ACTUALIDAD DE LA MICROBIOLOGIA

en LAS C I E N C I A S F O R E N SE S
LIC. T.M. DAVID G. QUISPE ARANDA

La microbiologa tiene como objeto de

estudio a los microorganismos (bacterias, virus,
hongos y protozoos) que presentan relacin con la
enfermedad humana, en sus aspectos de
deteccin, aislamiento, identificacin, mecanismos
de colonizacin y patogenicidad, mecanismos de
diseminacin y transmisin, significacin clnica y
epidemiolgica, procedimientos para su control
sanitario o teraputico. La historia de las
enfermedades infecciosas est estrechamente
relacionada con la evolucin de los mtodos de
diagnstico microbiolgico y las modalidades de
tratamiento farmacolgico. De esta forma, la
epidemiologa de las patologas infecciosas es un
proceso dinmico y en continua evolucin. La
microbiologa ha sufrido un enorme desarrollo
cientfico y tecnolgico paralelo a los avances de
la ciencia en este y otros campos afines. La
resistencia de los microorganismos a diferentes
antimicrobianos,
la
inmunosupresin,
la
importancia de la infeccin intrahospitalaria, las
infecciones en los trasplantes, el descubrimiento
de nuevos patgenos humanos, la presencia de
nuevas tecnologas para el diagnostico rpido y la
orientacin teraputica condicionan en desarrollo
de esta especialidad.
Las ciencias forenses comprenden un conjunto de
tcnicas que incluyen la investigacin policial,
judicial y cientfica y que tienen como finalidad la
consecucin de pruebas a efectos judiciales.

Especialista en Laboratorio Clnico y A.P.

Mg(e) Ciencias Forenses y Criminalstica

En muchos pases incluyendo el nuestro, existen

casos en los que ante la presencia de una muerte
violenta sospechosa de criminalidad el resultado
es una autopsia blanca, es decir sin hallazgos
macroscpicos ni microscpicos
destacables,
estos estudios en mencin no incluyen un estudio
microbiolgico y si los hay son escasos o
deficientes, a pesar de que esta descrito que
millones de muertes en el mundo se dan por
enfermedades infecciosas. Es aqu donde la
microbiologa forense debe profundizar y analizar
estos casos, el detalle es que esta nueva ciencia
esta aun en vas de desarrollo por lo que se deben
analizar algunas tcnicas para el estudio y anlisis
de las muestras microbiolgicas post-mortem.
OBJETIVOS DE ESTUDIO DE LA
MICROBIOLOGA FORENSE
Profundizar y Estudiar sobre:

La Microbiologa Forense, es una disciplina de

reciente
aplicacin
en
criminalstica
que
proporciona nuevas herramientas para poder
resolver las dudas que acontecen tanto en los
procesos de muerte natural como violenta.
Curiel y Domnguez-Gil, 2004, definen la
Microbiologa Forense como estudio de las
microorganismos que tiene relacin con la
medicina legal y forense y mas en concreto
con los diferentes problemas que el derecho
plantea a la medicina en la resolucin de
diferentes casos judiciales.
La microbiologa forense toma importancia como
rea propia de conocimientos a partir de los
atentados bioterroristas a nivel internacional, pues
juega un importante papel a la hora de proteger y
determinar los posibles agentes biolgicos
empleados en un ataque terrorista, en la
actualidad aporta mucho ms a los fines y
objetivos de la medicina legal y forense

I. Anlisis microbiolgicos post-mortem para

revelan la causa de muerte
II. Fenmenos cadavricos y de putrefaccin
en
los
que
hay
microorganismos
involucrados
III. Sndrome de muerte sbita del lactante as
como del adulto, con sospecha de origen
infeccioso.
IV. Infecciones de transmisin sexual como
indicios de agresin sexual (evidencia)
V. Bioterrorismo
VI. Problemtica
medico-legal
de
la
responsabilidad profesional
VII. El estudio de presuntos delitos contra la
salud pblica, en casos de intoxicaciones
alimentarias o brotes.
LA MICROBIOLOGIA FORENSE DEBE
APORTAR MUCHO MAS EN EL CAMPO DE LA
INVESTIGACION CRIMINAL

