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EL PROGRAMA UNIVERSITARIO DE ALIMENTOS

NMX-F-476-1985. MTODO PARA LA DETERMINACIN DE DEXTRANA EN


AZCAR CRUDO (MASCABADO). METHOD FOR THE DETERMINATION OF
DEXTRAN IN RAW SUGAR (UNREFINED). NORMAS MEXICANAS. DIRECCIN
GENERAL DE NORMAS
PREFACIO.
En la elaboracin de esta Norma participaron los siguientes Organismos:
Direccin General de Normas.
Laboratorio de Azcar.
Azcar, S.A. de C.V.
Subdireccin de Produccin. Laboratorio.
Cmara Nacional de las Industrias Azucarera y Alcoholera.
Secretaria de Hacienda y Crdito Publico.
Direccin de Servicios al Contribuyente
Asociacin de Tcnicos Azucareros de Mxico, A.C.
1. OBJETIVO Y CAMPO DE APLICACIN
Esta Norma establece el mtodo de prueba para determinar dextrana en muestras de azcar
crudo (Mascabado).
2. REFERENCIAS
Para la correcta aplicacin de esta Norma se debe consultar la siguiente Norma Mexicana
vigente:
NMX-K-368. Muestreo para materiales pulverulentos o granulados.
3. DEFINICIONES
3.1 Azcar crudo: Es el producto cristalizado que se obtiene de la centrifugacin de las
masas cocidas, y que no ha sido sometido al proceso de refinacin.
3.2 Dextrana: Es un polisacrido polmero de la D-glucosa (C6H10O5)n, (ver A.1) formado
por reacciones bioqumicas a partir de la sacarosa, con la intervencin, principalmente, del
Leuconostoc mesenteroides.
4. FUNDAMENTO
Este mtodo se basa en la medicin de la absorbancia, dada por la concentracin de
dextrana en la muestra, empleando para el efecto un espectrofotmetro.
5. REACTIVOS Y SU PREPARACIN

Los reactivos que se mencionan a continuacin deben ser grado analtico y cuando se
mencione agua debe entenderse agua destilada.
5.1 Reactivos
5.1.1 Resinas intercambiadoras de iones
5.1.2 Filtroayuda
5.1.3 Acido tricloractico
5.1.4 Enzima -Amilasa tipo X-A
5.1.5 Alcohol etlico absoluto
5.2 Preparacin de reactivos
5.2.1 Resinas intercambiadoras de iones
La amberlita IR - 120 (H+) y la IRA - 45 (OH-) (VER a.2), son normalmente aplicadas
hmedas, por lo cual deben lavarse con al menos su doble en peso de agua destilada y
drenarse. Luego deben lavarse con acetona por un tiempo no mayor de 2 minutos. El
solvente debe removerse inmediatamente.
Las resinas se secan con aire o en estufa a baja temperatura, aproximadamente 303K (30C)
y se almacenan en recipiente cerrado.
5.2.2 Filtroayuda: 50 5 g de filtroayuda se agregan a 1000cm3 de agua destilada, se
agregan 50 5 cm3 de cido clorhdrico concentrado y la mezcla se agita por 5 minutos.
Luego se filtra y la torta de filtroayuda se lava con agua destilada hasta que el pH del
lavado sea igual al del agua destilada. El filtroayuda se seca a 373K (100C) durante 6
horas y se almacena en un recipiente hermtico.
5.2.3 Acido tricloractico: 10 0.1 g de cido tricloractico se disuelven en agua destilada
en un matraz aforado y se llevan a 100cm3. Este reactivo se conserva por dos semanas.
NOTA: Este reactivo ataca las protenas y debe evitarse su contacto con la piel. No debe
pipetearse con la boca y no debe almacenarse en recipientes de plstico.
5.2.4 Enzima - Amilasa tipo X-A
Enzima removedora de almidn. Se consigue preparada
5.2.5 Alcohol
Alcohol etlico absoluto. Se consigue preparado o se puede preparar por cualquiera de los
mtodos conocidos.
6. MATERIALES Y APARATOS
6.1 Materiales
6.1.1 Bureta de vidrio de 50cm3
6.1.2 Cpsula de nquel con capacidad para pesar 23.5g de azcar crudo.

