las molculas de oxgeno son ms afectadas por la accin
de un campo magntico que las molculas de los otros gases.
Los analizadores de oxgeno magneto-dinmicos, se basan el mtodo de Faraday para
determinar la susceptibilidad magntica de un gas, midiendo la fuerza generada por un campo
magntico no uniforme sobre un cuerpo de prueba diamagntico suspendido en el gas de muestra.
Si la muestra contiene oxgeno, estas molculas sern atradas por la parte ms fuerte del campo
magntico lo que causa un aumento del campo magntico alrededor del cuerpo de prueba. Con lo
cual se cambia la fuerza que acta sobre el cuerpo y ocurre un desplazamiento del haz de luz que
atraviesa las fotoceldas, lo que resulta en una diferencia en la seal detectada por el amplificador.
La salida del amplificador es una corriente proporcional a la cantidad de oxgeno presente en la
muestra.
El analizador cuenta con una resolucin de 0,01% de oxgeno y un EMP de 1% del span para
el rango de 0-100% de oxgeno. En la Figura 3.3 se muestra una fotografa de este analizador.

Figura 3.3. Analizador de pureza de oxgeno Sermovex 244A.

49

3.5.3 Horiba VIA-510


Este analizador se encuentra diseado para analizar gases industriales. Mide exactamente las
concentraciones en trazas del monxido de carbono, utilizando el mtodo de anlisis infrarrojo no
dispersivo. Basado en este principio, el analizador utiliza la absorcin en el infrarrojo del
componente a ser medido a una longitud de onda especfica, y continuamente monitorea los
cambios en la concentracin de ese componente.
Cuando la muestra gaseosa absorbe los rayos infrarrojos que pasan a travs de la celda de
muestra, se genera una diferencia en la cantidad de luz de los rayos que entraran en una celda de
deteccin. Luego, la membrana instalada en esta celda vibrar, generando una salida elctrica con
cambios en la absorcin en el infrarrojo del componente a ser medido a la longitud de onda
correspondiente. Dependiendo de estos cambios de absorcin se determinar la concentracin del
componente a ser medido. Si la muestra gaseosa contiene un componente cuya longitud de onda
se sobrepone con aquella del componente que se quiere detectar, los rayos infrarrojos en las
longitudes de ondas solapados son previamente eliminados por medio de la instalacin de un
filtro. Como resultado el analizador no se ver afectado por dichos rayos.
Este equipo puede realizar mediciones de las concentraciones de monxido de carbono en los
rangos de 0-1000 ppm. Posee una resolucin de 0,1 ppm y un EMP de 1% de la lectura. En la
Figura 3.4 se muestra una imagen de este analizador.

Figura 3.4. Analizador de trazas de monxido de carbono Horiba VIA-510

50

3.5.4. CLD-2
El equipo CDL-2 mide trazas de nitrgeno en argn. Utiliza como principio de medicin el
mtodo espectrofotomtrico. La medicin se realiza cuando se hace pasar una muestra de argn a
travs de un tubo de vidrio analtico, el cual tiene sujetados unos electrodos de metal. Los
mismos estn conectados a un transformador de alto voltaje que provee una descarga elctrica
para ionizar el gas en el tubo. Si el nitrgeno est presente, el mismo se aade al espectro de luz
generado. La luz es filtrada pticamente y detectada por un fotomultiplicador. La intensidad de la
luz es proporcional a la concentracin de nitrgeno presente en la muestra gaseosa
El analizador realiza mediciones de nitrgeno en argn en el rango de concentraciones de 0-20
ppm y 0-200 ppm, tiene una resolucin de 0,01 ppm y un EMP de 0,25 ppm para el rango de 020 ppm y 2,5 ppm para el rango de 0-200 ppm. En la figura 3.5 se muestra una imagen de este
analizador.

Figura 3.5. Analizador de trazas de nitrgeno en argn CLD-2.

3.5.5 Cromatgrafo de Gases Agilent GC6890


Tal y como se describi en la seccin 2.4, la cromatografa es una tcnica ampliamente
utilizada en los anlisis cuantitativos y cualitativos de diferentes gases. Debido al amplio rango
de compuestos que se pueden identificar con un cromatgrafo, en las validaciones de los mtodos

51

de anlisis se emple el cromatgrafo de gases GC6890, para determinar concentraciones en


trazas y en porcentaje tanto de mezclas de gases como de algunos gases puros. Este cromatgrafo
tiene la particularidad de poseer dos tipos de detectores especficos para la identificacin de una
clase de compuestos, as como tambin dos tipos de columnas destinadas a tal fin. A continuacin
se presenta una breve descripcin de los dos tipos de detectores utilizados por el equipo GC6890.

3.5.5.1. Detector Ionizacin de llama (FID)


La finalidad de este detector es identificar los compuestos orgnicos de una muestra de gases,
para ello utiliza el principio de ionizacin de llama. El detector de ionizacin de llama lleva la
muestra y el gas portador desde la columna hasta la llama de hidrgeno-aire. La llama de
hidrgeno-aire por si sola produce unos pocos iones, pero cuando se quema un compuesto
orgnico, existe un incremento en los iones producidos. Un voltaje polarizador atrapa estos iones
en un colector localizado muy cerca de la llama. La corriente producida es proporcional a la
cantidad de muestra quemada. Esta corriente es registrada por un electrmetro, se convierte a la
forma digital y se enva a un dispositivo de salida.
El detector FID de este cromatgrafo permite identificar hidrocarburos desde C1 hasta C4,
tambin los productos de combustin monxido de carbono (CO) y dixido de carbono (CO2),
gracias a la separacin que se logra utilizando un modelo de columna denominada HP PLOT Q.

3.5.5.2. Detector de Conductividad Trmica (TCD)


El detector de conductividad trmica (TCD) compara la conductividad trmica de dos flujos de
gases: el gas portador puro (tambin llamado gas de referencia) y el gas portador ms la muestra.
Este detector contiene un filamento que es calentado elctricamente para que este ms caliente
que el cuerpo del detector. La temperatura del filamento se mantiene constante mientras
corrientes alternas del gas portador y de la muestra pasan a travs de l. Cuando la muestra es
aadida, la energa necesaria para mantener constante la temperatura del filamento cambia. Las
dos corrientes de gas se pasan a travs del filamento cinco veces por segundo, la diferencia de
energa se mide y se registra. Cuando se utiliza helio o hidrgeno como gas portador, la muestra
hace que la conductividad trmica disminuya. Si se utiliza nitrgeno, la conductividad trmica

52

usualmente aumenta debido a que la mayora de los componentes son ms conductores que el
nitrgeno.
Con el uso de este detector y una columna de almina (Al2O3) se pudo determinar las
concentraciones en trazas y porcentaje de oxgeno. Se limit su uso para la identificacin de
nitrgeno en argn debido a las similitudes de las conductividades trmicas de ambos gases lo
que ocasiona solapamiento de los picos en el cromatograma.
Por medio de los cromatogramas, se reportaron los resultados obtenidos en los anlisis con el
GC6890. A travs de stos, se representaron en forma grfica los picos de reas de cada
compuesto en funcin de los tiempos de retencin caractersticos de cada uno de ellos. En el
apndice C se muestra un cromatograma tpico reportado en los anlisis para las validaciones.

3.6 Medicin de la Concentracin del Gas


El valor de la concentracin de los componentes del MRC a analizar, se obtuvieron
directamente en el display (pantalla) de cada equipo, ya que todos los equipos utilizados son
digitales. Sin embargo, para el caso de la cromatografa, el clculo de la concentracin de los
gases se realiz de acuerdo a lo siguiente: en primer lugar, se analizaba un MRC cuyas
composiciones fueran cercanas o mximo hasta 10 veces los valores de las del MRC a analizar,
se registraban las reas de los picos de los componentes del MRC para obtener una referencia.
Posteriormente, se analizaba en el cromatgrafo el MRC de inters e igualmente se registraban
las reas. Finalmente, la concentracin del MRC de inters se determinaba por comparacin con
el rea y la concentracin de la referencia, de acuerdo a la siguiente ecuacin:

Donde CMRC y AMRC son respectivamente la concentracin y el rea del MRC a analizar y CREF
y AREF constituyen la concentracin y rea de referencia a comparar. La unidades del rea de los
picos reportados en los cromatogramas vienen dadas por [pA*s], las unidades de la concentracin
de los componentes analizar, dependern de las unidades de la concentracin del MRC a
comparar, generalmente pueden venir expresadas en [ppm] o [%].

53

3.7 Reporte y Documentacin de Resultados


Con la finalidad de llevar un registro de los anlisis de gases realizados, el Laboratorio de
Gases Especiales, cuenta con un formato de anlisis para cada tipo de gas puro o mezcla, en el
cual se reportan los resultados de concentraciones de impurezas del gas puro o de los
componentes minoritarios de la muestra, las condiciones de temperatura y humedad en que se
realizaron los anlisis, los equipos utilizados, el grado de pureza del gas obtenido, el analista, etc.
Estos formatos van acompaados de un cromatograma de la mezcla gaseosa para los casos en los
que se utilice la cromatografa como mtodo de anlisis. Ahora bien, como los anlisis de
concentraciones de los MRC durante el proceso de validacin difieren en ciertos aspectos de los
anlisis cotidianos del laboratorio, fue necesario la adopcin de un nuevo formato de anlisis
especfico para este fin, en el cual se especificaran los MRC utilizados, alguna informacin
relevante del certificado de los mismos, el mtodo de anlisis, y la informacin sobre las
condiciones en que se lleva a cabo el anlisis. En el apndice C se muestra un modelo de dicho
formato.

3.8 Anlisis Estadstico de los Resultados


Una vez obtenido los resultados de los anlisis de concentraciones de los MRC, se procedi a
realizar un anlisis estadstico de los mismos con el fin de evaluar algunos de los parmetros
caractersticos del mtodo. Dependiendo del parmetro a evaluar, se sigui una determinada
metodologa y se emplearon las herramientas estadsticas correspondientes. A continuacin se
describen cada una de ellas para cada parmetro.

3.8.1. Linealidad
Para evaluar la linealidad del mtodo, para cada anlisis de concentracin de los MRC, se
realizaron mediciones durante tres das consecutivos en condiciones de repetibilidad (mismo
analista, instrumento, mismo da), midindose diez veces la concentracin del componente de
inters del MRC. Posteriormente, se graficaron los valores de concentracin obtenidos por el
mtodo en funcin de los valores de concentracin reportados en el certificado del MRC
(concentracin de referencia). Se realiz una regresin lineal a la curva obtenida, y se evalu la
linealidad del mtodo al determinar el valor del coeficiente de correlacin de Pearson y del

54

coeficiente de determinacin para la recta obtenida. Se verific la condicin de linealidad, para


valores del coeficiente de determinacin mayores a 0,995.

