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UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS

FACULTAD DE QUMICA, INGENIERA QUMICA E


INGENIERA AGROINDUSTRIAL

Escuela Acadmico Profesional de Ingeniera Qumica (07.2)


Departamento Acadmico de Qumica Orgnica
LABORATORIO DE QUIMICA ORGANICA

PRACTICA N 10
BIOMOLCULAS: CARBOHIDRATOS - PROTENAS
HORARIO: Viernes: 9-1pm
PROFESOR: Mg. Thais Cleofe Linares Fuentes
FECHA DE REALIZACION: 19 de junio de 2015
FECHA DE ENTREGA: 26 de junio de 2015
INTEGRANTES:
-

Contreras Mario, Eric


Retegui Pascasio, Israel
Palomino Zelaya, Claudia

14070029
14070188
14070174

Ciudad
Universitaria,
Junio de 2015

RESUMEN

En este trabajo estudiaremos las reacciones de identificacin de los carbohidratos,


as como sus colores caractersticos.
En la parte de protenas indagaremos sobre la reaccin de Biuret y las reacciones
de desnaturalizacin de protenas.

INTRODUCCIN
Los carbohidratos son los compuestos ms abundantes en la naturaleza. Casi
todas las plantas y animales sintetizan carbohidratos y los emplean para
almacenar energa y suministrarla a sus clulas. Se encuentran en forma libre o
ligadas a cualquier clula vegetal o bacteriana. Las plantas almacenan energa
convirtiendo la glucosa en almidn, mientras que los animales almacenan energa
convirtiendo la glucosa en glucgeno.
La qumica de los carbohidratos es una de las reas ms interesantes de la
qumica orgnica. El trmino carbohidrato surgi porque los azcares tienen
frmulas moleculares interesantes, Cn(H2O)m, que indican que los tomos de
carbono estn combinados con molculas de agua de alguna forma; por ello se les
dio el nombre de hidratos de carbono o carbohidratos. La definicin moderna
comprende los polihidroxialdehdos, polihidroxicetonas y compuestos que por
hidrlisis los forman.
Por crucial que resulte la generacin de energa, no es la nica funcin de los
carbohidratos, muchos materiales estructurales biolgicos son polmeros de
carbohidratos como la celulosa de las plantas, las paredes celulares de las
bacterias y los exoesqueletos de los insectos y artrpodos. Los carbohidratos son
molculas biolgicas muy verstiles en sus tamaos, hay monosacridos,
oligosacridos y polisacridos, as como en su estructura qumica y sus
propiedades.

OBJETIVOS

Identificar a los carbohidratos con diferentes reacciones.


Desnaturalizar a las protenas.
Realizar la reaccin de Biuret.

PARTE TERICA
Los glcidos, carbohidratos, hidratos de carbono o sacridos son biomolculas
compuestas por carbono, hidrgeno y oxgeno, cuyas principales funciones en los
seres vivos son el prestar energa inmediata y estructural. La glucosa y
el glucgeno son las formas biolgicas primarias de almacenamiento y consumo
de energa; la celulosa cumple con una funcin estructural al formar parte de
la pared de las clulas vegetales, mientras que la quitina es el principal
constituyente del exoesqueleto de los artrpodos.
El trmino "hidrato de carbono" o "carbohidrato" es poco apropiado, ya que estas
molculas no son tomos de carbono hidratados, es decir, enlazados a molculas
de agua, sino que constan de tomos de carbono unidos a otros grupos
funcionales como carbonilo e hidroxilo. Este nombre proviene de la nomenclatura
qumica del siglo XIX, ya que las primeras sustancias aisladas respondan a la
frmula elemental Cn(H2O)n (donde "n" es un entero 3). De aqu que el trmino
"carbono-hidratado" se haya mantenido, si bien posteriormente se demostr que
no lo eran. Adems, los textos cientficos anglosajones an insisten en
denominarlos carbohydrates lo que induce a pensar que este es su nombre
correcto. Del mismo modo, en diettica, se usa con ms frecuencia la
denominacin de carbohidratos.
Los glcidos pueden sufrir reacciones de esterificacin, aminacin, reduccin,
oxidacin, lo cual otorga a cada una de las estructuras una propiedad especfica,
como puede ser solubilidad.

