Está en la página 1de 6

Lavado de semen en hombres con enfermedades infecciosas

transmisibles
Recomendacin (2014)
Sociedad Espaola de Bioqumica Clnica y Patologa Molecular
Comit Cientfico
Comisin de Seminologa y Tcnicas de Reproduccin Asistida
I. Snchez Prieto, M. C. Snchez Pozo, I. Garca Cobaleda, P. Pascual Usandizaga, M. I. Jimnez Garca,
J. A. Castilla Alcal
isprieto@salud.madrid.org

NDICE
1. Introduccin
2. Objeto y campo de aplicacin de la tcnica
3. Bases fisiolgicas del lavado de semen
4. Requisitos y condiciones de funcionamiento de los laboratorios
4.1. Medidas en laboratorios de uso espordico
4.2. Medidas para laboratorios de referencia
5. Requisitos especficos para las parejas serodiscordantes
5.1. Historia clnica
5.2. Documento de consentimiento informado
6. Tratamiento del semen en el laboratorio clnico
6.1. Criterios de seleccin de muestras para tratamiento en el

laboratorio
6.2. Tcnica de lavado triple de semen

6.2.1. Lavado simple de semen

6.2.2. Centrifugacin en gradientes discontinuos de densidad

6.2.3. Swim-up
6.3. Deteccin de VIH en espermatozoides recuperados
7. Criopreservacin de semen en hombres con enfermedades de
transmisin sexual
8. Recomendaciones
9. Conclusiones
10. Bibliografa

1. INTRODUCCIN
Las parejas con enfermedades infecciosas transmisibles y deseos
reproductivos, en funcin de su estatus frtil y de la infectividad del
miembro potencialmente transmisor, pueden optar por la reproduccin natural o plantearse el uso de tcnicas de reproduccin asistida,

52 Documentos de la SEQC - junio 2014

con el objeto de reducir al mximo la probabilidad de transmisin


horizontal y vertical de virus de la inmunodeficiencia humana (VIH),
virus de hepatitis B (VHB) y virus de hepatitis C (VHC).
Estas indicaciones de tratamiento estn incluidas en la cartera
de servicios de las Consejeras de Salud de varias comunidades
autnomas, adems de contar con un marco legal propio:
El listado B del Anexo I del Real Decreto que regula los procedimientos del fondo de cohesin sanitaria (Real Decreto 1247/2002,
de 3 de Diciembre) (1).
La publicacin del Real Decreto 1301/2006, de 10 de Noviembre
sobre determinados requisitos tcnicos para la donacin, la obtencin
y la evaluacin de clulas y tejidos humanos, establece que un
resultado positivo en las pruebas serolgicas, no necesariamente
impedir la utilizacin por la pareja de las clulas reproductoras,
en funcin de la legislacin nacional (2).
Adems de la cobertura legal, diferentes sociedades cientficas
(American Society for Reproductive Medicine, European Society of
Human Reproduction and Embryology, International Federation of
Gynecology and Obstetrics, Sociedad Espaola de Fertilidad, Panel
Espaol de Estudio de Parejas VIH-discordantes, etc.), recomiendan
no excluir a las parejas con enfermedades infecciosas de las tcnicas
de reproduccin asistida. Es ms, algunos expertos consideran que
se deberan integrar los tratamientos de reproduccin asistida en las
estrategias de prevencin de los programas de salud pblica (3).
Por otra parte, en determinadas circunstancias la posibilidad de la
reproduccin natural puede ser una alternativa en aquellas parejas
que cumplan unos requisitos mnimos (4).
La expectativa de vida de los pacientes infectados con VIH ha
mejorado notablemente en la ltima dcada. La administracin de
terapia antirretroviral de gran actividad (TARGA) permite suprimir
la replicacin viral y mejorar la situacin clnica de los pacientes,
pudiendo ser considerados como portadores de una enfermedad
crnica con buena expectativa de vida (5). Puesto que el 75% de los

