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UNMSM FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA E.A.P. FARMACIA Y BIOQUÍMICA MICROBIOLOGÍA GENERAL BIOPELICULAS JULIO R.
UNMSM FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA E.A.P. FARMACIA Y BIOQUÍMICA MICROBIOLOGÍA GENERAL BIOPELICULAS
UNMSM
FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA
E.A.P. FARMACIA Y BIOQUÍMICA
MICROBIOLOGÍA GENERAL
BIOPELICULAS

JULIO R. RUIZ QUIROZ

LIMA

- 2015

BIOFILMS (BIOPELÍCULAS)

En

microorganismos vive en grupos, adheridos a

mayoría de

la

naturaleza

la

superficies.

Los m.o. pueden vivir en dos estados:

Estado planctónico

Estado de biopelículas

BIOFILMS (BIOPELÍCULAS)

DEFINICIÓN E HISTORIA

BIOPELÍCULA: Una comunidad de microorganismos

inmersa en un medio líquido, caracterizada por

microorganismos que se hallan unidas a un sustrato o superficie, o unas a otras, que se encuentran embebidas en una matriz extracelular producida

por ellas mismas, y que muestran un fenotipo

alterado en cuanto al grado de multiplicación celular o la expresión de sus genes.

Clinical Microbiology Reviews 2002; 167-93

BIOFILMS (BIOPELÍCULAS)

DEFINICIÓN E HISTORIA

BIOFILMS (BIOPELÍCULAS) DEFINICIÓN E HISTORIA Fue el primero en describir la presencia de m.o . adheridos
BIOFILMS (BIOPELÍCULAS) DEFINICIÓN E HISTORIA Fue el primero en describir la presencia de m.o . adheridos
BIOFILMS (BIOPELÍCULAS) DEFINICIÓN E HISTORIA Fue el primero en describir la presencia de m.o . adheridos
BIOFILMS (BIOPELÍCULAS) DEFINICIÓN E HISTORIA Fue el primero en describir la presencia de m.o . adheridos
BIOFILMS (BIOPELÍCULAS) DEFINICIÓN E HISTORIA Fue el primero en describir la presencia de m.o . adheridos

Fue el primero en describir la presencia

de m.o . adheridos a la superficie dental

BIOFILMS (BIOPELÍCULAS)

DEFINICIÓN E HISTORIA

En los años 70’, CHARACKLIS procedió

a estudiar legamos microbianos en

sistemas de aguas industriales

Demostró su tenacidad y resistencia a diferentes desinfectantes, ej. Cloro

Luego Costerton y colaboradores, describieron la presencia de comunidades bacterianas embebidas en matriz glucoproteica unidas a superficies en contacto con el agua

Postula que las BIOPELÍCULAS podrían

ser la explicación para los mecanismos por los cuales los gérmenes se adhieren a superficies vivientes e

inertes

ser la explicación para los mecanismos por los cuales los gérmenes se adhieren a superficies vivientes

BIOFILMS (BIOPELÍCULAS)

DEFINICIÓN E HISTORIA

No hubo grandes avances en el estudio de las biopelículas hasta la aplicación del microscopio electrónico.

Microscopia electrónica de barrido

Tinciones especiales

Dos avances han incrementado la comprensión de las biopelículas:

El microscopio de láser confocal

Que ha permitido caracterizar la ultraestructura de la biopelícula

los genes

adhesión

las

La

investigación

en

de

la

involucrados

celular

y

la

formación

de

biopelículas

la biopelícula los genes adhesión las La investigación en de la involucrados celular y la formación

BIOFILMS (BIOPELÍCULAS)

Los habitantes de una biopelícula pueden pertenecer a una misma especie o a diversos grupos de microorganismos

Bacterianos

Fúngicos

Staphylococcus aureus Candida albicans
Staphylococcus aureus
Candida albicans

El

común

de

que

POLIMÉRICA

matriz

nexo

es

una

polisacáridos, ADN, y proteínas,

constituyen una SUSTANCIA EXTRACELULAR.

BIOFILMS (BIOPELÍCULAS)

La mayoría de las técnicas microbianas disponibles examinan m.o. cultivados en estado planctónico.

Se postula que el 99% de las bacterias existen bajo la

forma de biopelículas.

