CONTENIDO N 1. TCNICAS HISTOLGICAS.

Congelamiento:

Ese proceso histolgico normalmente se hace para

la investigacin o para el diagnostico en tejidos muertos;

El

isopentano

el

nitrgeno lquido.

los proveedores de esos tejidos pueden ser personas vivas,

Criodesecacin: Se congela rpidamente

sin embargo, el tejido ya una vez que nosotros los tenemos

con nitrgeno y luego se va disecando como

esta muerto.

en un bao de Mara, lo meten en una bomba

de vapor y empiezan a sacarle esa agua al

Se hacen entonces cortes histolgicos, estos

tejido ya congelado.
Criosustitucin: Consiste en ir congelando

cortes histolgicos son finos, tan finos como 5 micras.

de manera lenta y graduada el tejido y se va

Hay algunos tejidos cuyos cortes se hacen un

mezclando con alcohol etlico, acetona y

poco ms delgados como por ejemplo, medula sea,

propilenglicol (refrigerante que usan los

ganglios y hay algunos tejidos que aceptan que puedan ser

carros).

un poco ms gruesos tales por ejemplo, como el msculo,

La fijacin impide la autolisis que tiene que ver sobre

como el nervio que pueden llegar a ser entre 8 y 10 micras

el propio tejido y la putrefaccin que tiene que ver

y todava uno puede ver bien, si embargo, se estima hacer

sobre el ambiente actuando sobre ese tejido.

los cortes en Amrica latina en 5 micras, 5 veces la

2.

millonsima parte del metro.

DESHIDRATACIN: Se extrae el agua del tejido

para realizar un corte adecuado y se coloca primero
alcohol al 50% y despus, luego con alcohol al 100%.

Entonces, hacemos investigacin de tejidos

muertos sea por biopsia o por autopsia y eso se llama
3.

cortes histolgicos.

ACLARAMIENTO: Y luego al tejido se le trata con

Xileno (sustancia qumica que hace que el tejido se
torne transparente).

PREPARACIN DE LOS TEJIDOS (Microscopia

ptica).
4.

Se compone de los siguientes pasos:

1.

INCLUSIN: Se distingue entre si las clulas

FIJACIN: Tratamiento del tejido con sustancias

superpuestas en un tejido y la matriz extracelular, el

qumicas que retardan las alteraciones hiticas y no

histlogo

alteran su configuracin.

INCLUSIN ES LA PARAFINA. Se coloca en un

Existen 2 mtodos para fijar:

recipiente adecuado con parafina fundida hasta que se

secciona

el

tejido.

MEDIO

DE

formalina

infiltra. Cuando el tejido se impregna con parafina se

amortiguada y fijador de Bouin (estas permiten

coloca en un recipiente pequeo, y se deja que la

el entrecruzamiento de las protenas y por tanto

parafina se enfre, y se deja endurecer.

Mtodo

Qumico:

Se

utilizan

conservan una imagen del tejido similar al

vivo).

Mtodo Fsico:

5.

SECCIN: Los bloques de parafina se van a

seccionar. Este se cortara con un micrtomo (un
equipo con un brazo y una hoja). Los cortes
HECHO POR: PATRICIA CORREA

efectuados sern de 5 a 10 m. Luego los cortes se

montan y se tien con colorantes especficos.
6.

MONTAJE: Se colocan los cortes en portaobjetos de

vidrio.

7.

TINCIN: Enseguida se tien con colorantes

hidrosolubles que permiten diferenciar los diversos
componentes celulares. Primero debe de eliminarse

III.

TRICROMICA DE MASSON:
Azul oscuro: Ncleo.

por completo la parafina del corte, despus se

Rojo: musculo, queratina y citoplasma.

rehidrata y se tie el tejido. Los colorantes son:

Azul claro: mucingeno, colgena.

I.

HEMATOXILINA Y EOSINA (H y E):

HEMATOXILINA: Base que tie de manera
preferencial los componentes
cidos de la clula en color
azul y violeta.
DNA y RNA.
NUCLEO.
CITOPLASMA (rico en

IV.

COLORANTE DE ORCEINA PARA FIBRAS

ELASTICAS:

ribosomas).