3.8.2. Repetibilidad
La repetibilidad del mtodo se evalu realizando los anlisis de los MRC con el mismo
instrumento, mismas condiciones de operacin, mismo analista, durante tres das consecutivos,
determinando la desviacin estndar y la desviacin estndar relativa de los resultados para 10
mediciones de las concentraciones en cada da de anlisis. La repetibilidad de los resultados se
verific para valores de desviacin estndar relativa menores al 2%.

3.8.3. Precisin Intermedia


Para evaluar la precisin intermedia de los mtodos de anlisis, se variaron bsicamente tres
factores en los anlisis: el analista, el instrumento y los das. Se aplic un diseo anidado de
anlisis descrito en la Figura 3.6 (Maroto, 2002):

Figura 3.6. Esquema de los diseos anidados aplicados durante el anlisis de precisin
intermedia. (Maroto, 2002)

55

Bsicamente, cada analista aplic el mtodo de anlisis con un determinado equipo, durante
tres das consecutivos, realizando 10 mediciones de los MRC cada da. Con los resultados
obtenidos por cada mtodo de medicin, se aplic una prueba de Cochran para evaluar la
homogeneidad de varianzas de los resultados para posteriormente, realizar un anlisis de
varianzas (ANOVA) para el diseo anidado de la Figura 3.6, con la finalidad de determinar los
cuadrados medios (MS, por sus siglas en ingls) para cada factor del diseo anidado y as
concluir sobre las diferencias significativas en los resultados obtenidos por el cambio de alguno
de los factores. En la Tabla 3.5 se muestra el ANOVA correspondiente.

Tabla 3.5. Anlisis de varianza para el diseo anidado aplicado durante el anlisis de precisin
intermedia. (Maroto, 2002)
Fuente
Analista

Cuadrados medios

Grados de libertad
m-1

Instrumento

Da

Replicado

De la Tabla 3.5, m corresponde al nmero de analista (en este caso 2), q los instrumentos de
anlisis (tpicamente 2), p los das de medicin y n los replicados de medicin del MRC (10
mediciones).
A partir del anlisis de varianza de la Tabla 3.5, se pueden determinar las expresiones de las
varianzas para cada factor del diseo anidado, para luego obtenerse la varianza de la precisin
intermedia de los mtodos de anlisis (sI(D+In)2). En la Tabla 3.6, se muestran las expresiones de
las varianzas encontradas.

56

Tabla 3.6. Clculo de varianzas obtenidas a partir del ANOVA de los resultados obtenidos para el
diseo anidado (Maroto, 2002).
Varianza

Expresin

Repetibilidad, sr2

MSE

Entre das, sD2


Entre instrumentos, sIn2
Entre analistas, sA2
Intermedia de das diferentes, sI(D)2

sr2+ sD2

Intermedia de das e instrumentos diferentes,

sr2+ sD2+ sIn2

sI(D+In)2
Intermedia de das, instrumentos y analistas

sr2+ sD2+ sIn2+ sA2

diferentes, sI(D+In+A)2

3.9. Incertidumbre
La incertidumbre de los resultados reportados en cada mtodo de anlisis se evalu en dos
etapas. En la primera, se identificaron cualitativamente, los factores de mayor influencia durante
la preparacin y anlisis de las muestras. Esto se logr por medio de entrevistas al personal
operativo del Departamento de Gases Especiales y al analista del Laboratorio de Gases
Especiales, sobre anlisis de los componentes gaseosos. Para la segunda etapa, se realiz un
anlisis cuantitativo de los factores antes identificados y se incorporaron otros nuevos
aprovechando la informacin obtenida de los resultados de la validacin, siguiendo la
metodologa descrita por la aproximacin para el clculo de incertidumbre por medio de la
informacin obtenida en la validacin de los mtodos de anlisis (Maroto, 2002). Finalmente,
todos los factores identificados de mayor influencia en la determinacin de las concentraciones
de los gases, se plasmaron en un diagrama de causa efecto.

CAPITULO 4
RESULTADOS Y DISCUSIN
Los resultados obtenidos a partir de los anlisis experimentales realizados a los MRC,
siguiendo la metodologa explicada anteriormente, se exponen en el presente captulo. Por medio
de estos resultados, se describen en las siguientes secciones, la evaluacin de algunos de los
parmetros caractersticos del procedimiento de validacin de los mtodos de anlisis de
concentraciones de gases.
A continuacin se presentan los resultados y anlisis de los siguientes parmetros de
evaluacin: linealidad, precisin, exactitud e incertidumbre.

4.1. Linealidad.
Normalmente, la validacin del modelo lineal, es llevada a cabo por medio de la inspeccin del
coeficiente de determinacin (r2), obtenido a partir del coeficiente de correlacin. Para cada uno
de los anlisis mencionados en la seccin 3.3, se determin el coeficiente de correlacin por
medio del uso de la correlacin de Pearson, con la finalidad de comparar la relacin entre el valor
de referencia de la concentracin del MRC, reportado en el certificado, y la respuesta del
instrumento. El clculo del coeficiente de correlacin se realiz utilizando la ecuacin 2.11, a
partir de los valores de referencia de las concentraciones de los MRC, tomados como la variable
independiente xi y la respuesta del instrumento de medicin, tomados como la variable
dependiente yi. En la Tabla 4.1 se muestran los valores de las variables involucradas para el
clculo del coeficiente, en este caso para el anlisis de concentracin de monxido de carbono en
ppm. Los valores reportados como la respuesta del instrumento, se obtuvieron como promedios
de las mediciones consecutivas durante 3 das, cada valor medido 10 veces, esto para cada
mtodo de anlisis, y con la finalidad de asegurar la repetibilidad de dichos valores.

58

Tabla 4.1. Clculo del coeficiente de correlacin y determinacin para el anlisis de


concentracin de monxido de carbono en ppm.
Xi

yi

4,80

4,92

-438,34

-438,37

192141,96

192165,33

192153,65

19,90

19,71

-423,24

-423,57

179132,10

179414,37

179273,18

243,00

242,87

-200,14

-200,42

40056,02

40168,18

40112,06

947,00

947,90

503,86

504,61

253874,90

254634,62

254254,47

1001,0

1001,03

557,86

557,75

311207,78

311081,34

311144,56

Sumatoria

2215,70

2216,43

976412,75

977463,84

976937,91

Promedio

443,14

443,29

1,00

r2

1,00

Para el caso de la Tabla 4.1, se puede observar que el coeficiente de correlacin de Pearson
tiene un valor igual a 1,00, por lo tanto el valor del coeficiente de determinacin (r2) tambin es
igual a 1,00. Esto refleja una alta relacin lineal entre las variables, la cual usualmente se
considera vlida para valores de r2 mayores a 0,99. Sin embargo, es importante acotar, que
valores cercanos a cero del coeficiente de determinacin, no necesariamente indican que no
exista una relacin entre las variables involucradas, sino, que esta relacin no necesariamente es
lineal. De igual forma, an para valores de r2 muy cercanos a 1, puede existir una alta desviacin
de los puntos experimentales con respecto a la recta de calibracin, es por ello que el uso de este
coeficiente como parmetro de evaluacin de linealidad debera ser complementado con la
aplicacin de un anlisis de grficos de residuos, este anlisis se explica en la siguiente seccin.
En Tabla 4.2 se muestra un resumen de los valores del coeficiente de correlacin de Pearson y
del coeficiente de determinacin, para cada uno de los mtodos de anlisis evaluados.

59

Tabla 4.2. Valores de los coeficientes de correlacin y determinacin obtenidos durante el estudio
de linealidad de los mtodos de anlisis
Mtodo de Anlisis
Anlisis de O2 en ppm
Anlisis de O2 en
porcentaje
Anlisis de N2 en Ar en
ppm
Anlisis de CO en ppm
Anlisis de CO en
porcentaje
Anlisis de CO2 en
porcentaje
Anlisis de CH4 en
porcentaje

Coeficiente de

Coeficiente de

correlacin

Determinacin (r2)

0,997

0,995

(1-80)ppm

1,000

1,000

(0,5-99,8)%

0,999

0,998

(17-156)ppm

1,000

1,000

(4,8-1001,0)ppm

1,000

1,000

(0,1-19,9)%

1,000

1,000

(0,1-20,2)%

1,000

1,000

(0,1-20,3)%

Rango de trabajo

Como se puede observar en los resultados reportados en la Tabla 4.2, todos los valores de r2 son
muy cercanos a 1, por lo que, de acuerdo a este parmetro, se puede predecir un buen ajuste lineal
de todos los mtodos de anlisis. Para el caso de la especificacin de este parmetro en la
validacin de los mtodos de anlisis, el valor de r2 mnimo que asegura la linealidad del mtodo
debera ser mayor o igual 0,995, por lo tanto, de acuerdo a los resultados mostrados en la Tabla
4.2, se pudo comprobar el cumplimiento de la especificacin para todos los mtodos de anlisis
listados en dicha tabla.
Adems de determinar la linealidad del mtodo, durante el estudio de linealidad, se estableci
el rango de trabajo en el cual se realizaron las mediciones y por ende donde se determin la
relacin lineal entre la respuesta del instrumento y la concentracin del analito. La especificacin
de este rango, asegura la correcta aplicacin de los mtodos a lo largo de los valores de
concentracin reportados para cada anlisis. La extensin de este rango depender de lo
reportado en el anlisis completo de linealidad donde se incluye los graficos de residuos
(EURACHEM Guide, 1988).

60

El anlisis de grficos de residuos presentado a continuacin, forma parte de un complemento


al anlisis de correlacin para evaluar la linealidad de los mtodos. Es importante mencionar, que
para efectos de las especificaciones de este parmetro en el proceso de validacin, el
cumplimiento de los requerimientos mnimos del coeficiente de determinacin, es condicin
suficiente para evaluar la linealidad.

4.1.1. Grficos Residuales


Tal y como se explic en el captulo 2, la recta de calibracin viene dada por la aproximacin
lineal a la curva obtenida a partir de los datos de las concentraciones de los MRC y la respuesta
de los instrumentos. Aplicando un anlisis de mnimos cuadrados, pueden obtenerse los valores
del intercepto y la pendiente de la recta, con estos datos pueden calcularse los valores residuales
(ei) de acuerdo a la ecuacin 2.8, para cada nivel de concentracin utilizado. Un grfico de los
valores residuales en funcin de las concentraciones de los MRC junto el coeficiente de
determinacin, complementan el anlisis de linealidad de la recta de calibracin analtica del
mtodo de acuerdo a lo explicado en la seccin anterior. En la Tabla 4.3 se muestran los datos
utilizados para el clculo de los valores residuales para el mtodo de anlisis de concentracin de
monxido de carbono en ppm. En el apndice B se presenta en detalle el clculo de los valores
residuales.