Lavado de semen en hombres con enfermedades infecciosas transmisibles

infectados est en edad reproductiva, los avances en el tratamiento


han cambiado su visin de futuro y su deseo gensico.
La carga viral en sangre es el principal predictor del riesgo de
transmisin del VIH. Por debajo de 1500 copias de ARN de VIH1, la transmisin es muy rara (6). Aunque la presencia del VIH
en semen no se correlaciona exactamente con la carga viral en
sangre, la viremia suele ser indicativa de virospermia. La nueva
gua de fertilidad del Sistema Nacional de Salud (NHS) britnico
(7) aconseja mantener relaciones naturales solo durante el periodo
de ventana ovulatoria, cuando el hombre este tratamiento con
TARGA, en ausencia de otras infecciones genitourinarias, y con
una carga viral srica <50 copias/mL; ya que este es el lmite bajo
de deteccin de la mayora de las tcnicas de reaccin en cadena
de la polimerasa a tiempo real (RT-PCR), que se emplean para la
cuantificacin. En algunos estudios, se ha detectado carga viral en
semen en un 10% de hombres con carga viral en suero negativa y
tratamiento adecuado con TARGA (8). Aunque, hay que destacar
que, en el mayor estudio publicado hasta el momento que incluye
1365 ciclos, no han encontrado ningn caso de seroconversin (IC
95% 1,8-2,7/ 1000 ciclos), lo que permite afirmar que la tcnica de
lavado de semen es segura (9).
La estrategia a seguir en los hombres con infeccin del VHC no
est bien establecida. La transmisin sexual del VHC es controvertida. Algunos autores sostienen que la infeccin no justifica la
inclusin de las parejas no estriles en programas de reproduccin
asistida (4). Adems, dado que no existe una relacin lineal entre
la carga viral plasmtica y la seminal, la carga viral indetectable
no es una condicin indispensable para la aplicacin de TRA. En
un reciente estudio prospectivo, Savasi y cols. (10), recomiendan
realizar lavado seminal para TRA en parejas subfrtiles aunque no
consideran necesario comprobar, mediante reaccin en cadena de la
polimerasa (PCR), la ausencia de ARN-VHC en el producto final.
Diferentes estudios prospectivos demuestran ausencia de VHC en
muestras lavadas de semen empleadas para TRA y ninguna transmisin horizontal o vertical (10,11).
En la infeccin por VHB, cuando el varn presente AgHBs y
la mujer tenga anticuerpos frente al virus, no se debe proponer la
inclusin en programas de reproduccin asistida si no existe esterilidad. La necesidad de realizar lavado seminal es cuestionable puesto
que, aunque se recomiende hacerlo en fallos de vacunacin, hay
estudios que muestran una respuesta robusta frente al VHB, incluso
con ttulos indetectables de anti-HBs, hasta 10 aos ms tarde de
la inmunizacin primaria (12). La tabla I resume las propuestas de
actuacin en las parejas serodiscordantes.
En la descripcin de protocolos de este documento nos referiremos nicamente a semen de hombres VIH positivo, aunque
sean protocolos universales aplicables a las tres serodiscordancias
mencionadas anteriormente.

2. OBJETO Y CAMPO DE APLICACIN


El objetivo principal de este documento es proporcionar a los
laboratorios clnicos unas recomendaciones metodolgicas, para
preparar semen de hombres con enfermedades virales transmisibles,

Tabla I. Propuesta de protocolos a seguir en parejas


serodiscordantes.
Hombre
seropositivo

VIH+

VHB+

VHC+

Mujer
sin carga viral

TRA o
reproduccin
natural

Inmunizacin
y reproduccin
natural

Reproduccin
natural

con el fin ltimo de impedir la transmisin tanto vertical como horizontal de su patologa. Adems se indican medidas para intentar
controlar eficazmente el riesgo de contaminacin cruzada derivado
del proceso de tratamiento.
El campo de aplicacin de este documento son todos aquellos
laboratorios que vayan a lavar semen de hombres con enfermedades
infecciosas transmisibles con fines reproductivos.

