ACTIVIDAD METANOGNICA ESPECFICA EN UN REACTOR

ANAEROBIO - AEROBIO APLICADO AL TRATAMIENTO DE AGUA

RESIDUAL DOMSTICA
Mlida del Pilar Anzola Rojas, Antonio Oliveira Netto y Marcelo Zaiat
RESUMEN
El ensayo de actividad metanognica especfica (AME) es
una importante herramienta para el monitoreo de la digestin
anaerobia. En este estudio se observ el comportamiento de las
arqueas metanognicas de un lodo anaerobio, bajo diferentes
condiciones de oxigenacin en un reactor anaerobio-aerobio de
lecho fijo, operado de modo continuo con diferentes razones de
recirculacin de la fase lquida para remover carbono y nitrgeno, aplicado al tratamiento de aguas residuales domsticas.

La aplicacin del ensayo AME fue adaptado de varios autores

y la medicin del metano acumulado en el reactor se realiz
mediante cromatografa gaseosa. Al finalizar los experimentos
se observ que la presencia de oxgeno no inhibi el comportamiento de los organismos metanognicos. Al contrario, la velocidad de produccin de CH4 fue mayor en comparacin con
los resultados obtenidos en la fase en que el reactor oper de
forma anaerobia.

SPECIFIC METHANOGENIC ACTIVITY IN AN ANAEROBIC-AEROBIC REACTOR APPLIED TO THE TREATMENT

OF DOMESTIC RESIDUAL WATER
Mlida Anzola Rojas, Antonio Oliveira Netto and Marcelo Zaiat
SUMMARY
The specific methanogenic activity (SMA) test is an important
tool for the monitoring of anaerobic digestion. This paper presents the behavior of the methanogenic archaea of an anaerobic
sludge under different conditions of oxygenation in a fixed-bed
anaerobic-aerobic reactor treating domestic sewage. The reactor was operated in a continuous manner under different liquid
recycle ratios from aerobic to anaerobic zones in order to re-

move carbon and nitrogen. The application of the SMA test was
adapted from several authors and the measurement of the accumulated methane in the reactor was carried out by means of
gas chromatography. Methanogenic organisms were not inhibited by the presence of oxygen. In contrast, the values of CH4
production rate by sludge exposed to oxygen were greater than
those obtained for strictly anaerobic sludge.

Introduccin

(Poetsch y Koetz, 1998). Para

que esta biomasa pueda ser
preservada y monitoreada se
torn imperativo el desarrollo
de tcnicas para la evaluacin
de la actividad microbiana de
reactores anaerobios, en particular de las bacterias metanognicas. Diversos mtodos han
sido propuestos (Chernicharo,
1997) para evaluar la actividad microbiana anaerobia a
partir de la caracterizacin
de la actividad metanognica
especfica (AME).
Inicialmente el ensayo de
AME fue utilizado para la
seleccin del lodo a inocular

Una propuesta reciente para

tratamientos de efluentes industriales y domsticos considera el reactor anaerobio
como la unidad principal de
una depuradora, no obstante generalmente se requiera
de un postratamiento para
la obtencin de los niveles
exigidos por la legislacin.
Esta propuesta deriva de un
concepto ms amplio de proteccin ambiental sostenible
y de la conservacin aplicada
para aguas residuales (Foresti
et al., 2006). Estos tratamien-

tos han sido responsables por

el cambio en las condiciones
de control y contaminacin
industrial, pues son tecnologas de bajo costo econmico
y energtico. La operacin de
estos reactores depende de un
buen control de las condiciones ambientales del proceso
fermentativo, as como del diseo del equipamiento (Poetsch y Koetz, 1998).
La biomasa anaerobia, responsable por la degradacin
de la materia orgnica de las
aguas residuales, debe ser
constantemente evaluada en
su capacidad de depuracin

(Jawed y Tare, 1999). Pero el

ensayo puede ser una importante herramienta para el estudio de procesos anaerobios,
segn varios autores (Soto et
al., 1993; Ince et al., 1995,
2001; Stewart et al., 1995;
Chernicharo, 1997; Araujo et
al., 1998; Poetsch y Koetz,
1998; Hutnan et al., 1999;
Miranda et al., 2005).
El ensayo de AME consiste
en evaluar la capacidad de los
microorganismos metanognicos en convertir substrato orgnico en CH4 y CO2. De esta
forma, a partir de cantidades
conocidas de biomasa (slidos

PALABRAS CLAVE / Actividad Metanognica Especfica / Aguas Residuales Domsticas / Digestin Anaerobia /
Recibido: 25/06/2007. Modificado: 19/02/2008. Aceptado: 20/02/2008.

