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ACTIVIDAD 2: LABORATORIO DE FISIOLOGA VEGETAL

DETERMINACIN DEL CONTENIDO DE AGUA EN LAS PLANTAS


DETERMINACIN DEL POTENCIAL DE AGUA TOTAL
OBSERVACIN DE ESTOMAS A TRAVS DEL MICROSCOPIO
NOMBRE: JHON SEBASTIAN MARTINEZ

COD. 1070960065

RESUMEN
En el laboratorio de fisiologa vegetal de la universidad nacional abierta y a distancia
realizaremos el trabajo propuesto por el profesor German Castellanos, titulado
Determinacin del contenido de agua en las plantas donde se cortaran pedazos de diferentes
especies las cuales determinaremos en el laboratorio de 1 cm y estos se dejaran durante dos
horas en cajas de Petri con solucin salina , en la determinacin del potencial de agua total
se prepararan muestras de alguna especie que escogeremos en el laboratorio de 1 cm en
cajas de Petri con solucin salina , se realizara el mtodo de coloracin Shardakov, por
ultimo observamos los estomas de alguna especie vegetal que seleccionaremos en el
laboratorio a travs del microscopio.
INTRODUCCIN
DETERMINACION DEL CONTENIDO DE AGUA EN LAS PLANTAS

El contenido de agua es la medida ms comn para estimar el grado de hidratacin de las


plantas.
Por lo general, ste se expresa en trminos relativos, en relacin con la mxima capacidad
de agua que los tejidos vegetales pueden almacenar, y se expresa de manera sencilla as:
= Pf - Ps
Donde:
= Contenido de agua en gramos
Pf = Peso fresco
Ps = Peso seco (a 85C hasta peso constante).
Sin embargo, esta medida es imprctica porque no se pueden hacer comparaciones con
otras medidas de contenido de agua en las mismas plantas o con otras especies.
El contenido de agua se puede expresar con base en peso seco o peso fresco; es decir:
Formula:

PFPS
X 100
PS

PFPS
X 100
PF

Sin embargo, estas dos expresiones tambin subestiman o sobreestiman el contenido de


agua porque al expresarlo con base en peso seco, este tiende a cambiar diaria o
estacionalmente, y al expresarlo con base en su peso fresco, los problemas de cambio de
peso se minimizan, pero tambin tiende a minimizar cambios importantes en el contenido
de agua.
Para evitar estos errores, l se expresa con base en su peso trgido (Pt) que es el peso del
tejido a su mxima turgencia. De esta manera el se llama ahora "contenido relativo de
agua (CRA)" o
"dficit de saturacin de agua (DSA)".
CRA=

PFPS
X 100
PT PS

DSA=

PT PF
X 100
PTPS

DSA = 100-CRA

CRA: Contenido Relativo de Agua


PF: Peso Fresco
PS: Peso Seco
PT: Peso Turgente
DETERMINACIN DEL POTENCIAL DE AGUA TOTAL

La energa libre del agua es un concepto termodinmico que se usa para expresar la
capacidad que tiene el agua para realizar trabajo dentro del sistema de la planta (potencial
qumico) y ms apropiadamente se le llama "potencial de agua" ( A). El A es la
diferencia entre el potencial qumico del agua en el sistema y el potencial qumico del agua
pura a la misma temperatura, y se expresa de la siguiente manera:
RT
e
Potencial de agua = Va ln e
Donde:
R = Constante de los gases

V = Volumen parcial molar


T = Temperatura absoluta
e = Presin de vapor del agua en el sistema
e = Presin de vapor a saturacin del agua pura.
El A en plantas integra el efecto de varios componentes: potencial osmtico (o),
potencial de turgencia (t), potencial matricial (m) y potencial gravitacional (g). El
potencial gravitacional se puede eliminar porque slo representa una fuerza de 0.01
Megapascales (MPa) por metro y la contribucin del potencial matricial tambin es
despreciable con valores cercanos a cero. Finalmente, el A total de un tejido est
expresado por los componentes: potencial osmtico (o) y potencial de turgencia (t).
A = o + t

Se supone que el A puro a la temperatura y presin estndar es igual a cero, por lo tanto,
el A de las plantas es, por lo general, negativo y se usan unidades de presin para
expresarlo:
1 baria = 1.0 X 10 dyn/cm = 1.0 X 10 N/m
= 0.987 atm = 1017 cm de agua = 75.0 cm Hg
= 14.50 Ib/pulg. = 10 Pa = 0.1 MPa = 100 J/Kg.
Mtodo de cambio de peso
Este mtodo para determinar el potencial de agua (A) es uno de los ms antiguos. Se basa
en el hecho de que los tejidos vegetales ganan o pierden agua, cuando se les coloca en
soluciones que tienen un potencial osmtico (o) conocido como sacarosa, manitol o
polietiln glicol. Las soluciones con una concentracin conocida se utilizan para ceder o
absorber agua del tejido vegetal que se coloca en ellas. La finalidad de este mtodo es
encontrar una solucin en la cual el tejido no modifique su peso. Esto indica que no hubo ni
prdida ni ganancia de agua y que el tejido y la solucin estn en balance, por lo tanto, el
A del tejido es igual al A de la solucin. Este mtodo, basado en el cambio de peso,
puede ser muy til cuando no se tiene otros instrumentos que ayuden a precisar el A.

