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Universidad Interamericana de Puerto Rico

Recinto Metropolitano
Facultad de Ciencias y Tecnologa
Departamento de Ciencias Naturales

Manual de Laboratorio

Biologa 1103:

Laboratorio de Destrezas I

3ra Edicin
(2009)

Agradecimientos:

Agradecemos a los siguientes miembros de la facultad del Departamento


de Ciencias Naturales del Recinto Metropolitano : Dr. Livier I. Gonzlez , Prof.
Gadier de Jess, Prof. Ernesto Torres, Dra. Lynnette Fbregas, y Dra. Rosa Brito
por esta tercera edicin del Manual de Laboratorio del curso Destrezas de
Laboratorio I (Biol.1103).
En esta edicin se mantienen las contribuciones hechas a la primera
edicin (2001) por los siguientes profesionales: Dr. Livier I. Gonzlez , Dra.
Carmen Oquendo, Dra. Lillian Gay, Dr. William E. Arias, Dra. Mara T. Miranda,
Prof. Marta Rosas de Cancio, Prof. Gadier de Jess, Sr. Heriberto Cruz, y Srta.
Patricia Vzquez, Recinto Metropolitano; Dra. Ana I. Lugo, Recinto de Bayamn;
Prof. Jannette Acevedo, Recinto de San Germn; Dra. Karen Woolcock, y Prof.
Arlyn Prez, Recinto de Arecibo; Profesores Lilliam Broco, Dmaris Daz, Carmen
M. Reyes y Pablo Rivera, Recinto de Ponce; y Prof. Francisco J. Ferrer,
Universidad del Sagrado Corazn. A todos ellos nuestro ms sincero
agradecimiento por sus aportaciones a este trabajo.
La primera edicin de este manual fue auspiciada por el Recinto
Metropolitano de la Universidad Interamericana de Puerto Rico y el Proyecto TEN
(#P031S010036) del Programa Ttulo V del Departamento de Educacin de
Estados Unidos.

Tabla de Contenido
Pgina
Agradecimientos

Tabla de Contenido

Prontuario del curso BIOL 1103: Laboratorio de Destrezas I

Reglas de Seguridad

Informes de Laboratorio

10

Ejercicio 1: Aplicacin del Mtodo Cientfico

13

Ejercicio 2: Manejo e Interpretacin de Datos

19

Ejercicio 3: Uso de Sistemas de Medidas

33

Ejercicio 4: Uso del Microscopio

46

Ejercicio 5: Manejo de Pipetas y Balanzas

62

Ejercicio 6: Preparacin y Manejo de Soluciones

71

Ejercicio 7: Identificacin de Macromolculas Orgnicas

81

Ejercicio 8: Cromatografa

90

Ejercicio 9: Espectrofotometra

94

Ejercicio 10: Cambios en pH por Actividad Metablica

101

Apndice

113

UNIVERSIDAD INTERAMERICANA DE PUERTO RICO


RECINTO METROPOLITANO
FACULTAD DE CIENCIAS Y TECNOLOGA
Departamento de Ciencias Naturales

PRONTUARIO
I. Ttulo y Nmero del Curso: Laboratorio de Destrezas I (Biol. 1103)
Cdigo y Nmero: Biol. 1103
Crditos: 3
Horas contacto: 3 horas semanales
II. Descripcin del Curso: Desarrollo de destrezas y tcnicas bsicas de
laboratorio. Se da nfasis a las reglas de seguridad, sistemas de medicin,
mtodos estadsticos y el uso adecuado de equipos de laboratorio y de recursos
electrnicos de informacin. Se utiliza el mtodo cientfico para la solucin de
problemas del rea de biologa. Se requiere someter informes de laboratorio
siguiendo formatos cientficos establecidos. ( Requisitos: Se recomienda
matrcula simultnea con el curso Biol. 1101).
III. Objetivos Terminales y Capacitantes
Al terminar el curso, se espera que el estudiante pueda:
1. Aplicar las reglas de seguridad al trabajar en el laboratorio.
1.1 Aplicar las reglas de seguridad en el laboratorio.
1.2 Localizar los materiales y equipo de seguridad en el laboratorio.
1.3. Aplicar la informacin general que aparece en las hojas de
seguridad para materiales de laboratorio.
2. Aplicar las destrezas de trabajo en equipo en las experiencias de
laboratorio.
2.1
Conocer la importancia del trabajo en equipo.
2.2
Desarrollar conductas de cooperacin.
2.3
Utilizar la comunicacin como principal herramienta de trabajo.
2.4
Reconocer las aportaciones individuales.
3. Valorizar la utilidad del pensamiento cientfico en la solucin de
problemas.
3.1 Definir el concepto del mtodo cientfico.
3.2 Explicar los pasos utilizados por los cientficos para formular una
hiptesis.
3.3 Disear un experimento o protocolo experimental para corroborar
4

una hiptesis.
3.4 Distinguir entre un grupo experimental y uno control.
4. Organizar datos cientficos utilizando el anlisis estadstico.
4.1 Construir tablas y grficas para presentar y organizar
informacin.
4.2 Interpretar la informacin presentada en tablas y grficas.
4.3 Analizar los resultados de un experimento aplicando conceptos
estadsticos tales como frecuencia, promedio, mediana y moda.
5. Solucionar problemas que conlleven la aplicacin de los sistemas de
medidas.
5.1 Distinguir entre las unidades bsicas de volumen, masa, longitud,
temperatura, tiempo y energa de los sistemas de medidas ingls y
mtrico.
5.2 Aplicar equivalencias matemticas para convertir entre unidade
de medida.
5.3 Utilizar adecuadamente los materiales e instrumentos de medida
de uso comn en el laboratorio de biologa.
6. Seleccionar los materiales y equipo que se requieren para desarrollar
un experimento.
6.1 Describir los usos y las aplicaciones de los materiales y los equipos
que se usan en el laboratorio.
6.2 Evaluar la utilidad de cristalera y otros implementos o
instrumentos de medicin.
6.3 Utilizar adecuadamente los instrumentos de medida de uso comn
en el laboratorio de biologa.
6.4 Manipular adecuadamente la instrumentacin relacionada con el
curso.
7. Usar las bases de datos en la bsqueda e interpretacin de
informacin cientfica.
7.1 Aplicar la informacin cientfica en la preparacin de informes de
laboratorio.
7.2 Preparar presentaciones orales o escritas usando la informacin
obtenida de las bases de datos.

IV. Contenido
A. Medidas de seguridad; Cmo preparar un informe de laboratorio
B. Aplicacin del pensamiento cientfico
C. Manejo e interpretacin de datos
D. Uso de sistemas de medidas
E. Uso del microscopio
F.
G.
H.
I.

Manejo de pipetas y balanzas


Preparacin y manejo de soluciones
Identificacin de macromolculas orgnicas
Cromatografa

J. Espectrofotometra
K. Cambios en pH por actividad metablica
L. Uso de recursos electrnicos de informacin
M. Presentaciones orales
V. Actividades
VI. Actividades de Avalo
Pre y Post Prueba
Cuestionario sobre cumplimiento de objetivos
VII. Libros de Texto
Campbell, NA and JB Reece. 2005. Biology. 7th ed. Benjamin Cummings.
Menlo Park, California, USA.
Solomon, EP, LR Berg, and DW Martin. 2005. Biology 7th ed. Brooks/Cole
Thomson Learning. Belmont, CA
Tillery, BW, ED Enger and FC Ross. 2001. Integrated Science. McGraw-Hill
Higher Education. New York, New York.
VIII. Recursos
Lecturas Suplementarias
Recursos Audiovisuales
Scientific Method- Jaguar Educational 2002 (20 min.)
The Big Picture: Distributions, Variations and Experiments Insight Media

Measuring Up: An Introduction to Research Insight Media


Basic Laboratory Skills- Crown 1996 (34 min.)
Introduction to the Microscope Series: How to use the compound
microscope Clearwe 1991 (19:40 min.)

Recursos Electrnicos

Heidcamp, WH. 1995. Cell Biology Laboratory Manual.

http://www.gac.edu/cgi-bin/user/~cellab/phpl?contents.html

IX. Evaluacin
A. Instrumentos de evaluacin
Informes de laboratorio

100 puntos

Asistencia y participacin

100

Presentacin oral o escrita

100

Examen final

100_
Total 400 puntos

B. Curva:
90 100%

80 89

70 79

60 69

menos de 60

X. Bibliografa
Eberhard, C. 1985. General Biology Laboratory Manual. Saunders College
Publishing. Fort Worth, Texas.
Lawson, AE. 1995. Exploring the living World: A Laboratory Manual. McGraw-Hill,
Inc. New York.
Morgan, JG and ME Brown Carter. 2002. Investigating Biology. Benjamn
Cummigs. Menlo park, California.
Seidman, LA and C J Moore. 1999. Basic Laboratory Methods for
Biotechnology:Textbook and Laboratory Reference. Prentice-Hall, Inc. Upper
Saddle River, New Jersey.

Vodopich, DS and R. Moore. 2002. Biology Laboratory Manual. McGraw-Hill.


Boston, Massachussets.

Reglas de Seguridad
Objetivos:
1. Aplicar las reglas de seguridad en el laboratorio.
2. Localizar los materiales y equipo de seguridad en el laboratorio.
3. Aplicar la informacin general que aparece en las hojas de seguridad para
materiales de laboratorio.

Introduccin
El Laboratorio de Destrezas I te ofrece la oportunidad de familiarizarte con el
equipo, los materiales y algunos de los mtodos que se utilizan en el estudio de
la biologa. Para que puedas aprovechar al mximo cada una de tus experiencias
de laboratorio, es necesario que adoptes y practiques unas medidas de
seguridad que tienen el propsito de protegerte cuando ests en el saln de
laboratorio. Estas medidas generales sern presentadas de forma audiovisual al
inicio del curso, discutidas por tu instructor de laboratorio antes de comenzar
cada ejercicio y repasadas cada vez que sea necesario. Es imprescindible que
leas el ejercicio de laboratorio antes de llegar al laboratorio, para que te
asegures de que entiendes todas las instrucciones del experimento que llevars a
cabo.
Por tu seguridad, es necesario que:
1. uses una bata de laboratorio mientras ests dentro del saln y gafas de
seguridad o espejuelos, al manejar compuestos qumicos o especmenes
vivos o preservados. Dependiendo del experimento, en algunas ocasiones
se te requerir utilizar otro equipo de seguridad.
2. te abstengas de comer, beber, fumar o aplicarte cosmticos durante la
sesin de laboratorio.
3. conozcas la ubicacin y uso correcto del equipo y materiales de seguridad
{manta, extintores contra incendios, duchas de seguridad, botiqun de
primeros auxilios, duchas para ojos y hojas de seguridad de los materiales
(Material Safety Data Sheets o MSDS)}, entre otros.
4. puedas interpretar el cdigo de rotulacin de los reactivos, de acuerdo
con su peligrosidad, manejo y riesgos.
5. te vistas adecuadamente (faldas o pantalones largos, zapatos cerrados y
cabello recogido).
6. mantengas los libros y otros materiales personales fuera del rea de
trabajo, pero no en el piso.
7. mantengas el equipo dentro del saln de laboratorio.
8. leas las etiquetas de los reactivos y materiales que vas a utilizar y le
preguntes sobre su uso al instructor en caso de dudas.
9. rotules adecuadamente todos tus materiales con el nombre del reactivo y
tus iniciales, as como con otra informacin que tu instructor te provea.

10. evites apuntar con los reactivos o equipo a tus compaeros.


11. permanezcas dentro del saln de laboratorio durante la duracin de los
experimentos, as como en tu rea de trabajo mientras ests en el saln
de laboratorio o esperando tu turno para utilizar instrumentos o
materiales de uso comn.
12. informes al instructor sobre cualquier desperfecto en los instrumentos, sin
intentar arreglarlos.
13. utilices materiales y reactivos en cantidades suficientes, pero no
exageradas. Los materiales y reactivos que no hayas utilizado debern
ser descartados de acuerdo con las instrucciones del instructor y no
pueden devolverse al envase original.
14. dispongas adecuadamente de los desechos, de acuerdo con los
reglamentos vigentes. Los desperdicios slidos (materiales insolubles,
pedazos de vidrio, fsforos, papel, etc.) deben descartarse en los envases
apropiados. Los fregaderos y drenajes no son envases. Tu instructor te
indicar cmo descartar otros tipos de desperdicios.
15. mantengas el saln en orden. Luego de terminar tu trabajo, debers
devolver todo el material y equipo a las reas designadas para ello. El
saln debe quedar en orden, con las sillas colocadas ordenadamente.
16. mantengas tus manos limpias, antes, durante y despus de completar los
trabajos del da.
17. informes al instructor sobre cualquier accidente*, lesin o emergencia que
ocurra en el saln. De ocurrir algn accidente, puede ser necesario que
haya que desojar el saln. En ese caso, siguiendo las directrices de tu
instructor, debers salir de forma rpida y ordenada del saln, utilizando
la puerta ms cercana a tu rea de trabajo. Si ocurre algn derrame o
fuego, debers informarlo a tu instructor y utilizar el extintor, la manta
contra incendios o las duchas de seguridad, segn sea necesario.
Tambin es importante informarle a tu instructor sobre condiciones de
salud que tengas que puedan impedir tu participacin en laboratorios
individuales.
El cumplimiento de estas reglas de seguridad te ayudar a trabajar de forma
eficiente y a no cometer errores. Recuerda, tu seguridad y la de tus compaeros
dependen de ti.
*El procedimiento para el manejo de accidentes dentro del laboratorio requiere que:
1. prestes la debida atencin al compaero de clases afectado.
2. notifiques del accidente a tu instructor y a la persona encargada de atender
accidentes en el laboratorio. Esta persona notificar a las autoridades externas
y, de ser necesario, te requerir que completes un informe sobre el accidente.

Bienvenido al Laboratorio de Destrezas I!

10

Informes de Laboratorio
Una parte importante del desarrollo cientfico es la divulgacin de los hallazgos.
Mediante esta divulgacin, conocemos lo que otros han hecho y podemos
fortalecer nuestra gestin como cientficos. La base de la divulgacin es el
informe tcnico o informe de laboratorio. A travs de este informe puedes
resumir lo que hiciste para contestar, al menos, cinco preguntas clave:

cul es la situacin sobre la cual quieres experimentar?


(introduccin)

por qu se hizo el ejercicio de laboratorio? (objetivos)

cmo se llev a cabo el ejercicio? (materiales y mtodos)

cules fueron los datos obtenidos? (resultados)

qu importancia o significado tienen los resultados? (discusin y


conclusiones)

Es importante sealar que en cualquier experimento podrs obtener resultados


diferentes a los esperados. Despus de todo, si supieras los resultados de
antemano, para qu experimentar? Bajo ningn concepto esto debe
entenderse como un fracaso. Ms an, es mediante el anlisis y la
experimentacin repetida que logramos resultados significativos que realmente
representan la realidad que estamos tratando de entender. Muchos hallazgos de
valor en las ciencias naturales se dieron por accidentes o casualidades que
ocurrieron a estudiosos que supieron determinar el significado de los
experimentos que condujeron.
El informe de laboratorio es el material que presentars a tu instructor como
prueba de que hiciste el experimento. Dicho informe debe basarse en los datos
y observaciones que hayas anotado en tu libreta de laboratorio. Esta es una
libreta que utilizars durante todo el semestre y que tu instructor podra recoger
en cualquier momento del semestre. La libreta de laboratorio deber:
1. estar identificada con tu nombre, nmero de seccin y nombre del
instructor.
2. tener las pginas enumeradas de antemano y cosidas (no de hoja
suelta) y no tener pginas arrancadas.
3. escrita con tinta (azul o negra), nunca con lpiz. Si es necesario
corregir algn dato que ya escribiste, debers tacharlo pasando una
sola raya sobre el error (de modo que el dato permanezca legible)
escribiendo el dato correcto al lado del dato errneo y colocando tus
iniciales sobre ambos datos (ver ejemplo en el Apndice).
4. estar siempre en tu posesin. De esta manera, la podrs utilizar cada
vez que necesites anotar datos y evitars tener que anotarlos en hojas

11

de papel sueltas o en tu mano, de donde se pueden perder o borrar


fcilmente.
5. recoger los datos que generen otros miembros del grupo al que
pertenezcas y que sean necesarios para tus anlisis fuera del saln de
clases.
En este curso se te requerir someter informe de laboratorio siguiendo los
formatos cientficos utilizados ms comnmente. El informe recoge los puntos
ms significativos del trabajo que realizaste y establece claramente qu se hizo,
quin lo hizo, por qu se hizo, cmo se hizo, cules fueron los resultados y cul
es el significado de esos resultados. El informe debe contener alguna
informacin general que tu instructor solicitar.
Las partes de un informe tcnico de laboratorio son:
1. Ttulo: refleja el contenido del experimento de forma que el lector pueda
interesarse en la lectura. El ttulo debe ser corto pero informativo.
2. Lista de autores: todos aquellos que participaron en la redaccin, diseo
o realizacin del experimento deben aparecer como autores del trabajo.
Es importante que todos los miembros del grupo sean reconocidos.
3. Resumen: el resumen debe contener informacin suficiente sobre la
introduccin, los materiales y mtodos, los resultados y la discusin. No
debe pasar de un prrafo.
4. Introduccin: debe ser una descripcin breve de lo que se conoce con
relacin al problema bajo estudio, de modo que el lector sepa qu se ha
hecho y qu se sabe con relacin al problema. La introduccin debe
exponer claramente por qu es necesario completar el experimento que te
propones realizar e incluir los objetivos. Estos objetivos deben ser
redactados antes de hacer el experimento, y deben ser realistas en
trminos de tiempo y capacidad analtica del laboratorio.
5. Materiales y mtodos: esta parte del informe recoge la manera en que
se condujo el experimento para contestar las preguntas formuladas o
alcanzar los objetivos propuestos. La manera en que redactas esta parte
del informe debe ser tan clara como para que cualquier otra persona, con
acceso a los mismos reactivos y materiales, pueda obtener resultados
similares. Este concepto se conoce como reproducibilidad y es una
idea clave en las ciencias naturales. Los materiales y mtodos deben
aparecer de forma resumida detallando lo que se hizo, cmo se hizo y en
qu forma se hizo (por ejemplo, aad 5 mL de agua al tubo que contena
el reactivo de cobre y mezcl por 30 segundos). Si utilizas un instrumento
especfico (puede haber ms de uno en el saln) debes mencionar en tu
informe cul fue el modelo utilizado.
6. Resultados: esta parte del informe recoge, precisamente, los datos que
generamos del experimento. Es importante reconocer que no

12

necesariamente estos resultados deben concordar con lo que esperamos.


Siempre que puedas, debes presentar los datos en forma grfica (tablas o
cuadros, grficas o dibujos). Esto permite la representacin concisa y
clara de muchos datos en poco espacio. En la medida en que puedas,
debes incluir en el informe de laboratorio las frmulas y clculos
matemticos utilizados para obtener los resultados.
7. Discusin de los resultados: en esta parte del informe debes explicar
los resultados y cul es su significado. Siempre que sea posible, debes
comparar los resultados obtenidos con los resultados esperados y tratar
de explicar las posibles razones para las discrepancias entre las cifras. Es
aqu que podrs demostrar tu capacidad analtica e intuitiva.
8. Referencias: debes citar las referencias de todo lo que hayas usado para
comparar, obtener informacin o guiarte en la realizacin del experimento.
Nota: Tu instructor te proveer el estilo de citar referencias que debers
usar en tus informes.
Es importante sealar que el trabajo de laboratorio en este curso te permitir
desarrollar destrezas analticas que te servirn para entender mejor los
procesos biolgicos y te prepararn adecuadamente para cursos futuros. En
algunos casos dependers de tus compaeros de grupo para obtener e
interpretar los datos obtenidos. Es muy importante que intercambies y
discutas con ellos tus resultados. Scale el mejor provecho a tu experiencia y
acude a tu instructor en caso de dudas.
Casi todos los ejercicios de laboratorio de este manual contienen una serie de
problemas que te permitirn practicar las destrezas matemticas que hayan
sido presentadas en el ejercicio. Es probable que tu instructor te requiera
contestar los mismos como parte del informe de laboratorio. De cualquier
manera, es recomendable que los contestes.

13

Ejercicio 1: Aplicacin del Mtodo Cientfico


Objetivos:
1. Definir el concepto del mtodo cientfico.
2. Explicar los pasos utilizados por los cientficos para formular una hiptesis.
3. Disear un experimento o protocolo experimental para corroborar una
hiptesis.

Introduccin
El mtodo cientfico es la manera sistemtica y racional que usan los cientficos
para disear experimentos, recopilar informacin y comprobar ideas; se trata
bsicamente del modo de hallar respuestas a interrogantes. El mtodo cientfico
incluye los siguientes pasos:
1. Observacin
Al realizar observaciones se puede hacer uso directo de los sentidos o utilizar
instrumentos que aumentan la percepcin normal de los sentidos. Las
observaciones deben ser exactas o libres de errores, ya sean del investigador
(error humano) o del instrumento (error instrumental). Las opiniones y
emociones no deben influir en lo que se observa. Se debe mantener un registro
escrito o grabado de todas las observaciones que se realizan.
2. Definicin del problema
Durante las observaciones o el estudio cuidadoso de la literatura cientfica,
surgen preguntas que son tomadas en consideracin. Estas preguntas
constituyen el problema que el cientfico tratar de resolver. La investigacin
cientfica requiere una mente inquisitiva y la habilidad para cuestionarse por qu
y cmo ocurren las cosas. Cada pregunta o problema puede contestarse con
experimentos bien planificados. Una investigacin exitosa nos lleva a nuevas
investigaciones y nuevos conocimientos.
3. Formulacin de la hiptesis
Cuando la informacin que tenemos a mano no es suficiente para darnos una
explicacin del problema, es necesario proseguir con la experimentacin.
Usando su propio pensamiento y razonamiento creativo, el cientfico formula, en
forma de aseveracin, una explicacin tentativa o solucin al problema. Esta
aseveracin se conoce como una hiptesis. Aunque la hiptesis pareciera ser
una solucin razonable a la luz de los hechos conocidos, no puede ser aceptada
hasta que se sustente por una base amplia de evidencia. El investigador no slo
14

debe tener buena imaginacin para generar una hiptesis, sino tambin una
mente abierta para modificarla, si la evidencia falla en sostenerla. La hiptesis
es, entonces, una posible contestacin a una pregunta sobre la naturaleza,
basada en observaciones, lecturas, intuicin cientfica y los conocimientos del
cientfico.
4. Recopilacin de informacin relacionada con el problema
El cientfico trata de resolver cada aspecto del problema. Antes de emprender
un experimento, el investigador debe hacer uso de todos los datos disponibles.
Conocer esta informacin impide que haya duplicacin y repeticin del trabajo ya
hecho. Hay que buscar intensamente informacin en la literatura cientfica
encontrada en bibliotecas, centros de investigacin, Internet y otras fuentes.
5. Experimentacin
El experimento que se lleve a cabo para explicar un fenmeno o resolver un
problema debe disearse. Un experimento es una investigacin conducida
bajo condiciones muy estrictas en la que se controlan todas las variables menos
la que se quiere estudiar. Una variable es un evento o condicin que est
sujeto a cambio. Un experimento diseado correctamente utiliza un grupo
control y un grupo experimental. El grupo control representa la situacin
normal o natural en el experimento y se utiliza para comparar los cambios
ocurridos en el grupo experimental. El grupo experimental es aqul al que se le
aplica la variable.
6. Anlisis de resultados
Los datos o resultados obtenidos en la experimentacin se organizan y analizan
con honestidad y objetividad para determinar si la hiptesis formulada es
correcta o incorrecta. Durante el anlisis se infieren conclusiones y se establecen
posibles fuentes de error en el experimento.
En general, la experimentacin va dirigida a postular teoras y leyes o principios.
Una teora es una explicacin que tiene un alto grado de confiabilidad; es una
hiptesis respaldada por un gran nmero de observaciones y experimentos. Las
teoras estn sujetas a comprobacin. Una teora sirve generalmente como base
para experimentacin adicional. Una teora explica con sencillez el porqu de las
observaciones.
Cuando una teora ha generado predicciones que por mucho tiempo han sido
comprobadas una y otra vez, y es aceptada, se convierte en una ley o principio
cientfico. Una ley describe algn aspecto de la naturaleza.