I. ANLISIS MICROBIOLGICOS
POST-MORTEM PARA REVELAR CAUSA DE
MUERTE
Las autopsias forenses desempean un papel
fundamental en la prevencin de riesgos para la
salud pblica y concretamente en el diagnstico de
las enfermedades infecciosas. En la autopsia, la
infeccin puede sospecharse como causa de
muerte o bien puede ser un hallazgo inesperado,
destacando entre los ms frecuentes junto con el
tromboembolismo y el infarto agudo de miocardio.
Adems, en algunos casos, aunque la infeccin se
haya diagnosticado durante la vida del individuo,
es la autopsia la que revela como causa de muerte
una infeccin diseminada como la endocarditis
bacteriana o la pielonefritis aguda.
Aunque con frecuencia los anlisis microbiolgicos
post-mortem revelan la causa de la muerte, el
significado de los microorganismos aislados en la
autopsia es en ocasiones difcil de clarificar. Se
han sugerido diversas teoras para intentar
explicar este hecho:
1.
Teora de la INVASIN AGNICA, que
propone que en el perodo peri-mortal los cambios
en estructuras, funciones y viabilidad celulares
hacen al organismo ms proclive a sufrir una
infeccin diseminada a partir de microorganismos
endgenos.
El
principal problema para demostrare
esta
hiptesis que no se han tomado cultivos de forma
estandarizada en el
momento
previo
al
fallecimiento
Koneman y Davis
(1974), en
un
estudio de
396 exmenes postmortem,
dieron
como
resultados
que
en el 71.5 % de los pacientes se aisl un
microorganismo
que
en cultivos
de sangre
pulmones
u
otros
rganos, sin que existiera correlacin con
situacin
clnica del paciente antes del
fallecimiento.
Wilson WR y
col.(1972)
compararon
datos clnicos
premortem
con
cultivos
de
pulmn, hgado,
bazo y corazn tomados en la autopsia. El
agente responsable
de la infeccin
slo pudo identificarse con certeza 2.8 %
de los pacientes.

2.
Teora de la INVASIN POST-MORTEM,
propone que las bacterias endgenas se
multiplican y migran a travs del organismo slo
tras la muerte, lo que se denomina invasin,
diseminacin o translocacin post-mortem.
Desde el punto de vista prctico se asume que
puede existir una cierta diseminacin post-mortem,
que es ms perceptible una vez transcurridas 24
horas desde el fallecimiento y que puede afectar a
la interpretacin de los resultados microbiolgicos.
Dicha diseminacin podra hacer que en tejidos
estriles se detectase flora habitual intestinal o
que, p. ej. en pulmn se aislase flora de vas
respiratorias altas. No obstante, la realizacin de
una autopsia temprana, en condiciones de
asepsia, y la cuidadosa interpretacin conjunta de
los resultados obtenidos en las distintas muestras
de un mismo individuo, permiten extraer datos
tiles de los anlisis microbiolgicos post- mortem.

En general se acepta que sta no ocasiona

interferencia si las muestras se obtienen lo antes
posible (idealmente dentro de las primeras 24
horas del deceso) y el cuerpo se ha mantenido
refrigerado a 4C antes de la autopsia. Un estudio
reciente que investig los resultados de la
bacteriologa en muestras de autopsia observ
que casi el 50% de las muestras obtuvieron un
nmero significativo de contaminantes externos
(principalmente difteroides, estreptococos alfahemolticos y Staphylocococus epidermidis);
mientras que otro que investig la utilidad de la
microbiologa en autopsias peditricas, observ
que no hubo diferencias significativas en el
intervalo postmortem de los cultivos con
organismos potencialmente patognicos y aquellos
en los que en el cultivo se obtuvo microbiota
comensal no patognica.
No obstante, ninguna de las dos teoras se
ha podido demostrar por completo, pues son
diversos los estudios en los que se han
encontrado resultados contradictorios.
Cuando se realizan estudios microbiolgicos
en las autopsias es muy frecuente
encontrar cultivo positivos y, con frecuencia,
su relacin con la patologa del paciente o los
cultivos realizados en vida es escasa

