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1.

Como lleg Robert Koch a desarrollar el trabajo sobre la enfermedad del


Clera?
Koch se apresur a regresar de Egipto a Berln, llevando unas cajas misteriosas con
preparaciones teidas con poderosos colorantes; preparaciones que encerraban un
curioso microbio de la misma forma de una coma. Koch present un Informe al
Ministerio del Interior, en el que deca: En todos los casos de clera he encontrado
el mismo microbio; pero no he podido comprobar que sea el causante. Enveme
usted a la India, en donde siempre hay clera latente, pues lo que hasta ahora he
descubierto justifica esta peticin ma. Koch encontr su bacilo coma en cada uno
de los cuarenta cadveres que examin; descubri el mismo bacilo, puro, en gelatina
de caldo de carne, y una vez que lo tuvo aprisionado en los tubos, estudio las
costumbres de esta planta microscpica y mal intencionada, como apareca
rpidamente en cuanto se desecaba lo ms mnimo y cmo se insinuaba en las
personas sanas merced a las ropas manchadas por las que haban muerto de clera.
Descubri el bacilo coma en el agua ptrida de las cisternas, en torno de las cuales
se amontonaban las miserables chozas de los indios, tristes chamizos de donde
salan los lamentos de los que irremisiblemente moran vctimas de clera.
2. Cuales epidemias se presentaron con mayor fuerza en Europa?
El sarampin
mat a dos millones ms de nativos mexicanos en la dcada de 1600. Entre 1356
y 1894 Europa vivi tres veces la presencia de la peste bubnica o negra debido al
deambular de la enfermedad a travs de las rutas comerciales de la poca.
La Influenza
La epidemia, considerada por algunos la primera del mundo globalizado, comenz
antes que terminara la Primera Guerra Mundial (1918). Tras la guerra, las
condiciones de salubridad casi inexistentes en una Europa en ruinas presento la
situacin ideal para distribucin y propagacin del virus. La falta de comida sana,
de agua potable, el agotamiento de las tropas, el inadecuado equipamiento en el
vestir de los mismos y el clima fro y ventoso, cicern fcil su propagacin. Tras
atacar a Europa, el virus se esparci por Amrica, frica, Australia y Asia debido a
la migracin de poblacin que busc nuevas oportunidades de vida en otras
regiones del planeta. Esta pandemia, segn registros de la Organizacin Mundial
de la Salud (OMS), caus entre 1918 y 1920 unos 40 a 100 millones de muertes y
fue catalogada como una pandemia de nivel 5 (mismo nivel que la OMS le ha
dado a la actual gripa Porcina).
La Tifus
En la antigedad, la enfermedad epidmica en tiempo de guerra era el tifus,
llamada algunas veces "fiebre de los campamentos" debido a su patrn de estallar
en tiempos de penalidades. Emergiendo durante las Cruzadas, tuvo su primer
impacto en Europa en 1489, en Espaa. Durante la lucha entre los espaoles
cristianos y los musulmanes en Granada, los espaoles perdieron 3.000 efectivos
por bajas de guerra y 20.000 por tifus. En 1528 los franceses perdieron 18.000
efectivos de sus tropas en Italia y perdieron la supremaca en Italia en favor de los

espaoles. En 1542, 30.000 personas murieron de tifus mientras combatan a los


otomanos en los Balcanes. La enfermedad tambin jug un papel de importancia
en la destruccin de la Grande Arme de Napolen en Rusia en 1811.
EL COLERA
El clera ha producido varias epidemias, y unas siete pandemias mundiales,
siendo la primera la que partiendo de la India (zona de Bengala) asol Europa y
Amrica a principios del siglo (1816-1826). Esta primera pandemia de Clera
comenz en Bengala y se expandi a travs de la India hacia 1820. Se extendi
hasta la China y el Mar Caspio antes de disminuir. La segunda pandemia (1829
1851) alcanz Europa, Londres en 1832, Nueva York en el mismo ao, y la costa
del Pacfico en Norte Amrica por 1834. La tercera pandemia (18521860)
principalmente afect a Rusia, con ms de un milln de muertos. La cuarta
pandemia (18631875) se extendi en su mayor parte por Europa y frica. La
sexta pandemia (18991923) tuvo pocos efectos en Europa gracias a los
progresos en salud pblica, pero Rusia fue gravemente afectada de nuevo. La
sptima pandemia, llamada El Tor por la cepa, comenz en Indonesia en 1961 y
alcanz Bangladesh en 1963, India en 1964, y la URSS en 1966.En enero de 1991
surgi una epidemia de clera en varios pases del norte de Amrica del Sur que
se difundi rpidamente.
LA PESTE NEGRA
La peste negra fue una devastadora epidemia que asol Europa en el siglo XIV y
que, se estima, diezm cerca de un tercio de la poblacin del continente europeo.
La mayor parte de los cientficos cree que la peste negra fue un brote de peste
bubnica, una terrible enfermedad que se ha extendido en forma de epidemia
varias veces a lo largo de la historia.
3- Se pensaba que los monjes mendicantes, los peregrinos, los soldados
que regresaban a sus casas eran el vehculo para la introduccin de las
grandes epidemias de un pas a otro. Esto pudo ser en parte cierto, pero sin
duda el comercio fue ms peligroso ya que los barcos llegaban a puerto y
descargaban junto con las mercancas las ratas infectadas procedentes de
pases donde la enfermedad era endmica. Este fue sin duda el medio
mayor de difusin
3. Que factores influyeron para que se desplegaran las grandes las epidemias en
Europa?
Con el auge de la revolucin industrial y el crecimiento de las ciudades
industriales, en las que los pobres se hacinaban en viviendas sucias y
escasas de agua, viviendo como animales, las enfermedades infecciosas
como la tifoidea y el clera llegaron a proporciones jams conocidas. Los
mdicos y los estadistas comenzaron a preocuparse por las condiciones de
vida de los ciudadanos, en especial la de los trabajadores; se cre as un
sistema de control de enfermedades, el sanitarismo, que aun

