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Directora de la Asociacin: Liliana RojasSantos.

Director del Dep. de Educacin y


Extensin: Mauricio Vargas-Madrid.
Editor General VVS: Nstor Varela-Arias.
Comit editorial: Carolina Gutirrez, Natalia
Zuluaga, Lorena Lpez, Mauricio Vargas, Liliana
Rojas y Nstor Varela-Arias.

Internet: www.veterinariosvs.org y
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Veterinarios de Vida Silvestre (V.V.S.). N.I.T.:
830.142.128-4. Un organismo no gubernamental,
de carcter gremial creado con el objeto de
fomentar el conocimiento sobre la fauna silvestre,
su manejo y conservacin.
Las Memorias de la Conferencia Interna en
Medicina y Aprovechamiento de Fauna Silvestre,
Extica y no Convencional tienen por objeto
difundir informacin tcnico cientfica sobre
aspectos relacionados a la salud y conservacin
de los animales silvestres y sus poblaciones, as
como presentar tpicos de inters sobre medicina
y manejo de especies no convencionales. Sus
contenidos principales son producto de las
Conferencias del mismo nombre celebradas por la
Asociacin de Veterinarios de Vida Silvestre
(VVS).
Salvo que se indique situacin distinta, los
autores de los textos y presentaciones contenidas
en esta publicacin son responsables de las
opiniones, sugerencias e imgenes aqu
plasmadas.

MEMORIAS DE LA
CONFERENCIA
INTERNA EN MEDICINA
Y APROVECHAMIENTO
DE FAUNA SILVESTRE,
EXTICA Y NO
CONVENCIONAL
ISSN 2011 9348
Ao 2013, volumen 9: nmero 1

Bogot, Agosto 29 de 2013

La XII Conferencia Interna en


Medicina y Aprovechamiento de
Fauna Silvestre, Extica y no
Convencional (XII CIMA) realizada
los das 23 y 24 de agosto en la
Ciudad de Manizales (Caldas,
Colombia), convoc diferentes
instituciones y profesionales que
trabajan en conservacin de la
fauna silvestre, entidades que
desarrollan sus actividades en
diagnstico veterinario, as como
estudiantes y profesionales de
reas relacionadas. Tratar esta
temtica en la dcimo segunda
CIMA se consider importante
para Colombia, por cuanto
constituy un espacio para brindar
una actualizacin sobre los
tpicos del laboratorio clnico
veterinario, aportando informacin
til para el control de las
enfermedades, brindar conocimientos actualizados para la
caracterizacin y manejo de la
fauna en cautiverio y de esta

manera, mejorar los procedimiento relacionados con la colecta, conservacin


y envo de muestras al laboratorio clnico veterinario.
Considerando la relevancia de este tema en las ciencias de la salud animal,
para este 2013 las Memorias de la CIMA tendrn como temtica principal el
laboratorio clnico veterinario en fauna silvestre y mascotas no
convencionales, facilitando a los lectores revisiones de literatura, resultados
de investigacin, reportes y monogrficos en temas relacionados, as como
tambin tpicos complementarios a las diversas actividades y proyectos de la
Asociacin y sus miembros, brindando un panorama sobre la investigacin,
el desarrollo de tcnicas y procedimientos de los profesionales en el
diagnstico de las enfermedades que afectan a los animales silvestres y no
convencionales.
Aprovechamos este espacio para expresar nuestros agradecimientos a las
personas e instituciones que hicieron posible la XII CIMA: la Universidad de
Caldas y en especial al Dr. Gines Fernando Ramrez, al Consejo Profesional
de Medicina Veterinaria y de Zootecnia de Colombia (COMVEZCOL), al
grupo organizador y de logstica, integrado por Carolina Gutirrez, Natalia
Zuluaga, Liliana Rojas, Juanita Garca, Jhon Wilton Gmez Aguirre, Carolina
Castellanos Quintero y Emmanuel Snchez Lpez. Reconocemos tambin el
apoyo brindado por nuestros auspiciantes (en orden alfabtico): Benidorm
Hotel Manizales, Biovet, Cesdivet, Zoodiagnostic, Zoolab y el Zoolgico
Matecaa -SMP-.
Sincramente,

ALBA LORENA LPEZ-RUZ


MVZ, Esp. Lab. Clnico Vet.
Subdirectora General VVS
Miembro VVS

NSTOR VARELA A.
MV, Esp. Epid.
Editor General VVS
Miembro VVS, AAZV

MEM. CONF. INTERNA MED. APROVECH. FAUNA SILV. EXT. CONV. 2013, 9: 1

CHLAMYDOPHILA PSITTACI EN COLOMBIA,


PERSPECTIVAS
Monsalve-Buritic S*
* MVZ, Esp, MSc. Docente investigador, Programa MV. Corporacin Universitaria
Lasallista. Correo e: samonsalve@lasallistadocentes.edu.co

Resumen
El trfico ilegal de todas las especies de fauna silvestre Colombiana y en especial de
aquellas catalogadas como objeto de conservacin es considerado como una de las
principales causas de disminucin de las poblaciones naturales y uno de los
mercados que ms ingreso tiene, producto de compra y venta de especies vedadas.
El negocio de suministrar al mercado estas mascotas, tanto a nivel nacional como
internacional, influye en mayor proporcin en la disminucin poblacional. Aves
silvestre cautivas pueden representar un riesgo para las poblaciones humanas
debido a que pueden ser reservorios de Chlamydophila psittaci. Cuando se da la
enfermedad de forma subclnica en esta clase taxonmica, es factible la
diseminacin con riesgo potencial de transmisin zoontica. Esta revisin intenta
acercarse al conocimiento de la ornitosis transmitida por aves silvestres, su impacto
en la poblacin humana, y las perspectivas para el mdico de la conservacin en
Colombia.
Palabras clave: Chlamydophila psittaci, aves, zoontico, ornitosis, psitacosis, trafico
de fauna.

Abstract
The illegal traffic of Colombian wild species and in particular the ones cataloged as
subject of conservation, is one of the main causes for decline of natural population of
this species and constitute one of the more profitable markets as a result of
permanent trading activities. The business of supplying these animals to the market,
not only locally but internationally is a major factor in the population depletion
process. Wild birds kept in captivity could represent a high risk for human beings
because they are a potential source of Chlamydophila psittaci. When the disease is
detected its subclinical form in this taxonomical class, it is feasible to spread the
disease by through zoonotic transmission. The aim of this is provide and updated
review of the ornithosis transmitted by wild birds its impact in human populations and
prospects for conservation medicine vets in Colombia.
Key Words: Chlamydophila psittaci, birds, zoonotic, ornithosis, psittacosis, wildlife
traffic.

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MONSALVE-BURITIC S

Introduccin
Las aves silvestres que permanecen cautivas, pueden representar un riesgo
para las poblaciones humanas debido a que muchas especies pueden ser
reservorios de Chlamydophila psittaci, una bacteria intracelular gram negativa
y que es el agente causal de la ornitosis o psitacosis la cual puede tener
transmisin zoontica (1). Chlamydophila psittaci es normalmente aislada en
aves. El contacto entre fauna silvestre y poblaciones humanas por cacera,
consumo o como mascotas podra incrementar el riesgo de la transmisin de
la zoonosis por Chlamydophila psittaci. Igualmente la transmisin de aves
silvestres por la tenencia ilegal de psitacidos en fincas puede conllevar a
disminucin en la produccin y aumento de la mortalidad de aves de corral
(2). Las personas que frecuentemente entran en contacto con aves silvestres
tienen una mayor predisposicin a contraer la infeccin. Tambin se han
reportado la aparicin de infecciones bacterianas secundarias luego de
contraer Chlamydophila psittaci (1-6). Las aves infectadas liberan el agente
infeccioso a travs de las heces, orina, exudados respiratorios y oculares,
producindose la dispersin del mismo a travs de las corrientes de aire. La
ingestin de la bacteria conlleva a la infeccin de las clulas epiteliales.
Pavos, patos, y varios tipos de aves domsticas tambin pueden ser
afectados por diferentes serovariedades de Chlamydophila psittaci (7).
Chlamydophila psittaci es un patgeno que se encuentra actualmente
subestimado en Colombia. En Estados Unidos por ejemplo, la bacteria est
catalogada como un agente bioterrorista, la cual ha sido clasificada de esta
manera por su alta capacidad de transmisin, dispersin y virulencia.
Igualmente han sido determinadas altas tasas de morbilidad-mortalidad
humana cuando no se aplican los tratamientos antibiticos apropiados, y por
la incapacidad de crear inmunidad permanente ante la presencia del
patgeno (8). En Colombia, a pesar de la legislacin existente y el control
que ejercen las autoridades ambientales, el trfico de fauna sigue siendo un
problema de gran magnitud, sin embargo, por su naturaleza ilegal no se sabe
su verdadero alcance, su impacto sobre las poblaciones animales y las
consideraciones zoonticas y de salud pblica que se puedan generar de
esta situacin. En muchas ocasiones el estado mdico, gentico o
comportamental impide las reintroducciones o liberaciones inmediatas de
fauna silvestre, por lo tanto, como nica opcin para el bienestar animal, es
su permanencia temporal en centros de valoracin o ser albergados en
instituciones zoolgicas de forma definitiva (9). Las aves del orden
psitaciforme, principalmente los ejemplares que hacen parte de las especies
de loras (Amazona spp), guacamayas (Ara spp), pericos (Brotogeris
jugularis), cotorras (Aratinga pertinax) y cascabelitos (Forpus conspicillatus)
corresponden al mayor porcentaje de animales que hacen parte del proceso
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del trfico de fauna silvestre para uso como mascota en hogares de


particulares (10). Los ingresos de estos animales por decomisos y entregas
voluntarias a la Corporacin de los Valles del Sin y San Jorge (CVS) son
altos, los ejemplares del orden psitaciforme correspondieron al 57 % (n =
397) de los ingresos totales en el ao 2009 (11).

Psitacosis y ornitosis
La psitacosis es una enfermedad infecciosa primaria de aves y mamferos
producida por C. psittaci. Casi todas las aves son susceptibles (2). Cuando
estn infectadas pueden no presentar sntomas o manifestaciones clnicas de
enfermedad dependiente del estado inmunolgico en que se encuentre el
ave seropositiva. La sintomatologa cursa con un cuadro de inapetencia,
retraso en el crecimiento o plumas erizadas. En los mamferos la enfermedad
puede manifestarse por abortos o esterilidad (12, 13). En todo caso, con
presencia de sntomas o sin ellos, los animales pueden diseminar la infeccin
durante largo tiempo. El hombre se infecta por inhalacin de fomites
contaminados a partir de secreciones, excretas o tejidos provenientes de
animales. No se precisa contacto prolongado para que ocurra el contagio
(14).
La enfermedad humana se denomina ornitosis, y esta se encuentra
particularmente entre los trabajadores de plantas industriales de
procesamiento de aves, en los que se considera enfermedad profesional, y
entre los que poseen aves como loros, palomas, patos, pollos, pavos, etc.
(14). La incidencia anual declarada en Estados Unidos se cifra en unos
centenares, pero se cree que son muchos ms los casos no comunicados.
En este pas esta reportado en el sumario de enfermedades notificables el
hallazgo de 923 casos de ornitosis como resultado de la exposicin con aves
silvestres como mascotas (12).
Por tanto, se ha de considerar la posible transmisin del agente infeccioso en
aves en confinamiento ya que la existencia de una sola ave infectada por
esta bacteria es suficiente para que todas las dems se encuentren
expuestas al agente infeccioso, aunque esto no implique que desarrollen la
infeccin.

Psitacosis aviar
Existe una gran cantidad de especies afectadas por Chlamydophila psittaci
con diferentes tipos y niveles de virulencia. La expresin de la enfermedad
dependiente de los tiempos de incubacin, signos clnicos y tiempo de
recuperacin (15).

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MONSALVE-BURITIC S

Los signos clnicos aparentes de infeccin con Chlamydophila psittaci


incluyen neumoenteritis con signos respiratorios como descarga nasal
mucopurulenta, estertores, adems de diarrea, poliuria y depresin. Las
deposiciones pueden ser de color amarillento, sugiriendo altas
concentraciones de pigmentos biliares (15).
La presencia de Chlamydophila psittaci es ms frecuente en aves del gnero
Amazona y Ara. (2). A pesar de ser la Chlamydophila ms comnmente
encontrada en psitcidos, estudios han demostrado que el 50% de las
palomas en gran Bretaa tienen anticuerpos de Chlamydophila psittaci, En
Japn el 30% de las palomas muestreadas mostraron seropositividad (2).
En psitcidos hay un sinnmero de sntomas causados por la enfermedad,
los cuales comprenden conjuntivitis y queratoconjuntivitis, presencia de
uratos de color amarillento y sinusitis (16). En columbiformes la enfermedad
puede estar acompaada de sintomatologa clnica cuando la infeccin se
encuentra presente. Los signos clnicos en su mayora son de tipo
respiratorio y en general disminuye la posibilidad de un vuelo efectivo. En
palomas con infecciones crnicas puede haber presencia de cojeras,
opisttonos, tremor y convulsiones (16). La presencia del patgeno en aves
de ornato como canarios y finches es baja, aunque se reporta la presencia de
enfermedad respiratoria y conjuntivitis (15). En pavos se observa plumaje en
mal estado, depresin, anorexia, caquexia, diarrea y uratos de color
amarillento. Los signos clnicos incluyen descarga nasal y ocular, tosido y
disnea (17). En patos los signos clnicos pueden incluir tremores,
conjuntivitis, descarga nasal purulenta, depresin, recumbencia y mortalidad
(18). En patos y gansos se han reportado disturbios en el equilibrio (17). Las
aves de corral como pollos de engorde o ponedoras, son relativamente
resistentes a las infecciones por el patgeno y se han encontrado pocos
reportes de infecciones en estas especies. Ha sido reportada la enfermedad
ms frecuentemente en pollos juveniles (17). La sintomatologa clnica en
aves de corral incluye bajo peso, ceguera y moderado incremento en la tasa
de mortalidad.

Lesiones
La severidad de las lesiones encontradas en aves afectadas por el patgeno
depende de un nmero amplio de factores como la virulencia de la cepa, la
susceptibilidad del hospedador, la ruta de exposicin y la presencia de otras
enfermedades concurrentes (2). Las necropsias y datos histopatolgicos
causados por Chlamydophila psittaci no difieren en sus caractersticas
diferenciales con otras enfermedades sistmicas. Mnimos cambios
histopatolgicos pueden ocurrir luego de la mortalidad causada por
Chlamydophila psittaci. El ausentismo de lesiones histopatolgicas depende
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CHLAMYDOPHILA PSITTACI EN COLOMBIA, PERSPECTIVAS

de la virulencia de la cepa, la duracin de la enfermedad, el hospedador


susceptible y la ruta de infeccin. La concurrencia de la patologa con otros
agentes infecciosos es comn (19). El hgado puede mostrar alteraciones en
la arquitectura asociada con histiocitosis (Hiperplasia retculo-endotelial). La
hiperplasia linfoidea y plasmocitosis pueden estar presentes en reas de
necrosis. En el hgado es comn la heterofilia periportal e infiltrados
mononucleares (Tambin en sacos areos, especialmente macrfagos y
heterfilos). En infecciones agudas es frecuente el hallazgo de necrosis
multifocal coagulativa. La hemosiderosis puede estar presente. La
miocarditis difusa ocasionalmente se observa conjuntamente con focos
necrticos. En el tracto digestivo inferior se puede presentar enteritis
linfoctica. Necrosis aguda e infiltrados pueden estar presentes en riones.
Lesiones a nivel del sistema nervioso central generalmente son raras (19,
20). La esplenomegalia frecuentemente es observada en chequeos
macroscpicos. El bazo es generalmente friable en su consistencia con focos
blanquecinos necrticos y con hemorragias petequilaes en su parnquima. El
hgado generalmente se presenta friable, aumentado de tamao, de
coloraciones amarillenta o verde, con pequeos focos necrticos en la
superficie en el tejido capsular o en el parnquima. Se puede presentar
aerosaculitis con exudado fibrinopurulento. Puede haber congestin
pulmonar, en tracto digestivo, especialmente en la superficie de la serosa (7,
19, 20).

Patognesis
En pavos la principal ruta de transmisin es la contaminacin por contacto de
fmites, de partculas de plumas y de materia fecal. La ingesta de materia
fecal puede ser causante de la transmisin de la enfermedad en otras aves
(2). Raramente la presencia de ectoparsitos hematfagos tales como piojos
y moscas se tienen en cuenta como mecanismo transmisor del patgeno.
Luego de la inoculacin por aerosoles, se ha demostrado que Chlamydophila
psittaci se presenta luego de 4 horas multiplicndose en sangre, hgado y
riones. Luego a las 72 horas se encuentra en la mdula sea, testculos,
ovarios y en la musculatura. Gran cantidad de bacterias de este patgeno se
encuentran en orificios naturales como cloaca y orificio nasal externo, por lo
que resulta til tomar muestras de estas zonas anatmicas para el
diagnstico de laboratorio (2).