Tabla 4.3. Determinacin de los valores residuales (ei) para la recta de calibracin del anlisis de
monxido de carbono en ppm.
Xi

yi

ei

4,80

4,92

-438,34

192141,96

0,21

19,90

19,71

-423,24

179132,10

-0,10

243,00

242,87

-200,14

40056,02

-0,16

947,00

947,90

503,86

253874,90

0,52

1001,00

1001,03

557,86

311207,78

-0,38

Sumatoria

2215,70

2216,43

Promedio

443,14

443,29

61

Bajo el mismo formato de clculo mostrado en la Tabla 4.3, se determinaron los valores
residuales para los restantes mtodos de anlisis de concentracin de gases. En las siguientes
figuras se muestran los grficos de valores residuales para algunos de los mtodos de anlisis de
concentracin de gases.
La Figura 4.1 muestra el grfico de los residuos para cada valor de concentracin del MRC.

Figura 4.1. Grfico de residuos en funcin de la concentracin del MRC para el anlisis de
concentracin de monxido de carbono en ppm.
La linealidad de la recta de calibracin analtica puede asegurse, cuando el grfico de los
valores residuales cumple con las siguientes condiciones: la cantidad de valores residuales
positivos y negativos son aproximadamente iguales, deben estar distribuidos aleatoriamente,
todos deben tener aproximadamente el mismo valor absoluto y no deben mostrar tendencias.
(Boqu et al., 2002). El grfico de la Figura 4.1 muestra que los valores residuales no poseen el
mismo valor absoluto, por el contrario, tienden a aumentar a medida que lo hace la
concentracin, esto indica que la incertidumbre de cada valor experimental tambin aumenta con
la concentracin y que la aplicacin el mtodo de mnimos cuadrados no necesariamente es la
ms adecuada para este tipo de casos. (Boqu et al., 2002). A pesar de lo mostrado en la Tabla
4.2, donde el r2 para este mtodo de anlisis es igual a 1,00, de acuerdo a lo explicado
anteriormente, el grfico de los residuos del mtodo incumple en una de las condiciones de
linealidad, por lo que no se puede asegurar que el modelo lineal se ajusta perfectamente en la
calibracin analtica del mtodo.

62

En la Figura 4.2, se muestra el grfico de residuos para el mtodo de anlisis de concentracin


de monxido de carbono en porcentaje. De acuerdo a lo mostrado en dicha figura, en el grfico se
observa en uno de los puntos un valor de residuo ms alto que del resto, esto puede denotar la
presencia de un punto atpico en la data. La influencia de este valor en el ajuste lineal, puede
verificarse por medio un anlisis particular de puntos atpicos.

Figura 4.2. Grfico de residuos en funcin de la concentracin del MRC para el anlisis de
concentracin de monxido de carbono en porcentaje.

En el apndice B se muestran los grficos de residuos para los restantes mtodos de anlisis
evaluados, de forma general, en dichos grficos los valores residuales muestran el cumplimiento
de las condiciones de linealidad.

4.2. Precisin
La precisin de los mtodos de anlisis se evalu a travs de dos tipos de precisin:
repetibilidad y precisin intermedia, en ambas se tom la desviacin estndar como parmetro
estadstico de anlisis.

4.2.1. Repetibilidad

63

En las condiciones de repetibilidad bajo las cuales se llevaron a cabo las mediciones para
evaluar este parmetro, se mantuvieron constantes los siguientes factores: analista, equipo,
procedimiento de medicin, laboratorio. Las mediciones se realizaron durante tres das
consecutivos y en cada mtodo de anlisis y por cada nivel de concentracin se determin la
desviacin estndar para 10 mediciones en cada nivel, para as evaluar la dispersin de los datos.
En la Tabla 4.4 se muestran los valores de desviacin estndar por cada nivel de concentracin
para el anlisis de nitrgeno en argn en ppm en condiciones de repetibilidad.

Tabla 4.4. Anlisis de Repetibilidad para el mtodo de anlisis de nitrgeno en argn en ppm.
Concentracin del MRC

Respuesta del

(ppm)

Instrumento

Desviacin estndar (s)

Desviacin
Estndar Relativa

promedio(ppm)
17,0

16,3

0,3

2,0%

18,5

24,8

0,1

0,5%

39,2

39,6

0,5

1,4%

156,0

155,1

2,8

1,8%

De la Tabla 4.4 se puede observar que los valores de desviacin estndar para cada nivel de
concentracin son muy bajos, pero para determinar que tan insignificante es esta desviacin, se
puede observar el valor la desviacin estndar relativa, medido como el porcentaje de la relacin
entre la desviacin estndar y el promedio de las respuestas del instrumento, el cual evidencia
que la repetibilidad de los resultados est asegurada ya que se obtuvieron para todos los niveles
de concentraciones, porcentajes menores al 2%, el cual constituye uno de los criterios de la
validacin para evaluar el parmetro de repetibilidad. En el apndice B se muestran los anlisis
de repetibilidad para el resto de los mtodos de anlisis. Para todos ellos, se cumple igualmente la
condicin de repetibilidad al obtenerse porcentajes de desviacin estndar relativa menores al
2%.
Como se mencion anteriormente, estos resultados estn reportados en condiciones de
repetibilidad, por lo que es importante preguntarse en que medida afectan las variaciones de uno
o ms de los factores en los que se obtuvieron estos resultados en la precisin de los mismos.
Para ello se presenta a continuacin el anlisis de precisin intermedia.

64

4.2.2. Precisin Intermedia


La precisin intermedia de los mtodos de anlisis se evalu variando los siguientes factores:
los das de medicin, los analistas, y en algunos casos los equipos de medicin. La variacin de
este ltimo factor, es la que presenta mayor dificultad, debido a que generalmente en los
laboratorios, por razones de costos se dispone de un slo instrumento destinado a la medicin de
una magnitud especfica. Para el caso del Laboratorio de Gases Especiales, en los nicos anlisis
en los que se pudo variar el equipo de medicin, fueron en los mtodos de anlisis de oxgeno
tanto en porcentaje como en ppm, en los cuales el equipo cotidiano de anlisis se sustituy por el
cromatgrafo de gases GC6890 utilizando el detector de conductividad trmica (TCD).
La determinacin de la precisin intermedia de los mtodos de anlisis de concentracin de
gases, se obtuvo por medio de anlisis de varianza. A continuacin se presentan los resultados de
dichos anlisis.

4.2.2.1 Anlisis de Varianza


Los anlisis de varianza ANOVA aplicados en el estudio de precisin intermedia, tienen como
finalidad, la determinacin de las varianzas asociadas al cambio de los factores en las condiciones
de repetibilidad y por ende, el clculo de la desviacin estndar debida a la precisin intermedia
del mtodo, la cual como se explicar posteriormente, es una componente esencial para el clculo
de la incertidumbre final del mtodo de medicin.
Para realizar un ANOVA es necesario verificar las siguientes hiptesis que deben cumplir las
muestras: cada conjunto de datos debe ser independiente del resto, los resultados obtenidos para
cada conjunto deben seguir una distribucin normal y finalmente, las varianzas de cada conjunto
de datos no deben diferir de forma significativa. Para verificar este ltimo requisito, fue necesario
la aplicacin de las pruebas de Cochran para determinar si existan o no diferencias significativas
entre las varianzas para el conjunto de datos de un mtodo en especfico, en condiciones de
repetibilidad. En la Tabla 4.5 se muestra el resultado de la Prueba de Cochran aplicada para el
anlisis de nitrgeno en argn en ppm, en condiciones de repetibilidad.

65

Tabla 4.5. Prueba de Cochran aplicada al mtodo de anlisis de nitrgeno en argn en ppm.
Concentracin del MRC

Respuesta del

(ppm)

Instrumento

Desviacin estndar (s)

Desviacin
Estndar Relativa

promedio(ppm)
17,0

16,3

0,3

2,0%

18,5

24,8

0,1

0,5%

39,2

39,6

0,5

1,4%

156,0

155,1

2,8

1,8%

CCALCULADO

0,957

C(4,9,0,05)

0,502

De acuerdo a los resultados mostrados en la Tabla 4.5, el valor de CCALCULADO es mayor que el
valor de C tabulado para cuatro muestras, nueve grados de libertad y una probabilidad de 0,05 de
riesgo. Esto indica que existe una diferencia significativa entre las varianzas para los resultados
obtenidos en condiciones de repetibilidad para cada nivel de concentracin, es decir, se tiene
como indicio que la precisin intermedia de los mtodos de anlisis vara de acuerdo a la
concentracin del analito. En el apndice B se muestran las restantes pruebas de Cochran
aplicadas a los restantes mtodos de anlisis, de los resultados reportados en las mismas se
encontraron las mismas conclusiones de la Tabla 4.5.
A partir de los resultados obtenidos de las Pruebas de Cochran, se aplic el ANOVA en un
mismo mtodo de anlisis para cada nivel de concentarcin en especfico. El clculo de varianzas
para cada uno de los factores modificados en las condiciones de repetibilidad, se realiz
empleando la herramienta de Microsoft Excel 2007 Anlisis de datos ANOVA: dos factores
con replicado. Para ello, se tomaron como datos los valores de un nivel de concentracin
medidos por dos analistas diferentes en das diferentes, midindose diez replicados de la muestra
en cada da. En la Tabla 4.6 se muestra el ANOVA obtenido para el anlisis de concentracin de
monxido de carbono en ppm, para el nivel de concentracin del MRC igual a 4,8 ppm.

66

Tabla 4.6. ANOVA para el anlisis de precisin intermedia de das-analistas diferentes para el
mtodo de anlisis de concentracin de monxido de carbono en ppm.
Origen de

Suma de

Grados de

Cuadrados

Valor de P

F crtico

Variaciones

cuadrados

libertad

medios

Analistas

3,364

1,000

3,364

465,785

3,469 x 10-22

4,113

Das

0,016

1,000

0,016

2,215

0,145

4,113

Das/Analistas

0,016

1,000

0,016

2,215

0,145

4,113

Replicados

0,260

36,000

0,007

Total

3,656

39,000

Segn la Tabla 4.6, los valores del factor F para el cambio de analistas, resultan mayores que el
valor crtico, es decir, que los resultados obtenidos por cada analista para este nivel de
concentracin difieren significativamente, lo que indica que la precisin intermedia del mtodo
est siendo afectada por este cambio. La influencia de esta variable puede disminuirse por medio
de la continua verificacin de los resultados obtenidos por el cambio de analistas, en futuras
revisiones del proceso de validacin, con lo cual se estara corrigiendo posibles errores
sistemticos que pueden estar incorporndose en el procedimiento de anlisis. Por su parte, la
variacin de los das de anlisis por un mismo anlista, no present diferencias significativas en
los resultados ya que, los valores de F resultaron menores que el valor crtico.
A partir de los cuadrados medios reportados en la Tabla 4.6 para la variacin de cada factor, se
pudo realizar el clculo de varianzas para cada uno de ellos, siguiendo los lineamientos de la
Tabla 3.6 para el diseo anidado. En la Tabla 4.7 se muestran los resultados de las varianzas
obtenidas para el estudio de precisin intermedia para el anlisis de concentracin de monxido
de carbono en ppm para el nivel de concentracin de 4,8 ppm. En el apndice B se muestra el
clculo detallado de las varianzas y los valores de precisin intermedia para los restantes mtodos
de anlisis.

