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Muestreo y Anlisis de Gases Disueltos en el Aceite

Servicios > Mantenimiento Predictivo

1.

GENERALIDADES

Con el fin de detectar fallas incipientes en los transformadores antes de que


desarrollen y desencadenen en una falla mayor provocando prdidas de produccin, se
realiza el muestreo de aceite y se enva al laboratorio para identificar y medir la
concentracin
de
gases
disueltos
en
el
lquido.
El anlisis de gases disueltos en el aceite, se realiza utilizando un Cromatgrafo de
Gases y tomando en consideracin el mtodo de prueba ASTM D-3612; en cuanto a la
evaluacin de resultados se realizan conforme a la norma NMX-J-308 (Grfica
Doernenburg,
Mtodo
Rogers,
Triangulo
Duval
y/o
CSUS).
2.

DESCRIPCION

Registro

Muestreo

Entrega

Anlisis de la muestra en el Laboratorio, obtenindose la concentracin en ppm


los
siguientes
gases:

del
de

Envo

del

aceite
constancia

Hidrgeno
Metano
Etano
Etileno
Acetileno
Monxido
Dixido
Nitrgeno
Oxigeno

datos

ACTIVIDADES

de

de

DE

de
de

de

transformador.

aislante
de

servicio

3. PROPIEDADES Y/O VENTAJAS

Personal tcnico calificado y uniformado.

No interrupcin del suministro de energa elctrica.

realizado.

(H2)
(CH4)
(C2H6)
(C2H4)
(C2H2)
(CO)
(CO2)
(N2)
(O2)

Carbono
Carbono

Informe

mineral.

de

Servicio.

Anlisis en Laboratorio acreditado ante E.M.A.

Equipos de medicin y prueba calibrados.

Informe de Servicio Digital (PDF).

4. APLICACIONES
El anlisis de Cromatografa de Gases Disueltos es aplicable al aceite aislante de
transformadores, interruptores, etc. As como otros lquidos dielctricos tales como RTemp, Silicn, etc.
5. RECOMENDACIONES
Se recomienda realizar anlisis de gases disueltos en el aceite anualmente cuando el
transformador se encuentre en condiciones normales de operacin o cada seis meses
si se encuentra sobrecargado, cuando se hayan detectado deficiencias en su
funcionamiento o que el aceite se encuentre cerca de los lmites permisibles para
continuar
en
servicio.

Muestreo y Anlisis Fsico-Electro-Qumico al Aceite Aislante


Servicios > Mantenimiento Predictivo

1.

GENERALIDADES

Con el fin de verificar la condicin del aceite y programar las medidas preventivas
(reacondicionamiento) o correctivas (cambio), se realiza el anlisis de las
caractersticas
fsicas,
elctricas
y
qumicas
del
aceite.
El servicio consiste en la obtencin de una muestra de aceite aislante del
transformador, y envo para su anlisis correspondiente en un laboratorio acreditado
para
tal
fn.
El muestreo y diagnstico del aceite se realiza conforme a la norma NMX-J-308 y los
mtodos de prueba en el laboratorio conforme a la norma NMX-J-123.
2.

DESCRIPCION

Registro

de

Muestreo

del

Entrega

Anlisis
..........o
..........o
..........o
..........o
..........o
..........o

de

datos

del

aceite

la

equipo.

aislante

constancia

de

ACTIVIDADES

de

muestra

mineral.

servicio
en

el

realizado.
Laboratorio.

Apariencia visual.
Color.
Tensin Interfacial (mN/m).
Factor de Potencia (%).
Rigidez Dielctrica (kV).
Contenido de Humedad (mg/kg).

..........o

Nmero

Envo

DE

3.

de
de

Neutralizacin
Informe

de

PROPIEDADES

Personal tcnico calificado y uniformado.

No

Anlisis

Equipos

de

medicin

Entrega

de

constancia

en

del

suministro

Laboratorio

VENTAJAS

de

energa

acreditado
y
de

KOH/g).
Servicio.

Y/O

interrupcin

(mg

ante

prueba
servicio

elctrica.
E.M.A.
calibrados.
realizado

4.

APLICACIONES

El anlisis Fsico-Electro-Qumico es aplicable al aceite aislante de transformadores,


interruptores, etc. As como otros lquidos dielctricos tales como R-Temp, Silicn,
Envirotemp
FR3,
etc.

5. RECOMENDACIONES
Se recomienda realizar anlisis Fsico-Electro-Qumico anualmente, cuando el
transformador se encuentre en condiciones normales de operacin o cada seis meses
si se encuentra sobrecargado, cuando se haya detectado deficiencias en su
funcionamiento o cuando el aceite se encuentre cerca de los lmites permisibles para
continuar en servicio.

Reacondicionado de Aceite Aislante Mineral de Transformadores


Servicios > Mantenimiento Preventivo

1.

GENERALIDADES

Con el fin de prolongar la vida til del aceite aislante mineral y por consiguiente la vida

del transformador, se realiza el servicio de Reacondicionamiento del Aceite, el cual


consiste en la extraccin de agua y partculas, elevando notablemente su rigidez
dielctrica.
El servicio se realiza utilizando el mtodo de micro-filtracin conforme a la norma NMXJ-308 inherente al manejo, control y tratamiento de aceite aislante para
transformadores, y a la NOM-133-ECOL relacionada con manejo de residuos peligrosos.
2.

DESCRIPCION

DE

ACTIVIDADES

Registro
de
datos
del
transformador.

Prueba
colorimtrica
para
deteccin
de
BPCs.
Revisin general (tanque, gargantas, radiadores, nivel de aceite, temperatura, etc.).
Proceso de Reacondicionamiento de Aceite Aislante con equipo SPRAAM.

Medicin
del
contenido
de
humedad
del
aceite.

Determinacin
de
la
rigidez
dielctrica
(referencia
inicial).
Determinacin de la humedad de la parte activa del transformador.
Medicin y monitoreo de cantidad de aceite procesado, as como del contenido de
humedad.
Finalizacin del proceso de Reacondicionamiento al obtener una rigidez dielctrica
mayor
a
40
kV.
Muestreo para anlisis Fsico-Electro-Qumico en Laboratorio Acreditado (en su caso).

Entrega
de
constancia
del
servicio
realizado.
3.

PROPIEDADES

Y/O

VENTAJAS

No
interrupcin
del
suministro
de
energa
elctrica.

Incluimos
moto-generador
para
alimentar
el
equipo
SPRAAM.

Monitoreo
en
lnea
del
aceite
aislante
procesado.

Garantizamos
No-Contaminacin
de
BPCs.
Garantizamos una Rigidez Dielctrica mayor a 40 kV, siempre y cuando la saturacin
del aceite sea <20% o el contenido de humedad sea < 28 ppm.

4.

APLICACIONES

El servicio de reacondicionamiento del aceite aislante es aplicable a transformadores


tipo subestacin o pedestal, tanto de distribucin, como de potencia.
5.

RECOMENDACIONES

Se recomienda realizar el servicio de reacondicionamiento de aceite cuando el


laboratorio acreditado, as lo recomiende debido a la humedad detectada en el anlisis
Fsico-Electro-Qumico, y cuando se realicen reparacin de fugas del transformador y/o
revisin

apriete
de
conexiones
internas.