Mlida del Pilar Anzola Rojas.

Ingeniera Ambiental, Universidad Manuela Beltrn, Colombia. Estudiante de Maestra
en Hidrulica y Saneamiento,
Universidade de So Paulo
(USP), Brasil.

284

Antonio Pedro Oliveira Netto.

Ingeniero Civil, Universidade
Federal de Alagoas, Brasil.
Maestro en Hidrulica y Saneamiento, USP, Brasil. Estudiante de Doctorado, USP,
Brasil.

Marcelo Zaiat. Ingeniero Qumico y Maestro en Ingeniera

Qumica, Universidade Federal
de So Carlos, Brasil. Doctor en Ingeniera Hidrulica
y Saneamiento, USP, Brasil.
Profesor, USP, Brasil. Direc-

0378-1844/08/04/284-06 $ 3.00/0

cin: Escola de Engenharia de

So Carlos (EESC), USP, Av
Trabalhador So-carlense, 400,
13566-490, So Carlos, SP,
Brasil. e-mail: zaiat@sc.usp.br

APR 2008, VOL. 33 N 4

ATIVIDADE METANOGNICA ESPECFICA EM UM REATOR ANAERBIO-AERBIO APLICADO AO

TRATAMENTO DE AGUA RESIDUAL DOMSTICA
Mlida Anzola Rojas, Antonio Oliveira Netto e Marcelo Zaiat
RESUMO
O ensaio de atividade metanognica especfica (AME) uma
ferramenta importante para o monitoramento da digesto anaerbia. Nesse artigo, foi observado o comportamento das arqueias metanognicas de um lodo sob diferentes condies de
oxigenao em um reator anaerbio-aerbio de leito fixo, operado de modo contnuo, com diferentes razes de recirculao
da fase lquida, aplicado ao tratamento de esgoto sanitrio. A
voltiles totales, SVT), bajo
condiciones establecidas, se
puede evaluar la produccin de
CH4 a lo largo de un periodo
de tiempo. Algunos mtodos
utilizados para la medicin de
la produccin de CH4 en el
ensayo de AME son desplazamiento de lquido, cromatografa gaseosa y respirometra
(Chernicharo, 1997).
En este trabajo de investigacin se estudi el comportamiento de los organismos
metanognicos bajo diferentes
condiciones de oxigenacin en
un reactor anaerobio-aerobio
de lecho fijo, operado de modo
continuo con recirculacin de
la fase lquida aplicado al tratamiento de aguas residuales
domsticas; registrando los resultados obtenidos en el ensayo
de AME en tres diferentes
fases del reactor.
Materiales y Mtodos
Reactor
Fue utilizado un reactor de
lecho fijo de flujo ascendente
con arcilla expandida y espuma
de poliuretano como soportes
de inmovilizacin de la biomasa. El lecho del reactor fue
dividido en tres compartimientos de volmenes diferentes.
En una primera fase, el reactor
fue operado de forma anaerobia. Los dos compartimientos
anaerobios fueron llenados con
arcilla expandida el primero
y con espuma de poliuretano
el segundo. En una segunda
etapa, un mdulo adicional fue
insertado en la parte superior
del reactor, precedido por una
cmara de aireacin. As, el
reactor pas a operar al mismo tiempo como anaerobio-

