Cuestionario # 3

CONJUGACIN

1. Qu es un plsmido?
Los plsmidos son fragmentos extracromosmicos de cidos
nuclicos (ADN o ARN) que aparecen en el citoplasma de algunos
procariotas. Son de tamao variable aunque menor que el
cromosoma principal. Cada bacteria puede tener uno o varios a la
vez. Los plsmidos tienen una conformacin variable que puede ser
lineal, circular o con estructura superenrrollada.
Los plsmidos son molculas de DNA extracromosmico,
covalentemente cerrados y generalmente, de tamao pequeo que
se encuentran en muchas especies bacterianas y que se pueden
replicar de manera independiente del DNA cromosmico. A diferencia
de ste, los plsmidos no son necesarios para la viabilidad de la
clula, pero pueden contener genes que contribuyen a la
sobrevivencia en condiciones especiales, como los que confieren
resistencia a antibiticos o a metales,
2. Cules son los mecanismos de transferencia horizontal
de material gentico en bacterias?
La transformacin, la transduccin y la conjugacin.
3. Qu es la conjugacin?
La conjugacin bacteriana es un proceso de transferencia de material
gentico en el que la informacin gentica de un plsmido es
transferido a otra clula. Este proceso, a diferencia de la
transformacin, tiene como condicin esencial el contacto celular. A la
clula que aporta el material gentico se le llama donadora y a
aqulla que lo recibe, receptora
4. Qu diferencia existe entre la conjugacin y los otros
mecanismos de transferencia horizontal de material
gentico?
En la transformacin, el DNA liberado de una clula bacteriana entra
a otra clula, generalmente de la misma especie. En la transduccin,
un virus bacteriano accidentalmente toma DNA del cromosoma o de
un plsmido de la bacteria a la que ha infectado y lo inyecta a otras
bacterias.
5. Cules son las principales caractersticas del plsmido F
y qu genes contiene?
No todos los plsmidos pueden transmitirse por conjugacin, es decir
ser conjugativos, solamente aquellos que poseen un grupo de genes
denominados genes tra. Dentro de este grupo de plsmidos se
encuentra el factor de fertilidad o plsmido F de E. coli. El plsmido F

confiere a la clula bacteriana la capacidad de conjugarse con otra

clula que no lo posea. Este plsmido se presenta en una sola copia
por cromosoma bacteriano y tiene la capacidad de integrarse a ste.
Cuando se integra suprime su sistema de replicacin y se replica
como parte del cromosoma. El plsmido F contiene ms de 40 genes
tra, la mayora de los cuales son necesarios para la construccin de
un organelo llamado pili sexual o pili F constituido por una protena, la
pilina, codificada por uno de los genes tra. El Pili F es necesario para
promover el contacto entre las bacterias donadora y receptora y para
la formacin de un puente citoplasmtico para la transferencia del
material gentico.
6. Cules son los genes del plsmido F necesarios para la
transferencia de material gentico por conjugacin y
para qu codifican?
La transferencia se inicia a partir de un sitio especfico en el plsmido
y que forma parte de los genes tra, denominado oriT. Algunos
plsmidos no son capaces de llevar a cabo la conjugacin por s
mismos, pero pueden ser transferidos (plsmidos movilizables) a
otras bacterias cuando coexisten con plsmidos con genes tra, debido
a que contienen un grupo de genes denominados genes 32 mob, los
cuales incluyen un sitio oriT, pero carecen de otros genes necesarios
para la conjugacin, incluyendo los que codifican para la formacin
del pili.
7. De acuerdo al plsmido F cuntos tipos de cepas
bacterianas se conocen? y qu diferencia existe entre
ellas?

Cepa F- . Clula bacteriana que no posee un plsmido F, y que

acta como clula receptora en la conjugacin.
Cepa F+ . Clula bacteriana que posee un plsmido F
independiente del cromosoma bacteriano, acta como clula
donadora en la conjugacin y transfiere al plsmido F a la clula
receptora (F- ) transformndola en clula F+ .
Cepa Hfr (High frequency of recombination). Bacteria que posee
un plsmido F integrado a su cromosoma. Las cepas Hfr tienen
la capacidad de transferir porciones de su cromosoma (clula
donadora) y por ello confieren alta frecuencia de
recombinacin. No transfieren el plsmido F, por lo que al
trmino de la conjugacin la clula receptora permanece como
F- .
Cepa F. Clula bacteriana que posee un plsmido F
extracromosmico, pero que antes estuvo integrado al
cromosoma y que se escindi llevando consigo genes
bacterianos. Acta como clula donadora en la conjugacin y
transfiere el factor F junto con los genes bacterianos,
transformando a la clula receptora en una clula F , la cual
ser un diploide parcial o merocigoto. Esto quiere decir que