Diagnstico
No es fcil diagnosticar Chlamydophila psittaci en aves. El diagnstico
presuntivo se da inicialmente haciendo una investigacin detallada de la
historia clnica, exmenes clnicos, radiolgicos y hematolgicos, a pesar que
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MONSALVE-BURITIC S

la confirmacin solo se puede dar por medio del aislamiento del


microorganismo y la identificacin del mismo (19, 20). Como las Chlamydias
son intermitentes, la ausencia de la bacteria luego de un cultivo del patgeno
en heces o en cavidad orofarngea, no significa que el animal muestreado no
porte el agente. Algunas aves despus de haber sido tratadas con terapia
inhibitoria antimicrobiana y en estados iniciales de la enfermedad pueden
ofrecer resultados falsos negativos. Despus de realizar cultivos (Vero,
McCoy o Buffalo Green Monkey) se pueden identificar por medio de
microscopa electrnica, tinte citolgico, test de inmunoflorescencia, ELISA,
test peroxidasa antiperoxidasa, inmunoperoxidasas, PCR y DNA-Spot
hibridacin. Como sea, el aislamiento invitro siempre debe ir considerado
conjuntamente con un mtodo de identificacin antignica.

Seroprevalencia global y regional


Algunos estudios en psittacidos muestran prevalencias variables en vida
silvestre en diferentes especies (5). Existen diversas opiniones sobre las
investigaciones en condiciones in situ de la seroprevalencia del patgeno. Un
estudio realizado en la zona del Pantanal en Brasil determin la
seroprevalencia de loras del gnero Amazona spp en un 6,3 %, y en la
especie guacamaya azul (Anodorhynchus hyacinthinus) en un 37 % (21). Por
otra parte, en estudios en condiciones ex situ como en Brasil, se determin
la seroprevalencia en ejemplares de loras del gnero Amazona spp de tres
colecciones de zoocriaderos y se encontr seropositividad en 16 - 56% de
los ejemplares muestreados (22). En contraste, en Bolivia en la zona del
Gran Chaco, no se hallaron anticuerpos contra clamidia en loras de frente
azul (Amazona aestiva) (23). En Per, en el Parque Nacional del Man (24)
tampoco se encontr seropositividad para Chlamydophila psittaci en pericos
y cotorras (Aratinga weddelli y Brotogeris sanctithomae), es probable que la
ausencia de anticuerpos se debiera posiblemente a las condiciones en vida
silvestre de donde se capturaron los ejemplares estudiados y posiblemente a
la altitud y variabilidad del clima en esas regiones durante el ao.
La seroprevalencia en aves que permanecen en cautiverio tiende a ser
mayor que en ejemplares silvestres. En un estudio realizado en Australia en
muestras conjuntivales, cloacales y de orificios nasales tomadas en cacatas
silvestres resultaron negativos por PCR para la deteccin de Chlamydophila
psittaci (25). En otro estudio realizado en Eslovenia con la misma especie en
condiciones ex situ se determin una seroprevalencia del 15.2% (26). Las
condiciones de estrs por confinamiento que ocasionan una liberacin de
catecolaminas endgenas de forma crnica, conlleva a que los ejemplares
aviares se inmunodepriman y podra esto aumentar la susceptibilidad a la
infeccin (27). A pesar de esto la mortalidad causada por Chlamydophila
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psittaci en vida silvestre ha sido poco reportada. Solo en algunos estudios


donde se identificaron brotes mortales en algunas especies de patos y de
gaviotas in situ (28). En Colombia fue realizado un estudio en donde se
determin que de 138 sueros de aves del gnero Amazona spp que fueron
estudiados; 118 (85%) fueron positivos a la bacteria, mientras que en
humanos 30 de 39 sueros (78%) reaccionaron al antgeno, ofreciendo
resultados posiblemente positivos debido a que no se pudo descartar que en
la investigacin realizada en veterinarios y trabajadores de centros de
conservacin exsitu, no existiese reactividad cruzada con Chlamydophila
pneumoniae o Chlamydia trachomatis, ya que los epitopes MOMP podran
haber sido compartidos con otras especies de Chlamydiaceae. No obstante,
de esta reaccin cruzada, el estudio fue contundente con respecto a la
presencia de Chlamydophila psittaci ya que las aves no se infectan con
especies humanas como C. pneumoniae y C. trachomatis (29).
Tabla 1. Seroprevalencia de Chlamydophila psittaci en ejemplares aviares.
(Tomado de Monsalve S, Miranda J y Mattar S. 2011) (29).
Grupo afectado
Guacamayas
azules
Cacatas
Psittcidos
Gaviotas
Pericos
australianos
Psittcidos
Loras del gnero
Amazona

Condiciones (pas)
In situ (Brasil)
In situ
In situ
In situ
In situ

(Australia)
(Brasil)
(Islas Faroe)
(Eslovenia)

Ex situ (Brasil)
Ex situ (Colombia)

Seroprevalencia
en loros (%)
37

Referencia
Raso, 2002

0
6,3-37,8
10
15,2

McElnea, 1999
Raso, 2006
Hermann, 2006
Dovc, 2007

16-56
85

Raso, 2002
Monsalve, 2011

Factor ambiental como determinante de la infeccin


En el estudio realizado en centros de conservacin ex situ (29), se determin
una relacin entre la alta seropositividad encontrada con respecto a
instituciones ubicadas en zonas con mayor altitud sobre el nivel del mar. Sin
embargo, dicho estudio no pudo controlar la variable geogrfica sobre el
origen de las aves ya que existi desconocimiento sobre la procedencia de
los loros previamente al ingreso a los centros de conservacin ex situ, por lo
tanto no se pudo considerar cuando el patgeno pudo haber sido adquirido; o
antes o despus de su inclusin a la coleccin de animales de cada
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MONSALVE-BURITIC S

institucin. Las diferentes especies del gnero Amazona spp en condiciones


in situ hacen parte de pisos trmicos bajos del trpico, y posiblemente se
pueden afectar inmunolgicamente por el estrs medioambiental cuando son
extrados de vida silvestre (10). Los factores que pudieron haber sido
determinantes tanto en la presencia de seropositividad y de enfermedad
subclnica causado por el patgeno son variables. Estos factores tienen
como caractersticas el compromiso homeosttico, inmunodepresin o
condiciones causales del estrs por confinamiento.

Perspectivas
Para la formulacin de planes de rehabilitacin y liberacin de especies
aviares amenazadas, para el mantenimiento definitivo en condiciones exsitu
o para el manejo sostenible de los especmenes con fines de zoocra, se
deben estandarizar las correctas prcticas de manejo mdico, con el fin de
prevenir la transmisin a humanos y favorecer la reproduccin del animal.
Estos son aspectos cruciales en la conservacin de especies para que
existan datos reales en futuros estudios de investigacin, conservacin y
repoblacin. Los centros de conservacin ex situ que mantengan ejemplares
del gnero Amazona spp en zonas altas sobre el nivel del mar, deberan
replantear el mantenimiento de dichas aves por las condiciones adversas
medioambientales que podran ser determinantes en los indicadores de
estrs, lo que en consecuencia conducira a un posible brote de la
enfermedad y en la transmisin zoontica de la misma. Por otra parte, el
trfico de fauna silvestre de estas especies puede desencadenar en serios
problemas de salud pblica. Los ejemplares del gnero Amazona no
deberan ser considerados como mascotas hasta no haberse realizado
nuevos y concluyentes estudios con respecto a la posible transmisin de
enfermedades que dichos especmenes puedan transmitir. Igualmente se
hace necesario profundizar en la formulacin de protocolos de manejo en
cautiverio de la especie, tanto mdico como nutricional y biolgico (29).
Las condiciones desfavorables de higiene, hacinamiento, altitud sobre el nivel
del mar, temperatura y estrs nutricional, podran aumentar la susceptibilidad
en los animales seropositivos a enfermarse. La psitacosis humana podra
ser una importante causa de riesgo ocupacional en aquellas personas que se
encuentren en contacto con aves. Los trabajadores deberan ser informados
de los riesgos de la enfermedad, su mecanismo de transmisin y del uso de
equipos de proteccin adecuados (30).

12 Asociacin de Veterinarios de Vida Silvestre (VVS) ISSN 2011 - 9348

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Referencias
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14 Asociacin de Veterinarios de Vida Silvestre (VVS) ISSN 2011 - 9348

MEM. CONF. INTERNA MED. APROVECH. FAUNA SILV. EXT. CONV. 2013, 9: 1

SINPSIS DE LA EVALUACIN DE UN MTODO DE


EXTRACCIN DE SEMEN Y MORFOMETRA
ESPERMTICA DE LAPA CUNICULUS PACA EN UN
NCLEO DE REUBICACIN DE CORMACARENA
Cuan-Barrera J1, Gmez-Guerrero J1, Parra-Sandoval C2, Murillo-Pacheco R3 y
Fernndez-Manrique J4
1. Estudiante MVZ, Lnea de Profundizacin en Medicina de Especies Silvestres,
Escuela de ciencias animales, Facultad de Ciencias Agropecuarias y Recursos
naturales, Universidad de los Llanos; 2. MVZ, Esp., Profesional especializado del
Grupo Bioticos. Cormacarena; 3. MVZ, Esp. MSc, Docente Lnea de Profundizacin I
Medicina de Especies Silvestres de la Orinoqua, Programa de MVZ, Escuela de
Ciencias Animales, Facultad de Ciencias Agropecuarias y Recursos Naturales,
Universidad de los Llanos; 4. MV, Esp. MSc, Docente Lnea de Profundizacin II y III
Medicina de Especies Silvestres de la Orinoqua, Programa de MVZ, Escuela de
Ciencias Animales, Facultad de Ciencias Agropecuarias y Recursos Naturales,
Universidad de los Llanos.

La lapa (Cuniculus paca) es un roedor utilizado como fuente de protena en la


Orinoquia. La Corporacin Autnoma Regional de Macarena
(CORMACARENA) viene promocionando zoocriaderos no comerciales con el
propsito de disminuir la cacera y prevenir la extincin. Teniendo en cuenta
el decreto 309 del 2000 del Ministerio de Ambiente sobre investigacin con
diversidad biolgica y la Ley 84 de 1989 Estatuto sobre la proteccin de los
animales en Colombia, el objetivo de este trabajo fue determinar la
efectividad del mtodo de obtencin de semen directamente de la cola del
epiddimo. Un macho adulto de 8 Kg de peso, proveniente del ncleo de
reubicacin El Turpial, vereda Brisas del Ocoa, municipio de Villavicencio,
animal con historia de agresividad con sus congneres y cuidadores, se le
aplic protocolo anestsico, atropina (0,044 mg/kg) y Zoletil 50 (5 mg/kg), y
se realiz orquiectomia. El tratamiento postquirrgico incluyo Meloxican 0.2
mg/kg y Cefalotina 20mg/kg; Los testculos fueron depositados en caja de
petri y refrigerados para su conservacin, en el Laboratorio de Reproduccin
de UNILLANOS se obtuvo el semen por aspiracin de la cola del epiddimo
con jeringa de 1mL y aguja de 26G. Se montaron extendidos coloreados con
Eosina - Nigrosina para determinar espermatozoides vivos, muertos.
Igualmente se tomaron muestras para dilucin con 200L de NaCl al 0.9%
analizndose la morfometra del espermatozoide: longitud, anchura y rea de
la cabeza, longitud de la cola y longitud total. La longitud de la cabeza fue
Pgina 15

CUAN J, GMEZ J, PARRA C, MURILLO R Y FERNNDEZ J

5,69 0,18 m, el ancho de la cabeza fue de 3,60 0,14m, el rea de la


cabeza fue de 11,32 0,44 m, la longitud de la cola fue de 24,24 0,40
m y la longitud total fue de 33,53 0,42 m. El mtodo de aspiracin de la
cola del epiddimo permite una obtencin exitosa de semen para analizar su
morfometra.
Palabras clave: Cuniculus paca, orquiectoma, semen epididimal, aspirado.

16 Asociacin de Veterinarios de Vida Silvestre (VVS) ISSN 2011 - 9348

MEM. CONF. INTERNA MED. APROVECH. FAUNA SILV. EXT. CONV. 2013, 9: 1

ASPECTOS GENERALES DE LA EVALUACIN


HEMATOLGICA EN FAUNA SILVESTRE Y NO
CONVENCIONAL
Copete-Sierra M*
* BLC, MSc (c). Analista Clnica Veterinaria Centro Especializado de Diagnstico
Veterinario CESDIVET Ltda. Correo electrnico: mcbact@gmail.com

Resumen
El uso de la evaluacin hematolgica en animales silvestres y no
convencionales es fundamental para la evaluacin general del estado de
salud de estas poblaciones. La estandarizacin de los procedimientos de
laboratorio, el conocimiento y la experiencia del analista en la identificacin
de las diferencias morfolgicas, son fundamentales para obtener resultados
confiables que proporcionan la mayor utilidad clnica. El objetivo de este
documento es recopilar informacin bsica para la realizacin adecuada de
la evaluacin hematolgica en animales silvestres y no convencionales, as
como los aspectos generales para su interpretacin.
Palabras clave: evaluacin hematolgica, diferencias morfolgicas, mamferos,
aves, reptiles.

Introduccin
La Hematologa es la rama de la medicina, tanto humana como veterinaria,
que estudia los elementos formes de la sangre, los precursores en mdula
sea y los analitos qumicos plasmticos relacionados, abarcando un anlisis
estructural, funcional y la determinacin de concentraciones de estos
elementos. Dentro de las pruebas hematolgicas disponibles el hemograma
es la ms solicitada, ya que permite tener una visin global de la
homeostasis del sistema hematopoytico y obtener excelentes indicadores
de varios aspectos del estado de salud de un animal.
La evaluacin hematolgica, hemograma, cuadro hemtico, biometra
hemtica o hemoleucograma, en realidad no se trata de una prueba
individual sino de un conjunto de anlisis cuantitativos y cualitativos, en el
cual la utilidad clnica es directamente proporcional a la calidad del material
obtenido, la calidad analtica y el nmero de parmetros determinados. [10,
16]

Pgina 17

COPETE-SIERRA M

Pese a que en las ltimas dcadas se han estandarizado procedimientos


para desarrollar estas pruebas en especies silvestres y no convencionales,
an se presentan algunas limitaciones para su desarrollo. La primera de ellas
es la variacin morfolgica de las clulas sanguneas que existe en
condiciones normales, entre la gran cantidad de especies a evaluar. Si el
analista encargado no cuenta con los conocimientos y la experiencia
suficiente en el rea, difcilmente podr detectar los cambios celulares
producidos por alteraciones como el estrs, as como los que se hacen
evidentes en los diferentes procesos de enfermedad. En aves y reptiles,
especficamente, se pueden presentar confusiones entre tipos celulares
como linfocitos y trombocitos o entre heterfilos y eosinfilos. [15, 18]
Cuando la hematologa es remitida a laboratorios externos, es imprescindible
verificar la capacidad del analista para trabajar este tipo de animales.
Estas diferencias morfolgicas constituyen un obstculo para la
disponibilidad de recursos tcnicos. Actualmente los avances tecnolgicos
han hecho posible adaptar analizadores automatizados para hematologa
veterinaria similares a los de uso en humanos, capaces de crear resultados
ms precisos tanto desde un punto de vista cualitativo como cuantitativo. Sin
embargo, este tipo de tecnologa es aplicable a animales convencionales y a
muy pocas especies de mamferos no domsticos, ya que sigue siendo
necesaria la revisin manual del extendido para recuentos diferenciales y
observacin de inclusiones y parsitos sanguneos. En el caso de las aves,
reptiles, peces y anfibios es ms complicado, debido a que sus eritrocitos son
clulas nucleadas y esto dificulta el conteo con mtodos automatizados y su
posterior interpretacin. [2]
En cuanto a interpretacin de resultados hematolgicos, si bien existe el
Sistema de Informacin Internacional de Especies (ISIS), los valores de
referencia siguen siendo una limitante, ya que los rangos establecidos en
esta base de datos son muy amplios y no todas las especies estn incluidas.
El presente artculo pretende proporcionar informacin bsica para la
realizacin adecuada de la evaluacin hematolgica en animales silvestres y
no convencionales, haciendo nfasis en los parmetros que hacen parte del
hemograma manual y las caractersticas morfolgicas de las clulas
sanguneas, teniendo en cuenta que constituyen la mayor limitacin que
pueden presentarse en la prctica hematolgica para estas especies.