3. BASES FISIOLGICAS DEL LAVADO


DE SEMEN EN HOMBRES VIH POSITIVO
La carga viral en sangre es el principal predictor del riesgo de
transmisin del VIH y la transmisin heterosexual es rara cuando
la carga viral es menor de 1500 copias de ARN del VIH-1 (6).
Se sabe que el tracto genital masculino constituye un compartimento viral distinto de la sangre y es capaz de producir localmente
partculas virales. En algunos individuos, se puede detectar espordicamente el VIH en el semen a pesar de tener niveles estables
o incluso indetectables de VIH en sangre (8). El VIH se encuentra
libre en el plasma seminal en forma de virin (ARN) y se incorpora
en forma proviral al ADN de clulas redondas, linfocitos T y macrfagos que poseen receptores CD4, no as a los espermatozoides
y las clulas germinales que no poseen receptores CD4. Sin embargo, se han descrito varios correceptores que s se expresan en los
espermatozoides, como CCR5 y 3, que podran permitir la unin
especfica de VIH durante su progresin a travs de la va seminal.
Tambin se han hallado pequeas cantidades de espermatozoides
infectados con VIH (13).
Se ha demostrado que el lavado de semen elimina efectivamente
los espermatozoides anormales, los leucocitos infectados y las
partculas virales libres (9).

4. REQUISITOS Y CONDICIONES DE FUNCIONAMIENTO DE LOS LABORATORIOS


El objetivo que se debe perseguir a la hora de atender a pacientes
con enfermedades infecciosas es buscar el equilibrio entre seguridad
y eficiencia. Es decir, no se trata de adoptar las mximas medidas de
seguridad biolgica sino medidas de seguridad biolgica adecuadas
al nivel de riesgo en el que se trabaja.
El Real Decreto 664/1997 (14) sobre la proteccin de los trabajadores contra los riesgos relacionados con la exposicin a agentes
biolgicos, clasifica como agentes biolgicos del grupo 3 a los
virus VIH, VHC y VHB, por lo que correspondera un nivel 3 de
contencin para el manejo de semen de hombres infectados por
estos virus. No obstante, el mismo Real Decreto establece que la

Documentos de la SEQC - junio 2014 53

transmisin de estos tres virus no se produce normalmente por va


area, por lo que permite prescindir de algunas medidas de contencin
destinadas a prevenir su transmisin por esta va (15).
Es importante diferenciar dos tipos de laboratorios: aquellos en los
que slo se va a realizar lavado de semen de hombres seropositivos
de forma espordica y laboratorios con gran volumen de muestras
de hombres seropositivos o laboratorios de referencia.
Las fuentes bibliogrficas consultadas de algunas Comunidades
Autnomas proponen que estos centros deben cumplir los siguientes
requisitos (16,17).

4.1. Medidas en laboratorios de uso


espordico
Se pueden compartir a diferentes tiempos todos los equipos
(centrifugas, estufas, etc.), salvo las bombonas de almacenamiento de nitrgeno lquido, que deben ser exclusivas para pacientes
seropositivos. En estos casos, sera suficiente designar dentro del
laboratorio un rea de trabajo especfica, con contenedores de desecho para evitar la circulacin del material utilizado en el interior
del laboratorio y realizar el mayor nmero de actividades dentro
de la cabina de flujo laminar vertical.
Con el fin de evitar la contaminacin cruzada, se aconseja que
haya una separacin temporal entre el material biolgico de pacientes seropositivos y el resto de pacientes y observar las siguientes
medidas bsicas:
Se deben cubrir las superficies de trabajo con papel de filtro
para recoger cualquier salpicadura.
Las centrfugas deben estar dotadas de tapas de seguridad. Los
tubos deben ser de tapn de rosca o sellados con doble parafilm
para evitar la generacin de aerosoles durante la centrifugacin.
Las pipetas Pasteur y las puntas de pipeta deben tener filtros de
algodn para evitar contaminacin cruzada.
Las gradillas y pipetas, as como otros materiales de uso frecuente, preferiblemente sern de uso especfico y deben lavarse y
desinfectarse.
Se debe realizar lavado de manos con desinfectante suave a la
entrada y salida del laboratorio.
Es necesaria una adecuada limpieza y desinfeccin de los equipos
que garantice la eliminacin del virus despus de cada procedimiento
de trabajo. Se recomienda el uso de desinfectantes oxidativos que
no contengan alcohol, como el cloro activo a baja concentracin,
perxido de hidrgeno, dixido de cloro, ozono, etc.

