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INFORME N 5

INTRODUCCION
Los hongos se encuentran distribuidos ampliamente en la naturaleza, muchas de sus
especies son cosmopolitas, esto se debe entre otros factores a su propiedad de
colonizar diferentes sustratos y principalmente a su forma de reproduccin por
esporas, las que son fcilmente transportadas por los animales, el agua o el aire
contribuyendo a su dispersin.
Un alto nmero de esporas que son liberadas de diversas fuentes estn suspendidas
en el aire atmosfrico donde su diversidad y nmero varan con las condiciones
atmosfricas, ubicacin geogrfica, condiciones climticas, tipo de ambiente y
actividad.
En esta forma, la atmosfera posee una carga mictica de hongos saprobios que
pueden dar origen a importantes problemas de salud publica en individuos
susceptibles, convirtindose en patgenos y parsitos una vez que se introducen por
inhalacin, o invasores secundarios en individuos que tienen su sistema inmunolgico
disminuido por diversas causas, o tener accin toxicognica debido a la produccin
potencial debido a la produccin potencial de toxinas de algunas especies, o provocar
reacciones alrgicas en respuesta a los antgenos fngicos, en los individuos,
dependiendo de la sensibilizacin, predisposicin y exposicin.
Actualmente el estudio de la diversidad de las esporas fngicas suspendidas en el aire
de ambientes internos se ha extendido extraordinariamente debido a la potencial
contaminacin, alteracin por procesos industriales y otros, que estas esporas puedan
ser alerggenas y causar enfermedades de tipo respiratorias al ser inhaladas en
bioaerosoles y polvo producido en actividades humanas.

REVISION LITERARIA
Ciertas esporas de hongos presentes en el aire pertenecen a gneros cosmopolitas
que se han registrado como predominantes de la accin alrgica, cuyo trmino es
aplicado generalmente al tipo I de hipersensibilidad.
Su presencia, concentracin y diversidad estaran relacionadas con la polucin
ambiental externa, la prevalencia estacional de estas especies, las fuentes de
dispersin y las condiciones del ambiente interno laboral o habitacional.
Las alergias del tipo I desencadenan reacciones agudas en individuos genticamente
susceptibles a los alrgenos cuando estos entran en contacto con las vas
respiratorias produciendo sntomas de asma, rinitis o afecciones broncopulmonares
alrgicas.
La inhalacin de antgenos fngicos y de actinomycetes causara respuestas de
hipersensibilidad tales como sinusitis, o desordenes inmunolgicos al pulmn
(pneumonitis) alveolitis alrgica extrnseca.
En los estudios relativos a la presencia de esporas de hongos en el aire exterior, como
en el interior por su importancia en la accin alerggena se citan a nivel mundial, por
su presencia relativa y concentracin los siguientes gneros: Cladosporium, Alternaria,
Epicocum, Rhodothorula, Penicillium, Aspergillus y Aureobasidium.

La manifestacin alrgica corresponde a la hipersensibilidad del sistema inmunolgico