15

La ciencia no es absoluta. Todas las ideas, hiptesis, teoras y todo el


conocimiento cientfico est sujeto a revisin, estudio y modificacin.
El mtodo cientfico tiene aplicaciones diversas en nuestra vida. Podemos
aplicarlo antes de tomar decisiones para que stas resulten lo ms informadas,
confiables y certeras posible. Este mtodo es seguido diariamente por cientficos
en el proceso de generar nuevos conocimientos en muchos campos del saber.
Una manera en que los investigadores aplican el mtodo cientfico es en el
desarrollo de propuestas de investigacin. En estas propuestas, se analiza un
problema y se propone una solucin mediante el diseo de experimentos
controlados. Luego de desarrollar el diseo experimental, el investigador redacta
la propuesta y usualmente la somete a una entidad o agencia que evala la
propuesta en sus mritos, asigna la prioridad que merece y recomienda o no el
otorgamiento de fondos para sufragar los gastos que la investigacin conlleva.

Ejercicios de Laboratorio
Parte I- Actividad de Aprendizaje Cooperativo:
A. Los estudiantes formarn grupos o equipos de trabajo de
aproximadamente 5 (cinco) a 6 (seis) personas.
B. Cada grupo nombrar un lder y un relator o anotador. Este ltimo
tomar notas de la actividad de su grupo.
C. Los integrantes de cada grupo llevarn a cabo un torbellino de ideas o
brain storming relacionado a la siquiente pregunta: Qu palabra
viene a tu mente cuando piensas en el mtodo cientfico? El relator
anotar esta palabra. Al finalizar esta tarea habr muchas palabras (no
oraciones) relacionadas al mtodo cientfico.
D. Luego de esto el lder de cada grupo establecer un perido de cinco
minutos para que cada miembro construya o elabore una definicin del
concepto del mtodo cientfico con la sopa de palabras surgidas del
torbellino de ideas.
E. Los miembros de cada grupo leern su definicin del concepto mtodo
cientfico.
F. Luego llegarn a un consenso sobre la mejor definicin y se anotar
en la pizarra .

16

G. Finalizada esta actividad los grupos quedarn disueltos. Todos los


estudiantes del saln debern establecer cal es la mejor definicin del
mtodo cientfico de aquellas que aparecen anotadas en la pizarra.
H. Se recomienda que los estudiantes vean una pelcula o lean un artculo
sobre el mtodo cientfico.
I. Cada alumno presentar un ensayo corto (una o dos pginas) en el
cual presentar cmo se puede utilizar el mtodo cientfico para
resolver cualquier tipo de situacin o asunto relacionado a nuestro
diario vivir.
Parte II- Desarrollo de un Experimento
MATERIALES
Plato llano
Vela
Fsforo
Agua
PROCEDIMIENTO
1. Observe una vela cuidadosamente. Haga anotaciones sobre su morfologa
o forma, color, textura, olor, naturaleza de la materia (liquido, slido,
gaseoso, coloidal).
2. Encienda la vela, coloque la misma en un plato llano, tomando las debidas
precauciones y observando todas las medidas de seguridad a estos
efectos.
3. Observe los cambios si alguno en la vela(morfologa,color, textura, ect)
relacionados al paso # 1 . Que cambios observas? Anota los mismos en
tu libreta de laboratorio.
4. Al colocar un vaso de cristal sobre la vela encendida : Que piensas que
podria ocurrir? Anota tus predicciones antes de colocar el vaso de cristal
sobre la vela encendida. Luego de esto procede a colocar el vaso sobre la
vela encendida y anota todas tus observaciones. Que ocurri? Anota
todas las preguntas relacionadas a este asunto.
5. Si repetimos el procedimiento del paso # 4, pero esta vez aadiendo aqua
al plato llano. Que piensas tu que debe ocurrir? Cuales serian tus
predicciones? Establece una hiptesis de acuerdo a tus observaciones

17

previas. Luego de establecer la hiptesis lleva a cabo el experimento con


el aqua. Que observas?
6. Brinda una explicacin cientfica para los resultados experimentales
observados. De acuerdo a estos hechos : Cal es tu conclusin?
7. Compara tus resultados con aquellos obtenidos por otros compaeros del
grupo. Cal es tu opinin al respecto? Anota similitudes y diferencias.
Como explicas esto?

Preguntas:
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.

Qu es una hiptesis?
Qu es un experimento?
Cul es la relacin entre una hiptesis y un experimento?
Qu es una variable?
Cul es la diferencia entre un grupo control y un grupo experimental?
Por qu son las teoras ms aceptadas que las hiptesis?
En un experimento para investigar la funcin del ncleo de la clula, un
cientfico le removi el ncleo a una ameba mediante microciruga. La ameba
dej de dividirse y en pocos das muri. A base de los resultados de este
experimento,
a. Cul fue una posible hiptesis planteada por este
cientfico?
b. Cul es una funcin del ncleo, de acuerdo con los
resultados?
8. Considera usted que el mtodo cientfico tiene limitaciones?. Explique su
contestacin.
9. Construye un diagrama donde ilustre los pasos de mtodo cientfico.
10. Identifica en la Internet dos recursos sobre el mtodo cientfico, provea sus
direcciones.

Recurso Audiovisual
Pelcula The Scientific Method

Referencias
Campbell, NA and JB Reece. 2005. 7th ed. Biology. Pearson-Benjamin
Cummings. San Francisco, California.
Eberhard, C. 1985. General Biology Laboratory Manual. Saunders College
Publishing. Fort Worth, Texas.
Lawson, AE. 1995. Exploring the living World: A Laboratory Manual. McGraw-Hill,
Inc. New York.

18

Morgan, JG and ME Brown Carter. 2002. Investigating Biology. Benjamn


Cummigs. Menlo park, California.
Tillery, BW, ED Enger and FC Ross. 2001. Integrated Science. McGraw-Hill
Higuer Education. New York, New York.

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Ejercicio 2: Manejo e Interpretacin de Datos


Objetivos:
1. Construir tablas y grficas para presentar y organizar informacin.
2. Interpretar la informacin presentada en tablas y grficas.
3. Analizar los resultados de un experimento aplicando conceptos estadsticos
tales como frecuencia, promedio, mediana y moda.

Introduccin:
La estadstica puede definirse como un mtodo de recopilacin, organizacin y
anlisis de datos numricos u observaciones. El objetivo principal de la
estadstica es presentar los datos en forma sencilla, til y comprensible.
A. Representacin de Datos Experimentales
Toda investigacin cientfica genera datos. Si la investigacin es extensa, la
cantidad de datos puede ser tan grande como para hacer difcil su interpretacin.
Una manera sencilla para organizar e interpretar los datos es mediante la
construccin de tablas y grficas. Las tablas y grficas nos permiten observar
claramente grupos de datos. Al estar organizados, se nos hace ms fcil
establecer relaciones o tendencias, comparar entre diferentes grupos de datos y,
hasta predecir de forma razonable una relacin entre dos o ms variables.
Al recopilar datos tomando medidas en un laboratorio, generalmente
comparamos dos o ms datos o grupos de datos. Los datos se representan por
una variable, que puede ser peso (p), longitud (l), temperatura (T) o tiempo (t).
Por lo general, dentro de un estudio estos datos estn relacionados, de modo
que llamamos al dato que depende de otro la variable dependiente. Por otra
parte, el dato que no depende de otro se conoce como la variable
independiente. Por ejemplo, si estuvisemos midiendo el peso de un animal
segn pasa el tiempo, ciertamente el peso depender del tiempo. Por esto el
peso es la variable dependiente y el tiempo es la variable independiente.
1. Preparacin de tablas:
Las tablas (cuadros) nos ayudan a observar mejor un resumen de los datos
obtenidos. Una tabla es una representacin grfica de los datos relacionados
con las variables que estamos estudiando. Por ejemplo, si queremos demostrar
cul es la relacin entre la edad y el consumo de caloras de un beb, podemos
tener la siguiente informacin: El consumo diario promedio de caloras durante
el primer mes de vida fue de 2,000 caloras; durante el segundo fue de 2,500
20

caloras; durante el tercero fue de 2,800 caloras; durante el cuarto fue de 3,100
caloras; durante el quinto, fue de 3,200 caloras; durante el sexto y el sptimo,
fue de 3,500 caloras; durante el octavo fue de 3,000 caloras; durante el noveno
fue de 2,800 caloras; durante el dcimo fue de 2,000 caloras; durante el
undcimo fue de 1,700 caloras y; durante el duodcimo fue de 1,600 caloras. A
pesar de que la informacin est presentada claramente, se nos hace un poco
difcil apreciar si existe o no un patrn o una tendencia entre los datos.
Con el fin de manejarla ms efectivamente, la informacin del ejemplo se puede
organizar en una tabla. En este ejemplo, solamente tenemos dos variables, que
son el tiempo de vida (edad) del nio y el promedio del consumo diario de
caloras. La manera ms sencilla de organizar esta informacin es formando una
tabla con dos columnas (de arriba a abajo), en la que cada columna corresponde
a una variable. La tabla contendr tantas filas como datos individuales
tengamos.
Al construir una tabla debemos siempre procurar que los datos en una fila se
lean de izquierda a derecha, excepto si se espera que sumen al final. Los
nmeros deben ser ordenados de menor a mayor, para facilitar la lectura de la
informacin. Adems, las columnas deben estar rotuladas con el nombre de la
variable y la unidad (que debe mantenerse igual a lo largo de toda la tabla), y la
tabla debe tener un ttulo que sea descriptivo de la informacin que contiene.
Los datos del ejemplo podran presentarse como aparece en la Tabla 2.1.
Tabla 2.1 Consumo calrico
promedio para bebs de
1 a 12 meses
Edad
(meses)
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12

Consumo promedio
diario (caloras)
2,000
2,500
2,800
3,100
3,200
3,500
3,500
3,000
2,800
2,000
1,700
1,600

En la medida en que aumentamos variables en el experimento, se deben aadir


columnas a la tabla.

21

2. Preparacin de grficas
Dependiendo de la naturaleza de la tabla, sta se puede traducir en otro tipo de
representacin conocido como una grfica. Las grficas ms comnmente
usadas son los histogramas (grficas de barra o bar charts), las grficas de
distribucin porcentual (pie charts) o las lneas (curvas).
Las grficas de barra se utilizan preferentemente cuando la informacin que
tenemos puede ser agrupada en grupos discretos de magnitud similar. Agrupar
esta informacin nos puede dar una idea de la variabilidad presente en la
poblacin. Un ejemplo de este tipo de informacin podra ser el siguiente.
Un investigador desea conocer el coeficiente de inteligencia (CI) de los
estudiantes de nuevo ingreso a uno de los recintos de la Universidad
Interamericana de Puerto Rico. De los archivos de la Universidad, el investigador
extrae al azar los expedientes de 110 estudiantes de nuevo ingreso. Los CI de
esos estudiantes estn presentados en la Tabla 2.2.
Tabla 2.2 CI de 110 estudiantes
154
131
122
100
113
133
119
115
117
110
115
103
103
121
109
128
93
90
105
118
85
108
108
136
115
100
100
114
123
126
105
111
127
108
106
150
130
87
89
108
118
104
127
94
115
97
135
108
139
133
110
113
112
82
114

119
104
147
134
117
119
91
137
101
107
112

121
125
103
89
110
122
123
124
125
115
113

128
85
113
143
80
102
132
96
129
83
142

112
120
107
108
111
100
97
111
131
109
145

93
135
98
142
127
106
110
101
110
116
123

El primer paso en el proceso de interpretacin de estos datos es reorganizarlos


para obtener la frecuencia de los datos. La frecuencia es el nmero de veces
que un dato aparece o se repite entre las observaciones. La Tabla 2.3 ilustra las
frecuencias no agrupadas en este ejemplo. Con esta informacin podemos,
por ejemplo, establecer el valor mximo y el mnimo y con ellos el rango. Esta
organizacin de los datos nos permite determinar rpidamente que en la muestra
no hubo estudiantes con CI mayor de 154 o menor de 80. Otra ventaja de
presentar los datos en frecuencias no agrupadas es que contamos con un orden
(en este caso, el orden descendiente de CI observados en la muestra de
estudiantes).

22

Tabla 2.3 Distribucin de frecuencias no agrupadas de los


resultados del CI de 110 estudiantes.
X
f
X
f
X
f
X
f
154
1
135
2
116
1
97
2
153
0
134
1
115
5
96
1
152
0
133
2
114
2
95
0
151
0
132
1
113
4
94
1
150
1
131
2
112
3
93
2
149
0
130
1
111
3
92
0
148
0
129
1
110
5
91
1
147
1
128
2
109
2
90
1
146
0
127
3
108
6
89
2
145
1
126
1
107
2
88
0
144
0
125
2
106
2
87
1
143
1
124
1
105
2
86
0
142
2
123
3
104
2
85
2
141
0
122
2
103
3
84
0
140
0
121
2
102
1
83
1
139
1
120
1
101
2
82
1
138
0
119
3
100
4
81
0
137
1
118
2
99
0
80
1
136
1
117
2
98
1
X = CI; f=frecuencia (nmero de estudiantes con ese CI)
Observa cmo se reorganizaron los datos al pasar de la Tabla 2.2 a la Tabla 2.3.
Los datos pueden ser reorganizados una vez ms en trminos de frecuencias
agrupadas. Esto permitir una interpretacin ms fcil y una mejor utilizacin
de la informacin. Para agrupar los datos se emplea la tcnica de intervalos de
clase. El nmero de intervalos es establecido por el investigador. En el siguiente
ejemplo, el investigador decide que la informacin de la Tabla 2.3 ser agrupada
en 15 intervalos de clase y a cada intervalo se le asignar un resultado, haciendo
lo siguiente:
1. Se busca la diferencia entre el dato ms alto y el dato ms bajo y se le
suma 1 al resultado. En nuestro ejemplo, (154-80) + 1= 74 + 1= 75.
2. Se divide el resultado por el nmero de intervalos (en este caso, 15),
para obtener el nmero de resultados que se agrupar en cada intervalo.
Si el valor resultante no es un entero, el mismo se redondea al nmero
impar ms cercano. De esa manera, siempre habr un nmero entero
a la mitad del intervalo de clase. En este caso, el nmero de datos de
cada intervalo (i) es 5 (porque 75/15=5).

23

3. Se identifica el valor ms bajo en la Tabla 2.3. Ese ser el lmite


inferior del primer intervalo de clase. Luego se resta 1 del intervalo de
clase (i-1). Aade i-1 (5-1=4) al valor del lmite inferior para llegar al
lmite superior. De esta forma se determina que el primer intervalo de
clase va desde el 80 hasta el 84 (o sea, 80+4=84).
4. El lmite inferior del siguiente intervalo de clase comienza con el entero
que sigue al 84. Luego se aade i-1 para llegar al lmite superior de ese
intervalo. En nuestro ejemplo, esto es 85+4=89.
5. Se repite el procedimiento para cada uno de los intervalos. La Tabla
2.4 muestra la distribucin de frecuencias agrupadas.
Tabla 2.4 Distribucin de frecuencias agrupadas de los
resultados de CI.
Intervalo de clase
f
Intervalo de clase
150 154
2
110 114
145 149
2
105 109
140 144
3
100 104
135 139
5
95 99
130 134
7
90 94
125 129
9
85 89
120 124
9
80 84
115 119
13

f
17
14
12
4
5
5
3

La agrupacin por frecuencias permite una interpretacin rpida de los datos que
se han obtenido. En este ejemplo, podemos interpretar que:
- existe una mayor frecuencia en los intervalos que van del 100 al
119.
- la frecuencia en los extremos tiende a disminuir.
Una vez agrupada, esta informacin se puede representar en un histograma o
bar chart. Para preparar dicho histograma, usamos como datos la frecuencia
para cada CI y el valor del CI segn aparecen en la Tabla 2.4. Para preparar el
diagrama, entonces colocamos la frecuencia en el eje vertical (eje de y) y el
intervalo de clase en el eje horizontal (eje de x). La escala en cada eje debe
reflejar los valores de cada rengln.
Para determinar la altura de cada barra en el histograma, tomamos como punto
de referencia la frecuencia de cada intervalo de clase, colocando un punto en el
lugar que representa la frecuencia. El ancho de la barra se derivar del ancho
del intervalo de clase. Un histograma de los datos podra lucir como aparece en
la Figura 2.1.

24

Frecuencia

Histograma de CI
18
16
14
12
10
8
6
4
2
0
8084

9094

100104

110114

120124

130134

140144

150154

Intervalo de clase

Figura 2.1. Histograma

Al estudiar el histograma, se hace ms fcil la identificacin de los CI ms


frecuentes entre los sujetos bajo estudio.
Tambin se pueden representar los datos sobre el CI de los estudiantes en el
recinto de la UIPR en un diagrama de distribucin porcentual (pie chart). Para
esto es necesario convertir los datos a un por ciento, a base del total de datos
individuales. Para ello, es conveniente reagrupar los intervalos para hacerlos
ms grandes, segn se ilustra en la Tabla 2.5.
Tabla 2.5 Distribucin porcentual de CI
Intervalo de CI Frecuencia
(%)
80-89
8
7.28
90-99
9
8.18
100-109
26
23.64
110-119
30
27.27
120-129
18
16.36
130-139
12
10.91
140-149
5
4.55
150 ms
2
1.81
Total
110
100.00
Para construir un diagrama porcentual, se fracciona un crculo en el cual cada
seccin del crculo corresponde a un ngulo que representa ese porcentaje de
360 grados. Los datos reagrupados dentro de este tipo de diagrama nos ayudan
a establecer relaciones entre una porcin de los datos y el todo.

25

Un diagrama de distribucin porcentual lucira como aparece a continuacin:

2%
5%

7%
8%

11%

16%

24%

80-89
90-99
100-109
110-119
120-129
130-139
140-149
150 ms

27%

Figura 2.2. Diagrama de distribucin porcentual


Del diagrama presentado en la Figura 2.2 se desprende que poco ms del 50%
de los estudiantes tiene CI entre 100 y 119.
Otra forma de representar los datos de un experimento es usando una grfica de
lneas. Estas son las que ms comnmente se utilizan cuando se quiere
establecer o comparar la relacin entre dos o ms variables.
Al presentar los datos en una grfica de lneas debes tomar en cuenta que la
grfica tiene dos ejes: el eje vertical (o eje de y) y el eje horizontal (o eje de
x). Este par de ejes se conoce como el plano cartesiano (Figura 2.3). El eje
horizontal, tambin conocido como la abscisa, representa las variables
independientes; el eje vertical, tambin conocido como la ordenada, representa
las variables dependientes.

Cuadrante I

Figura 2.3. Plano cartesiano


26

Recuerda que cada eje representa la recta numrica, teniendo el valor de cero
en la interseccin de las rectas. En el eje de x, hacia la derecha estn los
nmeros positivos y hacia la izquierda estn los nmeros negativos. En el caso
del eje de y, hacia arriba estn los nmeros positivos y hacia abajo estn los
nmeros negativos.
El plano cartesiano, que consiste de un nmero infinito de puntos, divide el plano
donde se dibuja en cuatro regiones llamadas cuadrantes. A cada punto le
corresponde un par ordenado (x,y) = (abscisa, ordenada) = (variable
independiente, variable dependiente). Cada cuadrante se distingue por tener los
signos particulares de cada uno de los ejes que lo forman. Cuando nuestros
datos son positivos, como en el ejemplo que aparece a continuacin, podemos
presentar los datos grficamente usando solamente el primer cuadrante.
Cada grfica va acompaada de una tabla. Los datos tabulados se trazan
(plot) en la grfica. Por ejemplo, consideremos un experimento en el que se
contaron levaduras por un perodo de 10 das. Los datos del experimento
aparecen en la Tabla 2.6.
Tabla 2.6 Nmero de clulas de
levadura en cada da
Da
Nmero de clulas de
levadura
0
20
1
28
2
40
3
55
4
63
5
70
6
70
7
62
8
62
9
50
10
30
Al construir la grfica de lnea, debemos identificar las variables, rotular los ejes,
establecer los intervalos (que deben ser regulares) y ubicar los puntos dentro del
cuadrante. Por ltimo, una grfica de este tipo debe tener un ttulo y una
leyenda que ayude en su interpretacin.
Una grfica de los datos de la Tabla 2.6 podra lucir como aparece a
continuacin.

27

Nmero de clulas

Nmero de clulas versus tiempo


80
70
60
50
40
30
20
10
0
0

10

Tiempo (das)

Figura 2.4. Grfica de lnea.