aerobio de lecho fijo con flujo

ascendente. En este nuevo compartimiento tambin se coloc
espuma de poliuretano para
inmovilizacin de la biomasa.
En la tercera y ltima etapa,
el reactor fue operado como
combinado anaerobio-aerobio,
con recirculacin del efluente
para la zona anaerobia, justo
encima del lecho que contiene
arcilla expandida (Figura 1).
En esta etapa experimental la
variable fue la razn de recirculacin (relacin entre el
caudal de recirculacin y el
caudal de alimentacin del
reactor). Dos razones de recirculacin (r) fueron adoptadas:
0,5 y 1,5; es decir, el caudal
de recirculacin fue igual a
la mitad del valor del caudal
de alimentacin en un primer experimento y, finalmente,
fue 50% superior al caudal de
alimentacin en un segundo
experimento.
El ensayo de actividad metanognica especfica fue realizado en tres ocasiones, la primera al final de la operacin de
la fase anaerobia del reactor de
lecho fijo y flujo ascendente, la
segunda despus de la operacin combinada anaerobia-aerobia con recirculacin a razn
de 0,5 y la tercera en el final
de la fase combinada anaerobia-aerobia con recirculacin a
razn de 1,5.
Las caractersticas de funcionamiento del reactor, presentadas por Oliveira Netto
(2007), para cada fase son presentadas en las Tablas I, II y
III. El caudal del afluente fue
de 0,59lh 1 en las tres fases
del reactor, y los caudales de
recirculacin utilizados en la
tercera fase fueron de 0,30 y
0,90lh1.

APR 2008, VOL. 33 N 4

aplicao do ensaio de AME foi adaptado de vrios autores e a

medio de metano acumulado no reator foi realizada por cromatografia gasosa. Ao final dos experimentos observou-se que
a presena de oxignio no inibiu a atividade dos organismos
metanognicos. Ao contrrio, a velocidade de produo de CH4
foi maior em comparao como os resultados obtidos na fase
em que o reator foi operado de forma anaerbia.
Durante todo el experimento
el caudal de aire inyectado no
se midi, ya que lo importante
era mantener una concentracin de O2 disuelto >1,5mgl1.
La media de la concentracin
de O2 disuelto durante todo el
periodo de operacin estuvo en
4,5mgl1.
Agua residual
El agua residual utilizada en
este estudio es la que abastece
la estacin de tratamiento de
agua residual (ETE) del Campus de la Universidad de So
Paulo (USP) en So Carlos.
Se trata de agua residual del
Campus universitario, prove-

niente del restaurante, baos,

y tambin del agua residual
domstica de los barrios Tijuco Preto y Vila So Jos, de
la ciudad de So Carlos, SP,
Brasil. Algunos residuos de
laboratorios tambin son vertidos en la red que alimenta la
ETE, pero estos valores al ser
diluidos son despreciables.
Actividad metanognica
especfica (AME)
Los ensayos fueron basados en los trabajos de Oliveira
(1997), Zaiat et al. (2000), Steil
(2001) y Vich (2006). Para las
tres ocasiones del ensayo las
espumas de poliuretano (~30

Figura 1. Reactor anaerobio-aerobio de lecho fijo y flujo ascendente con

recirculacin de la fase lquida (Oliveira Netto, 2007)

285

matrices) fueron retiradas del

reactor con ayuda de una pinza
metlica. Se tom como punto
de muestreo el tercer compartimiento de la zona anaerobia,

aparato fueron: temperatura del detector,

columna e inyector de
50C y corriente de
150mA. Para el clculo de la concentracin
del metano (mmol de
CH4/l1) se prepar una
curva de calibracin.

justo antes de la zona de aireacin (Figura 1). Las espumas

fueron colocadas en un beaker
de 80ml cubierto con plstico
expandible para evitar la conta-

Tabla I
Etapa anaerobia con tiempo de detencin hidrulica (TDH) de 8h
Parmetros

Afluente

Efluente

pH

6,65 0,17

6,69 0,11

Temperatura (C)

24,4 1,2

23,6 1,7

DQO bruta (mgl-1)

823 180

255 70

DQO filtrada (mgl-1)

275 69

159 26

Alc. total (mg CaCO3 l )

153 11

202 35

Alc. a bicarbonato (mg CaCO3 l-1)

102 15

162 27

-1

AVT (mg HAcl )

70,9 9,3

57,0 16,5

SST (mgl-1)

251,8 82,6

81,2 25,9

SSV (mgl )

31,2 15,0

4,6 5,6

-1

-1

Tomado de Oliveira Netto (2007).