Recoleccin, almacenamiento y preparacin de muestras


El procedimiento de toma de muestra es el principal factor determinante
durante la fase preanaltica. El proceso de extraccin de sangre puede ser
innecesariamente estresante para un animal, sencillamente por el trato, el
tipo de anestesia o la incomodidad que se asocia a una determinada tcnica.
18 Asociacin de Veterinarios de Vida Silvestre (VVS) ISSN 2011 - 9348

EVALUACIN HEMATOLGICA EN FAUNA SILVESTRE Y NO CONVENCIONAL

[21] Las recomendaciones generales para una correcta extraccin de sangre


son las mismas para todas las especies.
Toda muestra debe acompaarse de una solicitud que indique el anlisis
requerido, la informacin bsica del animal y una corta anamnesis (cuando
se trata de hematologa para diagnstico).

Sitios de puncin
Se debe escoger el sitio de puncin ms adecuado de acuerdo con la
especie y el tamao del animal (tabla 1). Puede usarse el sistema tradicional
con jeringa o el sistema al vaco tipo Vacutainer (figura 1). Se debe tener
en cuenta que el calibre de la aguja debe asegurar una extraccin de sangre
rpida sin colapsar la vena, dentro de la limitacin de evitar hematomas; el
calibre deber ser justo menor que el dimetro de la vena. [21]
Figura 1. Toma de muestra en un puma (Puma concolor) con sistema
tradicional de jeringa, en la vena femoral. Fotografa: Santiago LozadaCardona.

La cardiocentesis no es recomendada como proceso rutinario de extraccin


sangunea en ninguna especie, ya que presenta un riesgo elevado de
muerte para el animal. [7, 8]

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COPETE-SIERRA M

Tabla 1. Sitios de puncin para extraccin de muestras sanguneas en


mamferos, aves y reptiles
Grupo
Mamferos
Aves
Reptiles

Sitios de Puncin Venosa


Safena, popltea, femoral, humeral, baslica, braquial, ceflica,
yugular
Baslica (ulnar, radial o braquial), metatarsiana medial, yugular
Cervical dorsal (supravertebral), coccgea dorsal, caudal,
subcarapacial (subvertebral)*, ulnar (radio-humeral), yugular**

Convenciones: *, Exclusiva en quelonios [8]; **, Minimiza los cambios que se producen con
frecuencia por contaminacin linftica de la sangre durante la extraccin, debido a que en
reptiles los vasos linfticos acompaan a los sanguneos [8, 28]

Recoleccin y almacenamiento
Existen tubos para recoleccin de sangre con fines hematolgicos,
comercialmente disponibles, en diferentes tamaos y presentaciones.
Generalmente se usan los tubos de tapa lila los cuales contienen cido
Etilendiamino Tetractico (EDTA) lquido o liofilizado, compuesto
anticoagulante de eleccin en hematologa; el EDTA es el que mejor
conserva las caractersticas morfolgicas y permite la tincin adecuada de
los leucocitos. [32] Sin embargo, en algunos casos la sangre debe
recolectarse en tubos con heparina, material que se encuentra disponible
comercialmente (tabla 2). [20, 40] Los tubos con heparina se encuentran
disponibles en diferentes tamaos y se identifican con la tapa de color verde.
Los tubos con anticoagulante tambin pueden ser preparados en el
laboratorio.
En reptiles se prefiere la recoleccin con heparina ya que en algunas
especies, sobre todo en quelonios, el EDTA produce hemlisis. Algunas
especies aviares presentan una anticoagulacin incompleta y hemlisis
parcial cuando se mezclan con EDTA. En estos casos tambin se utiliza
heparina como anticoagulante. [7] La relacin anticoagulante/sangre debe
ser la correcta para evitar fenmenos de dilucin y/o distorsin celular por
exceso.
Durante el proceso de extraccin sangunea se debe evitar el exceso de
succin para no provocar hemlisis; es necesario usar la jeringa y la aguja
adecuadas al calibre de la va utilizada. Una vez extrada la sangre, se
mezcla por inversin suavemente. Es ideal realizar el frotis sanguneo
inmediatamente, ya que el contacto prolongado de la sangre con el
anticoagulante induce distorsiones celulares e incluso hemlisis; no se
deben hacer recuentos celulares en sangre con ms de 4 das de
almacenamiento. Si la muestra no se va a procesar durante la primera hora
20 Asociacin de Veterinarios de Vida Silvestre (VVS) ISSN 2011 - 9348

EVALUACIN HEMATOLGICA EN FAUNA SILVESTRE Y NO CONVENCIONAL

posterior a la toma, debe refrigerarse de 2 8C; jams debe congelarse


pues esto causa hemlisis. [40]
Tabla 2. Anticoagulantes de uso frecuente en hematologa de animales
silvestres y no convencionales
Anticoagulante

Mecanismo
de accin

Ventajas

Desventajas

Usos

Heparina (litio,
sodio)

Antitrombnico

Reversible,
no txico

Aves
(cuando la
muestra va
usarse
para
bioqumica)
y reptiles.

cido
Etilendiamino
Tetractico:
Na2EDTA,
K2EDTA y
K3EDTA

Quelante de
calcio

Proporciona
la mejor
preservacin

Alteracin
morfologa
lecucocitaria y
agregacin; fondo
azul en la
coloracin de
frotis; artefactos
en eritrocitos;
costoso.
Irreversible; en
altas
concentraciones
contrae los
eritrocitos.

Mamferos,
aves y
algunos
reptiles.

Parmetros de la evaluacin hematolgica


La composicin del hemograma vara desde unos pocos parmetros como la
hemoglobina, el hematocrito y los recuentos total y diferencial de leucocitos,
obtenidos mediante tcnicas manuales, hasta ms de 30 parmetros
obtenidos determinados por autoanalizadores de hematologa, agrupados
tradicionalmente en el eritrograma, el leucograma y el trombograma. [10, 11]
Adicional a estos tres grupos, en hematologa veterinaria se realiza la
determinacin de protenas plasmticas.
Eritrograma. Comprende el anlisis de todos los parmetros relacionados
con los eritrocitos en circulacin. En los hemogramas simples consta del
recuento eritrocitario, hematocrito, hemoglobina e ndices eritrocitarios. En
los cuadros hemticos ms completos y, necesariamente, automatizados se
incorporan parmetros como el ancho de distribucin eritrocitaria y el
recuento de reticulocitos. [10 ,40] Para el estudio de la morfologa celular y la
deteccin de hemoparsitos, es necesaria la observacin del extendido de
sangre perifrica. El eritrograma brinda informacin para detectar y
caracterizar anemias, as como para evaluar la presencia de agentes
www.veterinariosvs.org Subdireccin Tcnico Cientfica 21

COPETE-SIERRA M

patgenos relacionados de manera directa o indirecta con la cantidad de


clulas y cambios morfolgicos. [19, 46]

Recuento eritrocitario
Determina el nmero total de eritrocitos o hemates que se encuentran en un
volumen de sangre perifrica expresado en clulas por milmetro cbico
(mm3), por microlitro (L) o por litro (L). [10] El sistema de unidades en que
se reporta el resultado puede variar en cada laboratorio, pero la
interpretacin del parmetro sigue siendo la misma y va acorde con los
valores de referencia. Para el recuento pueden usarse mtodos manuales o
automatizados.
El recuento manual consiste en preparar una dilucin de la sangre en
solucin salina en el caso de mamferos, o en solucin de Natt y Herrick para
aves, reptiles, peces y anfibios. [31] Esta dilucin se pone en un
hemacitmetro o cmara de Neubauer para realizar el conteo. [40] Este
mtodo requiere de mucho tiempo y habilidad visual, desventajas para ser
usado de rutina en el laboratorio. Adems, su alto coeficiente de variacin le
resta confiabilidad a los parmetros que a partir de l se calculan. [10]
El conteo automatizado tradicional se basa en el principio de impedancia
elctrica. [4] Los analizadores ms recientes usan centrifugacin asociada a
colorantes y anticuerpos monoclonales, y citometra de flujo por equipos
lser. Estas tecnologas son poco aplicables a muestras de animales
silvestres y no convencionales.
El conteo de eritrocitos es necesario para calcular el volumen corpuscular
medio (VCM) en los hemogramas realizados por mtodos manuales. Este
recuento en sangre perifrica es menor en los reptiles que en los mamferos
y aves. [5]

Hematocrito
Es la relacin del volumen de eritrocitos con el de sangre total, es decir, es el
valor de sangre que se compone realmente de eritrocitos. Se expresa como
un porcentaje o, preferiblemente, una fraccin decimal. El hematocrito se
puede medir directamente por centrifugacin con un micromtodo o, de
forma indirecta como lo hacen los analizadores automatizados, calculando el
producto del volumen corpuscular medio (VCM) multiplicado por el recuento
de eritrocitos. [10, 40]

Hemoglobina
La hemoglobina (Hb), componente principal de los eritrocitos, es una protena
conjugada especializada que sirve de vehculo para el transporte de oxgeno
22 Asociacin de Veterinarios de Vida Silvestre (VVS) ISSN 2011 - 9348

EVALUACIN HEMATOLGICA EN FAUNA SILVESTRE Y NO CONVENCIONAL

y de CO2. [44] La determinacin de hemoglobina, ya sea manual o


automatizada, consiste en medir la cantidad de esta protena por unidad de
volumen expresada en g/dL. Este parmetro es de gran utilidad clnica, ya
que define los conceptos de anemia y policitemia. [10]
El mtodo manual empleado es el de la cianometahemoglobina, compuesto
que se forma al disolver un volumen de sangre en el reactivo o solucin de
Drabkin. Es una tcnica sencilla y su principio de reaccin consiste en la
oxidacin de la hemoglobina a metahemoglobina por parte de ferricianuro
potsico, para formar cianometahemoglobina, compuesto que tiene una
absorcin mxima a una longitud de 540 nm. La sangre debe diluirse en el
reactivo de Drabkin y en el caso de animales con eritrocitos nucleados, la
dilucin debe someterse a centrifugacin para lisar las membranas
eritrocitarias. Los ncleos libres de los eritrocitos lisados deben ser
removidos antes de realizar la lectura de la absorbancia, para evitar una
sobrestimacin de la concentracin de hemoglobina. [42, 43]
El mtodo de la cianometahemoglobina tambin es utilizado de forma ms
refinada por algunos analizadores automatizados. [30] Sin embargo,
teniendo en cuenta la toxicidad del cianuro y su impacto en el medio
ambiente y la salud ocupacional, en analizadores ms recientes se ha
reemplazado la solucin de cianuro por lauril sulfato sdico, una sustancia
atxica. La hemoglobina de la sangre diluida en este lisante es transformada
en lauril sulfato de sodio-metahemoglobina (metahemoglobina sdica de
lauril sulfato). Este compuesto tiene un pico de mxima absorcin a 555 nm,
lectura que realiza el autoanalizador. [23]
Otro de los mtodos automatizados descritos para la determinacin de la
concentracin de hemoglobina se basa en la medicin de la cantidad de luz
lser dispersada, tcnica descrita en 1986 y aplicada en la actualidad en
hematologa automatizada. [30]

ndices eritrocitarios
Las determinaciones del eritrograma descritas hasta ahora, se conocen como
ndices eritrocitarios bsicos o primarios. Aquellos que derivan de estos se
les conoce como parmetros derivados o secundarios. [10, 40] Estos
parmetros son la base para la clasificacin de las anemias y pueden ser
calculados o determinados por analizadores automatizados. A continuacin
se describen los ndices eritrocitarios secundarios que hacen pueden
componer el eritrograma manual y el automatizado:
Volumen corpuscular medio (VCM). Ofrece informacin sobre el tamao
promedio de los eritrocitos, expresado en fentolitros (fL) como unidad de
volumen. A partir del VCM se define el tamao de los eritrocitos como
normocitosis (normales), microcitosis (pequeo) y macrocitosis (grandes),
www.veterinariosvs.org Subdireccin Tcnico Cientfica 23

COPETE-SIERRA M

caracterstica fundamental para la clasificacin de las anemias. [33] Su


clculo manual se obtiene de la relacin del hematocrito y del recuento
eritrocitario, aplicando la siguiente frmula:
VCM (fL) = (hematocrito/recuento de eritrocitos en millones por L) x 10
Se debe tener en cuenta que El VCM calculado no tiene la misma
confiabilidad del obtenido por analizadores automatizados, ya que depende
del recuento de eritrocitos que por mtodos manuales tiene un coeficiente de
variacin muy alto (>5%). [4]
Hemoglobina corpuscular media (HCM). Es el valor promedio de la
hemoglobina contenida en cada eritrocito, expresada en picogramos (pg). Se
calcula a partir del valor de hemoglobina y del recuento de eritrocitos
mediante la siguiente frmula:
HCM (pg) = (Hb en g/dL/recuento de eritrocitos en millones por L) x 10
La HCM es considerada como redundante a otros parmetros y de poca
utilidad si es calculada manualmente. [10, 40]
Concentracin de hemoglobina corpuscular media (CHCM). Provee un ndice
de la cantidad de hemoglobina en relacin al hematocrito, expresada en g/dL.
La frmula para su clculo es la siguiente:
CHCM (g/dL) = (hemoglobina en g/dL/ hematocrito %) x 100
La CHCM define los conceptos de hipocroma, normocroma e hipercroma
(concepto hipottico), necesarios para la clasificacin de las anemias. [10]

Morfologa eritrocitaria
Un perfil hematolgico siempre debe incluir el examen de un frotis sanguneo
para determinar, si existen o no, cambios morfolgicos en los eritrocitos y
dems clulas sanguneas. Esta evaluacin se realiza mediante un extendido
de sangre en lmina teido con coloracin de Wright u otra tipo Romanowsky
como son Wright-Giemsa, May Grnwald-Giemsa o Diff-Quick. [19] La
relevancia de la informacin derivada es proporcional al conocimiento y
experiencia del analista.
24 Asociacin de Veterinarios de Vida Silvestre (VVS) ISSN 2011 - 9348

EVALUACIN HEMATOLGICA EN FAUNA SILVESTRE Y NO CONVENCIONAL

Los eritrocitos normales de todos los vertebrados, a excepcin de los


mamferos diferentes a los Camelidae, son nucleados y ovales sin palidez
central (Figura 2). La variacin en el tamao tambin es evidente; por regla
general, los eritrocitos aviares son de mayor tamao que los de los
mamferos, y los de los reptiles son ms grandes que los de las aves. A
pesar de las diferencias en tamao, la similitud entre los eritrocitos de reptiles
y aves es notoria, corroborando la hiptesis de un ancestro comn. [45] Los
glbulos rojos ms grandes son los de los anfibios. [19]
Figura 2. Eritrocitos normales en diferentes especies. Izq. Mamfero
(Saguinus leucopus): discos bicncavos, con palidez central evidente,
anucleados. Centro. Ave (Ara macao): contorno y ncleo elpticos. Der. Reptil
(Iguana iguana): contorno y ncleo elpticos, ms redondeados que en las
aves. (1000X, coloracin de Wright). Fotografas: Copete-Sierra M.

Alteraciones del color


Policromasia o policromatofilia. Las clulas policromatfilas son eritrocitos
que han sido liberados tempranamente a la circulacin. Generalmente son
ms grandes que los eritrocitos maduros y su coloracin es azul violceo, en
frotis teidos con coloraciones tipo Romanowsky, permitiendo determinar un
grado cualitativo. Bajo la coloracin supravital con azul de metileno, se
observan de un tono azul claro con material reticular punteado o formando
agregados y son llamados reticulocitos, clulas que pueden ser
cuantificadas. Esta tonalidad es el resultado de organelas como ribosomas y
mitocondrias, que permanecen en las clulas inmaduras. La presencia o
ausencia de este tipo de clulas indica una eritropoyesis activa, importante
en la caracterizacin de las anemias. [7, 8, 9, 40]

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COPETE-SIERRA M

La policromasia debe ser interpretada con cautela de acuerdo con la especie


a evaluar. En los frotis sanguneos de pequeos mamferos es normal
encontrar un nmero moderado de eritrocitos policromatfilos, ya que estos
animales responden rpida y drsticamente a la prdida de glbulos rojos
(figura 3). Por el contrario, en el caso de grandes mamferos es raro
encontrar, en condiciones normales, clulas policromatfilas en un extendido.
[19]
Figura 3. Eritrocitos policromatfilos de un tit gris (Saguinus leucopus), que
se diferencian del resto de eritrocitos por su tincin azul-violcea y un tamao
ligeramente mayor. (1000X, coloracin de Wright). Fotografa: Copete-Sierra
M

En aves los eritrocitos policromatfilos son similares a los eritrocitos


maduros, pero aparecen con un citoplasma dbilmente basoflico y un ncleo
redondeado menos condensado (figura 4). Con coloracin supravital se
observan agregados de material reticular rodeando el ncleo. [7]
La respuesta regenerativa eritrocitaria en los reptiles parece ser ms lenta
que la observada en los mamferos. Los eritrocitos policromatfilos en estas
especies, al igual que en las aves, presentan un patrn de cromatina nuclear
menos denso pero su citoplasma es ms basoflico que el de los eritrocitos
maduros y, generalmente, son de menor tamao (figura 5). [8] En los reptiles
con policromatofilia, existe una menor CCMH y un VCM disminuido. [28]
26 Asociacin de Veterinarios de Vida Silvestre (VVS) ISSN 2011 - 9348

EVALUACIN HEMATOLGICA EN FAUNA SILVESTRE Y NO CONVENCIONAL

Figura 4. Eritrocitos policromtofilos de una guacamaya bandera (Ara


macao). Se puede observar las diferencias en la coloracin del citoplasma y
la densidad de la cromatina (1000X, coloracin de Wright). Fotografa:
Copete-Sierra M.