desconociendo la etiologa de las enfermedades consigui abatir el ndice


de mortalidad a travs de la dotacin de aguas y la construccin de
drenajes.
La eliminacin de excretas en las grandes ciudades era, sin lugar a dudas,
el mayor problema de salud pblica. Como no existan excusados ni
drenajes, la gente acumulaban el excremento en cubetas tapadas y
cuando estas se llenaban las botaban por la ventana hacia la calle
produciendo una suciedad y hediondez.
4. que es sanitarismo?
SANITARISMO
El sanitarismo es la expresin de una concepcin ecolgica de la salud, segn la
cual, esta es la interaccin de dos factores: husped y agente en el ambiente en el
cual ambos se desarrollan. Dentro de ese ambiente se incorpora a la sociedad,
mas no a una sociedad histrica concreta, si no a una sociedad en abstracto,
concebida como una formacin a histrica, regida por leyes naturales anlogas a
las biolgicas. Una vez aprendido el proceso salud-enfermo de esta manera
integral y fenomenolgica, el sanitarismo propone no solo tratar al individuo de
acuerdo con el biologismo, si no con medidas sanitarias que plantea soluciones
colectivas a problemas ecolgicos.
5. Como se controlaron las epidemias en Europa?
Las epidemias se lograron controlar gracias a la implementacin de drenajes, la
coleccin de excretas y la dotacin de agua potable. Tambin se hicieron reformas
en los hospitales yaqu los grmenes eran causantes de enfermedades, adems una
de las normas implementadas fue la cuarentena ya que permiti el control de las
enfermedades infecciosas ya que se obligaban a los viajeros a permanecer en estado
de aislamiento durante 30 o 40 das.
6. como logr koch describir la va de entrada del bacilo de koch y del bacilo
antrhacis al ser humano?
El bacilo
antrhacis a travs de una astillita de madera, que limpi
cuidadosamente y calent en el horno, para matar todos los microbios que
accidentalmente pudiera tener, la moj en sangre, de ovejas muertas de carbunco,
sangre repleta de aquellos filamentos y bastoncitos inmviles y misteriosos, y
despus, sujeto a un ratn, con un bistur le hizo, en la base de la cola, un corte bien
limpio, en el que insert delicadamente la astillita empapada en sangre. Coloc el
ratn en una jaula aparte, se lav las manos y, en un estado de ensimismamiento
consciente, se fue a ver lo que le pasaba a un nio enfermo.
A la maana siguiente, entr Koch en su laboratorio casero, y lo encontr boca
arriba tieso con los pelos de punta y su blancura de ayer convertida en un azul
plomizo, y las cuatro patas apuntando al cielo. Calent los bisturs, sujet el animal

a una tabla, para hacerle la diseccin, y le extrajo el hgado y los pulmones,


registrando de paso los rincones. Con un bistur bien limpio y calentado abri el
bazo y puso sobre un portaobjetos una gota del lquido negruzco que exudaba.
Pasado un rato, murmur: Aqu estn los bastoncitos y los filamentos, tan
abundantes en el cuerpo de este ratn como en la gota de sangre que utilic ayer
para empapar la astillita.
El bacilo de koch. Record las explicaciones sobre la transmisibilidad de la
infeccin, sobre la alta frecuencia del contagio familiar y ciertas
experiencias observadas en su mismo laboratorio (a veces los conejillos de
indios sanos que estaban en la misma sala de los animales infectados,
aunque en diferentes, jaulas adquiran espontneamente la tuberculosis),
Koch concluyo que solo exista una va posible: la inhalacin.
7. cules son los postulados de koch? explique usando un mapa conceptual.

El microorganismo debe de estar presente en todos los individuos


enfermos.

El microorganismo debe poder aislarse del hospedador y ser crecido


en cultivo puro.

La inoculacin del microorganismo crecido en cultivo puro a animales


sanos debe provocar la aparicin de sntomas especficos de la
enfermedad en cuestin.

El microorganismo debe poder ser re aislado del hospedador


infectado de forma experimental.

8. que personajes mencionados en los libros reconocieron la labor de koch?


Edward trudeau, el profesor cohn, El profesor Cohnheim, Dr Loeffler y Dr
Graffky, el emperador, pasteur.
9. mencione los aportes de louis pasteur a la ciencia?
Descubri 4 cidos tartricos y no 2.

1870: Estudia el problema (pelvine) del gusano de la seda:


descubre los agentes de la enfermedad y descubre el modo de
evitarlas. El observo que los gusanos presentaban manchas y se
moran entonces llego a la conclusin de que el gusano de cera era
atacado por un hongo.
Sintetizo varias vacunas (rabia, ntrax).
En relacin a las fermentaciones. El descubrimiento de un fenmeno
biolgico de gran alcance, al demostrar que la fermentacin es
debida a la presencia de microorganismos. Ello, con sus estudios de
desinfeccin y esterilizacin, sirvi de base para el desarrollo de las
tcnicas de pasteurizacin. Estos descubrimientos suponen un
nuevo camino para la medicina, y con ellos la bacteriologa se
DESARROLLA COMO UNA NUEVA RAMA DE LA CIENCIA
MEDICA.
En 1857: Fermentacin lctica: descubrimiento de la bacteria que la
produce.
En 1860: Fermentacin butrica: carcter anaerobio de sus agentes.
1861-1876: Fermentacin alcohlica, invencin de la pasteurizacin
para evitar las enfermedades del vino y de la cerveza. Pasteur
demuestra que los hongos de los vinos, siempre presentes, son los
causantes de la fermentacin actica, responsable de malograr la
formacin y conservacin del vino. Seala que si se calienta el vino
durante un minuto con la botella cerrada (69-75C), se evita su
descomposicin.
Crea
ENTONCES
EL
PROCESO
DE
PASTEURIZACION, que constituye una base fundamental de la
preparacin de alimentos del tipo conservas y lcteos.
En relacin a las enfermedades contagiosas de los animales y el
hombre:
1877: Estudia el Carbunco: trabajando en el control de la
enfermedad (carbonosa) conocida como enfermedad de los
campos malditos de Beauce, por la gran mortandad que produca
en los animales vacunos; investiga y desarrolla una vacuna contra
este flagelo, logrando un xito publicitario sin precedentes para la
ciencia, con un experimento pblico en Poeulli la Fort.
Teora de la generacin espontnea.