Cuando organizamos los datos grficamente, notamos que la grfica es un
conjunto de puntos que, en este caso, suben de izquierda a derecha por un
tiempo, para luego permanecer al mismo nivel por un tiempo y eventualmente
bajar. Este diagrama se conoce como un diagrama de dispersin. Aunque los
puntos estn unidos por una lnea, esto no siempre resulta as. De cualquier
manera, esta lnea nos ayuda a establecer las tendencias entre unos puntos y
otros dentro de la grfica.
B. Medidas de Tendencia Central
Como establecimos anteriormente, el objeto central de la estadstica es presentar
la informacin en forma conveniente, til y comprensible. El anlisis estadstico
de los datos nos permitir tomar decisiones en cuanto a la validez de los
resultados y su significado. Partiendo del ejemplo sobre el Coeficiente de
Inteligencia presentado anteriormente, podemos calcular una serie de valores
que se conocen como las medidas de tendencia central. En este ejemplo,
estas medidas de tendencia central nos permiten tener una idea general del CI
de los estudiantes admitidos al recinto sin tener que estudiar cada individuo. Las
medidas de tendencia central que usaremos son el promedio, la mediana y la
moda.
El promedio es una de las medidas de tendencia central ms utilizadas. Un
promedio equivale a la suma de todos los resultados dividido por el nmero de
individuos o eventos. Usando la Tabla 2.2, el promedio se calculara como sigue:

28

X
donde

CI
n

n=nmero de individuos y
suma de todos los CI.
Entonces, X =

12,539
113.99
110

Si redondeamos (el valor de CI no se expresa con decimales), el CI promedio de


los estudiantes en el ejemplo es de 114. Aunque en este caso dos estudiantes
tienen CI=114, no necesariamente el promedio es un valor que aparece entre los
datos recopilados. En trminos generales, esto quiere decir que la mayora de
los estudiantes (existen mtodos para calcular especficamente en qu consiste
esa mayora) tiene un CI cercano a este valor.
La mediana es una medida que equivale al punto medio de los valores
recopilados cuando los mismos son colocados en orden (ascendente o
descendente). Si observamos la Tabla 2.2, podemos ver que hay un total de 110
valores. En el caso que el nmero total de valores es impar, el valor del centro
constituye la mediana, que representa el valor que divide la poblacin en dos
mitades. Cuando el nmero total de valores es par, la mediana se calcula
tomando el promedio entre los dos valores en el centro de la secuencia de
valores ordenados. En el ejemplo de la Tabla 2.2, si colocamos los valores en
orden descendente, 113 es el valor que queda exactamente en el medio. Como
el nmero total de valores es par, es necesario sumar los dos valores del centro
(113 + 113 = 226) y dividir entre dos (2262) para calcular el promedio de los
valores. Como ves, en este caso la mediana es 113. Podemos decir que la mitad
de los estudiantes tiene un CI mayor (o menor) de 113. Aunque en este ejemplo
la mediana (113) est cerca del promedio (114), esto no siempre ocurre.
La moda es el valor con mayor frecuencia entre los datos (el ms repetido).
Para esto podemos referirnos a la Tabla 2.3. En el ejemplo del CI la moda es
108. Esto quiere decir que el valor de CI ms frecuente en la muestra es 108.

Ejercicio de laboratorio
Materiales:

200 semillas de la misma planta para cada estudiante


regla plstica transparente dividida en milmetros
calibrador de Vernier
10 tubos de ensayo y gradilla
papel de grfica

29

Procedimiento:
1. Mide el largo (en milmetros) de cada una de 200 semillas. Cuando hayas
medido la primera semilla, colcala dentro de un tubo de ensayo y rotula el
tubo con el tamao de la semilla. Si la segunda semilla vara en tamao,
colcala en un segundo tubo, de manera que al finalizar tengas varios tubos
en los que las semillas sern del mismo tamao.
2. Determina el nmero de semillas en cada tubo para establecer la frecuencia
de semillas de cada tamao.
3. Prepara una Tabla con informacin sobre la distribucin de tamao de las
semillas.
4. Organiza los datos sobre el tamao de las semillas en frecuencias agrupadas.
Debes decidir cuantos intervalos usaras.
5. Prepara un histograma con los datos sobre el tamao de las semillas.
6. Analiza los datos recogidos para determinar las siguientes medidas de
tendencia central:
a. promedio (media)
b. mediana
c. moda

Preguntas o Problemas:
A. El peso de unas ratas alimentadas con una dieta rica en protenas fue
determinado por siete (7) semanas. Los resultados aparecen a continuacin.
Tiempo
(semanas)
1
2
3
4
5
6
7

Peso
(gramos)
25
32
43
51
60
68
73

Dibuja una grfica que represente los datos de peso para las ratas en este
experimento.

30

B. El factor de estrs de una persona se clasifica con un nmero del 1 al 100.


En un estudio se encontr la siguiente relacin entre eventos significativos y el
factor de estrs que estos producen:
Evento
Divorcio
Prdida del trabajo
Embarazo
Muerte de un amigo
Cambio de escuela
Navidad

Factor de
estrs
73
47
40
37
20
12

Identifica la variable dependiente y la variable independiente. Dibuja un


diagrama de barras para representar grficamente los datos recogidos.
C. El tamao del territorio en que vive cierto animal salvaje se relaciona con su
peso, segn se establece en los siguientes datos.
rea (pies
cuadrados)
5
10
20
30
40
50

Peso (libras)
15
26
68
121
182
249

Identifica la variable dependiente y la variable independiente. Dibuja un


diagrama de dispersin para representar los datos.
D. La expectativa de vida de la mujer puertorriquea ha variado en las ltimas
dcadas, como se presenta a continuacin.
Dcada
1950-59
1960-69
1970-79
1980-89
1990-99
2000-10

(t=0)
(t=1)
(t=2)
(t=3)
(t=4)
(t=5)

Expectativa
de vida (aos)
70.9
73.2
74.8
77.5
78.6
79.1

Identifica las variables dependiente e independiente. Dibuja un diagrama de


dispersin.
31

E. Opcional.
A continuacin te incluimos una lista de los platos principales del restaurante de
Wendy's y de las caloras correspondientes a cada uno.
Papa
Papa
Papa
Papa
Papa
Papa

asada, plain
asada con tocineta y queso
asada con brcoli y queso
asada con queso
asada con chili y queso
asada con sour cream y cebollines

Sandwich
Sandwich
Sandwich
Sandwich
Sandwich

250
510
450
550
600
500

Big Classic
de pollo empanado
de pollo a la plancha
Chicken Club
de pescado

570
450
290
520
460

Cheeseburger doble
Jr. Cheeseburger
Jr. Cheeseburger Deluxe
Jr. Cheeseburger Deluxe con tocineta

590
320
390
440

Nuggets de pollo (6 pedazos)


Chili grande
Ensalada de repollo (1/2 taza)
Papitas fritas tamao grande

280
290
90
450

Frosty
Hamburger
Hamburger con todo
Hamburger doble carne
Hamburger Jr.
Loncherita

578
350
440
520
270
270

Ensalada Caesar
Ensalada Garden Deluxe sin aderezo
Ensalada de pollo a la plancha sin aderezo
Ensalada pequea, sin aderezo
Taco, sin aderezo

160
110
200
60
640

32

1.

Completa la tabla:
Clases
0 99
100 199
200 299
300 399
400 499
500 599
600 699

Frecuencia

2. Prepara un histograma con los datos de la tabla.


3. Determina las medidas de tendencia central
a. media (promedio)
b. mediana
c. moda

Referencias
Heidcamp, WH. 1995. Cell Biology Laboratory Manual, Appendix B: Statistics.
http://homepages.gac.edu/~cellab/contents.html
Heidcamp, WH. 1995. Cell Biology Laboratory Manual, Appendix C: Graphs.
http://homepages.gac.edu/~cellab/contents.html

33

Ejercicio 3: Uso de Sistemas de Medidas


Objetivos:
1. Distinguir entre las unidades bsicas de volumen, masa, longitud,
temperatura, tiempo y energa de los sistemas de medidas ingls y mtrico.
2. Aplicar equivalencias matemticas para convertir entre unidades de medida.
3. Utilizar adecuadamente los materiales e instrumentos de medida de uso
comn en el laboratorio de biologa.

Introduccin:
Todos los mtodos que se utilizan en biologa conllevan la toma de medidas que
permiten realizar observaciones cualitativas y cuantitativas sobre lo que estamos
estudiando. Las observaciones cualitativas son descripciones no numricas de
un objeto de estudio. Por ejemplo, la forma o el olor de un objeto son medidas
cualitativas. As, decimos que una hoja tiene forma irregular o que un
compuesto qumico tiene un olor metlico. Por otra parte, las medidas
cuantitativas son aquellas descripciones numricas de las caractersticas de un
objeto. Entre estas caractersticas estn el tamao, el peso, la extensin y el
volumen de un objeto. El resultado de un experimento depende grandemente
de la precisin y exactitud de las medidas que tomamos. En este curso
utilizars instrumentos y materiales que te permitirn apreciar los cambios en los
sistemas que estudiars mediante la medicin de sus caractersticas. En este
ejercicio aprenders el uso y manejo de algunos de estos instrumentos.
Sistemas y Unidades de Medida
Para llevar a cabo observaciones cuantitativas, es importante conocer los
sistemas de medidas. En Puerto Rico se usan mayormente el sistema ingls
(United Status Customary System USCS) y el sistema mtrico (Systeme
Internacional d Units SI). El sistema USCS se utiliza en el campo de la
ingeniera y, a menudo, en nuestra vida cotidiana. Las unidades utilizadas en
este sistema incluyen los galones y cuartillos (para medir volumen), las pulgadas,
pies, yardas y millas (para medir longitud o distancia) y las libras o quintales
(para medir masa). Sin embargo, el SI es el que ms se utiliza en el mundo
cientfico. Este sistema es el que se utiliza en la mayora de los pases para la
investigacin y el comercio. Este sistema tiene la ventaja de que utiliza un
sistema de notacin decimal, que se puede expresar en base 10 y se puede
aprovechar la notacin exponencial. Esto es de gran utilidad cuando expresamos
cantidades muy grandes o muy pequeas. En este sistema, la unidad bsica
para medir masa es el gramo (g), para la longitud es el metro (m), para
temperatura es el grado Celsius o centgrado (C) y para el volumen es el
34

litro (L). A pesar de que su uso cotidiano es limitado y de que en Puerto Rico
utilizamos el sistema USCS, es necesario que te familiarices con ambos sistemas
para convertir cifras entre uno y otro sistema. Ms an, la comunidad cientfica
utiliza otros trminos para referirse a ciertas unidades dentro de ambos sistemas.
Adems, es importante que te familiarices con los trminos y prefijos
relacionados con estas unidades (Tabla 3.1).
Tabla 3.1: Prefijos comunes usados en el sistema mtrico (SI)
Prefijo
Smbolo
Significado
picop
10-12
nanon
10-9
micro
10-6
milim
10-3
centic
10-2
decid
10-1
decada
101
hectoh
102
kilok
103
megaM
106
gigaG
109
Cuando tomes una medida, es necesario hacerlo con precisin y exactitud.
Adems, en algunas ocasiones ser necesario que estimes un valor. Para lograr
este fin, las unidades bsicas pueden ser fraccionadas. De esta manera,
podemos tomar medidas de cifras menores que la unidad bsica. La siguiente
informacin resume las unidades bsicas del sistema mtrico:
A. Longitud
El metro (m) es la unidad bsica del SI para medir longitud. La longitud en el
laboratorio se mide usualmente con cintas mtricas, reglas, o micrmetros.
Los micrmetros son usados para medir con precisin las distancias o
longitudes muy pequeas, como por ejemplo, dentro del microscopio.
Si hay alguna longitud que sea menor a un metro, entonces es conveniente
utilizar medidas ms pequeas que el metro. Con este fin, el metro se divide
en 10 partes iguales. Cada una de estas partes representa una dcima (1/10)
parte de un metro, y se conoce como decmetro (dm). Cada dm a su vez
puede ser dividido en 10 partes y cada fraccin de estas se conoce como
centmetro (cm). El metro puede subdividirse an ms. Estas fracciones del
metro aparecen en la Tabla 3.2.

35

Tabla 3.2 Unidades de longitud


Unidad
Smbolo
Cuntos hay en 1 m?

metro
decmetro
centmetro
milmetro
micrmetro
(micrn o
micra)
nanmetro
angstrom

m
dm
cm
mm
m

1
10
100
1,000
1,000,000

Qu fraccin
del m
representa?
--1/10
1/100
1/1,000
1/1,000,000

nm

1,000,000,000
10,000,000,000

1/1,000,000,000
1/10,000,000,000

Existen unidades de longitud mayores que 1 metro como el hectmetro (hm),


que equivale a 100 m y el kilmetro (km), que equivale a 1,000 m.
B. Masa
La unidad bsica para medir masa es el gramo (g). Para determinar la masa
de un cuerpo, usualmente utilizamos balanzas, que miden especficamente el
peso del cuerpo. El peso del cuerpo es una medida de la fuerza que la
gravedad ejerce sobre el cuerpo. Para propsitos de este laboratorio el peso
y la masa son equivalentes.
Existen varios tipos de balanza; las ms usadas en el laboratorio son las de
torsin, las electrnicas y las analticas. Estas balanzas difieren en su
capacidad y precisin.
Al igual que el metro, el gramo est subdividido en fracciones. La Tabla 3.3
presenta las fracciones ms utilizadas en biologa.
Tabla 3.3 Unidades de masa
Unidad

Smbolo

gramo

Cuntos hay en Qu fraccin


1 g?
del g
representa?
1
---

miligramo

mg

1,000

1/1,000

microgramo

1,000,000

1/1,000,000

Una unidad de masa mayor al gramo es el kilogramo (kg), que equivale a


1,000 gramos.

36

C. Volumen
La unidad bsica para medir el volumen es el litro (L), que es equivalente a
un decmetro cbico (dm3). El volumen de un objeto puede medirse utilizando
diversas tcnicas. Si el objeto es lquido, su volumen puede ser medido con
matraces, probetas, buretas, pipetas y micropipetas. Al igual que con otras
medidas, el litro puede ser subdividido en unidades ms pequeas. La Tabla
3.4 presenta las fracciones del litro que ms se utilizan en biologa.
Tabla 3.4 Unidades de volumen
Unidad
Smbolo
Cuntos hay en Qu fraccin
1 L?
del L
representa?
litro
L
1
--mililitro
mL
1,000
1/1,000
microlitro
L
1,000,000
1/1,000,000
D. Tiempo
La unidad bsica para medir el tiempo en el SI es el segundo (s). El
segundo se puede dividir en dcimas, centsimas y milsimas de segundo
(milisegundo).
E. Temperatura
La temperatura es una medida de la intensidad de calor de un cuerpo. Para
medir la temperatura de un objeto se usa comnmente un termmetro, que
utiliza la escala Fahrenheit (del USCS), la escala Celsius o centgrado (del SI),
o ambas. La Tabla 3.5 presenta algunas temperaturas usuales para
fenmenos conocidos.
Tabla 3.5 Ejemplos de temperaturas aproximadas
Ejemplos
Temperatura
Temperatura
aproximada, C aproximada, F
Agua hirviendo
100
212
Hielo
0
32
Caf caliente
80
176
Temperatura de
25
77
saln (con aire
acondicionado)
Nevera
4
39
Parte ms fra del
-5
23
congelador
Tanto la escala Fahrenheit como la escala Celsius toman como referencia los
puntos de congelacin y de ebullicin del agua. En la escala Centgrado, la
37

temperatura de congelacin del agua es de 0 y la de ebullicin es de 100.


Entre ambos extremos hay 100 divisiones, cada una de las cuales se conoce
como grado centgrado (C). En la escala Fahrenheit el agua se congela a 32
y hierve a 212. Cada una de las 180 divisiones entre ambos puntos se
conocen como grados Fahrenheit (F). Ambas escalas incluyen nmeros
negativos (por debajo de 0). Es importante que puedas convertir entre uno y
otro sistema con facilidad. Los factores de conversin son los siguientes:
C = (F-32) 0.556

F = (C X 1.8) + 32

F. Energa
Una de las unidades para medir energa es la calora (cal), utilizada en el
USCS. Una calora es la cantidad de calor necesaria para aumentar la
temperatura de 1 gramo de agua en un grado centgrado.
Toma de medidas
A lo largo de tu experiencia como estudiante de biologa ser necesario tomar
medidas de diversos objetos para hacer observaciones relacionadas con los
mismos. El resultado de los trabajos experimentales depender de tu habilidad
al tomar esas medidas. Adems de tomarlas correctamente, es necesario que
las interpretes adecuadamente. Parte de esa interpretacin debe considerar la
incertidumbre al tomar las medidas.
Usualmente una regla de un metro est dividida en centmetros y a veces en
milmetros. Si medimos el largo de una hoja con esta regla (el metro), que est
dividida en centmetros, podemos leer que la hoja mide ms de 3 pero menos de
4 cm. Estamos seguros de que la hoja mide algo ms de 3 cm. En el lenguaje
cotidiano decimos que la hoja mide 3 cm y pico, pero en las ciencias es
necesario precisar la medida exacta de la hoja. Para tener una mejor precisin
al tomar la medida, es necesario que aproximemos (o estimemos) ese pico. Si
el metro solamente est graduado en centmetros, ser necesario estimar o
aproximar el nmero de milmetros adicionales a los 3 cm que son seguros.
Midiendo a nuestra mejor capacidad, si el objeto llega al punto exacto entre 3 y
4, podemos decir que el objeto mide 3.5 cm. En esta cifra, el valor de 3 cm es
seguro. La incertidumbre en esta medida est en el ltimo lugar decimal. Esto
quiere decir que la hoja mide, con certeza, entre 3.1 y 3.9 cm y el 0.5 cm
medido es incierto. En una segunda medida de la misma hoja, o si otra persona
mide la misma hoja, puedes determinar que mide 3.4 cm, en lugar de 3.5 cm.
Esta variacin en las medidas, que es normal, se conoce como precisin. La
variacin en la medida se minimizara si el metro estuviese dividido en
milmetros.

38

Si medimos la hoja con un metro con divisiones de 1 mm, entonces podemos


medir con un mayor grado de certeza el largo de la hoja. Por ejemplo, podemos
determinar que el tamao de la hoja est entre 3.4 y 3.5 cm. En este caso,
corresponde determinar el pico entre 3.4 y 3.5. Entonces tendramos 2 cifras
con certeza y la tercera sera incierta, o sea que la hoja mide entre 3.41 y 3.49.
Observa como en este caso aumentamos el grado de certeza de que nuestra
medida es correcta. El grado de cercana al valor correcto de lo que estamos
midiendo se conoce como exactitud.
Al tomar medidas en el laboratorio es necesario hacerlo con precisin y con
exactitud. Para lograrlo, hay que tener cuidado y utilizar ciertas estrategias:
1. siempre que sea posible, debe medir la misma persona, de modo que
se minimice la variabilidad inherente a la forma de medir de cada
persona.
2. los instrumentos de medicin que usamos deben estar en buen
estado. No uses equipo roto o deteriorado.
3. al medir, siempre es conveniente usar el metro o envase de tamao o
capacidad ms cercano a la medida que queremos tomar. Por
ejemplo, si vas a medir una hoja de 12.5 cm, usa una regla o metro
pequeo.
4. al medir el volumen de los lquidos, usa como referencia el punto por
debajo del menisco (la interfase entre el lquido y el aire sobre el
mismo). El menisco se coloca al nivel de los ojos para leer en un solo
plano.
5. al pesar reactivos qumicos, stos se colocan sobre papel, bandejas de
pesar u otro envase adecuado.
6. al usar un instrumento electrnico (balanzas, metros de pH, relojes,
etc.), es necesario cerciorarse de que el mismo est calibrado
correctamente.
7. al tomar una medida, colcate de frente al instrumento, de modo que
la lectura se haga en lnea recta con la escala que se utiliza.
Conversin de Unidades
Podemos expresar una medida de varias formas al utilizar diferentes unidades de
medida. Por ejemplo, podemos decir que el ancho de una puerta del saln de
clases mide 1 m, lo que tambin equivale a 10 dm (10 dm=1 m), o 100 cm (100
cm=1 m). Todos estos valores son equivalentes y, por lo tanto representan la
misma medida. Por otra parte, tambin existen equivalencias entre los sistemas
USCS y SI. Considera la siguiente situacin: en Puerto Rico, por ejemplo,
compramos la gasolina en litros (SI), pero la capacidad del tanque de gasolina se

39

mide en galones (USCS). Mas an, el automvil mide la distancia recorrida en


millas, pero la rotulacin de las carreteras est expresada en kilmetros.
Durante el transcurso de tus estudios en biologa tendrs la necesidad de
convertir diferentes cifras entre sistemas de medidas o dentro del mismo sistema
de medida. Para realizar estas conversiones es necesario conocer y aplicar las
equivalencias existentes entre las unidades, principalmente las que se utilizan
para expresar masa, longitud y volumen. Para esto es necesario consultar una
tabla de equivalencias.
Los pasos a seguir al hacer una conversin son:
1. Identifica la unidad que quieres cambiar (unidad original) y la unidad a
la que quieres cambiar (unidad final).
2. Identifica o calcula el factor de conversin (la relacin o equivalencia
entre ambas unidades).
3. Multiplica el valor de la unidad que se va a cambiar (unidad original)
por una fraccin en la que el numerador posee la unidad a la que
quieres cambiar (unidad final) y el denominador posee la unidad que
quieres cambiar (unidad original). Como estamos multiplicando por
una fraccin compuesta por dos cantidades equivalentes, sera como si
multiplicramos por 1, lo que no afecta el valor de la medida inicial. Al
cancelar la unidad original con la unidad del denominador, prevalece la
unidad final.
Considera el siguiente ejemplo:
A cuntos gramos de glucosa equivalen 500 miligramos de glucosa?

Paso 1: Convertir de mg a g.
Paso 2: 1 g=1,000 mg
Paso 3: 500mg X

1g
0.5g
1,000 mg

De esta manera, calculaste que 500 mg equivalen a 0.5 g.


Al final de este ejercicio de laboratorio encontrars varios problemas que te
permitirn familiarizarte con el proceso de conversiones.