4.2. Medidas para laboratorios de referencia


En centros con gran volumen de muestras de semen de hombres
seropositivos, es necesario un laboratorio de uso especfico e independiente que cumpla las siguientes medidas:
El laboratorio debe tener el acceso restringido slo para personal
autorizado y estar dotado de sistema de seguridad para entrada y
salida de personal.

54 Documentos de la SEQC - junio 2014

Contar con zona de vestuario especfica con equipos de proteccin


individual: pijama, gorro, calzas, mascarilla y guantes.
Debe tener zona de lavado a la entrada del laboratorio, provista
de desinfectante suave y agua caliente.
Estar dotado de cabinas de seguridad biolgica tipo II.
Deben existir protocolos de trabajo y de seguridad escritos,
actualizados y validados por las autoridades sanitarias.

5. REQUISITOS ESPECFICOS PARA LAS


PAREJAS SERODISCORDANTES
En principio, las parejas deben cumplir los requisitos generales para
la tcnica de reproduccin asistida que deba aplicarse y adems, las
medidas especficas en funcin de su condicin clnica y serolgica.

5.1. Historia clnica


Los pacientes deben aportar un informe mdico en el que se especifique
la evolucin de la enfermedad en los ltimos doce meses, la ausencia
de infecciones oportunistas o complicaciones graves asociadas a la
infeccin por VIH y acreditacin del seguimiento y buena adherencia
al tratamiento por parte del paciente. En el momento de comenzar el
tratamiento de reproduccin asistida, el paciente debe aportar un informe
con una antigedad inferior a cuatro meses donde se demuestre que el
nivel de sus linfocitos CD4+ es superior a 200 clulas/mm3 . Adems,
si el paciente ha seguido un tratamiento farmacolgico potencialmente
teratognico (p. ej. ribavirina) se deben esperar al menos seis meses tras
la finalizacin del mismo para comenzar tratamientos de reproduccin.
Antes de iniciar el tratamiento se determinar la carga viral en
sangre. El riesgo de transmisin sexual del virus se correlaciona con
la carga viral en sangre, y disminuye con el tratamiento con TARGA.
En un informe de la base de datos Cochrane se concluye que en las
parejas serodiscordantes el tratamiento con TARGA y un recuento
de CD4+>350 clulas/mm3 reduce el riesgo la trasmisin del virus
a la pareja con un cociente de tasas de 0,02 (IC 95% 0,0- 2,87) (18).

5.2. Documento de consentimiento


informado
Este documento debe estar cumplimentado por ambos miembros
de la pareja y por el gineclogo responsable del tratamiento de
reproduccin asistida.
El consentimiento informado debe incluir informacin verbal y
escrita de los siguientes puntos:
Informacin sobre los riesgos de trasmisin vrica a la pareja
o al recin nacido. Pese a que hasta la fecha no se conoce ningn
caso de seroconversin de la mujer despus de someterse a TRA,
previo lavado de semen y confirmacin de carga viral negativa, sigue
existiendo un pequeo riesgo terico que deben conocer.
Informacin sobre los beneficios del lavado de semen respecto
a la disminucin del riesgo de transmisin vrica a la pareja, comparado con el coito no protegido y la consiguiente disminucin del
riesgo de transmisin al recin nacido.