10.
que logro derrotar la teora de la generacin espontnea? explique
mediante una lnea de tiempo de la historia de la microbiologa involucrada en
esta teora mencionando los defensores y detractores de la misma.

11. realice un cuadro comparativo de las estructuras de los dos tipos de clulas,
tanto en las diferencias como en similitudes.
Clulas eucariotas
Las clulas eucariotas son ms
complejas y ms recientes.
Son clulas que presentan un ncleo
bien diferenciado ya que poseen una
membrana nuclear que rodea al ADN.
Son los organismos pluricelulares.
*Poseen un ncleo delimitado por
una doble membrana.
*Poseen complejos supramoleculares.
*Poseen ms ADN
* Tienen la membrana celular
presente.
* Tiene mltiples cromosomas.
* Su divisin celular se produce en la
mitosis o meiosis.
* Tiene mitocondrias, cloroplastos,
pared celular, nuclolos, retculo
endoplsmico y rganos de
locomocin.
Similitudes de eucariotas y
Procariotas
Ambas poseen membrana celular
que las rodea.
Poseen citoplasma.
Ambas contienen un ncleo.
Poseen mitocondrias.

Clulas Procariotas
*Son las algas y bacterias.
*Tienen forma esfrica, ovoide, de
bastn y espirada.
*Poseen menos ADN
*No poseen ncleo celular
* En el citoplasma o citosol ocurren los
procesos qumicos que ayudan al
crecimiento de la clula.
* No Tiene membrana celular.
*Tiene un nico cromosoma.
*Su divisin celular se produce por fisin
binaria.
*No tienen cloroplastos, ni mitocondrias,
ni nuclolos ni retculo endoplsmico,
pero si tiene pared celular y rganos de
locomocin

12. que factores definen el crecimiento de los microorganismos? defina y explique.


Crecimiento Microbiano
Los requisitos para el crecimiento microbiano incluyen factores fsicos y qumicos.
Entre los factores fsicos tenemos la temperatura, el pH y la presin osmtica. Los
factores qumicos necesarios para el crecimiento bacterial son diversos elementos
constitutivos de las clulas.
Requisitos Fisicos
Temperatura
El patrn de crecimiento bacterial se ve profundamente influenciado por la
temperatura. La temperatura a crecimiento ptimo permite el crecimiento ms
rpido de las bacterias durante un perodo de tiempo, usualmente entre 12 y 14
horas. La temperatura mnima de crecimiento es aquella temperatura menor a la
cual la especie puede crecer. La Temperatura de crecimiento mximo es la
temperatura mayor en la cual el crecimiento es posible. Los microorganismos se
dividen en 3 grandes grupos en base a su preferencia de rango de temperatura.
Sicrfilos son capaces de crecer a 0C menos, pero crecen mejor a una
temperatura mayor. Estas bacterias son capaces de crecer a 0C, pero tienen una
temperatura ptima de 15C menos y una mxima de aproximadamente 20C.
Los sicrfilos estrictos mueren si se exponen a la temperatura de saln. Un ejemplo
de sicrfilos estrictos son las bacterias que crecen en la Antrtica. An a una
temperatura ptima estas bacterias se tardan en crecer de 2 a 3 semanas
pH
En la mayora de las bacterias el crecimiento ptimo es entre 6.5 y 7.5. Muy pocas
bacterias crecen a un pH menor de 4.0. Sin embargo, las bacterias clasificadas
como acidfilos son tolerantes a la acidez, un ejemplo es Thiobacillus thiodans que
crece a un pH ptimo de entre 2.0 a 3.5.
Presin osmtica
Los microorganismos requieren agua para su crecimiento, adems para obtener
nutrientes de sta. Una presin osmtica alta causa prdida de agua y plasmlisis de
la clula, por lo que se utiliza este fenmeno para conservar los alimentos ya sea
aadiendo sal o azcar, lo que previene el crecimiento bacterial. Sin embargo
algunas bacterias se han adaptado a altas concentraciones de sal, a stas se les
conoce como halfilos extremos. Por otro lado, los halfilos facultativos no