67

Tabla 4.7. Valores de varianza obtenidos a partir del ANOVA para el anlisis de precisin
intermedia para el mtodo de anlisis de concentracin de monxido de carbono en ppm. Nivel
de concentracin 4,8 ppm
Varianza
Repetibilidad,

sr2

0,007

0,001

Entre das, sD

Entre analistas, sA2

0,167

Intermedia de das diferentes, sI(D)2


Intermedia de das/analistas diferentes,

sI(D+A)2

0,008
0,176

De la Tabla 4.7 se puede observar que el valor de varianza entre los analistas es la componente
de mayor significacia en la precisin intermedia del mtodo, en tanto, los valores de varianza
para la repetibilidad y entre das son los componentes de menor influencia en la precisin
intermedia de los mtodos. La significancia de la varianza obtenida para la precisin intermedia
en el clculo de incertidumbre final se evaluar en las secciones posteriores.

4.3. Veracidad
La veracidad en los mtodos de anlisis se evalu por medio del clculo del sesgo (bias), como
la diferencia entre el promedio de las mediciones de las concentraciones de los MRC reportadas
por los equipos medidas en condiciones de repetibilidad y el valor de referencia, el cual para
estos casos se obtuvo a partir del certificado del material. Para cada nivel de concentracin, se
calcul el valor del sesgo correspondiente y de forma general, el valor del sesgo promedio del
mtodo de anlisis. La Tabla 4.8 muestra los valores del sesgo reportados en cada nivel de
concentracin para el mtodo de anlisis de monxido de carbono en ppm.

68

Tabla 4.8. Anlisis de veracidad por medio del clculo del sesgo para el mtodo de anlisis de
monxido de carbono en ppm.

Valor de refrencia
(ppm)

MRC 1

MRC 2

MRC 3

MRC 4

MRC 5

4,80

19,90

243,00

947,00

1001,00

4,92

19,71

242,87

947,90

1001,03

0,12

0,19

0,13

0,90

0,03

Respuesta
promedio del
instrumento (ppm)
Sesgo (ppm)
Sesgo promedio
(ppm)

0,27

De acuerdo a los resultados mostrados en la Tabla 4.8, los valores promedios de concentracin
medidos por el instrumento, reflejan una diferencia menor a 0,3 ppm del nivel de concentracin
reportado por el certificado del MRC, lo cual puede considerarse como diferencia insignificante
en comparacin al nivel de referencia. Puede obtenerse una representacin grfica de la
veracidad, en trminos del porcentaje de la relacin entre las concentraciones promedios medidas
por los instrumentos y las concentraciones de referencia, por medio del uso de la recuperacin
aparente del mtodo. Para cada nivel de concentracin, se calcul dicha relacin para las diez
mediciones realizadas en cada nivel. En la Figura 4.3 se muestra el grfico de recuperacin
aparente para el mtodo de anlisis de concentracin de monxido de carbono en ppm.
Se puede asegurar la veracidad del mtodo para valores de la recuperacin aparente que tiendan
a 1, o lo que es lo mismo, en trminos del porcentaje al 100%. De acuerdo al grfico de la Figura
4.3, de forma general se observa una buena veracidad del mtodo, o un sesgo reducido, lo cual se
refleja en la mayoria de los valores de recuperacin aparente cercanos al 100% para cada nivel de
concentracin medido. En el apndice B se muestran los resultados de anlisis de veracidad por
medio por medio de los grficos de porcentaje de recuperacin para los restantes mtodos de
anlisis.

69

Figura 4.3. Grfico del porcentaje de recuperacin aparente para los distintos niveles de
concentracin de los MRC medidos por el mtodo de anlisis de monxido de carbono en ppm.

Los resultados reportados en la Tabla 4.8 y en la Figura 4.3, a pesar de mostrar una tendencia
que asegura la veracidad del mtodo, es necesario verificarlos por medio de la aplicacin de
pruebas de t apropiadas, con la finalidad de concluir si el mtodo de anlisis posee o no un sesgo
siginificativo.
La prueba de t apropiada para este caso, corresponde a la calculada por medio de la ecuacin
2.12, ya que en la misma, se compara el valor de referencia de la concentracin del MRC con el
promedio obtenido por el mtodo de anlisis, durante los 3 das de mediciones, y la incertidumbre
de referencia reportada en el certificado con la desviacin estndar de los resultados obtenidos
por el mtodo. En la Tabla 4.9 se muestran los resultados de la prueba de t aplicada en cada nivel
de concentracin del MRC para el mtodo de anlisis de monxido de carbono en ppm.

Tabla 4.9. Prueba de t para el anlisis de exactitud del mtodo de anlisis de monxido de
carbono en ppm.

t calculado
t tabulado(0,05,29)

MRC 1

MRC 2

MRC 3

MRC 4

MRC 5

2,010

0,877

0,047

0,082

0,003

2,040

70

De acuerdo a los resultados mostrados en la Tabla 4.9, se puede considerar insignificativo el


valor del sesgo para este mtodo de anlisis, ya que los valores de t calculados, son menores al
valor de t tabulado para el nivel de confianza del 95% y los 29 grados de libertad. Esta
insignificancia del sesgo confirmado por la prueba de t, asegura la veracidad de los resultados
obtenidos mediante este mtodo de anlisis. En el apndice B se muestran las restantes pruebas
de t aplicadas a los diferentes mtodos.

4.4. Incertidumbre
Es importante que los resultados reportados por un laboratorio se encuentren acompaados por
su respectivo valor de incertiumbre, ya que de esta manera se puede tener nocin acerca de la
exactitud de dicho resultado, es decir, que tan alejado se encuentra el mismo del valor
considerado como verdadero. Dependiendo del valor de incertidumbre reportado, se pueden
tomar decisiones basadas en los resultados, por ello es importante que el laboratorio debe contar
con todo un procedimiento de evaluacin de las posibles fuentes de incertidumbre que puedan
influir en el clculo del resultado final.
El proceso del clculo de incertidumbre puede dividirse las siguientes cuatro etapas:
especificacin, identificacin, cuantificacin y combinacin. En la etapa de especificacin se
incluye el modelado del proceso de medicin, esto es, establecer la relacin existente entre el
resultado y los parmetros anliticos de los cuales depende el mismo. En la etapa de
identificacin se deben incluir todas las posibles fuentes de incertidumbre que puedan influir en
el valor final. En la cuantificacin, se valoran dichas fuentes dependiendo de la naturaleza de las
mismas, es decir, dependiendo si son del tipo A o del tipo B. Finalmente, se combinan todas las
incertidumbres en una del tipo estndar, para luego expandirla por un factor de cobertura
determinado para un cierto nivel de confianza. (Maroto, 2002)
Del proceso para la determinacin de la incertidumbre descrito anteriormente, las etapas de
especificacin e identificacin pueden tornarse excesivamente tediosas y complicadas. Es por
ello que se han desarrollado aproximaciones para el clculo de incertidumbre, que contemplan la
asociacin de trminos obtenidos a partir de las etapas del proceso de validacin. La combinacin
de estos trminos se presenta en la ecuacin 2.3. En el anlisis de incertidumbre de los mtodos
de anlisis reportados en este informe estn basados en el uso de dicha ecuacin.

71

Los mtodos de anlisis de impurezas realizados en el Laboratorio de Gases Especiales, se


realizan por medio de una sola medicin de la concentracin con el uso del equipo de medicin
especfico para tal fin, por lo que en el clculo de incertidumbre, se involucra la evaluacin de la
incertidumbre tipo B relacionada con los parmetros de resolucin y error mximo permisible
(EMP) del instrumento de medicin. La cuantificacin de este tipo de incertidumbre puede
realizarse por medio del uso de las ecuaciones 2.1 y 2.2, suponiendo una distribucin rectangular.
Las mediciones de las concentraciones de impurezas realizadas en el laboratorio, no involucran
ningn tipo de tratamientos previos a la muestra (por ejemplo: extraccin del analito), sino que
por el contrario, el anlisis se realiza conectando directamente el cilindro que contiene la muestra
al panel de analizadores, por lo que el trmino de incertidumbre de upretratamietos contenido en la
ecuacin 2.3, no interviene en el clculo de incertidumbre final.
Adems de incluirse los trminos de incertidumbre asociados a la precisin intermedia del
mtodo, la cual se evalu por medio del anlisis de varianza durante el proceso de validacin, la
incertidumbre debida a la trazabilidad del mtodo, la cual toma en cuenta la incertidumbre del
MRC y de la precisin intermedia, tambin puede incluirse aquella debida a la evaluacin de la
linealidad, la cual involucra el establecimiento de la relacin entre la respuesta del instrumento y
los valores de concentracin de los MRC. La combinacin de estos trminos y finalmente la
expansin de la incertidumbre combinada por un factor de cobertura k, constituyen las etapas
finales del proceso de evaluacin de este parmetro. En las siguientes secciones se muestran los
clculos de incertidumbre para algunos de los mtodos de anlisis evaluados durante la
validacin.

4.4.1. Evaluacin de la Incertidumbre para el Mtodo de Anlisis de Concentracin de


Monxido de Carbono en ppm
La medicin de la concentracin en ppm del monxido de carbono, se realiza por medio del
mtodo espectrofotomtrico infrarrojo no dispersivo utilizando el equipo de medicin Horiba
VIA-510, el cual tiene una resolucin de 0,1 ppm y un EMP igual a 1% de la lectura medida por
el equipo. Utilizando las ecuaciones 2.1 y 2.2, respectivamente, se pueden calcular los valores de
incertidumbre asociados a estos dos parmetros.
La incertidumbre debida a la evaluacin de la linealidad, puede determinarse por aproximacin
a la incertidumbre debida a la recta de calibracin, calculada por medio de la ecuacin 2.6,

72

utilizando los datos de la Tabla 4.3 obtenidos a partir del estudio de linealidad del mtodo. En la
Tabla 4.10 se presenta un resumen de todos los datos necesarios para el clculo de incertidumbre
debido a la evaluacin de la linealidad para una lectura del instrumento igual a 4,92 ppm. En el
apndice B se muestra de forma detallada el clculo de los parmetros mostrados en dicha tabla.
De acuerdo a los resultados reportados en la Tabla 4.10, el valor de incertidumbre debido a la
evaluacin de la linealidad, se calcula a partir del valor de la lectura del instrumento. De manera
ideal, este valor debera ser igual al valor de x0, el cual corresponde al valor de la medicin
obtenido por medio de la recta de calibracin. Esto se cumple para el caso en que se tengan
valores de la pendiente e intercepto de la recta iguales a 1 y 0 respectivamente, lo que constituye
una recta del tipo y=x. El valor de la pendiente de la recta de calibracin est relacionado con la
sensibilidad del instrumento de medicin de forma inversa, esto es, para valores de pendiente
mayores a 1 la sensibilidad del instrumento es baja y viceversa. Los problemas de sensibilidad
pueden corregirse, si durante la calibracin del instrumento, se ajusta la respuesta del mismo a un
valor conocido de concentracin, generalmente por medio del uso de un MRC.