Pardo: Fibras elasticas.

A estos componentes se les

denomina BASOFILICOS.
EOSINA: cido que
tie los componentes
bsicos de la clula
en color rosado o
rojizo.

Se

le

denomina elementos
ACIDOFILOS.

V.

COLORANTE DE WEIGERT PARA FIBRAS

ELASTICAS:

II.

AZUL DE TOLUIDINA: Las molculas de este

Azul: Fibras elasticas.

colorante se polimerizan entre si cuando se

exponen a concentraciones altas de polianiones en
el tejido. Este tie de azul los tejidos, excepto los
que son ricos en polianiones, ej.: La matriz del
cartlago y grnulos de clulas cebadas, que se
tien de color purpura. Tejido que se tie de
color purpura es METACROMATICO.
El azul de toluidina presenta METACROMASIA.
HECHO POR: PATRICIA CORREA

VI.

TINCIONES ARGENTICAS:
Negro: Fibras reticulares.

VII.

HEMATOXILINA FERRICA:
Negro: Estriaciones del musculo, nucleos y

TECNICAS DE IMGENES DIGITALES.

Tecnica utilizada de imgenes digitales, se emplea

una computadora para capturar y manipular las

eritrocitos.

imgenes histologicas.

Su importancia radica en que gracias a esta tecnica

podemos guardar en CD ROM varias imgenes y
archivarlas asi.

PROCEDIMIENTOS

AVANZADOS

DE

OBSERVACIN.
1.

HISTOQUIMICA.
Metodo de tincin de tejido que proporciona

VIII.

ACIDO PERYODICO DE SCHIFF:

informacin sobre la presencia y localizacin de

Magenta: Moleculas ricas en glucgeno y

macromoleculas intracelulares y extracelulares.

carbohidratos.

Este metodo aprovecha la actividad enzimatica,

reactividad

quimicay

otros

fenomenos

fisicoquimicos.
Esta se efectua sobretodo en tejidos congelados y
puede

aplicarse

en

microscopia

optica

como

electronica.
En una reaccion histoquimica se usa el reactivo
Acido Peryodico de Schiff (PAS) que forma un
precipitado color magenta que contiene glucgeno y
IX.

COLORANTES DE WRIGHT Y GIEMSA

carbohidratos. Para asegurar que la reaccin sea

(empleados para tincion diferencial de celulas

especfica del glucgeno, los cortes consecutivos se

sanguineas):

tratan con amilasa.

Rosa: Eritrocitos, Grnulos de Eosinfilos.

Azul: Citoplasma de Monocitos y Linfocitos.

2.

INMUNOCITOQUIMICA.
Se utilizan anticuerpos marcados con fluorescena y
anticuerpos

para

intracelular

identificar
extracelular

una
de

localizacin
las

celulas

HECHO POR: PATRICIA CORREA

macromolculas ms precisa de la que es posible en

la histoquimica.
Existen dos metodos de marcado con aticuerpos
directos e indirectos:

Metodo Directo: Se marca el anticuerpo contra

la macromolecula con un colorante fluorescente.
Luego se permite que reaccione el anticuerpo
con la macromolecula y puede observarse el
complejo resultante mediante el uso de un
microscopio de fluorescencia.

Metodo Indirecto: Se prepara un anticuerpo

marcado con fluorescencia contra el anticuerpo
primario especifico para la macromolecula de
interes. Una vez que reacciona el anticuerpo
primario con el antigeno, se lava la preparacin
para eliminar el anticuerpo primario no unido;
se aade el anticuerpo marcado y reacciona con
el complejo antigeno anticuerpo original, con
lo cual se forma un complejo secundario visible
con microscopio de fluorescencia.

3.

AUTORRADIOGRAFIA.
Metodo

en

radioactivos

el
en

que

se

incorporan

macromoleculas,

istopos
que

continuacin se observan con el uso de una pelicula

de emulsin superpuesta.
Metodo util para localizar e investigar una
secuencia temporal especifica de fenomenos.

4.

MICROSCOPIA ELECTRONICA.

HECHO POR: PATRICIA CORREA