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Promocin de la industria responsable

y del compromiso climtico


FACULTAD DE QUMICA E INGENIERA
QUMICA
E.A.P CIENCIAS BIOLGICAS

INFORME N5 Anlisis Cromatogrfico I

ASIGNATURA:

Qumica orgnica

HORARIO:

Martes 14:00 16:00

PROFESORA:

Elva Cueva Talledo

ALUMNOS:

Ascoy, Antonio
Chin Julca, Jaime
Mory Soto, Benyi
Solis Gzar, Angel Francisco

AO:

Primero

SEMESTRE:

Segundo

(14100048)
(14100005)
(14100061)
(14100087)

Ciudad Universitaria, septiembre del 2014

Introduccin
Los cloroplastos poseen una mezcla de pigmentos con diferentes colores: clorofilaa(verde intenso), clorofila-b (verde), carotenos (amarillo claro) y xantofilas (amarillo

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anaranjado) en diferentes proporciones. Todas estas sustancias presentan un grado
diferente de solubilidad en disolventes apolares, lo que permite su separacin cuando
una solucin de las mismas asciende por capilaridad a travs de una tira de papel poroso
(papel de cromatografa o de filtro) dispuesta verticalmente sobre una pelcula de un
disolvente orgnico (etanol), ya que las ms solubles se desplazaran a mayor velocidad,
pues acompaaran fcilmente al disolvente a medida que esta asciende. Las menos
solubles avanzaran menos en la tira de papel de filtro.
Aparecern, por lo tanto, varias bandas de diferentes colores (hasta siete o ms,
dependiendo del material utilizado) que estarn ms o menos alejados de la disolucin
alcohlica segn la mayor o menor solubilidad de los pigmentos. Estas bandas poseern
diferente grosor, dependiendo de la abundancia del pigmento de la disolucin.

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Resumen
En sntesis los dos experimentos: Cromatografa en papel, y en capa fina,
tuvieron como muestra a la Elodea diferenciando en el solvente, el primero tuvo
al Hexano, que es un solvente no polar y el segundo tuvo un sistema de
solventes que lo conformaba el Tolueno, que es un solvente no polar y el
Metanol, que al ser polar le dio un poco de polaridad a dicho sistema.
Los experimentos pasaron por el proceso de extraccin, que se llev a cabo en el
tubo de ensayo, se agreg la muestra con un capilar, para luego ponerla en
nuestra cmara de desarrollo, que fue un matraz de Erlenmeyer, y finalmente
poder ver las bandas de separacin.

Parte Terica
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Cromatografa: Este proceso es un mtodo fsico de separacin en el cual los
componentes que se han de separar se distribuyen en dos fases, una de las cuales
est en reposo8fase estacionaria) mientras que la otra se encuentra en movimiento
definido (fase mvil).
En todas las separaciones cromatografcas la muestra se separa en una fase mvil,
la cual puede ser un gas, un lquido o un fluido supercrtico. Esta fase se hace pasar
a travs de una estacionaria la cual es inmiscible. Las fases se eligen de tal forma
que los componentes de la muestra se distribuyen de modo distinto entre la fase
mvil y la estacionaria. Aquellos componentes que son retenidos con ms fuerza por
la fase estacionaria se mueven lentamente con el flujo; por el contrario los
componentes que unen dbilmente a la fase estacionaria, se mueven con rapidez.
Tipos de cromatografa:
a

Cromatografa de absorcin: Se caracteriza por usar una fase estacionaria solida


de carcter polar y una fase mvil liquida de carcter apolar, este proceso es
utilizado tanto con fines analticos como preparativos, siendo su principal
limitacin la dificultad que presenta para separar sustancias de polaridad
parecida.

Cromatografa de intercambio inico: En este proceso se pueden separar iones y


molculas polares basadas en las propiedades de carga de las molculas. Puede
ser usada en cualquier molcula cargada, desde grandes protenas hasta
pequeos nucletidos o aminocidos. Es usada a menuda en anlisis de
protenas, anlisis de agua o control de calidad.

Cromatografa de particin: Se caracteriza por una fase estacionaria lquida


anclada en un soporte slido y una fase lquida mvil. Ambas fases son
inmiscibles.

Cromatografa de papel: Es un proceso muy utilizado en laboratorios para


realizar anlisis cuantitativos ya que a pesar de no ser una tcnica muy potente
no requiere ningn tipo de equipamiento.
La fase estacionaria de este est conformada por un papel filtro. La muestra se
deposita colocando la solucin en un extremo y evaporando el disolvente.

Detalles Experimentales

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A. SEPARACIN DE PIGMENTOS VEGETALES MEDIANTE
CROMATOGRAFA SOBRE PAPEL.

Para el experimento se uso la Elodea


seca y triturada en pequeos trozos.

El solvente usado para esta


cromatografa fue el Hexano, un
solvente no polar.

Se lleva a cabo el proceso de


extraccin en el tubo de ensayo
que est aislado de la luz, este
proceso se llama en fro, porque
es a temperatura ambiente

Se extrae el Hexano para luego


poder poner dicho solvente en el
matraz de Erlenmeyer, que ser la
cmara de desarrollo.

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En la cmara de desarrollo se deja


el solvente por varios minutos
tapado con una luna de reloj, para
que esta cmara se sature con el
vapor del solvente.

En el inicio se agrega varias veces


la muestra con un capilar, siempre
esperando aprox. 30 segundos
para volver a agregar la muestre

Finalmente
qued
as
la
separacin de los pigmentos, se
not claramente dos bandas de
separacin.