Figura 5. Eritrocitos policromatfilos de una tortuga carey (Eretmochelys


imbricata). Se observa intensa basofilia citoplasmtica y menor condensacin
del ncleo (1000X, coloracin de Wright). Fotografa: Copete-Sierra M.

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COPETE-SIERRA M

Hipocroma. La hipocroma se produce por una disminucin en el contenido


de hemoglobina en los eritrocitos. En la mayora de mamferos, los eritrocitos
hipocrmicos aparecen con una palidez central aumentada (figura 6). [41] En
aves, la hipocroma se evidencia en eritrocitos con una palidez
citoplasmtica, que equivale a un rea mayor al 50% del total. [7]
Figura 6. Eritrocitos hipocrmicos de un mono churuco (Lagothrix lagotricha).
La palidez central de estas clulas es ms notoria que la de los eritrocitos
normocrmicos. En la imagen puede apreciarse un neutrfilo (sup der)
(1000X, coloracin de Wright). Fotografa: Copete-Sierra M.

Alteraciones de tamao
La variacin en el tamao eritrocitario se conoce como anisocitosis. En la
mayora de mamferos esta alteracin puede discriminarse en macrocitosis
(aumento de tamao) y microcitosis (disminucin de tamao).
En aves y reptiles suele describirse de forma general y es normal encontrar
una ligera variacin en el tamao eritrocitario (1+). Un grado mayor de
anisocitosis asociado con policromatofilia es observado en aves con anemia
regenerativa. [7]

Alteraciones de la forma
Poiquilocitosis es el trmino que se emplea para generalizar las variaciones
en la forma de los eritrocitos. Aunque en aves y reptiles se describe de
28 Asociacin de Veterinarios de Vida Silvestre (VVS) ISSN 2011 - 9348

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manera general por cruces, en mamferos este trmino no es posible de


interpretar ya que son varios los cambios descritos en la forma eritrocitaria.
[41]
Algunas de las alteraciones morfolgicas eritrocitarias evidentes en el frotis
sanguneo de algunos mamferos, son reversibles. Generalmente estos
cambios estn asociados a la presencia de variantes de hemoglobina que se
polimerizan tras la manipulacin de las muestras, produciendo un fenmeno
in vitro. La forma de hoz observada en los eritrocitos de venados, antlopes y
pequeos carnvoros, es la alteracin reversible ms notoria. El cambio en
stos animales es el resultado de la polimerizacin de hemoglobinas
variantes de la hemoglobina del adulto, al someter la sangre a oxigenacin.
[19]
El significado de las alteraciones en el color, tamao y forma de los eritrocitos
puede variar entre mamferos, aves y reptiles (Tabla 3).

Inclusiones
Cuerpos de Howell-Jolly. Son remanentes nucleares y se observan como
grnulos densos y de color azul rojizo o violeta, localizados excntricamente
(figura 7). Es un hallazgo habitual en felinos, roedores, pequeos primates y
algunos marsupiales sanos. [19] Una cantidad incrementada de estas
inclusiones se asocia con anemia regenerativa e hipoesplenismo. [41]
Figura 7. Cuerpo de Howell-Jolly en un eritrocito de tit gris (S. leucopus).
(1000X, coloracin de Wright). Fotografa: Copete-Sierra M.

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Tabla 3. Significado de algunos cambios morfolgicos eritrocitarios en


mamferos, aves y reptiles
Observacin

Indicacin

Mamferos

Aves y
reptiles

Hipocroma

Anemia, deficiencia
mineral (hierro)

Significativa

Significativa

Poiquilocitosis

Alteracin metablica,
eritropoyesis
incrementada
Alteracin metablica,
eritropoyesis
incrementada

Significativa

Significativa

Significativa si la
hemoglobina no
tiende a la
polimerizacin
Significativa

Significativa

Anisocitosis

Codocitos o
dianocitos

Enfermedad heptica,
anemia hipocrmica

No descrita

Estomatocitos

Enfermedad heptica,
anemia hemoltica

Significativa

No descrita

Esferocitos

Anemia hemoltica

Significativa

No descrita

Esquistocitos

Significativa

No descrita

Cuerpos de
Howell-Jolly

Coagulacin
intravascular
diseminada (CID),
sepsis
Hipoesplenismo, divisin
nuclear anmala

Significativa en
algunas especies

Probablemente
significativa

Punteado
basfilo

Deficiencia de hierro,
intoxicacin por plomo

Significativa en
adultos

Significativa

Cuerpos de
Heinz

Exposicin a oxidantes,
hemoglobina inestable,
defectos enzimticos,
hipoesplenismo

Significativa en
algunas especies

Significativa
(rara vez
descritos)

Tomado y adaptado de: Hawkey C M y Dennet T B. Atlas de Hematologa Veterinaria


Comparada. Grass Ed. Espaa, p. 15, 1989.

Cuerpos de Heinz. Son el resultado de la desnaturalizacin oxidativa de la


hemoglobina. Aparecen como estructuras pequeas, plidas y excntricas
30 Asociacin de Veterinarios de Vida Silvestre (VVS) ISSN 2011 - 9348

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dentro del eritrocito. Estn asociados a alimentos como la cebolla y el ajo, y a


frmacos como el acetaminofn. La presencia de cuerpos de Heinz reduce la
deformabilidad de la clula roja aumentado su susceptibilidad a hemlisis
intra y extravascular. [41] Estas inclusiones han sido descritas en aves que
han ingerido petrleo. [19]
Punteado basfilo. Aparece como grnulos pequeos, irregulares de tincin
basoflica, en el citoplasma eritrocitario, y est asociado con cambios
degenerativos del rRNA. En mamferos y aves, estos cambios son indicativos
de la respuesta a anemia o, rara vez, indican una intoxicacin. En reptiles es
comn que aparezca punteado basfilo en los reticulocitos (figura 8). [8, 45]
Figura 8. Punteado basfilo en eritrocito de una tortuga carey juvenil (E.
imbricata). La clula punteada puede observarse en el centro de la imagen
(1000X, coloracin de Wright). Fotografa: Copete-Sierra M.

Hemoparsitos. Especies de diferentes gneros se encuentran parasitando


las clulas sanguneas de mamferos, aves y reptiles. Algunos de estos
organismos tienen una baja o nula patogenicidad en especies silvestres y no
convencionales. [15, 41]
En primates, por ejemplo, es comn encontrar microfilarias y trypomastigotes
de Trypanosoma spp, sin enfermedad asociada (figuras 9 y 10). De la Horta
et al (2007), determinaron la prevalencia de microfilarias en primates de
zoolgicos colombianos, la cual fue de 6,39%, encontrando la mayora de
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parsitos en machos adultos de Saguinus leucopus, sin signos de


enfermedad considerando a esta especie como reservorios y/o portadores.
[13] Otros hemoparsitos observados en primates y otros mamferos
pertenecen a los gneros Plasmodium, Babesia, Hepatozoon, Theileria y
Anaplasma. [41]
En frotis sanguneos de aves es comn encontrar parsitos de los gneros
Hemoproteus, Leucocytozoon, y Plasmodium, as como algunas especies de
filarias y tripanosomas. [8, 25]
En reptiles pueden observarse con frecuencia Haemogregarina spp,
Trypanosoma spp y Plasmodium spp. Parsitos del gnero
Haemoproteus tambin han sido reportados en reptiles, describindolas
como especies similares a las que parasitan aves. [27, 42]
Figura 9. Tripomastigote de Trypanosoma sp en un tit gris (S. leucopus).
(1000X, coloracin de Wright). Fotografas: Copete-Sierra M

Eritrocitos inmaduros
En mamferos los precursores eritrocitarios aparecen como clulas
nucleadas. En aves y reptiles se observan con un ncleo de mayor tamao
que el de la clula madura y acmulos irregulares de cromatina. Las
caractersticas detalladas de los eritrocitos inmaduros se recopilan en la
Tabla 4. [19]

32 Asociacin de Veterinarios de Vida Silvestre (VVS) ISSN 2011 - 9348

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Figura 10. Microfilaria compatible con Mansonella (Dipetalonema) perstans


en un tit gris (S. leucopus). Estos hemoparsitos son observados con
frecuencia en pequeos primates (1000X, coloracin de Wright). Fotografas:
Copete-Sierra M.

Tabla 4. Clasificacin y descripcin de los precursores eritroides de


mamferos, aves y reptiles
Precursor
Rubriblasto

Prorubricito

Rubricito

Mamferos

Aves y reptiles

Redondo, de gran tamao,


ncleo grande que opaca la
mayor parte de la clula.
Cromatina nuclear finamente
granulada, nuclolos.
Citoplasma fuertemente
basoflico.
Redondo, pequeo, con
cromatina nuclear granulada,
sin nuclolo. Citoplasma
basoflico.

Redondo o ameboide de gran


tamao. Cromatina nuclear
formando reticulacin laxa con
acmulos. Nucleolo grande.
Citoplasma muy basoflico con
espacios mitocondriales.

Redondo de menor tamao,


con el ncleo ms pequeo
con relacin al citoplasma;
grupos irregulares de
cromatina. Citoplasma gris o
ligeramente eosinoflico.

Redondo, pequeo. Ncleo


relativamente pequeo con
acmulos de cromatina, ausencia
de nuclolo. Citoplasma grisceo
o ligeramente eosinoflico.

Redondo, de menor tamao, con


acmulos de cromatina nuclear.
Nucleolo de menor tamao,
visible. Citoplasma basoflico.

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Precursor

Mamferos

Aves y reptiles

Metarubricito

Citoplasma eosinoflico o algo


basoflico. Ncleo de tamao
reducido, uniformemente
basoflico o pigntico.

Policromatfilo

Redondo, anucleado, con


citoplasma grisceo o
azulado. Suele ser ms
grande que el eritrocito
maduro.

Pequeo, redondeado o
ligeramente oval. Ncleo
redondeado o ligeramente
ovalado y acmulos irregulares de
cromatina. Citoplasma grisceo o
rojo plido.
Citoplasma eosinoflico, ncleo de
mayor tamao que el de la clula
madura, con acmulos irregulares
de cromatina. Con tincin
supravital se observa una banda
perinuclear formada por
abundantes grnulos
citoplasmticos.

Tomado y adaptado de: Hawkey C M y Dennet T B. Atlas de Hematologa Veterinaria Comparada. Grass
Ed. Espaa, p. 10-11, 1989.

El eritrograma en respuesta a anemia


La anemia es el trastorno ms comn de la lnea roja y se define como la
disminucin en la masa eritrocitaria, lo cual resulta en una deficiencia del
transporte de oxgeno. Las tres causas bsicas de anemia en mamferos,
aves y reptiles son: disminucin de la produccin de eritrocitos (anemia
hipoplsica), prdida aguda o crnica (anemia hemorrgica) y destruccin
(anemia hemoltica). [2, 39]
Las anemias han sido clasificadas en tres esquemas generales descritos a
continuacin [39]:
Tamao eritrocitario (normoctica macroctica o microctica) y
concentracin de hemoglobina (normocrmica o hipocrmica).
Respuesta de la mdula sea (regenerativa o no regenerativa
Mecanismo fisiopatolgico (agrupa las anemias de acuerdo al
desorden subyacente)
En mamferos, aves y reptiles, la respuesta a anemias se evala con el
eritrograma.

Mamferos
La policromasia y la hipocroma son alteraciones eritrocitarias evidentes en
frotis teidos por sus patrones de coloracin, de gran utilidad en la
clasificacin y monitoreo de anemias. La policromasia tiende a producirse en
anemias por prdida de sangre y anemias por destruccin eritrocitaria,
34 Asociacin de Veterinarios de Vida Silvestre (VVS) ISSN 2011 - 9348

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mientras que en anemias por hipoplasia eritroide y anemia aplsica, no se


hace evidente. [39, 41]
La hipocroma es un signo indicativo de prdida de hierro. En mamferos
adultos la deficiencia de hierro se debe generalmente a prdidas crnicas de
sangre causadas por neoplasias, alteraciones de la coagulacin y trastornos
del sistema gastrointestinal como lceras y enfermedad inflamatoria
intestinal. En mamferos jvenes esta deficiencia se produce por dieta
inadecuada. [8]
En anemias hemolticas y anemias hemorrgicas por prdida crnica es
caracterstico observar anisocitosis, policromasia, eritrocitos nucleados y
cuerpos de Howell-Jolly, ya que son regenerativas. [9, 14] Las causas de
anemia en mamferos son similares a las descritas en aves y reptiles. [41]

Aves
La anemia es un hallazgo comn en los hemogramas aviares. [38] En las
aves, el desarrollo de la anemia por carencia de eritropoyesis parece ser ms
rpido que en los mamferos debido, probablemente, a la vida media
relativamente corta de sus eritrocitos, que puede variar de 28 a 45 das. [7]
La policromasia puede usarse como un indicador de eritrognesis. En aves
anmicas con una respuesta regenerativa apropiada el grado de
policromasia debe ser superior al 5% del total de eritrocitos (3+ y 4+). La
presencia de clulas en mitosis, eritrocitos inmaduros binucleados y de otros
precursores eritroides en el frotis sanguneo, son evidencias de eritropoyesis
activa (figura 11). [3, 7]

Reptiles
La respuesta regenerativa a anemia en reptiles es ms lenta comparada con
la de aves y mamferos, y se evidencia con aumento de eritrocitos
policromatfilos, presencia de eritrocitos inmaduros, anisocitosis (moderada a
marcada), eritrocitos en mitosis y poiquilocitosis. Sin embargo, algunos de
estos hallazgos pueden presentarse en reptiles posthibernacin o asociados
a estados de ayuno, malnutricin y enfermedad inflamatoria severa. [8, 28]
La hipocroma est asociada a la deficiencia de hierro al igual que en
mamferos. [43]
Leucograma. Consiste en el anlisis cuantitativo y cualitativo de los
parmetros relacionados con los glbulos blancos o leucocitos en sangre
perifrica. Comprende los recuentos total y diferencial lecucocitarios y la
evaluacin morfolgica de las clulas blancas en el frotis de sangre
perifrica. [10]

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Figura 11. Eritroblasto aviar en mitosis (Amazona amaznica). (1000X,


coloracin de Wright). Fotografa: Copete-Sierra M.

Recuento total leucocitario


El recuento total de leucocitos es de gran utilidad clnica ya que define los
conceptos de leucopenia (disminucin) y leucocitosis (aumento), alteraciones
que pueden estar asociadas con una amplia variedad de enfermedades y
estados fisiolgicos. [10] Factores como el estrs y los cambios estacionales,
en algunos reptiles, producen variaciones en el total de leucocitos aumentado
los recuentos totales. [8, 28] Puede realizarse por mtodos automatizados o
tcnicas manuales.
Automatizado. Similar al recuento de eritrocitos en la mayora de los
autoanalizadores de hematologa, aplicando los principios de impedancia
elctrica y la dispersin de luz lser. [10] Este tipo de analizadores son tiles
slo en un pequeo grupo de mamferos y han sido de poca utilidad en aves
y reptiles, ya que por sus eritrocitos y trombocitos nucleados, se presentan
interferencias que dificultan la interpretacin de los resultados obtenidos. [28]
En estudios preliminares se ha indicado la posibilidad de obtener un recuento
total leucocitario confiable en reptiles, empleando analizadores como el Cell
Dyn 3500 (Abbott Diagnostics) asociado al programa informtico para
veterinaria. [38] Sin embargo, incluso empleando analizadores de alta
complejidad, la variacin que existe entre las diferentes especies de reptiles
requiere la modificacin de parmetros y estudios de validacin para cada
especie estudiada. [28]

36 Asociacin de Veterinarios de Vida Silvestre (VVS) ISSN 2011 - 9348

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Manual. Para mamferos la muestra debe diluirse en reactivo de Turk, que es


una solucin de cido actico, compuesto que hemoliza los eritrocitos para
permitir la observacin de los leucocitos. [36] En el caso de animales con
eritrocitos nucleados el solvente utilizado es la solucin de Natt y Herrick, que
permite contar eritrocitos y leucocitos en una misma dilucin. [44, 45]. El
recuento se realiza mediante hemacitmetro o cmara de Neubauer.

