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UNIVERSIDAD DE LA SALLE

Asignatura: Biologa General

Practica de laboratorio No. 1

Reconocimiento de biomolculas orgnicas: glcidos, lpidos y


protenas
Preparado por: Estrella Crdenas C. Profesora de Biologa General

OBJETIVOS DE LA PRACTICA

Reconocer la presencia de carbohidratos, lpidos y protenas en diferentes


alimentos de origen animal y vegetal mediante pruebas cualitativas.
Interpretar los resultados obtenidos en cada una de las pruebas
FUNDAMENTO TERICO

Los azucares monosacridos y la mayora de los disacridos poseen poder reductor,


que deben al grupo carbonilo que tienen en su molcula (Bohisnski, 1991). Este
carcter reductor puede ponerse de manifiesto por medio de una reaccin redox llevada
a cabo entre ellos y el sulfato de cobre de la solucin Feling A que contiene CuSO4 y la
solucin Feling B contiene NaOH para alcalinizar el medio y permitir la reaccin; al
reaccionar estas soluciones con un glcido reductor se forma xido de cobre de color
rojo ladrillo.
El almidn es un polisacrido vegetal formado por dos componentes: la amilosa y la
amilopectina. La primera se colorea de azul en presencia de yodo debido a la adsorcin
o fijacin de yodo en la superficie de la molcula de amilosa, lo cual slo ocurre en fro.
Para esta prueba se utiliza una solucin denominada Lugol; la cual contiene yodo y
yoduro potsico (Campbell y Farrell, 2004).
Los lpidos ms abundantes son los que posen cidos grasos, es decir, los lpidos
saponificables; los triglicridos (grasas y aceites) son los ms caractersticos. En estos
a una molcula de glicerina se unen tres molculas de cidos grasos. La reaccin de
formacin ser la siguiente:
GLICERINA (alcohol) + 3 ACIDOS GRASOS ------------- STER (triglicrido) + AGUA
Los lpidos saponificables reaccionan con NaOH produciendo hidrlisis alcalina; la cual
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se denominada saponificacin; en este proceso se obtiene jabn y se libera glicerina.


El jabn es, por consiguiente una sal de un cido graso:
TRIGLICRIDO + 3 (NaOH) -------------- GLICERINA + 3(RCOONa) (jabn)
La caracterstica comn a todos los lpidos es la insolubilidad en agua y solo son
solubles en disolventes orgnicos como la gasolina, benceno, acetona, xilol y el
cloroformo (Lehninger et al., 2001). Para el reconocimiento colorimtrico de los lpidos
se emplea el colorante Sudn III; la prueba positiva de su presencia es que toman un
color anaranjado.
Las protenas son macromolculas formadas por la unin de muchos aminocidos por
enlace peptdico (estructura primaria). Tambin, se dan uniones entre lminas plegadas
y alfa-hlice, las cuales hacen que la protena adquiera una conformacin
tridimensional (estructura terciaria). Los enlaces peptdicos pueden ser destruidos por
variaciones del pH y la temperatura o por concentraciones salinas; de esta forma la
protena pierde su conformacin y se desnaturaliza. Las soluciones que forman con el
agua pueden precipitar con formacin de cogulos al ser calentadas a temperaturas
superiores a los 70C o al ser tratadas con soluciones salinas, cidos, alcohol, etc. La
coagulacin de las protenas es un proceso irreversible y se debe a su
desnaturalizacin por los agentes indicados, que al actuar sobre la protena la
desordenan por la destruccin de su estructura terciaria y cuaternaria (Bohisnski, 1991).
La presencia de protenas se detecta colorimtricamente utilizando el reactivo de Biuret.
Esta reaccin se produce en pptidos y protenas. Cuando se ponen en contacto con
un lcali concentrado, se forma una sustancia compleja denominada Reactivo de
Biuret. El reactivo de Biuret se prepara con sulfato cprico (CuSO4), hidrxido potsico
(KOH) o hidrxido de sodio (NaOH) y tartrato de sodio y potasio (KNaC4O64H2O).
Una muestra biolgica al agregarle reactivo de Biuret, toma un color violeta en
presencia de protenas, y toma coloracin rosada cuando la muestra contiene
polipptidos de cadena corta (Switzer & Garrity, 1999).