requieren una alta concentracin de sal, pero pueden crecer hasta una concentracin
de 2%. Otras bacterias pueden tolerar hasta un 15% de sal.
Requisitos Qumicos
Carbono (C) todos los organismos requieren C para sintetizar los componentes
celulares.
Nitrgeno, azufre. Y fsforo. Estos elementos se requieren para la sntesis de DNA,
RNA, protenas y ATP. Las bacterias pueden obtener nitrgeno (N) ya sea fijndolo
directamente de la atmsfera, como por ejemplo el gnero bacteriano Rhizobium.
Tambin pueden obtener este elemento de compuestos inorgnicos que contengan N
como nitritos, nitratos, sales de amonia o amino cidos. Las bacterias pueden
obtener azufre de iones de sulfato, sulfito de hidrgeno y amino cidos con azufre.
El fsforo es esencial para la sntesis de cidos nucleicos y membranas celulares.
Una fuente para obtener fsforo son los iones de fosfato y el ATP.
Elementos trazas. Otros elementos como hierro, cobre, molibdeno y zinc son
requeridos por los microorganismos en pequeas cantidades. Usualmente tienen
funcin de cofactores.
Oxgeno. No todos los microorganismos necesitan 02, sin embargo, muchas formas
de vida requieren oxgeno para llevar a cabo respiracin aerbica. Los
microorganismos que utilizan oxgeno molecular son llamados aerbicos. Estos se
clasifican en aerbicos obligados que son los que requieren oxgenos molecular para
vivir, y los aerbicos facultativos los cuales utilizan el oxgeno molecular cuando
est presente, pero en su ausencia continan su crecimiento por la va de
fermentacin o respiracin anaerbica, un ejemplo es Escherichia coli. Por otro
lado tenemos los anaerbico obligados que necesitan ausencia de oxgeno molecular
para crecer y donde este generalmente es txico, un ejemplo es el
gnero Clostridium.
Factores orgnicos de crecimiento Estos son compuestos orgnicos esenciales que
el organismo no puede sintetizar, aqu se incluyen las vitaminas, los amino cidos,
las purinas y las pirimidinas.
Medios de cultivo
Es un material nutriente preparado para el crecimiento de microorganismos en el
laboratorio. Un medio qumicamente definido es aquel donde su composicin
qumica exacta es conocida. Un medio complejo es aquel donde su composicin
exacta vara de un lote a otro, ya que este medio esta hecho de nutrientes como
extractos de levaduras, carne, partes de plantas o protenas digeridas. Hay medios
especficos para crecer anaerbicos, es estos se utiliza un ingrediente reductor como

tioglicolato de sodio, que se combina con el oxgeno molecular disuelto para


eliminarlo del medio.
13. como se clasifican los microorganismos segn los factores de crecimiento
microbiano.
Segn la temperatura se clasifican en:

14. que son micronutrientes y macronutrientes?


Macronutrientes: son aquellos nutrientes que suministran la mayor parte de la
energa metablica del organismo. Los principales son glcidos, protenas y lpidos.
Se diferencian de los micronutrientes ya que estos son necesarios para producir
energa.
Micronutrientes: son sustancias que el organismo de los seres vivos necesita en
pequeas dosis. Son indispensables para los diferentes procesos bioqumicos y
metablicos del organismo.
Algunos de los ms importantes micronutrientes son el yodo, hierro y la vitamina A
que son esenciales para el crecimiento fsico, el desarrollo de las funciones
cognitivas.
15. Que son medios de cultivo; segn su naturaleza como se clasifican?
De manera general se denomina medio de cultivo a cualquier material que
presente una adecuada combinacin de nutrientes para permitir el
crecimiento o el incremento del nmero de clulas de una poblacin
microbiana. ULTIVO DE LOS MICROORGANISMOS 2 En los Laboratorios
de Microbiologa se utiliza una gran variedad de medios de cultivos para
mantener las cepas, aislar o identificar microorganismos con varias
finalidades: determinar la existencia de contaminacin de alimentos,

medicamentos o cosmticos; diagnosticar alguna enfermedad, elaboracin


de vacunas bacterianas, etc.
CLASIFICACIN DE LOS MEDIOS DE CULTIVO
Los medios de cultivo pueden clasificarse segn diferentes criterios, pero los ms
importantes son aquellos que se basan en:
a) Su consistencia
b) Su utilizacin
c) Su composicin
d) Su origen
SEGN SU ESTADO FSICO (CONSISTENCIA).
1) Medios lquidos: Son los que se presentan en este estado, denominndose por
esta razn caldos. El medio lquido ms utilizado es el llamado caldo nutritivo,
compuesto principalmente de extracto de carne, peptona y agua. Se utiliza
fundamentalmente cuando se pretende la obtencin de una suspensin bacteriana de
una determinada concentracin.
2) Medios slidos: Se preparan a partir de los medios lquidos, agregndoles un
agente gelificante. Los ms utilizados son la gelatina y el agar. Gelatina: Es una
protena animal obtenida de los huesos. Tiene el inconveniente de que es hidrolizada
por muchas bacterias, y adems su uso est muy limitado porque su punto de fusin
es bajo (lica a temperatura ambiente) razn por la que no puede utilizarse para
cultivos a 37C, que es la tempera ptima de crecimiento para muchos
microorganismos. Agar-agar: Es un polmero de azcares obtenido de algas
marinas. Se trata de una molcula insoluble enagua pero soluble en agua caliente;
una solucin al 1,5% p/v forma un gel firme entre 32 y 39C y no se funde por
debajo de 85C. Funde a 90C y solidifica una vez fundido alrededor de los 45C.
Tiene el inconveniente de que introduce compuestos orgnicos indefinidos que
pueden falsear los resultados de las necesidades nutritivas de un microorganismo.
Aunque el agar es una mezcla de polisacridos, Araki, en 1937, los dividi en dos
grupos:- agarosa, con poco sulfato, libre de cido pirvico, y- agaropectina, con
mucho sulfato y gran cantidad de cenizas. La proporcin de agarosa a agaropectina
en el agar vara segn el alga de origen. El agar puede utilizarse para diferentes
fines, aunque los ms importantes son: agar comercial para la industria alimenticia,
agar bacteriolgico, agares purificados y agarosa, utilizada para electroforesis en
gel. Aproximadamente la mitad de todo el agar que se produce, se utiliza en trabajo
microbiolgico, por lo que es importante la ausencia de metales txicos.