40

Ejercicio de Laboratorio
A. Medidas de Longitud
Materiales:

metro
calculadora
reglas de 6 y 12 pulgadas graduadas en centmetros
objetos de diversos tamaos (dados, cajas de fsforos, cajas
y mesa)

Procedimiento:
1. Observa el tamao de los objetos disponibles para medir.
2. Identifica la regla o metro que contiene la unidad (metro o centmetro)
ms apropiada para medir los objetos.
3. Mide en centmetros el largo, ancho y altura de tres cajas de diferente
tamao. Calcula el rea de cada cara de las cajas (rea = largo X
ancho) y el volumen (volumen = largo X ancho X altura) del objeto.
4. Calcula el rea superficial de cada caja, sumando las medidas de rea
de cada lado.
5. Calcula la proporcin del rea superficial al volumen para cada caja
(rea superficial/volumen).
6. Compara las proporciones rea superficial/volumen de las tres cajas.
Qu concluyes?
B. Medidas de Volumen
Materiales:

probetas de diversas capacidades (50 y 100 mL)


vasos de laboratorio (beakers) de 50, 100 y 150 mL

Procedimiento:
1. Familiarzate con envases de medicin tales como vasos (beakers), y
probetas de diversas capacidades.
2. Determina el volumen de agua necesario para llenar un vaso de
laboratorio hasta la medida ms alta que refleja la escala. Anota esta
medida de volumen de agua.
3. Vierte el agua que mediste en el vaso en una probeta adecuada.
Anota el volumen que mide la probeta y compara este volumen con el
volumen medido en el vaso. Determina si hay diferencias entre ambas
medidas e identifica cul envase te permite leer con mayor precisin el
volumen.

41

4. Mide 40 mL de agua en un vaso de 150 mL. Anota el volumen como


volumen 1. Vierte el agua en una probeta de 100 mL y determina el
volumen (volumen 2). Anota esta medida. Vierte el agua en una
probeta de 50 mL y determina el volumen (volumen 3). Compara los
volmenes e identifica el envase que te permite medir los 40 mL de
agua con mejor precisin.
C. Medidas de Masa
Materiales:

vasos de laboratorio de 50 y 100 mL de capacidad


papel de libreta
libreta de laboratorio
balanza
probeta de 50 mL

Procedimiento:
1. Utilizando una balanza, determina el peso de una hoja de papel de tu
libreta y el peso de la libreta de laboratorio.
2. Utilizando una balanza, determina el peso de un vaso de laboratorio de
100 mL.
3. Mide 50.0 mL de agua con una probeta y transfirelos al vaso que ya
pesaste.
4. Determina el peso de 50 mL de agua dentro del vaso previamente
pesado. Conserva este vaso y el agua para la prxima actividad.
5. Calcula la densidad (masa/volumen) del agua y compralo con la densidad
del agua (1g/ml).
D. Medidas de temperatura
Materiales:

termmetro
vaso de laboratorio con capacidad para 100 mL con 50 mL
de agua
hielo
plancha para calentar
guantes protectores

Procedimiento:
El propsito de esta seccin del ejercicio es que te familiarices con la escala
del termmetro disponible en el laboratorio. SEGURIDAD: El termmetro

42

contiene mercurio, un metal txico. En el caso de que el termmetro se


rompa y se derrame el mercurio, no toques el mercurio ni lo trates de secar
con papel toalla. Infrmale el accidente a tu instructor inmediatamente.
1. Determina la temperatura del agua dentro del vaso. Remueve el
termmetro del vaso.
2. Coloca el vaso sobre una plancha para calentar y calienta el agua a
temperatura alta por 5 minutos. SEGURIDAD: Maneja con mucho
cuidado la plancha y el vaso caliente. Utilizando guantes protectores,
remueve el vaso de la plancha caliente y colcalo sobre papel toalla sobre
la mesa.
3. Inmediatamente, determina la temperatura del agua caliente.
4. Aade 2 cubos de hielo al agua. Espera 2 minutos.
5. Determina la temperatura del agua nuevamente.
6. Convierte las tres temperaturas tomadas a grados Fahrenheit.

Preguntas o Problemas
A. Usa las tablas de conversin que aparecen en el texto y al final de este
ejercicio para efectuar las siguientes conversiones:
1. 425 g = ____ kg
2. 0.5 ml = ____ L
3. 3.5C = ____ F
4. 20F = ____ C
5. 33 cm = ____ mm
6. 1.78 m = ____ pies
7. 36 pulgadas = ____ cm
8. 85 mL = ____ L
9. 75F = ____ C
10. 60 pulgadas = ____ m
11. Si contamos con 1 L de solucin de almidn y necesitamos dividir esa
cantidad en cuatro partes iguales, de cunto volumen ser cada porcin?
12. Si tienes 625 L de una solucin de NaOH y quieres aadirle agua hasta
llegar a 1.0 mL, cunto volumen de agua necesitas aadir al tubo?
13. Un pediatra determin que la temperatura de un beb es de 102.2F. Si
se define la fiebre como cualquier temperatura sobre 37.5C, podemos
decir que el beb tiene fiebre?
B. Subraya la cantidad mayor de cada uno de los siguientes pares. Si ambas
cantidades son iguales, subraya ambas cantidades.
1.
2.
3.
4.
5.

250 g, 0.23 kg
100 mL, 0.1 L
10C, 10F
1.0 g de agua, 1.0 mL de agua
30 mL, 300 L
43

C. Problemas de Medidas de Longitud


1. Cuntas tablillas de 140cm de longitud se pueden cortar de un trozo de
madera que mide 4.20m de longitud?
2. Una caminata que se realizar en San Juan tendr dos puntos de
descanso, donde se podrn detener los competidores a beber agua y a
secarse el sudor. El primer descanso ser a 1400m de la salida, el
segundo descanso a 1200m del primero. Adems, el segundo descanso
est a 1800m de la meta. Indica, en kilmetros, la longitud de la
caminata.
D. Problemas de Medida de Masa
1. A una paciente se le recomienda un suplemento vitamnico con 2 g de
calcio por da. Las tabletas de calcio que ella compr contienen 500mg de
calcio cada una. Cuntas tabletas por da se deber tomar esta
paciente?
2. Si un huevo tiene 247mg de colesterol, cuntos gramos de colesterol
tendr una docena de huevos?
3. Un vaso de 8oz de leche contiene 33mg de colesterol. Cuntos gramos
de colesterol habr en 4 vasos de leche?
E. Problemas de Medida de Volumen
1. Una lata de jugo de tomate contiene 1.36L. Cuntos mililitros de jugo de
tomate habr en esta lata?
2. Una vacuna para la influenza se comenzar a poner en el prximo mes.
Una corporacin mdica compra 12 L de esta vacuna. Cuntos
pacientes se podrn vacunar si cada persona recibe 3ml de vacuna?
F. Problemas de Medida de Energa
1. Una rebanada de pan tiene 119 caloras. Cuntas caloras puedes
eliminar de tu dienta si dejas de comer una rebanada de pan por da
durante 30 das?
2. Para poder mantenerse en el peso, una persona moderadamente activa
requiere 20 caloras por cada libra del peso de su cuerpo. Cuntas
caloras debe consumir una persona moderadamente activa que pesa 150
libras para mantenerse en ese peso?

44

Factores de conversin
1 pie = 12 pulgadas
1 metro = 39.37 pulgadas = 1.1 yardas
1 mL = 1 cm3

Referencias
Heidcamp, WH. 1995. Cell Biology Laboratory Manual.
http://homepages.gac.edu/~cellab/contents.html
Vodopich, DS y R Moore. 1999. Biology: Laboratory Manual. WCB McGraw-Hill,
Boston, Massachusetts.
http://www.unc.edu/~rowlett/units/

45

Ejercicio 4: Uso del Microscopio


Objetivos:
1. Mencionar los diferentes tipos de microscopios.
2. Identificar las partes de los microscopios de luz visible.
3. Describir la funcin de cada una de las partes bsicas de un microscopio
compuesto y diseccin.
4. Explicar conceptos relacionados con el uso del microscopio, tales como
inversin de imagen, profundidad de foco, campo visual, magnificacin total y
otros.
5. Emplear las tcnicas correctas para enfocar un objeto bajo el microscopio.
6. Efectuar tareas de mantenimiento y cuidado bsico de un microscopio de luz.

Introduccin
Muchos organismos vivientes o sus partes son muy pequeos para ser
observados a simple vista. Por tal razn, existe una serie de hallazgos biolgicos
que se han realizado gracias a la invencin del microscopio. El microscopio es
un instrumento que se compone de un sistema de lentes cncavos y convexos
que enfocan la luz que pasa a travs del espcimen, produciendo una imagen
magnificada. Adems de los lentes, el microscopio tiene un sistema para
iluminar el objeto examinado.
Existen diversos tipos de microscopios, entre los que se encuentran el microcopio
de luz visible, de luz polarizante, de luz ultravioleta y electrnico. Los
microscopios de utilizan ampliamente en la investigacin y cada uno tiene su
aplicacin particular.
Los microscopios de luz utilizan lentes que enfocan los rayos de luz y magnifican
la imagen del objeto observado. La iluminacin del microscopio proviene de una
lmpara ubicada en la parte inferior (base) del microscopio. Existen diferentes
clases de microscopios de luz. Los microscopios que usars en este curso son
microscopios compuestos, que se llaman as porque utilizan dos o ms lentes. El
microscopio de diseccin o estereoscopio (Figura 4.1) est diseado para el
estudio de los objetos a baja magnificacin, cuando se puede observar el objeto
en su totalidad.
Otros microscopios se utilizan para observar estructuras pequeas, ya que este
tiene una capacidad de magnificacin mayor. Dependiendo de la naturaleza del
objeto bajo estudio, usualmente es necesario o conveniente teir las estructuras
que queremos observar, para distinguirlas de su entorno. La tincin tambin
ayuda a distinguir estructuras celulares internas. Una desventaja del proceso de
tincin es que requiere que el objeto se fije de alguna manera a la laminilla.
Esto casi siempre resulta en la destruccin o muerte del organismo.

46

Figura 4.1. Diagrama del microscopio de diseccin.

Partes del microscopio compuesto:


El primer paso en el uso correcto del microscopio es conocer los nombres y
funciones de cada parte del mismo. Dichas partes aparecen identificadas en la
Figura 4.2 y son visibles en la Figura 4.3.
Las partes ms importantes de un microscopio de luz son:
1. brazo sostiene el cabezal con sus lentes oculares y el revolver con los
lentes objetivos. El brazo constituye el cuerpo del microscopio.
2. base sostiene el microscopio en posicin vertical. Usualmente
contiene espejos y algn espacio para los controles para la fuente de
iluminacin. Colocar la base del microscopio sobre la palma de la mano te
ayudar a moverlo de una manera segura.
3. cabezal contiene prismas o espejos que dirigen la imagen al lente
ocular.
4. lente ocular es el lente que ubica en el tubo del cabezal, cerca del
ojo del operador del microscopio. Regularmente este lente magnifica la
imagen del objeto bajo estudio 10 veces (10X). Existen microscopios
monoculares, binoculares y trinoculares.

47

Figura 4.2. Diagrama esquemtico del microscopio de luz de campo brillante.

48

Lentes
oculares

Revlver
Brazo
Platina
Tornillo macromtrico
Tornillo micromtrico
Base

Figura 4.3. Fotografa del microscopio


de luz de campo brillante

5. lente objetivo es el lente ms cercano al objeto que se observa.


Muchos microscopios tienen varios tipos de lentes, con capacidad para
magnificar la imagen de 4 a 100 veces. Los lentes objetivos se
encuentran ubicados en el revlver (ver Figura 4.4).
a. objetivo de 4X (o de rastreo) aumenta el tamao de la
imagen 4 veces. Se utiliza para rastrear y centralizar un objeto o
para examinar en detalle especmenes grandes. Permite una
mayor cobertura del rea del objeto bajo estudio.
b. objetivo de 10X (o de baja potencia) aumenta el tamao de la
imagen 10 veces. Es ms largo que el objetivo 4X, por tener un
mayor nmero de lentes. Por esto logra mayor magnificacin, pero
cubre un rea menor que el objetivo de diseccin. Se utiliza para
comenzar a observar detalles en organismos microscpicos.
c. objetivo de 40X (o de alta potencia) aumenta el tamao de la
imagen 40 veces. Algunos microscopios pueden tener un lente de
alta potencia de 45X. Este lente es tambin ms complejo que el
49

lente de baja potencia, por lo que abarca an menos rea del


objeto bajo observacin.
d. objetivo de 100X (o de inmersin en aceite) aumenta el
tamao de la imagen 100 veces, aunque algunos microscopios
pueden tener un lente 90X en lugar de uno 100X. Este lente se
utiliza para observar detalles de los especimenes bajo estudio.
Para usar este objetivo, es necesario colocar una gotita de aceite
de inmersin entre el objetivo y el objeto bajo observacin, de
modo que el lente queda inmerso en el aceite. El aceite evita la
dispersin de luz, produciendo una imagen ms definida, lo que es
indispensable al usar este lente, que cubre poco del rea bajo
estudio.
6. revlver o portaobjetivos sostiene a los lentes objetivos (Figura 4.4).
Mediante la rotacin cuidadosa del mismo, podemos cambiar el lente
objetivo para observar en ms detalle, segn sea necesario.
7. plataforma o platina apoya la laminilla (Figura 4.4). Tiene un orificio
en el centro que permite el paso de la luz que iluminar el objeto bajo
estudio. En algunos modelos, esta estructura se sube o se baja para
ayudar en el enfoque.
8. tornillo de ajuste grueso (tornillo macromtrico) mueve la
plataforma o el tubo que sostiene el revlver haciendo movimientos
amplios para enfocar la imagen con el objetivo de diseccin (ver Figura
4.5).
9. tornillo de ajuste fino (tornillo micromtrico) mueve la platina o el
tubo que sostiene el revlver, haciendo movimientos cortos, que permiten
enfocar la imagen (enfoque fino). Se usa con los objetivos 10, 40 y 100X
(ver Figura 4.5).
10. diafragma (obturador de luz) localizado bajo la plataforma y
controlado por una palanca, el diafragma se utiliza para controlar el paso
de luz hacia el espcimen bajo estudio (ver Figura 4.6).
11. condensador lente localizado debajo del diafragma, permite
concentrar hacia el objeto el haz de luz que viene de la fuente de
iluminacin. Puede moverse hacia arriba o hacia abajo para cambiar el
punto de iluminacin en el espcimen (ver Figura 4.6).
12. fuente de luz bombilla localizada en la base del microscopio.
Usualmente, el microscopio posee un interruptor para encender la

50

bombilla, un control para ajustar la intensidad de la luz y un filtro (ver


Figura 4.6).

Revlver

Objetivos

Pinzas

Platina

Figura 4.4. Partes del microscopio.

Tornillo macromtrico
(de ajuste grueso)

Tornillo
micromtrico
(de ajuste fino)

Figura 4.5. Tornillos para enfoque.

51

Condensador

Diafragma

Fuente de luz

Figura 4.6. Partes del microscopio.

Precauciones al manejar el microscopio compuesto


El microscopio es un instrumento de trabajo indispensable para la observacin de
objetos biolgicos. Su uso y cuidado son tu responsabilidad. Siempre debes:
1. firmar al utilizar el microscopio y anotar el nmero del microscopio
usado.
2. transportar el microscopio sujetndolo con ambas manos (una
soportando la base y la otra agarrando el brazo).
3. limpiar los lentes objetivos y oculares nicamente con papel de lente,
NUNCA con papel toalla. El papel toalla tiene fibras que pueden rayar los
lentes.
4. guardar el microscopio sin laminilla, con el revlver en el lente de
menor aumento, con la platina en su punto ms bajo y con el cable
enrollado entre la platina y la base del microscopio.
5. notificar cualquier problema a tu instructor.
Caractersticas de los lentes objetivos
Los lentes objetivos de un microscopio se caracterizan por su capacidad de
magnificacin, poder de resolucin, distancia de trabajo y profundidad de foco.
La magnificacin total de una imagen es el producto de la magnificacin del
ocular multiplicado por la magnificacin del objetivo. Esto es, si un objeto es
observado a travs de un ocular con magnificacin 10X y de un objetivo con
magnificacin de 10X, la magnificacin total de la imagen es de 100X (10X X
10X).

52

El poder de resolucin determina con cunta claridad se pueden observar


detalles que se ven a travs del microscopio. La resolucin se define como la
habilidad para discernir como separados dos objetos que estn cerca. Por
ejemplo, el ojo humano puede detectar como separados dos objetos que tengan
entre s una distancia de 100 M o ms. Sin embargo, el microscopio compuesto
tiene un poder de resolucin de 0.2 M. La resolucin aumenta con la
magnificacin del lente y con el tipo de luz que se usa. Te dars cuenta de esta
diferencia cuando observes bajo el microscopio una letra obtenido del peridico.
Cuando observamos un espcimen con el microscopio compuesto, el objetivo
debe estar localizado a una distancia adecuada para que el objeto se vea en
foco. Esta distancia entre el objetivo y el objeto se conoce como distancia de
trabajo, y es constante para cada objetivo. A medida que aumenta la
magnificacin, se reduce la distancia de trabajo, de manera que la distancia es
de 25 a 55 mm para el objetivo 4X, de 5 a 10 mm para el objetivo 10X y de 0.15
a 0.60 mm para el objetivo de 45X. Aunque cada objetivo tiene una distancia de
trabajo diferente, estos objetivos han sido alineados en el revlver de tal manera
que el espcimen queda en foco al girar el revlver y cambiar de un objetivo a
otro. Cuando los objetivos estn alineados, no es necesario hacer reajuste en el
foco y se dice que los objetivos estn parafocales (coinciden en un mismo foco).
Cualquier espcimen observado en una laminilla tiene longitud, ancho y
profundidad. La distancia vertical en la que el espcimen permanece en foco se
conoce como profundidad de foco. La profundidad de foco es constante para
cada objetivo. Mientras mayor sea la magnificacin del objetivo, menor ser su
capacidad para enfocar toda la profundidad del espcimen, por lo que veremos
partes del mismo en foco y partes fuera de foco. Por esto, si queremos observar
la estructura tridimensional de un objeto, es ms conveniente observarlo con los
objetivos de bajo aumento.
El campo de visin se refiere al rea que se puede ver a travs del lente ocular
y del objetivo. Debes recordar que, a medida que aumentamos la magnificacin,
menor ser el tamao del campo de visin. Por consiguiente, si estamos tratando
de observar un objeto que no est exactamente en el centro del campo, es
posible que se pierda del campo de visin al cambiar de objetivo, segn se
representa en la Figura 4.7. Si conocemos el tamao del campo de visin, y
contamos con micrmetros de platina y oculares, podemos determinar el tamao
aproximado de un espcimen visto a travs del microscopio o podemos
enumerar microorganismos en una muestra. Estas prcticas son de gran utilidad
en campos como la parasitologa y la microbiologa aplicada.

53

Figura 4.7. Ubicacin de un objeto en el campo de visin. El diagrama superior


muestra el objeto fuera del campo de visin, el diagrama inferior muestra el objeto
dentro del campo de visin. A una magnificacin mayor el campo de visin se reduce
(diagrama superior) y a una menor magnificacin se amplia (diagrama inferior).

Tipos de microscopios
El microscopio de diseccin o estereoscopio permite observar objetos
enteros que sean muy grandes u opacos para ser observados por el microscopio
de luz visible. Tambin se utiliza para ayudar a realizar disecciones, es decir,
separacin de las estructuras de un organismo. Generalmente es binocular y
tiene dos fuentes de iluminacin para la observacin estereoscpica. Tambin
posee un solo tornillo de ajuste de foco (grueso). La magnificacin mxima de
un microscopio de diseccin depende del modelo y la marca.
El microscopio de campo oscuro (darkfield) se utiliza para observar
organismos que no pueden teirse con tintes comunes. En este tipo de
microscopio existe un disco opaco, que impide el paso de luz hacia la parte
54

central del condensador, de modo que solamente la luz difractada por el objeto
llega a los objetivos. De esta forma, los objetos se observan brillantes sobre un
campo oscuro. La magnificacin mxima de un microscopio de campo oscuro es
de 1,000 a 2,000X.
El uso de un microscopio de contraste de fase permite un examen detallado
de estructuras dentro de organismos vivos sin necesidad de teir el organismo.
Tambin permite un mayor contraste entre objetos con mayor espesor o
densidad. El microscopio de fase contiene condensadores y objetivos especiales
coordinados, capaces de controlar la luz que pasa a travs de las diferentes
partes del espcimen bajo estudio. Un disco anular (ver Figura 4.8) hace que los
rayos de luz que pasan a travs del espcimen sean difractados (desviados) de
una manera diferente y viajan por diferentes trayectorias antes de llegar al
ocular. Esto hace que percibamos la imagen con distintos grados de brillantez u
oscuridad, lo que produce un efecto tridimensional. La magnificacin mxima de
un microscopio de fase es de 1,000 a 2,000X.

Figura 4.8. Diagrama de la formacin de la imagen en un microscopio de fase.

Un microscopio de fluorescencia utiliza luz ultravioleta en lugar de luz visible


para iluminar el objeto bajo estudio. La luz ultravioleta tiene un largo de onda
55

ms corto que la luz visible, lo que permite observar objetos de menor tamao.
Para hacerlo, se utilizan tintes especiales, que son invisibles al ojo humano bajo
luz visible pero que son fluorescentes bajo luz ultravioleta. Este microscopio
tiene una utilidad particular, ya que puedes distinguir partes especficas del
objeto que observas, ya que la parte teida muestra fluorescencia sobre un
fondo oscuro (no teido). La magnificacin mxima para un microscopio de
fluorescencia es similar al microscopio de luz visible.
El microscopio electrnico es el que brinda mayor magnificacin, por lo que
tiene utilidad para observar objetos pequeos (de 0.003 M), tales como virus u
otras estructuras subcelulares. Esto se debe a que utiliza electrones (y no luz)
para visualizar los objetos. En lugar de utilizar lentes de cristal para enfocar, se
utilizan imanes (lentes electromagnticos) para enfocar el haz de electrones, que
viaja a travs de un vaco hacia el espcimen. La capacidad de magnificacin de
un microscopio electrnico es de 200,000 a 400,000X. Existen varios tipos de
microscopio electrnico, entre los cuales los ms utilizados son el de transmisin
y el de rastreo.
En el microscopio electrnico de transmisin, el rayo de electrones pasa a
travs de un corte muy fino del espcimen y de un objetivo electromagntico
antes de ser proyectado a una placa o pelcula fotogrfica. La imagen que se
observa resulta de la absorcin selectiva de electrones por diferentes partes del
objeto observado. En el microscopio electrnico de rastreo (scanning), los
rayos de electrones son dirigidos hacia el objeto bajo estudio y reflejados de la
superficie del objeto a una placa fotogrfica. Como los electrones no atraviesan
el objeto, no es necesario cortarlo finamente y se puede observar en detalle los
contornos del objeto. Los microscopios electrnicos tienen la desventaja de que
no permiten la observacin de organismos vivos y, como no usan luz visible, los
objetos o estructuras solamente se aprecian en blanco y negro. En los libros de
texto usualmente se colorean por computadora las imgenes para enfatizar sus
diferencias.