Recuento diferencial leucocitario


El recuento diferencial leucocitario corresponde a la concentracin relativa y
absoluta de las subpoblaciones de glbulos blancos, en las que se dividen
las poblaciones principales, en sangre perifrica. [10] Al igual que el
recuento total de leucocitos, puede realizarse de forma automatizada o
manualmente, siendo esta ltima la ms aplicable en animales silvestres y no
convencionales.
Las dos poblaciones principales en las que se dividen los leucocitos son los
granulocitos o polimorfonucleares y los agranulocitos o mononucleares.
Aunque las subpoblaciones leucocitarias presentan diferencias morfolgicas
y en terminologa entre mamferos, aves y reptiles (tabla 5), son similares en
trminos de funcionalidad. [19]
Recuento automatizado. Realizado por autoanalizadores junto al recuento
total. Bajo el principio de impedancia elctrica el citoplasma celular es
reducido sin ser destruido, dando como resultado una nueva clula de un
tamao proporcional al ncleo de la misma para poder ser contadas y
medidas. El recuento diferencial arrojado consta de tres partes: granulocitos,
linfocitos y monocitos. [10]
Mediante luz lser el recuento diferencial de leucocitos se basa en el tamao
de las clulas por impedancia y en las caractersticas de stas de acuerdo
con ciertas propiedades qumicas de las clulas, obteniendo un diferencial de
cinco partes: neutrfilos, eosinfilos, basfilos, linfocitos y monocitos. [34]
Las variaciones en tamao, forma, granulacin y patrones de tincin de los
leucocitos en animales silvestres y no convencionales, dificulta la aplicacin
de este tipo de metodologas, limitndola a unas pocas especies de
mamferos como los felinos y primates.
Recuento manual. La diferenciacin manual de los leucocitos se basa en la
observacin microscpica de las variaciones morfolgicas y las
caractersticas de tincin de los constituyentes celulares, en el frotis
sanguneo. [19] Tradicionalmente se clasifican las subpoblaciones
leucocitarias de un total de 100 200 clulas contadas. Este mtodo depende
de la calidad del extendido de sangre, de la calidad de la coloracin y,
sobretodo, de la experiencia y habilidad del analista.
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Tabla 5. Clasificacin de las subpoblaciones leucocitarias en mamferos,


aves y reptiles
Poblacin
Granulocitos

Mamferos
Neutrfilos
Eosinfilos
Basfilos

Aves
Heterfilos
Eosinfilos
Basfilos

Reptiles
Heterfilos
Eosinfilos
Basfilos

Mononucleares

Monocitos
Linfocitos

Monocitos
Linfocitos

Azurfilos
Monocitos
Linfocitos

Evaluacin morfolgica
Mamferos
Neutrfilos. En todas las especies de mamferos los ncleos de los
neutrfilos son polimrficos y la variacin radica en el grado de lobulacin.
Existen diferencias en tamao, forma y patrones de tincin. Los grnulos de
los neutrfilos pueden ser basoflicos como en primates y algunos
artiodctilos, o fuertemente eosinoflicos como en algunos roedores (figura
12). [12, 41] Los neutrfilos son las clulas de mayor proporcin dentro del
recuento diferencial de mamferos adultos. [14, 19]
En el frotis sanguneo de mamferos pueden observarse neutrfilos
inmaduros. Estas clulas se caracterizan por su gran tamao, basofilia
citoplasmtica y disminucin o ausencia de lobulacin nuclear. [19] Un
incremento en la cantidad de neutrfilos inmaduros se conoce como
desviacin a la izquierda, alteracin en la que generalmente se observan
bandas, pero tambin pueden aparecer metamielocitos y mielocitos (figura
13).
La toxicidad en neutrfilos se refiere a los cambios morfolgicos que se
observan en el citoplasma como resultado de una liberacin temprana de
estas clulas, desde la mdula sea, a la circulacin. [9] Los cambios txicos
evidentes consisten en granulaciones y vacuolizacin citoplasmticas, e
inclusiones azul-grisceas llamadas cuerpos de Dhle.

38 Asociacin de Veterinarios de Vida Silvestre (VVS) ISSN 2011 - 9348

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Figura 12. Izq. Neutrfilo tpico con grnulos basoflicos, de un primate


(Cebus capucinus). Der. Neutrfilo de roedor caracterstico en el cual puede
apreciarse la diferencia en la coloracin de la granulacin de tipo eosinoflico
(Hydrochaeris hydrochaeris). (1000X, coloracin de Wright). Fotografas:
Copete-Sierra M.

Figura 13. Banda neutrfila en un zorro caero (Cerdocyon thous).


Claramente se observa la ausencia de lobulacin nuclear. (1000X, coloracin
de Wright). Fotografa: Copete-Sierra M.

La desviacin a la izquierda y los cambios txicos son indicios de hiperplasia


mieloide asociados a malignidad, infecciones y otras enfermedades
inflamatorias. [19]
Eosinfilos. Generalmente aparecen en un pequeo porcentaje de la
poblacin leucocitaria de los mamferos. Estas clulas contienen grandes
grnulos citoplasmticos eosinoflicos (figura 14) que permiten diferenciarlos
claramente de los neutrfilos, con algunas excepciones. En el caso de
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conejos y roedores los neutrfilos tienen caractersticas pseudoeosinoflicas,


lo cual dificulta la identificacin de sus eosinfilos. [9, 12, 19, 41] La
diferenciacin en estas especies se basa en la forma del ncleo y las
caractersticas de sus grnulos: el ncleo vara de bilobulado a una forma de
U, y los grnulos son de mayor tamao y se tien con menor intensidad
que los de los neutrfilos. [9]
Figura 14. Eosinfilos caractersticos de algunos mamferos. Izq. Lemur
(Varecia variegata). Der. Mono capuchino (Cebus apella). (1000X, coloracin
de Wright). Fotografas: Copete-Sierra M.

Un aumento en la cantidad de eosinfilos (eosinofilia) es considerado una


respuesta inespecfica que podra estar asociada a infestaciones por
helmintos, reacciones de hipersensibilidad e inflamacin de tejidos con un
alto contenido de mastocitos. [41]
Basfilos. Son las clulas de menor proporcin dentro del recuento
diferencial de mamferos. Generalmente tienen el ncleo lobulado y
contienen grnulos citoplasmticos fuertemente basoflicos (figura 15). [9] Al
igual que la eosinofilia, la basofilia est asociada a reacciones de
hipersensibilidad.
Linfocitos. Los linfocitos tpicos son redondos, con ncleo redondo en
posicin central o ligeramente excntrico con un grado variable de
condensacin de cromatina. El citoplasma aparece de color azul claro u
oscuro y, en algunas especies, contiene grnulos azurfilos o basoflicos
(figura 16). Los linfocitos inmaduros pueden distinguirse de las clulas
maduras por su mayor tamao, intensidad en la basofilia del citoplasma y
presencia de nuclolos. En animales juveniles de algunas especies, los
linfocitos pueden ser la subpoblacin predominante dentro del recuento
diferencial leucocitario. [19]

40 Asociacin de Veterinarios de Vida Silvestre (VVS) ISSN 2011 - 9348

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Figura 15. Basofilo de un tit gris (S. leucopus). En esta clula puede
apreciarse la fuerte granulacin basoflica que, en ocasiones, esconde al
ncleo. (1000X, coloracin de Wright). Fotografa: Copete-Sierra M.

Figura 16. Linfocitos de un mono ardilla (Saimiri sciureus). (1000X,


coloracin de Wright). Fotografa: Copete-Sierra M.

En algunos roedores los linfocitos de gran tamao presentan una inclusin


citoplasmtica conocida como cuerpo de Kurloff. Estas estructuras suelen
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observarse en machos, por lo que se sugiere una asociacin con las


hormonas sexuales. [41]
Los linfocitos reactivos pueden aparecer como clulas con un ncleo menos
denso mayor cantidad de citoplasma, que los linfocitos maduros. La
linfocitosis y presencia de linfocitos reactivos, sugiere estimulacin antignica
por infeccin crnica. Un aumento marcado de los linfocitos en mamferos as
como la aparicin de linfocitos inmaduros (linfoblastos) en el frotis sanguneo,
generalmente es asociado con un trastorno linfoproliferativo. [19, 41]
Monocitos. Usualmente son las clulas ms grandes entre las poblaciones
leucocitarias. Su ncleo vara de redondo u oval a lobulado. El citoplasma es
abundante, se tie de color azul grisceo y puede contener vacuolas y
grnulos azurfilos (figura 17). La monocitosis en mamferos ocurre en
inflamaciones agudas y crnicas como respuesta a un incremento en la
demanda. [9]
Figura 17. Monocitos en tit gris (S. leucopus). Izq. Ncleo caracterstico
lobulado. Der. Clula con vacuolas citoplasmticas. (1000X, coloracin de
Wright). Fotografas: Copete-Sierra M.

Aves
Heterfilos. Constituyen la subpoblacin ms abundante dentro del recuento
diferencial en aves son las clulas anlogas a los neutrfilos de los
mamferos. [39] Generalmente son redondos, con un ncleo lobulado de
cromatina densa que se tie de color morado. Su citoplasma es plido y
presenta grnulos de color rojo ladrillo de forma espiculada, aunque en
algunas especies estos grnulos pueden ser ovalados o redondos (figura 18).
[7, 19]

42 Asociacin de Veterinarios de Vida Silvestre (VVS) ISSN 2011 - 9348

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Los cambios morfolgicos observados en heterfilos pueden deberse al


estrs o diferentes enfermedades. La toxicidad se evidencia con
degranulacin, vacuolizacin y/o basofilia del citoplasma. [3]
La heterofilia puede asociarse con inflamacin en respuesta a agentes
infecciosos como Chlamydophila, Mycobacterium y Aspergillus, y a causas
no infecciosas como toxicidad e injuria traumtica. [42]
Figura 18. Heterfilo de una lora frente amarilla (Amazona ochrocephala),
con ncleo bilobulado. (1000X, coloracin de Wright). Fotografa: CopeteSierra M.

Los heterfilos inmaduros presentan una fuerte basofilia citoplasmtica y


ausencia de segmentacin nuclear. Al igual que en mamferos pueden
encontrase bandas, metamielocitos y mielocitos. Estas clulas no suelen
observarse en aves sanas y su presencia est relacionada con
enfermedades infecciosas. En respuesta a enfermedades sistmicas los
heterfilos pueden exhibir cambios txicos como son degranulacin,
vacuolizacin y/o basofilia del citoplasma. [7]
Eosinfilos. El ncleo de los eosinfilos es lobulado y suele teirse ms
oscuro que el de los heterfilos. El citoplasma se colorea de azul claro y
contiene grnulos generalmente ovalados o redondos, de color rojo brillante
en la mayora de especies (figura 20). En algunas ocasiones los grnulos no
absorben el colorante y semejan vacuolas redondeadas de tamao uniforme

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que ocupan todo el citoplasma. [7] En algunas especies de psitcidos los


eosinfilos exhiben grnulos de color azul (figura 20). [19]
Aunque se considera un hallazgo inconsistente, la eosinofilia en aves puede
estar asociada a parasitosis, automutilacin, traumas severos, lesiones en
piel y reacciones de hipersensibildad. [15] Las aves rapaces sanas poseen
un nmero elevado de eosinfilos.
Basfilos. Usualmente el ncleo no est segmentado y es difcil de observar,
debido a que los grnulos metacromticos basoflicos del citoplasma
suelen enmascararlo. A diferencia de los mamferos, es frecuente encontrar
basfilos en frotis de aves sanas. Aunque se conoce que estas clulas
participan en la respuesta inflamatoria aguda y en reacciones de
hipersensibilidad tipo IV, su funcin no ha sido bien definida. [42]
Linfocitos. Similares a los de mamferos. Son redondos pero pueden
exhibir irregularidad en el citoplasma, por acmulos de eritrocitos a su
alrededor. El ncleo es redondo, de cromatina densa o reticulada, en
posicin central o ligeramente excntrico. El citoplasma es homogneo, se
tie dbilmente basoflico y carece de vacuolas y grnulos, caractersticas
importantes para la diferenciacin entre trombocitos y linfocitos pequeos [7].
Figura 19. Eosinfilos aviares. Izq. Eosinfilo de una lora de cachetes
amarillos (Amazona amazonica): clula con granulacin redonda, de color
rojo brillante; en la parte inferior se observa un heterfilo. Der. Eosinfilo de
una Guacamaya azul y amarillo (Ara ararauna), en el cual pueden observarse
los grnulos de color azul caractersticos en algunos psitcidos. (1000X,
coloracin de Wright). Fotografas: Copete-Sierra M.

Los linfocitos reactivos se caracterizan por presentar un citoplasma basoflico


un ncleo con cromatina densa. En ocasiones el citoplasma puede contener
grnulos azurfilos. En psitcidos se han observado linfocitos reactivos con
vacuolizacin del citoplasma. [3, 7] La reactividad de estas clulas, al igual
que la linfocitosis, se relaciona con estimulacin antignica producida por
44 Asociacin de Veterinarios de Vida Silvestre (VVS) ISSN 2011 - 9348

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diferentes agentes infecciosos, aunque algunos autores afirman que la


aparicin de esta reactividad en animales clnicamente sanos es comn [25].
Monocitos. Son las clulas ms grandes de la serie blanca encontradas en la
sangre aviar. Pueden ser redondos o ameboides, de ncleo redondo o
lobulado normalmente excntrico (figura 20). Su citoplasma es abundante, se
tie azul-grisceo, puede verse ligeramente opaco y puede presentar
vacuola y finos grnulos eosinoflicos. [7, 15]
La monocitosis en aves es un signo de infeccin crnica que puede
asociarse con agentes bacterianos y fngicos. [42]
Figura 20. Monocito de una guacamaya cariseca (Ara severa). (1000X,
coloracin de Wright). Fotografa: Copete-Sierra M.

Reptiles
Heterfilos. Al igual que en aves son las clulas equivalentes a los neutrfilo
de los mamferos. Son clulas redondeadas, de gran tamao, con citoplasma
plido que contiene grnulos fusiformes refringentes, generalmente. Estos
grnulos se tien de color naranja brillante y en una misma clula pueden
aparecer grnulos opacos y refringentes. El ncleo es ovalado o redondo, de
posicin excntrica y con un patrn de cromatina denso (figura 21). Algunas
especies de lagartos, como las iguanas o los dragones barbudos, tienen
heterfilos con el ncleo lobulado. El nmero de heterfilos en el leucograma
de reptiles sanos vara con la especie. [1, 8, 28]

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COPETE-SIERRA M

La heterofilia se asocia con enfermedades inflamatorias, especialmente


infecciosas o que supongan un dao tisular. [28] El aumento de heterfilos
puede asociarse con causas no inflamatorias como estrs, neoplasias y
leucemia hetroflica. Se han observado heterofilias por cambios estacionales
(valores mximos en verano y ms bajos durante la hibernacin) y como
respuesta a la migracin, en algunas especies como la tortuga Caretta
caretta. [37]
Al igual que en mamferos y aves, en los frotis sanguneos de reptiles pueden
observarse heterfilos inmaduros (normalmente mielocitos y metamielocitos)
y clulas con cambios txicos. Los heterfilos inmaduros tienen mayor grado
de basofilia del citoplasma, el ncleo no lobulado, menor nmero de grnulos
que las clulas maduras. Su presencia en el frotis sanguneo acompaada de
heterofilia es indicativa de una enfermedad inflamatoria. Si la cantidad de
heterfilos inmaduros constituye una desviacin a la izquierda, la heterofilia
se asocia una etiologa infecciosa bacteriana. [8, 28]
Figura 21. Heterfilo de una tortuga estuche (Kinosternon leucostomum). Se
puede apreciar el deterioro de la morfologa eritrocitaria por el contacto
prolongado con el anticoagulante (1000X, coloracin de Wright). Fotografa:
Copete-Sierra M.