Muestreo y Anlisis de Gases Disueltos en el Aceite


Servicios > Mantenimiento Predictivo

1.

GENERALIDADES

Con el fin de detectar fallas incipientes en los transformadores antes de que


desarrollen y desencadenen en una falla mayor provocando prdidas de produccin, se
realiza el muestreo de aceite y se enva al laboratorio para identificar y medir la

concentracin

de

gases

disueltos

en

el

lquido.

El anlisis de gases disueltos en el aceite, se realiza utilizando un Cromatgrafo de


Gases y tomando en consideracin el mtodo de prueba ASTM D-3612; en cuanto a la
evaluacin de resultados se realizan conforme a la norma NMX-J-308 (Grfica
Doernenburg,
Mtodo
Rogers,
Triangulo
Duval
y/o
CSUS).
2.

DESCRIPCION

Registro

Muestreo

Entrega

de

de

ACTIVIDADES

del

aceite
constancia

transformador.

aislante
de

servicio

mineral.
realizado.

Anlisis de la muestra en el Laboratorio, obtenindose la concentracin en ppm


los
siguientes
gases:

Hidrgeno
Metano
Etano
Etileno
Acetileno
Monxido
Dixido
Nitrgeno
Oxigeno

datos

del
de

DE

Envo

de
de

de

(H2)
(CH4)
(C2H6)
(C2H4)
(C2H2)
(CO)
(CO2)
(N2)
(O2)

Carbono
Carbono

Informe

3. PROPIEDADES Y/O VENTAJAS

Personal tcnico calificado y uniformado.

No interrupcin del suministro de energa elctrica.

Anlisis en Laboratorio acreditado ante E.M.A.

Equipos de medicin y prueba calibrados.

Informe de Servicio Digital (PDF).

de

Servicio.

4. APLICACIONES
El anlisis de Cromatografa de Gases Disueltos es aplicable al aceite aislante de
transformadores, interruptores, etc. As como otros lquidos dielctricos tales como RTemp, Silicn, etc.
5. RECOMENDACIONES
Se recomienda realizar anlisis de gases disueltos en el aceite anualmente cuando el
transformador se encuentre en condiciones normales de operacin o cada seis meses
si se encuentra sobrecargado, cuando se hayan detectado deficiencias en su
funcionamiento o que el aceite se encuentre cerca de los lmites permisibles para
continuar
en
servicio.

Pruebas Bsicas a Transformadores de Distribucin


Servicios > Mantenimiento Preventivo

1.

GENERALIDADES

Con el fin de verificar la condicin general del transformador y programar las medidas

preventivas

correctivas,

se

realizan

pruebas

elctricas

dielctricas.

El servicio consiste en la limpieza (en su caso), inspeccin fsica del transformador, as


como pruebas de resistencia de aislamiento, relacin de transformacin, resistencia
hmica
y
medicin
de
inductancia.
Lo anterior se realiza con equipos de medicin y prueba diseados para tal fin,
siguiendo los lineamientos que establece la norma NXM-J-169 inherente a mtodos de
prueba
para
transformadores
de
distribucin
y
potencia.
2.

DESCRIPCION

DE

ACTIVIDADES

Registro
de
datos
del
transformador.

Maniobras
de
des-energizacin
y
puesta
a
tierra.
Revisin del indicador de nivel de aceite, temperatura, temperatura mxima y
manovacumetro.
Revisin y limpieza externa del tanque, gargantas, radiadores boquillas y vlvulas (en
su
caso).
Preparacin del transformador (identificacin y desconexin del lado primario y
secundario).
Medicin de resistencia de aislamiento (megohmetro), as como determinacin de
ndice
de
polarizacin.

Medicin
de
relacin
de
transformacin
(DTR).

Medicin
de
resistencia
hmica
(mili-hmetro).

Medicin
de
la
inductancia
de
los
devanados.
Conexin y apriete de conexiones externas en el lado de primario y secundario del
transformador.

Retiro
de
puesta
a
tierra
y
energizacin
del
transformador.

Entrega
de
constancia
de
servicio
realizado.
3.

PROPIEDADES

Y/O

VENTAJAS

Personal
tcnico
calificado
y
uniformado.
Equipos
de
medicin
y
prueba
calibrados.
Apriete
de
conexiones
con
torqumetro.
Uso
de
equipo
de
proteccin
personal
y
traje
Arc-Flash.
Informe
de
Servicio
Digital
(PDF).

4.

APLICACIONES

El servicio de pruebas es aplicable a transformadores de distribucin y/o potencia, tipo


subestacin,
pedestal
o
secos.
5.

RECOMENDACIONES

Se recomienda realizar pruebas al transformador anualmente durante el periodo de


mantenimiento
preventivo
a
la
subestacin
elctrica.

CROMATOGRAFIA DE GASES

La cromatografa para la deteccin de gases combustibles disueltos en el aceite dielctrico es,


probablemente, la tecnica mayormente usada en el mundo para hacer monitoreos de la condicin de
operacin en transformadores. Su adecuada aplicacin la hace una herramienta indispensable en todo
programa de mantenimiento preventivo.

Durante la operacin de un transformador es normal que el aceite dielctrico se vaya degradando lentamente
liberacin cierta cantidad de gases que quedan atrapados en el aceite. Sin embargo, en presencia de
anomalas trmicas, la generacin de estos gases se da a un ritmo ms acelerado. Hay cinco tipos de
anomalas trmicas, unas ms severas que otras:

Arqueo
El arqueo de alta energa es la anomala en procesos ms severa y peligrosa. Se manifiesta a travs de la
produccin de altas cantidades de hidrgeno y acetilieno, acompaadas de cantidades menores de metano y
etileno.

El arqueo se presenta a altas corrientes y temperaturas. Bixido de carbono y monxido de carbono estarn
tambin presentes cuando la anomala implica al aislamiento slido, celulosa. En algunos casos severos el
aceite tambin se puede carbonizar.

Efecto corona
El efecto corona es una anomala elctrica de baja energa. Las descargas elctricas a baja energa producen
hidrgeno y metano con pequeas cantidades de etano y etileno. Cantidades similares de bixido de carbono
y monxido de carbono pueden resultar de una descarga que implique a la celulosa.

Chisporroteo
El chisporroteo ocurre con el aumento intermitente del voltaje sin implicar altas corrientes. Como resultado de
esto se incrementan los niveles de metano y etano sin que se incrementen el hidrgeno, etileno y acetileno.

Sobrecalentamiento
La descomposicin por sobrecalentamiento en el aceite producir metano y etileno, junto con pequeas
cantidades de hidrgeno y etano. Rastros de acetileno se dejarn ver si la anomala es severa e implica
contactos elctricos.

Sobrecalentamiento de la celulosa
Grandes cantidades de dixido y mnoxido de carbono estn relacionadas con el sobrecalentamiento de la
celulosa. Hidrocarbonos como el metano y el etileno se van a formar tambin si la anomala implica a las
estructuras de madera y celulosa impregnadas de aceite.
En estos casos un anlisis de furanos ser de gran utilidad para determinar el grado de despolimerizacin del
aislamiento slido.

Nueve son, tpicamente, los gases detectados a travs del anlisis cromatogrfico; oxgeno, nitrgeno, dixido
de carbono, monxido de carbono, hidrgeno, metano, etano, etileno, acetileno. La presencia de algunos de
ellos y sus cantidades ayudan en la determinacin de la naturaleza de la falla, su nivel de severidad, y en
algunos casos, su posible ubicacin.

Apndice 6.5 - Mantenimiento del equipo utilizado


habitualmente en el laboratorio
1. Mantenimiento y reparacin
1.1 Cromatgrafo de gases
Como sucede con todo instrumento, para asegurar la fiabilidad de un cromatgrafo de
gases es necesario prestar atencin a diversos aspectos del equipo y a su modo de
empleo. La negligencia de cualquier parte del sistema puede invalidar los resultados del
anlisis. Para conseguir que un instrumento d resultados fiables es imprescindible evitar
que la contaminacin se concentre en los componentes principales, lo cual depende a su
vez de la naturaleza de los materiales de ensayo que se analizan, y en el caso de algunas
aplicaciones puede ser el factor mas importante para la calidad analtica. Esto es aplicable
en particular a los anlisis de trazas. Adems, la experiencia en este tipo de
instrumentacin como sistema total es insustituible. Una parte importante del
procedimiento de comprobacin consiste en la vigilancia continua, especialmente de los
cromatogramas y parmetros instrumentales, por parte de especialistas en cromatografa
experimentados.
Por tanto hay que reconocer que el mantenimiento ha de ser una tarea compartida entre
el personal del servicio tcnico de la empresa fabricante de todo el sistema instrumental y
los usuarios de los componentes expuestos a los materiales de ensayo, que sufren un
deterioro como consecuencia del uso y necesitan frecuentes cuidados entre las visitas del
servicio tcnico. El personal de este servicio, que dispone de informacin sobre el
producto y de herramientas, es el ms capacitado para mantener y reparar eficientemente
los componentes electrnicos. Sin embargo, los usuarios se ven obligados con frecuencia
a reparar fallos cuando es imposible conseguir los servicios del personal de
mantenimiento o cuando estos fallos se repiten y los usuarios se familiarizan con el modo
de resolverlos. Es preciso que los usuarios elaboren su propio programa de
mantenimiento para los componentes del sistema que entran en contacto con materiales
de ensayo o que estn sujetos a deterioro. Entre los componentes que requieren una
atencin sistemtica se incluyen los sistemas de inyeccin, las columnas, los detectores,
los suministros de gas y los accesorios de goma.
1.1.1 Inyectores
Siempre es necesario proceder peridicamente a la sustitucin de los diafragmas y a la
limpieza de las superficies internas, en particular los revestimientos de la inyeccin. Hay
que comprobar diariamente si los diafragmas tienen fugas utilizando un lquido espumoso
de tipo "Snoop". Los diafragmas slo suelen servir para 25-30 inyeccciones, siendo
necesario sustituirlos despus. Los diafragmas que presentan fugas han de sustituirse
automticamente por otros nuevos que hayan sido limpiados cuidadosamente con una
extraccin de disolvente o mediante tratamiento en una estufa al vaco antes del uso.

Si se emplea habitualmente un cromatgrafo de gases, hay que quitar el revestimiento de


la inyeccin de la abertura de sta (actualmente casi todos los revestimientos de
inyeccin son de vidrio) y sustituirlo por uno nuevo o por el revestimiento original limpiado
a fondo en una mezcla con un 50 por ciento de cido ntrico que contenga un 7,5 por
ciento de cromato potsico. A continuacin, el revestimiento de la inyeccin se lavar
cuidadosamente con agua y etanol y se colocara de nuevo, una vez seco, en la abertura
de la inyeccin. Los diafrgmas se sustituirn automticamente en esa fase.
1.1.2 Columnas
Diariamente se comprobar si las conexiones de la columna del cromatgrafo de gases
tienen prdidas utilizando un detergente o jabn lquido espumoso. Estas conexiones se
apretarn en caso necesario. La columna se inspeccionar visualmente a intervalos
peridicos para asegurarse de que no han aparecido resquicios en el relleno de las
columnas o, si se trata de una columna capilar, que no se han producido roturas en la
propia columna. Puede comprobarse si ha habido una rotura en la columna midiendo el
flujo en el detector final de la misma. Las columnas rellenas tienen de ordinario un flujo de
10 a 25 mi aproximadamente por minuto, mientras que las columnas capilares suelen
tener un flujo que oscila entre 1,0 y 2,5 mi.
Tanto diaria como semanalmente se comprobar la resolucin de las columnas utilizando
un patrn de calibracin (vase la Seccin 2.2). Cada semana se golpearn suavemente
las columnas rellenas con un lpiz o un trozo de madera para asegurarse de que el
relleno de la columna no ha sufrido alteraciones. Si se observa que la resolucin de los
picos se ha debilitado, se retirar la columna y se inspeccionar el extremo de la
inyeccin de la columna que pudiera haberse deteriorado a causa de la contaminacin
con extractos de muestras. Las soluciones de patrones apropiados, que es necesario
analizar para que sirvan de base a la cuantificacin, pueden proporcionar una informacin
suplementaria de importancia crucial para el diagnstico. Se examinar un cromatograma
para determinar la constancia de los tiempos de retencin, las alturas relativas de los
picos y la simetra de las configuraciones de stos, la ausencia de picos extraos, la
regularidad de la lnea de referencia y la proporcin entre seal y ruido. Los cambios
imprevistos suelen indicar problemas de degradacin o contaminacin, ya sea en la
propia columna, en el inyector o en el detector. Muchas columnas rellenas y capilares se
suministran con mezclas de componentes de diversas polaridades, etc., y con el
correspondiente cromatograma de ensayo, que puede utilizarse tambin para comprobar
el rendimiento de la columna. Esta mezcla de ensayo permite confirmar si la columna se
ha deteriorado apreciablemente (vase la Seccin 2.2.1 del presente Apndice).
1.1.3 Estufas
Adems de comprobar el correcto funcionamiento del sistema de circulacin de aire y
ventilacin a efectos de enfriamiento, el usuario ha de recurrir a las indicaciones sobre la
temperatura que facilita el fabricante. Es posible insertar un termopar o un termmetro con
resistencia de platino para comprobar la temperatura de la estufa isoterma. Si se utiliza

este sistema para vigilar la programacin de la temperatura, es posible descubrir


variaciones sinusoidales inquietantes en la rampa y fuertes subidas de temperatura
cuando se llega a un conjunto isotermo. Para trabajar con columnas capilares es
imprescindible que el control de la temperatura sea preciso y reproducible. Sin embargo,
algunos fabricantes son reacios a declarar cules son exactamente las especificaciones y
tolerancias para el control programado. No obstante, lo que realmente importa es la
precisin del control de temperatura de la estufa. Siempre que la temperatura se
mantenga constante, da lo mismo que la estufa est 1 2 grados por encima o por debajo
de lo que indica la lectura.
1.1.4 Suministros de gas y accesorios de goma
Deber comprobarse peridicamente la presin y el flujo del gas, con el fin de que
correspondan a las especificaciones y sean apropiados para el sistema y la aplicacin. Un
cambio imprevisto puede indicar la presencia de una fuga que deber repararse sin
demora. Las piezas que utilizan cierres de goma son propensas al deterioro y han de
remplazarse por manguitos de metal. La pureza de los gases es importante. Los gases
portadores habrn de purificarse por medio de filtros para eliminar el oxgeno y la
humedad; de ordinario se utilizar el helio para las columnas capilares. Las impurezas de
hidrocarburos de los gases utilizados en los detectores se eliminarn mediante filtros de
grafito. Si se utiliza nitrgeno como gas portador en el anlisis de residuos de plaguicida
con detectores de captura de electrones, se aplicar una pureza superior al 99,999 por
ciento, siempre que sea posible; aun as se deber utilizar una trampa de oxgeno para
que liberarlo de este gas.
1.1.5 Detectores
Por su naturaleza y diversidad, es difcil medir y vigilar la sensibilidad de los detectores
empleados en la cromatografa de gases, ya sean unidades aisladas o dependientes de
otros componentes del sistema cromatogrfico. En la prctica, se siguen utilizando hasta
que se observa una disminucin apreciable de la sensibilidad atribuible al detector. La
limpieza terica, al igual que la sustitucin de las partes sensibles, restablece a menudo el
rendimiento. Debern seguirse fielmente las instrucciones del fabricante en materia de
limpieza.
De ordinario, 0,1 mg de estearato de metilo provocarn una deflexin en plena escala de
un detector de ionizacin de llama. Se puede comprobar fcilmente la sensibilidad de un
detector de electrones utilizando una solucin de lindano en n-hexano; 20-40 pg de
lindano inyectados en un cromatgrafo de gases darn normalmente una deflexin en
plena escala. No obstante, hay que sealar que estas cifras de sensibilidad son
indicativas; las respuestas de los detectores variarn considerablemente segn los
cromatgrafos de gases y los fabricantes.
1.1.6 Evaluacin de datos

Los sistemas de datos cromatogrficos suelen evaluar las alturas o reas de los picos.
Tales sistemas dependen de la exactitud de la conversin de los datos analgicos a
digitales, la cual tal vez hayan de confirmarse en varios rdenes de magnitud. La medicin
de picos aislados y bien resueltos, situados en lneas de referencia uniformes, no plantea
grandes problemas. Sin embargo, si han de cuantificarse picos sin resolver en lneas de
referencia no uniformes, ser necesario comprender el funcionamiento del sistema de
integracin, especialmente en lo que respecta a la deteccin percibida de las lneas de
referencia y la diseccin de los picos que se superponen. La configuracin de los picos
puede ser tambin un indicador de la eficiencia y eficacia de la columna de cromatografa
de gases. Picos torcidos o configuraciones de picos no gaussianas indican a menudo un
deterioro de la columna, suciedad en el sistema de inyeccin, incompatibilidades en el
flujo, una compatibilidad incorrecta entre el analito y la polaridad de la columna, o una
sobrecarga que impide la debida separacin entre las fases estacionarias gaseosa y
lquida.
1.1.7 Curvas de calibracin
Se preparar una serie de disoluciones patrn, de modo que la variedad de
concentraciones sea ms amplia que la de la disolucin desconocida que ha de
analizarse. Esto permite determinar los lmites de la respuesta lineal al analito del
detector.
1.2 Cromatografa lquida de alta resolucin (HPLC)
La HPLC es una tcnica que exige atencin constante para mantener una sensibilidad y
separacin ptimas. Las bombas pueden daarse, las columnas bloquearse y
deteriorarse y los detectores contaminarse, lo que redunda en un flujo bajo, una presin
inversa alta, absorbencia de fondo e interferencias. Durante el proceso de cierre hay que
tener cuidado para que no entre en el sistema ninguna materia extraa.
Los componentes del sistema de HPLC a los que hay que prestar atencin
sistemticamente son la bomba, la columna del sistema de inyeccin, los detectores y los
disolventes.
1.2.1 Bomba
La funcin principal de la bomba de HPLC es proporcionar un flujo continuo de fase mvil
a la columna de separacin a una presin constante. Las piezas principales de la bomba
aspirante e impelente son los pistones, los cierres de los pistones y las vlvulas de
retencin, el motor y las levas de la barra impulsora.
Antes de su uso diario, hay que comprobar si el flujo de la bomba es constante. Si se
observa que el flujo es dbil o intermitente, hay que introducir en el sistema disolvente
desgasificado para eliminar el aire atrapado, limpiar a fondo las vlvulas de retencin y, si
est ajustado, comprobar el correcto funcionamiento del regulador de impulsos. Cuando

se sustituyen los cierres y las vlvulas de retencin, hay que actuar con cuidado para no
daarlos apretando excesivamente las piezas. El valor de la columna bombeada deber
ser preciso. Sin embargo, slo ha de ser exacto cuando el analista instala y valida un
sistema analtico. Una vez validado el sistema, lo nico que importa es la precisin del
flujo. Se comprobar la columna bombeada a intervalos peridicos fijando la bomba en un
volumen dado y pasando el disolvente bombeado a un cilindro u otro aparato de medicin.
1.2.2 Columnas de HPLC
Como cualquier medio de separacin cromatogrfica, la columna de HPLC debe funcionar
con la eficiencia necesaria, como mnimo, para llevar a cabo la separacin de los analitos.
Por consiguiente, se calibrar peridicamente y se vigilar la resolucin por medio de
patrones (vase la Seccin 2.3).
Las columnas pueden deteriorarse por diversas razones, como la contaminacin, el
cambio de polaridad debido a la perdida de actividad o una perturbacin en la geometra
de la columna. La contaminacin puede producirse en el cuerpo de la columna, a causa
de la unin irreversible de un componente a la fase estacionaria o, ms frecuentemente,
debido a la retencin de materia extraa en la parte superior de la columna. Slo es
necesario prestar atencin a las columnas si el deterioro de la resolucin es
analticamente significativo. Si es necesario puede quitarse el extremo superior de la
columna; a continuacin se quita la "frita" de retencin y se inspecciona el relleno de la
columna. La supresin de unos pocos milmetros de relleno y su sustitucin por nuevo
relleno y una nueva "frita" resolver tal vez este problema, pero podra causar otros con
algunos rellenos de alta resolucin.
El problema ms grave es la prdida de sensibilidad de una columna por razones que
varan ampliamente segn el tipo de columna (intercambio de iones, slice, FR, fase
unida). Se deber tratar de limpiar la columna introduciendo en ella el disolvente utilizado
habitualmente en el anlisis, y si con esto no se consigue una mejora, se utilizar
disolvente de distinta polaridad, teniendo presente la necesidad de elegir un disolvente
miscible y la naturaleza del relleno de la columna. Introducir por detrs el disolvente no da
buenos resultados, ya que altera el relleno y hace que el flujo de disolvente sea desigual.
Si se dispone del equipo y los conocimientos necesarios, puede que la solucin ms
rentable sea rellenar una nueva columna.
1.2.3 Detectores de HPLC
En el anlisis de alimentos se utilizan diversos detectores, el ms frecuente de los cuales
es el basado en UV visible, fluorescencia, ndice de refraccin y propiedades
electroqumicas de los analitos. La respuesta de estos detectores se comprobar
diariamente utilizando el patrn que recomiende el fabricante para detectar cualquier
"desviacin" en el rendimiento, que suele ser una advertencia oportuna de un fallo
inminente en el detector.

Los detectores, especialmente los que se utilizan para medir componentes derivados
despus de la columna, deben enjuagarse a fondo al final de cada jornada o al completar
una serie de anlisis. Hay que tener especial cuidado con los detectores cuando se
utilizan junto con bloques mviles modificados con aminas o sulfanatos amortiguados.
Despus del uso, el detector se desconectar y limpiar haciendo pasar cido ntrico
disuelto en agua (1:10) a travs de la unidad. Se dejar reposar durante diez minutos y se
aclarar a fondo con agua. Este procedimiento garantiza la eliminacin de componentes
que pueden producir sedimentos insolubles y obstruir el instrumento.
1.2.4 Fases mviles de HPLC
Lo ideal sera preparar las fases mviles cuando fueran necesarias a partir de un tipo
conocido de disolventes de calidad HPLC y filtrarlas con un filtro de 0,45 micras para
eliminar cualquier materia sin disolver. A continuacin se desgasifica la fase mvil
utilizando helio o tcnicas ultrasnicas y se evalan las impurezas haciendo pasar el
nuevo disolvente por el sistema de HPLC y midiendo cualquier interferencia de fondo a las
longitudes de onda de la deteccin. Esto puede resultar problemtico cuando se utiliza
acrilonitrilo con deteccin UV.
Todos los disolventes se conservarn de modo que se evite la contaminacin con
partculas transportadas por el aire y la contaminacin atmosfrica con contaminantes
como dixido de carbono, cloruro de hidrgeno, cloro y compuestos voltiles de azufre.
Tambin debe evitarse cuidadosamente la formacin de productos inestables de reaccin
(por ejemplo perxidos en el tetrahidrofrano una vez eliminados los estabilizadores
durante la redestilacin).
1.3 Espectrofotmetros
Los espectrofotmetros UV/visible se utilizan ampliamente en el laboratorio de control de
los alimentos. Su mantenimiento es una tarea sumamente especializada que suele exigir
los servicios de un tcnico debidamente capacitado en el instrumento en cuestin.
El analista no tratar nunca de forzar el banco ptico, los espejos, los prismas, los filtros o
el fotomultiplicador, ya que en manos inexpertas el ms leve desfase puede inutilizar el
espectrofotmetro.
Antes y despus del anlisis se proceder al mantenimiento general de los
espectrofotmetros, incluida la limpieza de las cubetas y la cmara de celdas. Las
salpicaduras de disoluciones acidas o alcalinas pueden causar daos irreparables,
aunque se dejen slo por breve tiempo.
El analista podr encargarse de mantener y cambiar la mente de iluminacin siempre que
se disponga del manual del fabricante y el mantenimiento se efecte en presencia de un
analista con experiencia. Inmediatamente despus llevar a cabo una operacin de este

tipo, se har constar en un registro permanente. A continuacin se calibrar de nuevo el


instrumento (vase la Seccin 2.1).
Se realizarn comprobaciones bsicas de la longitud de onda y la absorbencia utilizando
filtros calibrados y disoluciones patrn (vase la Seccin 2.1) que recomienden y
suministren los fabricantes. Rara vez es necesario utilizar un patrn primario para las
comprobaciones.
1.4 Balanzas
Las balanzas debern mantenerse perfectamente limpias y exentas de polvo y corrosin.
La balanza, ya se aproxime su precisin al gramo o al miligramo, es sensible a las
vibraciones, corrientes de aire, fluctuacin de la temperatura y horizontalidad de la
superficie sobre la que descansa.
Todas las balanzas se comprobarn peridicamente para verificar si no se han movido y
siguen apoyndose en una superficie lisa. Diariamente se realizarn pesajes bsicos de
comprobacin utilizando pesas calibradas. Se mantendr un registro permanente de estas
comprobaciones, que debern cotejarse con las fichas de trabajo del analista.
1.5 Polarmetros
Los polarmetros se utilizan sobre todo para determinar la concentracin y el tipo de las
disoluciones de azcar. Suelen ser de dos tipos: los que se basan en la rotacin de una
luz monocromtica emitida por una fuente de sodio incandescente y funcionan
mecnicamente, y los electrnicos que utilizan una luz policromtica polarizada. En
ambos casos se proceder a una limpieza peridica de las lentes y ventanas de luz.
Gracias a la instrumentacin electrnica moderna, los polarmetros llevan incorporado un
sistema que detecta los defectos de funcionamiento, como la prdida de potencia de la
lmpara. Tambin tienen un sistema de autocalibracin. Sin embargo, tanto los
polarmetros mecnicos como los electrnicos han de comprobarse peridicamente
utilizando cuas normalizadas de cuarzo, disoluciones patrn de sacarosa o un tubo
sacarmetro normalizado (vase la Seccin 2.4).
1.6 Espectrmetros de absorcin atmica
Los espectrmetros de absorcin atmica se utilizan en el laboratorio de control de los
alimentos para analizar especies de sustancias inorgnicas txicas y nutrientes. Dado que
casi todas estas especies se encuentran en niveles residuales, es necesario realizar un
esfuerzo considerable para impedir la contaminacin cruzada, la adsorcin en la
superficie de diversas partes del espectrmetro (como el nebulizador, la linterna, el tubo
de muestreo, etc.) y la alineacin de la llama o la estufa y la longitud de onda y geometra
bsica de la luz procedente de las lmparas de ctodo hueco.

Que los resultados estn equivocados en una cifra excesivamente alta o baja, que no se
alcancen los lmites de deteccin, que no se consigan las concentraciones caractersticas,
que se obtengan datos ruidosos, blancos elevados o lneas de referencia ruidosas, que la
llama no prenda o presente un perfil irregular o que el quemador se apague rpidamente
son hechos que pueden indicar la necesidad de revisar el espectrmetro de absorcin
atmica. Otro indicador caracterstico es que el rendimiento del anlisis con o sin llama no
corresponda a la especificacin del fabricante.
Si no se cumple la especificacin del fabricante, debern realizarse diversas
comprobaciones. Sin embargo, casi todas ellas habrn de ser efectuadas exclusivamente
por un especialista de un servicio de mantenimiento reconocido por el fabricante o por un
tcnico altamente calificado. Las operaciones de mantenimiento ms sencillas son las
relativas a los instrumentos pticos, el quemador y el nebulizador.
1.6.1 Instrumentos pticos
Se evitar dejar huellas digitales en las ventanas del compartimiento de la muestra o
sobre la fuente de luz, as como tocar las superficies reflectantes de los espejos o rejillas.
Si se acumula polvo en las superficies pticas, se extraer cuidadosamente con una pera
de aire limpio y seco. Las superficies no debern frotarse con un trapo. Las superficies de
las ventanas podrn limpiarse con un trozo de algodn empapado en una disolucin de un
detergente lquido suave y enjuagarse despus varias veces con agua desionizada. Si se
ensucian las superficies de los espejos (por ejemplo a causa de la exposicin a los
vapores del laboratorio), la limpieza deber confiarse a un especialista de un servicio de
mantenimiento. Si esto no es posible, un tcnico especializado podr limpiar las
superficies cuidadosamente con un algodn limpio humedecido en un disolvente limpio
como por ejemplo alcohol. Es importante secar rpidamente las superficies, sin frotar las
superficies pticas. Se evitarn cuidadosamente los araazos que obligan a pulir de
nuevo los espejos. Nunca se debern limpiar o tocar las superficies de las rejillas.
1.6.2 Quemador
La naturaleza de las muestras aspiradas determina la frecuencia de la limpieza del
quemador. Si funciona normalmente, no requerir limpiezas frecuentes. La cmara del
quemador deber reacondicionarse despus de trabajar con disolventes orgnicos o
cuando se aspiren muestras con un contenido elevado de slidos.
El quemador deber dar una llama uniforme a lo largo de la ranura. Una llama desigual
puede indicar que la ranura necesita una limpieza. Tras haber desconectado la llama
apagada y conectado el aire, se pasar cuidadosamente una lmina fina de metal a travs
y a lo largo de la ranura, sin mellar sus bordes. Para limpiar los sedimentos incrustados en
la ranura de la cabeza del quemador puede que sea necesario quitar la cabeza de la
cmara del quemador, dejarla durante toda la noche a remojo en una disolucin
detergente y a continuacin enjuagarla con agua desionizada y secarla con aire limpio.

Si se aspiran muestras acuosas o muestras orgnicas como aceite o extractos de


metilisobutilcetona, la seal de la absorcin producida puede ser ruidosa e irregular. Tras
la aspiracin de muestras orgnicas, se aspirar durante cinco minutos un disolvente
orgnico limpio del que se sepa que es miscible con las muestras que acaban de
aspirarse. Despus de esto se aspirar acetona durante cinco minutos y a continuacin se
aspirar un 1 por ciento de cido ntrico durante otros cinco minutos. Si se han formado
sedimentos en la cmara del quemador, ste se desmontar y limpiar empapndolo en
una disolucin detergente con un cepillo para botellas. En la cmara de mezcla no se
utilizarn cidos ni limpiadores de tipo domstico y se evitar daar su recubrimiento
plstico con productos abrasivos.
El tubo de desage de residuos se limpiar a fondo con agua. El colector se vaciar y se
rellenar de agua, las disoluciones peligrosas o corrosivas se eliminarn debidamente y
se observarn las normas locales sobre los efectos de los residuos en el medio ambiente.
Tras la aspiracin de muestras con concentraciones elevadas de plata, cobre o mercurio,
el quemador se limpiar siempre en una llama de acetileno, ya que si se deja que se
sequen podran formarse acetiluros inestables explosivos. Inmediatamente despus de
realizar este tipo de anlisis se enjuagarn a fondo el tubo de desage de residuos y la
cmara de mezcla del quemador, y sta se inspeccionar visualmente para asegurarse de
que se ha eliminado toda traza de residuos.
1.6.3 Sistema de desage del quemador
El sistema de desage del quemador se enjuagar concienzudamente con agua para
eliminar residuos custicos, corrosivos u orgnicos que pudieran daar el tubo de
desage y la cmara. Se recomienda efectuar esta operacin al trmino de cada jornada
de trabajo.
1.7 Equipo de elaboracin
El mantenimiento de los mezcladores, trituradores y molinillos se suele limitar a la
limpieza, el diagnstico de las averas elctricas y el mantenimiento preventivo de la
degradacin de los cierres hermticos. Hay que sealar que con disolventes inflamables
slo podrn utilizarse mezcladores a prueba de chispas.
La limpieza es el aspecto ms importante del mantenimiento de este tipo de equipo, ya
que evita la contaminacin cruzada de las muestras, y en especial las de naturaleza
grasa, como carnes, productos de confitera y semillas oleaginosas.
La limpieza peridica con agua y detergente ir seguida en caso necesario de una
limpieza con un disolvente apropiado y a continuacin de nuevo con detergente. Para
quitar de los mezcladores la carne y el pescado triturados se suele utilizar agua caliente,
detergente y un cepillo robusto. Si de ese modo no se eliminan todos los restos de grasa,
puede estar indicada una limpieza con un disolvente como el n-hexano.

El mantenimiento de estufas, hornos de mufla, refrigeradores y congeladores se limitar a


una comprobacin peridica de la temperatura.
Aunque en el anlisis de alimentos no suele ser esencial que la temperatura de los
hornos, refrigeradores y congeladores sea absolutamente exacta, estos elementos del
equipo han de cumplir unos requisitos mnimos que pueden variar segn la temperatura
externa y la especificacin del fabricante. De ordinario un refrigerador ha de alcanzar de
2C a 5C y un congelador de -18C a -22 C.
Los refrigeradores y congeladores se comprobarn a intervalos determinados,
habitualmente de un mes, utilizando un termmetro certificado de inmersin total; en caso
de que el control de la temperatura sea crucial se utilizar un termopar de registro
continuo. Los hornos se comprobarn por medio de un pirmetro o un termopar. Si las
temperaturas diferen considerablemente de las indicadas en la especificacin para el
instrumento, un tcnico calificado deber revisar la unidad de control de la temperatura.
Las estufas de secado y vaco son algo diferentes, ya que algunos mtodos normalizados
(AOAC, BS, etc.) especifican una desecacin hasta un peso constante o mediante una
temperatura especfica, por ejemplo 100 C 1C. Se aconseja comprobar diariamente la
temperatura con ayuda de un termmetro certificado.
El mantenimiento del vaco en las estufas de vaco puede comprobarse por medio de un
manmetro debidamente calibrado. Este vaco deber ser inferior como norma a 100 mm
de mercurio. Puede que tambin sea necesario comprobar las bombas y tuberas.
1.8 Instrumental de vidrio
Todos los laboratorios que se ocupan del anlisis de alimentos realizan algunas
operaciones de qumica "por va hmeda", y algunos de ellos no hacen otra cosa, por lo
que el mantenimiento del instrumental de vidrio y los reactivos reviste una gran
importancia. Una prctica acertada es separar el instrumental de vidrio utilizado en el
anlisis de trazas del empleado en las macrodeterminaciones. Debern elaborarse
procedimientos para la limpieza del instrumental de vidrio (y tambin de tefln, politeno,
polipropileno, etc., en caso de que se utilicen). Hay que recordar que estos
procedimientos dependen del calibre y la capacitacin del personal que lleva a cabo la
limpieza. Para limpiar la mayor parte del instrumental de vidrio de uso general es
suficiente utilizar agua caliente y detergente, no siendo necesario el empleo de materiales
corrosivos como el cido crmico. Sin embargo, ciertas aplicaciones del instrumental de
vidrio requieren procedimientos especiales de limpieza y manipulacin, por ejemplo
cuando se miden oligoelementos en agua, para evitar la adsorcin o lixiviacin del
instrumental de vidrio, o cuando no se utiliza el vidrio en absoluto. En general, para llevar
a cabo anlisis de trazas se evitar utilizar instrumental de vidrio con araazos o
raspaduras.
2. Rendimiento y calibracin de los instrumentos