debido a la sobreproduccin de los anticuerpos y componentes celulares como una
respuesta a la exposicin a un alrgeno (causante de alergia).
Se describen tambin reacciones de hipersensibilidad, de alergias tipo III
correspondientes a inflamaciones locales debido a cambios de permeabilidad vascular
provocando alteraciones serolgicas y neumonitis, donde serian agentes potenciales
la inhalacin de esporas de hongos, especialmente: Cladosporium sp., Acremonium
sp., Alternaria sp., Mucor sp., Penicillium sp., Aspergillus sp., Trichoderma sp.,
Aureobasidium sp., actinomycetes, polvo organico y algunos compuestos inorgnicos.
La calidad del aire interior llega a ser de esta forma una importante causa de riesgo en
salud cuando en este ambiente se encuentra estimaciones significativas de esporas
fngicas pudiendo ser estas de origen interno y/o del medio exterior.
El aire interior es considerado como el espacio cerrado laboral o domstico con
diferencias importantes de las situaciones externas ambientales, en la cual la situacin
externa es valorada como una caja mvil de aire por efectos de la temperatura, viento,
precipitaciones, que producen una condicin homognea de concentraciones
caractersticas de un sitio a otro y de una estacin a otra.
El ambiente interno por el contrario se menciona como una caja negra inmvil, donde
el aire se mueve de acuerdo a influencias externas especificas y acumula
contaminantes por la accin antrpica, creando una situacin heterognea.
Al respecto se han encontrado correlaciones significativas entre los ambientes
externos e internos, altitud, humedad, circuitos de ventilacin, etc.
Tambin numerosos hongos provenientes de fuentes interiores siendo de especial
inters las especies de predominio anual y principalmente saprobias que se adaptan
ecolgicamente y constituyen reas de dispersin interna gracias a factores como la
calefaccin, aire acondicionado y falta de limpieza.
El reconocimiento del nmero de unidades formadoras de colonias por m3 (ufc/m3) y la
exhaustiva identificacin de los tipos de propgulos permiten estimar los riesgos de
salud en la calidad del aire frente a la accin de los hongos.
Dentro de los grupos fngicos suspendidos en la atmsfera se sealan como
responsables del efecto alergnico a: Cladosporium spp., Alternaria alternata, en las
manifestaciones aeroalerggenas de rinitis, traquetis, conjuntivitis y asma, problemas
internos de mayor seriedad que afectan ms profundamente al sistema respiratorio
alveolar e intersticial del pulmn; y a Aspergillus sp. y Penicillium sp.; en micotoxicosis.
Los gneros Alternaria y Cladosporium junto con Aspergillus y Penicillium se han
descrito como los ms abundantes y frecuentemente asociados a factores de
correlacion en hogares, como ventilacin, humedad, deterioro de superficies y en
ambientes industriales asociados a la dispersin de la contaminacin industrial junto
con Acremonium, Fusarium y Aureobasidium.

PARTE EXPERIMENTAL
Ejercicio 1.
IDENTIFICACIN DE HONGOS MEDIO AMBIENTALES
Materiales
-

Aislamientos de hongos medio ambientales en placas de agar sabouraud.

Luego de:
1. Elegir un punto determinado en el ambiente que se quiera evaluar.
2. Destapar la placa petri exponiendo el medio de cultivo al aire (se asume que
las esporas de hongos se encuentran suspendidas). El tiempo de exposicin
puede ser de 5 a 10 minutos. Vuelva a tapar la placa, identifiquela con nombre
y lugar muestreado.
3. Trabaje de manera similar para cada placa y lugar.
4. En el laboratorio incube las placas en una estufa de 30 C por 4 5 das.
5. Transcurrido el tiempo, examine las placas y realice una descripcin detallada
de las mismas.
Despus seguir el siguiente procedimiento:
Observacin macroscpica
1. Observe el tpico desarrollo de los hongos en medio de cultivo. Cada una de
las masas de forma definida que puede observar constituye una colonia.
2. Cuente el nmero total de colonias que aparece en la placa. Se asume que
cada colonia desarrollada proviene de una espora captada del aire.
3. Establezca los tipos morfolgicos ms saltantes entre las colonias presentes.
Obtngalos de acuerdo a la observacin de las caractersticas externas en
ellas (color, forma y aspecto de la colonia en el haz y envs de la placa).
4. Determine la frecuencia de cada tipo morfolgico con respecto al nmero total
de colonias.
5. Describa cada tipo morfolgico detallando dimetro promedio, color, forma,
aspecto y cualquier caracterstica saltante que observe.