3) Medios semislidos: Se preparan a partir de los medios lquidos, agregando a


stos un agente solidificante en una proporcin menor que para preparar medios
slidos. Uno de sus usos es la investigacin de la movilidad de las bacterias

7) Medios de multiplicacin: Sirven para obtener una gran cantidad de clulas a


partir de un microorganismo ya aislado. Se emplean en la obtencin de vacunas, en
la investigacin y en la industria. Los medios ms adecuados para la multiplicacin
suelen ser lquidos. El caldo-infusin cerebro-corazn (BHI), es un ejemplo tpico
de estos medios.
8) Medios de conservacin: Se utilizan para conservar una cepa que, por diversas
razones nos interese mantener. Fundamentalmente se utilizan como controles de
calidad de las pruebas y reactivos utilizados en el Laboratorio de Microbiologa. En
el laboratorio se pueden conservar las cepas de tres formas:
a) haciendo pases peridicos de placa a placa,
b) mediante liofilizacin de una suspensin bacteriana, y
c) congelando las cepas en leche descremada estril al 0,1%.
9) Medios de transporte: Se usan para el transporte de muestras clnicas que no
pueden sembrarse inmediatamente. Su utilizacin debe hacerse introduciendo la
torunda con la que se obtuvo la muestra en el interior del medio (generalmente en
un tubo). Son ejemplos tpicos de este grupo los medios de Stuart-Amies, CaryBlair, etc.
ATENDIENDO A SU COMPOSICIN.
Segn las sustancias que entren a formar parte en su composicin, los medios de
cultivo pueden ser clasificados en:
1) Medios complejos: Fueron los primeros utilizados, y los ms empleados se
preparan a partir de tejidos animales, y ms raramente de vegetales. Su composicin
no es exactamente definida, y por consiguiente no es rigurosamente constante. Esto
puede tener ciertos inconvenientes en condiciones experimentales, donde la
reproductibilidad no podr ser exacta.
2) Medios sintticos: Son aquellos que contienen en su composicin
exclusivamente sustancias qumicas conocidas y disueltas en agua destilada en

proporciones determinadas, resultando un medio de composicin perfectamente


definida.
3) Medios semisintticos: El gran nmero de factores de crecimiento exigidos para
ciertos grmenes hace que la fabricacin de un medio sinttico para estos grmenes
sea imposible o demasiado cara. En este caso se aportan los factores de crecimiento
bajo la forma de un extracto orgnico complejo (extracto de levadura, extracto de
tejidos, etc.).Ciertos grmenes no crecen en ningn medio por muy enriquecido que
est ste, hacindolo exclusivamente en clulas vivas con unas caractersticas
determinadas. Ejemplos de este tipo son, aparte de los virus, las Chlamydias,
Rickettsias, etc.
Segn su origen:
a) NATURALES: son los preparados a partir de sustancias naturales de origen
animal o vegetal como se extractos de tejidos o infusiones y cuya composicin
qumica no se conoce exactamente.
b) SINTTICOS: son los medios que contienen una composicin qumica definida
cuali y cuantitativamente. Se utilizan para obtener resultados reproducibles.
c) SEMISINTTICOS son los sintticos a los que se les aaden factores de
crecimiento bajo una forma de un extracto orgnico complejo, como por ejemplo
extracto de levadura.

16. Como se clasifican los medios de cultivo segn la naturaleza qumica y


funcionalidad?
SEGN SU UTILIZACIN.
1) Medios comunes: Son aquellos que poseen los componentes mnimos para que
pueda producirse el crecimiento de bacterias que no necesiten requerimientos
especiales. El medio ms conocido de este grupo es el agar nutritivo o agar comn,
que resulta de la adicin de agar al caldo nutritivo. Otros representantes de este
grupo son el agar tripticase de soja, el agar Columbia, etc.
2) Medios de enriquecimiento: Son aquellos que, adems de las sustancias
nutritivas normales, incorporan una serie de factores indispensables para el
crecimiento de microorganismos exigentes. Este enriquecimiento se hace por
adicin de sangre u otros productos biolgicos (sangre, suero, leche, huevo, bilis,
etc.) que aportan dichos factores.
3) Medios selectivos: Son medios utilizados para favorecer el crecimiento de
ciertas bacterias contenidas en una poblacin polimicrobiana. El fundamento de

estos medios consiste en facilitar nutricionalmente el crecimiento de una poblacin


microbiana especfica. Un ejemplo de medio selectivo es el caldo selenito, que se
utiliza para favorecer el crecimiento de salmonellas y frenar el del resto de
enterobacterias.
4) Medios inhibidores: Cuando las sustancias aadidas a un medio selectivo
impiden totalmente el crecimiento de una poblacin microbiana, se denomina
inhibidor. Los medios inhibidores podran considerarse como una variante ms
restrictiva de los medios selectivos. Los medios inhibidores se consiguen
habitualmente por adicin de sustancias antimicrobianas o de cualquier otra que
inhiba completamente el desarrollo de una poblacin determinada
5) Medios diferenciales: Se utilizan para poner en evidencia caractersticas
bioqumicas que ayuden a diferenciar gneros o especies. La adicin de un azcar
fermentable o un sustrato metabolizable se utilizan para este fin. El medio
MacConkey es un medio diferencial porque permite distinguir los grmenes que
fermentan la lactosa de aquellos que no lo hacen.
6) Medios de identificacin: Son los destinados a comprobar alguna cualidad
especfica que puede servirnos para reconocer la identidad de un microorganismo.
Estos medios han de poseer los elementos necesarios para asegurar el crecimiento
de los microorganismos, el sustrato especfico que vaya a ser metabolizado y el
indicador que nos muestre el resultado. El agar Kligler, el medio de Simmons y en
general, cualquier medio al que se le haya aadido un elemento diferencial de un
microorganismo, son medios utilizados en identificacin.

17. Que son inhibidores en los medios de cultivo, para que se utilizan? explique
18. Que son indicadores de pH, mencinelos. Qu funcin cumplen en los medios
de cultivo.