Tabla 4.10. Incertidumbre debida a la evaluacin de la linealidad para el mtodo de anlisis de


concentracin de monxido de carbono en ppm.
ei

ei2

192141,96

0,21

0,04

-423,24

179132,10

-0,10

0,01

242,87

-200,14

40056,02

-0,16

0,03

947,00

947,90

503,86

253874,90

0,52

0,27

1001,00

1001,03

557,86

311207,78

-0,38

0,14

Suma

2215,70

2216,43

976412,75

0,08

0,49

Promedio

443,10

443,29

Intercepto

-0,09

Pendiente

1,00

Lectura de
la muestra

Xi

yi

4,80

4,92

-438,34

19,90

19,71

243,00

4,92

x0

5,00

Sxx

976412,75

150,00

Se

0,06

73
u(x)

0,06

Para el caso de valores de intercepto diferentes de cero, estos pueden relacionarse a problemas
de ruido en el instrumento, lo cuales siempre estn presentes y son difciles de corregir. Es muy
poco probable que la respuesta de un instrumento sea igual a cero cuando se realicen mediciones
de muestras de blanco (concentraciones muy bajas de analito). La influencia de este y otros
factores que puendan afectar la linealidad del mtodo est contemplada en el valor de
incertidumbre reportado en la Tabla 4.10, (u(x) igual a 0,06). Este valor depender de la
concentracin que se desea medir y deber calcularse para cada nivel de concentracin.
Como el trmino de incertidumbre uprecisin involucra la precisin intermedia del mtodo de
anlisis, sta viene dada por el valor de varianza sI(D+A)2 reportado en clculo de varianzas a partir
del ANOVA para evaluar la precisin intermedia (Tabla 4.7), siendo este valor igual a 0,176. El
clculo de esta incertidumbre se obtiene a partir de la ecuacin 2.4.
El trmino utrazabilidad involucra la incertidumbre asociada a la trazabilidad de los resultados,
esto es cuando la concentracin del MRC es medido siguiendo el mismo procedimiento de
anlisis de la muestra, para obtener una referencia y comparar dicho valor con el de la muestra de
concentracin desconocida, por ejemplo durante el ajuste del span en el proceso de calibracin
del instrumento. La expresin de esta incertidumbre viene dada a partir de la ecuacin 2.5.
En la Tabla 4.11 se presenta un resumen de las fuentes de incertidumbre descritas
anteriormente y su correspondiente valor de incertidumbre para el ejemplo de una lectura del
instrumento igual a 4,92 ppm. Si se analizan los aportes de algunas de las fuentes de
incertidumbre reportadas en la Tabla 4.11, se puede observar que la componente de precisin
intermedia y aquella debida a la trazabilidad aportan el mayor valor de incertidumbre al resultado
final, por el contrario, la incertidumbre debida a la resolucin del equipo y al EMP, resultan las
de menor valor, como es de esperarse. Sin embargo, la incertidumbre debida al EMP depende de
la lectura del instrumento, y tender a aumentar su aporte en funcin de valores altos de
concentracin medidos, especficamente, para valores de concentracin de CO mayores a 10 ppm
en las muestras a medir, la incertidumbre debida a este parmetro entra en competencia con
aquella asociada a la evaluacin de la linealidad, la cual presenta valores intermedios al aporte de
la incertidumbre para el caso de concentraciones bajas de CO (<10ppm).

74

Tabla 4.11. Fuentes de incertidumbre asociadas al clculo de concentracin de monxido de


carbono en ppm, utilizando el mtodo espectrofotomtrico infrarrojo no dispersivo para una
lectura del instrumento igual a 4,92 ppm.
Componentes de la
Incertidumbre
uprecisin

Fuente de incertidumbre
Presicin intermedia

Expresin

Valor de
incertidumbre
0,42

Incertidumbre del material de


utrazabilidad

referencia, precisin

0,43

intermedia

uotros trminos

Resolucin del Equipo

0,03

EMP

0,03

Evaluacin de la linealidad

0,06

uc

0,60

1,2

En la Figura 4.4 se muestra un diagrama de causa efecto con las fuentes de incertidumbre
asociadas al clculo de concentracin de mnoxido de carbono en ppm utilizando el mtodo
espectrofotomtrico infrarrojo no dispersivo, a partir de la informacin de la validacin del
mtodo. En el diagrama, se colocaron de forma ms alejada las fuentes de incertidumbre
obtenidas previas al proceso de medicin de la concentracin del CO, es decir, aquellas obtenidas
durante el proceso de validacin, entre ellas se encuentran la precisin intermedia y la
incertidumbre debida a la evaluacin de la linealidad. En el intermedio se ubic la trazabilidad
como fuente de incertidumbre asociada a la comparacin de la medicin de la concentracin con
un MRC. Finalmente, ms proximas al proceso de medicin, se ubicaron las fuentes tipo B de
incertidumbre, tales como aquellas debidas al EMP y a la resolucin del equipo por considerarse
que estn vinvuladas al proceso final de medicin.

75

Precisin
Intermedia

EMP

[CO]

Evaluacin de la
Linealidad

Trazabilidad

Resolucin

Figura 4.4. Diagrama de causa efecto de las fuentes de incertidumbre para el anlisis de
concentracin de monxido de carbono en ppm, utilizando el mtodo espectrofotomtrico
infrarrojo no dispersivo.

El Diagrama mostrado en la Figura 4.4 puede aplicarse para todos los mtodos de anlisis de
concentracin evaluados en este informe, ya que todos siguen los mismos procedimientos de
medicin. La diferencia en cada uno de ellos depender del equipo utilizado y de la precisin
intermedia de cada mtodo. En la siguiente seccin, se muestra un resumen de la evaluacin de
las fuentes de incertidumbre de forma general, para cada mtodo de medicin, siguiendo el
procedimiento anterior.

4.4.2. Evaluacin de la Incertidumbre para los Mtodos de Anlisis de Concentracin de


Gases
En la Tabla 4.12 se muestra un resumen de las fuentes de incertidumbre para los mtodos de
anlisis de concentracin de gases: oxgeno en ppm por el mtodo electroqumico, oxgeno en
porcentaje por el mtodo paramgnetico y nitrgeno en argn en ppm por el mtodo
espectrofotomtrico. Los valores reportados para la precisin intermedia y la evaluacin de la
linealidad fueron tomados para los niveles de concentraciones ms bajos anlizados en cada
mtodo.

76

Tabla 4.12. Resumen de las fuentes de incertidumbre asociadas al clculo de concentracin de


gases.
Valor de incertidumbre
Componentes
de la
Incertidumbre
uprecisin

Fuente de
incertidumbre

Expresin

Anlisis O2 en

Presicin intermedia

ppm

Anlisis O2 en

Anlisis N2

en Ar en
ppm

0,73

0,01

0,6

0,03

0,003

0,003

0,02

0,003

0,1

0,30

0,02

0,53

Incertidumbre del
utrazabilidad

material de
referencia, precisin
intermedia
Resolucin del
Equipo

uotros trminos

EMP
Evaluacin de la
linealidad

uc
U

Analizando cada fuente de incertidumbre por separado, se tiene que: para todos los mtodos de
anlisis, el trmino de incertidumbre asociado a la precisin intermedia es el que proporciona el
mayor aporte al valor final, lo que significa que la variabilidad de los resultados reportados puede
ser significativa. Para el caso de los anlisis de oxgeno en porcentaje, la precisin intermedia
proporciona un valor intermedio de incertidumbre, por lo que se puede afirmar para este mtodo
los resultados presentan poca dispersin entre s. Los menores valores de incertidumbre los
proporcionan la resolucin del equipo en cada caso reportado.
Un caso especial para evaluar la incertidumbre de los resultados, puede aplicarse para los
mtodos de anlisis cromatogrficos para determinar: monxido de carbono, dixido de carbono
y metano en porcentaje. En la Tabla 4.13 se presenta el resumen de la evaluacin de la

77

incertidumbre para estos mtodos de forma general, y aplicada para los menores niveles de
concentracin de cada mtodo.

Tabla 4.13. Resumen de las fuentes de incertidumbre asociadas al clculo de concentracin de


gases para los mtodos cromatogrficos.
Valor de incertidumbre
Componentes
de la
Incertidumbre
uprecisin

Fuente de
incertidumbre
Presicin
intermedia

Expresin

Anlisis
CO en %

Anlisis
CO2 en
%

Anlisis de
CH4 en %

0,004

0,004

0,002

0,02

0,006

0,03

Incertidumbre del
material de
utrazabilidad

referencia,
precisin
intermedia
Evaluacin de la
linealidad

uc
U

De acuerdo a la Tabla 4.13, para los mtodos cromatogrficos, la resolucin y el error mximo
permisible, no aplican como fuentes de incertidumbre del equipo, particularmente del
cromatgrafo de gases. Sin embargo, el trmino de trazabilidad resulta especialmente importante
en la evaluacin de la incertidumbre por cromatografa, ya que, como se haba explicado
anteriormente, el clculo de concentraciones para los mtodos cromatogrficos, se realiza por
medio de las comparaciones entre el rea del MRC y la de la muestra problema, por lo que esta
fuente de incertidumbre en especfico resulta determinante, ya que dependiendo de la
incertidumbre de referencia del MRC (UMRC) la exactitud del resultado final se ver afectada. La
expresin de incertidumbre debida a este trmino puede evaluarse, al igual que en los casos
anteriores, por medio de la ecuacin 2.5, con la variacin de que n es igual a 5, ya que en el

78

laboratorio, el rea de los MRC que se utilizan para establecer la referencia, se miden 5 veces
para asegurar la repetibilidad al igual que el rea de la muestra problema. Las dems fuentes de
incertidumbre, pueden evaluarse de la misma forma que para los otros trminos.

79

CONCLUSIONES

El proceso de validacin de los mtodos de anlisis de concentracin de gases comprendi la


evaluacin de los parmetros caractersticos: linealidad, precisin, veracidad e incertidumbre. El
estudio de cada uno de los mismos proporcion la informacin adecuada sobre el desempeo de
los mtodos de anlisis en la aplicacin de cada uno de ellos, siendo el cumplimiento de las
especificaciones establecidas en la validacin para cada parmetro, la confirmacin de la correcta
aplicabilidad de los mtodos para su propsito de medicin establecido.
La linealidad de los mtodos de anlisis se evalu por medio del clculo de los coeficientes de
determinacin para el ajuste de la recta de la respuesta del instrumento de medicin en funcin de
la concentracin de los MRC. Para todos los mtodos de anlisis estudiados, se encontraron
coeficientes de determinacin mayores a 0,995, cumplindose as la especificacin de este
parmetro en la validacin.
Por medio del estudio de precisin, se evalu la dispersin de los resultados en un conjunto de
mediciones realizadas a travs de los mtodos de anlisis. Se verific la repetibilidad de los
resultados obtenidos en cada mtodo de medicin, realizando anlisis de los MRC en condiciones
de repetibilidad. Para todos los mtodos de anlisis, se calcul la desviacin estndar relativa
obtenindose valores menores al especificado (2%). Asimismo, se evalu la precisin intermedia
de los mtodos de anlisis, como una medida de la reproducibilidad interna del laboratorio,
obtenida al variar los factores de las condiciones de repetibilidad. A travs de la aplicacin de las
pruebas de Cochran, se encontr que para todos los mtodos de anlisis, la precisin intermedia
vara en funcin de la concentracin. Por su parte, por medio de los anlisis de varianzas se
encontraron diferencias significativas en los resultados obtenidos por el cambio de analistas, por
lo que es necesario la continua evaluacin de este parmetro en futuras revisiones del proceso de
validacin, para as corregir a los resultados de posibles errores sistemticos que puedan
introducirse debido al cambio de analistas.
Por otra parte, la veracidad en los resultados medidos por los mtodos de anlisis, se determin
por medio del clculo del sesgo. Se encontr poca discrepancia entre el conjunto de resultados
medidos por los mtodos y los valores de referencia de los MRC. La evaluacin de este

80

parmetro, tambin se verific a travs del clculo de porcentajes de recuperacin aparente,


obtenindose, de forma general, variaciones del 20% alrededor del valor de referencia medido.
Finalmente, la evaluacin de la incertidumbre realizada por medio de la aproximacin del
clculo global del parmetro, utilizando la informacin generada durante el proceso de
validacin, mostr que la precisin intermedia influye de manera significativa al valor final de
incertidumbre de los resultados. Por su parte, la trazabilidad hacia los MRC constituye una fuente
de incertidumbre de influencia moderada. La incertidumbre debida a la evaluacin de la
linealidad como aproximacin de la respuesta del instrumento de medicin, proporciona un valor
intermedio al trmino final de incertidumbre. Los trminos asociados a la resolucin del equipo y
al EMP resultaron los de menor aporte al valor final, sin embargo, para el caso de este ltimo
parmetro, la influencia del mismo puede resultar significativa especialmente cuando se miden
valores altos de concentracin. Por lo tanto se encontr que el valor de incertidumbre de los
resultados aumenta en funcin del aumento de la concentracin y las principales fuentes de
incertidumbre significativas estn asociadas al procedimiento de anlisis de las muestras ms que
al equipo de medicin.

81

RECOMENDACIONES

A pesar que en el Laboratorio de Gases Especiales se lleva a cabo la verificacin del proceso de
validacin de los mtodos de anlisis de concentracin de manera regular, se propone, con la
finalidad de llevar un control y registro del proceso, formular una agenda de validacin, en
trminos de los lapsos de tiempo en los cuales debera llevarse a cabo el proceso. De forma
tentativa, se propone llevar a cabo la revisin y verificacin de los parmetros de estudio,
anualmente. En la misma agenda de validacin, puede establecerse un cronograma con una lista
de actividades destinadas a lograr el objetivo final de la validacin, stas pueden incluir la
metodologa de los anlisis de los MRC para evaluar los parmetros de linealidad, repetibilidad,
veracidad, etc. Por otra parte, se recomienda emplear el formato de validaciones desarrollado
durante la pasanta (ver apndice C), como documento para el registro de los resultados obtenidos
en los anlisis de concentracin realizados, ya que el mismo se encuentra diseado para reportar
la informacin mnima requerida para la evaluacin de los parmetros en la validacin. Adems
de esto, resultara especialmente til, llevar a cabo un inventario de los MRC que se encuentran
en el laboratorio, con la finalidad de asegurar contar con MRC adecuados y necesarios para llevar
a cabo los anlisis. El inventario, puede realizarse trimestralmente y se debe especificar en el
mismo la presin actual del cilindro que contiene el MRC y contrastarla con la presin mnima
estable reportada en el certificado. Este parmetro es de especial importancia, ya que el mismo
asegura la homogeneidad de la concentracin reportada en el certificado, para valores de presin
del material por debajo de la presin mnima estable, no se puede asegurar la homogeneidad. Por
ltimo, se recomienda establecer el proceso de validacin de los restantes mtodos de anlisis
realizados en el laboratorio, entre ellos, el anlisis de muestras binarias, el anlisis de humedad y
el anlisis de hidrocarburos totales en ppm.

82

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
[1] Boqu, R., Maroto, A., Riu, J., y Rius, F. X., Validation of Analytical Methods, Grasas y
Aceites, Vol. 53, No. 1, 2002, pp. 128-143.
[2] Cirino, A., Gases Especiales, Praxair Per, Bellavista, 2002.
[3] COVENIN 2552:1999., Vocabulario Internacional de trminos bsicos y Generales en
Metrologa. 1999
[4] EURACHEM/CITAC CG4., EURACHEM/CITAC Quantifying uncertainty in analytical
measurement. 2a. edicin, Teddington, Middlessex, 2000
[5] EURACHEM., The Fitness for Purpose of Analytical Methods. A Laboratory Guide to
Method Validation and Related Topics. EURACHEM Secretariat, Teddington,1998.
[6] Garrido, A y Estramiana, J., Tcnicas de Anlisis Estadstico en Ciencias Sociales. Servicio
de Publicaciones Universidad Complutense, Madrid, pp. 159-162 (1995).
[7] Gennaro, A., Remington Farmacia. Panamericana, Buenos Aires, pp. 748-749 (2003).
[8]Gonzlez, J., Tcnicas y mtodos de laboratorio clnico. Masson, Barcelona, pp. 79-81
(2005).
[9] Hernndez, L y Gonzlez, C., Introduccin al anlisis instrumental, Ariel, Barcelona, pp.
45-63 (2002)
[10] IUPAC, International Union of Pure and Applied Chemistry., Harmonized Guidelines for
single-laboratory validation of methods of analysis (Technical Report), Pure Appl. Chem., Vol.
74, No.5, 2002, pp. 835-855
[11] JCGM 200:2008., International vocabulary of metrology. Basic and general concepts and
associated terms (VIM), 2008
[12] Maroto, A., Incertidumbre en Mtodos Anliticos de Rutina. Tesis Doctoral, Universitat
Rovira I Virgili, Tarragona, 2002
[13] Menndez, F., Higiene Industrial. Manual para la formacin del especialista, Lex Nova,
Valladolid, pp. 146-155 (2008)

83

[14] Namas., The Expression of Uncertainty and Confidence in Measurement for Calibrations,
Teddington, 1995
[15]

Praxair,

2006.

Visin

Valores.

Disponible

en

Internet:

http://www.praxair.com/praxair.nsf/AllContent/3D60019459A9657985256A92006E793E?Open
Document&URLMenuBranch=174A058E577520DE85257035005F4206, consultado el 12 de
Enero de 2011.
[16] Puglisi, C y Kornblit, F., Incertidumbre de medicin en qumica analtica. Recta de
calibracin, Buenos Aires, 2002
[17] Schmid, W y Martnez, R., Gua para estimar la incertidumbre de la medicin, Centro
Nacional de Metrologa, Mxico, 2000
[18] Silva, M. y Garca, M. J., Tcnico especialista en Laboratorio de Atencin Primaria, Mad,
Espaa, pp. 347-361 (2006)
[19] Skoog, D., West, D., Holler, F., Fundamentos de Qumica Analtica, Revert, Espaa,
2001

84

APNDICES

85

APNDICE A

Las siguientes secciones de este apndice muestran los procedimientos de anlisis de


concentraciones de gases para los diversos mtodos evaluados durante la validacin. La
informacin reportada se obtuvo a partir del Manual de Procedimientos e Instrucciones del
Laboratorio de Gases Especiales Praxair Venezuela Sucursal Cagua.

1.Procedimiento de Anlisis para Determinar la Concentracin de los Gases: Oxgeno en


porcentaje, Oxgeno en ppm, Monxido de Carbono en ppm, Nitrgeno en Argn en ppm
A continuacin se describen los pasos generales para la determinacin de la concentracin de
los gases oxgeno en porcentaje, oxgeno en ppm, monxido de carbono en ppm, nitrgeno en
argn en ppm.

1.1.Toma y Preparacin de Muestra

El cilindro que contiene la mezcla gaseosa, se toma del rea para anlisis de cilindros
ubicada detrs del Laboratorio de Gases Especiales (cilindros por anlisis).

Se conecta el cilindro a analizar en la central doble de anlisis del gas correspondiente,


ubicada detrs del laboratorio de Gases Especiales. Ver Figura A.1

Se coloca la cadena de seguridad para sujetar el cilindro.

Se abre la vlvula del cilindro.

Se verifican fugas con agua y jabn, de existir alguna, se cierra la vlvula y se revisa la
instruccin para reparacin de fugas.

Se abre la vlvula de purga, se espera 2 segundos y se cierra. Se repite esta operacin


mnimo 15 veces.

Se abre la vlvula de entrada de la central doble.

Se regula la presin de salida en 50 psig.

Se conecta el puerto de anlisis del cilindro con la entrada al rack los analizadores SC1
SC2. Ver Figura A.2.

86

Se abre la vlvula de bypass del puerto de anlisis ubicada en el rack de analizadores del
Laboratorio, se purga la lnea por lo menos durante 2 minutos y cierra la vlvula de
bypass.

Figura A.1. Central doble de anlisis de gases puros.

Figura A.2. Conexiones de los cilindros al rack de analizadores en los puertos de anlisis SC1 y
SC2.

87

1.2.Calibracin del Equipo

Se revisa en la ficha tcnica del equipo de anlisis a utilizar, si ste se encuentra


calibrado, de lo contrario, se revisa la instruccin para calibracin del analizador
correspondiente. En la misma, se especifican los procedimientos a seguir para el ajuste del
cero y del span del equipo, con el uso de los MRC correspondientes.

1.3.Entrada de la Muestra al Rack de Analizadores

Dependiendo del equipo a utilizar, se coloca la vlvula correspondiente en el rack de


analizadores, en la posicin SC1 SC2, segn sea la eleccin de entrada hacia el rack.
Ver Figura A.3.

Se abre la vlvula correspondiente por lo menos durante un tiempo aproximado de 2


minutos para purgar la muestra antes de entrar al analizador.

Se visualiza el paso del gas a travs del bypass flow.

Se coloca la vlvula en posicin sample y se regula el flujo de entrada al analizador.