Ejercicio de laboratorio
Materiales:

palillos de dientes
laminilla con la letra e
laminilla con hilos coloreados
laminillas y cubreobjetos
laminillas de depresin
vaselina
pipetas Pasteur y bulbos
agua estancada (PROVISTA POR LOS ESTUDIANTES)
especmenes de animales pequeos (PROVISTOS
POR LOS ESTUDIANTES)
microscopios
micrmetros oculares y de platina
56

pinzas finas
Procedimiento
SEGURIDAD: Las laminillas y cubreobjetos estn hechos de vidrio, por lo que
debes tener precaucin para no cortarte con ellos. En caso de accidente, debes
notificarlo a tu instructor inmediatamente. Tambin debes recordar descartarlas
en los envases apropiados al final del ejercicio.
A. Inversin de la imagen
Debido a la posicin de los lentes en el microscopio, la imagen que se observa
est invertida. Para demostrar esta situacin, utiliza una laminilla con la letra
e.
1. Observa a simple vista la laminilla y dibuja lo observado.
2. Coloca la laminilla en la platina en la misma direccin en que la observaste a
simple vista. Enfoca con el objetivo de rastreo (4X). Para enfocar, coloca el
lente de 4x completamente perpendicular a la platina. Gira lentamente el
tornillo macromtrico mientras observas a travs del microscopio hasta que la
imagen sea clara. Ajusta la imagen con el tornillo micromtrico. Dibuja la
imagen observada.
3. Mientras observas a travs del microscopio, mueve la platina hacia la derecha,
la izquierda, arriba, abajo, al frente y atrs. Describe la direccin en que se
mueve la imagen.
B. Enfoque con lentes de baja y alta potencia
1. Luego de enfocar la laminilla con la letra e utilizando el lente de 4X y sin
subir o bajar la platina, cambia el lente objetivo al 10X para observar la misma
imagen. sta debe permanecer bastante enfocada. De no ser as, ajusta la
imagen con el tornillo micromtrico. Dibuja la imagen.
2. Cambia ahora al objetivo de alta potencia (40X o 43X). Enfoca con el botn
micromtrico, si es necesario. Dibuja la imagen que se observa en el campo
de visin (el rea vista a travs del lente ocular del microscopio). Describe si
observas alguna diferencia entre las imgenes de 10X y 40X.
C. Profundidad de foco
1. Obtn una laminilla fija con hilos de colores.
2. Usando el objetivo de baja potencia (10X), localiza el punto donde los tres
hilos se cruzan.
3. Determina el orden de los hilos en tu laminilla (de arriba hacia abajo)
57

enfocando con el tornillo macromtrico. Anota tus observaciones.


D. Medida del campo de visin (opcional)
1. Asegrate que el microscopio tiene instalado un micrmetro ocular.
2. Coloca en el microscopio el micrmetro de platina.
3. Gira el micrmetro ocular. Haz que sus lneas coincidan con las lneas del
micrmetro de platina, haciendo que el 0 del primero coincida con el 0 del
segundo.
4. Determina el nmero de espacios (x) del micrmetro de platina que caben
dentro de un nmero de espacios (y) en el micrmetro ocular. Anota ambos
valores para usarlos en la ecuacin del paso 5.
5. Calcula la distancia en mm entre cada lnea del micrmetro ocular usando la
siguiente relacin: y = x (0.01mm). El espacio entre dos lneas en el
micrmetro de platina es de 0.01mm. Por lo tanto,

x (0.01) mm
y
Recuerda que la unidad final para la medida del espacio ocular es en
micrmetros, m.
6. Calcula el rea del campo de visin para cada objetivo de tu microscopio,
usando la siguiente frmula: rea = r2. Recuerda que el r= dimetro.
7. Determina el dimetro (en mm) del campo de visin para cada uno de los
objetivos de baja potencia (10X) y alta potencia (40X o 43X) de tu
microscopio.
1 espacio ocular

E. Preparacin de especmenes para la observacin por el microscopio


Las laminillas se utilizan para observar a travs del microscopio los organismos o
partes de stos que nos interesan. Muchas laminillas vienen preparadas (fijas y
teidas). Sin embargo, a menudo es necesario preparar material fresco para
observar organismos de inters. La preparacin de una laminilla conlleva
seleccionar el tejido u objeto a ser examinado, hacer cortes segn sea necesario,
fijar el tejido y realizar tinciones.
1. Tcnica del montaje (frotis) hmedo
a. Transfiere con una pipeta Pasteur una pequea gota de agua
estancada (proveniente del fondo del envase) a una laminilla.
b. Coloca un cubreobjetos sobre el material dejndolo caer en ngulo y
suavemente, para evitar la formacin de burbujas de aire. Puedes
utilizar unas pinzas finas para este propsito.
c. Examina la muestra de agua con los objetivos de baja y alta potencia.
Dibuja y describe lo observado con ambos objetivos.

58

2. Tcnica de gota colgante


a. Familiarzate con la apariencia de la laminilla de depresin.
b. Coloca una gota de la muestra de agua en el centro de un
cubreobjetos.
c. Usando un palillo de dientes, coloca una cantidad mnima de vaselina
sobre los cuatro bordes del cubreobjetos.
d. Coloca cuidadosamente una laminilla de depresin invertida sobre la
vaselina (sin tocar la gota) e invierte rpidamente la laminilla.
e. Examina la laminilla utilizando los objetivos de baja y alta potencia.
Observa el tamao, forma y movimiento de los organismos. Dibuja y
describe lo observado con ambos objetivos.
F. Microscopio de diseccin
1. Escoge 2 especmenes que hayas trado a la clase para observar sus
detalles bajo el microscopio de diseccin.
G. Observacin de especmenes fijos y teidos
El instructor le asignar una serie de laminillas ya preparadas para que las
observe aplicando las destrezas de uso y manejo del microcopio que ya a
aprendido.

Preguntas o Problemas
A. Preguntas sobre el microscopio
1. Completa la siguiente Tabla calculando la magnificacin total de la imagen
observada al utilizar los lentes mencionados.
Tipo de lente

Magnificacin
lente ocular

Magnificacin
lente objetivo

Magnificacin
total

Rastreo
Baja potencia
Alta potencia
Inmersin en aceite
2.
3.
4.
5.

Cul objetivo provee el campo de visin ms pequeo?


Cul objetivo es el ms til para localizar un objeto en una laminilla?
Cul objetivo provee la mayor profundidad de foco? Por qu?
Cul objetivo requiere una mayor intensidad de luz? Cmo se relaciona
este requisito de luz con el dimetro de la abertura del lente?
6. Cul es la funcin del aceite de inmersin?
7. La mosca frutera Drosophila melanogaster se utiliza como modelo en
estudios de gentica. El sexo de la mosca se distingue por las diferencias

59

en el segmento final del abdomen. Qu microscopio utilizaras para


separar las hembras de los machos?
B. Variacin Inversa
En la actividad del laboratorio notamos que a medida que aumenta la
magnificacin del lente del microscopio se reduce la distancia de trabajo. En
matemticas cuando el aumento en una cantidad implica la disminucin en otra,
decimos que las cantidades son inversamente proporcionales. Por otro lado, si el
aumento en una cantidad causa un aumento en la otra decimos que las
cantidades son directamente proporcionales. En las siguientes situaciones,
determina si la relacin entre las cantidades es directa o inversamente
proporcional.
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
9.
10.

La intensidad de una bombilla disminuye a medida que la distancia


hasta ella aumenta.
Mientras ms mejoras le quiero hacer a casa, ms me cuesta.
Mientras ms grande es la botella de refresco, ms barato es el
precio por onza.
Mientras ms fuerza hago ms ligero empujo la silla.
Mientras ms cerca estamos del centro de la tierra, ms pesamos.
Mientras ms gasolina le eche al carro ms pagar por ella.
Mientras mi suscripcin a la revista abarque ms aos, menos
tendr que pagar por ao.
Si duermo menos, entonces encuentro ms estacionamientos
disponibles en el Recinto Metropolitano.
Mientras ms beba cerveza, ms le dola la cabeza.

C. Halla la medida indicada.


1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.

El dimetro de un velln es de 2 cm, halla el radio.


El radio de una rueda de bicicleta es de 9 pulgadas, halla el
dimetro.
El radio de una piscina circular es de 4 pies, halla el dimetro.
El dimetro de una pizza es de 30cm, halla el radio.
El radio de un plato es de 12cm, halla el dimetro.
El dimetro de una machina es de 7m, halla el radio.
El radio de las lluvias de una tormenta es de 10km, halla el
dimetro.
Si un perro est amarrado a una estaca de madera con una soga
que mide 4 metros, halla el dimetro del crculo donde el perro se
puede mover.
Un asteroide cay en la tierra e hizo un hueco con dimetro de
3km, halla el radio.
60

10.

Una alfombra en forma de semicrculo tiene un radio de 33cm,


halla el dimetro.

D. Halla el rea de las figuras en los ejercicios anteriores:


1. El velln
2. La rueda de la bicicleta
3. La piscina
4. La pizza
5. El plato
6. La machina
7. La tormenta
8. La regin circular donde el perro se mueve
9. El hueco que hizo el asteroide
10. La alfombra

Referencias
Brum, GL, E McKane and G Karp. 1994. Biology: Exploring Life. John Wiley
and Sons, New York.
Campbell, NA and JB Reece. 2005. 7th ed. Biology. Benjamin Cummings.
Menlo Park, California.
Mader, SS. 1998. Biology: Laboratory Manual. WCB McGraw-Hill. Boston,
Massachusetts.
Vodopich, DS and R Moore. 1999. Biology: Laboratory Manual. WCB McGrawHill. Boston, Massachusetts.

61

Ejercicio 5: Manejo de Pipetas y Balanzas


Objetivos:
1. Seleccionar la pipeta ms apropiada para medir un volumen especfico de
lquidos.
2. Manejar adecuadamente las pipetas y llenadores para la transferencia de
lquidos.
3. Utilizar correctamente la balanza de plataforma.
4. Calcular el por ciento (%) de error en las medidas tomadas.

Introduccin
Manejo de reactivos lquidos
Los experimentos biolgicos que efectuars en este curso te requerirn la
medicin y transferencia de cantidades especficas de soluciones. El grado de
precisin que tengas al hacer dichas mediciones y transferencias determinar el
xito de las tcnicas. Para llevar a cabo la tarea de medir y transferir lquidos se
utilizan aparatos conocidos como buretas, pipetas, probetas y matraces
volumtricos. Las buretas, matraces volumtricos y pipetas son usados cuando
se requiere gran exactitud y precisin; las probetas son utilizadas ms
frecuentemente en la mayora de los experimentos de este curso.
Tanto las probetas (o cilindros graduados) como las pipetas se pueden usar para
medir diferentes volmenes. Las probetas son dispositivos en forma de cilindro
que estn graduados (marcados) a intervalos regulares y a los que se le aade el
lquido a ser medido por gravedad (echamos el lquido de otro envase o fuente
dentro de la probeta, hasta alcanzar el volumen deseado). La diferencia ms
significativa entre probetas es la capacidad (las ms comnmente usadas tienen
capacidad de 5, 10, 25, 50, 100, 250, 500 y 1,000 mL).
Las pipetas son otros dispositivos usados frecuentemente para medir volmenes
de lquidos. A diferencia de las probetas, las pipetas requieren, por su diseo, la
aplicacin de succin, que hace que el lquido suba a travs del cilindro que
compone la pipeta (algo similar a lo que ocurre con un sorbeto). Existe una gran
variedad de pipetas, con capacidad que vara desde fracciones de mililitros hasta
50 mL. Las pipetas tambin tienen diversas aplicaciones. Las pipetas que ms
se usan en experimentos biolgicos son:
a. pipetas volumtricas se utilizan para medir un volumen especfico y
no est graduada con volmenes intermedios. La pipeta usualmente tiene
un rea ensanchada en el cilindro y una marca que identifica su
capacidad.
62

b. pipetas serolgicas estn graduadas a lo largo del cilindro y se usan


para medir el volumen de lquidos. Existen dos tipos de estas pipetas: to
deliver o TD, y to blow o TB. Las pipetas TD descargan la totalidad del
volumen que son capaces de medir, sin necesidad de descargar la gota
residual. Las pipetas TB estn graduadas hasta la punta, lo que quiere
decir que su capacidad incluye hasta el volumen residual que queda en la
pipeta luego de vaciarla. Por esto, hay que forzar la salida de la ltima
gota que queda en la pipeta para medir el volumen de forma precisa.
Estas pipetas estn identificadas con dos lneas cerca del extremo
superior.
c. micropipetas automticas se utilizan comnmente para transferir
volmenes entre 1 y 1,000 L, aunque las hay de mayor capacidad.
Existen dos tipos de micropipetas: de desplazamiento positivo y de
desplazamiento de aire. En la pipeta de desplazamiento positivo (con
apariencia de jeringuilla para inyeccin) hay un pistn que, al retraerse,
permite que la muestra entre al cilindro capilar. Las micropipetas de
desplazamiento positivo se usan usualmente para transferir volmenes
pequeos a equipos de cromatografa o electroforesis. Las micropipetas
de desplazamiento de aire tambin utilizan un pistn que succiona aire
en lugar de la muestra. Se utilizan con una punta de plstico (pipet
tip), que es la parte que entra en contacto
con
la
muestra.
Las
micropipetas de desplazamiento de aire son las ms utilizadas en
laboratorios de biologa. La Figura 5.1 muestra algunas micropipetas de
uso frecuente.
d. pipetas capilares son tubos capilares que han sido calibrados para
medir volmenes especficos. No permiten la medida de volmenes
intermedios.
e. pipetas Pasteur se utilizan solamente para transferir lquidos, pues
usualmente no estn calibradas. Algunas pipetas Pasteur (sobre todo
las de plstico) estn marcadas pero no calibradas, y se usan cuando la
exactitud no es crucial.

63

Figura 5.1. Micropipetas.


El uso de pipetas requiere la utilizacin de un instrumento que permita succionar
el lquido que queremos medir. SEGURIDAD: Bajo ningn concepto se debe
pipetear con la boca, pues existe el riesgo de ingerir involuntariamente el lquido.
Existen diversos tipos de llenadores (aspiradores o bulbos) de pipetas,
adecuados para el tipo de pipeta que se usa. En cualquiera de los casos, hay
que recordar que la pipeta debe ser utilizada de forma vertical, de manera que
ningn lquido llegue al bulbo, pues esto lo contamina y puede daarlo.
Generalmente, los llenadores utilizados en experimentos biolgicos son:
a. bulbo de ltex se usa mayormente con las pipetas Pasteur y permite
poco control del lquido dentro de la pipeta.
b. bulbo de goma se utiliza para medir volmenes con pipetas
graduadas. Permiten llenar la pipeta rpidamente, pero no son de mucha
ayuda para vaciarlas. Para aspirar el lquido, se debe vaciar el aire dentro
del bulbo, colocar la pipeta sin apretarla y comenzar a succionar. Una vez
la pipeta est llena ligeramente por sobre el volumen deseado, se va
descargando lentamente el lquido hasta alcanzar el volumen deseado. Si
el volumen de lquido que se va a transferir es menor de la capacidad de
la pipeta, para descargar el volumen deseado de la pipeta, se debe
descargar la pipeta lentamente, de modo que el nivel del lquido

64

(menisco) baje hasta el punto deseado. Si se requiere utilizar todo el


volumen de lquido presente en la pipeta, simplemente se descarga el
mismo.
c. otros llenadores mecnicos existen varios tipos de llenadores
mecnicos. Los ms utilizados succionan a partir de un bulbo o bomba
elctrica interna de gran precisin. Varios de estos dispositivos aparecen
en la Figura 5.2. Tu instructor te explicar la manera correcta en que
se usan los llenadores que utilizars.

Figura 5.2. Llenadores mecnicos.


Al medir lquidos, es necesario mantener en cuenta que:
a. el dispositivo (probeta o pipeta) debe tener una capacidad mayor y
cercana al volumen que se desea medir. Por ejemplo, para medir 4.0 mL
se debe usar una pipeta de 5 mL en lugar de una de 10 mL. Sin
embargo, si queremos dispensar ese volumen en dos envases
diferentes, podemos usar la pipeta de 10 mL, para medir una sola vez.
En otro ejemplo, para medir 40 mL, se genera menos error el medir una
vez con una probeta de 50 mL que medir dos veces con una probeta de
25 mL.
b. se debe medir por debajo del menisco, manteniendo la trayectoria de
la visin en el mismo plano que el menisco.
c. es necesario cotejar el tipo de pipeta volumtrica que estamos usando
para corroborar si es necesario o no forzar la salida de la ltima gota del
lquido.
d. la exactitud de la medida que tomemos depende de la integridad del
dispositivo que usemos. Antes de usar una pipeta, debes cerciorarte
de que tenga la punta intacta.
65

Los dispositivos para medir volumen, especialmente las pipetas y las


micropipetas son objetos de precisin muy delicados. Es necesario que los uses
conscientemente y los trates con sumo cuidado antes, durante y despus de los
experimentos. Es de especial importancia manejar en posicin vertical, de modo
que el lquido no contamine el bulbo o llenador. De ese cuidado depender en
gran medida el servicio que estos objetos rindan durante el laboratorio.
Manejo de la balanza
En los laboratorios de biologa tambin es usual medir cantidades mediante la
medicin de su masa, lo que se determina con balanzas que determina el peso
del material. En este curso usars ms frecuentemente las balanzas de torsin o
de plataforma digitales (Figura 5.3), que pueden detectar el peso de objetos de
hasta 2 kg, y que pueden leer diferencias de hasta 0.1 a 0.01 g. En otros cursos
utilizars balanzas analticas, que permiten medir la masa en unidades de mg y
g.

Figura 5.3. Balanza de plataforma.


Los materiales slidos (granulados o pulverizados) se pesan en envases de vidrio
o plstico o sobre papel parafinado. Las sustancias lquidas se pesan siempre en
envases. Para ayudar a dispensar el material que queremos pesar es siempre
conveniente utilizar esptulas, que permiten la manipulacin de cantidades
pequeas de material. El recipiente o papel en el que se coloca el material debe
estar previamente pesado.
Para utilizar una balanza de plataforma (electrnica) debes ajustar la balanza a
0, colocar el envase o papel en el que vas a pesar sobre la plataforma,

66

reajustar a 0 nuevamente y aadir lentamente (con una esptula o aparato


adecuado) el material a ser pesado.

Ejercicio de laboratorio
Materiales:

regla
microtubos
lquidos (leche, agua,
agua con colorante vegetal)
arena
tierra
madera
semillas
gradillas
gotero
balanza electrnica
esptulas
tubos de ensayo

vasos de 50, 100 y 250 mL


recipientes plsticos para pesar
puntas para micropipetas
probetas de 10, 50 y 100 mL
pipeta serolgica de 1 y 10 mL
micropipetas de 100 y 1,000 L
pipetas Pasteur
matraces cnicos (Erlenmeyer)
de 125 y 250 mL
bulbo de ltex
llenadores o pipeteadores
mecnicos o elctricos

Procedimiento:
A. Manejo de balanza
Sobre la mesa de trabajo encontrars varios objetos de peso conocido y una
balanza electrnica. Con estos materiales:
1. Determina el peso de varios slidos disponibles en el saln. Si vas a pesar
arena, tierra o madera, recuerda utilizar un envase plstico.
2. Coloca un envase de vidrio sobre la balanza y determina su peso. Determina
el peso de 30 mL y de 50 mL de varios tipos de lquido.
B. Medicin de lquidos
Sobre la mesa de trabajo encontrars varios vasos, probetas y pipetas y
micropipetas de distintos tamaos. Tambin encontrars matraces conteniendo
volmenes conocidos de algunos lquidos.
1. Usando una de las pipetas serolgicas y el bulbo, mide 5.0 mL de uno de los
lquidos disponibles.
2. Transfiere el lquido a una probeta de 10 mL y mide el volumen con la probeta.
3. Repite el procedimiento con una pipeta serolgica y el llenador
correspondiente.
4. Compara la facilidad y rapidez de succin de cada llenador.
5. Repasa el funcionamiento de una micropipeta con tu instructor de laboratorio.
Ajusta la micropipeta para medir 1,000 L de volumen.
67

6. Transfiere 1,000 L de agua con colorante a un microtubo. Descarta la punta


de la micropipeta (esto es necesario luego de cada transferencia).
7. Reajusta la pipeta para medir 750 L y transfiere esa cantidad del primer
microtubo a otro microtubo.
8. Repite los pasos 6 y 7 utilizando una pipeta serolgica de 1.0 mL
(1.0 mL=1,000 L; 0.75 mL = 750 L).
C. Transferencia de lquidos
1. Determina el peso de un vaso de 250 mL en una balanza.
2. Utilizando una pipeta serolgica, transfiere al vaso de 250 mL, los
siguientes volmenes de agua, pesndo luego de cada adicin: 10 mL, 6
mL, 4 mL, 6 mL, 9 mL y 10 mL. Has transferido un total de 45 mL de agua.
Anota el peso final.
3. Determina el peso en gramos del agua. Para esto, resta el peso del vaso
vaco (paso 1) del total obtenido en el paso 2.
4. Convierte el peso en gramos de los 45 mL de agua obtenido en el paso 3
a mL, utilizando el valor de la densidad del agua a temperatura ambiente.
(densidad de agua = 0.998 g/mL)
5. Vierte el contenido del vaso en una probeta de 50 mL y mide el volumen
de agua.
6. Compara el volumen obtenido (paso 5) con el volumen esperado
(paso 2).
7. Calcula el % de error en la transferencia de agua utilizando la siguiente
ecuacin:
- valor esperado|
% error | valorobtenido
x 100
valor esperado

8. Determina cmo se afectara el % de error si se utiliza el volumen


calculado en el paso 4 en lugar del volumen obtenido en el paso 5.
9. Vierte en un matraz cnico de 250 mL 125 mL de agua destilada.
10. Vierte el contenido del matraz en una probeta de 250 mL. Determina el
volumen del agua en la probeta.
11. Determina el % de error para el valor del volumen obtenido en el matraz.
Presume que el volumen esperado para el matraz es de 125 mL.

68

Preguntas o Problemas
A. Entre los siguientes pares, subraya cul es la cantidad mayor. Si ambas
cantidades son iguales, subraya ambas.
1.
2.
3.
4.
5.

1,000 L, 1.2 mL
40 mL, 0.40 L
25 mg, 0.25 g
volumen de una gota de una pipeta de 10 mL, volumen de una
gota de una pipeta de 1.0 mL
1 mL de agua, 1 gramo de agua

B. Ejercicios de volumen y masa


1.
2.

3.