En los diferentes medios de cultivo se encuentran numerosos materiales de


enriquecimiento como hidratos de carbono, suero, sangre completa, bilis, etc. Los
hidratos de Carbono se adicionan por dos motivos fundamentales: para
incrementar el valor nutritivo del medio y para detectar reacciones de fermentacin
de los microorganismos que ayuden a identificarlos. El suero y la sangre completa
se aaden para promover el crecimiento de los microorganismos menos
resistentes.

Tambin se aaden colorantes que actan como indicadores para detectar, por
ejemplo, la formacin de cido o como inhibidores del crecimiento de unas
bacterias y no de otras (el Rojo Fenol se usa como indicador ya que es rojo en pH
bsico y amarillo en pH cido. La Violeta de Genciana se usa como inhibidor ya
que impide el crecimiento de la mayora de las bacterias Gram-positivas).

19- Como se mide o como se hace el conteo de microorganismos?


( Medicin de crecimiento de los microorganismos). Qu mtodos existen,
explique
- El conteo bacteriano seala la magnitud de la poblacin total bacteriana. En
ese sentido se puede determinar por diversas tcnicas que se basan en algunos
de los siguientes tipos de medida: cuenta celular (directamente al microscopio o
mediante un contador electrnico de partculas o indirectamente con la cuenta de
colonias), masa celular (en forma directa pesando el contenido celular del
nitrgeno o indirectamente por turbidimetra, proporcional al nmero de clulas) y
actividad celular (indirectamente relacionando el grado de actividad bioqumica al
tamao de la poblacin bacteriana). Existen muchos medios diferenciales, en la
prctica rutinaria se usan los siguientes:
Conteo en caja de petri
Mtodo ms usado para contar bacterias. Un caldo de
cultivo con microorganismos es diluido y posteriormente muestras del mismo son
distribuidas en la caja de petri contenedora de agar. Es de suponerse que
cada clula se dividir en sus mltiples alrededores para producir colonias
separadas en el agar. Cada clula es llamada unidad formadora de
colonias (UFC). Despus de la incubacin, el nmero de colonias se reflejar en el
nmero de clulas UFC originalmente presentes. Es importante considerar un
nmero limitado de colonias pues de no ser as, stas pueden sobre poblarse y
dificultar el conteo de las mismas (rango sugerido de acuerdo a FDA 25-250
colonias). El conteo se facilita utilizando un contador. Este mtodo es deseable
porque arroja el total de clulas viables (slo clulas vivas); en contraste con el
conteo microscpico y el conteo de peso seco. Una desventaja radica en el tiempo
que requiere para producir las colonias, ya que se necesitan como mnimo
veinticuatro horas o ms. Por otra parte, no es cien por ciento fiable porque
generalmente las colonias crecen unidas en cadenas o en grupos.

Conteo por filtracin

Es realizado cuando la cantidad de bacterias es muy pequea, como en casos de


lagos y arroyos relativamente puros. En esta tcnica se necesitan al menos 100
mL de agua que atraviesen una membrana delgada de un filtro, con poros tan
pequeos que no permitan el paso de bacterias, de esta forma stas son retenidas
en la superficie del filtro.
Posteriormente el filtro es transferido a una caja de petri que cuenta con un caldo
nutritivo, en la cual las colonias surgen de las bacterias en la superficie del filtro.
Las colonias bacterianas formadas por este mtodo son distintivas cuando ocupan
un medio diferencial.
Este mtodo es aplicado frecuentemente en la deteccin y enumeracin
de bacterias coliformes, las cuales son indicadores de contaminacin fecal en la
comida o en el agua.
Mtodo del nmero ms probable (NMP)
Es una tcnica de estimacin estadstica basada en el hecho que a mayor nmero
de bacterias en una muestra, mayor ser la dilucin necesitada para reducir la
densidad hasta el punto en que ninguna bacteria se le permita crecer en la serie
de tubos de dilucin. Muestras microbianas son aadidas a tubos con caldos de
lactosa y la presencia o ausencia de gas formado en la fermentacin y da un
estimado de nmero de clulas. Este mtodo es ms til cuando las bacterias que
estn siendo contados no crecern en medios slidos, como en el caso de
Chemoautotrof phic nitrifying bacteria. Tambin es til cuando el crecimiento de la
bacteria es en un medio lquido diferencial, usado para identificar microbios, como
en bacterias coliformes. El NMP es la nica afirmacin en la cual existe 95% de
probabilidad que la poblacin bacteriana sea de rango correcto, siendo el nmero
estadstico ms probable.
Determinacin directa por microscopio
Las clulas se pueden contar en un frote teido, como es el caso del Mtodo de
Breed, colocando en la preparacin un volumen conocido de la suspensin de
clulas sobre un rea conocida del portaobjetos. Despus de haber fijado y teido
el frote, es posible contar con un microscopio las bacterias.
Como no es prctico recorrer toda el rea, se cuenta el nmero de clulas en unos
cuantos campos microscpicos seleccionados al azar. Si el dimetro del campo
microscpico se mide con micrmetro objetivo, se puede calcular fcilmente el
rea, entonces el nmero de campos en 1 cm2 se multiplicar por el promedio del
nmero de clulas por campo y despus por 100 (si se vierte 0.01 mL) el resultado
ser igual al nmero de clulas por mililitro. Este mtodo es susceptible a muchas
crticas debido a su falta de uniformidad al momento de hacer el frote.
Mtodo de turbiedad
Para algunos experimentos, es necesario estimar turbiedad, ya que es una forma
prctica de monitorear el crecimiento bacteriano. Como una bacteria se multiplica
en un medio lquido, ste se torna turbio o de aspecto nublado por las clulas. El
instrumento usado para medir la turbiedad es un espectrofotmetro (colormetro).
En el espectrofotmetro, un haz de luz es transmitido a travs de la suspensin