A continuacin se indican las tcnicas de evaluacin del rendimiento y calibracin para


algunos instrumentos analticos ampliamente utilizados:
2.1 Espectrofotmetros ultravioleta y visible
Los espectrofotmetros deben calibrarse por lo que respecta a la exactitud de la longitud
de onda y la densidad ptica (absorcin). La exactitud de la longitud de onda puede
comprobarse fcilmente utilizando filtros normalizados de didimio u holmio. La exactitud
de la absorbancia puede comprobarse mediante el barrido de una disolucin de 50 100
mg por litro de dicromato potsico puro en 0,005M de cido sulfrico, entre 200 nm y 400
nm.
Son habituales las absorbancias siguientes:
Longitud de onda (nm)

50 mg/l

100 mg/l

235

0,626 0,009

1,251 0,019

257

0,727 0,007

1,454 0.015

313

0,244 + 0,004

0,488 0,007

350

0,536 0,005

1,071 0,011

2.2 Cromatgrafos de gases


Los aspectos ms importantes del rendimiento de los cromatgrafos de gases son los
relativos a la sensibilidad y a la separacin. La sensibilidad depende de varios factores,
entre ellos el funcionamiento correcto del detector, la proporcin de sitios activos en la
fase estacionaria de la columna, la estanqueidad de las conexiones del gas y los efectos
de la descomposicin del analito debidos a posibles puntos calientes locales y superficies
metlicas.
2.2.1 Columnas cromatogrfcas de gases
Para calibrar columnas cromatogrficas de gases lo mejor es utilizar disoluciones patrn
del analito que ha de analizarse, pero se puede obtener informacin sobre las condiciones
de una columna con ayuda de mezclas normalizadas de ensayo. A continuacin se
ofrecen algunos ejemplos:
Mezcla de ensayo n 1 - Para los sistemas equipados con un detector de ionizacin de
llama puede ser til una mezcla que contenga 2-octanona, 1-octanol, 2,6-dimetilanilina,
2,6-dimetilfenol, decano, undecano, dodecano y tridecano en diclorometano. Esta
formulacin permite confirmar la eficiencia de la columna, la presencia de fugas, el
volumen muerto de la columna, los sitios de absorcin metlica, las caractersticas

cido/base, los grupos de enlace de hidrgeno o silanol y los cidos de Lewis. Esta
mezcla se usa en los anlisis sensibles, isotermos o con temperatura programada para
comprobar la afinidad de una columna con respecto a mltiples compuestos (Grob et al.,
J. Chromatography, 156, 1, 1978).
Mezcla de ensayo n 2 - Tambin en caso de utilizar un detector de ionizacin de llama,
puede llevarse a cabo una sencilla comprobacin de la eficiencia de la columna para el
anlisis de esteres metlicos de cidos grasos mediante CG disolviendo aceite de coco (o
de colza) en isooctano, agitando con un 10 por ciento de hidrxido de potasio metanlico
durante 2 minutos y, tras dejar que se separen las fases, inyectando un volumen
convenientemente pequeo de la capa superior de isooctano directamente en el
cromatgrafo. La resolucin de los picos de estearato y oleato de metilo es un buen
indicador del rendimiento satisfactorio de la columna.
Mezcla de ensayo n 3 - En los sistemas con un detector de captura de electrones, se
puede adquirir una mezcla til para evaluar columnas de cromatografa de gases
destinadas al anlisis de plaguicidas en empresas como la norteamericana Supelco. Otra
posibilidad es utilizar una disolucin de isooctano que contenga 0,1 g/ml de alfa-HCH,
beta-HCH, gamma-HCH (lindano), p,p'-DDT, o,p'-DDT, p,p'-TDE, p,p'-DDE, aldrn, dieldrn,
endrn, heptacloro y heptacloroepxido. Algunos usuarios aaden tambin o,p'-TDE y o,p'DDE, pero estas sustancias slo aparecen como productos de la degradacin de o,p'-DDT
(que a su vez es normalmente una impureza en p,p'-DDT) y rara vez se encuentran como
residuos en los alimentos. Si se quiere evitar la frecuente identificacin errnea de los
picos, son necesarias una cuidadosa utilizacin de las mezclas de ensayo (incluido un
"marcado" en extractos de materiales de ensayo) y una interpretacin correcta de los
resultados. Hay que sealar que el LMR para el DDT total es igual a la suma de p,p'-DDT,
o,p'-DDT, p,p'-TDE y p,p'-DDE.
Mezcla de ensayo n 4 - En los anlisis de plaguicidas se producen con frecuencia
interferencias debidas a la contaminacin con bifenilos policlorados (BPC). Para calibrar y
evaluar la interferencia de BPC en una columna de CG puede ser til una mezcla de
ensayo que contenga 10 mg por mi de Aroclor 1242, o de Aroclor 1254, en diclorometano.
2.3 Cromatgrafos en fase lquida de alta resolucin
Los principales aspectos que han de tenerse en cuenta al comprobar el rendimiento y
calibrar un cromatgrafo en fase lquida de alta resolucin son el sistema de
bombeo/distribucin, las columnas (eficiencia y simetra de los picos) y el detector.
2.3.1 Sistema de distribucin
El sistema de distribucin suele consistir en una bomba aspirante e impelente o en una
bomba de doble pistn con desplazamiento de una rama. Independientemente del
sistema que se utilice, la calibracin correcta de la distribucin del flujo es de la mayor
importancia, ya que en la cromatografa de gases el flujo determina la velocidad de

elucin, y de sta depende la capacidad de la columna de separacin para alcanzar un