La controversia sobre la validez de la sensibilidad

y especificidad de la utilizacin de mtodos de
diagnstico microbiolgico en la autopsia es, en
gran parte, responsable de que sta haya sido
tradicionalmente relegada a un segundo plano. Sin
embargo, estudios recientemente publicados han
revalorizado su papel, en el campo el forense. Ms
an cuando la introduccin de nuevas tcnicas
diagnsticas como la inmunohistoqumica, la
hibridacin in-situ u otras tcnicas moleculares
tales como la reaccin en cadena de la polimerasa
(PCR), que permiten actualmente que el ADN y el
ARN de los organismos patognicos puedan
detectarse directamente en las muestras tisulares
tomadas en la autopsia. De esta manera, las
tcnicas moleculares actuales no slo han logrado
que el diagnstico microbiolgico recupere su
papel protagonista en la patologa de autopsia,
sino que su fusin con la biologa molecular y la
histopatologa le han abierto a una nueva
dimensin cientfica.

ser humano tienen una relacin de tipo simbitica.

Esta relacin es beneficiosa para ambos hasta que
sobreviene el fallecimiento del ser humano.
La muerte no puede considerarse desde el punto
de vista biolgico como un momento, sino como
un proceso, pues no todos los sistemas vitales
cesan a la vez. Lo que socialmente se considera
como el proceso de la muerte podra definirse
como el cese sbito e irreversible de las funciones
respiratorias, cardiocirculatorias y neurolgicas.
Es justo en ese momento en el que la asociacin
entre el ser humano y las bacterias se convierte en
un proceso de tipo predativo, y comienzan los
denominados procesos cadavricos que no son
otra cosa que las transformaciones que se
suceden en el cadver por accin de los factores
ambientales. Los fenmenos cadavricos pueden
clasificarse dos en funcin del tiempo en el que se
desarrollan.

A pesar de la controversia, la importancia de la

microbiologa
postmortem es indudable, los
estudios microbiolgicos tras el fallecimiento
podran permitir:
1. Establecer la correlacin clnico patolgica
(especialmente si etiologa es infecciosa);
2. Valorar eficacia de teraputica antibitica
3. Conocer posible flora
comensal de rganos internos
4. Diferenciar contaminacin de la patogenicidad
5. Valorar los hallazgos microbiolgicos en
diferentes tipos de enfermos (crnicos,
spticos, inmunodeprimidos)
6. Conocer las vas de difusin de los
microorganismos a partir focos spticos

Los primeros procesos cadavricos se suceden

inmediatamente tras producirse la muerte, y
comienzan por la acidificacin de los tejidos
debido a la ruptura celular y la consiguiente salida
del contenido de las vacuolas digestivas de las
mismas al medio extracelular.

II. LOS MICROORGANISMOS IMPLICADOS EN

LOS PROCESOS DE DESCOMPOSICIN
CADAVRICA
Antes de comenzar a estudiar los
microorganismos que estn implicados en los
procesos de descomposicin cadavrica y como
estos pueden proporcionar datos sobre el cadver,
es necesario definir que es la microbiota normal
del ser humano. El hombre como individuo est
14
compuesto por 10 clulas, de las cuales slo el
10% forman parte de los tejidos, el resto
corresponde a microorganismos asociados, no
patgenos que viven habitualmente en el cuerpo
sano y que constituyen la microbiota normal. Estos
microorganismos se pueden localizar en
numerosos lugares: piel, cavidad oral, tracto
gastrointestinal, vas respiratorias, odo externo,
conjuntivas y tracto genitourinario, e intervienen en
procesos beneficiosos para el ser humano, tales
como la digestin de los alimentos, la produccin
de vitaminas o la proteccin por competencia con
otros microorganismos patgenos, o simplemente
conviven con l. As pues la microbiota normal y el

A. Fenmenos cadavricos tempranos

1. Algor mortis (enfriamiento progresivo del cuerpo)

A las dos horas, manos, pies y cara estn
fras, a las cuatro horas este fenmeno se
aprecia en las partes cubiertas, y las 8
horas de la muerte puede alcanzar los
29C y a las 15 horas descender a los
23C.
2. Lividez (Hipostasia postmortem) deposicin de la
sangre corporal en el tercio inferior del
cadver cuando se encuentra en posicin
supina. Se presenta entre las 3 y las 24
horas de haber sucedido el deceso.

3. Rigor Mortis (Rigidez cadavrica) La causa de la

rigidez es la precipitacin de la miosina
muscular que aparece entre 3 y 6 horas
despus de la muerte; en el corazn y en
el diafragma la rigidez comienza a las dos
horas.

B. Fenmenos cadavricos tardos

1. Autolisis. Es el conjunto de procesos
fermentativos
anaerbicos
que
se
desarrollan en el interior de la clula por
accin de las enzimas intracelulares sin
intervencin microbiana. Se trata de
procesos previos a la putrefaccin, aunque
a veces se superponen. Dependen de
factores ambientales y de tratamientos
mdicos.
2. Tanatoquimia Se definen como los procesos
bioqumicos propios de la actividad
cadavrica. Al realizar la autopsia de
forma rpida tras la muerte, se pueden
valorar la mayor parte de los parmetros
bioqumicos, sobre todo aquellos que
tienen un valor diagnstico y pueden
informar sobre la forma de la muerte
(glucosa, urea, creatinina, electrlitos,
enzimas,
antgenos
y
anticuerpos,
hormonas, etc.). La toma de muestras
para realizar la valoracin de estos
parmetros es importante. De forma
general se toma sangre del ventrculo
derecho, pero esta suele contaminarse
fcilmente pues recibe la sangre de las
cavas que se contaminan por la
degradacin del pncreas y los fluidos
digestivos e intestinales. Por ello, es mejor
tomar muestras de fluidos de sitios
cerrados
tales
como:
lquido
cefalorraqudeo, humor acuoso, humor
vtreo, lquido sinovial, lquido pericrdico y
lquido peri linftico.

3.

Putrefaccin. Se produce por la degradacin

de los tejidos del cadver por accin de
los
microorganismos.
Estos
microorganismos pueden tener una
procedencia diversa:
- Microorganismos ambientales.
- Microorganismos de infecciones.
- Microorganismos de la microbiota normal.

Tracto digestivo (ciego).

Tracto respiratorio.

Piel.
Los microorganismos encargados de los
procesos de descomposicin siguen un
orden determinado. En primer lugar actan
los microorganismos aerobios (bacterias y
hongos filamentosos), seguidos por las
bacterias anaerobias facultativas presentes
en el tracto gastrointestinal, para concluir
con las bacterias anaerobias estrictas.
A lo largo del proceso de putrefaccin
cadavrica, se origina la descomposicin a
travs
de
procesos
oxidativos
y
fermentativos de las grasas, hidratos de
carbono y protenas del organismo,
generando compuestos malolientes como
cido
sulfhdrico,
mercaptanos,
indol
escatol, amoniaco y aminas de tipo
cadaverina y putrescina.

Fases de la descomposicin
actividad bacteriana

cadavrica

1. Periodo cromtico

De todos ellos, el humor vtreo es el que

tiene ms ventajas. Entre los dos ojos se
pueden extraer unos 4-5 ml de fluido,
suficiente para poder valorar: glucosa,
cido lctico, compuestos nitrogenados
(protenas,
aminocidos,
cidos
nucleicos), enzimas (fosfatasa cida o
alcalina, amilasa, transaminasas, etc.),
lpidos, hormonas (catecolaminas, cortisol,
tiroxina, etc.) o electrlitos (sodio, cloro,
calcio, etc.).

Es considerado el primer signo de la

descomposicin cadavrica. A nivel macroscpico
comienza con la llamada mancha verde. Esta
mancha se inicia normalmente en la fosa iliaca
derecha entre las 24 a 48 horas despus de la
muerte, y se extiende en los dos siguientes das
por todo el cuerpo adquiriendo este una tonalidad
verde parduzca.
Esta mancha se origina por la descomposicin de
la hemoglobina por parte de las bacterias
coliformes y especies del gnero Clostridium, que
producen metahemoglobina, de un color azulado,
y la accin del Micrococcus prodigiosus y el
Bacterium violaceum, que provocan manchas
violetas. En los fetos, las bacterias penetran por
los orificios naturales, principalmente por las vas
respiratorias, por lo que la mancha verde aparece
en el cuello y la parte superior del trax. En los
cuerpos que presentan lesiones supurativas o
neoplsicas, la mancha verde aparece alrededor
de las lesiones.