Observacin microscpica
1. Observe al microscopio compuesto en pequeo y mediano aumento las
caractersticas de cada tipo morfolgico.
2. Determine en detalles los tipos de hifas presentes y las diferenciaciones de
hifas en estructuras nutricionales, estructuras de reproduccin, de resistencia,
etc.
3. Con ayuda de un manual de identificacin de hongos haga una aproximacin
vlida para determinar los gneros aislados.
4. Elabore con detalle los esquemas correspondientes.

Ejercicio 2.
CULTIVO DE CMARA HMEDA
Materiales
-

Placas petri con colonias de hongos aislados del medio ambiente.

Agua destilada estril

Dispositivo para cultivo en Cmara Hmeda

Mechero de alcohol

Procedimiento
1. Utilizando aguja de klle o estilete, pique una colonia y extraiga una fraccin
mnima de esporas o micelio.
2. En forma asptica deposite esta fraccin sobre la porcin de agar dispuesta en
el portaobjeto de la cmara hmeda.
3. Con ayuda de una pinza estril cubra cuidadosamente la preparacin con la
lmina cubre objetos.
4. Humedezca el papel filtro de la placa con agua destilada estril.
5. Incube la placa a temperatura ambiente (20 25 C).
6. Examine diariamente al microscopio la lmina sembrada hasta verificar el
completo desarrollo del hongo. Retire cada vez la lmina del cultivo de la
cmara hmeda y una vez realizada la observacin vulvala a su lugar

cuidando de mantener la humedad constante, si es necesario aada ms agua


al sistema.
7. Observe la germinacin de las esporas, el crecimiento y ramificacin del
micelio, la aparicin de hifas diferenciadas y el desarrollo de las estructuras de
reproduccin.
8. Con ayuda de un manual de identificacin de hongos determine el gnero
correspondiente.
9. Elabore en detalles los esquemas de cada etapa de desarrollo.

RESULTADOS
Ejercicio 1.
Observacin macroscpica

Ambiente de exposicin: Sala


En la placa de la izquierda se observan 2 colonia mientras que la de la dercha se
aprecian 16, de distintos colores, formas, aspectos y dimetros.
Color de las colonias: Generalmente verdes, haban de tonos verde claro y verde
oscuro (o verde olivo). Adems haba una de color anaranjado metlico.
Forma de las colonias: La mayora tenan forma circular y las dems forma irregular
(ovalada).
Aspecto de las colonias: Aspecto agamuzado y algodonado, lo cual indica que son
hongos filamentosos. Se aprecia una colonia de aspecto mucoso y brillo metlico que
indica que se trata de una levadura, siendo un hongo unicelular ms no una colonia.
Dimetro de las colonias: Se observaron colonias de dimetros grandes, medianos y
pequeos.

Frecuencia: Las colonias ms frecuentes fueron las de dimetro pequeo y color verde
oscuro.

Observacin microscpica
En la prctica se observaron los siguientes hongos:
1

G.A.: 100X
Tipo de hifa: septada
Esporas asexuales: Conidiosporas
Gnero: Aspergillus sp

G.A.: 400X
Tipo de hifa: septada (conidiforo aseptado)
Esporas asexuales: Conidiosporas
Gnero: Aspergillus sp

G.A.: 400X
Tipo de hifa: septada
Esporas asexuales: Conidias
Gnero: bipolaris sp

G.A.: 400X
Tipo de hifa: septada
Esporas asexuales: conidias
Gnero: Cladosporium sp

Ejercicio 2.
Tomando muestras de las colonias de la placa petri que fue expuesta al medio
ambiente se realiz el cultivo en cmara hmeda.
Muestra A
Da 1
Slo se pueden distinguir hifas septadas. An no se distingue el gnero.

G.A.: 40X

G.A.: 100X

Da 4
Se determin comparando con un manual de identificacin de hongos que se trata del
gnero Alternaria sp
G.A.: 40X

G.A.: 100X

Muestra B
Da 1
No hubo crecimiento
Da 4
No se pudo apreciar el crecimiento de ningn hongo

IV. DISCUSIONES

En sta prctica de laboratorio; el tiempo de exposicin de la placa petri fue el


adecuado, siendo establecido en 15 minutos lo que permiti que varios hongos
crecieran en las placas

La humedad es un factor de crecimiento del hongo ya que con la actividad de


agua (ej. Aspergillus Aw= 0.8) aumenta su cintica de crecimiento.

Segn Prescott (pg. 132-133), la temperatura afecta intensamente a los


microorganismos. La temperatura de la clula microbiana se refleja
directamente con la de su ambiente. La temperatura de un microorganismo
determinado abarca normalmente un margen de temperatura de 30C.

En

identificacin de hongos al medio ambiente y cultivo en cmara hmeda se


trabajo a 30C y 25C respectivamente, que son temperaturas ptimas para
medios hmedos.

Al observar hongos medio ambientales se observa que las esporas estn


volando por todo el ambiente. As pudimos encontrar hongos de todo tipo como
Aspergillus, Bipolaris, Cladosporium,

Diferentes tipos de hongos a un mismo tiempo de crecimiento, desarrollaron


diferentes tamaos.

Es posible que la segunda muestra en la cmara hmeda no hubiese crecido


debido el hongo no fue correctamente sembrado o que no logro fijarse al agar

Bipolarias presenta esporas alargada y recubiertas, al no ser esperada su


aparicin en las placas este puede ser confundido con alternara

V. CONCLUSIONES

Cuando no se puede determinar el gnero de una colonia de hongos, se


recurre al cultivo en cmara hmeda. Ya que esta nos brinda resultados que
proporcionan informacin suficiente para identificar el gnero al que pertenece

el hongo estudiado.
Mediante el cultivo en cmara hmeda se puede observar el desarrollo de las
estructuras reproductoras de los hongos. Este mtodo nos permite una buena
manipulacin y observacin sin alterar el crecimiento ni modificar la estructura

y organizacin y sin la interferencia de otros hongos.


Los hongos necesitan humedad para desarrollarse completamente.
Los hongos crecen en forma radial y apical en todo el sustrato o hasta que se
topan con otra colonia, es entonces que entre ellos determinan sus lmites.

La temperatura afecta mucho la presencia o ausencia de algunos gneros.


Cladosporium tiene un rango amplio de temperatura.

Encontramos algunas diferencias en la rapidez de crecimiento de algunos


hongos, estos crecen ms rpido que otros debido a hifas diferenciadas lo que
constituye una ventaja.

Vi. CUESTIONARIO
Ejercicio 1
1. Haga una descripcin morfolgica de 5 gneros de hongos del medio ambiente
considerando las caractersticas de desarrollo en medio de cultivo y las
caractersticas observadas al microscopio.

Penicillium es un gnero del reino Fungi. Tiene entre 100 y 150 especies.
Las especies de Penicillium son reconocidas por su denso cepillar como las
estructuras del espora-cojinete. Los conidiforos son simples o ramificados y
son terminados por los racimos de fialides en forma de botella. Las esporas
(conidios) se producen en cadenas secas de las extremidades de los fialides,
con la espora ms joven en la base de la cadena, y son casi siempre verdes.
La ramificacin es una caracterstica importante para identificar especie del
Penicillium. Algunos no son ramificados y llevan simplemente un racimo de
fialides en la tapa del estpite. Otros pueden tener un racimo de ramas, cada
cojinete un racimo de fialides. Un tercer tipo tiene ramas el llevar de una
segunda pedido de ramas, llevando alternadamente un racimo de fialides.
Estos tres tipos de sistemas del cojinete de la espora (penicilli) se llaman
monoverticillate, biverticillate y terverticillate respectivamente.
El Penicillium es un gnero grande y encontrado casi por todas partes, y siendo
comnmente el gnero de hongos ms abundante en suelos. La fcil
proliferacin de los Penicillium en los alimentos es un problema. Algunas
especies producen toxinas y pueden hacer el alimento no comestible o an
peligroso. Es una buena prctica desechar los alimentos que demuestran el
desarrollo de cualquier moho. Por otra parte otras especies de Penicillium son
beneficiosas para los seres humanos. Los quesos tales como el roquefort, brie,
camembert, stilton, etc. se crean a partir de su interaccin con algunos
Penicillium y son absolutamente seguros de comer. La penicilina es producida
por el hongo Penicillium chrysogenum, un moho ambiental.