bacteriana a un detector sensible a la luz. Mientras incremente el nmero de


bacterias, menor ser la luz captada por el detector. Este cambio en la luz se
registrar en la escala del instrumento como el porcentaje de transmisin. Tambin
se registra una expresin logartmica llamada absorbancia (algunas veces
nombrada densidad ptica), un valor derivado del porcentaje de transmisin que
puede ser reportado. Ms de un milln de clulas por milmetro deben estar
presentes para que la primera seal de turbiedad sea visible. Aproximadamente de
10 millones a 100 millones de clulas por mililitro son necesitadas para hacer una
suspensin suficientemente turbia para leer en el espectrofotmetro. La turbiedad
no es til para medir contaminacin en lquidos por la pequea cantidad relativa de
bacterias.
Determinacin del peso seco en las clulas
Es el mtodo ms directo para las mediciones cuantitativas de la masa celular y
probablemente el ms fcilmente realizable y reproducible, aunque se debe aplicar
slo en suspensiones celulares muy densas y las clulas deben ser lavadas muy
bien para removerles todo material extra. Se utiliza para bacterias filamentosas y
mohos. En este proceso, el fungus es removido del medio de crecimiento, filtrado
para remover material extrao, drenado en un secador y despus es pesado.

20. Que pruebas se utilizan para identificar un microorganismo. Explique con un


ejemplo.
Pruebas Primarias.
Para la identificacin de las bacterias en el laboratorio es importante conocer sus
caractersticas morfolgicas, la reaccin a la tincin de Gram, agrupacin, propiedades,
morfologa colonial, reacciones metablicas como produccin de enzimas y reacciones
de xido-fermentacin.
La identificacin bacteriana primaria se basa en los siguientes puntos:
Tincin de Gram: Revela la forma de la bacteria, agrupacin y grupo taxonmico al
que pertenece: Gram positivo o Gram negativo.
Tincin de Ziehl Neelsen: Las bacterias Alcohol-cido resistentes (BAAR), son
difciles de cultivar, tal vez y en un agar sangre muestre algo de crecimiento, por eso es
til esta tincin de identificacin primaria.
Tincin de esporas: La espora es un mecanismo de defensa generalmente de los
gneros Bacillus y Clostridium.
Prueba de catalasa: La catalasa es una enzima que descompone al perxido de
hidrgeno en oxgeno y agua, esta enzima es similar a la estructura de la hemoglobina.
Excluyendo al gnero Streptococcus y algunos otros la mayora de las bacterias
aerobias y anaerobias facultativas tienen catalasa.
La base de esta prueba es demostrar la presencia de la enzima catalasa, colocando 2 o 3
gotas al cultivo.

El resultado es positivo si en la colonia hay efervescencia. Ejemplos:


Catalasa (+): Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Pseudomonas sp.
Catalasa (-): Streptococcus spp.
Prueba de oxidasa: Bsicamente es la deteccin de la enzima oxidasa, muy til en la
identificacin de bacterias Gram (-). La reaccin de la oxidasa se debe a la presencia
del sistema de citocromo-oxidasa, la cual activa citocromos reducidos por oxgeno
molecular, por la transferencia de un aceptor al estado terminal del sistema de
transferencia de electrones.
El sistema de citocromos est generalmente presente en organismos aerbicos. Un
resultado positivo a la oxidasa consiste en una serie de reacciones en las cuales un
componente auto-oxidable del sistema de citocromo es al final catalizado. Utilizando
un tubo capilar con tetrametil-p-phenylendiamina al 1%, se adiciona una pequea
cantidad a un cultivo bacteriano colocado sobre un papel filtro y obtenemos las
siguientes reacciones: una reaccin positiva (presencia de oxidasa) se indica por la
apariencia de un color prpura obscuro en el papel, en menos de 10 segundos; al
contrario una reaccin negativa, que consiste en una ausencia de color prpura, indica
segn los ejemplos:
Oxidasa (+): Pasteurella multocida
Oxidasa (-): Escherichia coli
cido de la Glucosa: La mayora de las bacterias de inters mdico usan la glucosa
como fuente de carbono, como parte importante de su metabolismo. Se determina si la
bacteria usa la glucosa produciendo cido y/o gas a partir de dicho carbohidrato. En un
tubo con agua peptonada al 1% tapado, y un tubo de Durham, se inocula la bacteria por
agitacin teniendo cuidado de no mover el tubo de Durham e incubndolo 24 horas y
37C se obtienen los siguientes resultados.
Si la bacteria usa la glucosa producir cido y/o gas, por lo tanto el agua peptonada se
observar rosa, si produce gas, se observar una burbuja en el tubo de Durham.
Ejemplos:
cido y gas a partir de la glucosa: Escherichia coli
Negativo a produccin de gas: Proteus stuartii.
Prueba de O/F: para realizar esta prueba se usa el medio bsico de Hugh y Leisfon con
un pH de 7.1. Es un medio semislido de color verde que se inocula por picadura,
contiene carbohidratos como: glucosa, lactosa, sacarosa o maltosa al 10%. Como
indicador de pH tiene Azul de bromotimol. Se usa en dos tubos, uno sin aceite y otro
con acetie o vaselina sellndolo. Se inoculan los dos tubos con la bacteria por picadura
y se mantiene a 37C por 24 horas, obtenindose:

TUBO ABIERTO

TUBO SELLADO

INTEPRETACIN

Amarillo

Verde

Oxidacin (aerobio)

Amarillo (anaerobio facultativo)

Amarillo

Fermentacin

Verde (anaerobio estricto)

Amarillo

Fermentacin

Verde

Verde

Negativo (NH3)