Figura A.3. Rack de analizadores del Laboratorio de Gases Especiales.

88

1.4.Registro de la Lectura

Se espera por lo menos durante 3 minutos hasta obtener una lectura constante en el
equipo.

Se registra la lectura obtenida en el formato correspondiente al anlisis que se est


llevando a cabo.

1.5.Retiro de la Muestra

Se regresa la vlvula correspondiente del rack a la posicin purgue (purga).

Se cierra la vlvula del cilindro.

2. Procedimiento de Anlisis para Determinar la Concentracin de los Gases: Monxido de


Carbono, Dixido de Carbono y Metano en porcentaje por el Mtodo de Cromatografa
Los siguientes pasos, muestran los procedimientos a realizar para el anlisis de muestras por
medio del mtodo de cromatografa de gases. En ellos se incluyen desde la preparacin de la
muestra, la calibracin del equipo y el anlisis de concentracin.

2.1. Toma y Preparacin de Muestra

Se toma el cilindro del rea correspondiente: Patrn, del rea patrones de referencia y
si es muestra del rea cilindros por anlisis; ambas ubicadas al frente del laboratorio de
Gases Especiales.

Se conecta el cilindro (calibracin o anlisis) en el puerto de anlisis cromatogrfico


No.2 si los anlisis a realizar son de hidrocarburos desde C1 hasta C8; en el puerto de
anlisis cromatogrfico No.1 si son de gases permanentes, dixido de carbono,
monxido de carbono, nitrgeno en hidrgeno o helio.

Se coloca la cadena de seguridad para sujetar el cilindro.

Se abre la vlvula del cilindro (calibracin o anlisis) y se ajusta la presin a 50 psig.

Se verifican fugas con agua y jabn, de existir alguna, se cierra la vlvula y se revisa la
instruccin para reparacin de fugas.

Se abre la vlvula de bypass de se punto de anlisis.

89

Se abre la vlvula de la muestra del panel de cromatografa del laboratorio.

Se cierra la vlvula del cilindro, y se deja caer la presin a cero psig.

Se abre la vlvula del cilindro y se cierra hasta que caiga la presin a cero psig. Repita
esta operacin 15 veces.

Se abre nuevamente la vlvula del cilindro y se cierra la vlvula de bypass de ese punto
de anlisis.

Se cierra la vlvula de muestra del panel de cromatografa del laboratorio.

2.2. Calibracin del Cromatgrafo

Seleccin del MRC de calibracin: se recomienda utilizar el MRC ms cercano a la


lectura deseada. Este no debera superar en 10 veces el valor que se requiere analizar
(no limitativo). En caso de no contar con el MRC adecuado solicitar por escrito a
produccin de Gases Especiales la elaboracin del mismo y generar la requisicin para
la compra de un MRC importado.

Inyeccin del MRC de calibracin: se prepara el gas de calibracin segn el


procedimiento de toma y preparacin de muestra de la seccin anterior. Se carga en el
computador del cromatgrafo el mtodo HID. Se abre la vlvula de muestra del panel
del cromatgrafo de gases por 7 segundos, cerrar, y esperar que salga la ltima burbuja
de la fiola y presionar la tecla start del panel del cromatgrafo. Se repite este paso
hasta lograr estabilizar el equipo y obtener lecturas oscilantes. Generalmente se
requieren de 5 inyecciones para lograr estabilizar el equipo no limitativo.

Ajuste de la calibracin: se ajusta el tiempo de retencin del compuesto analizado si


este as lo requiere. Se calcula el promedio de las reas que considere estables se
sugiere utilizar Excel y se registra en el formato de Orden de produccin y anlisis.
Finalmente, se imprime un cromatograma tipo.

2.3. Anlisis de la Muestra

Para el anlisis de la muestra de concentracin desconocida, se realiza el mismo


procedimiento de Inyeccin y Ajuste de los tiempos de retencin que en la seccin de
calibracin.

90

El clculo de la concentracin de la muestra se realiza por medio de la ecuacin 2.14,


basndose en la comparacin con las reas del MRC.

2.4.Retiro de la Muestra

Al finalizar los anlisis cerrar la vlvula del cilindro analizado.

91

APNDICE B

En las secciones de este apndice se muestran los clculos de algunos parmetros expuestos en
el captulo de resultados, de igual forma, se presentan algunos grficos complementarios a dicho
captulo.

1.Clculo de Valores Residuales


A partir de los datos de la concentracin de los MRC (xi) y los promedios de los tres das de
medicin de la respuesta del instrumento para cada nivel de concentracin, (yi), se utiliz la
funcin de Microsoft Excel 2007, ESTIMACIN LINEAL, para calcular el valor de la
pendiente (b) y de intercepto (a) de la recta de calibracin. Para los datos de la Tabla 4.3, los
valores de intercepto y pendiente de la recta de calibracin son:

Utilizando la ecuacin 2.8, para el punto (4,80;4,92) se tiene el valor residal ei igual a:

2.Grficos Residuales
A continuacin se presentan los grficos residuales para los mtodos de anlisis de: nitrgeno
en argn (Figura B.1), dixido de carbono en porcentaje (Figura B.2), metano en porcentaje
(Figura B.3), oxgeno en porcentaje (Figura B.4) y oxgeno en ppm (Figura B.5).

92

Figura B.1. Grfico de residuos en funcin de la concentracin del MRC para el anlisis de
concentracin de nitrgeno en argn en ppm.

Figura B.2. Grfico de residuos en funcin de la concentracin del MRC para el anlisis de
concentracin de dixido de carbono en porcentaje.

93

Figura B.3. Grfico de residuos en funcin de la concentracin del MRC para el anlisis de
concentracin de metano en porcentaje.

Figura B.4. Grfico de residuos en funcin de la concentracin del MRC para el anlisis de
concentracin de oxgeno en porcentaje

94

Figura B.5. Grfico de residuos en funcin de la concentracin del MRC para el anlisis de
concentracin de oxgeno en ppm.

3.Anlisis de Repetibilidad
En las siguientes tablas se muestran los resultados de los anlisis de repetibilidad y las pruebas
de Cochran para los mtodos de anlisis de concentracin de: oxgeno en ppm (Tabla B.1),
oxgeno en porcentaje (Tabla B.2), monxido de carbono en ppm (Tabla B.3), monxido de
carbono en porcentaje (Tabla B.4), dixido de carbono en porcentaje (Tabla B.5), metano en
porcentaje (Tabla B.6)

Tabla B.1. Anlisis de Repetibilidad para el mtodo de anlisis de oxgeno en ppm.


Concentracin del MRC

Respuesta del

(ppm)

Instrumento

Desviacin estndar (s)

Desviacin Estndar
Relativa

promedio(ppm)
1,00

0,80

0,00

0%

7,30

6,75

0,07

1,04%

27,00

31,00

0,00

0%

59,00

58,20

0,42

0,72%

80,00

75,00

0,00

0%

CCALCULADO

0,973

C(5,9,0,05)

0,424

95

Tabla B.2. Anlisis de Repetibilidad para el mtodo de anlisis de oxgeno en porcentaje.


Concentracin del MRC

Respuesta del

(%)

Instrumento

Desviacin estndar (s)

Desviacin Estndar
Relativa

promedio(%)
0,50

0,49

0,003

0,64%

3,08

3,26

0,000

0%

4,78

5,06

0,000

0%

10,30

10,32

0,007

0,07%

21,18

21,20

0,004

0,02%

99,80

99,75

0,007

0,007%

CCALCULADO

0,398

C(6,9,0,05)

0,368

Tabla B.3. Anlisis de Repetibilidad para el mtodo de anlisis de monxido de carbono en ppm.
(yi)

(xi)
Concentracin del MRC
(ppm)

Respuesta del
Instrumento

Desviacin estndar (s)

Desviacin
Estndar Relativa

promedio(ppm)

4,80

5,00

0,00

0%

19,90

20,00

0,00

0%

243,00

244,40

0,52

0,21%

947,00

953,50

0,53

0,06%

1001,00

1007,00

0,00

0%

CCALCULADO

0,511

C(5,9,0,05)

0,424

96

Tabla B.4. Anlisis de Repetibilidad para el mtodo de anlisis de monxido de carbono en


porcentaje.
Concentracin del MRC

Respuesta del

(%)

Instrumento

Desviacin estndar (s)

Desviacin
Estndar Relativa

promedio(%)
0,100

0,093

0,001

0,585%

1,000

1,043

0,010

0,654%

10,000

10,084

0,135

0,440%

19,900

21,255

0,195

1,422%

CCALCULADO

0,675

C(4,9,0,05)

0,502

Tabla B.5. Anlisis de Repetibilidad para el mtodo de anlisis de dixido de carbono en


porcentaje.
Concentracin del MRC

Respuesta del

(%)

Instrumento

Desviacin estndar (s)

Desviacin
Estndar Relativa

promedio(%)
0,100

0,082

0,001

0,559%

1,000

1,037

0,008

0,776%

10,100

9,822

0,041

0,415%

20,200

21,254

0,290

1,362%

CCALCULADO

0,980

C(4,9,0,05)

0,502

97

Tabla B.6. Anlisis de Repetibilidad para el mtodo de anlisis de metano en porcentaje.


Concentracin del MRC

Respuesta del

(%)

Instrumento

Desviacin estndar (s)

Desviacin
Estndar Relativa

promedio(%)
0,100

0,093

0,001

0,508%

1,000

1,025

0,007

0,653%

10,200

9,899

0,042

0,427%

20,300

22,034

0,321

1,458%

CCALCULADO

0,983

C(4,9,0,05)

0,502

4.Anlisis de Varianza (ANOVA) para el Clculo de Precisin Intermedia


El anlisis de varianzas ANOVA se realiz utilizando la herramienta de Microsoft Excel
2007, ANLISIS DE DATOS ANOVA: DOS FACTORES CON REPLICADO. En la funcin
se especific como rango de entrada, los resultados por cada analista, obtenido en dos das
diferentes para un mismo nivel de concentracin. Adems se realiz el anlisis para un valor de
igual a 0,05. Para el caso de la Tabla 4.6, para un nivel de concentracin de 4,8 ppm de CO. En la
Tabla B.7, se muestran dichos datos.
Los resultados del ANOVA para los datos de la Tabla B.7, se muestran en la Tabla 4.6. De all
se tomaron como los valores medios de cada factor variado los siguientes:

98

Tabla B.7. Datos de concentraciones por analistas y das para el ANOVA de das-analista
diferentes del anlisis de concentracin de monxido de carbono en ppm.