 

En

los

próximos

años

se

viene

UNA

NUEVA

PERSPECTIVA DE LA VIDA MICROBIANA, que tendrá

consecuencias en la investigación y desarrollo en:

La medicina

La industria

La ecología

La agricultura

en la investigación y desarrollo en: – La medicina – La industria – La ecología –
en la investigación y desarrollo en: – La medicina – La industria – La ecología –

BIOFILMS (BIOPELÍCULAS)

TAPICES MICROBIANAS EN TODAS PARTES

BIOFILMS (BIOPELÍCULAS) TAPICES MICROBIANAS EN TODAS PARTES Biopelículas formada por Bacterias, hongos y algas

Biopelículas formada por

Bacterias, hongos y algas

PARTES Biopelículas formada por Bacterias, hongos y algas Biopelícula formada por Pyrodictium En fumarolas

Biopelícula formada por Pyrodictium En fumarolas volcánicas submarinas

BIOFILMS (BIOPELÍCULAS)

TAPICES MICROBIANAS EN TODAS PARTES

BIOFILMS (BIOPELÍCULAS) TAPICES MICROBIANAS EN TODAS PARTES Biopelícula de Candida albicans B i o p e
BIOFILMS (BIOPELÍCULAS) TAPICES MICROBIANAS EN TODAS PARTES Biopelícula de Candida albicans B i o p e

Biopelícula de Candida albicans

Biopelícula polimicrobiana en tuberias Sistema de agua

FORMACIÓN DE UNA BIOPELÍCULA

FORMACIÓN DE UNA BIOPELÍCULA Comprehensive Reviews in Food Science and Food Safety. 2015;14(4):491-509.

Comprehensive Reviews in Food Science and Food Safety. 2015;14(4):491-509.

FORMACIÓN DE

UNA BIOPELÍCULA

Adherencia

Flagelos, fimbrias G (-) Adhesinas G (+)

Hay mayor adhesión en Superficies hidrofóbicas, no polarizadas como teflón o plástico

Exopolisacaridos

Alginato en P. aeruginosa

Celulosa en S. typhimurium

Glucosa y galactosa en V. cholerae Poli-N-acetil glucosamina en S. aureus

Mecanismos de desprendimiento

A) Erosión o deslizamiento

B) Separación

C) Abrasión

glucosamina en S. aureus Mecanismos de desprendimiento A) Erosión o deslizamiento B) Separación C) Abrasión

FORMACIÓN DE UNA BIOPELÍCULA DE Pseudomonas aeruginosa

FORMACIÓN DE UNA BIOPELÍCULA DE Pseudomonas aeruginosa Biomed Res Int. 2015; 2015:759348.

Biomed Res Int. 2015; 2015:759348.

BIOFILMS (BIOPELÍCULAS)

BIOPELÍCULAS EN TRACTO GASTROINTESTINAL HUMANO

(BIOPELÍCULAS) BIOPELÍCULAS EN TRACTO GASTROINTESTINAL HUMANO Journal of Applied Microbiology 102 (2007) 1187 – 1196

Journal of Applied Microbiology 102 (2007) 11871196

BIOFILMS (BIOPELÍCULAS)

El Centro para

Prevención y Control de Enfermedades (CDC), estima que aprox. entre el 60 a 70 % de las infecciones bacterianas humanas en el mundo occidental están provocadas por

biopelículas

la

el 60 a 70 % de las infecciones bacterianas humanas en el mundo occidental están provocadas

BIOFILMS (BIOPELÍCULAS)

SUPERFICIES

BIÓTICAS

SUPERFICIES

ABIÓTICAS

BIOFILMS (BIOPELÍCULAS) SUPERFICIES BIÓTICAS SUPERFICIES ABIÓTICAS

Biopelículas asociadas a infecciones

Keratitis Fibrosis asociada quística Bacilos a lente Gram de contacto (-) Endocarditis válvula prostética
Keratitis Fibrosis asociada quística Bacilos a lente Gram de contacto (-)
Endocarditis válvula prostética

BIOPELÍCULAS E INFECCIONES

Las biopelículas desempeñan un papel fundamental en la supervivencia y propagación de microorganismos.

Esto se debe a que la matriz de exopolisacáridos, actúa a modo de escudo, contra el sistema inmune (anticuerpos, leucocitos)

Son altamente resistentes a conc. elevadas de antibióticos

Una biopelícula es 10 a 1000 veces más resistente, que la misma formada por m.o. en estado planctónico

Se han desarrollado nuevos métodos para estudiar la susceptibilidad de las biopelículas, entre ellos el más conocido es el “Dispositivo de Biopelículas de Calgary”

BIOPELICULAS Y RESISTENCIA ANTIMICROBIANA

BIOPELICULAS Y RESISTENCIA ANTIMICROBIANA

BIOFILMS (BIOPELÍCULAS)

QUORUM SENSING

PERCEPCIÓN DEL QUORUM: Un sistema por el cual las bacterias se comunican y obtienen información de la densidad

bacteriana de su entorno.

 

Algunas bacterias liberan una molécula señalizadora, o inductor.

Con una densidad celular creciente aumenta la conc. de estas sustancias

Los

inductores

interaccionan

con

receptores específicos en cada célula, para activar los genes

Luego se

inicia

una

cascada

que

desencadena en la expresión o represión

de varios

genes

del

cromosoma

bacteriano.

Entre 1 -10% de los genes de un m.o. pueden estar regulados directamente por el proceso descrito.

bacteriano. • Entre 1 -10% de los genes de un m.o. pueden estar regulados directamente por

QUORUM SENSING

Las principales moléculas empleadas para comunicarse con las demás bacterias son:

Las ACIL-HOMOSERINA-LACTONAS, que predominan en bacterias Gram negativas. Los OLIGOPEPTIDOS MODIFICADOS, prevalecen en los Gram positivos.

