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MEJORAMIENTO MEDIANTE LA FORMACION DE EMBRIOGENESIS EN EL

ROBLE

ESTUDIANTE
GINNER FERNANDO AFANADOR
AMANDA GABRIELA MARTINEZ
LINA MARCELA OSSA

TUTOR
MARIA ISABEL ARISTIZABAL

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA


INGENIERIA AGROFORESTAL
UDR CUBARA-BOYACA
2014

INTRODUCCION
En el siguiente artculo se presenta mejoramiento mediante la formacin de
embriognesis en el roble, la cual desde diferentes mtodos se ha logrado hacer
el mejoramiento como es el caso de la descripcin del problema citando a la
profesora de investigacin del CSIC Ana Mara Viitez Martn quien nos recuerda
que el roble presenta dificultades para su propagacin vegetativa por mtodos
tradicionales (injerto, estaquillado o germinacin de las bellotas), ya que sus
semillas son recalcitrantes y no sobreviven en condiciones de sequedad y fro.
En el artculo se hace revisin cientfica, que tiene como propsito la necesidad de
comunicar y establecer las propiedades e investigaciones realizadas, de acuerdo a
los requisitos, metodologa, herramientas, muestras y resultados, mas relevantes
sobre la utilizacin de la modificacin gentica y cultivos in vitro desarrollados en
el mundo y compartidos a la comunidad cientfica, sobre la importancia de
intervenir en las especies del roble.

El objetivo de este trabajo fue evaluar la respuesta de las especies con


tratamientos o modificaciones genticas en comparacin con las especies
sembradas, y producidas de manera tradicional, y con la premisa de predecir que
existen mejoras en las caractersticas y propiedades de dichas plantaciones que
recibieron el tratamiento. Presentando problemas, mtodos de investigacin
desarrollados, resultados y discusin de las investigaciones realizadas.

MATERIALES Y METODOS

En el artculo cientfico realizado por la Universidad politcnica de Madrid, sobre la


Induccin de embriognesis somticas en roble (Quercus robur L.). Se
recolectaron bellotas maduras en noviembre de 1988, bellotas inmaduras en julio
de 1989 y hojas de plntulas de uno o dos meses de edad. Se esterilizaron con
bao de etanol 70 durante 30 segundos, seguido de CLONa durante 20 minutos y
4 baos.
El medio solido se dispenso en placas de Petri de 90 mm de dimetro, y el medio
liquido en Erlenmeyer de 50 o 300 ml, con 10 o 50 ml de medio, respectivamente.
Cmo se hizo?
Experimento 1: Induccin de callo en cotiledones de embriones maduros
Los cotiledones de embriones maduros se sometieron a una inmersin de tres
horas en una solucin de 1nM de uno de los siguientes tratamientos: AIA, 2,4-D,
ANA y AIB, solos o en combinacin con BA. A continuacin, se transfirieron a
medio basal. Se emplearon 20 repeticiones por tratamiento
Experimento 2: Crecimiento de callo de cotiledn de embriones maduros
A los 30 das, la mitad de los ex plantos de callo obtenidos en los tratamientos de
induccin con ANA, 2,4-D y 2,4-D ms BA 1mM, del experimento anterior, se
transfirieron a medio slido, suplementando con uno de los siguientes reguladores
de crecimiento: BA 4,44, 2iP 4,91 M; kin 4,64 M y BA 22,2 M con ANA 5,37
M. la otra mitad se trat con un bao de una hora en una de las siguientes
soluciones: BA 0,5 mM; 2iP 0,5 mM; Kin 0,5 mM; BA 1mM con ANA 0,2mM y a
continuacin se pas a medio basal. Se emplearon entre 18 y 24 repeticiones por
tratamiento.
Experimento 3: Induccin de callo en entrenudos de tallo y fragmentos de
hoja
En el experimento 3 se usaron como explantos entrenudos de tallo y fragmentos
de hojas de plntulas germinadas en invernadero, de cuatro meses de edad. Los
entrenudos se colocaron en posicin horizontal, y los fragmentos de hoja, con el
envs hacia abajo y se cultivaron en medio solido con las combinaciones de
reguladores de crecimiento: 2,4-D 0, 4,52 y 9,04 M y BA 0, 4,44 y 22,20 M. El
callo obtenido se transfiri a medio solido con BA 44,44 M ms ANA 10,74 M.