Analista 1

Analista 2

Da 1

Da 2

5,0

5,0

5,0

5,0

5,0

5,0

5,0

5,0

5,0

5,0

5,0

5,0

5,0

5,0

5,0

5,0

5,0

5,0

5,0

5,0

5,3

5,6

5,7

5,6

5,5

5,5

5,5

5,4

5,6

5,5

5,6

5,6

5,8

5,6

5,7

5,6

5,8

5,5

5,7

5,5

Siguiendo las ecuaciones para el clculo de varianzas de la Tabla 3.6, se calcularon las mismas
como sigue:
Varianza para la repetibilidad:

99

Varianza entre das, para n=10 (replicados):

Varianza entre analistas, para p= 2 (das de medicin):

Varianza para la precisin intermedia de das diferentes:

Varianza para la precisin intermedia de das-analistas diferentes:

5.Valores de Precisin Intermedia para los Mtodos de Anlisis de Concentracin de Gases


En las siguientes tablas se muestran los valores de precisin intermedia obtenidos para los
niveles de concentracin ms bajos en cada uno de los mtodos de anlisis de concentracin de:
oxgeno en ppm (Tabla B.8), oxgeno en porcentaje (Tabla B.9), nitrgeno en argn (Tabla B.10),
monxido de carbono en porcentaje (Tabla B.11), dixido de carbono en porcentaje (Tabla B.12),
metano en porcentaje (Tabla B.13).

100

Tabla B.8. Valores de varianza obtenidos a partir del ANOVA para el anlisis de precisin
intermedia para el mtodo de anlisis de oxgeno en ppm. Nivel de concentracin 1ppm
Varianza
Repetibilidad,

sr2

0,003

Entre das, sD2

0,003

Entre analistas, sA2


Intermedia de das diferentes,

0,524
sI(D)2

Intermedia de das/analistas diferentes,

0,005

sI(D+A)2

0,529

Tabla B.9. Valores de varianza obtenidos a partir del ANOVA para el anlisis de precisin
intermedia para el mtodo de anlisis de oxgeno en porcentaje. Nivel de concentracin 0,5 %
Varianza
Repetibilidad, sr2
Entre das, sD
Entre analistas,

6E-05

3E-05

sA2

3E-05

Intermedia de das diferentes, sI(D)2

9E-05

Intermedia de das/analistas diferentes, sI(D+A)2

1E-4

Tabla B.10. Valores de varianza obtenidos a partir del ANOVA para el anlisis de precisin
intermedia para el mtodo de anlisis de nitrgeno en argn en ppm. Nivel de concentracin 17
ppm
Varianza
Repetibilidad, sr2

0,1

Entre das, sD2

0,3

Intermedia de das diferentes, sI(D)2

0,4

101

Tabla B.11. Valores de varianza obtenidos a partir del ANOVA para el anlisis de precisin
intermedia para el mtodo de anlisis de monxido de carbono en porcentaje. Nivel de
concentracin 0,1%
Varianza
Repetibilidad,

sr2

1,4E-06

1,9E-05

Entre das, sD

Entre analistas, sA2

5,8E-05

Intermedia de das diferentes, sI(D)2


Intermedia de das/analistas diferentes,

sI(D+A)2

2,0E-05
7,8E-5

Tabla B.12. Valores de varianza obtenidos a partir del ANOVA para el anlisis de precisin
intermedia para el mtodo de anlisis de dixido de carbono en porcentaje. Nivel de
concentracin 0,1%
Varianza
Repetibilidad, sr2

1,3E-06

Entre das, sD2

6,3E-05

sA2

Entre analistas,

Intermedia de das diferentes,

1,0E-05
sI(D)2

Intermedia de das/analistas diferentes, sI(D+A)2

6,4E-05
7,4E-05

Tabla B.13. Valores de varianza obtenidos a partir del ANOVA para el anlisis de precisin
intermedia para el mtodo de anlisis de metano en porcentaje. Nivel de concentracin 0,1 %
Varianza
Repetibilidad,

sr2

1,1E-06

1,9E-05

Entre das, sD

Entre analistas, sA2


Intermedia de das diferentes,

2,9E-5
sI(D)2

Intermedia de das/analistas diferentes,

sI(D+A)2

2,0E-05
5,0E-05

6. Pruebas de t aplicadas para el anlisis de veracidad.


En esta seccin se muestran las pruebas de t aplicadas en los distintos mtodos de anlisis para
cada nivel de concentracin, para comparar las medias obtenidas por los mismos y los valores de

102

referencia reportados en los certificados de los MRC. En las siguientes tablas se muestran las
pruebas de t para el anlisis de veracidad para los mtodos de anlisis de concentracin de gases:
nitrgeno en argn en ppm (Tabla B.14), oxgeno en porcentaje (Tabla B.15), monxido de
carbono en porcentaje (Tabla B.16), dixido de carbono en porcentaje (Tabla B.17) y metano en
porcentaje (Tabla B.18).

Tabla B.14. Prueba de t para el anlisis de veracidad del mtodo de anlisis de nitrgeno en argn
en ppm.

t calculado

MRC 1

MRC 2

MRC 3

MRC 4

0,589

2,038

2,080

0,529

t tabulado(0,05,29)

2,040

Tabla B.15. Prueba de t para el anlisis de veracidad del mtodo de anlisis de oxgeno en
porcentaje.

t calculado

MRC 1

MRC 2

MRC 3

MRC 4

MRC 5

MRC 6

0,153

0,943

1,016

0,644

0,447

0,036

t tabulado(0,05,29)

2,040

Tabla B.16. Prueba de t para el anlisis de veracidad del mtodo de anlisis de monxido de
carbono en porcentaje.

t calculado

MRC 1

MRC 2

MRC 3

MRC 4

0,075

1,149

2,682

0,060

t tabulado(0,05,29)

2,040

Tabla B.17. Prueba de t para el anlisis de veracidad del mtodo de anlisis de dixido de
carbono en porcentaje.

t calculado
t tabulado(0,05,29)

MRC 1

MRC 2

MRC 3

MRC 4

2,780

2,135

0,892

1,392

2,040

103

Tabla B.18. Prueba de t para el anlisis de veracidad del mtodo de anlisis de metano en
porcentaje.

t calculado
t tabulado(0,05,29)

MRC 1

MRC 2

MRC 3

MRC 4

0,607

0,525

0,945

1,377

2,040

7.Grficos de Porcentaje de Recuperacin Aparente para el Anlisis de Veracidad


En las siguientes figuras se muestran los grficos del porcentaje de recuperacin aparente para
los mtodos de anlisis de concentracin de gases: oxgeno en ppm (Figura B.6), oxgeno en
porcentaje (Figura B.7), nitrgeno en argn en ppm (Figura B.8), monxido de carbono en
porcentaje (Figura B.9), dixido de carbono en porcentaje (Figura B.10) y metano en porcentaje
(Figura B.11).

Figura B.6. Grfico del porcentaje de recuperacin aparente para los distintos niveles de
concentracin de los MRC medidos por el mtodo de anlisis de oxgeno en ppm.

104

Figura B.7. Grfico del porcentaje de recuperacin aparente para los distintos niveles de
concentracin de los MRC medidos por el mtodo de anlisis de oxgeno en porcentaje.

Figura B.8. Grfico del porcentaje de recuperacin aparente para los distintos niveles de
concentracin de los MRC medidos por el mtodo de anlisis de nitrgeno en argn en ppm.

105

Figura B.9. Grfico del porcentaje de recuperacin aparente para los distintos niveles de
concentracin de los MRC medidos por el mtodo de anlisis de monxido de carbono en
porcentaje.

Figura B.10. Grfico del porcentaje de recuperacin aparente para los distintos niveles de
concentracin de los MRC medidos por el mtodo de anlisis de dixido de carbono en
porcentaje.

106

Figura B.11. Grfico del porcentaje de recuperacin aparente para los distintos niveles de
concentracin de los MRC medidos por el mtodo de anlisis de metano en porcentaje.

8.Incertidumbre Debida a la Evaluacin de la Linealidad


La evaluacin de la linealidad como fuente de incertidumbre, se realiz por medio del clculo
de incertidumbre de la recta de calibracin para el mtodo de anlisis de concentracin de
monxido de carbono en ppm, se determin utilizando la ecuacin 2.6, a partir de los datos de la
Tabla 4.10 y con los valores de intercepto y pendiente (-0,0917 y 1,0005) obtenidos por la
funcin ESTIMACION LINEAL.

Donde Se, se calcul, a partir de n=150 ( 50 mediciones durante tres das), como:

107

El valor de x0 se calcul para una respuesta del instrumento (y0) igual a 4,92

El termin Sxx se calcul a partir de los valores:

Finalmente se obtuvo la incertidumbre debida a la recta de calibracin como:

108

APNDICE C
El siguiente apndice incluye algunos de los documentos complementarios a la informacin
presentada en los captulos de este trabajo.

1.Certificado de un Material de Referencia Certificado


En la Figura C.1 se muestra un certificado de un MRC importado, especficamente de Praxair,
Mxico. En dicho certificado se especifican, adems de los componentes del MRC, los valores de
concentracin de cada uno, los instrumentos de medicin empleados, la incertidumbre expandida
de los resultados reportados junto con el factor de cobertura k empleado y la trazabilidad del
MRC aquellos utilizados en la medicin.

2.Cromatogramas
En la Figura C.2 se muestra un cromatograma tpico del anlisis por cromatografa. En dicho
grfico se especifican los tiempos de retencin de los compuestos en minutos y las reas de los
picos de cada uno de ellos en pA. El cromatograma mostrado corresponde al anlisis de
concentracin de CO,CO2 y CH4 en porcentaje utilizando el detector FID (mtodo ionizacin de
la llama).

3.Formato para el Registro de Resultados en las Validaciones


En la Figura C.3 se muestra el modelo del formato desarrollado en la pasasnta para el reporte
adecuado de la informacin y los resultados generados durante los anlisis en el proceso de
validacin.

109

Figura C.1. Certificado de un Material de Referencia Importado

110

Figura C.1. Certificado de un Material de Referencia Importado. Cont.

111

CO

400

300

2. 015 -

1. 411 -

350

CO2

pA

1. 513 -

CH4

FID1 A, (703Z\SIG10001.D)

250
200
150
100
50
0.25

0.5

0.75

1.25

1.5

1.75

2.25

min

Figura C.2 Cromatograma del anlisis de monxido de carbono, dixido de carbono y metano en
porcentaje.

112

Praxair Venezuela, S.C.A.


LABORATORIO DE GASES ESPECIALES
VALIDACIN DE MTODOS ANLITICOS
FECHA:
ANALISTA:

EQUIPO:
MTODO DE ANLISIS:
MRC DE CALIBRACIN
COMPOSICIN
CONCENTRACIN

CDIGO

MATERIAL DE REFERENCIA

COMPOSICIN

CONCENTRACIN

N CERTIFICADO

HUMEDAD
(%)

LECTURA
ACTUAL

PRESIN
ACTUAL

PRESIN ACTUAL

Uref

CERTIFICADO

TEMP.(C)

OBSERVACIONES:

Figura C.3. Formato para el registro de resultados de anlisis durante la validacin.