Un quilate es una unidad de peso igual a 200mg. Halla el peso en


gramos de una piedra preciosa de 8 quilates.
Un cliente del supermercado ms cercano, compr los siguientes
artculos: 754g de tomates, 772g de papas, 3.45kg de azcar, 425g
de sopa, 4.62kg de pasas, 1.361kg de aceite vegetal y 218gr de
polvo de hornear. Cul es la masa total de la compra en
kilogramos?
Si fusemos a vender todo el jugo de frutas en una verbena, en
vasitos de 80ml que cuestan .25, Cul sera la ganancia si los
ingredientes costaron $12.50?

C. Ejercicios de por ciento de error.


1. Si se mide que el dimetro de un velln es de 2.3cm y se espera que
su medida sea de 2cm, halla el por ciento de error.
2. Si se mide que el radio de una piscina circular es de 3.9 pies y su
medida se supone que sea de 4 pies, halla el por ciento de error.
3. Si se mide que el radio de un plato es de 11.8cm y su medida se
supone que sea de 12cm, halla el por ciento de error.
4. Si se mide que el dimetro de una machina es de 6.01m y su medida
se supone que sea de 7m, halla el por ciento de error.
5. Si se mide el que radio de las lluvias de una tormenta es de 9.97km y
su medida se supone que sea de 10km, halla el por ciento de error.

Referencias
Boyer, RF. 1993. Modern Experimental Biochemistry. Benjamin Cummings.
Menlo Park, California.
Brum, GL, E McKane and G Karp. 1994. Biology: Exploring Life. John Wiley
and Sons, New York.
69

Dolphin, WD. 1999. Biological Investigations. WCB McGraw-Hill. Boston,


Massachussets.
Eberhard, C. 1985. General Biology Laboratory Manual. Saunders College
Publishing. Fort Worth, Texas

70

Ejercicio 6: Preparacin y Manejo de Soluciones


Objetivos:
1. Definir conceptos tales como soluto, solvente, solucin, unidades de
concentracin (% p/p, % p/v, % v/v molaridad y otros relacionados).
2. Emplear expresiones matemticas para calcular la cantidad de sustancia
(analito) necesarios para preparar soluciones.
3. Utilizar correctamente las pipetas, balanzas y matraces volumtricos
necesarios para preparar soluciones.
4. Preparar adecuadamente soluciones de concentracin conocida.

Introduccin
A menudo en el laboratorio de biologa se requiere el uso de soluciones de
diversos compuestos. Aunque muchas de estas soluciones se pueden adquirir
comercialmente, siempre es conveniente aprender a prepararlas, pues esto
facilita a menudo el intentar experimentos nuevos o procedimientos de
investigacin. En la preparacin de soluciones se utiliza preferiblemente el
sistema mtrico, pues ste ayuda a uniformar los informes de laboratorio. En
este laboratorio utilizaremos medidas de masa y volumen para preparar las
soluciones. Para determinar la concentracin de las soluciones ya preparadas, se
usarn expresiones matemtica que nos permiten estos cmputos.
Una solucin es una mezcla homognea de compuestos en la que un compuesto,
el soluto, est en menor proporcin que el otro, el disolvente (tambin
conocido como solvente). Aunque el solvente universal es el agua, existen
otros solventes orgnicos que tienen gran utilidad en los estudios biolgicos. La
concentracin de una solucin nos dice cunto soluto hay disuelto en un
volumen determinado de disolvente. En el caso de las soluciones, la
concentracin se expresa comnmente en gramos, miligramos o microgramos
por mililitro o litro (por ejemplo g/L, mg/mL o g/L), porcentajes (% p/p, %
p/v o % v/v), y molaridad (moles/L, o M). Menos frecuentemente se usan las
expresiones partes por mil (ppt 0/00) o partes por milln (ppm). La exactitud
con la que preparemos nuestras soluciones ser el factor determinante en la
confiabilidad de los resultados que obtengamos.
Preparacin de soluciones
Antes de preparar una solucin de concentracin conocida, es necesario conocer
cul es la concentracin final de soluto deseada y cul es el estado en que se
encuentra el soluto. Hay que determinar si el soluto est en estado slido o si
est disuelto. En segundo lugar, es necesario determinar cunto volumen de
solucin prepararemos y, a base de ese volumen, cunto soluto hay que aadir
para alcanzar la concentracin deseada. Finalmente, hay que determinar el tipo

71

de balanza, pipetas y matraces volumtricos que utilizaremos y los factores de


conversin entre unidades que necesitaremos.

Solutos granulados o pulverizados


Consideremos un ejemplo: preparars 250 mL de una solucin de 25 g/L
(2.5%p/v) de glucosa a partir de la glucosa en polvo. Usualmente cuando se
deja sin mencionar el disolvente, podemos asumir que usaremos agua destilada
o desionizada como disolvente.
Paso 1: Determinar cuntos gramos de soluto necesitamos para el volumen que
queremos preparar. Esto se puede hacer usando una proporcin (despejando
por x y multiplicando cruzado) o mediante anlisis dimensional:
a. por multiplicacin cruzada, recordando que 250 mL = 0.25 L
25 g glucosa 1L

x g glucosa 0.25 L
- multiplicando cruzado, tenemos que
(x g) (1 L) = (25 g) (0.25 L)
- despejando por x, determinamos que

xg=

(25 g) (0.25 L)
= 6.25 g
1L

Entonces, ser necesario pesar exactamente 6.25 g de glucosa para


preparar la solucin que deseamos.
b. por anlisis dimensional, podemos calcular que:

25 g glucosa
1L
(25) (250)
X
X 250 mL =
= 6.25 g glucosa
1 L de solucin 1,000 mL
1,000
Paso 2. Preparar la solucin.
a. se pesan 6.25 g de glucosa en un envase adecuado y se transfiere el
slido a un matraz volumtrico de 250 mL.

72

b. se aade con una botella de lavado un volumen pequeo de agua a la


bandeja para transferir cuantitativamente al matraz cualquier residuo de glucosa
que haya quedado en la bandeja.
c. se aade agua hasta llegar cerca de la lnea de graduacin del matraz,
dejando espacio para aadir los ltimos mililitros gota a gota con una botella de
lavado o una pipeta. Este ltimo paso es necesario para asegurarnos que no nos
pasamos del volumen exacto.
d. se tapa el matraz con su tapn y se mezcla completamente el
contenido.
A veces, en lugar de pedirnos una solucin con un nmero de g por unidad de
volumen, lo que se busca es preparar una solucin con una cantidad expresada
como un por ciento. Por ejemplo, muchas reacciones biolgicas utilizan lo que
se conoce como salina fisiolgica. Esto es una solucin de NaCl al 0.85%. Esta
expresin quiere decir que se aaden 0.85 g por cada 100 ml de agua. Para
preparar esta solucin se siguen los mismos pasos que para la solucin anterior.
Consideremos un ejemplo: preparars 500 mL de una solucin de NaCl al 0.85%.
Para determinar la cantidad de gramos que necesitars, debes usar una
proporcin o el anlisis, como en el ejemplo anterior.
Paso 1: Determinar la cantidad de NaCl necesario para preparar 500 mL de esta
solucin.

500 mL X

0.85 g
= 4.25 g NaCl
100 mL

Paso 2: Preparar la solucin. Se procede como en el ejemplo anterior.


Una tercera forma muy frecuente de expresar la concentracin de soluto en una
solucin es en trminos de su molaridad. La molaridad es la concentracin de
una solucin expresada en moles de la sustancia por litro de solucin, esto es
moles/L o, simplemente M. Tambin se utilizan mucho las expresiones mM
(milimolar 10-3M) y M (micromolar 10-6M). Un mol es una medida de la
cantidad de sustancia y corresponde a 6.02 x 1023 partculas (tomos o
molculas). Como cada tomo pesa diferente, un mol de una sustancia pesa
diferente a un mol de otra sustancia. El peso en gramos de un mol de cualquier
sustancia se conoce como el peso molecular.
El peso molecular de una molcula se expresa en gramos/mol y se determina a
base de la suma de los pesos atmicos de todos los tomos en la molcula
(para encontrar los pesos moleculares de cada tomo, usa una tabla peridica de

73

los elementos). Por ejemplo, el peso molecular de glucosa se determina


sumando los pesos atmicos de todos los tomos de carbono, de hidrgeno y de
oxgeno que hay de la molcula. Esto es, si la frmula molecular de glucosa es
C6H12O6, entonces el peso molecular es:
C 6 (12.01 g/mol) =

72.06

H 12 (1.008 g/mol) =

12.096

O 6 (16.00 g/mol) =

96.00

peso molecular de glucosa =

180.156 g/mol

Si queremos preparar 500 mL de una solucin 1.5 M de glucosa, entonces


necesitamos calcular a cunto equivale 1.5 moles de glucosa y hacer la
conversin de 1L a 500 mL. Nuevamente, usamos anlisis dimensional o
proporciones para obtener esa cantidad.

500 mL X

1.5 mol 180.156 g (500)(1)(1.5)(180.156)


1L
X
X
=
= 135.117 g
1L
mol
1,000 mL
(1,000)(1)(1)

Para preparar la solucin se procede como en el primer ejemplo.


Diluciones
Usualmente en los laboratorios se prepara un sinnmero de soluciones que se
usan frecuentemente en los trabajos cotidianos. Con el fin de economizar
espacio, tiempo y reactivos, a veces se preparan o compran soluciones
concentradas de los compuestos de inters. A partir de estas soluciones,
conocidas como soluciones madre o stock solutions, se realizan diluciones para
preparar las soluciones de trabajo (working solutions), que se cambian de da a
da. Una dilucin es la proporcin entre la cantidad de soluto y la cantidad de
soluto mas la cantidad de diluyente. El uso de soluciones madre para preparar
soluciones diluidas de trabajo agiliza los trabajos, pues solamente necesitamos
mantener las unidades iguales y aplicar la siguiente frmula:
(concentracin)i(volumen)i = (concentracin)f(volumen)f
donde:

(concentracin)i = concentracin inicial


(volumen)i = volumen inicial
(concentracin)f = concentracin final, y
(volumen)f = volumen final

Consideremos un ejemplo: Si deseamos preparar 300 mL de una solucin de


trabajo de NaOH 0.1M a partir de una solucin madre de NaOH 1.0M, entonces:
74

Paso 1: Calcular el volumen de solucin madre necesaria para hacer la solucin


de trabajo.
(1.0M)(x) = (0.1M)(0.3L), donde
x=

(0.1 M)(0.3L)
= 0.03 L = 30 mL solucin madre
(1.0M)

Paso 2: Preparar la solucin de trabajo


a. Medir 30.0 mL de la solucin madre y aadir a un matraz volumtrico
de 300 mL.
b. Aadir un volumen pequeo de agua destilada o desionizada para diluir
un poco la solucin madre y agitar suavemente.
c. Aadir agua hasta llegar cerca de la lnea de graduacin del matraz,
dejando espacio para aadir los ltimos mililitros gota a gota con una botella de
lavado o una pipeta.
Diluciones Seriadas
Cuando manejamos cantidades pequeas, a veces se dificulta el pesar o medir el
volumen de una muestra. Entonces necesitamos hacerlo de una manera
indirecta, mediante el uso de diluciones seriadas. Por ejemplo, una dilucin con
1 parte de solucin de albmina en 10 partes totales (1 de solucin de albmina
y 9 de diluyente) sera representada como una dilucin 1/10. Una ventaja de las
diluciones es que pueden hacerse en serie (o seriadas). Esto es, cada dilucin
proviene de la anterior. En este caso la dilucin final sera el producto o
resultado de la multiplicacin de cada una de las diluciones.
Por ejemplo, si furamos a hacer una solucin de 3 mL de NaOH 6.25 mM
tendramos que pesar 0.75 mg (0.00075 g) de la sustancia. Esto no es siempre
prctico, pues necesitamos una balanza analtica especializada, que no siempre
est disponible en un laboratorio. Tampoco es usual encontrar un matraz
volumtrico de 3 mL. Para compensar por estas dificultades, se pueden hacer
diluciones a partir de una cantidad conocida. Consideremos el siguiente
ejemplo:
Si tenemos una solucin de NaOH que sea 0.1M, podramos diluirla 1/2, esto es
tomando un volumen de solucin y mezclndolo con un volumen igual de
diluyente. La dilucin resultante sera 0.05M 50 mM. Si continuamos
diluyendo esta dilucin de en serie, tendramos esta serie de diluciones:
Dilucin

Concentracin

1/1 (solucin madre, sin diluir)

0.1 M

0.05 M 50 mM

x =1/4

0.025 M 25.0 mM

75

x = 1/8

0.0125 M 12.5 mM

1/8 x = 1/16

0.00625 M 6.25 mM

La concentracin que queremos se puede obtener pesando 0.75 mg y


disolvindolos en 3.0 mL de agua destilada o desionizada. Una manera alterna
de lograr esa concentracin es diluyendo en serie la solucin original hasta llegar
a la concentracin deseada. En el caso de nuestro ejemplo, podemos lograrlo
diluyendo 1 en 16 la solucin original o, lo que es lo mismo, haciendo 4
diluciones de en serie a partir de la original.
Las diluciones en serie correspondientes a este ejemplo se podran hacer como
se presenta en la Figura 6.1 y segn se describe a continuacin.
a. Utilizando una pipeta volumtrica, aadir 2 mL de agua destilada o
desionizada a cada uno de 4 tubos colocados en serie.
b. Utilizando una segunda pipeta, transferir 2 mL de la solucin madre al
primer tubo de la serie. Este contendr entonces 4 mL de una dilucin . En
este punto es importante recordar que es necesario mezclar bien el
contenido de cada tubo antes de hacer cualquier transferencia a otro
tubo.
c. Utilizando una nueva pipeta, transferir 2 mL de la dilucin al
segundo tubo de la serie. Este contendr entonces 4 mL de una dilucin 1/4.
d. Utilizando una nueva pipeta, transferir 2 mL de la dilucin 1/4 al tercer
tubo de la serie. Este contendr entonces 4 mL de una dilucin 1/8.
e. Utilizando una nueva pipeta, transferir 2 mL de la dilucin 1/8 al cuarto
tubo de la serie. Este contendr entonces 4 mL de una dilucin 1/16, que es la
que queremos. Siempre es conveniente preparar un poco ms de la dilucin que
queremos para facilitar el sacar una porcin con la pipeta.

76

2 mL

2 mL

Dilucin
,
0.05 M

Solucin
madre, 0.1 M

2 mL

Dilucin
1/4,
0.025 M

2 mL

Dilucin
1/8,
0.0125 M

Dilucin
1/16,
0.00625 M

Figura 6.1. Diluciones en serie.


Las diluciones en serie facilitan el trabajo, especialmente cuando se trabaja con
volmenes o cantidades muy pequeas o muy grandes. Adems, usando las
tcnicas adecuadas, permiten alcanzar un alto grado de precisin y exactitud.
Otra ventaja es que, si hacen diluciones en base 10 (o decimales), los valores se
pueden expresar en notacin exponencial, lo que facilita su manejo.

Ejercicio de laboratorio
Materiales:

pipetas Pasteur y bulbos


pipetas serolgicas de 5 y 10 mL
aspiradores de llenado rpido para pipetas
tubos de ensayo y gradillas
micropipetas
matraz volumtrico de 50 mL
lpiz de cera
azul de metileno
esptulas finas

Seguridad: Se requiere el uso de gafas o espejuelos de seguridad para


este ejercicio.

77

Procedimiento
1. Prepara 100 mL de una solucin de azul de metileno al 0.01% (solucin
madre).
2. Rotula 6 tubos de ensayo del 1 al 6.
3. Transfiere 10 mL de la solucin al 0.01% de azul de metileno al tubo #1.
4. Transfiere 9 mL de agua destilada a cada uno de los restantes cinco tubos.
5. Prepara una serie de diluciones 1/10 a partir de la solucin de azul de
metileno que se encuentra en el tubo #1. Utiliza una pipeta diferente para cada
transferencia. Recuerda mezclar el contenido de cada tubo antes de transferir al
siguiente.

Resultados
1. Completa la Tabla 6.1.
Tabla 6.1. Concentracin de azul de metileno.
Tubo
nmero

Dilucin

Concentracin de
azul de metileno,
%

1
2
3
4
5
6

Preguntas o Problemas
A. Cuntos gramos de azul de metileno se necesita para preparar 150 mL de
una solucin al 2% p/v?
B. Utiliza una tabla peridica para calcular el peso molecular de:
1. Na2CO3
2. NH4Cl
3. CaCl2
4. MgSO4

78

C. Cuntos gramos de reactivo se necesitan para preparar 50 mL de una


solucin 2.6 M de MgSO4?
D. Calcula la molaridad de una solucin preparada disolviendo 60 g Na2CO3 en
500 mL de agua destilada.
E. Cul es la concentracin (en mg/mL) de una solucin preparada disolviendo
0.1 g de lisina en 10 mL de agua destilada?
F. Expresa las siguientes cifras en notacin cientfica:
1. 0.000027
2. 356
3. 0.096
4. 47,764
G. Expresa las siguientes cifras en forma decimal:
1. 1.52 X 10-2
2. 7.78 X 10-5
3. 8.09 X 10-2
H. Aplicacin de frmulas
1. La presin (P) de un objeto sumergido est dada por P = 15 + x,
dnde x representa la profundidad en pies y P la presin en
libras/pulgada2. Halla la presin sobre un buzo que se encuentra a
24.5 pies de profundidad.
d
2. Un explorador camina 7.5 millas en 3 horas. Usa la frmula v = ,
t
donde v es la velocidad en millas por hora, d es la distancia y t es el
tiempo para hallar la velocidad a la que caminaba el explorador.
3. Halla la cantidad de fuerza necesaria para empujar por el suelo a un
mueble de 75 libras, si el coeficiente de friccin es . Usa la frmula
F = N, donde es el coeficiente de friccin y N el peso del mueble.
La fuerza se mide en libras.
I. Notacin Cientfica
La masa de la Tierra es 5.9 x 1027 g y la masa del Sol es de 2 x 1033 g. La
distancia al sol es de 9.3 x 107 mi. A base de esta informacin, contesta las
siguientes preguntas.
1. Cuntas millas viaja la luz en un da? La velocidad de la luz es de
d
186,000mi/seg. Usa la frmula v = , donde v es la velocidad en
t

79

millas por segundo, d es la distancia en millas y t es el tiempo.


Expresa la respuesta en notacin cientfica.
2. Un satlite se aleja de la tierra viajando a una velocidad constante de
1 x 105 mi/hr. Cunto tiempo le tomara al satlite llegar al sol, si esto
fuese posible? Usa la frmula que aparece en la seccin 1 (arriba).
J. Razones
Las razones son comparaciones entre dos cantidades, se expresan en su
forma ms simple utilizando las unidades originales, si estas no se cancelan.
Expresa como una razn en su forma ms simple o en forma decimal los
siguientes valores.
1. Un corredor cubre una distancia de 26 millas en 4 horas. Halla a
cuantas millas por hora puede correr este atleta.
2. Un automvil viaja 326.6 millas con 11.5 galones de gas. Halla el
nmero de millas que se viaja por galn de gasolina.
3. Puedes manejar 326.6 millas en 4.5 horas. Halla el nmero de millas
por hora a las que viajaste.

Referencias
Heidcamp, WH. 1996. Cell Biology Laboratory Manual (Appendix J)
http://www.gac.edu/cgi-bin/user/~cellab/phpl?appds/appd-j.html

80

Ejercicio 7: Identificacin de Macromolculas Biolgicas


Objetivos:
1. Distinguir los cuatro grupos de macromolculas biolgicas en base a su
composicin qumica.
2. Identificar la presencia de macromolculas biolgicas en una solucin
mediante pruebas bioqumicas cualitativas.

Introduccin
Las estructuras de las clulas de los organismos vivientes estn compuestas por
molculas orgnicas (molculas que contienen carbono) de diversa naturaleza.
Muchas de estas molculas se enlazan con otras molculas, formando
estructuras moleculares de gran tamao, que contienen miles de tomos de
carbono. Por esta razn es comn que se les llame macromolculas.
Las macromolculas estn compuestas de subunidades pequeas llamadas
monmeros, los cuales se unen mediante reacciones de condensacin que
tambin generan agua. Al unirse muchos monmeros se forma un polmero.
Los polmeros pueden romperse por el proceso de hidrlisis.
Los cuatro grupos de macromolculas biolgicas principales son:
carbohidratos, lpidos, protenas y cidos nuclecos. La estructura bsica
y funcin de cada tipo de macromolcula es similar en todos los organismos.
Carbohidratos
Los carbohidratos son un grupo de substancias que se caracterizan por tener una
proporcin de Carbono:Hidrgeno:Oxgeno de 1:2:1. Los carbohidratos ms
sencillos son los monosacridos, compuestos por una unidad de azcar. Los
monosacridos tienen de 3 a 7 carbonos; los ms comunes son la ribosa (5 C),
la deoxiribosa (5 C), la glucosa (6 C), la galactosa (6C) y la fructosa (6 C). Los
monosacridos se unen entre s mediante enlaces glucosdicos para formar los
polisacridos.
Al enlazarse las molculas de glucosa se pueden formar uno de tres polmeros
principales: almidn, glucgeno y celulosa. El almidn es la forma de
almacenar glucosa en las plantas y el glucgeno es la forma de almacenar
glucosa en los animales. La celulosa es una molcula estructural, que forma las
fibras presentes en la madera y en las paredes celulares de las plantas.
Lpidos
Los lpidos se destacan por su poca solubilidad en agua. Esta caracterstica se
debe a que contienen cadenas largas de carbono enlazadas a tomos de
hidrgeno. Los lpidos incluyen las grasas neutrales (grasas y aceites), los
fosfolpidos, los esteroides y las ceras. Las grasas neutrales se componen de
una molcula de glicerol y tres molculas de cidos grasos. stas representan
81

un almacn de energa celular. Los fosfolpidos se componen de una molcula


de glicerol, dos cidos grasos, un grupo fosfato y un grupo polar orgnico. Esta
composicin hace que la molcula sea anfiptica, o sea, que tenga una porcin
hidrofbica y una porcin hidroflica. Cuando los fosfolpidos se exponen a un
medio acuoso, se pueden organizar en micelas, liposomas o bicapas, siendo esta
ltima el arreglo presente en las membranas celulares. El colesterol es un lpido
tipo esteroide que sirve como precursor de las hormonas esteroides (estrgeno,
testosterona, cortisol y progesterona) que tambin forma parte de algunas
membranas celulares.
Protenas
Las protenas son macromolculas compuestas de aminocidos que estn
enlazados entre s por enlaces peptdicos. Existen 20 aminocidos que son
ms frecuentes en la protenas y que se caracterizan por tener un grupo amino
(-NH2), un grupo carboxilo (-COOH) y un grupo funcional R variable alrededor de
un tomo de carbono central. El grupo R hace que los aminocidos sean
distintos entre s. Los aminocidos se clasifican por sus caractersticas
fisicoqumicas, impartidas por los grupos R, en aminocidos polares, no polares,
cidos y bsicos.
Las protenas son las macromolculas que realizan diversas funciones
importantes en la clula. Entre sus funciones estn la regulacin de las
sustancias que entran o salen de la clula, la regulacin de la expresin de los
genes y la formacin de las estructuras que permiten movimientos celulares
(cilios y flagelos). Tambin son componentes del pelo, las uas, los ligamentos y
los tendones. Muchas de las protenas son enzimas, molculas esenciales para el
metabolismo, ya que aceleran cada una de las reacciones que ocurren en las
clulas.
cidos nuclecos
Los dos tipos de cidos nuclecos presentes en los seres vivos son el cido
deoxiribonucleco (ADN) y el ribonucleco (ARN). Los cidos nuclecos consisten
de unidades repetidas de nucletidos. Cada nucletido, a su vez, se compone de
una base nitrogenada (adenina, timina, citosina, guanina o uracilo), de una
pentosa (ribosa en ARN y deoxiribosa en ADN) y de un grupo de fosfato. Los
nucletidos se unen entre s por enlaces fosfodister.
Las molculas de ADN contienen un cdigo de informacin en su secuencia de
nucletidos (son como un alfabeto). Este cdigo contiene las instrucciones para
todas las actividades celulares. Las molculas de ADN se duplican antes de que
una clula se replique y la copia del material gentico pasa a cada clula hija. El
ARN es una transcripcin (copia similar) del ADN. La informacin contenida en
esta transcripcin es utilizada en los ribosomas para la sntesis de protenas.