Prueba de Motilidad: Llamada tambin de la gota suspendida. Algunas bacterias son


mviles por presentar flagelo, los flagelos son encontrados principalmente en las
formas bacilares y pueden presentarse en nmero y posicin variados (monotricos,
peritricos, etc.). La base de esta prueba es determinar si la bacteria es mvil o inmvil.
Con un asa de inoculacin se le coloca a un cubreobjetos un poco de muestra y se le
agrega una gota de agua destilada. Se coloca sobre un portaobjetos y se observa al
microscopio. Podremos observar si las bacterias tienen movimientos rectilneos o
curvos y en todas direcciones. Ejemplos:
Motilidad (+): como en Pseudomonas auruginosa.
Motilidad (-): como en Pasteurella multocida.
2. Pruebas Secundarias.
La identificacin se fundamenta en la comparacin del microrganismo que deseamos
identificar con los microorganismos de identidad conocida. La exactitud de la
identificacin depende de la eficacia del trabajo preparatorio as como su grado. Estas
pruebas se clasifican de la siguiente manera:
Simples: Citrato, Malonato, MR-VP, Nitrato y Leche Tornasol.
Mltiples: TSI, LIA y SIM.
Especiales: Coagulasa, Hialuronidasa y Acriflavina.
21. Defina curva de crecimiento microbiano. Explique.

Curvas de Crecimiento Microbiano


El concepto asociado al Crecimiento Microbiano, corresponde al aumento poblacional
de una especie microbiana en un medio de cultivo provisto de todas las necesidades del
microorganismo (Cantidad de Nutrientes, Temperatura, Grado de Humedad, Gases y pH).
Las curvas de Crecimiento Microbiano constan de 4 etapas bien definidas, aunque el
tiempo de duracin de cada una de estas etapas, puede variar segn el tipo de
microorganismo, la familia a la cual este pertenece, entre otras caractersticas.
Fase de Latencia: Corresponde a un perodo de transicin para los microorganismos
cuando son transferidos a una nueva condicin. En esta fase no hay incremento en el
nmero de clulas, aunque s una gran actividad en el metabolismo.

Fase de Crecimiento Exponencial: Perodo en que el crecimiento del microorganismo


ocurre de forma exponencial, es decir, cada vez que pasa un determinado tiempo la
poblacin se duplica.
Fase Estacionaria: Perodo en que ocurren las limitaciones del crecimiento, ya sea por
agotamiento de algn nutriente esencial, por acumulacin de productos txicos o por una
combinacin de las causas anteriores.
Fase de Muerte: Luego que culmine la fase estacionaria, comienza una progresiva
disminucin en el nmero de celulas viables, cuando esto ocurre se dice que la poblacin
ha entrado en fase de muerte.

22. Que es tiempo de generacin?


Es el tiempo requerido para que se duplique el nmero de clulas de la poblacin
bacteriana.
23. Que aplicabilidad tiene la curva de crecimiento.
24. Defina cultivo continuo o discontinuo.
El mtodo de cultivo ms simple es el cultivo discontinuo es en el que el microorganismo
crece a partir de una limitada cantidad de medio hasta que se agota un nutriente esencial o
se acumulan productos txicos hasta niveles que inhiben el crecimiento. En un sistema
discontinuo el cultivo pasar por una serie de fases.
El crecimiento no comienza inmediatamente despus de la inoculacin del medio de
cultivo, el periodo previo al crecimiento activo se denomina fase de latencia que puede
considerarse como un perodo de adaptacin.
CULTIVO CONTNUO:
Consiste en mantener la poblacin microbiana en fase exponencial de crecimiento. Se
utiliza en fermentaciones industriales que requieren actividad metablica mxima. Los
sistemas de cultivo continuo pueden hacerse funcionar como quimiostatos o como
turbidostatos. En un quimiostatos la velocidad de flujo de entrada y salida de nutrientes se
mantiene a un valor determinado de tal manera que la velocidad de crecimiento del cultivo

queda ajustada a esa velocidad de flujo. En un turbidostato el sistema incluye un dispositivo


ptico que regula la turbidez controlando la velocidad de flujo.
Es un cultivo balanceado mantenido por tiempo indefinido por un sistema de flujo que se
compone de:
Una cmara de cultivo de volumen constante a la que llega un suministro de
nutrientes, y de la que se eliminan o separan los productos txicos de desecho (por
un dispositivo de rebosadero).
Una vez que el sistema alcanza el equilibrio, el nmero de clulas y la concentracin de
nutrientes en la cmara permanecen constantes, y entonces se dice que el sistema est
en estado estacionario, con las clulas creciendo exponencialmente.
QUIMIOSTATO El tipo ms frecuente de cultivo continuo es el quimiostato en el que se
introduce medio fresco a un flujo constante denominado velocidad de dilucin (D) a la vez
que se elimina cultivo viejo al mismo flujo. El medio de cultivo de un quimiostato contiene
un nutriente esencial en una cantidad limitante (nutriente limitante).
25. Que caractersticas tienen dichos cultivos, realice un cuadro comparativo.
1. El cultivo
continuo opera bajo condiciones de un estado de equilibrio ya que
las concentraciones
de todos los componentes del cultivo son constantes.
2. El cultivo
continuo opera bajo condiciones limitantes de sustratos, mientras
que el
cultivo discontinuo, en la fase exponencial, funciona en presencia de
exceso de sustrato.
3. La velocidad de crecimiento
en el cultivo continuo est controlada por la
velocidad de dilucin ( y
por bajo el control del operario) y su valor es
siempre menor que el de la
velocidad especifica de crecimiento mxima,
( max). Por el contrario la velocidad especfica
de crecimiento en la fase
exponencial de un cultivo discontinuo alcanzar
la max correspondiente a las
condiciones que prevalezcan en
el cultivo.
26. Mencione un ejemplo de cada cultivo.
27. Segn la lectura Se origin la vida fuera del planeta
Tierra?, cul es la idea principal? Que puede concluir?.
28. Segn la lectura Biopelculas que funcin tienen estas?, que puede concluir?
Informacin que complementa las lecturas: