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CURSO TCNICO DE NVEL MDIO EM BIOTECNOLOGIA

TALITA SANTOS EL HINDI, 19

CARBOIDRATOS
VIA DAS PENTOSES
GLICONEOGNESE

CAMPINAS
2015

TALITA SANTOS EL HINDI, 19

CARBOIDRATOS
VIA DAS PENTOSES
GLICONEOGNESE

Relatrio de aula prtica


referente ao dia 17 de agosto de 2014
com tema de carboidratos e pesquisa
bibliogrfica com os temas Via das
Pentoses e Glicognese. Ambos
referentes matria de bioqumica sob
orientao da professora Joslia
Cristina Oliveira.

1. CARBOIDRATOS
So molculas orgnicas constitudas fundamentalmente por tomos de carbono,
hidrognio e oxignio. So tambm molculas energticas utilizadas por todos seres vivos para
obter energia para suas atividades metablicas.
Produzidas na fotossntese na maioria (exceto a galactose, que produzida pelas
glndulas mamrias dos mamferos).
Funes:
- Energia
- Estrutural
Os carboidratos constituem a principal fonte de energia para os seres vivos e esto
presentes em diversos tipos de alimentos. O mel por exemplo, contm a glicose; cana-de-acar
rica em sacarose e o leite contm a lactose.
Alm da funo energtica, os carboidratos tambm contribuem na arquitetura
corporal dos seres vivos. Um exemplo a quitina que constitui a parede celular dos fungos e o
exoesqueleto dos artrpodes.
Outra importncia dos carboidratos a participao da estrutura dos cidos nuclicos,
tanto do DNA quanto do RNA.
Outros nomes para os Carboidratos
- glicdios
- sacardeos
- oses
- osdeos
- acares

1.1 NOMENCLATURA
Existem dois grandes grupos:

Regra de nomeao dos Carboidratos


Nomenclatura qumica:
- sufixo inicial aldo ou ceto;
- sufixo de quantidade de carbono;
- sufixo final ose (grande maioria dos carboidratos).
1.3 CLASSIFICAO
Os carboidratos so divididos em trs grupos importantes:
Monossacardeos: carboidratos mais simples, quimicamente podem ser aldedo ou
cetona. Todos monossacardeos apresentam entre 2 a 7 tomos de carbono.
Formula Geral:
Cn(H2O)n
Para:
n = 3 = C3H6O3 = triose
n = 4 = C4H8O4 = tetrose
n = 5 = C5H10O5 = pentose
n = 6 = C6H12O6 = hexose
n = 7 = C7H14O7 = heptose

Oligossacardeos: unio de 2 a 10 monossacardeos (reao de sntese por


desidratao). Os mais importantes so os dissacardeos.

Polissacardeos: formados por centenas ou milhares de unidades (monossacardeos).


So polmeros (constitudos por unidades idnticas-monmeros), cadeias longas. Os
Polissacardeos tambm subdividido em dois grupos: Homopolissacardeos e
Heteropolissacardeos.
- Homopolissacardeos: forma de armazenamento de energia (amido e glicognio) e
componente estrutural (celulose e quitina);
- Heteropolissacardeos: componente estrutural de parede celular de bactrias
(peptdeoglicano da Staphylococcus aureus).

Todos os carboidratos, salvo a diidrocetona, apresentam carbonos assimtricos


(quirais), de modo que ocorrem formas isomricas pticas.

Diferentes carboidratos podem possuir a mesma composio molecular, apenas


diferindo em sua isomeria ptica. Isto se d o nome de Epmero.
2. IDENTIFICAO QUALITATIVA DE CARBOIDRATOS

2.1 REAO DE BENEDICT

MATERIAIS

REAGENTES

Pipetas graduadas de 1mL

Reativo de Benedict

Pipetas graduadas de 5mL

Soluo de glicose a 1%

Tubos de ensaio

Soluo de sacarose a 1%

Pina de madeira

Soluo de trealose a 1%

Bcker de 250mL
Procedimento
Colocar em um tubo de ensaio, 5 ml de reativo de Benedict, aquecer em banho maria
fervente por 2 minutos. Adicionar ento 1 ml de cada soluo de acar e aquecer no banho por
mais 2 minutos. Notar o aparecimento de precipitado vermelho-tijolo, se o acar for redutor.

2.2 REAO DE FEHLING

MATERIAIS

REAGENTES

Tubos de ensaio

Reativo de Fehling A

Bcker de 250Ml

Reativo de Fehling B

Pipetas graduadas de 1mL

Soluo de glicose a 1%

Pipetas graduadas de 2mL

Soluo de frutose a 1%
Soluo de maltose a 1%
Soluo de sacarose a 1%
Soluo de amido a 1%

Procedimento
1 - Colocar 2,0 ml do composto a ser analisado em um tubo de ensaio;

2 - Acrescentar 1,0 ml de Fehling A e 1,0 ml de Fehling B;


3 - Aquecer em banho-maria fervente e observar a formao de precipitado vermelhotijolo.

2.3 REAO DE BARFOED

MATERIAIS

REAGENTES

Tubos de ensaio

Reativo de Barfoed

Pipetas graduadas de 1mL

Soluo de glicose a 5%

Pipetas graduadas de 5mL

Soluo de sacarose a 5%

Pina de madeira

Soluo de maltose a 5%

Bcker de 250mL

Soluo de acar problema

Procedimento
Numerar 4 tubos de ensaio e colocar em cada um deles 5 ml do reativo de Barfoed. Ao
tubo n 1 juntar 1 ml de soluo de glicose a 5 %, ao n 2, 1 ml de soluo de sacarose a 5 %,
ao n 3, 1 ml da soluo de maltose a 5% e ao n 4, 1ml da soluo problema. Aquecer por 2
minutos em banho fervente. Verificar a formao de um precipitado vermelho-tijolo de Cu2O,
se o acar for redutor.
2.4 REAO DE TOLLENS OU DE ESPELHO DE PRATA

MATERIAIS
Tubos de ensaio
Bcker de 250mL

REAGENTES
Soluo de nitrato de prata a
2%
Soluo de hidrxido
amnio a 1%

Pipetas graduadas de 1mL

Soluo de glicose a 5%

Pina de madeira

Soluo de acar problema

de

Procedimento
Misturar em um tubo de ensaio 1 ml de soluo de nitrato de prata a 2 %, 1 ml de
soluo de hidrxido de amnio a 1 % e 1 ml de soluo de glicose a 5%. Aquecer brandamente
e verificar o espelhamento da superfcie interna do tubo. Repetir a operao com soluo de
acar problema.

2.5 INVERSO DA SACAROSE

MATERIAIS

REAGENTES

Tubos de ensaio

Reativo de Benedict

Pipetas graduadas de 1mL

HCl concentrado

Pipetas graduadas de 5mL

Soluo de sacarose a 1%

Pina de madeira
Bcker de 250mL
Procedimento
Pipetar 5 ml de sacarose a 1 % em um tubo de ensaio. Juntar 1 gota de HCl
concentrado. Aquecer em banho fervente por 2 minutos e esfriar. Praticar a reao de Benedict.
2.3 RESULTADOS E DISCUSSES:

2.3.1 REAO DE BENEDICT


um reagente qumico da cor azulada, que usado para identificar a presena de
acares e acares redutores. O reagente Benedict, uma soluo de sulfato cprico em meio
alcalino, ele reduz os ons do cobre.
- Glicose = mudou sua cor primeiramente para verde, mas logo ficou vermelho tijolo.
- Sacarose = no mudou sua cor, ficou dar cor do reagente (azulado).
- Trealose = mudou a cor para vermelho bem clarinho.
O aparecimento de um precipitado de colorao vermelho tijolo, indica presena de
acar redutor.
Dessa forma, aps colocarmos os tubos de ensaio com as solues em banho-maria
por 10 minutos, observamos:
- Glicose, houve reao e obteve a colorao de vermelho tijolo, sendo assim ela um
acar redutor;
- Sacarose, no houve reao, permanecendo a mesma colorao do reagente azulada,
portanto ela apenas um acar e no acar redutor;
- Tretose, houve uma pequena reao, ficando com um precipitado da colorao de
vermelho claro, porm ela apenas um acar e no acar redutor.

2.3.2 REAO DE FEHLING


Este reagente a base de cobre, e menos reativo que o reagente Benedict. Ela
utilizada para identificar acares redutores. O reagente Fehling muito alcalino, contendo ons
cpricos, com isso o cobre reduzido por ao de acares redutores, formando-se o xido
cuproso.
- Glicose = vermelho tijolo
- Frutose = vermelho tijolo
- Maltose = no houve reao, permaneceu da mesma cor
- Sacarose = no houve reao, permaneceu da mesma cor
- Amido = houve uma pequena reao, obteve a colorao de um azul bem escuro
O cobre presente na soluo reduzido pela ao de acares redutores, onde ocorre
a precipitao da soluo dando origem a colorao de vermelho tijolo.
Dessa forma, aps de colocarmos os tubos de ensaio com as solues em banho-maria,
observamos:
- Glicose, um acar redutor;
- Frutose, foi a segunda soluo a ter a precipitao, onde tambm um acar redutor;
- Maltose, tambm ocorreu a precipitao, confirmando que um acar redutor;
- Sacarose, no houve precipitao ento apenas um acar e no um acar redutor;
- Amido, uma pequena reao, pois o amido uma cadeia muito grande, aprox.1400
molculas de glicose, com apenas uma extremidade redutora, sendo assim no consegue realizar
a hidrolise redutora.
2.3.3 REAO DE BARFOED
Esta reao tambm contm a reduo do cobre, onde efetuada em meio cido. Esse
reagente para a identificao de monossacardeos, onde o cobre reduzido a quente pelos
monossacardeos, formando o xido cuproso, originando a colorao do vermelho tijolo. Os
dissacardeos tambm podem ser identificados com essa reao de Barfoed, porm as reaes
tem que ser aquecidas por tempo bem prolongado.
- Glicose = em 1 min. de aquecimento j reagiu, ficou vermelho tijolo.
- Sacarose = no ocorreu a reao.
- Maltose = reagiu bem pouco.
- Acar problema = em 1 min. de aquecimento j reagiu, tornando-se vermelho tijolo.
Na reao, o cobre sofre reduo, onde essa tal reduo feita em meio cido. As
solues quem apresentarem um precipitado com a colorao de vermelho tijolo, so as
solues de monossacardeos. Aps aquecermos os tubos em banho-maria, observamos:
- Glicose, reagiu no primeiro min. de aquecimento, tornando-se vermelho tijolo, sendo
assim essa soluo um monossacardeo.
- Sacarose, no ocorreu nenhuma reao, soluo dissacardeo.

- Maltose, ocorreu um pequena reao, pois usamos a soluo de 1% e no a 5%,


porm essa soluo dissacardeo.
- Acar problema, reagiu no primeiro min. de aquecimento, tornando-se vermelho
tijolo, sendo assim essa soluo monossacardeo.
2.3.4 REAO DE TOLLENS
Esse reagente uma soluo amoniacal de nitrato de prata, que atravs das reaes de
soluo de nitrato de prata e de hidrxido de amnio, forma-se xido de prata.
Para diminuir o potencial de reduo de eltron adiciona a soluo amonaco, sendo
assim, forma-se um espelho de prata na parede do tubo.
Aps o aquecimento dos tubos em banho-maria, observamos:
- Glicose, vai escurecendo e ficando prata, geando um complexo de um precipitado de
prata metlico, que vai aderir na parede do tubo
- Acar problema, tambm foi modificando sua cor, porm menos prateado do que a
glicose, sendo assim consideramos esse acar ser a frutose.
2.3.5 INVERSO DA SACAROSE
O acar facilmente hidrolisada pelos cidos diludos, com essa inverso
estritamente monomolecular, sendo assim a frao da sacarose presente constante.
Aps colocarmos o reagente de Benedict, a soluo j foi modificando sua colorao
para vermelho tijolo, comprovando j a inverso da sacarose.

3. VIA DAS PENTOSES


tambm chamada de desvio da hexose monofosfato, e uma via alternativa de
oxidao (degradao de glicose), ou seja, importante via anaerbica alternativa para a
utilizao de glicose. Esta via no produtora de ATP mas fonte de NADPH (uma coenzima
semelhante ao NAD).
A via das pentoses tem 2 funes bsicas:
1- Produo de pentoses produz ribose 5-fosfato para a sntese de nucleotdeos
componente dos cidos nuclicos que formam o DNA).
2- Produo de NADPH- que um agente redutor utilizado para a sntese de cido
graxos e dos esterides (colesterol e seus derivados), e da manuteno da integridade da
membranas da hemcias
A via das pentoses ativada no fgado, glndulas mamrias, tecido adiposo e nas
hemcias. uma via citoplasmtica e anaerbica e possui duas fases.

3.1 FASES DA VIA DAS PENTOSES


1- Fase oxidativa produo de pentoses
2- fase no oxidativa- produo de intermedirios para a via glicoltica. Na via das
pentoses h a formao por exemplo de frutose 6- fosfato e gliceraldedo 3-fosfato que so
intermedirios da via glicoltica (gliclise).
A via das pentoses ocorre no citoplasma, como a gliclise (via glicoltica). As duas
vias apesar de diferentes , esto intimamente ligadas atravs de compostos comuns: glicose 6fosfato, frutose 6- fosfato e gliceraldedo 3-fosfato.

3.2 REGULAO DO METABOLISMO DOS CARBOIDRATOS:

O pncreas responsvel por sintetizar dois hormnios de vital importncia para a


regulao do metabolismo, a insulina e o glucagon.
A insulina um hormnio produzido pelas clulas b das ilhotas de Langerhans (1 a
2% das clulas pancreticas). A insulina estocada em grnulos no citosol. As clulas b so
sensores de glicose que percebe o aumento de glicose no sangue (por exemplo, depois de uma
ingesto rica em carboidrato) e aumenta a secreo de insulina por exocitose.

A insulina aumenta acaptao de glicose, sntese do glicognio, de protenas e de


triacilgliceris

O glucagon um hormnio produzido pelas clulas a das ilhotas pancreticas. O


glucagon, juntamente com a adrenalina, o cortizol e o hormnio do crescimento se ope a
muitas reaes da insulina.
O glucagon atua na manuteno da glicemia durante os momentos de hipoglicemia. O
glucagon ativa a glicogenlise, a gliconeognese.

4. GLICONEOGNESE
A gliconeognese a sntese de glicose a partir de compostos como lactato, alanina e
glicerol, com o consumo de ATP. realizada nas clulas hepticas, e o ATP utilizado
proveniente principalmente da oxidao de cidos graxos.
Como a gliclise e a gliconeognese so vias praticamente opostas, e que
compartilham a maioria de suas enzimas, necessrio que uma funcione quando a outra estiver
inativada.
A gliconeognese inicia com a transformao de alanina e lactato em piruvato (alanina
aminotransferase e lactato desidrogenase), que entra na mitocndria atravs de uma translocase.
A partir da, existem 3 etapas da gliclise que so modificadas.

4.1 ETAPAS DA GLICLISE

Etapa1: converso de piruvato a fosfoenolpiruvato.


Na gliclise, esta etapa ocorre em apenas uma reao, j na gliconeognese, ocorre em
duas reaes, a primeira que transforma piruvato em oxaloacetato (ser mandando para fora
da mitocndria atravs de uma lanadeira), atravs da piruvato quinase (que contm biotina), e
a segunda que transforma oxaloacetato em fosfoenolpiruvato, atravs da fosfoenolpiruvato
carboxilase.
O fosfoenolpiruvato se transforma em frutose 1,6-bisfosfato.
Etapa 2: converso de frutose 1,6-bisfosfato a frutose 6-fosfato, atravs da frutose 1,6bisfosfatase.
Etapa 3: converso de glicose 6-fosfato a glicose, atravs da glicose 6-fosfatase.

4.2 REGULAO

O controle da gliconeognese realizado pelo glucagon, que estimula esse processo,


e pela insulina, que atua de maneira oposta.
Gliclise e gliconeognese no ocorrem ao mesmo tempo.
A gliconeognese ocorre durante o jejum, tambm estimulada durante exerccio
prolongado, por uma dieta altamente protica, e sob condies de stress.
Piruvato carboxilase + fosfoenolpiruvato x piruvato quinase
A gliclise estimulada pela presena de frutose 1,6-bisfosfato, e inibida por ATP e
alanina (esta impede que fosfoenolpiruvato possa ser convertida a piruvato novamente). O
glucagon estimula a via da PKA, inativando a piruvato quinase e estimulando a

fosfoenolpiruvato carboxilase. Quando ocorre hiperglicemia e existe insulina no meio, esta


causa a desfosforilao da piruvato quinase, estimulando a gliclise.
Acetil-CoA estimula a piruvato carboxilase, em que se forma oxaloacetato necessria
para o funcionamento do ciclo de krebs. ADP sempre age como inibidor da gliconeognese.
Frutose 1,6-bisfosfatase x fosfofrutoquinase 1
Frutose 1,6-bisfosfatase inibida pela presena de AMP e frutose 2,6-bisfosfato.
Fosfofrutoquinase 1 inibida por ATP e citrato (devido ao ciclo de krebs) e
estimulada por AMP e frutose 1,6-bisfosfato.
A produo de frutose 2,6-bisfosfatase inibida pelo aumento da concentrao de
fosfoenolpiruvato, e portanto estimula a gliconeognese, alm disso, inibida tambm pela
presena de glucagon e epinefrina, que fosforilam a enzima responsvel pela sua sntese.
Glicose 6-fosfatase x glicoquinase

5. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS

http://www.ebah.com.br/content/ABAAABdd8AL/gliconeogenese (acessado em: 07/09/2015)


http://adm.online.unip.br/img_ead_dp/36232.PDF (acessado em: 07/09/2015)
http://estudodebiologiabruder.blogspot.com.br/2012/05/bioquimica-via-das-pentoses-eregulacao.htmL (acessado em: 07/09/2015)