En esta fase las bacterias aerobias del tracto

respiratorio empiezan a desarrollarse a partir de
exudados pulmonares, sangre pulmonar y lquido
pleural. Los microorganismos intestinales rompen
los epitelios por acumulacin de gas debido a los
procesos fermentativos, se produce la liquefaccin
del contenido intestinal, y
se consume todo el
oxgeno presente en el
sistema digestivo. Los
deshechos
metablicos
debidos a la actividad
microbiana empiezan a
aparecer como las aminas
secundarias (putrescina y
cadaverina),
cido
sulfhdrico, otros gases como el metano y el
hidrgeno. En el caso de las mujeres
embarazadas, debido a la acumulacin de gases
en la cavidad abdominal se produce la expulsin
del feto. Bacillus putricum acaba con el oxgeno
existente y comienza la fase anaerobia estricta.
2. Periodo enfisematoso
En este periodo se acumulan una gran cantidad de
gases como productos de la fermentacin de los
hidratos de carbono y la desaminacin de las
protenas. Se produce la desfiguracin casi
completa del cadver por acumulacin de los
propios gases, los tejidos se hinchan, y en casos
extremos pueden llegar a explotar por la presin.
Los vasos sanguneos quedan muy marcados
sobre la superficie de la piel.
Durante esta fase predominan las bacterias
anaerobias estrictas y anaerobias facultativas
(dentro de las cavidades) y aparecen hongos
filamentosos sobre la superficie del cadver.
Como consecuencia de los procesos fermentativos
se aprecia una infiltracin gaseosa en el tejido
celular subcutneo, se hincha la cabeza y se
protruyen los globos oculares, la lengua se sale
fuera de la boca, el trax y el abdomen aparecen
distendidos, los genitales externos multiplican su
tamao por diez, las venas superficiales son
presionadas por las vsceras y aparecen con un
color violceo intenso. El periodo de duracin es
de aproximadamente quince das.
3. Periodo colicuativo
En este periodo se producen ampollas repletas de
lquidos productos de los procesos putrefactivos. A
nivel interior, todava se pueden distinguir rganos
en el interior del cuerpo, se produce el
desprendimiento del pelo y la piel se desprende
por simple traccin, la piel se ennegrece, los
globos oculares se protruyen hacia el exterior. Las
bacterias que predominan en esta fase son
anaerobias estrictas (Clostridium y Fusobacterium)
y anaerobias facultativas (Escherichia coli). La
cantidad de gas producido es tal que se suele
producir la ruptura de la pared abdominal, se

rompen tambin las asas intestinales con la

liberacin de su contenido, los rganos se
desintegran y las partes blandas de la cara
desaparecen. Al final de esta fase se produce la
licuefaccin del cadver. Si se realiza la
exhumacin del cadver hay que tener mucho
cuidado al abrir el fretro, si es de madera, hay
que tener precaucin al desmoldar la tapa. En el
caso de que sea metlico, hay que abrir la vlvula
de seguridad, pues existe riesgo de explosin.
Esta fase viene a durar entre 8 a 10 meses
4. Periodo de esqueletizacin
En este periodo no existe actividad microbiana,
pues se origina por la desaparicin de las partes
blandas del cadver. En la fase inicial queda el
putrlago (restos orgnicos an no desintegrados),
a continuacin desaparecen los ligamentos y
cartlagos hasta la completa desintegracin de la
materia orgnica quedando nicamente restos
seos. Este proceso tiene una duracin que oscila
entre 2 y 5 aos segn el lugar en el que se
encuentre el cadver (enterrado, con atad,
sumergido) y las condiciones ambientales
(humedad, temperatura y estacin del ao)
III. SINDROME DE MUERTE SBITA DEL
LACTANTE
El Sndrome de la Muerte Sbita del Lactante
(SMSL) se define como el fallecimiento de un nio,
menor de un ao, en el que despus de: un
estudio necrpsico completo, una revisin de su
historia clnica y un examen del escenario y
circunstancias de la muerte, no se encuentra
ninguna causa que lo justifique, es una secuela
reconocida de distintos agentes infecciosos, cuyo
desenlace depender de la combinacin de varios
factores. La toma de muestras para anlisis
microbiolgicos,
toxicolgicos,
bioqumicos,
genticos y metablicos deber realizarse de
manera sistematizada y protocolizada para evitar
la contaminacin secundaria de las muestras.