TIPOS DE CARBOHIDRATOS
MONOSACRIDOS
Los glcidos ms simples, los monosacridos, estn formados por una
sola molcula; no pueden ser hidrolizados a glcidos ms pequeos. La frmula
qumica general de un monosacrido no modificado es (CH 2O)n, donde n es
cualquier nmero igual o mayor a tres, su lmite es de 7 carbonos. Los
monosacridos poseen siempre un grupo carbonilo en uno de sus tomos de
carbono
y
grupos hidroxilo en
el
resto,
por
lo
que
pueden
considerarse polialcoholes. Por tanto se definen qumicamente como
polihidroxialdehdos o polihidroxicetonas.
Los monosacridos se clasifican de acuerdo a tres caractersticas diferentes: la
posicin del grupo carbonilo, el nmero de tomos de carbono que contiene y
su quiralidad. Si el grupo carbonilo es un aldehdo, el monosacrido es
una aldosa; si el grupo carbonilo es una cetona, el monosacrido es una cetosa.
Los monosacridos ms pequeos son los que poseen tres tomos de carbono, y
son llamados triosas; aquellos con cuatro son llamados tetrosas, lo que poseen
cinco son llamados pentosas, seis son llamados hexosas y as sucesivamente.
Los sistemas de clasificacin son frecuentemente combinados; por ejemplo,
la glucosa es una aldohexosa (un aldehdo de seis tomos de carbono),
laribosa es una aldopentosa (un aldehdo de cinco tomos de carbono) y
la fructosa es una cetohexosa (una cetona de seis tomos de carbono).
Cada tomo de carbono posee un grupo de hidroxilo (-OH), con la excepcin del
primero
y
el
ltimo
carbono,
todos
son asimtricos,
hacindolos
centros estricos con dos posibles configuraciones cada uno (el -H y -OH pueden
estar a cualquier lado del tomo de carbono). Debido a esta asimetra, cada
monosacrido posee un cierto nmero deismeros. Por ejemplo la aldohexosa Dglucosa, tienen la frmula (CH 2O)6, de la cual, exceptuando dos de sus seis
tomos de carbono, todos son centros quirales, haciendo que la D-glucosa sea
uno de los estereoismeros posibles. En el caso del gliceraldehdo, una aldotriosa,
existe
un
par
de
posibles
esteroismeros,
los
cuales
son enantimerosy epmeros (1,3-dihidroxiacetona, la cetosa correspondiente, es
una molcula simtrica que no posee centros quirales). La designacin D o L es
realizada de acuerdo a la orientacin del carbono asimtrico ms alejados del
grupo carbonilo: si el grupo hidroxilo est a la derecha de la molcula es un azcar

D, si est a la izquierda es un azcar L. Como los D azcares son los ms


comunes, usualmente la letra D es omitida.
CICLACIN

Ciclacin de la glucosa.

El grupo aldehdo o cetona en una cadena lineal abierta de un monosacrido


reaccionar reversiblemente con el grupo hidroxilo sobre un tomo de carbono
diferente en la misma molcula para formar un hemiacetal o hemicetal, formando
un anillo heterocclico, con un puente de oxgeno entre los dos tomos de
carbono. Los anillos con cinco y seis tomos son llamados
formas furanosa y piranosa y existen en equilibrio con la cadena lineal abierta.
Durante la conversin de la forma lineal abierta a la forma cclica, el tomo de
carbono conteniendo el oxgeno carbonilo, llamado el carbono anomrico, se
transforma en un centro quiral con dos posibles configuraciones: el tomo de
oxgeno puede tomar una posicin arriba o abajo del plano del anillo. El par de
estereoismeros resultantes son llamados anmeros. En el -anmero, el -OH
sustituyente sobre el carbono anomrico se encuentra en el lado opuesto del anillo
(posicin trans) a la cadena CH 2OH. La forma alternativa, en la cual el sustituyente
CH2OH y el grupo hidroxilo sobre el carbono anomrico estn en el mismo lado
(posicin cis) del plano del anillo, es llamado -anmero. Como el anillo y la forma
abierta se interconvierten, ambos anmeros existen en equilibrio.
DISACRIDOS

Hidrlisis de la Lactosa. 1.Galactosa. 2. Glucosa.

Los disacridos son glcidos formados por dos molculas de monosacridos y, por
tanto, al hidrolizarse producen dos monosacridos libres. Los dos monosacridos
se unen mediante un enlace covalente conocido como enlace glucosdico, tras
una reaccin de deshidratacin que implica la prdida de un tomo de hidrgeno
de un monosacrido y un grupo hidroxilo del otro monosacrido, con la
consecuente formacin de una molcula de H 2O, de manera que la frmula de los
disacridos no modificados es C12H22O11.
Algunos disacridos comunes son:

Sacarosa. Es el disacrido ms abundante y la principal forma en la cual los


glcidos son transportados en las plantas. Est compuesto de una molcula
de glucosa y una molcula de fructosa. El nombre sistemtico de la sacarosa ,
O--D-glucopiranosil-(12)- -D-fructofuransido, indica cuatro cosas:

Sus monosacridos, glucosa y fructosa.

Disposicin de las molculas en el espacio: La glucosa adopta la


forma piranosa y la fructosa una furanosa.

Unin de los monosacridos: el carbono anomrico uno (C1) de glucosa est enlazado en alfa al C2 de la fructosa formando 2-O-(alfa-Dglucopiranosil)-beta-D-fructofuranosido y liberando una molcula de agua.

El sufijo -sido indica que el carbono anomrico de ambos


monosacridos participan en el enlace glicosdico.

Lactosa. Es el azcar de la leche. Es un disacrido compuesto por una


molcula de galactosa y una molcula de glucosa; est presente de modo
natural solo en la leche. El nombre sistemtico para la lactosa es O--Dgalactopiranosil-(14)-D-glucopiranosa.

Maltosa. Es un disacrido formado por dos glucosa con enlace -1,4; se


obtiene de la hidrlisis del almidn.

Celobiosa. Es un disacrido formado dos glucosa con enlace -1,4; se


obtiene de la hidrlisis de la celulosa.

OLIGOSACRIDOS

Estaquiosa, tetrasacrido formado por una glucosa, dosgalactosas y una fructosa.

Los oligosacridos estn compuestos por tres a nueve molculas de


monosacridos2 que al hidrolizarse se liberan. No obstante, la definicin de cuan
largo debe ser un glcido para ser considerado oligo o polisacrido vara segn los
autores. Segn el nmero de monosacridos de la cadena se tienen
los disacaridos (como la lactosa ), tetrasacrido (estaquiosa), pentasacridos, etc.
Los oligosacridos se encuentran con frecuencia unidos a protenas, formando
las glucoprotenas, como una forma comn de modificacin tras lasntesis
proteica. Estas modificaciones post traduccionales incluyen los oligosacridos de
Lewis, responsables por las incompatibilidades de losgrupos sanguneos,
el eptope alfa-Gal responsable del rechazo hiperagudo en xenotrasplante y OGlcNAc modificaciones.
POLISACRIDOS

Amilopectina.

Los polisacridos son cadenas, ramificadas o no, de ms de diez monosacridos,


resultan de la condensacin de muchas molculas de monosacridos con la
prdida de varias molculas de agua. Su frmula emprica es: (C 6 H10 O5)n. Los
polisacridos representan una clase importante de polmeros biolgicos y su
funcin en los organismos vivos est relacionada usualmente con estructura o
almacenamiento.
El almidn es la manera en que las plantas almacenan monosacridos; es una
mezcla de dos polmeros de glucosa, la amilosa y laamilopectina (ramificada).
Los animales usan el glucgeno en vez de almidn el cual es estructuralmente
similar pero ms densamente ramificado. Las propiedades del glucgeno le
permiten ser metabolizado ms rpidamente, lo cual se ajusta a la vida activa de
los animales con locomocin.
La celulosa y la quitina son ejemplos de polisacridos estructurales. La celulosa
forma la pared celular de plantas y otros organismos y es la molcula orgnica
ms abundante de la Tierra. La quitina tiene una estructura similar a la celulosa,
pero tiene nitrgeno en sus ramas incrementando as su fuerza; se encuentra en
el exoesqueleto de losartrpodos y en las paredes celulares de muchos hongos.
Otros polisacridos incluyen la calosa, la laminarina, la maltodextrina, el xilano y
la galactomanosa.p
PROTENAS
Las protenas (del francs protine,
y
este
del griego [proteios],
prominente, de primera calidad) o prtidos son molculas formadas por cadenas
lineales de aminocidos.

Por sus propiedades fsico-qumicas, las protenas se pueden clasificar en


protenas simples (holoproteidos), formadas solo poraminocidos o sus derivados;
protenas conjugadas (heteroproteidos), formadas por aminocidos acompaados
de sustancias diversas, y protenas derivadas, sustancias formadas
por desnaturalizacin y desdoblamiento de las anteriores. Las protenas son
necesarias para la vida, sobre todo por su funcin plstica (constituyen el 80 %
del protoplasma deshidratado de toda clula), pero tambin por sus
funciones biorreguladoras (forman parte de las enzimas) y de defensa
(los anticuerpos son protenas).
Las protenas desempean un papel fundamental para la vida y son
las biomolculas ms verstiles y diversas. Son imprescindibles para el
crecimiento del organismo y realizan una enorme cantidad de funciones diferentes,
entre las que destacan:

Estructural. Esta es la funcin ms importante de una protena


(Ej: colgeno)

Inmunolgica (anticuerpos)

Enzimtica (Ej: sacarasa y pepsina)

Contrctil (actina y miosina)

Homeosttica: colaboran en el mantenimiento del pH (ya que actan como


un tampn qumico)

Transduccin de seales (Ej: rodopsina)

Protectora o defensiva (Ej: trombina y fibringeno)

Las protenas estn formadas por aminocidos.

Produccin de costras (ej:fibrina).

Las protenas de todos los seres vivos estn determinadas mayoritariamente por
su gentica (con excepcin de algunos pptidos antimicrobianos de sntesis no
ribosomal), es decir, la informacin gentica determina en gran medida qu
protenas tiene una clula, un tejido y un organismo.

Las protenas se sintetizan dependiendo de cmo se encuentren regulados


los genes que las codifican. Por lo tanto, son susceptibles a seales o factores
externos. El conjunto de las protenas expresadas en una circunstancia
determinada es denominado proteoma.

PARTE EXPERIMENTAL

A) CARBOHIDRATOS
A.1) PRUEBA DE MOLISCH
Se coloc, en 4 tubos de ensayo, 1 mL de sacarosa, glucosa, fructuosa al
10% y almidn 1% a cada uno. Aadimos 2 gotas de reactivo de Molisch y
mezclamos bien, posteriormente por las paredes agregamos 1 mL de
H 2 S O 4 (cc) .
Al ver la formacin de un anillo de color violeta en la interfase indicar
reaccin positiva para carbohidratos.
A.2) PRUEBA DE LUGOL
Acidificamos a una muestra de almidn con 1 mL de HCl (cc) y aadimos 1 o
2 gotas de solucin de Lugol. Al ver la formacin de un color azul intenso
nos indicara la presencia de almidn.
A.3) PRUEBA DE FERMENTACIN
Disolvemos 1,2 g de levadura en 18 mL de agua en un mortero. Luego
adicionamos 12 g de harina sin preparar y homogenizamos
adecuadamente. Transferimos esta masita a una probeta de 100 mL.

B) PROTENAS
B.1) REACCIN DE BIURET
En un tubo de ensayo se coloc 2 mL de solucin de albmina con 3 mL de
NaOH al 10% y agregamos gota a gota la solucin de CuSO 4 al 5 % hasta
obtener un color prpura.
B.2) REACCION CON NIHIDRAZINA
En un tubo de ensayo se coloc 1ml de muestra de ovoalbmina y se
aadi 10 gotas de CuSO4. Finalmente agregados 5 gotas de NaOH .
REACCION XANTOPROTEICA
En un tubo de ensayo se coloco 2 ml de ovoalbmina y se aadi 20 gotas
de HNO3 y se llev a bao Maria.
Se dej enfria para agregar NH4OH

B.2) REACCIONES DEDESNATURALIZACIN DE PROTENAS


En 4 tubos de ensayo se coloc 2 mL de solucin de ovoalbmina y se
realizo lo siguiente:
Adicionamos H 2 S O4 (cc) .
Calentamiento por 1 minuto
Adicionamos 1 mL de etanol.
Adicionamos 0,5 mL de CuSO4

RESULTADOS Y DISCUSIN DE RESULTADOS

Prueba de Molisch

Este ensayo es para reconocimiento general de carbohidratos en donde los


polisacridos y disacridos se hidrolizan (ruptura del enlace glucosdico)
con cido sulfrico concentrado hasta monosacridos, que se siguen
hidrolizando hasta convertirse en furfural o derivados de furfural (5hidroximetilfurfural). Estos productos luego se combinan con el agente
condensante que posibilita la aparicin del color: -naftol, quien a su vez
reacciona en presencia del cido sulfrico (sulfonndose dos veces) y
genera un complejo prpura.
SECUENCIA DE LA REACCIN DE UN CARBOHIDRATO CON MOLISH
GLUCOSA (A PARTIR DE LA HIDRLISIS DE SACARAROSA)

FRUCTUOSA (A PARTIR DE SACAROSA)

2 Prueba de Lugol
El reactivo de Lugol que contiene una mezcla de yodo y
yoduro, permite reconocer polisacridos, particularmente el
almidn por la formacin de una coloracin azul- violeta
intensa y el glicgeno y las dextrinas por formacin de
coloracin roja.

3 Prueba de fermentacin

En esta prueba se determina la capacidad de un microorganismo para


fermentar (degradar) un hidrato de carbono especfico incorporado en un
medio basal y producir cido o cido con gas visible.
La fermentacin es un proceso metablico anaerobio de xido-reduccin,
en el cual el sustrato orgnico acta como el aceptor final de hidrgeno
(aceptor de electrones) en lugar de oxgeno. El proceso de fermentacin
ms comn produce como producto final cido lctico. Las levaduras
pueden fermentar diferentes azucares como glucosa, sacarosa, maltosa y
lactosa.
Se realiz una prueba paralela, en la que se observa la fermentacin en
una probeta graduada solo con levadura y en otra probeta, levadura y
azcar. Aumentando un poco la temperatura se observa que en la probeta a
la que se agreg azcar, el volumen de la mezcla aumenta
progresivamente y en mayor proporcin que la levadura que sola se
encuentra en la otra probeta.

B: PROTENAS

1. Reaccin de Biuret
CON2H4 + Calor ---- NH3 + NH2CONHCONH2
Biuret

Se observo la formacion de un complejo de color violeta, al agregar el medio


basico que en este caso fue NaOH. En la experiencia utilizamos este reactivo con
una concentracion menor es por eso que la coloracion sale mas tenue que la usual

2. Reaccin con nihidrina


Mientras se calentaba en
bao maria , la ovoalbmina
fue tomando un color mas oscuro hasta obtener el color naranja de la imagen ,
pero segn referencias bibliogrficas el color debio ser amarillo.

3.

Desnaturalizacin de las

protenas

-Al agregar cido


concentrado (cido
sulfrico) en la
muestra, se nota un
precipitado blanco que indica la desnaturalizacin de la protena.
-Al darse el calentamiento se observa la coagulacin de la albmina,
la temperatura a la que se dio la coagulacin fue de 80C.
-Al adicionar el solvente orgnico (cloroformo), no hubo cambio
aparente ya que la protena se disolvi por ser un compuesto
orgnico.
-Al adicionar el CuSO4 se forma precipitado. La reaccin es:

Biuret, a,b,c y d respectivamente

CONCLUSIONES

El ensayo de Mollish es una prueba que permite reconocer y diferenciar


glcidos llevndolos a monosacridos y estos luego convertidos a furfural o
derivados de ellos.
La precipitacin de protenas por calentamiento coagulacin es
caracterstica casi para todas las protenas.
La reaccin de biuret es un mtodo que se basa en la capacidad del grupo
peptdico de las protenas y polipptidos de formar con lo iones Cu 2+ un
compuesto complejo de color violeta con matices de color rojizo o azulado.
La desnaturalizacin de protenas es consecuencia de algn factor externo
como acidez del medio, temperatura, etc. Es importante saber que la
desnaturalizacin de una protena no afecta a lo que se conoce cmo
estructura primaria, esto es, la secuencia de aminocidos base de la
protena.

RECOMENDACIONES

Medir el tiempo cuando se pone las sustancias en el bao maria , ya que si es un


polisacridos y se pone por un prolongado tiempo , se puede romper los enlaces
formndose solo monosacridos , dndonos un falso positivo para las muestras .

Lavar los tubos de ensayo para que no tengan impurezas ni suciedad ya que esto
puede afectar en la reaccin.

Cuando se trabaje con las sustancias, ver que no tengan ningn contaminante ya
que esto puede hacer que la reaccin falle o no salga.

Tener cuidado con algunos reactivos ya que pueden ser txicos cuando tiene alta
concentracin.

BIBLIOGRAFA

CUEVA LEON GOMEZ FORUSARI,


ExperimentoS de qumica orgnica.

L.G. WADE, Jr. Quimica Organica (Tomo II).Quinta Edicion Pearson


Prentice Hall., -Mexico.
G. PONS MUZZO, D. BINDA ARANDA
Quimica Organica. ED. Universo SA , - Lima.