Mtodo de coloracin de Shardakov


Este mtodo consiste en sumergir muestras de tejido vegetal durante algn tiempo en un
gradiente de concentracin, de soluciones de sacarosa, manitol o polietilen-glicol. Las
soluciones ganarn o perdern agua (disminuyendo y aumentado su densidad
respectivamente), esto depende del potencial del agua A del tejido. Si la densidad de la
solucin no cambia, esto indica que el tejido y la solucin tienen el mismo A. La presin
de turgencia, la transpiracin, los componentes del soluto y la hidratacin son factores que
influyen en el potencial hdrico de una planta.

En el laboratorio se determinar el potencial hdrico a diferentes concentraciones de


sacarosa y se analizar qu sucede en cada una de ellas.
Fenmenos osmticos
Osmosis es la difusin de una sustancia a travs de una membrana semipermeable, es decir,
aquella que deja pasar los solventes pero no los solutos. En las clulas vegetales ocurre
smosis porque las membranas citoplasmticas no dejan pasar numerosas sustancias
disueltas en las vacuolas, lo cual determina la existencia de una menor energa libre del
agua en su interior, provocando la entrada de agua a la clula; a medida que esta agua entra,
el protoplasma es presionado contra la pared celular limitando ella su grado de expansin.
Dicha presin se denomina "presin de turgencia" y es el producto, a su vez, de la presin
osmtica del contenido celular.
El termino o conocido como potencial de solutos o potencial osmtico, representa el
efecto de la disolucin de solutos sobre el potencial hdrico. Los solutos reducen la energa
libre del agua por su dilucin. Este efecto es esencialmente un efecto entrpico; es decir, la
mezcla de solutos yagua aumenta el desorden (entropa) del sistema y, consecuentemente,
disminuye la energa libre. El efecto entrpico de los solutos disueltos tambin se observa
en otros efectos fsicos, conocidos como propiedades coligativas de las soluciones: los
solutos disminuyen la presin de vapor de las soluciones, aumentan su punto de ebullicin
y disminuyen su punto de congelamiento.
Para soluciones diluidas de sustancias no disociadas, el potencial osmtico puede ser
estimado por la ecuacin de Van't Hoff:
o = - RTCs

Donde:
R = constante de los gases (8,32 Lmolv.k': 0,00831Kg.MPa.moll.okl)
T = temperatura absoluta en grados Kelvin
Cs = concentracin de solutos de la solucin expresada como osmolalidad (moles de
solutos totales disueltos por litro de agua [mol.L:']).
OBSERVACIN DE ESTOMAS A TRAVS DEL MICROSCOPIO
Los estomas estn presentes en las hojas de todas las plantas superiores y en rganos de
plantas primitivas tales como musgos y hepticas. Se trata de pequeas aberturas que se
encuentran principalmente en la epidermis de las hojas y de algunos tallos jvenes y que
estn flanqueadas por dos clulas epidrmicas especializadas que reciben el nombre de
clulas guarda. Su funcin es doble: permitir el intercambio gaseoso y mantener un
adecuado nivel hdrico en la planta. Normalmente estn en el envs y en ocasiones en el
haz y el envs, aunque en este caso son ms numerosos en el envs. En ocasiones slo hay
en el haz. Tambin, a veces, como ocurre en la adelfa, Nerium oleander, pueden estar
encerrados en unas depresiones denominadas criptas estomticas, lo que parece ser una
adaptacin a las condiciones de sequedad ambiental. En el caso del olivo, estn recubiertos
por una serie de tricomas pluricelulares que se asemejan a las sombrillas de playa. Las

clulas guarda, tambin llamadas oclusivas, suelen tener (aunque no siempre) dos
caractersticas que las diferencias del resto de las clulas epidrmicas:
a) No estn conectadas con las clulas vecinas a travs de plasmodesmos.
b) Tienen cloroplastos.
MATERIALES Y METODOS.

Material vegetal
Cajas de Petri
Balanza
Papel secante
Solucin salina 0,8, 0,5 0,2 0,1 0,05
H2O destilada
Tubos de ensayo
Pipeta
Azul de metileno
Porta objetos
Cubreobjetos
Microscopio
Agitador magntico de laboratorio
Matraz volumtrico 100 ml
Probeta
Gradilla