tendr dos copias de los genes bacterianos que estn presentes

en el plsmido F . A ese tipo de transferencia se le conoce como
sex-duccin.
8. Seale qu tipo de transconjugantes se obtienen en
cada una de las siguientes cruzas:
a) F+ X F- recombinantes
b) F X F
c) Hfr X F9. Qu caractersticas tienen las cepas empleadas en la
prctica?
10.
Por qu tanto la cepa donadora como la receptora
tienen un marcador de seleccin?
Dos genes que confieran resistencia a diferentes antibiticos, permite
la identificacin de las clulas que portan a dicho vector.
11.
Hubo crecimiento de las cepas empleadas en la
prctica en las cajas controles con antibiticos? Por qu
son importantes estas cajas control?
12.
Por qu se parchan la cepa receptora y la
transconjugante tanto en medio con estreptomicina
como kanamicina? Qu resultados se obtuvieron en
esas cajas?
13.
Cmo se comprob la conjugacin en la prctica?
Qu porcentaje de bacterias transconjugantes se
obtuvo?
14.
Cul es el genotipo de la cepa transconjugante
obtenida en la prctica?
15.
Qu diferencias existen
conjugativo y uno movilizable?

entre

un

plsmido

Algunos plsmidos no son capaces de llevar a cabo la conjugacin por

s mismos, pero pueden ser transferidos (plsmidos movilizables) a
otras bacterias cuando coexisten con plsmidos con genes tra, debido
a que contienen un grupo de genes denominados genes 32 mob, los
cuales incluyen un sitio oriT, pero carecen de otros genes necesarios
para la conjugacin, incluyendo los que codifican para la formacin
del pili.
16.
La conjugacin puede realizarse entre las
bacterias Gram positivas o slo ocurre en las bacterias
Gram negativas?
La conjugacin es el proceso por el cual las bacterias diseminan
material gentico que en este caso son los plsmidos que portan

genes (ver Fig. 3). Las bacterias pueden transferir plsmidos, que son
crculos de ADN, de formas distintas segn su tipo. En las bacterias
gram-negativas,
una
clula
donadora
produce estructuras protuberantes que son los pili, que establecen
contacto con una clula receptora. Despus del contacto, el pilos se
retrae, consiguiendo as que las bacterias donadora y receptora
queden estrechamente unidas. Suele ocurrir que muchas bacterias
donadoras despliegan sus pili al mismo tiempo y son varias las
bacterias de este tipo que pueden converger a la vez en una misma
receptora. Como consecuencia de ello, se producen agregaciones de
bacterias. A continuacin se forma un poro entre las clulas. Por dicho
poro pasa a la bacteria receptora una de las cadenas del ADN
plasmdico, regenerndose despus una molcula de cadena doble
a partir de cada una de las cadenas simples. Cuando concluye la
transferencia, las bacterias se separan. En las bacterias grampositivas la conjugacin es similar, pero para atraerse las bacterias no
utilizan pili sino seales qumicas.
17.
Con qu frecuencia y
conjugacin en forma natural?

18.

dnde

se

realiza

la

Cul es la importancia biolgica de la conjugacin?

Los plsmidos portadores de mltiples genes que codifican resistencia a diversos

agentes antimicrobianos.
19.
Indique los mecanismos por los que se da la
resistencia de las bacterias a los antibiticos utilizados
en la prctica.
20.
Qu aplicaciones tienen en su prctica profesional
o en su vida cotidiana los conceptos adquiridos al
realizar esta prctica?

Bibliografa

http://laguna.fmedic.unam.mx/~evazquez/0403/plasmidos.html
http://www.monografias.com/trabajos39/resistencia-aantibioticos/resistencia-a-antibioticos2.shtml#ixzz3RJYbsQv1
http://www.microbiologybook.org/Spanish/chapter8.htm

http://www.biologia.edu.ar/microgeneral/microianez/27_micro.htm

Elaborado por: Fragoso Aguirre Alondra Elizabeth

Equipo # 1