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A. SEPARACIN DE PIGMENTOS VEGETALES MEDIANTE
CROMATOGRAFA DE CAPA FINA.

El proceso es similar a la cromatografa de papel, con alguna excepciones como:


Se uso como sistema de solventes al tolueno y solo una gota de metanol,
para que le d ms polaridad.
La cmara de desarrollo no fue un matraz Erlenmeyer.
Y el papel era slica gel

Se logra diferencias tres colores bien


marcados, lo cuales son amarillo,
oscuro, y anaranjado.

Luego de unos minutos dichos colores


van bajando de tonalidad a causa de la
oxidacin de los pigmentos con la luz y
el calor.

Clculos Experimentales y Resultados


Cromatografa de papel
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Se realiz con la utilizacin de un papel filtro, a la distancia de 1cm se coloc la


muestra de los pigmentos vegetales.
Con el suficiente hexano para ver el arrastre
Se observa el arrastre del hexano en el papel filtro (hexano es no polar)
Factor de retencin:
1
=0,1
Para A: 10

10
=1
Para B: 10

Cromatografa de capa fina

Se realiz con la utilizacin de una placa fina, para la obtencin de mejores


resultados.
El lugar donde se hizo el experimento fue en una cmara raxo
Se observ con ms detalles el arrastre
Factor de retencin.
0.5
=0,1 041
Para A: 4.8

Para B:

1.7
=0, 3541
4.8

Para C:

4.8
=1
4.8

Discusin de resultados

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En el experimento de cromatografa de papel surgi un percance al momento


de colocar los pigmentos vegetales en el papel filtro lo cual ocasiono que el
arrastre no sea de forma adecuada y se incline para un lado.

El hexano en el primer experimento no fue el adecuado por lo cual el arrastre no


se hizo con normalidad, el hexano es un compuesto que fcilmente se evapora en
el medio y al no tener el recipiente totalmente cerrado se dej la fuga de dicho
compuesto.

Conclusiones
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En este trabajo pudimos concluir en que la muestra es que la forma en la que
introducimos el papel es fundamental para poder completar el trabajo de manera
adecuada, puesto que debemos tener facilidad para poder extraerlo del Erlenmeyer
para que de esta forma no se pierda nada de la disolucin. Otro punto es no poner
demasiada disolucin en el recipiente y tratar de que no se gaste echando
directamente en el fondo del recipiente la solucin.

Recomendaciones

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Es necesario la manipulacin correcta del compuesto que se utilice para el


proceso de cromatografa, son compuestos que fcilmente logran evaporarse en
el medio y una mala utilizacin de estos puede ocasionar consecuencias graves.
En el caso del hexano es un compuesto daino se recomienda el buen manejo de
los compuestos otorgados en el laboratorio.
Las correctas y adecuadas medidas del papel filtro ocasionara un mejor resultado
al momento de realizar el experimento.
Se debe utilizar con mucha precaucin el papel de capa fina, para la obtencin
de mejores resultados.
Los recipientes que contengan el experimento deben permanecer siempre
cerrados para no interferir con el arrastre.

Apndice
CUESTIONARIO
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1.

Por qu empleamos ter etlico para extraer la clorofila?


La clorofila tiene la caracterstica de poder asociarse con lpidos y protenas
hidrofbicas membranosas fotosintticas. Como cabe mencionar, la clorofila es
insoluble en agua pero s lo son en compuestos orgnicos como la acetona, el
alcohol, el cloroformo, el ter y dietlico. Estas sustancias llegan a extraer
cualquier compuesto soluble que recaiga sobre ellas, como resinas, ceras,
hormonas liposolubles, vitaminas liposolubles y pigmentos (como la clorofila).
Es por ello, cuando se prueba con ter o cetonas sobre plantas fibrosas, como las
gramneas (gramas o pasto) casi todo lo extrado es clorofila.

2.

Qu pigmentos son los ms abundantes?


Sin duda alguna, el principal pigmento en las plantas trata de una clorina que
consigue absorber longitudes de ondas amarillas y azules de la luz: la clorofila.
Una manera de demostrar la gran abundancia de dicho pigmento, sin la
necesidad de incurrir a gravosos experimentos, es dar una simple vuelta al
parque y ver la coloracin verdosa de la inmensa cantidad de plantas al alcance.
Y una de las razones por la cual es importante su presencia es que permite la
realizacin de la fotosntesis el punto clave para la subsistencia de la vida en el
planeta .
Otro tipo abundante de pigmentos radica en los carotenoides, de color rojo,
naranja o amarillo. Permiten un impulso al momento de realizar la fotosntesis,
cuando recopila las longitudes de onda de luz que no son absorbidas con
facilidad por la clorofila. Se podra decir que son como los pigmentos accesorios
en las plantas. Dentro de este grupo encontramos diferentes pigmentos, tales
como el caroteno, la lutena y el licopeno.

3. Por encima de las clorofilas aparece ms de una banda, qu significado


tiene?
Lo que se aprecia en el papel de filtro son los otros pigmentos que han albergado
las plantas tratadas. Dentro de ellas podemos encontrarlas en el siguiente orden:
clorofila a, clorofila b, xantofila y el caroteno.
Bibliografa
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L.G. Wade Jr. Organic Chemistry 5th Edition


Ernest Ingersoll Color in Plants

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G.A. Armstrong & J.E. Hearst Carotenids 2: Genetics and Molecular Biology
of Carotenoid Pigment Biosynthesis
Missouri Botanical Garden Plants and Life on Earth