Lavado de semen en hombres con enfermedades infecciosas transmisibles

Informacin sobre otras alternativas como la utilizacin de


semen de donante.
Compromiso firmado por ambos miembros de la pareja de la
utilizacin sistemtica de preservativos.
En caso de embarazo debe realizarse la determinacin inmediata
de la carga viral para confirmar que sta es negativa. A las 6 semanas,
para cubrir el periodo ventana, se determinar la carga viral y la
serologa. Se realizar la serologa a las 12 semanas y en el tercer
trimestre de embarazo para confirmar la ausencia de seroconversin.

6. TRATAMIENTO DEL SEMEN


EN EL LABORATORIO CLNICO
6.1. Criterios de seleccin de muestras para
tratamiento en el laboratorio
Antes de decidir qu tcnica de reproduccin asistida es la idnea, se debe realizar un test de recuperacin de espermatozoides,
puesto que el proceso de lavado implica una prdida importante
de espermatozoides.
Cuando no se evidencie subfertilidad por factor femenino, se
podr realizar inseminacin intrauterina con 1 milln de espermatozoides mviles recuperados. Si el rendimiento de la tcnica de
lavado es inferior a esta concentracin, se recomendar la inyeccin
intracitoplsmica de espermatozoides (ICSI) (9, 19).
La titulacin de VIH baja 1000 veces tras el lavado de semen
con gradientes de densidad, de modo que, los espermatozoides
mviles recuperados no son infectivos. Tras el lavado de semen
debe verificarse que la carga viral sea indetectable en la suspensin
de los espermatozoides recuperados. Es infrecuente detectar VIH
en espermatozoides lavados, aunque si es as, la muestra debe
desecharse (9).

6.2. Tcnica de lavado triple de semen


Existen mltiples variaciones de la primera tcnica de lavado
publicada por Semprini en 1987 (20). Los diferentes mtodos
tienen en comn el empleo de gradientes de densidad discontinuos
y la realizacin de mltiples lavados con medio de cultivo y/o la
combinacin con swim-up, para que la eliminacin de clulas y
partculas virales sea efectiva.
Con respecto a la fase preanaltica, la muestra de semen debe
recogerse siguiendo las recomendaciones establecidas en anteriores
documentos de esta Comisin (21).
En una valoracin inicial de la muestra en fresco, se evaluar la movilidad de los espermatozoides en el eyaculado
y se estimar qu dilucin es necesaria para el clculo de la
concentracin (22, 23).
Los materiales necesarios para la realizacin del lavado triple
deben ser estriles y manejarse en condiciones de asepsia. Los
medios de cultivo deben tener la certificacin CE y han de atemperarse antes de su uso. Las caractersticas idneas de los medios
estn especificadas en un documento previo (24). La figura 1
muestra un resumen secuencial del proceso de lavado propuesto
a continuacin.

Figura 1 . Tcnica de lavado triple de semen.

6.2.1. Lavado del semen


El lavado simple de semen se realiza con el objeto de eliminar
el plasma seminal. Se mezcla el semen en una proporcin 1:1 con
medio de cultivo. Se centrifuga a 400g durante 10 minutos. Se extrae
el sobrenadante con una pipeta Pasteur, en el sedimento quedaran
los espermatozoides y el resto de clulas del eyaculado. Se aaden
2 mL de medio de cultivo y se homogeniza.

6.2.2.Centrifugacin en gradientes discontinuos de


densidad
Los gradientes de densidad separan los diferentes componentes
del semen segn su gravedad especfica. Los distintos elementos
se desplazan hasta alcanzar una posicin en la que su densidad es
igual a la del entorno. Los espermatozoides maduros con mayor
densidad, se desplazan hasta el gradiente de mayor concentracin
en el fondo del tubo; las clulas redondas, los espermatozoides
anormales y muertos se sitan en la interfase entre los dos gradientes; el medio de cultivo permanece flotando sobre el gradiente de
menor concentracin.
Los gradientes se preparan, partiendo de una solucin coloidal de
partculas de slice unidas de forma covalente a molculas de silano,
habitualmente en diluciones al 40% y al 80% con medio de cultivo.
En un tubo cnico se coloca 1 mL de cada gradiente, quedando
la dilucin menos densa (40%) en la parte superior. Sobre sta
se coloca la muestra de semen Se centrifuga a 300g durante 20
minutos. Se aspiran las dos primeras capas con una pipeta Pasteur,
con cuidado desde el menisco para evitar alterar las fases, hasta
que queden aproximadamente 0,3 mL de la ltima fase. Se aspira

Documentos de la SEQC - junio 2014 55

el sedimento con otra pipeta y se decanta en un tubo estril con 2


mL de medio de cultivo. Se homogeniza y se fracciona depositando
0,5 mL en cada tubo.