MATERIALES Y METODOS
Materiales y reactivos necesarios para desarrollar la practica
Materiales

Reactivos

Tubos de ensayo
Gradilla
Pinzas
Pipetas
Bao Mara 90 C
Albumina de huevo
Maicena
Mantequilla
Aceite de cocina
Jugo de frutas

Solucin de Lugol

Solucin de Fehling A y B

Solucin Sudn III

NaOH al 20%

Reactivo de Biuret

Procedimiento
1. Rotule cada tubo tal como se indica en la Figura 1 y coloque cada tubo en la
gradilla. En su orden agregue las siguientes soluciones:
2. Al tubo #1 coloque 2 ml de agua destilada; al tubo # 2 agregue 2 ml de jugo de
frutas y al tubo #3 agregue 2 ml de solucin de azcar y al tubo #4 agregue 2 ml de
solucin de maicena.
3. Al tubo #5 agregue 2 ml de agua destilada, al tubo #6 agregue 2 ml de aceite de
cocina y al tubo #7 agregue 2 ml de margarina.
4. Al tubo #8 agregue 2 ml de agua destilada, al tubo #9 agregue 2 ml de albumina de
huevo y al tubo #10 coloque tambin 2 ml de albumina.
5. Seguidamente, a los tubos #1, #2 y #3 adicione a cada uno 1ml de solucin de
Fehling A y 1ml de Fehling B.
6. Al tubo #4 adicione 4 gotas de la solucin de Lugol. Observe y anote los resultados
de coloracin que toma la solucin de este tubo.
7. A los tubos #5, #6 y #7 adicione a cada uno entre 5 a 7 gotas de solucin Sudn III.
Agite suavemente cada uno y deje reposar. Observe y anote los resultados de
estos tres tubos.
8. A los tubos #8 y #9 adicione a cada uno 3 ml de NaOH al 20% + 5 gotas del

reactivo de Biuret. Observe y anote los resultados de coloracin de estos dos


tubos.
9. Caliente los tubos #1 #2 y #3 al bao Mara a 90C por 15 minutos. Observe y
anote los resultados de coloracin de estos tres tubos.
10. Caliente el tubo #10 al bao Mara a 90C por 15 minutos y luego adicione 3 ml de
NaOH al 20% + 5 gotas del reactivo de Biuret. Observe y anote los resultados de
coloracin de este tubo.

Glcidos

Lpidos

Protenas

Figura 1. Tubos rotulados para reconocimiento de carbohidratos, lpidos y protenas

RESULTADOS
Tabla 1. Registre en la siguiente tabla sus resultados de coloracin obtenidos en los tubos para
cada una de las sustancias problema
Prueba
#
Tubo

Sustancias
problema

Control
Agua destilada

Jugo

Azcar

Maicena

Control
Agua destilada

Aceite

Margarina

Control
Agua destilada

Albumina de huevo

10

Albumina de huevo

Fehling A y B

Lugol

Sudn III

NaOH + Biuret

DISCUSIN
Haga una interpretacin de sus resultados obtenidos en la prctica comparndolos con lo
reportado en la bibliografa y haga sus conclusiones con respecto a los resultados de la
prctica.

BIBLIOGRAFA
Bohisnski, R.C. Bioqumica. (1991). Bioqumica. 5 Edicin. Addison Wesley
Iberoamericana.
Campbell, Mary F. y Farrell, Shawn O. (2004). Bioqumica. Mxico, DF. 4a. ed.
Internacional Thomson editores.
Lehninger, A.L., Nelson, D.L. y Cox, M.M., (2001). Principios de Bioqumica. 3a ed.,
Editorial Omega, Espaa.
Switzer, R. y L. Garrity. (1999). Experimental Biochemistry: Theory and exercises in
fundamental methods. 3rd edition, Freeman and Company, New York.