Experimento 4: Induccin de embriognesis en vulos y embriones cigticos


inmaduros
Se emplearon como explantos vulos y embriones inmaduros recolectados el 13
de julio aproximadamente un mes y medio despus de la polinizacin, y se
sometieron a los tratamientos: BA 0,44 M, mas ANA 0,05 M; BA 4,44 M; BA
44,44 M ms ANA 10,74 M y 2,4-D 4,52 M. La mitad de los explantos se
mantuvieron en oscuridad total, la otra mitad en condiciones habituales de 16
horas de fotoperiodo. Despus de tres semanas, la mitad de los explantos de cada
tratamiento se transfirieron a medio solido fresco con la misma composicin, salvo
los tratados con BA 44,44 M y ANA 10,74 M, que se transfirieron a medio basal.
La otra mitad de los explantos se transfiri a medio basal lquido suplementado
con glutamina 3,42 mM.

RESULTADOS

Experimento 1: Induccin de callo en cotiledones de embriones maduros


Las respuestas morfolgicas a los distintos tratamientos de induccin de callo en
cotiledn de embriones maduros se recogen en la tabla 1. El 2,4-d fue regulador
de crecimiento de auxinico que mejor indujo la formacin de callo, solo o
combinado con BA. Tambin se obtuvo callo con ANA. En cambio, el AIA y el AIB
indujeron la formacin de races adventicias. (Fig. 1)

Experimento 2: Crecimiento de callo de cotiledn de embriones maduros


Los resultados de crecimiento de callo se reflejan en Tabla 2. La BA dio mejores
resultado que las otras dos citoquininas empleadas. No obstante, en ninguno de
los tratamientos de observaron respuestas organognicas.

Experimento 3: Induccin de callo en entrenudos de tallo y fragmentos de


hoja
En entrenudos de tallo y fragmentos de hojas se observ la formacin de callo por
accin del 2,4-D. La mejor concentracin fue 4,52M (Tabla 3). Este callo fue
transferido al cabo de un mes con BA44, 44 M y ANA 10,74 M, con objeto de
inducir organognesis, pero no se obtuvo ninguna respuesta.

Experimento 4: Induccin de embriognesis en vulos y embriones cigticos


inmaduros

Ocho das despus del comienzo del tratamiento se observ una abundante
proliferacin de estructuras globulares en la epidermis de vulos cultivados en
oscuridad en medio con BA 0,44 M y ANA 0,05 M (fig. 2). Tambin se observ,
pero en menor cantidad en los tratamientos con BA 4,44 M y 2,4-D 4,52 M. Los
vulos cultivados en BA 44,44 M y ANA 10,74 M no sobrevivieron.
En esta seccin se reportan los nuevos conocimientos, es decir, lo que se
encontr y debiera ser la seccin ms simple de redactar. Incluye las tablas y
figuras que, por s solas, deben poder expresar claramente los resultados del
estudio.

DISCUSION
Los resultados obtenidos en los experimentos 1 y 2 muestran que los embriones
maduros solo fueron aptos para la formacin de races adventicias, pero no pudo
obtenerse organognesis de meristemos caulinares no embriognesis en ninguno
de los tratamientos. nicamente el 2,4-D, solo o combinado con BA y el ANA
promovieron la induccin de callo, pero este no manifest ninguna potencialidad
organognica.
Los resultados del experimento No 3 que era utilizar entre entrenudos de tallo y
fragmentos de hojas se observndose la formacin de callo por accin del 2,4-D.
con objeto de inducir organognesis, pero no se obtuvo ninguna respuesta, por lo
que se deduce que este mtodo no es aplicable para esta especie.
Los resultados del experimento 4 muestran que los embriones inmaduros y vulos
no desarrollados manifestaron una buena embriognica. Este hecho coincide con
los resultados obtenidos en Quercus rubra, en el que el estado de desarrollo del
embrin juega un papel fundamental.

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

(Viitez, M, 2014) Consejo superior de investigaciones cientficas,


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Disponible
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