6.2.3. Swim-up
Se basa en la seleccin de espermatozoides en funcin de su
movilidad. Los tubos se centrifugan a 400g durante 10 minutos. En
el fondo de cada tubo queda un sedimento con los espermatozoides
mviles. Se extrae el sobrenadante y se aade a cada tubo 0,6 mL
de medio de cultivo; este paso se realizar lentamente resbalando
por las paredes para evitar remover el sedimento. Los tubos se dejan
en la estufa a 37C, inclinados 45 durante una hora. Transcurrido
ese tiempo, se recoge con pipeta Pasteur en un nico tubo la parte
superior del sobrenadante desde el menisco (0,4-0,5 mL por tubo),
dejando en el tubo la parte que contacta con el sedimento. La
muestra obtenida se mezcla y se fracciona:
Aproximadamente 0,1 mL para la valoracin de la concentracin
y la movilidad de los espermatozoides.
0,5 mL se reservarn a temperatura ambiente en oscuridad, hasta
conocer el resultado de la carga viral. Si el resultado es negativo se
realizar la inseminacin o se proceder a su congelacin para su
utilizacin posterior en fecundacin in vitro.
1 mL para determinar la carga viral.

6.3. Deteccin de VIH en espermatozoides


recuperados
Actualmente no existe ningn ensayo comercial validado para la
determinacin de carga viral en semen o en espermatozoides lavados.
Los laboratorios que realizan lavado de semen han adaptado sus
protocolos de las tcnicas de deteccin de carga viral en sangre.
En la fraccin de espermatozoides mviles se determinar la carga
viral mediante RT-PCR. La automatizacin de la extraccin de
ARN mejora la sensibilidad aumentando el rango de cuantificacin.
En los ltimos estudios publicados no se ha evidenciado ningn
caso de transmisin de VIH-1 tras lavado de semen empleando la
tcnica del lavado triple (9, 25).

7. CRIOPRESERVACIN DE SEMEN
DE VARONES CON ENFERMEDAD DE
TRANSMISIN SEXUAL
La publicacin de la Directiva 2006/17/CE de la comisin
europea de 8 de febrero de 2006 por la que se aplica la Directiva
2004/23/CE del Parlamento Europeo y del Consejo en lo relativo a
los requisitos tcnicos para la donacin, obtencin y evaluacin de
clulas y tejidos humanos obliga a la utilizacin de contenedores
exclusivos para estos pacientes.
De todas la medidas propuestas para evitar la transmisin del virus
durante el proceso de congelacin y almacenamiento en nitrgeno lquido, las ms efectivas son el uso de pajuelas de almacenamiento de alta
seguridad como las pajuelas de resina ionomrica termoselladas (26).

56 Documentos de la SEQC - junio 2014

Los espermatozoides seleccionados mediante la tcnica de lavado


descrita anteriormente, pueden congelarse siguiendo el mismo
protocolo que se aplica a muestras no infecciosas (27).