equilibrio entre las fases mvil y estacionaria, y por tanto afecta a todo el sistema. Sin una
calibracin precisa del flujo, es imposible conseguir la repetibilidad y reproducibilidad. La
calibracin del sistema de distribucin del flujo es una operacin sencilla que se realiza
haciendo que el eluyente de todo el sistema pase por un cilindro de medicin de tipo A
durante un tiempo exacto. Hay que tener cuidado de registrar un volumen suficientemente
grande para que se pueda efectuar una medicin exacta (por ejemplo, 25 mi a 1 mi por
minuto en un cilindro de medicin de 25 mi). El pesaje permite conseguir una mayor
exactitud. Siempre es preferible medir el flujo de todo el sistema, ya que la presin inversa
de la columna y del detector que la acompaa puede variar, con lo que vara la cada de la
presin en todo el sistema y por consiguiente el flujo.
2.3.2 Columnas
El rendimiento y la calibracin de las columnas varan segn con los componentes que se
separan y miden. Sin embargo, de ordinario la calibracin puede realizarse utilizando
compuestos puros y midiendo distintos parmetros, como el tiempo de elucin, la
desviacin de la resolucin y el nmero de platos tericos.
El tiempo de elucin se calcula como el tiempo transcurrido entre el punto medio del pico
eludido y el frente del disolvente. Si no se observa ningn frente de disolvente, el tiempo
de elucin puede calcularse como el tiempo transcurrido entre el punto medio del pico
eludido y el punto de inyeccin. Las columnas deben mantenerse a temperatura constante
si se quiere evitar que varen los tiempos de elucin.
La asimetra del pico eludido proporciona informacin sobre las condiciones de la columna
y el estado de la "frita" en la cabeza de sta. Un pico asimtrico puede deberse al
excesivo nmero de sitios activos, a la desactivacin de la columna, a la formacin de un
tnel dentro de sta, a un flujo demasiado rpido o a la utilizacin de un disolvente
inadecuado. La asimetra del pico eludido se calcula midiendo las distancias entre el
punto medio del pico y la posicin de la traza a cada lado del punto medio a mitad de la
altura del pico. En el caso de una configuracin gaussiana del pico, las distancias sern
idnticas.
El nmero de platos tericos de la columna mide la eficiencia de sta. Cuanto ms alto
sea este nmero, ms eficiente ser la columna y mayor ser la separacin entre los dos
compuestos. El nmero de platos tericos (N) se calcula dividiendo la longitud de la
columna por la "altura equivalente de una plato terico" (HETP):

La HETP se calcula del siguiente modo:

donde "D" es la distancia del punto medio del pico eludido desde el punto de inyeccin y
"W1/2" es la anchura del pico a la mitad de la altura.
2.3.3 Detectores de HPLC
En los detectores UV/visible, el fabricante suele preestablecer las longitudes de onda en
254 nm y 360 nm, pero se puede utilizar la absorcin en esas longitudes de onda para
comprobar el deterioro de la lmpara UV. Cuando se utilicen detectores de longitud de
onda variable, se comprobar que el cambio de lmparas de deuterio a lmparas de
tungsteno (habitualmente a unos 320 nm) se realiza sin problemas.
Los detectores del ndice de refraccin pueden comprobarse con una disolucin de una
sustancia adecuada, como por ejemplo un 0,1 por ciento de glucosa para el anlisis de
azcares.
2.4 Sacarmetros v polarmetros
La prctica ms comn para calibrar el instrumental empleado en la determinacin del
contenido de azcar (por el mtodo EWERS, etc.) es utilizar una disolucin patrn de
azcar. Sin embargo, por lo general las diferencias en el clima, la temperatura y el tiempo
que tarda la disolucin en alcanzar el equilibrio hacen que varen los resultados de un
laboratorio a otro. Un mtodo seguro consiste en utilizar un tubo de actividad ptica que
ha sido calibrado por un organismo competente acreditado y diseado para que tenga una
rotacin especfica de azcar utilizando una determinada longitud de onda de una luz que
suele ser de sodio (4900A). Si la sacarosa es el nico azcar presente, una disolucin del
26 por ciento en un tubo de 200 mm de un sacarmetro a 20 C registrar un 100 por
ciento.
Los polarmetros pueden comprobarse utilizando las concentraciones de azcares en
agua que se indican a continuacin:
Azcar

10%

20%

Sacarosa

+66,5

+66,5

Glucosa

+52,7

+53,1

Fructosa

-90,7

-93,3

Lactosa

+52,5

+52,5

Maltosa

+138,3

+138,1

Las rotaciones angulares especficas susodichas se observan a una temperatura de 20 C


con una luz de sodio de lnea "D" y un decmetro de espesor. Todas las disoluciones se
prepararn aadiendo unas pocas gotas de amonaco 0,880 para eliminar los efectos de
la mutarrotacin y equilibrar la actividad ptica.
2.5 Espectrmetros de absorcin atmica
El rendimiento de un espectrmetro que utilice absorcin atmica de llama podr
comprobarse efectuando las operaciones siguientes.
El espectrmetro para el anlisis de una disolucin acuosa de cobre satisfar las
condiciones que se indican a continuacin:
Longitud de onda

324,8 nm

Rendija

0,7 nm

Corriente de la lmpara

15 mA (vase la especificacin del fabricante)

Llama

oxidante aire/acetileno (azul dbil)

Configuracin del quemador

distribuidor de flujo instalado

En estas condiciones, se aprovechar al mximo la posicin de la lmpara y del


quemador, as como el nebulizador. Se aspirar agua destilada y se situar a cero el
instrumento. Se aspirar una disolucin acuosa de cobre con una concentracin de 4
mg/1. Se ajustar la posicin del quemador y las condiciones de la llama para obtener la
mxima absorbancia. En casi todos los instrumentos, la absorbancia obtenida ser de 0,2
unidades o mayor.
Para calibrar un espectrmetro de absorcin atmica, lo mejor es utilizar lmparas de
ctodo hueco normalizadas y disoluciones patrn. En el cuadro que se ofrece a
continuacin se indican las longitudes de onda validadas y reconocidas para la
absorbancia de cierto nmero de elementos.
Elemento

Longitud de onda (nm)

Gases

Sensibilidad

Notas

Al

309,3

N-Ac

50,0

As

193,7

A-Ac

45,0

Ba

553,6

N-Ac

20,0

Bi

223,1

A-Ac

20,0

Ca

422,7

A-Ac

4,0

Cd

228,8

A-Ac

1,5

Co

240.7

A-Ac

7,0

Cr

357,9

A-Ac

4,0

Fe

248,3

A-Ac

5,0

Ge

265,1

N-Ac

100,0

Hg

253,7

A-Ac

200,0

766,5

A-Ac

2,0

2,3

Li

670,8

A-Ac

2,0

Mg

285,2

A-Ac

0,3

Mo

313,3

N-Ac

30,0

Na

589,0

A-Ac

0,5

2,3

Ni

232,0

A-Ac

7,0

Pb

283,3

A-Ac

20,0

Sb

217,6

A-Ac

25,0

Se

196,0

A-Ac

30,0

Sn

286,3

N-Ac

150,0

Sr

460,7

N-Ac

5,0

351,5

N-Ac

5500,0

318,4

N-Ac

90,0

255,1

N-Ac

450,0

Zn

213,9

A-Ac

1,0

Notas:

1. Concentracin del elemento (mg/1) en una disolucin acuosa que da unas 0,2 unidades
de absorbancia
2. Se recomienda la adicin de una sal bsica (K, La o Cs como cloruro) para controlar la
ionizacin.
3. El uso de la gota de impacto mejorar la sensibilidad en 2 x aproximadamente.
La utilizacin de las disoluciones de "spectrosol" suministradas por los principales
fabricantes de productos qumicos constituye un mtodo de calibracin relativamente
barato y suficientemente exacto para casi todos los fines del anlisis de alimentos. La
disolucin patrn deber ir acompaada de un certificado de anlisis del fabricante, el
nmero de partida y la fecha de caducidad. Bamett (1,2) ofrece una gua til sobre los
conceptos de espectrmetro de absorcin atmica y calibracin.
3. Referencias
1. Barnett, W. (1985), Spectrochimica Acta 39B(6), 829-836.
2. Barnett, W. (1985), Spectrochimica Acta 40B(10-12), 1689-1703.