La toxicidad en heterfilos se caracteriza por un aumento de basofilia


citoplasmtica; alteraciones en los grnulos como degranulacin parcial,
46 Asociacin de Veterinarios de Vida Silvestre (VVS) ISSN 2011 - 9348

EVALUACIN HEMATOLGICA EN FAUNA SILVESTRE Y NO CONVENCIONAL

grnulos con tendencia a fusionarse o grnulos anmalos; vacuolizacin del


citoplasma; y alteraciones nucleares (cariorrexis o cariolisis). [28] La
lobulacin nuclear, en especies de reptiles que normalmente no la poseen,
indica una inflamacin grave, caracterstica que se observa en tortugas del
gneroTestudo. [24]
Eosinfilos. Son clulas grandes, redondas, con citoplasma azul claro que
presenta grnulos esfricos eosinoflicos. En algunas especies estos
grnulos se observan de color magenta oscuro o azul. El ncleo tiene una
forma variable, desde redondo a ligeramente ovalado; en algunas especies
de lagartos puede ser bilobulado (figura 22). [8] El tamao de los Eosinfilos
vara con la especie: las serpientes tienen los eosinfilos ms grandes, y los
lagartos los ms pequeos. [26]
En algunas especies de reptiles es normal encontrar eosinofilia en animales
sanos durante la hibernacin; es relativamente normal encontrar un recuento
elevado en las tortugas del gnero Trachemys. [28] La eosinofilia puede
asociarse con infecciones parasitarias y la estimulacin del sistema inmune.
[8]
Basfilos. Son clulas pequeas, redondas con un contenido variable de
grnulos citoplasmticos metacromticos basoflicos que enmascaran con
frecuencia el ncleo, al igual que en los basfilos aviares (figura 23). Son de
tamao variable de acuerdo con la especie: los lagartos tienen basfilos
pequeos y los quelonios y cocodrilos tienen basfilos ms grandes. [8]
Figura 22. Eosinfilo de una pitn de la India (Python molurus) observan
grnulos esfricos de color rojo brillante. (1000X, coloracin de Wright).
Fotografa: Copete-Sierra M.

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COPETE-SIERRA M

Figura 23. Basfilo de de una tortuga estuche (Kinosternon leucostomum).


(1000X, coloracin de Wright). Fotografa: Copete-Sierra M.

Su funcin es probablemente similar a la de los basfilos de los mamferos.


Su concentracin en sangre perifrica vara entre especies: en la tortuga
acutica Pseudemys ruiventris es el tipo celular predominante en los
recuentos diferenciales leucocitarios. [22] La basofilia en reptiles ha sido
asociada con infecciones parasitarias y virales. [8]
Linfocitos. Son similares a los de aves y mamferos. Son redondos pero
pueden exhibir irregularidad en el citoplasma, por acmulos de eritrocitos a
su alrededor, al igual que los linfocitos aviares. Su citoplasma es escaso,
homogneo, generalmente carece de vacuolas y grnulos y se tie
moderado o dbilmente basoflico. El ncleo es redondo, de posicin central
o ligeramente excntrico, con un patrn de cromatina densa [8, 28].
La concentracin de linfocitos en sangre de reptiles es variable y puede
representar ms del 80% del recuento diferencial leucocitario. [39] Existen
diferencias en el recuento linfocitario asociadas con sexo: en algunas
especies las hembras pueden tener una concentracin de linfocitos
significativamente ms alta que los machos de la misma especie; cambios
estacionales: disminuye en invierno y es ms elevado en verano. La
linfocitosis es producida en procesos inflamatorios, infecciones parasitarias y
virales, cicatrizacin de heridas y trastornos linfoproliferativos. La reactividad
48 Asociacin de Veterinarios de Vida Silvestre (VVS) ISSN 2011 - 9348

EVALUACIN HEMATOLGICA EN FAUNA SILVESTRE Y NO CONVENCIONAL

se evidencia con un volumen citoplasmtico aumentado y un mayor grado de


basofilia citoplasmtica, y se asocia con una estimulacin del sistema inmune
por la presencia de antgenos sistmicos [43].
Monocitos. Al igual que en mamferos y aves son los leucocitos de mayor
tamao que se encuentran en la sangre perifrica. Pueden ser redondos o
ameboides, con un ncleo pleomrfico (redondo, ovalado o lobulado) y con
un patrn de cromatina menos denso que el de los linfocitos. El citoplasma
se tie azul-grisceo y puede contener vacuolas o grnulos eosinoflicos
(figura 24). [8]
Figura 24. Monocito de de una tortuga estuche (Kinosternon leucostomum).
(1000X, coloracin de Wright). Fotografa: Copete-Sierra M.

La monocitosis est asociada con enfermedad inflamatoria, especialmente en


inflamacin granulomatosa. Con frecuencia, los monocitos en sangre
perifrica muestran actividad fagocitaria. La eritro y la leucofagocitosis por
parte de estas clulas pueden asociarse con anemia y la presencia de
enfermedades infecciosas. [17, 38]
Azurfilos. La identificacin y clasificacin de estas clulas han estado
rodeadas de confusin, ya que son consideradas del mismo tipo que los
monocitos por algunos autores, y de una poblacin aparte por otros como se
presentan en las serpientes. [28]
Los azurfilos son clulas mononucleares, que pueden ser redondas o de
forma irregular, ligeramente ms pequeas en tamao que los monocitos.
Son mononucleares y el ncleo es redondo, ovalado o irregular. El
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citoplasma es basoflico y ms oscuro que el del monocito, de color azul a lila


y presenta una pequea cantidad de grnulos azuroflicos mate, de varios
tamaos; el citoplasma puede presentar vacuolas y material fagocitado. [8,
19]
Se ha descrito azurofilia asociada con inflamacin e infecciones, incluyendo
las producidas por hemoparsitos. [27, 35]

Trombograma
En animales silvestres y no convencionales el trombograma consiste en el
anlisis cuantitativo (recuento) y cualitativo (morfologa) de las plaquetas en
mamferos, y de los trombocitos en aves y reptiles. El recuento puede
realizarse de forma manual en hemacitmetro (recuento directo), o en el
frotis sanguneo (recuento indirecto) como recuento estimado. [4, 40]
El recuento de plaquetas y trombocitos define los conceptos de
trombocitopenia y trombocitosis. Trombocitopenia se refiere a la disminucin
de estas clulas y est asociada en la mayora de especies a un aumento del
consumo o destruccin. [9] Pueden producirse falsas disminuciones en los
recuentos por agregacin plaquetaria in vitro.
La trombocitosis define el aumento en la cantidad de plaquetas o trombocitos
y est asociada con anemia ferropnica, enfermedades inflamatorias,
neoplasias e infecciones bacterianas. [7, 8, 9]

Mamferos
Las plaquetas son los fragmentos citoplasmticos de los megacariocitos,
clulas que se encuentran en la mdula sea, no poseen ncleo y presentan
granulacin (figura 25). Tienden a ser redondas pero pueden variar en forma
y tamao. [19] Normalmente son ms pequeas que los eritrocitos pero
pueden aparecer mucho ms grandes. A estas clulas de mayor tamao se
les denomina macroplaquetas, son producto de una liberacin de formas
inmaduras hacia la circulacin y, en algunas especies, regeneracin
plaquetaria. [9]

Aves
Los trombocitos aviares son clulas pequeas, redondas u ovaladas. Poseen
un ncleo que puede ser redondo u ovalado, y presenta un patrn de
cromatina denso. El citoplasma es incoloro o se tie de un gris plido y
contiene grnulos eosinfilicos (figura 26). Su identificacin y recuento se
dificulta ya que tienden a agregarse. Los trombocitos se forman a partir de un
precursor mononuclear en mdula sea. [7]
50 Asociacin de Veterinarios de Vida Silvestre (VVS) ISSN 2011 - 9348

EVALUACIN HEMATOLGICA EN FAUNA SILVESTRE Y NO CONVENCIONAL

Figura 25. Plaquetas de un puma (Puma concolor). (1000X, coloracin de


Wright). Fotografa: Copete-Sierra M.

Figura 26. Trombocitos de un periquito cascabelito (Forpus conspicillatus).


(1000X, coloracin de Wright). Fotografa: Copete-Sierra M.

Reptiles
En reptiles los trombocitos son clulas pequeas, elpticas o fusiformes, con
un ncleo ovalado y central. El citoplasma es casi transparente, hecho
importante que lo que permite diferenciarlos de los linfocitos pequeos. [8,
28]
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Protenas plasmticas
La estimacin de la concentracin de protenas plasmticas se realiza
mediante refractometra y es un parmetro de gran utilidad, ya que refleja el
estado de hidratacin de una animal al correlacionarse con el hematocrito.
Se debe tener en cuenta que condiciones del plasma como la lipemia y la
hemlisis interfieren en la lectura resultando, generalmente, en una falsa
elevacin de este analito (8, 23). [29, 40]
A la vez que se determine la concentracin de protenas se debe observar el
aspecto y color del plasma.

Mamferos
El plasma en mamferos puede ser incoloro o ligeramente amarillo. Una
coloracin amarilla intensa puede indicar ictericia, lo que sugiere
hiperbilirrubinemia. La lipemia produce un plasma blanco, opaco o de
aspecto lechoso; se asocia con dislipidemias o muestras tomadas en estado
postprandial. Una coloracin de rosado a rojo indica hemlisis, que puede ser
inducida durante el proceso de recoleccin o por hemlisis intravascular. [41]

Aves
En aves el plasma normalmente es incoloro, aunque puede ser amarillo e
inclusive anaranjado, debido a carotenos de la dieta; esto puede observarse
en aves granvoras. El color verde en el plasma aviar sugiere biliverdinemia,
indicador de falla heptica o renal. [8] Pueden observarse lipemia y hemlisis
asociadas a las mismas causas que en mamferos.

Reptiles
El plasma en reptiles debe ser incoloro o ligeramente amarillo. Sin embargo,
se puede observar un plasma de amarillo a anaranjado por pigmentos en la
dieta de reptiles hervboros, o verde a amarillento en las serpientes. [6]

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MEM. CONF. INTERNA MED. APROVECH. FAUNA SILV. EXT. CONV. 2013, 9: 1

CONTRIBUCIN AL CONOCIMIENTO DE LOS


PARMETROS HEMATOLGICOS EN ARMADILLO
NUEVE BANDAS (DASYPUS NOVEMCINCTUS), EN
NCLEOS DE REUBICACIN DE FAUNA
SILVESTRE EN LA ORINOQUIA COLOMBIANA
(RESUMEN)
Melo-Restrepo JS1, Parra C2, Murillo-Pacheco R3, Fernndez-Manrique J4
1. Estudiante MVZ, Lnea de Profundizacin en Medicina de Especies Silvestres,
Escuela de ciencias animales, Facultad de Ciencias Agropecuarias y Recursos
naturales, Universidad de los Llanos; 2. Mdico Veterinario y Zootecnista ESP MSc.,
Grupo Biticos CORMACARENA; 3. Mdico Veterinario y Zootecnista ESP MSc.,
Docente Lnea de Profundizacin I Medicina de Especies Silvestres de la Orinoqua,
Programa de MVZ, Escuela de Ciencias Animales, Facultad de Ciencias
Agropecuarias y Recursos Naturales, Universidad de los Llanos; 4. Mdico
Veterinario ESP MSc., Docente Lnea de Profundizacin II y III Medicina de Especies
Silvestres de la Orinoqua, Programa de MVZ, Escuela de Ciencias Animales,
Facultad de Ciencias Agropecuarias y Recursos Naturales, Universidad de los
Llanos.

El armadillo nueve bandas (Dasypus novemcinctus), es un pequeo


mamfero placentado de la familia Dasypodidae recubierto por una armadura
de placas seas cubiertas por escudos crneos, su distribucin va desde
Argentina y Chile en Latino Amrica hasta el sur de los Estados Unidos, su
carne es muy apetecida, por lo cual es grande la presin del hombre sobre la
especie a travs de la caza indiscriminada y la destruccin de los hbitats
naturales. Con el propsito de conocer el comportamiento y la sanidad de la
especie Ex situ se practic un muestreo a cinco especmenes adultos en los
ncleos de reubicacin de fauna silvestre bajo el rea de influencia de
CORMACARENA. Se estableci un protocolo anestsico basado en
premedicacin de atropina a la dosis de 0,044 mg/kg va subcutnea y
sedacin con una mezcla de Zolazepan-Tiletamina a la dosis de 5 mg/kg va
intramuscular, posterior a la decumbencia se realiz examen clnico, el cual
incluy morfometra, evaluacin de constantes fisiolgicas, temperatura,
frecuencia cardiaca y respiratoria, toma de muestras de sangre para la
Pgina 56

PARMETROS HEMATOLGICOS EN ARMADILLO (DASYPUS NOVEMCINCTUS)

determinacin del hemograma y presencia de endoparsitos; hisopados


rectales para la visualizacin de endoparsitos. Los resultados preliminares
registraron un peso promedio para las hembras de 1,4 Kg y de 1,8 Kg para
los machos; la temperatura rectal observada fue de 34,5oC para hembras y
35,5oC para machos. En referencia al hemograma se encontr en promedio
un RGR de 4,3 x 106 mm3, Hto 35 %, RGB 5,35 x 106 mm3, Neu 74 %, Lin
20,5 %, Eos 1 %, Monocitos 5,5 %. No se observaron hemoparsitos para las
muestras analizadas. Los resultados del hemograma se observaron dentro
de los valores de referencia reportados a nivel internacional. Es importante
determinar los parmetros fisiolgicos y los valores de referencia del cuadro
hemtico y la qumica sangunea para animales en cautiverio, esto facilita el
monitoreo y la evaluacin de la sanidad animal en los programas de
conservacin ex situ de las especies silvestres.
Palabras Claves: Dasypus novemcinctus, Hemograma, Hematocrito,
Recuento de glbulos blancos, Neutrofilos, Eosinofilos, Orinoquia.

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MEM. CONF. INTERNA MED. APROVECH. FAUNA SILV. EXT. CONV. 2013, 9: 1

APROXIMACIN AL ANLISIS DE BIOQUMICA


SANGUNEA Y UROANLISIS EN ANIMALES
SILVESTRES Y ESPECIES NO CONVENCIONALES
Ruz-Rodrguez J*
* Bacteriloga, Especialista en laboratorio veterinario. Magister en Sistemas de
Gestin, Gerente Lab. Biovet, Ccentro de Diagnstico Veterinario Especializado.
Correo Electrnico: juliruiz86@gmail.com biovet.cdv@gmail.com

Introduccin
Dcadas atrs, la Medicina Veterinaria enfocaba su diagnstico a los signos
y sntomas observados en el animal, determinando de esta manera el
tratamiento a instaurar; al correr de los aos, por la variacin sintomatolgica
en los individuos, los hallazgos sobre nuevos microorganismos y la
diversidad de patologas presentes, los profesionales veterinarios se han
visto en la necesidad de hacer uso de herramientas valiosas, entre estas los
anlisis clnicos para diagnstico de las patologas de tipo fisiolgico e
infeccioso.
Esta necesidad ha permitido dar un posicionamiento al laboratorio
veterinario, reconocindolo como ayuda diagnstica para diversas
enfermedades, convirtindose en pieza clave en la prevencin y profilaxis.
Es importante puntualizar que para obtener resultados confiables es preciso
realizar una adecuada colecta de muestra, un correcto almacenamiento, un
cuidadoso transporte y una conservacin apropiada, minimizando as todos
los factores que puedan generar resultados errados.
Por lo anterior queda por sentado lo valioso y necesario que es el laboratorio
para el quehacer cotidiano y reconocer los usos de cada una de las
herramientas que este, en su inmensa variedad puede brindar para
mantener el control sanitario de las poblaciones.
Se tratarn aqu dos enfoques importantes del laboratorio, el primero es el
diagnstico de patologas fisiolgicas por medio del suero o plasma
sanguneo y el segundo es el diagnstico de patologas fisiolgicas e
infecciosas por medio de la orina.