8. RECOMENDACIONES
Antes de realizar un lavado de semen se debe comprobar la historia
clnica de la pareja: tratamientos farmacolgicos (posible teratogenia),
estado serolgico y carga viral con una antigedad inferior a cuatro
meses y ausencia de otras enfermedades de transmisin sexual.
El lavado de semen se har empleando una tcnica de lavado triple
que incluya centrifugacin con gradientes de densidad discontinuos.
En ausencia de factor femenino, se puede indicar inseminacin
intrauterina si se recupera 1 millones de espermatozoides tras el lavado.
Si el resultado de la recuperacin es inferior a esta cifra, se recomendar
fecundacin in vitro.
La deteccin de la carga viral en espermatozoides recuperados se har
mediante RT-PCR y con extraccin automatizada de cidos nuclicos.
Realizar el mayor nmero de actividades en la cabina de flujo laminar
y observar minuciosamente los protocolos de limpieza y seguridad.
Cuando sea necesario congelar los espermatozoides recuperados,
se emplearn pajuelas de alta seguridad y contenedores de nitrgeno
lquido especficos para su almacenamiento.

9. CONCLUSIONES
El tratamiento de las parejas serodiscordantes con deseos reproductivos debera formar parte de la cartera de servicios de los centros
donde se lleven a cabo tratamientos de reproduccin asistida. El
laboratorio clnico, en la medida de sus competencias, debe ofertar
la posibilidad de tratamiento a estas parejas. Cuando las tcnicas de
reproduccin asistida no son una opcin legal o econmicamente
asequible, la reproduccin natural es una alternativa.
La cumplimentacin rigurosa de las medidas de seguridad y de
los protocolos normalizados de trabajo, hacen posible el tratamiento
de muestras infecciosas en laboratorios de androloga, aunque no
sean estos de referencia.
Los ltimos estudios muestran que el lavado triple de semen es
una tcnica segura puesto que no se ha comunicado ningn caso de
seroconversin ni en las mujeres, ni en sus recin nacidos (9, 25).
La eficacia del lavado de semen para reducir la carga viral y el
riesgo de transmisin del VIH, apoya la opinin de que la reproduccin asistida no puede negarse a parejas serodiscordantes en
los pases desarrollados y, cuando sea posible, debera integrarse
en una iniciativa de salud pblica mundial contra el VIH en los
pases en desarrollo (3).

10. BIBLIOGRAFIA
1. Real Decreto 1247/2002, de 3 de diciembre, por el que se regula la gestin
del Fondo de cohesin sanitaria. Documento BOE-A-2002-23571.
2. Real Decreto 1301/2006, de 10 de noviembre, por el que se establecen
las normas de calidad y seguridad para la donacin, la obtencin, la
evaluacin, el procesamiento, la preservacin, el almacenamiento y la

Lavado de semen en hombres con enfermedades infecciosas transmisibles

distribucin de clulas y tejidos humanos y se aprueban las normas de


coordinacin y funcionamiento para su uso en humanos. Documento
BOE-A-2006-19625.
3. Bujan L, Hollander L, Coudert M, et al. Safety and efficacy of sperm
washing in HIV-1-serodiscordant couples where the male is infected:
results from the European CREATHE network. AIDS 2007; 21:
19091914.
4. Labarga P, Martnez E, Soriano V, Barreiro P. Panel Espaol de Estudio de Parejas VIH-discordantes. Consejo reproductivo en parejas
serodiscordantes para el virus de la inmunodeficiencia humana. Med
Clin 2007; 129(4): 140-148.
5. Support for sexual and reproductive health in people living with HIV/
AIDS. Clinical protocol for the WHO European Region. http://www.
euro.who.int/__data/assets/pdf_file/0007/70099/E90840_Chapter_9.
pdf. 2013 [Consultado: junio 2013]
6. Quinn TC, Wawer MJ, Sewankambo N, et al. Viral load and heterosexual
transmission of human immunodeficiency virus type 1. Rakai Project
Study Group. N Engl J Med 2000; 342: 921929.
7. National Collaborating Centre for Womens and Childrens Health.
Fertility: assessment and treatment for people with fertility problems.
London (UK): National Institute for Health and Clinical Excellence
(NICE); 2013 Feb. 63 p.(Clinical guideline; no. 156).
8. Le Tortorec A, Dejucq-Rainsford N. HIV infection of the male genital
tract - consequences for sexual transmission and reproduction. International Journal of Andrology 2010; 33: 98108.
9. Semprini AE, Macaluso M, Hollander L, et al. Safe conception for
HIV-discordant couples: insemination with processed semen from the
HIV-infected partner. Am J Obstet Gynecol 2013; 208(5): 402-10.
10. Savasi V, Oneta M, Parrilla B, et al. Should HCV discordant couples
with a seropositive male partner be treated with assisted reproduction
techniques (ART)?. European Journal of Obstetrics & Gynecology and
Reproductive Biology 2013; 167:181184.
11. Bourlet T, Lornage J, Maertens A, et al. Prospective evaluation of the threat
related to the use of seminal fractions from hepatitis C virus-infected men
in assisted reproductive techniques. Hum Reprod 2009; 24(3): 530-535.
12. Alfaleh F, Alshehri S, Alansari S, et al. Long-term protection of hepatitis
B vaccine 18 years after vaccination. J Infect 2008; 57(5): 404-409.
13. Muciaccia B, Corallini S, Vicini E, et al. HIV-1 viral DNA is present
in ejaculated abnormal spermatozoa of seropositive subjects. Human
Reproduction 2007; 22(11): 28682878.