82

Pruebas para detectar molculas biolgicas


En el campo de la biologa a menudo es necesario caracterizar la naturaleza de
los compuestos o molculas biolgicas que estudiamos. Esta caracterizacin nos
permite entonces empezar a conocer el compuesto, para tomar decisiones sobre
el papel que pueda jugar en un sistema. Como regla general, primero
estudiamos la naturaleza del compuesto de forma cualitativa, para determinar de
qu est hecho. El estudio cualitativo puede estar seguido por un estudio
cuantitativo, en el que determinamos cunto de cada compuesto hay en el
sistema.
Existen varias pruebas usadas para determinar la presencia de algunas molculas
de importancia biolgica en sistemas como el medio de cultivo que usamos de
ejemplo. En este laboratorio utilizars diversas pruebas cualitativas para
determinar la presencia de azcares reductoras, almidn, lpidos y protenas. La
Tabla 7.1, que aparece al final de esta seccin, resume los resultados de dichas
pruebas cualitativas.
A. Prueba para detectar azcares reductoras
La prueba de Benedict permite detectar la presencia de azcares reductoras en
una mezcla de compuestos. Las azcares reductoras contienen un grupo
aldehdo (H-C=O) libre como parte de su estructura molecular. Los
monosacridos y algunos disacridos tienen grupos aldehdo libres, de modo que
exhiben una reaccin positiva a Benedict cuando se calientan. La solucin
(reactivo) de Benedict contiene bicarbonato de sodio (NaHCO3), citrato de sodio
(NaC6H8O7) y sulfato de cobre (CuSO4). En un medio alcalino, el grupo aldehdo
del azcar reduce los tomos de cobre, presentes en el reactivo de Benedict.
Esto es, el cobre acepta electrones y se reduce. El reactivo de Benedict es azul y,
en presencia de azcares reductoras su color cambia a verde, anaranjado o rojo,
dependiendo de la cantidad de azcares presente.
B. Prueba para detectar almidn
A diferencia de la glucosa y la sucrosa, el almidn es un polisacrido complejo,
que consiste de cientos de molculas de glucosa enlazadas en una red de
cadenas largas. Cuando una solucin de yoduro de potasio o KI (reactivo de
Lugol) se pone en contacto con el almidn su color anaranjado rojizo cambia a
azul intenso.
C. Prueba para detectar lpidos
Muchos lpidos no son solubles en agua pero s lo son en disolventes orgnicos.
Esta caracterstica se aprovecha al usar el tinte Sudn IV, de color rojo. El
mismo se disuelve con ter, un disolvente que tambin solubiliza los lpidos. Al
poner una sustancia lpida en contacto con el tinte, sta adquirir el color del
tinte.
D. Prueba para detectar protenas

83

El reactivo de Biuret es de utilidad para detectar la presencia de protenas en una


mezcla de sustancias. El reactivo de Biuret contiene sulfato de cobre y es de
color azul. En presencia de protena y en un medio alcalino, el reactivo de Biuret
cambia de azul a prpura. El color que se obtiene se debe a que el tomo de
cobre presente en el reactivo de Biuret forma un complejo con cuatro tomos de
nitrgeno adyacentes. La intensidad del color que se obtenga depender de la
concentracin de protena que tenga la mezcla analizada.
Tabla 7.1. Pruebas cualitativas para la deteccin de molculas
orgnicas.
Prueba

Reactivo

Apariencia
original del
reactivo

Cambio que
indica prueba
positiva

Azcares
reductoras

Benedict

azul

verde, anaranjado
o rojo

Almidn

Iodo

amarillo mbar

azul o violeta
intenso

Lpidos

Sudn IV

rojo

color rojo se
solubiliza con
lpidos

Protenas

Biuret

azul

prpura o violeta

Ejercicio de laboratorio
Materiales:

tubos de ensayo y gradillas

reactivo de Lugol

vasos de laboratorio

reactivo de Biuret

planchas para calentar

reactivo de Sudn IV

pipetas de 5 y 10 mL

reactivo de Benedict

lpices de cera

solucin de albmina de huevo

parafina

solucin de glucosa al 5%

goteros

extracto de macerado de papa

pinzas para tubos de ensayo

extracto de macerado de cebolla

lpiz para rotular (Sharpie)

suspensin de almidn

guantes resistentes al calor

aceite

soluciones desconocidas

solucin de gelatina

SEGURIDAD: Se requiere el uso de gafas o espejuelos de seguridad


para este laboratorio.

84

Procedimiento
Antes de comenzar el laboratorio, lee cuidadosamente el procedimiento para
cada seccin y prepara un diagrama de lo que debers colocar en cada tubo para
cada prueba. As ahorrars tiempo a la hora de hacer las pruebas y de analizar
los resultados.
A. Prueba de Benedict
1. Llena hasta poco ms de la mitad un vaso con agua y calienta con la plancha
hasta que el agua hierva. SEGURIDAD: Maneja los vasos y la plancha calientes
con guantes resistentes al calor.
2. Mientras el agua hierve, rotula ocho tubos de ensayo del 1 al 8.
3. Aade 5.0 mL del reactivo de Benedict a cada tubo.
4. Aade 10 gotas de la solucin de glucosa al 5% al tubo 1, 10 gotas de
extracto de macerado de papa al tubo 2, 10 gotas de extracto de macerado de
cebolla al tubo 3, 10 gotas de solucin de gelatina al tubo nmero 4, 10 gotas de
solucin de albmina de huevo al tubo nmero 5, 10 gotas del primer
desconocido al tubo nmero 6, 10 gotas del segundo desconocido al tubo
nmero 7 y 10 gotas de agua al tubo nmero 8.
5. Coloca cuidadosamente los ocho tubos en el bao de agua hirviendo y calienta
por 5 minutos.
6. Utilizando una pinza, remueve los tubos del agua hirviendo y deja enfriar a
temperatura ambiente. Mezcla suavemente. Anota el color de cada tubo.
B. Prueba de Iodo
1. Rotula ocho tubos de ensayo del 1 al 8.
2. Aade 2.0 mL de suspensin de almidn al tubo nmero 1, 2.0 mL de
extracto de macerado de papa al tubo nmero 2, 2.0 mL de extracto de
macerado de cebolla al tubo nmero 3, 2.0 mL de solucin de gelatina al tubo
nmero 4, 2.0 mL de solucin de albmina al tubo nmero 5, 2.0 mL del primer
desconocido al tubo nmero 6, 2.0 mL del segundo desconocido al tubo nmero
7 y 2.0 mL de agua al tubo nmero 8.
3. Aade 3 gotas de reactivo de Lugol a cada tubo y mezcla.
4. Observa si hay cambio en color y anota los resultados.
C. Prueba de Sudn IV
1. Aade 30 gotas de agua y 30 gotas de Sudn IV a cada uno de seis tubos de
ensayo.

85

2. Aade 15 gotas de aceite al tubo nmero 1, 15 gotas de solucin de gelatina


al tubo nmero 2, 15 gotas de solucin de albmina al tubo nmero 3, 15 gotas
de primer desconocido al tubo nmero 4, 15 gotas del segundo desconocido al
tubo nmero 5 y 15 gotas de agua al tubo nmero 6.
3. Tapa cada tubo con parafina (tu instructor te ensear a hacerlo
correctamente). Agita vigorosamente por 1 minuto. Permite que el contenido
del tubo se sedimente.
4. Describe la distribucin del tinte con respecto al agua en el tubo 6 y con
respecto al aceite para ensalada (la capa de aceite est arriba) en el tubo 1.
Utiliza estos tubos como referencia para determinar los resultados de los tubos
2-5. Anota tus resultados.
D. Prueba de Biuret
1. Enumera 6 tubos de ensayo. Aade 1.0 mL de reactivo de Biuret a cada
tubo.
2. Aade 1.0 mL de solucin de albmina al tubo nmero 1, 1.0 mL de extracto
de macerado de papa al tubo nmero 2, 1.0 mL de solucin de gelatina al tubo
nmero 3, 1.0 mL del primer desconocido al tubo nmero 4, 1.0 mL del segundo
desconocido al tubo nmero 5 y 1.0 mL de agua al tubo nmero 6.
3. Agita cada tubo para mezclar el contenido y anota los resultados. Deja
reposar sobre la mesa a temperatura ambiente por 30 minutos.
SEGURIDAD. Deposita el disolvente usado en el recipiente rotulado
para descartar desperdicios qumicos acuosos.

86

Resultados
Completa la siguiente Tabla.
Resultado de Prueba
Solucin o Benedict
mezcla
Albmina de
huevo

Yodo

Sudn
IV

Posible
composicin
Biuret

Glucosa al
5%
Macerado
de papa
Macerado
de cebolla
Suspensin
de almidn
Aceite para
ensalada
Gelatina
Desconocido
____
Desconocido
____
Desconocido
____

87

Preguntas o Problemas
A. Preguntas sobre el ejercicio
1. Cul crees que es la composicin de tus desconocidos?
2. De cul tipo de macromolcula estn compuestas las enzimas?
3. Ilustra la estructura general de un aminocido e identifica la porcin de
dicha estructura que brinda a la molcula sus propiedades particulares.
4. A qu se debe que el yodo reaccione con el almidn pero no con la
glucosa?
B. Preguntas sobre razn y proporcin
Una proporcin consiste de dos razones unidas por un signo de igualdad.
a c
Existe una propiedad que asevera que toda proporcin de la forma cumple
b d
con que ad = bc.
1.
Escribe una proporcin para cada una de las siguientes, utiliza la
variable x para representar a la cantidad desconocida. Utilizando la
propiedad, resuelve cada proporcin.
a. Si 3 lbs. de chinas cuesta $.90, cunto cuestan 10lbs?
b. La razn de varones a mujeres en una universidad es de 7 a 5.
Cuntas mujeres hay si estudian 5600 varones?
c. Un carro viaja 165 millas en 3 horas. Cunto viajar en 8 horas si
se mantiene a la misma velocidad?
d. Dos ciudades en el mapa estn a 7 pulgadas de distancia y su
distancia real es de 420 mi. Halla la distancia entre las ciudades que
estn a 4 pulgadas de distancia.
e. Una caja de 2 libras de semilla para grama se supone que cubra un
rea de 2,500 pies cuadrados de patio. Cuntas cajas de semilla
necesitars para cubrir un rea de 8,750 pies cuadrados de patio?
f. Un poste de 9 pies de altura da una sombra de 15 pies. Halla la
altura del rbol de mang que tiene al lado si ste tiene una sombra
de 40 pies.
g. Una barra de metal se expande de pulgada por cada 12F de
aumento en temperatura. Cuanto se expandir si se expone a una
temperatura de 48F?
h. Si 8 kilmetros equivalen aproximadamente a 4.8 millas, A cuntos
kilmetros equivalen 12 millas?
i. Si dos cuartillos de pintura cubren un rea de 225 pies cuadrados,
cuntos pies cuadrados cubrirn 2 galones? (1 galn = 4 cuartillos)

88

j. Una mquina de procesar retratos puede desarrollar 3 rollos de


pelcula cada 8 minutos. A este ritmo, cuantos rollos desarrolla en un
periodo de 4 horas?

Referencias
Brum, GL, E McKane and G Karp. 1994. Biology: Exploring Life. John Wiley
and Sons, New York.
Campbell, NA and JB Reece. 2005. 7th ed. Biology. Pearson-Benjamin
Cummings. San Francisco, California.
Eberhard, C. 1985. General Biology Laboratory Manual. Saunders Collage
Publishing. Fort Worth, Texas.

89

Ejercicio 8: Cromatografa
Objetivos:
1. Aplicar la tcnica de cromatografa de capa fina en la separacin de
pigmentos fotosnteticos.
2. Identificar en un sistema de cromatografa la fase estacionaria y la fase mvil.
3. Explicar la base terica de la separacin de componentes en sistemas de
cromatografa de capa fina y papel.

Introduccin
La fotosntesis es el proceso mediante el cual la energa de la luz solar se
convierte en energa qumica. Durante este proceso, la clorofila, un pigmento
localizado en las membranas tilacoides de los cloroplastos, atrapa la energa de
la luz solar y la utiliza para formar compuestos de alta energa, ATP y NADPH.
Esta energa es luego utilizada en las reacciones del ciclo de Calvin, en las que se
forman carbohidratos a partir de CO2.
Existen diferentes tipos de pigmentos fotosintticos. El pigmento fotosinttico
ms abundante en la naturaleza es la clorofila A, que es el pigmento verde que
inicia las reacciones dependientes de luz. La clorofila B es un pigmento accesorio
que posee un color verde-amarillo. Adems de la clorofila, las plantas poseen
otros pigmentos accesorios llamados carotenoides. Hay dos tipos de
carotenoides, las xantofilas (pigmentos amarillos) y los carotenos (pigmentos
anaranjados). Dentro de los carotenos se encuentra el -caroteno, el -caroteno
y el licopeno, un pigmento rojo presente en los tomates y en los pimientos rojos.
Durante este ejercicio, separars los diferentes pigmentos presentes en un
extracto de hojas de plantas, mediante la tcnica conocida como cromatografa
de capa fina (thin layer chromatography o TLC). La cromatografa es utilizada
para separar los componentes presentes en una mezcla. Esta separacin se
logra por la diferencia en afinidad que tienen los componentes de la mezcla por
el disolvente (fase mvil) o por la capa de slice o silica (fase estacionaria). Los
pigmentos que tienen mayor afinidad por la fase estacionaria se desplazarn ms
lentamente.
En una cromatografa de capa fina, la mezcla que deseamos separar se coloca
sobre la fase estacionaria, que puede ser papel, slice u otra sustancia. Luego la
fase estacionaria se pone en contacto con la fase mvil. Entonces, la fase mvil
se comienza a mover sobre la fase estacionaria. Mientras esto ocurre, los
componentes que tienen menos afinidad con la fase estacionaria migran con la
fase mvil, con la que tienen mayor afinidad. Al detener el tiempo de contacto
entre ambas fases, los compuestos que migraron con la fase mvil
eventualmente se quedan unidos a la fase estacionaria, pero permanecen
ubicados en un lugar distinto a su origen. El resultado (el cromatograma)

90

contiene las sustancias separadas a base de su afinidad por el material de la fase


estacionaria.
El anlisis de una cromatografa de capa fina se realiza calculando el factor de
retencin, o la razn de flujo, Rf. El Rf compara la distancia recorrida por el
disolvente con la distancia recorrida por cada componente de la mezcla que se
haya separado. El Rf se calcula utilizando la siguiente ecuacin:

Rf =

distancia recorrida por el compuesto


distancia recorrida por el disolvente

Ejercicio de laboratorio
Materiales:

mortero y masa
arena
acetona
vasos de laboratorio
embudos
papel de filtro
placas de slice
goteros
iso-octano-acetona (SEGURIDAD: Este disolvente es
inflamable y no debe usarse cerca de llamas)
cmaras de vidrio con tapas
tubos capilares
lpiz de grafito
reglas

SEGURIDAD: Se reuiere el uso de gafas o espejuelos de seguridad


para este ejercicio.
Procedimiento:
1. Plantea o propn los tipos de pigmentos que esperas encontrar.
2. Prepara un extracto de hojas, macerando las hojas en un mortero con un poco
de arena y acetona. Usando un embudo y papel de filtro, filtra el macerado a un
vaso.
3. Marca con lpiz de grafito una lnea horizontal a 2.5 cm del borde inferior de
la placa de slice o papel de filtro. Este ser el origen de la cromatografa.

91

4. Utilizando un tubo capilar, coloca tres gotas del extracto de hojas sobre la
placa de slice o papel de filtro en el lugar marcado con lpiz. Espera que la gota
se seque y repite la aplicacin hasta cinco veces sobre la gota original.
5. Utilizando una pipeta Pasteur de vidrio, aade suficiente disolvente
(petroleum-eter-acetona) para cubrir el fondo de la cmara de cromatografa.
Tapa la cmara inmediatamente.
6. Coloca la placa de slice o el papel de filtro dentro de la cmara con los
pigmentos hacia el fondo. Tapa la cmara y permite que la cromatografa se
desarrolle hasta que el disolvente est a 1 cm del borde superior de la placa de
slice.
7. Saca la placa de la cmara e inmediatamente marca con un lpiz el borde
hasta donde lleg el disolvente. Permite que el cromatograma se seque
completamente.
8. Identifica los pigmentos obtenidos por su color caracterstico (clorofila
verde, clorofila verde-amarillo, caroteno anaranjado, xantofila
anaranjado-amarilloso).
9. Determina el Rf para cada componente que hayas logrado separar.
SEGURIDAD. Deposita el disolvente usado en el recipiente rotulado
para descartar desperdicios qumicos orgnicos.

Preguntas o Problemas:
A. Ejercicios sobre la tcnica de cromatografa de capa fina.
1.

Cul pigmento migra ms rpido? Cul migra ms lento?

2.

A qu se debe la diferencia en rapidez de migracin de los


pigmentos?

3.

Cmo expresaras matemticamente la relacin que se da entre la


rapidez de migracin y el factor que afecta esta rapidez?

4.

Qu pasara si, en lugar de usar iso-octano-acetona como


disolvente, hubieses utilizado uno con mayor afinidad por el
pigmento ms lento y menor afinidad por el pigmento ms rpido?

B. Problemas de razn de cambio


Hallamos una razn de cambio promedio cuando comparamos el cambio
que ocurre en dos acontecimientos distintos.

cantidad #1final - cantidad #1inicial


cantidad #2 final - cantidad #2 inicial

92

En las siguientes situaciones halla la razn de cambio promedio e indica las


unidades que cambian.
1. En el Maratn de Boston, en la categora de mujeres en silla de ruedas, en
1986 el mejor tiempo fue de 129 minutos. En 1996, el tiempo fue de 113
minutos. Halla la razn de cambio promedio en minutos por ao.
2. Cuando Margarita tena 8 aos meda 127cm y al cumplir los doce tena
una estatura de 143cm. Halla la razn de cambio promedio en centmetros
de estatura por ao.
3. En 1950, el Departamento de Agricultura estim que el consumo de grasa
por persona cada da era de 140g. Ahora, en 2002, encontr que el
consumo haba aumentado a 181.6g. Halla la razn de cambio promedio
de gramos de grasa por ao.
4. En un estudio realizado en Puerto Rico se ha encontrado que en 1989, las
grabaciones de jazz se vendan a aproximadamente $6.00. En el ao
2000 las grabaciones de jazz se vendan a $13.00. Halla la razn de
cambio de promedio de dlares por ao.
5. Si una dama usa un pantaln talla 10, entonces su cintura es de 26
pulgadas, si otra usa un pantaln talla 16 su cintura mide 32 pulgadas.
Halla la razn de cambio promedio en pulgadas por talla.

Referencias
Brum, GL, E McKane and G Karp. 1994. Biology: Exploring Life. John Wiley
and Sons, New York.
Campbell, NA and JB Reece. 2005. 7th ed. Biology. Pearson-Benjamin
Cummings. San Francisco, California.
Eberhard, C. 1985. General Biology Laboratory Manual. Saunders College
Publishing. Fort Worth, Texas.
Heidcamp, WH. 1995. Cell Biology Laboratory Manual.
http://www.gac.edu/cgi-bin/user/~cellab/phpl?contents.html

93

Ejercicio 9: Espectrofotometra
Objetivos:
1.
2.
3.
4.

Utilizar adecuadamente soluciones madre para preparar diluciones.


Describir el funcionamiento general de un espectrofotmetro.
Preparar una grfica que represente una curva de calibracin.
Determinar la concentracin de un desconocido mediante espectrofotometra.