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BIOQUMICA SANGUNEA Y UROANLISIS EN ANIMALES SILVESTRES

Bioqumica Sangunea y Uroanlisis


Bioqumica Sangunea
En los ltimos aos el uso de los anlisis clnicos veterinarios ha evidenciado
un crecimiento importante, esto ha sido por el inters en conocer las causas
que desencadenan una disfuncin en los sistemas del individuo, con el
objetivo principal de lograr definir un diagnstico, instaurar un tratamiento y
determinar un pronstico.
La bioqumica sangunea surge como aliado del clnico veterinario, pues
permite obtener informacin adicional para un diagnstico ms preciso,
permitiendo la ejecucin de un tratamiento especfico que pueda controlar la
disfuncin o alteracin evidenciada.
Ms del 90% de los analitos pueden evaluarse a partir del suero, en otros
casos puede utilizarse plasma obtenido con EDTA o heparina. Para que todo
esto pueda lograrse como se planea, es necesario que se tengan en cuenta
lo sensible que son a las condiciones previas al anlisis, los parmetros que
se evalan (enzimas, metabolitos, electrolitos), as como procedimientos
como la colecta de la muestra, su conservacin y transporte.
A continuacin se mencionan algunos factores que causan el deterioro de las
muestras:
La extraccin: Materiales usados para el procedimiento; por ejemplo
el calibre de las agujas usadas para la extraccin, estas no deben
ser ni de mayor calibre, ni de menor calibre que provoque
tromboflebitis o que dificulte la salida de la muestra al tubo
respectivamente.
La presin contenida en los tubos usados para toma de muestra:
Es preferible remover la tapa del tubo y aguja, vaciar la muestra por
las paredes, logrando minimizar el posible dao celular, evitando
adems una posible hemolisis de las muestras.
El tiempo de centrifugacin: Perodos largos de centrifugacin
producen lisis celular, se recomienda centrifugar las muestras por
perodos de 5 minutos y repetir hasta obtener el suero o plasma
separado del coagulo.
Conservacin: La muestra se refrigera a 4C solo despus de
haberse formado el coagulo y cuando se ha obtenido el suero o
plasma se puede congelar.

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RUZ-RODRGUEZ J

Cada uno de los analitos evaluados en el laboratorio por medio de equipos


automatizados o semiautomatizados son de gran valor diagnstico pues
permitirn definir el estado del organismo.
Cada uno de los parmetros bioqumicos evaluados tienen un significado
clnico valioso, es importante elegir los analitos a evaluar teniendo en cuenta
la valoracin clnica de los pacientes, evitando dispersar el diagnstico con
muchos resultados.
Tabla 1. Parmetros bioqumicos analizados con significado clnico.
Parmetros

Significado clnico
Reptiles

Significado clnico Aves

Amilasa

Pancreatitis Enfermedades del tracto


gastrointestinal

Variable, incluso en
animales sanos. Existe
en gran cantidad en el
pncreas de iguana.
No es especfica
Existe en afecciones de
hgado, rin, msculo
cardiaco y estriado, e
intestino.
Elevada-herpesvirus,
heridas glomerulonefritis,
estomatitis, artritis
sptica, e intususcepcin

Aspartato
aminotransferasa
(AST)

Hgado, corazn, msculo


esqueltico, el cerebro y el
rin.
Indicador de dao
hepatocelular o muscular
reciente
til para la deteccin de
enfermedad hepatobiliar

Alanino amino
transferasa
(ALT)

Poco valor diagnstico


Rion, hgado y otros
tejidos.
Elevada
glomerulonefritis

Bajas concentraciones
en iguanas y en muchas
especies est ausente.

Fosfatasa
alcalina (FA)

Rin, intestino, hueso y


gnadas. Es de poco valor
y poco especfica.
Elevada - enfermedad
sea o hipovitaminosis D,
en estadios juveniles en
crecimiento o en perodos
pre-ovulatorios.

Creatinin
fosfoquinasa
(CPK)

Dao muscular.
Aumento - enfermedades
del SNC y aquellas que
cursan con dao

Elevada- dao muscular.


En afecciones de
msculo cardiaco,
esqueltico y rin. Es

Significado clnico
Mamferos
Pancreatitis

Corazn, hgado y el
tejido muscular. (mayor
concentracin en fibras
musculares)
Indicador de lesin
muscular o necrosis
heptica.
Elevada - infarto agudo
de miocardio,
hepatopata aguda,
miopatas por frmacos.
Se encuentra en la
clula.
Es muy estable y de
larga duracin.
Tejido heptico, msculo
esqueltico, corazn,
rin, pncreas y
eritrocitos.
Elevada Afeccin
heptica inducida por
medicamentos. Hepatitis,
Inflamacin de vescula.
Sndromes metablicos
Se encuentra en hgado,
mucosa intestinal,
riones y huesos.
Elevada- Enferm.
Agudas, Enferm. Oseas,
obstrucciones hepticas,
hepatotoxicidad por
medicamentos.
Disminuida deficiencia de
vit. C, cretinismo.
Mayor concentracin en:
tejido muscular,
esqueltico y cardiaco.
Dao muscular:

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Parmetros

Significado clnico
Reptiles

Significado clnico Aves


muscular.
Disminucin - reduccin
en la masa heptica.

especfica de lesiones de
msculo en la iguana.
Aumentada - Daos
musculares: postpunciones, caquexia,
atrofias, mal manejo, en
animales agresivos y
muy activos.
-

Lactato
Deshidrogenasa
(LDH)

Est en muchos tejidos,


no especficos y no es
sensible para evaluar
hgado, suele indicar
degradacin de la muestra
y aumenta en las
hemlisis.

Glutamato
deshidrogenasa
(GLDH)
Calcio (Ca)

Indicador de necrosis
hepatocelular

Elevada en hembras en
estados preovulatorios,
deshidratacin y algunas
neoplasias.
Disminucin en sndrome
de hipocalcemia y postovoposicin

Colesterol

Elevada - enfermedad
heptica, caquexia e
hipotiroidismo,
hiperadrenocorticismo,
diabetes mellitus,
sndrome nefrtico,
nefropata perdedora de
protenas, enfermedad
heptica obstructiva,
dietas altas en grasas,
aterosclerosis y
pancreatitis aguda.
Disminucin- Nutricin
inadecuada, insuficiencia
heptica, enfermedad

Elevada en hembras en
estado reproductivo.
Hiperparatiroidismo
primario, ostelisis,
artefactos por lipemia,
dieta hiperclcica, y
exceso de vitamina D.
Disminucin - Dficit de
exposicin a rayos
ultravioletas, dficit de
calcio o vitamina D3,
enfermedad renal y
decalcificaciones.
Post- Ovoposicin.
Elevadas- Vitelognesis.
Ovoposicin. Anorxicos
crnicos y altos periodos
de letargia

Significado clnico
Mamferos
inflamacin y distrofia
muscular.

Se encuentra en todas
las clulas del organismo
Mayor concentracin:
hgado, corazn, rin
musculo esqueltico y
eritrocitos
Elevada cardiopatas,
hepatopatas, enferms.
Hematolgicas,
metstasis tumorales,
aumentada presin
arterial, lesin
musculares.
-

Elevada Falla renal,


proceso neoplsicos.
Disminuida Postparto
Descalcificacin
Osteoporosis

Aumentada Definir
Riesgo a cardiopatasRiesgo cardiovascular.
Alto en Carnvoros.
Bajo en Herbvoros

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RUZ-RODRGUEZ J

Parmetros

Triglicridos

Glucosa

Lipasa
Fsforo (P)

Significado clnico Aves


heptica severa,
aflatoxicosis, grasa
diettica baja, etc.
-

Aumentada diabetes, y
transitoria en casos de
estrs por manejo e
ingestin reciente de
alimento
Disminuida en
insuficiencia o disfuncin
heptica, septicemia,
neoplasia, enfermedad
infecciosa, inflamacin
entre otros
Elevada pancreatitis
aguda.
Elevada enfermedades
renales severas.

Significado clnico
Reptiles

Significado clnico
Mamferos

Aumentada
Foliculogenesis
Dietas anormales,
Pancreatitis
Disminuido - Dieta baja
en grasas, Sndrome de
malabsorcin,
Desnutricin
Aumentada- estrs
Disminuida - Inanicin,
debilidad,
posthibernacin,
desnutricin, alteraciones
hepticas y algunas
pancreatitis.

Pancreatitis aguda.

Pancreatitis

Elevada- Enfermedad
renal Es un indicador de
fluidos. Aumenta en
enfermedad renal junto al
acido rico (excepto en
la iguana, donde es muy
variable.

Evidencian afecciones
renales, evalan
excrecin de los riones,
problemas de absorcin
o desnutricin

Elevada - inflamacin o
infeccin crnica.
Disminuida-Sangrado
(hemorragia)
quemaduras (extensas)
enfermedad heptica.
Malabsorcin.

Protenas
plasmticas
totales (PPT)

Disminucin desnutricin, enfermedad


renal y heptica, mala
absorcin.
Elevada - deshidratacin
y respuesta inmunolgica.

Albumina

Enfermedades del hgado


y del rin.

Elevada- Deshidratacin,
Hembras en estado
reproductivo.
Disminuida- Mal
nutricin, prdida de
sangre, enfermedad
intestinal, enfermedades
crnicas del hgado y del
rin y caquexia.
Enfermedades del
hgado y del rin.

cido rico

Origen hgado y se
elimina por rin
Disminucin enfermedad
heptica severa.
Elevada deshidratacin
severa y falla renal muy
marcada.

Resultado del
metabolismo final de las
protenas en aves y
reptiles
Elevada: deshidratacin
grave, enfermedad renal
severa e ingestin de

Elevada - Diabetes,
Estrs Hipertiroidismo,
Pancreatitis
Disminuida Hipopituitarismo
Hipotiroidismo, Ayuno

Disminuida en
desnutricin, diarrea
parasitaria, hepatitis.
Falta de aminocidos y
suplementos en la dieta.
Dietas bajas en protenas
Resultado del
metabolismo de las
purinas y pirimidinas en
mamferos
Elevada- diabetes, gota,
intoxicacin,
insuficiencia renal

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Parmetros

Potasio

Sodio

Significado clnico Aves

Elevada- enfermedad
renal, acidosis, hemlisis.
Disminucin - diarrea y
alcalosis.
Indicador de fluidos.
Aumenta en
deshidratados.

Urea

Creatinina

No es indicador de dao
renal como en los
mamferos

Significado clnico
Reptiles

Significado clnico
Mamferos

altas cantidades de
protena en la dieta.
Diagnstico de gota
articular y / visceral
Disminuida: hepatopatas
severas por baja
produccin heptica.
Indicador de fluidos.
Aumenta en lisis
celulares

Disminuida artritis gotosa


crnica, lesin del rin y
del urter

Indicador de fluidos.
Aumenta en
deshidratados.
No se considera como
una herramienta de
diagnstico.
Elevada - deshidratacin,
alteracin renal
(especies acuticas),
uremia pre-renal,
catabolismo,
posthibernacin, y dieta
proteica

Indicador de fluidos.

Indicador de fluidos.

Resultado del
metabolismo de las
protenas.
Elevada- trastornos
renales (insuf. Renal
crnica y aguda)
obstruccin de vas
renales fiebre
(destruccin de las
protenas)
Disminuida en
enfermedades hepticas,
malnutricin de
protenas.
Analito ms importante
de la funcin renal.
Elevada deshidratacin,
obstruccin de las vas
urinarias, insuficiencia
renal
Disminuida distrofia
muscular (etapa
avanzada)

Adicionalmente es importante indicar que la evaluacin de enzimas por


separado no es til en el diagnstico de enfermedades hepticas, pues no
son especficas de ningn tejido, por lo que es necesario diferenciar de de
dao heptico (aumentos de enzimas) de dao muscular evaluando, por
ejemplo, CPK y otros analitos (Tabla 2).

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RUZ-RODRGUEZ J

Tabla 2. Anlisis de analitos e interpretacin en algunas alteraciones


Condicin
Lesin heptica o renal
Trauma, lesin muscular o caquexia

Estado de AST
Aumentada
Normal

Estado de CPK
Normal
Elevada

Por otro lado, la relacin Ca-P, ser casi siempre 2:1, la evaluacin de estos
analitos permitir determinar en ocasiones el estado nutricional de los
animales o incluso afectacin del metabolismo renal.

Uroanlisis
El uroanlisis es la evaluacin fsica, qumica y microscpica de la orina. Este
anlisis permite evaluar la condicin renal de los pacientes, para muchos es
una prueba sencilla, pero es preciso definirla como una prueba selectiva y se
utiliza como ayuda diagnstica en todo animal enfermo. Es una prueba de
gran utilidad, pues suele usarse para evaluacin rutinaria, permitiendo
obtener datos de diferentes sistemas como: renal, heptico, estado de
hidratacin, equilibrio cido base, endocrinopatas y sistema reproductivo,
entre otros.
Es claro para muchos profesionales en la prctica lo difcil que resulta la
colecta de muestra de orina en los animales, esto se debe al manejo que
debe drsele a los pacientes para obtener una muestra representativa y libre
de contaminantes, til para hacer un buen diagnstico de la patologa que
pueda estar cursando. Para ello es necesario llevar procedimientos muy bien
definidos; en muchos casos, si no es en la mayora, debe hacerse un
procedimiento de cistocentesis.
En aves y reptiles la toma de muestra de orina resulta ser ms dispendiosa
que en mamferos, el obtenerla por miccin espontnea da lugar a
contaminacin de la muestra con materia fecal y la cistocentesis se ve
limitada por la estructura morfolgica de los individuos (ausencia de vejiga en
aves y algunos reptiles).
En mamferos la toma de muestra puede realizarse por miccin espontnea
(condicionamiento), pero en muchos casos se emplea la cistocentesis.
Posterior a la colecta, las muestras de orina deben ser dispuestas
inmediatamente al laboratorio y conservadas en refrigeracin por corto
tiempo, estas deben procesarse en el menor tiempo posible.
En el anlisis de orina se evalan diversos parmetros y son agrupados de la
siguiente manera: Examen fsico, examen qumico y examen citolgico o
microscpico.
Anlisis fsico Este parmetro permite observar las caractersticas
macroscpicas de la muestra y determinar el aspecto de esta en lo
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que se refiere a color y turbidez. COLOR: En aves y reptiles la orina


suele ser clara, pero al mezclarse con los uratos crean una mezcla
blanca turbia. Por medio de este anlisis la variedad de colores
permitir relacionarlo a ciertas alteraciones, como:
o Color verde o amarillo - Enfermedades del Hgado,
anorexia.
o Color rosado en enfermedades del rin.
o Color Rojizo Sangrado
o La presencia de abundante turbidez por deshidratacin
En mamferos la orina es de color amarillo claro sin turbidez:
o Color rojizo sangrado.
o Color rojizo oscuro o marrn hemoglobinuria.
o Color naranja marrn ante la presencia de bilirrubina.
TURBIDEZ: Se presenta por la presencia de solutos o partculas
suspendidas, las cuales pueden ser evidenciadas al hacer el
montaje del sedimento.
Anlisis qumico se evalan diversos parmetros que permiten una
aproximacin al estado real de funcionamiento de los riones entre
los se encuentran protenas, sangre, glucosa, leucocitos, cetonas,
nitratos, pH, urobilingeno, bilirrubina y densidad. Densidad
Corresponde a la presencia de solutos en la orina y por medio de
esta se logra evaluar el proceso de filtracin glomerular. Permite
evaluar el estado de hidratacin de los pacientes. pH En muchas
ocasiones depender de la dieta de los animales. Se evidencian
orinas cidas y alcalinas. Protenas Normalmente no deben
aparecer en orina ya que estas se encuentran en el proceso de
filtracin y son reabsorbidas por los tbulos renales. Glucosa Debe
ser negativa, pues es absorbida por los tbulos renales. En caso de
evidenciar positividad es asociada a dao de tubulos renales y
diabetes, pues sobrepasa el umbral de glucosa en suero y se ve
reflejada en orina. Cetonas No se evidencia, solo que estn siendo
usadas las grasas como fuente de energa y en animales en ayuno.
Sangre Se logra evidenciar presencia de sangre en la muestras,
permitiendo clasificar entre un cuadro de hematuria (presencia de
hemates) y hemoglobinuria (destruccin intravascular de
eritrocitos). Bilirrubina - Urobilinogeno Al detectarse en orina, se
pueden evidenciar procesos de alteracin heptica y hemolisis.

La positividad de algunos de estos parmetros son confirmados al realizar la


revisin del sedimento.

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RUZ-RODRGUEZ J

En aves y reptiles la densidad se encuentra elevada en pacientes


deshidratados. La glucosuria junto a la proteinuria es frecuente en patologas
renales.
Anlisis citolgico se observa la celularidad (clulas epiteliales,
hemates, leucocitos, cilindros, cristales entre otros). Las aves y
reptiles tienen nula celularidad, escasamente algunas clulas
epiteliales y no se observan bacterias, se observan con normalidad
los cristales de cido rico.
En Mamferos se puede evidenciar diversidad celular, cuando se encuentran
abundantes se asocian a procesos inflamatorios y dependiendo la morfologa
de las clulas se puede definir el nivel de afeccin.
La presencia de microorganismos y leucocitos se asocia a procesos
infecciosos, en este caso se recomienda hacer uso de otra herramienta del
laboratorio como lo son los cultivos microbiolgicos.