14. Real Decreto 664/1997, de 12 de mayo, sobre la proteccin de los trabajadores contra los riesgos relacionados con la exposicin a agentes
biolgicos durante el trabajo. Documento BOE-A-1997-11144.
15. Castilla JA, Magn R y cols. Seguridad biolgica en el Laboratorio de
Reproduccin Asistida. Aula de Formacin en Embriologa Clnica N
4. Granada: JA Castilla y R Magn; 2003.
16. Tcnicas de reproduccin asistida y VIH. Comisin Asesora sobre
tcnicas de reproduccin humana asistida en Catalua. Documento
aprobado en la 41 reunin de la comisin asesora sobre tcnicas de
reproduccin humana asistida. 2002 www.pcb.ub.edu/bioeticaideret/
archivos/pdf/cbc/Tecnicas&VIH.pdf [Consultado: enero 2013]
17. Gua de Reproduccin Humana Asistida en el SAS 2006. http://www.
juntadeandalucia.es/servicioandaluzdesalud [Consultado: noviembre
2013]
18. Anglemyer A, Rutherford GW, Baggaley RC, Egger M, Siegfried N. Antiretroviral therapy for prevention of HIV transmission in HIV-discordant
couples. Cochrane Database Syst Rev 2011; 10; (8):CD009153. doi:
10.1002/14651858.CD009153.pub2.
19 Nicopoullos J., Almeida P., Vourliotis M., et al. A decade of the spermwashing programme: correlation between markers of HIV and seminal
parameters. HIV Medicine, 2011; 12: 195201.
20. Semprini AE, Levi-Setti P, Bozzo M, et al. Insemination of HIV-negative
women with processed semen of HIV-positive partners. Lancet 1992;
340:1317-9.
21. Aulesa C, Mar, C. Recomendaciones en la fase preanaltica para el
anlisis de semen. Documentos de la SEQC, Qumica Clnica 2006;
25 (5): 416-418.
22. Kvist U, Bjrndahl L. Manual on Basic Semen Analysis. ESHRE
Monographs 2002. Barcelona: SEQC; 2004.
23. World Health Organization, Department of Reproductive Health and
Research. WHO laboratory manual for the Examination and processing
of human semen. 5 ed. 2010.
24. Snchez I, Mar C, Castilla JA y cols. Tcnicas para la preparacin de
semen en reproduccin asistida. Documentos de la SEQC 2009; 1:23-26.
25. Savasi V, Mandia L, Laoreti A, et al. Reproductive assistance in HIV
serodiscordant couples. Hum Reprod Update 2013; 19(2): 136-150.
26. Mortimer D. Current and future concepts and practices in human sperm
cryobanking Reproductive Biomedicine Online, 2004; 9: 134-151.
27. Jimnez MI, Serrano G, Moreno JM. Tcnicas de criopreservacin
seminal. Documentos de la SEQC 2011; 1:34-39.

Documentos de la SEQC - junio 2014 57