En lactantes las causas ms frecuentes de Muerte

Sbita son las enfermedades infecciosas , en
estos individuos es muy conveniente el estudio
microbiolgico, sobre todo en las muertes rpidas
que se producen en la fase invasiva de la infeccin
y en los que no se encuentran signos de infeccin
en el estudio histopatolgico.
Las causas ms frecuentes son:
1)
Respiratorias:
empiema,
laringotrqueobronquitis,
neumona,
absceso
retrofarngeo, bronquiolitis, amigdalitis, neumonitis.
2) Cardacas: miocarditis, endocarditis, arteritis,.
3) Infecciones del sistema nervioso: meningitis
bacteriana, encefalitis.
4) Gastrointestinales: enterocolitis, peritonitis.
5)
Infecciones
genitourinarias:
pielonefritis,
sndrome urmico-hemoltico.
6) Sepsis: septicemia, shock endotxico

IV. INFECCIONES DE TRANSMISIN SEXUAL

COMO INDICIOS DE AGRESIN SEXUAL
(EVIDENCIA)
En agresiones sexuales y maltratos, la
microbiologa forense dispone de mtodos que
permiten:
Establecer
el
tipo
de
virus
o
microorganismo involucrado.
Comprobar si es el mismo que el del
agresor. Individualizar el agente patgeno
distinguindolo de otros tipos y establecer
si se trata exactamente del mismo
microorganismo.

V. LA MICROBIOLOGA FORENSE Y LA
PREVENCIN DE ATAQUES BIOLGICOS

Los agentes biolgicos (A.B.) llamados as en

Microbiologa forense pueden definirse como
aquellos microorganismos o sus toxinas capaces
de producir dao al ser humano, los animales,
plantas o el medio ambiente en grado extremo.
La capacidad que tiene un agente biolgico de
producir un dao sobre los seres vivos. Este riesgo
puede cuantificarse determinando la peligrosidad
de los agentes biolgicos clasificndolos en tres
categoras (A, B y C) de forma que el riesgo ms
elevado se encuentra en los microorganismos del
grupo A y el menor en el C.
Agentes del grupo A: El Clostridium
botulinum, Bacillus anthracis, Yersinia
pestis, los virus hemorrgicos entre otros.
Agentes del grupo B: Brucella abortus,
Burkholderia pseudomallei, Salmonella
typhi, Coxiella burnetti.
Agentes del grupo C: Virus Nipah,
Hantavirus.
De todos estos agentes biolgicos, los ms
peligrosos pues producen una elevada mortalidad
en la poblacin a la vez que tienen un gran
impacto en la salud pblica provocando pnico se
encuentran el Bacillus anthracis, agente productor
del antrax y Yersinia pestis, agente causal de la
peste pulmonar. Ambas enfermedades sin
tratamiento adecuado pueden llegar a producir una
mortalidad que oscila entre el 80 y el 100% de los
infectados.
Bioterrorismo es el trmino utilizado para
definir el empleo criminal de
microorganismos patgenos, toxinas o
sustancias dainas contra la poblacin con el
propsito de generar enfermedad, muerte,
pnico y terror.

En 2001, El Servicio Postal de los Estados Unidos

se vio afectado por un ataque bioterrorista con
esporas de Bacillus anthracis, se infectaron 22
personas con carbunco (en ingls: antrax) y a 7
supervivientes se les confirm la enfermedad del
carbunco cutneo, este atentado hizo que pases
como Rusia, Libia, EEUU, China, Egipto y Corea
dieran pie entre los aos 1999 y 2003 a una nueva
ciencia muy joven que naci de la mano del
Bioterrorismo: Microbiologa Forense.