Tabla II
Etapa combinada con recirculacin (r= 0,5) y
tiempo de detencin hidrulica (TDH) de 11h
Parmetros

Afluente

Efluente

pH
Temperatura (C)
DQO bruta (mgl-1)
DQO filtrada (mgl-1)
Alc. total (mg CaCO3 l-1)
Alc. a bicarbonato (mg CaCO3 l-1)
AVT (mg HAcl-1)
NT (mgl-1)
NTK (mgl-1)
NH4+ (mgl-1)
SST (mgl-1)
SSV (mgl-1)

6,93 0,22
27,6 1,6
579 121
234 43
166 16
109 16
79,2 14,4
40,0 4,7
39,9 4,7
26,9 1,5
130,0 55,2
22,5 17,2

7,37 0,28
27,6 2,2
44 17
29 7
100 55
41 24
23,9 14,3
13,6 2,4
8,1 4,2
6,0 4,0
23,9 18,1
6,1 11,4

Tomado de Oliveira Netto (2007).

Tabla III
Etapa combinada con recirculacin (r= 1,5) y
tiempo de detencin hidrulica (TDH) de 11h
Parmetros

Afluente

Efluente

pH
Temperatura (C)
DQO bruta (mgl-1)
DQO filtrada (mgl-1)
Alc. total (mg CaCO3 l-1)
Alc. a bicarbonato (mg CaCO3 l-1)
AVT (mg HAcl-1)
NT (mgl-1)
NTK (mgl-1)
NH4+ (mgl-1)
SST (mgl-1)
SSV (mgl-1)

6,98 0,18
29,9 1,4
627 319
220 36
167 23
119 20
67,8 9,3
40,1 3,1
40,0 3,1
25,3 4,2
129,2 72,0
11,6 14,2

7,42 0,15
28,2 1,9
31 10
28 10
86 38
75 36
15,6 2,8
9,9 1,3
5,9 1,6
2,2 1,1
14,8 6,4
2,0 2,8

Tomado de Oliveira Netto (2007).

286

Clculo de la AME
Los valores de las
reas obtenidas fueron convertidos por
Figura 2. Montaje de frascos de reaccin y
medio de la ecuacin
extraccin de muestra del biogs para lectura
de la recta padrn, a
en el cromatgrafo.
mmol CH4 en condiciones normales de
temperatura y presin (CNTP),
minacin. Se llev a una incues decir, a 0C (273K) y 1atm
badora a 30C por 12h, tras las
y, los valores de CH4 obtenicuales se retir la biomasa de
dos para 1ml de gas fueron
las espumas de poliuretano y se
convertidos para el headspace
virti por partes iguales en dos
de cada frasco a partir de la
frascos con volumen de 80ml
ecuacin
cada uno (Figura 2). En los
frascos se
agreg agua
residual domstica del
afluente del
reactor hasta completar el volumen lquido de cada uno (2/3
del volumen til). Se burbuje
N2 puro en el medio durante
5min para expulsar los gases
contenidos en los frascos. Posteriormente, se sellaron con tapa
de caucho y lacre metlico y
se llevaron a una incubadora a
30C con agitacin a 40rpm.
Durante los experimentos los
frascos no fueron despresurizados a fin de mantener concentraciones acumuladas del
biogs.
Determinacin de metano
Alcuotas de 1ml de biogs del interior de cada frasco
(headspace) fueron retiradas con
ayuda de una jeringa con vlvula de traba de 1,0ml (VICI Precisin Sampling) y la concentracin de CH4 medida en un cromatgrafo Gow-Mac Instrument
modelo 69, con columna porapak-Q, largo de 2,0m y dimetro interno de '', con detector
de conductividad trmica serie
15. El gas de arrastre usado fue
hidrgeno superseco. Se emple
un integrador Hewlett-Packard
modelo HP 3396 serie II. Las
condiciones de operacin del

Los datos experimentales fueron ajustados a la sigmoide de

Boltzman a travs del software
Microcal Origin 6.0 c el algoritmo de Levenberg-Marquardt,
minimizando la sumatoria de
los errores al cuadrado. Con el
mismo software, la sigmoide
ajustada fue posteriormente
derivada numricamente, a fin
de determinar las velocidades mximas de formacin de
metano (r max). Dividiendo la
velocidad mxima por la concentracin de biomasa de cada
frasco (g STV), se obtuvo la
actividad metanognica especfica (AME).
La derivada de la sigmoide
ajustada fue integrada para
determinar el rea y posteriormente la actividad metanognica media (rmed), estimndola a
partir de la ecuacin
(2)

La concentracin de la biomasa en cada frasco o slidos

totales voltiles (STV) de cada
uno fue calculada por el procedimiento descrito en APHA
(1998).

APR 2008, VOL. 33 N 4

Resultados
El ensayo de AME fue realizado en tres fases: la primera en el final de la fase anaerobia del reactor de lecho fijo
y flujo ascendente (fase 1), la
segunda en la fase combinada
anaerobia-aerobia con recirculacin a razn de 0,5 (fase 2),
y, la tercera en la fase combinada anaerobia-aerobia con
recirculacin a razn de 1,5
(fase 3).
Fase 1. Reactor anaerobio
de lecho fijo con flujo
ascendente
Los anlisis de AME fueron hechos por duplicado al
final de esta fase del reactor. Se realizaron 16 lecturas
en el cromatgrafo durante 8 das. La concentracin
de CH 4 acumulado en 176h
de experimento fueron de
1,4710 2mmoll1 para el frasco 1 y de 1,46 10 2 mmoll 1
para el frasco 2 (Figura 3).
El inicio de produccin de
CH4 se present en ~48h en
ambos frascos y la estabilizacin tuvo lugar despus de
las 132h.
Los valores de r mxima y
r media obtenidos para los dos
frascos se muestran en la Figura 4. La masa de STV para el
frasco 1 fue de 151,40mg, por
tanto la velocidad mxima fue
de 2,37106mmolCH4/mgSTVh
y la velocidad media de
7,9010 7mmolCH4 /mgSTVh.
Pa r a el f r a s c o 2 la m a sa
de ST V fue de 163,30mg,
l a ve l o c i d a d m x i m a d e
2,1410 6 mmolCH4 /mgSTVh
y la velocidad media de
7,3010 7mmolCH4/mgSTVh.
Fase 2.
Reactor operado
anaerobioaerobio con
recirculacin a razn de 0,5
Los anlisis fueron realizados por duplicado en la fase 2
del reactor, cuando fue operado
de forma combinada anaerobio-aerobio con recirculacin
a razn de 0,5. Se realizaron
19 lecturas en el cromatgrafo durante 8 das. La concentracin de CH4 acumulado en
175h de experimento fue de

Figura 3. Variacin temporal de la produccin de CH4,

fase 1. La curva es el modelo sigmoidal ajustado a los
valores experimentales ().

Figura 4. Estimacin de la actividad metanognica por el

ajuste de la expresin sigmoidal, fase 1.

2,99101mmoll1 para el frasco

1 y de 3,18101mmoll1 para el
frasco 2 (Figura 5). El inicio de
produccin de CH4 se present
en ~7h en ambos frascos y la
estabilizacin tuvo lugar despus de las 120h.
Los valores de r mxima
y r media obtenidos pa ra
los dos frascos se muestran
en la Figura 6. La masa de
STV pa ra el frasco 1 fue
de 143,70mg, por tanto la
velocidad mxima fue de
2,4110 5mmolCH4 /mgSTVh
y la velocidad media de
1,2210 5mmolCH4 /mgSTVh.
Pa ra el frasco 2 la masa
de STV fue de 163,20mg,
la velocidad mxima de

APR 2008, VOL. 33 N 4

Figura 5. Variacin temporal de la produccin de metano, fase 2. La curva es el modelo sigmoidal ajustado a
los valores experimentales ().

Figura 6. Estimacin de la actividad metanognica por

el ajuste de la expresin sigmoidal, fase 2.

2,2210 5mmolCH4 /mgSTVh

y la media de 1,17105mmolCH4 /
mgSTVh.
Fase 3.
Reactor operado
anaerobio aerobio
con recirculacin a razn
de 1,5
Los anlisis fueron hechos
por duplicado en la fase 3 del
reactor, cuando fue operado
de forma combinada anaerobio-aerobio con recirculacin
a razn de 1,5. Se realizaron
11 lecturas en el cromatgrafo
durante 5 das. La concentracin de CH 4 acumulado
en 100h de experimento fue

de 8,1210 2 mmoll 1 para el

frasco 1 y de 1,02101mmoll1
para el frasco 2 (Figura 7). El
inicio de produccin de CH4
se present en ~5h en los dos
frascos y la estabilizacin despus de las 53h.
Los valores de r mxima
y r media obtenidos pa ra
los dos frascos se muestran
en la Figura 8. La masa de
STV pa ra el frasco 1 fue
de 260,40mg, por tanto la
velocidad mxima fue de
1,1110 5mmolCH4 /mgSTVh
y la velocidad media de
1,0010 6mmolCH4 /mgSTVh.
Pa r a el f r a s c o 2 la m a s a
de ST V f ue de 113,70mg,
la velocidad mxima de

287

2,11105mmolCH4/mgSTVh y la
media fue de 1,13105mmolCH4/
mgSTVh.
Discusin
En la Tabla IV se presentan los valores medios de la
produccin mxima y media
de CH 4 pa ra cad a u na de
las tres fases del reactor en
que fue realizado el ensayo
AME, a fin de facilitar el
anlisis de los resultados.
Los resultados muestran
que el contenido de O 2 disuelto no a fe ct la met anognesis, al contrario, aument la velocidad y mejor
la produccin de CH4. Esto
puede ser explicado por el
aumento de la variedad microbia na ex istente en ese
compartimiento del reactor.
Despus de la insercin de
O 2 en el medio, microorganismos que no habitaban en
ese compartimiento pasaron
a existir con las nuevas condiciones impuestas.
Una pr i mer a h ip t esis
para explicar este comportamiento podra ser que con
la recirculacin de la fase
lquida aumentara el contenido de bacterias facultativas en la zona anaerobia del
reactor, ubicndose as para
proteger las bacterias estrictas anaerobias del O2 disuelto. Una segunda hiptesis
podra ser que al aumentar
la cantidad de bacterias facultativas, las cuales tienen
tasas de crecimiento mayores, incrementaran la velocidad de la hidrlisis, mejorando as las fases siguientes
de la digestin anaerobia:
acidognesis, acetognesis y
metanognesis.
Estas dos hiptesis se pueden sustentar con comportamientos similares de los
microorganismos en cuanto
a produccin de CH 4 , bajo
condiciones diferentes para
su crecimiento y desarrollo,
en este caso el soporte.
Se observ un gran aumento en la produccin mxima
y media de CH4 en la fase 2
y 3 con respecto a la fase 1,
hecho que puede ser explicado siguiendo a Shen y Guiot
(1996), quienes estudiaron el

288

impacto del O2
disuelto sobre
la actividad
de g r nulos
anaerobios,
asumiendo los
grnulos como
un tipo de biofilm.
Se podra hacer una analoga, segn Shen
y Guiot (1996)
bajo concentraciones limitadas
de O2, mientras
los microorganismos aerobios
respiran ellos
pueden mantener condiciones
muy bajas de
O 2 disuelto en
un sistema cocultivado anaerobio-aerobio, Figura 7., Variacin temporal de la produccin de meevitando as una tano, fase 3. La curva es el modelo sigmoidal ajustado
eventual inhibi- a los valores experimentales ().
cin de los microorganismos
anaerobios. Las
bacterias facultativas son predominantes en
el lecho perimetral del biofilm,
mientras que las
metanognicas
se sitan en el
centro. Las primeras, sobre el
permetro, adquieren la capaFigura 8. Estimacin de la actividad metanognica
cidad de limipor el ajuste de la expresin sigmoidal, fase 3.
tar eficazmente
la penetracin
difusiva de O 2 y prevenir el
en el interior puedan sobrevivir
O 2 txico para las bacterias
en ambientes ricos en O2.
metanognicas, situadas en el
En comparacin con el trainterior del biofilm y que son
bajo de Shen y Guiot (1996),
sensibles al mismo. De esta
el crecimiento de los micromanera, la estructura espacial
organismos y formacin del
es considerada como una clave
biofilm sobre los soportes
fundamental para que las bacutilizados en el reactor del
terias metanognicas situadas
presente estudio es diferenTabla IV
Valores medios de la produccin mxima
y media de CH4
Fase de operacin
del reactor
Fase 1
Fase 2
Fase 3

Valores medios
r max (mmol/mg.h)
r med (mmol/mg.h)
2,2510 -6
2,3110 -5
1,6110 -5

7,6010 -7
1,1910 -5
7,6710 -6

te, debido a la porosidad de

la arcilla expandida y a la
espuma de poliuretano. Sin
embargo, la ptima tolerancia
de las anaerobias al O2 podra
ser atribuida a la presencia de
bacterias facultativas y aerobias en el lodo, ubicadas sobre
los soportes de modo tal que
formen un gradiente de O 2 ,
evitando el contacto de ste
con las bacterias anaerobias.
Los resultados del estudio de
Estrada et al. (2001) sugirieron
que el consorcio de organismos
anaerobios/metanognicos tuvieron una resistencia especial,
pequea o nula al O2 , y que
esta tolerancia se debe principalmente a la proteccin que
ejercieron las bacterias facultativas que lograron reducir el
O2 disuelto en la fase lquida.
El decrecimiento de la produccin de CH4 en la fase 3
con respecto a la fase 2, puede
ser explicado tambin con una
analoga, ya que como se dijo
anteriormente no se utilizaron
grnulos durante estos experimentos. Segn Kato et al.
(1997), no obstante, a pesar
de la no-toxicidad del O 2 a
los cultivos mixtos naturales,
en los lodos granulares usados
en el tratamiento de aguas residuales todava hay una preocupacin en cuanto a la competencia por el substrato entre
las arqueas metanognicas y
las bacterias facultativas. Si el
reactor fuera alimentado con
exceso de O2, el substrato sera
consumido por las bacterias
facultativas, puesto que tienen
actividades y tasas de crecimiento especficas mucho ms
altas que las metanognicas.
Estas ltimas, sin el acceso al
substrato, quedaran fuera de
competencia.
Al elevar la razn de recirculacin de 0,5 a 1,5 en la fase
3, el contenido de O2 disuelto
aument y probablemente el
substrato fue consumido rpidamente por las bacterias facultativas, creando una ventaja
de crecimiento sobre las metanognicas y una inhibicin
sobre stas.
Se observ un aumento de
velocidad en el inicio y estabilizacin de produccin de CH4
en los anlisis de las fases 2 y
3 del reactor; lo que tambin

APR 2008, VOL. 33 N 4

enfatiza el hecho que las bacterias facultativas tienen actividades y tasas de crecimiento
especficas mucho mas altas
que las arqueas metanognicas
(Kato et al., 1997), probablemente acelerando as las etapas
anteriores a la metanognesis.
Conclusiones

El ensayo de actividad metanognica especfica fue una

herramienta eficiente para el
monitoreo del comportamiento
de las bacterias en el reactor
anaerobio-aerobio de lecho
fijo, operado de modo continuo
con recirculacin de la fase
lquida.
AGRADECIMIENTOS

La presencia de O2 disuelto en la zona anaerobia del

reactor cuando la fase lquida
fue recirculada no inhibi la
metanognesis. Por el contrario la produccin de metano
fue mayor.
El lodo mantuvo buena
actividad metanognica en
las fases 2 y 3, demostrando
que el reactor funcionando en
fase anaerobio-aerobio puede
ser operado con xito para
mantener tanto a las bacterias
anaerobias estrictas, como a
las aerobias, al mismo tiempo, en condiciones existentes
de O2 disuelto en el fluido de
recirculacin.
El impacto no negativo
del O2 disuelto en el afluente
sobre las arqueas estrictas
anaerobias, indica una probable presencia de bacterias
facultativas formando una estructura protectora para estas
bacterias anaerobias.
Los resultados sugieren que
aunque el O2 disuelto fue inhibitorio para las bacterias
metanognicas en el reactor
anaerobio-aerobio; cuando la
razn de recirculacin fue
un 50% mayor que el caudal
de alimentacin, la tasa de
produccin de CH4 fue mejor
que en la fase anaerobia.

Los autores agradecen a la

FAPESP (Fundao de Amparo Pesquisa do Estado de
So Paulo, Brasil) por el soporte financiero a este trabajo.
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