Conclusiones
Con lo anteriormente descrito se puede concluir que en la actualidad los
Mdicos Veterinarios cuentan con una variedad de analitos con los que
logran orientar su diagnstico, permitiendo determinar la patologa que est
cursando, logrando instaurar el tratamiento acertado.
Es claro que el uso de muchos analitos no aportar informacin concisa, por
el contrario podra entorpecer el diagnstico; por esto la agrupacin de
analitos en perfiles permite evaluar el funcionamiento de diferentes rganos,
logrando obtener un conocimiento integral del paciente.
Una correcta seleccin de analitos permitir la reduccin de costos, pues el
uso desmesurado de pruebas ocasiona altos costo y confusin a la hora de
definir un diagnstico.
El tipo de muestra, la obtencin, condiciones de envo y su conservacin son
factores claves para llegar a una interpretacin de resultados correcta,
logrando un diagnstico acertado.
Es necesario emplear tablas con valores de referencia de los parmetros
evaluados para realizar un anlisis apropiado de los resultados de laboratorio
clnico veterinario. La confrontacin de los resultados con los valores de
referencia permite un anlisis concienzudo, logrando interpretar los datos
obtenidos, estableciendo as un diagnstico; esto unificado con la historia
clnica permite que el profesional veterinario instaure un tratamiento
acertado, que permita dar un pronstico del paciente.
Es importante en este proceso la comunicacin directa entre el clnico y el
encargado del laboratorio para la resolucin de los casos.
66 Asociacin de Veterinarios de Vida Silvestre (VVS) ISSN 2011 - 9348

BIOQUMICA SANGUNEA Y UROANLISIS EN ANIMALES SILVESTRES

Bibliografa
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5.
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A Mahaffey Keith W Prasse. 4ta edicin. Multimedica Ediciones Veterinarias.
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MEM. CONF. INTERNA MED. APROVECH. FAUNA SILV. EXT. CONV. 2013, 9: 1

COLECTA DE MUESTRAS SANGUNEAS EN


REPTILES
Troiano JC*
* MV Esp. Med. Especies Exticas y no Tradicionales. Docente UBA. Correo e:
juancatroiano@hotmail.com

Introduccin
La toma de muestras sanguneas es un procedimiento importante dada la
necesidad de obtener valores normales de las distintas especies de reptiles,
observar la progresin de enfermedades e indirectamente evaluar sistemas
tan complejos como la depuracin heptica y renal de metabolismos.
Cada orden en particular posee estructuras anatmicas determinadas que
enmascaran o dificultan el acceso a los diferentes sitios de toma de muestras
sanguneas. La piel es seca, impermeable y en muchos casos cubiertas por
escamas o adaptaciones de la piel que hacen que los vasos sanguneos
sean invisibles y difciles de palpar. En otros rdenes taxonmicos existen
barreras como el caparazn, que cubre prcticamente todo el animal y deja
expuestas solo pequeas reas libres donde obtener la muestra. Cada orden
ser analizado por separado.

Tcnicas en Cocodrlidos
Puncin de los senos venosos postoccipitales: con el animal sujeto por el
cuello, se introduce la aguja hasta dentro del canal vertebral y se punza una
de las venas que corren por el canal, a cada lado de la mdula espinal.
Puncin cardiaca en animales juveniles: con el animal en decbito dorsal, se
introduce la aguja montada en la jeringa, por detrs del esternn (el cual se
puede palpar). La aguja se introduce hacia adelante y abajo en un ngulo
aproximado de 45 hasta alcanzar el corazn. Si bien puede obtenerse un
volumen de sangre apropiado, puede contaminarse con lquido pericrdico.
Puncin de la vena caudal ventral: dos personas mantienen al animal
convenientemente sujeto en decbito dorsal. Se introduce la aguja montada
en la jeringa en la cara ventral de la cola, por detrs de la cloaca y en un
ngulo de 90 grados hasta llegar al hueso. Se retira levemente la aguja y se
toma la muestra (Jacobson, 1984). El mismo procedimiento se emple en
especmenes juveniles (con una talla inferior a los 70 cm) utilizando agujas
de menor calibre.

Pgina 68

COLECTA DE MUESTRAS SANGUNEAS EN REPTILES

Ciertos autores prefieren la puncin cardiaca o la puncin de los senos


venosos postoccipitales, independientemente del tamao del animal. Los
riesgos que se corren con la primera tcnica son altos, debido a que se
pueden lesionar delicadas estructuras orgnicas ubicadas en los alrededores
del corazn, capaces de causar la muerte o lesiones graves en los animales.
Otra desventaja es que la muestra puede contaminarse con lquidos
orgnicos, especialmente lquido proveniente del saco pericrdico, causando
dilucin de la sangre y por tanto, interpretar errneamente los parmetros
sanguneos estudiados.
En el caso de la puncin de los senos postoccipitales (Samour et al., 1984;
Tourn et al., 1994), si bien permite obtener una adecuada muestra
sangunea, sin contaminantes y de un adecuado volumen, existe la
posibilidad de lesionar la mdula espinal del animal, as como los riesgos
que corre la persona que toma la muestra, dada la cercana de la cavidad
bucal de los animales.
La tcnica de eleccin, tanto en juveniles como adultos es la puncin de la
vena caudal ventral. Esta tcnica permite obtener una adecuada muestra
sangunea en cuanto a volumen, rapidez de ejecucin, escaso a nulo riesgo
para el animal, posibilidad de repetirla varias veces en el mismo animal y
adecuadas condiciones de seguridad para el operador.

Tcnicas en Quelonios
Puncin de la vena axilar en tortugas terrestres, por delante de los miembros
anteriores. Si bien el volumen de muestra es abundante, el animal puede
retraerse dentro del caparazn impidiendo el acceso a la zona de puncin.
Adems, si la tcnica no se efecta cuidadosamente es posible perforar los
pulmones.
Puncin cardaca: en este caso la aguja se introduce entre los miembros
anteriores, por debajo del cuello. Requiere extremo cuidado por el riesgo de
perforar los pulmones o seccionar la vena cava anterior. Imposible de realizar
si el animal se retrae dentro del caparazn.
La puncin cardaca transplastral es ms rpida y ms segura, pero
igualmente debe realizarse con gran cuidado. La posibilidad de contaminar la
muestra con lquido pericrdico, obtenindose valores inexactos, es un
inconveniente.
Puncin del seno venoso retroorbital: utilizando un capilar de
microhematocrito heparinizado el cual debe ser introducido en el ngulo
oculonasal, dirigindolo hacia adelante y hacia adentro. La sangre entonces
sube por capilaridad en el capilar cuando se rompe el seno venoso retrorbital

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TROIANO JC

y la misma puede colectarse con una jeringa y una aguja de tuberculina


unida a ella (Samour et al., 1984).
Puncin de la vena caudal dorsal o vena coccgea superior: un examen
detallado de la anatoma de la extremidad caudal de los quelonios permite
observar la existencia de una gran vena dorsal, llamada vena coccgea
principal que corre sobre las apfisis espinosas de las vrtebras y es
abordable desde el borde posterior del caparazn.
Con el animal contenido por otra persona, se toma la cola, se la estira y se
introduce la aguja desde el borde posterior del caparazn hacia las apfisis
espinosas de las vrtebras de la cola del animal. Una vez que la aguja toca
el hueso, se retira unos milmetros la misma y se ejerce traccin con el
mbolo obtenindose la muestra. Esta tcnica es ms rpida que las
anteriores, puede realizarse varias veces en el mismo animal, no se
entorpece si este se retrae dentro del caparazn y no hay rganos de
importancia en la zona que puedan ser lesionados por una mala maniobra.
En algunas especies de quelonios se han reportado varios procedimientos
alternativos. La exposicin quirrgica de los vasos sanguneos del cuello o de
los miembros es una maniobra compleja y puede provocar una alteracin de
los resultados obtenidos. En efecto, estas tcnicas deben realizarse bajo
anestesia general y se han observado cambios de los parmetros
hematolgicos en reptiles inducidos por anestsicos generales. Por ejemplo,
algunas drogas, como parte de sus efectos farmacolgicos producen
relajacin de la musculatura lisa de la cpsula que rodea al bazo. Esto
conduce a la dilatacin de los sinusoides esplnicos, secuestro de sangre en
el bazo y disminucin de los parmetros hematolgicos.
La puncin de las almohadillas plantares o palmares; la puncin axilar (o la
puncin de la vena yugular) se descartaron por el dao que pueden provocar
al animal, el tiempo requerido para su ejecucin, el volumen y calidad de la
muestra obtenida resultaron insatisfactorias.
La puncin de las venas coccgeas superiores o dorsales constituye la
tcnica de eleccin por la rapidez de su ejecucin y otras caractersticas
deseables ya consideradas en el caso de los crocodlidos. Sus desventajas
son: (a) el tamao del animal es limitante para su correcta ejecucin y (b) no
puede repetirse en animales pequeos.
En estos casos se utiliza como primera alternativa la puncin cardaca por
va transplastral y como segunda opcin la puncin de los senos venosos
postorbitales.
Algunos autores han analizado las diferencias encontradas en los parmetros
hematolgicos y de bioqumica sangunea de quelonios sangrados por
diferentes tcnicas, encontrando diferencias estadsticamente significativas
70 Asociacin de Veterinarios de Vida Silvestre (VVS) ISSN 2011 - 9348

COLECTA DE MUESTRAS SANGUNEAS EN REPTILES

(p< 0,05) en los valores de recuento de glbulos rojos, recuento de glbulos


blancos, hematocrito y concentracin de hemoglobina, cuando la muestra es
obtenida por puncin venosa de la vena caudal o por otra va como la
puncin de los senos retrorbitales o yugular. Esta diferencia estara dada por
la contaminacin y hemodilucin con lquidos orgnicos cuando la muestra
demora en ser tomada o bien no se realiza con una tcnica correcta.

Tcnicas en Saurios
Puncin del seno venoso retroorbital: utilizando un capilar de
microhematocrito heparinizado el cual se introduce en el ngulo oculonasal,
ya descrito en quelonios.
Puncin cardaca retroesternal: en juveniles de una talla inferior a los 40 cm.
Puncin de la vena caudal ventral: similar a la tcnica descrita para el caso
de los crocodlidos.
Analizando otras tcnicas de toma de muestras sanguneas utilizadas en los
saurios o lagartos se reporta decapitar al animal, corte de la punta de la cola,
incisin de la piel para exponer vasos sanguneos caudales (Sellers et al.,
1980) e inclusive la utilizacin de Triatmidos (Rohdnius prolixus) para
obtener sangre han sido descrito para especies de saurios de pequeo
tamao, cuya escasa talla no permite obtener grandes volmenes de sangre
sin que corra riesgo la vida del animal. Si bien estas tcnicas son aceptables
en cuanto a la facilidad y rapidez de ejecucin, sus desventajas,
especialmente el escaso y muy contaminado volumen de sangre obtenido, no
la hacen aconsejable para ejecutar trabajos de intervalos de referencia.
En los adultos de este gnero de lagartos autctonos, se recurre a la puncin
de la vena caudal ventral, tcnica ya descrita para los crocodlidos con sus
ventajas en cuanto al volumen de sangre obtenido y facilidad de ejecucin.
Cuando se trabaja con juveniles de menos de 40 cm de largo total se recurri
a la puncin cardaca, la cual, bien ejecutada y con las condiciones mnimas
de asepsia permite obtener un buen volumen de sangre y no causa riesgo
para la vida del animal. Como alternativa la puncin del seno venoso
postorbital por medio de un capilar de microhematocrito.

Tcnicas en Ofidios
Puncin de la vena caudal: la cual requiere de la ayuda de otra persona que
sujete adecuadamente al ofidio manteniendo la cabeza lejos de la persona
que tomar la muestra sangunea. Mientras el ayudante contiene con un lazo
el cuello o la parte anterior del animal, la persona encargada de tomar la
muestra sujeta la cola del animal y la estira, de manera que la serpiente no
pueda alcanzar ese extremo caudal.
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TROIANO JC

Mientras el ayudante sigue sosteniendo la serpiente por su cuello, se toma


con una mano la cola y con la otra mano la jeringa con la aguja montada y la
misma se introduce en la extremidad caudal, por detrs de la cloaca, en
forma recta hasta que la aguja toque el hueso, se retira levemente la aguja y
ejerciendo traccin sobre el mbolo se obtiene la muestra. Luego se suelta la
cola y el ayudante vuelve a introducir al animal dentro de su jaula, sin soltar
el cuello hasta que la serpiente se encuentre dentro de su habitculo.
Puncin cardaca: para ello el animal se contiene de la misma manera
descrita anteriormente. El corazn se ubica en el tercio medio ventral del
cuerpo, se lo sujeta entre dos dedos y se introduce la jeringa con la aguja
montada en el lugar donde se observan los latidos y se toma la muestra.
En los ofidios tambin se reportan otras tcnicas, como la puncin de las
venas palatinas o bien la exposicin quirrgica y posterior canalizacin de
vasos importantes como la aorta o la rama gstrica de la aorta se
descartaron porque el animal corra riesgos, el operador estaba muy
expuesto a accidentes o bien deben realizarse bajo anestesia general, con
las complicaciones citadas anteriormente.
La tcnica de colecta ms segura y efectiva consiste en la puncin de la vena
caudal ventral tanto en ejemplares venenosos como no venenosos sin
importar el tamao del animal.
Las tcnicas de toma de muestras aqu descritas han sido adaptadas de
aquellas descritas por varios autores para diferentes especies y gneros de
reptiles. De todas ellas, fueron elegidas las que ofrecieran las caractersticas
deseables de una muestra sangunea como la seguridad para el operador,
rapidez en la ejecucin, bajo riesgo para la salud del animal, repetibilidad del
muestreo y la posibilidad de ser llevadas adelante bajo condiciones de
campaa.

Lecturas Recomendadas
1.
2.
3.
4.

Campbell TW & Ellis CK (Eds). Avian & Exotic Animal Hematology & Cytology.
Third Ed. Blackwell Publishing. Iowa, EUA. 2007.
Thrall MA, Weiser G, Allison R & Campbell T (Eds.). Veterinary Hematology and
Clinical Chemistry. 2nd Ed. Wiley-Blackwell. EUA. 2012.
Mader D. Reptile Medicine and Surgery. Elsevier Health Sciences. EUA, 2005.
Ballard B & Cheek R. Exotic Animal Medicine for the Veterinary Technician.
John Wiley & Sons, 2013.

72 Asociacin de Veterinarios de Vida Silvestre (VVS) ISSN 2011 - 9348

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2013 Ago; 9 (1): 56 57. http://www.veterinariosvs.org ISSN 2011
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5.

Ruz-Rodrguez J. Aproximacin al Anlisis de Bioqumica Sangunea y


Uroanlisis en Animales Silvestres y Especies no Convencionales. Mem.
Conf. Interna Med. Aprovech. Fauna Silv. Ext. Conv. [Internet]. 2013
Ago; 9 (1): 58 67. http://www.veterinariosvs.org ISSN 2011 9348.

6.

Troiano JC. Colecta de Muestras Sanguneas en Reptiles. Mem. Conf.


Interna Med. Aprovech. Fauna Silv. Ext. Conv. [Internet]. 2013 Ago; 9
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2013, 9: 1 ISSN 2011 - 9348
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Contenido

1. Monsalve-Buritic S. Chlamydophila psittaci en Colombia, Perspectivas.


Mem. Conf. Interna Med. Aprovech. Fauna Silv. Ext. Conv. [Internet].
2013 Ago; 9 (1): 5 14. http://www.veterinariosvs.org ISSN 2011
9348.
2. Cuan-Barrera J, Gmez-Guerrero J, Parra-Sandoval C, Murillo-Pacheco
R y Fernndez-Manrique J. Sinpsis de la Evaluacin de un Mtodo de
Extraccin de Semen y Morfometra Espermtica de Lapa Cuniculus
paca en un Ncleo de Reubicacin de Cormacarena. Mem. Conf. Interna
Med. Aprovech. Fauna Silv. Ext. Conv. [Internet]. 2013 Ago; 9 (1): 15
16. http://www.veterinariosvs.org ISSN 2011 9348.
3. Copete-Sierra M. Aspectos Generales de la Evaluacin Hematolgica en
Fauna Silvestre y no Convencional. Mem. Conf. Interna Med. Aprovech.
Fauna Silv. Ext. Conv. [Internet]. 2013 Ago; 9 (1): 17 55.
http://www.veterinariosvs.org ISSN 2011 9348.

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