, que predominan en bacterias Gram negativas . Los OLIGOPEPTIDOS MODIFICADOS , prevalecen en los Gram

BIOFILMS (BIOPELÍCULAS)

ESTRATEGIAS PARA EL TRATAMIENTO DE

INFECCIONES ASOCIADAS A BIOPELICULAS

Sustancias capaces de destruir la matriz de la biopelículas (ej. Dispersina B)

Sustancias que destruyan a las células persistentes

Sustancias que interfieran con el “quorum sensing ”, las enzimas quorum quenching

Sustancias que causen la autodestrucción de las biopelículas

Estrategias que ayuden a la acción del agente antimicrobiano (ej. Corriente eléctrica)

BIOPELÍCULAS

ESTUDIOS EN LA FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA

“Penetración de Vancomicina a través de biopelículas inducidas in vitro de estafilococos coagulasa negativos aislados de catéteres

provenientes de la U.C.I. del Hospital Nacional Guillermo Almenara

Irigoyen” León y col.

Aislaron 72 cepas de estafilococos coagulasa negativos de catéteres

venosos

Para determinar las cepas productoras de biopelículas usaron el agar rojo de congo.

Determinaron que el 46% de sus cepas eran formadoras de biopelículas.

Las biopelículas fueron inducidas en membranas de fluoruro de polivinilideno.

Se observó que el antibiótico vancomicina penetró en promedio un 57,5% de su conc. a través de las biopelículas, después de 6 horas de

expòsición en comparación con el 92,4% del control negativo

A las 24 horas se alcanzó 82,2% de penetración de la vancomicina

BIOPELÍCULAS

ESTUDIOS EN LA FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA

“Influencia de la N-acetil cisteína en la prevención de la formación y remoción de biopelículas de Pseudomonas aeruginosa

Cristobal y col.

Investigaron 62 cepas de Pseudomonas aeruginosa aisladas de líquidos

biológicos y secreciones del HNERM

Para determinar las cepas productoras de biopelículas usaron el agar rojo de congo.

Determinaron que el 42% de sus cepas eran formadoras de biopelículas.

La influencia de la N-acetil cisteína fue estudiada por el método de Friedman-Kolter en dos etapas

PRIMERA, durante la formación de biopelículas obteniéndose resultados favorables de disminución desde el 39% al 84%

SEGUNDA, realizada sobre biopelículas previamente formadas, obteniéndose una remoción del exopolisacárido del 14% al 77%

Se concluye que la N-ACETIL CISTEINA podría utilizarse como una

alternativa efectiva para prevenir las infecciones resistentes a la terapia antibacteriana e inh. de la formación de biopelículas

J Clin Pathol 1989;42:872-874 (ARTICULO CLÁSICO) New method for detecting slime production by coagulase negative staphylococci D J FREEMAN, et al

by coagulase negative staphylococci D J FREEMAN, et al EL MÉTODO DEL AGAR ROJO DE CONGO

EL MÉTODO DEL AGAR ROJO DE CONGO El medio fue compuesto de

Caldo de infusión cerebro corazón 37 g/L

Sucrosa 50 g/L

Agar-agar 10 g/L

Rojo de congo 0.8 g/l

50 g/L • Agar-agar 10 g/L • Rojo de congo 0.8 g/l Un resultado positivo colonias
50 g/L • Agar-agar 10 g/L • Rojo de congo 0.8 g/l Un resultado positivo colonias

Un resultado positivo colonias negras con una consistencia cristalina seca.

positivo colonias negras con una consistencia cristalina seca. Los cepas no productores usualmente permanecen rosadas

Los cepas no productores usualmente permanecen rosadas

“Actividad antiestafilocóccica y antibiopelícula de los extractos de Juglans neotropica Diels,

Piper lineatum Ruiz&Pav. y Terminalia catappa L.”

Tabla 3. DETERMINACIÓN DE LA CONCENTRACIÓN MÍNIMA INHIBITORIA DE BIOPELÍCULA

 

Partes de

Concentración Minima Inhibitoria de Biopelícula (µg/mL)

Especies de plantas

las

Tipo de

plantas

extractos

ensayadas

a

b

Staphylococcus

Staphylococcus

 

aureus

epidermidis

Juglans

C

 

neotropica

E

2000

1000

C

HA

2000

250

Piper lineatum

H

E

500

500

H

HA

500

500

Terminalia

H

E

2000

2000

catappa

 

H

HA

> 2000

2000

(a) Partes de las plantas ensayadas: C, corteza; H, hojas

 

(b) Tipo de extractos: E, etanólico; HA, hidroalcohólico

Ciencia e Investigación. 2013; 16(1): 32-37

Plaza de armas de Chachapoyas

GRACIAS

julioruizquiroz@gmail.com