6.1.3 Embudo para el dispositivo de filtracin al vaco (ver fig. 2)


6.1.4 Matraz de filtracin al vaco de 1000cm3
6.1.5 Matraces aforados de 25cm3
6.1.6 Membrana Millipore de 0.45 m
6.1.7 Membrana absorbente (prefiltro) para dispositivo de filtracin (ver fig. 2)
6.1.8 Pipeta de seguridad para dosificar el cido tricloractico
6.1.9 Pipeta graduada de 20cm3
6.1.10 Tubo de Nessler con aforo a 100cm3
6.1.11 Vaso de precipitados de 250cm3
6.1.12 Vidrio de reloj de 12cm de dimetro
6.2 Aparatos
6.2.1 Bomba de vaco
6.2.2 Espectrofotmetro UV - visible, con dos celdas de 5cm y dos celdas de 1cm.
6.2.3 Parrilla trmica con agitador magntico
7. PROCEDIMIENTO
7.1 Pesar 23.5g de la muestra de azcar crudo y colocarlos en el vaso de precipitados.
Agregar 35cm3 de agua destilada, insertar la barra magntica, cubrir el vaso de precipitados
con el vidrio de reloj y conectar la placa de calentamiento para disolver. (ver fig. 1)
7.2 Agregar 0.05g de enzima - Amilasa tipo X-A e incubar a 328K (55C) por una hora
en una estufa o en un bao de agua, agitando cada 15 minutos.
7.3 Despus de la incubacin se agregan a la muestra 5g de Amberlita IR - 120 y 5g de
Amberlita IRA - 45 y se agita por 30 minutos.
7.4 Se agrega 1g de filtroayuda lavada con cido, se mezcla y se filtra solamente a travs de
la membrana absorbente. El filtrado se recibe en un tubo de Nessler de 100cm3 colocado
dentro del matraz de filtracin al vaco. Las paredes del vaso de precipitados se lavan con
una pipeta, empleando aproximadamente 10cm3 de agua destilada. Este lquido se pasa a
travs del embudo y se recoge en el tubo de Nessler.
Se contina con dos pequeos lavados del embudo, teniendo cuidado de no exceder los
100cm3 del aforo del tubo de Nessler (ver. fig. 2).
7.5 La muestra y lavado contenidos en el tubo de Nessler se aforan a 100cm3 con agua
destilada y se agregan 10cm3 de cido tricloractico. Se tapa el tubo y se agita.
7.6 Filtre el contenido del tubo a travs de la membrana Millipore de 0.45 m cubierta con
a membrana absorbente y reciba el filtrado en un tubo de Nessler limpio, colocado dentro
de un matraz de filtracin de 1000cm3. Colecte por lo menos 30cm3 de filtrado (Ver fig. 2).
7.7 Con una pipeta ponga 12.5cm3 del filtrado en cada uno de dos matraces aforados de
25cm3, designando a primero como El Control y al segundo como La Muestra.

NOTA: Use pipeta de seguridad.


7.8 Al primer matraz (El control) agregar, movindolo, agua destilada hasta la marca de
25cm3, tapar y agitar.
Al segundo matraz (La muestra) agregar, movindolo, alcohol absoluto con una bureta de
50cm3 hasta la marca de 25cm3. Tapar y mezclar invirtiendo el matraz suavemente de tres a
cinco veces (Ver fig. 3).
7.9 Dejar en reposo la muestra por 60 2 minutos contando este tiempo desde el momento
en que se termina de mezclar.
7.10 Durante el perodo de reposo, llenar dos celdas de 5cm, una con agua destilada y la
otra con El Control. Despus de poner en cero el espectrofotmetro a 720 nanmetros con
la celda que contiene agua destilada; leer la absorbancia de El Control la cual se designa
como B.
7.11 Despus de realizada la lectura, El Control se guarda en un matraz de 25cm3 para un
posible uso futuro. La celda vaca se lava varias veces con agua destilada y se seca
rocindola con acetona.
7.12 Al terminar los 60 minutos de reposo, llenar la celda limpia de 5cm con La Muestra.
Despus de poner en cero el espectrofotmetro a 720 nanmetros con la celda que contiene
agua destilada, leer la absorbancia de La Muestra la cual se designa como A.
8. EXPRESIN DE LOS RESULTADOS
8.1 El contenido de dextrana se expresa en Unidades de Mili absorbancia:
U.M.A. = (A - B) 1000
9. REPETIBILIDAD
9.1 Cuando la absorbancia de La Muestra excede de 0.7 ( ver A.1) el valor de ambos; El
Control y La Muestra, debe releerse inmediatamente en celdas de 1cm, despus de poner el
espectrofotmetro en cero a 720 nanmetros con agua destilada. Los resultados entonces se
expresan as:
U.M.A. = (A - B) 5000
10. REPRODUCIBILIDAD
10.1 Para lograr resultados reproducibles, debe seguirse estrictamente el mtodo. (Ver A.2)
APNDICE A

A.1. La dextrana es un producto que ocasiona problemas en los filtros y en la cristalizacin,


por incrementar la viscosidad de las soluciones de azcar. Estos problemas se presentan con
valores superiores a 0.05% (500p.p.m.) en el azcar crudo.
A.2. Equipos y reactivos pueden substituirse por equivalentes, nicamente despus de
demostrar que dan resultados comparables a los de este mtodo.
Esto es aplicable particularmente al reactivo alcohol.

Esto es aplicable particularmente al reactivo alcohol

11. BIBLIOGRAFA

Amstar Corporation - American Sugar Division - 1251 Avenueof the Americas, New
York. NY 10020 (212) 489.9000 - Form 2021 - July 1, 1984.
Principles of Sugar Technology; Pieter Honig, Elsevier Publishing Company 1953.
Cane Sugar Handbook, Meade - Chen - John Willey & Sons, Inc. 10th Ed., 1974.

12. CONCORDANCIA CON NORMAS INTERNACIONALES


Esta Norma no concuerda con ninguna Norma Internacional por no haber referencias sobre
el tema.