Introduccin
La tcnica de espectrofotometra nos permite determinar la cantidad de material
o concentracin de un preparado biolgico. Esta tcnica se basa en el hecho de
que las sustancias absorben luz. Esta luz, que proviene de una fuente de luz
ubicada dentro del instrumento llamado espectrofotmetro, incluye la luz
visible (la que podemos detectar con nuestra vista) y dos tipos de luz invisible (la
luz ultravioleta y la luz infrarroja). Estos tipos de luz difieren entre s en cuanto a
su largo de onda. La luz ultravioleta (UV) tiene largos de onda de 230 a 380
nm, la luz visible tiene largos de onda de 380 a 750 nm y la luz infrarroja (IR)
tiene largos de onda mayores de 750 nm.
La luz que incide sobre una sustancia puede ser absorbida o transmitida por la
sustancia. Mientras ms luz es absorbida por la sustancia, menos luz es
transmitida. Las sustancias tienen capacidad de absorber (o transmitir) luz a
diferentes largos de onda. Existen sustancias que absorben luz de un largo de
onda correspondiente a la luz ultravioleta y otras que absorben luz de un largo
de onda correspondiente a la luz visible. Por ejemplo, una solucin de la base
nitrogenada adenina absorbe luz a 260 nm, mientras que una solucin del
aminocido triptfano absorbe luz a 280 nm. Puedes referirte a un texto de
biologa para informacin adicional sobre sustancias biolgicas que absorben a
otros largos de onda, como por ejemplo, los pigmentos fotosintticos.
La capacidad de absorber luz a determinados largos de onda tambin se puede
utilizar para determinar la concentracin de diversas sustancias en solucin. En
general, a mayor concentracin de una sustancia, mayor ser la cantidad de luz
absorbida (absorbancia). Por ejemplo, cuando tratamos ciertas soluciones de
protenas con sales de cobre, se forma un complejo de color azul-prpura, que
absorbe a 550 nm. En este tipo de prueba, bajo condiciones especficas y en un
rango de concentracin particular, la intensidad del color formado es
proporcional a la cantidad de protenas.
Dependiendo de la sustancia bajo estudio, podemos llevar a cabo pruebas
directas o indirectas en las cuales, mediante la deteccin de la absorbancia,
podemos determinar la concentracin de la sustancia. En ambos tipos de
pruebas se puede relacionar la concentracin de soluciones conocidas del
94

compuesto que nos interesa con su absorbancia (Ley de Beer-Lamber). A


base de esta relacin se puede construir una grfica de la concentracin (eje de
x) versus la absorbancia del compuesto (eje de y). Esta grfica deber resultar
en una lnea recta, que nos permitir entonces relacionar cualquier absorbancia
con la concentracin del desconocido que nos interesa estudiar. Este tipo de
grfica se conoce como una Curva de Calibracin. Para prepararla, se utilizan
soluciones estndares o de concentracin conocida con diferentes
concentraciones de la sustancia bajo estudio y una solucin que contiene
solamente el reactivo que permite el desarrollo del color (llamado blanco). A
cada una de estas soluciones, incluyendo el blanco, se les mide su valor de
absorbancia.
Los estudios de espectrofotometra se llevan a cabo utilizando un
espectrofotmetro. Este es un instrumento que contiene las siguientes partes:
1. fuente de luz emite luz con energa correspondiente a los largos de onda
requeridos para el anlisis. La fuente de luz puede ser una lmpara de
tungsteno (largo de onda visible) o una lmpara de hidrgeno (largo de
onda ultravioleta).
2. selector de largo de onda consiste de filtros que absorben la luz de largos
de onda menores o mayores al deseado para llevar a cabo el anlisis. Por
ejemplo, si vamos a tomar lecturas a 550 nm, el selector bloquear los largos de
onda diferentes a ese largo.
3. apertura sirve para controlar la intensidad de luz que incide o impacta la
muestra. En general, los espectrofotmetros sencillos tienen una apertura que
no vara en tamao.
4. cuveta (celda) es el recipiente donde se coloca la muestra del material que
se va a analizar y por el que pasa la luz a travs de la muestra. La cuveta o
celda puede estar hecha de vidrio o plstico en el caso de largos de onda en la
regin visible y de cuarzo en el caso de largos de onda en la regin ultravioleta.
5. fotocelda es la parte del espectrofotmetro que detecta la cantidad de luz
transmitida (que atraviesa la cuveta). La fotocelda absorbe la luz transmitida por
el material que se va a analizar y esto causa un cambio en el movimiento de
electrones, lo que es detectado en un metro.
En este laboratorio utilizars el espectrofotmetro para determinar la
concentracin de protenas en unas soluciones de concentracin desconocida.

95

Ejercicio de laboratorio
Materiales
y equipo:

agua destilada
solucin madre de albmina de suero bovino (20 mg/mL)
solucin de albmina de suero bovino (desconocido)
pipetas serolgicas de 1 y de 5 mL
micropipetas
papel de lente
5 tubos de ensayo de 10mL
gradillas
reactivo de Biuret
10 cuvetas para espectrofotmetro
papel de grfica
espectrofotmetro
agitador mecnico

SEGURIDAD: Se requiere el uso de gafas o espejuelos de seguridad


para este ejercicio.
Procedimiento:
A- Preparacin de estndares
1. Aade 1 mL de agua destilada a un tubo de ensayo. Rotula este tubo como
blanco.
2. Utilizando la solucin madre de albmina de suero bovino (50 mg/mL) , aade
suficiente solucin a cuatro tubos de ensayo, para que cada tubo tenga 10,
20, 30 y 40 mg de albmina de suero bovino (recuerda calcular el volumen
necesario utilizando las conversiones). Completa el volumen de cada tubo
hasta 1.0 mL. Rotula cada uno de estos cuatro tubos como estndares para
cada concentracin (10 mg/mL, 20 mg/mL, etc.)
B- Dilucin y anlisis de la solucin desconocida
1. Diluye la solucin desconocida en la serie , , 1/8 y 1/16, siguiendo el
diagrama que aparece en la Figura 9.1 a continuacin. Recuerda cambiar de
pipeta cada vez que vas a transferir 1 mL de un tubo a otro, y descartar 1 mL
del ltimo tubo para que al final este tambin tenga un volumen de 1 mL.

96

1 mL

Solucin
desconocida

1 mL

Dilucin
,

1 mL

Dilucin
1/4,

1 mL

Dilucin
1/8,

Dilucin
1/16,

Figura 9.1 Esquema de dilucin en serie.


2. Aade 4.0 mL del reactivo de Biuret a cada uno de los nueve tubos (uno de
agua, cuatro de solucin estndar y cuatro de las diluciones del desconocido).
Mezcla utilizando un vortex. El volumen final de cada tubo debe ser de 5.0
mL.
3. Incuba los tubos por 30 minutos a temperatura ambiente.
4. Determina la absorbancia de cada solucin (estndares y desconocidos) a 550
nm, siguiendo este procedimiento:
a. Enciende el espectrofotmetro y permite que el mismo se caliente por
unos minutos. Selecciona el largo de onda (550 nm) para el estudio.
b. Mientras esperas, limpia cuidadosamente con papel de lente la
superficie de 9 cuvetas que utilizars para el anlisis
espectrofotomtrico
(pasos c al e).
c. Deposita en una cuveta 1 mL de reactivo de Biuret con agua (el
blanco) en el espectrofotmetro. Ajusta la transmitancia a 100%
presionando el botn de 100% T/O. En este momento el instrumento
ya est calibrado. Remueve la cuveta.
d. Deposita en una cuveta 1 ml del estndar que contiene 10 mg/mL de
albmina de suero bovino. Inserta la cuveta en el espectrofotmetro y
determina su absorbancia. Debes alinear la punta de flecha de la cuveta
97

con la punta de flecha que esta en el orificio para cuvetas en el


espectrofotmetro. Anota tus observaciones en la Tabla 9.1.
e. Utilizando el blanco, reajusta el espectrofotmetro a 100% de
transmitancia y determina la absorbancia de los restantes tubos
(estndares y desconocidos).
5. Completa la Tabla 9.1.
Tabla 9.1. Absorbancia de las soluciones estndar.
Concentracin de la
Absorbancia
solucin estndar
(=550 nm)
(mg/mL)
10
20
30
40
6. Prepara una curva de calibracin con los datos obtenidos de la lectura de
los estndares (absorbancia vs. concentracin de estndares).
7. Utiliza esta grfica para determinar la concentracin de las diluciones del
desconocido, buscando en la grfica la concentracin que corresponde a cada
lectura de absorbancia. Entonces completa la Tabla 9.2.
Tabla 9.2. Absorbancia de las diluciones del
desconocido.
Dilucin del Absorbancia Concentracin
desconocido
(mg/mL)
1/2
1/4
1/8
1/16
8. Determina la concentracin de protenas en un mililitro de la solucin
desconocida original. Recuerda que si el desconocido fue diludo, tienes
que considerar el factor de dilucin.

98

Preguntas y Problemas
A. Preguntas sobre el ejercicio
1. Tienes alguna lectura de absorbancia sobre o menor que las de los
estndares? De ser as: explica a qu se debe y qu haras para que la
lectura se encuentre dentro de la curva de calibracin.
2. Qu haras para detectar 0.5mg/mL de protenas?
B. Busque en Internet referencias que indiquen para que se utiliza la
espectrofotometra en el campo de la biologa y la medicina.
C. Problemas sobre grficas
Utiliza papel cuadriculado para trazar las grficas representadas por las
siguientes tablas. Recuerda utilizar una escala adecuada.
1. Un empleado monta x equipos, entonces el pago por hora es y.
Nmero de
equipos
montados
0
1
5
10

Pago por
hora ($)
9
9.25
10.25
11.50

2. Porciento de msica que se produce en cassettes es y, para cada ao


x dado.
Ao

Porciento de Msica
producida en

cassettes

1
(1991)
3 (1993)
5 (1995)

50
38
26

99

3. Un arbolito que se siembra en Puerto Rico a la edad de x aos tiene


un tronco que mide y pulgadas de dimetro.
Edad en
Aos
8
22
34

Dimetro del tronco del


arbolito en pulgadas
2
5
6.5

4. El costo por da y para la renta de un carro depende del nmero de


das x que se rente.
Nmero de
das
2
5
10

Renta por
Da
24
20
13.33

Referencias
1- Heidcamp, WH. 1995. Cell Biology Laboratory Manual, Appendix G:
Spectrophotometry.

http://www.gac.edu/cgi-bin/user/~cellab/phpl?contents.html

100

Ejercicio 10: Cambios en pH por Actividad Metablica


Objetivos:
1. Utilizar adecuadamente el metro de pH.
2. Distinguir entre grupo control y grupo experimental.
3. Determinar el efecto de un organismo en el pH de su medio ambiente.

Introduccin
El pH es la medida de la concentracin de iones de hidrgeno (H+) presentes en
una solucin y nos permite determinar el grado de acidez o alcalinidad de una
sustancia. La expresin matemtica que describe el pH es la siguiente:
pH = - log [ H+ ]
Como la concentracin de H+ est siempre entre 0 y 1 (es un decimal), el
logaritmo es negativo. Sin embargo, como tomamos el inverso de ese logaritmo,
el pH siempre es positivo. La escala de pH va de 0 a 14, y todas las sustancias
caen dentro de la escala. Se establece que una sustancia es cida si tiene un
pH<7; es neutral si tiene pH=7; y es alcalina si tiene un pH>7.
Es de importancia vital para un organismo el mantener control de su pH, pues
solamente en un pH ideal pueden llevarse a cabo las funciones celulares
necesarias. En los organismos el pH se mantiene dentro de los lmites normales
por la accin de sustancias amortiguadoras. Estas son sustancias capaces de
absorber pequeas cantidades de iones de H+, cuando el pH baja, o de liberar
iones de H+ cuando el pH sube. La accin de las sustancias amortiguadoras
permite as el buen funcionamiento de las clulas.
En el ejercicio de laboratorio de hoy podrs determinar cmo la actividad
metablica de algunos organismos afecta el pH del ambiente en el cual se
encuentran. Como modelo de estudio se utilizarn peces de agua dulce. A
medida que los peces respiran, generan CO2. Una vez en el agua, el CO2 afecta
el pH de la misma ya que se forma cido carbnico.
CO2 + H2O H2CO3 H+ + HCO3
En este laboratorio utilizars una tcnica que se conoce como titulacin para
determinar ese efecto. La titulacin se define como el anlisis de la composicin
de una solucin de concentracin desconocida midiendo el volumen
necesario para reaccionar con el volumen de otra solucin de concentracin
conocida.

101

Ejercicio de laboratorio
Materiales:

vasos de laboratorio
placas Petri
bureta
metro de pH
botellas de lavado con agua destilada
agua alcalinizada (pH 9.0)
agua
NaOH 2.5mM
dos peces (goldfish) por grupo
probetas de 50 mL
solucin de fenolftalena
soluciones calibradoras para pH (pH=4.0, 7.0 y 9.0)
embudo pequeo

SEGURIDAD: Se requiere el uso de gafas o espejuelos de seguridad


para este ejercicio.
Procedimiento
A. Uso del metro de pH
1. Familiarzate con el metro de pH (Figura 10.1).

102

Electrodo

Figura 10.1. Metro de pH.

2. Lava el electrodo usando una botella con agua destilada. Seque el electrodo
con papel toalla.
3. Calibra el metro de pH.
a. Presiona la tecla CAL.
b. Presiona la tecla CLEAR para remover la calibracin que pueda estar en
la memoria del metro.
c. Vuelve a oprimir la tecla CLEAR para confirmar la remocin de la
calibracin.
d. Introduce el electrodo del metro de pH en el amortiguador standard de
pH=4.0.
e. Presiona la tecla READ. El resultado del pH es desplegado
continuamente en la pantalla, mientras que el auto-eye parpadea.
espera a que el parpadeo cese, lo que indica que el metro tiene una
lectura estable. El valor de pH debe aparecer en la pantalla del metro.

103

Si la lectura del metro no es la esperada, ajstala al valor esperado y


repite.
f. Remueve el electrodo de la solucin amortiguadora standard, enjuaga
el. electrodo con agua destilada y seca cuidadosamente con papel toalla
g. Repite el paso e con las soluciones amortiguadoras standard de pH 7.0
y 8.0.
h. Presiona la tecla de EXIT para salir de la funcin de calibracin, Todos
los valores se guardarn en la memoria del metro de pH.
B. Determinacin del pH experimental
1. Determina el volumen ocupado por cada uno de los peces de la siguiente
manera: deposita 25 mL de agua destilada (no alcalinizada) en una probeta
de 50 mL. Echa el pez en la probeta y anota el valor del volumen de agua
desplazado en la Tabla 10.2.
2. Rotula un vaso como Control, otro como Experimental 1 y un tercero como
Experimental 2.
3. Deposita 150 mL de agua alcalinizada en cada uno de los tres vasos. Cubre
los vasos con placas Petri.
4. Determina el pH del agua alcalinizada:
a. Presiona la tecla de pH RESOLUTION para seleccionar una resolucin
de 0.01.
b. Sumerge el electrodo del metro de pH en el agua alcalinizada.
c. Oprime la tecla de READ. Anota el pH que aparece en la pantalla en la
Tabla 10.1.
5. Deposita cada pez en los vasos rotulados Experimental 1 y Experimental 2.
Cubre el vaso control y los dos vasos experimentales con una placa Petri.
6.Determina el pH del agua en los dos vasos experimentales cada tres (3)
minutos hasta llegar a 15 minutos. Tendras un total de cinco determinaciones.
Anota los valores de pH en la Tabla 10.1. Saca los peces de los vasos al
finalizar los 15 minutos
7. Luego de medir el pH de cada vaso por el tiempo asignado, aade tres
gotas de fenolftalena a cada uno de los tres vasos. La fenolftalena es un

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indicador de pH que es incoloro a pH cido y rosado intenso a pH alcalino.


8. Utilizando un embudo, llena hasta la marca de 0.0 mL la bureta con solucin
de NaOH 2.5 mM. Segn te demostr el profesor, descarga gota a gota el
contenido de la bureta en el primer vaso experimental, mezclando suavemente
mientras aades el NaOH. Deja de aadir NaOH justo en el momento en que el
contenido del vaso se torna rosado. Anota en la Tabla 10.2 el volumen de
NaOH usado. Llena la bureta nuevamente y contina titulando el otro vaso
experimental. Anota todos los resultados. Descarta el NaOH como el instructor
te indique y enjuaga cuidadosamente las buretas.
9. Utiliza los datos obtenidos para determinar la razn de respiracin
relativa(RRR) para cada pez y la razn de respiracin del organismo por
mililitro (RRO/mL), aplicando las siguientes frmulas:
RRR= mL NaOH usados para alcanzar el punto de titulacin en el vaso
Experimental mL de NaOH usado para control*
*Este valor te ser provisto por el profesor.
RRO/mL= RRR/volumen del organismo

Resultados
1. Completa las Tablas 10.1 y 10.2.
Tabla 10.1. Medidas de pH
Vaso
___ min
___ min
Control

pH
___ min

___ min

___ min

EXP 1
EXP 2

105

Tabla 10.2. Razones de respiracin


Vaso

Volumen total
del organismo

Volumen
NaOH
requerido
para cambio
en pH

RRR

RRO/mL

Control
EXP 1
EXP 2

Preguntas y Problemas
A. Preguntas sobre la actividad de laboratorio
1. Prepara una grfica que represente el cambio en pH a travs del
tiempo.
2. Segn tus resultados experimentales, qu relacin existe entre el
volumen de un organismo y su RRO/mL?
3. Qu esperaras que pase si el agua no hubiese estado alcalinizada? Y
hubiese estado amortiguada?
4. Menciona dos sustancias amortiguadoras presentes en una clula.
5. Cules son los iones que se forman cuando el agua se disocia? Es el
agua una sustancia amortiguadora?

B. Aplicaciones de Nmeros Decimales


1. Si a un joyero le cuesta $30.73 un reloj y lo vende en $87.80, cunto
le gan?
2. Si el Dow Jones Industrial Average, hoy baj 2.69 puntos para
cerrar en 3932.68, en cunto cerr ayer?
3. La semana pasada, Luis dedic 21.7 horas a ver televisin y 5.6 horas a
estudiar para sus clases de biologa y de matemticas. Cunto ms
tiempo estuvo viendo televisin que estudiando?
4. Si una cadena de fantasa fina cuesta $39.88 y se cobra un impuesto
adicional de $2.39, cunto me devolvern si la compro con un billete de
$50.00?
5. Si para comprar una cmara de vdeo, das $225 de pronto y pagas 18
mensualidades de $34.17, halla el costo total de la cmara.

106

Referencias
Campbell, NA and JB Reece. 2005. 7th ed. Biology. Pearson-Benjamin
Cummings. San Francisco, California.
Vodopich, DS and R Moore. 1999. Biology: Laboratory Manual. WCB McGrawHill. Boston, Massachussets.

107

Apndice
EJEMPLO INFORME DE LABORATORIO
Nota: Los nombres, resultados y referencias de este modelo son
ficticios.
Ttulo: Efecto de los ejercicios aerbicos en el pulso
Autores: Corazn Prez, Alma Carrera y Mario Pulso
Resumen: Con el fin de completar un estudio comparativo de la intensidad de
los ejercicios, se midi el efecto de caminar, trotar, nadar, correr y subir
escaleras en el pulso de 24 estudiantes de entre 18 y 20 aos de edad. Los
estudiantes fueron identificados de entre un grupo de voluntarios con peso y
estatura normal, quienes comenzaron a hacer uno de varios ejercicios sin
calentamiento previo. Se midi electrnicamente el pulso de los estudiantes en
reposo (antes de comenzar el ejercicio) y a los 5, 10 y 15 minutos de estar
ejercitndose. Todos los ejercicios resultaron en un aumento en el pulso, con un
aumento mayor para los estudiantes que subieron escaleras.
Introduccin:
Por mucho tiempo hemos sido conscientes de la importancia de mantener una
buena condicin cardiovascular. Una manera recomendada para lograr esta
buena condicin es hacer ejercicios aerbicos por un perodo de 20 minutos o
ms diarios por lo menos tres das a la semana. Existen muchas opciones de
ejercicios aerbicos para lograr esa condicin. Sin embargo, existe
incertidumbre sobre cul ejercicio es ms eficiente en lograr un aumento el pulso
de la persona que se ejercita. El propsito de este estudio fue comparar los
efectos de cinco tipos de ejercicio (caminar, trotar, nadar, correr y subir
escaleras) sobre el pulso.
Materiales y mtodos:
Un grupo de 28 adultos jvenes de entre 18 y 20 aos fue seleccionado al azar
de entre los 80 miembros del club Los ciclistas de Cupey. Todos los
participantes tenan peso y estatura promedio e informaron gozar de buena
salud. Los participantes fueron asignados al azar en uno de siete grupos. Los
voluntarios asignados al grupo 1 no se ejercitaron, los del grupo 2 caminaron, los
del grupo 3 trotaron, los del grupo 4 nadaron, los del grupo 5 corrieron, los del
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grupo 6 subieron escaleras y los del grupo 7 pedalearon en una bicicleta


estacionaria. A cada uno de los voluntarios se le coloc en el antebrazo derecho
un electrodo capaz de medir el pulso electrnicamente. Los datos fueron
recopilados y analizados por un analizador de datos (marca Little, modelo B6).
El pulso de cada voluntario fue medido antes de iniciar los ejercicios y a los 5, 10
y 15 minutos durante el perodo de ejercitacin.
Resultados:
Los resultados de cada grupo de voluntarios fueron promediados para comparar
los efectos de cada tipo de ejercicio aerbico sobre el pulso. Los resultados
aparecen resumidos en la tabla 1 y presentados de forma grfica en la figura 1
Tabla A.1. Efecto de diferentes ejercicios en el pulso.
Tipo de
Promedio pulso (latidos por minuto)
ejercicio
en
5 min
10 min
15 min
reposo

caminar

60

90

110

115

trotar

58

95

95

98

nadar

61

90

90

95

correr

62

100

105

110

subir
escalera

59

110

114

120

ninguno

58

60

58

59

bicicleta
estacionaria

63

120

115

118

109

140
120

caminar

100

trotar

80

nadar

60

correr

40

subir

20

ninguno

0
0

10

15

pedalear

Figura 1. Efecto de diferentes ejercicios en el pulso


Discusin de los resultados:
Todos los ejercicios evaluados fueron efectivos en subir el pulso de los
voluntarios. Solamente no subi el pulso del grupo que se mantuvo en reposo
durante el experimento. El ejercicio que caus un menor aumento en el pulso
fue el de nadar, seguido por el de caminar. El ejercicio que caus un mayor
aumento en el pulso fue el de subir escalera, que fue casi tan efectivo como
pedalear en una bicicleta estacionaria, un ejercicio aerbico que ha sido
reconocido como el que ms aumenta el pulso entre quienes lo practican. El
ejercicio de natacin es el que menos aument el pulso, contrario a lo que
esperbamos.
El cambio ms significativo en cuanto al pulso ocurri durante los primeros cinco
minutos de actividad. El pulso se mantuvo ms o menos igual por el resto de la
actividad. Sera de esperarse que el pulso siguiera alto mientras se mantuviera
la actividad, pero sera interesante conocer si esto es as. Un posible
experimento que podra ampliar nuestro conocimiento sobre el efecto de estos
ejercicios es tomar medidas del pulso por mayor tiempo.
Referencias:
1. Annimo. 2002. Tu salud y el ejercicio. El Nuevo Da, 27 de julio de 2002.
2. Ejercicio de laboratorio entregado en clase.
3. Larson, D. 2001. Fisiologa del ejercicio. Publicaciones Puertorriqueas.
San Juan, Puerto Rico. P. 201-03.
4. Morales, R. 1999. La efectividad de ejercitarse con bicicletas estacionarias.
Revista de Educacin Fsica de Puerto Rico, Volumen 10 Nmero 1: 27-29.
5. Soller, J. 2000. Physiological response to exercise.
http://www.exerciseexperts.com

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