El Aspergillus es un gnero de alrededor de 200 hongos (mohos), y es ubicuo.


Los hongos se pueden clasificar en dos formas morfolgicas bsicas: las
levaduras y las hifas. El Aspergillus es un hongo filamentoso (compuesto de
cadenas de clulas, llamadas hifas), el tipo de hongos opuesto a las levaduras,
stas ltimas compuestas de una sola clula redondeada. El hbitat natural del
Aspergillus son el heno y el compostaje.
La estructura microscpica del Aspergillus es nica. Tienen hifas tabiculares y
conidioforas cuya cabeza est localizada en el extremo de un hifa, compuesta
por una vescula rodeada por una corona de filides en forma de botella
directamente insertadas sobre la vescula. 8 De las filides se desprenden las
esporas (conidios). Otras estructuras se encuentran en ciertas especies y no
en otras, por ejemplo, las clulas de Hle.

Rhizopus es un genus de mohos que incluyen especies cosmopolitas de


hongos filamentosos hallados en el suelo, degradando frutos y vegetales,
heces animales, y residuos.
Las especies de Rhizopus producen esporos asexuales y sexuales. Los
esporangiosporos asexuales se producen dentro de una estructura aguzada, el
esporangium, y son genticamente idnticos a su padre. En Rhizopus, el
esporangio es soportado por una gran columela apofisada, y el esporangiforo
asoma entre rizpodes distintivos. Cigosporos negros se producen despus de
dos fusiones compatibles de micelios durante la reproduccin sexual. Y hacen
colonias que pueden ser genticamente diferentes de sus padres.
Algunas spp. de Rhizopus son agentes oportunistas de cigomicosis humana.
Pueden causar serias (y con frecuencia fatales) infecciones en humanos y en
animales debido a su rpido crecimiento a relativamente altas temperaturas.
Algunas especies son patgenos vegetales. Dos son usados en fermentacin:
Rhizopus oligosporus, en la produccin de tempeh, un alimento fermentado
derivado de grano de soja; R. oryzae se usa en la produccin de bebidas
alcohlicas, en partes de Asia y de frica.

Cladosporium es un hongo filamentoso con conidiforos con cadenas


ramificadas de conidios elipsoides o cilndricos de extremos redondeados,
formados por gemacin sucesiva del conidio anterior.
Colonias de crecimiento lento, planas, finamente vellosas, aterciopeladas o
lampias, de color verde oliva a pardo oliva. Reverso negro oliva.

El gnero Alternaria contiene especies cosmopolitas que se encuentran en un


amplio rango de materiales y productos. Como saprobias pueden deteriorar
alimentos y forrajes, produciendo compuestos biolgicamente activos tal como
micotoxinas. Como patgenas reducen el rendimiento de las cosechas o
afectan a los vegetales almacenados.
Los conidios de Alternaria tienen septos transversales y longitudinales y se los
conoce como dictiosporas, adems son pardos y picudos. Nacen por la
brotacin apical de una clula conidigena o de la espora anterior, dando lugar
en este ltimo caso a una cadena que suele ramificarse si una espora produce
ms de un brote.
Es comn observar en los hongos una plasticidad morfolgica. Cuando las
especies de Alternaria crecen en medios ricos y en la obscuridad bajo
condiciones ambientales no controladas, se forma un exceso de micelio areo
que afecta al desarrollo tridimensional de la esporulacin. Al hacer las
preparaciones hmedas se destruyen las estructuras y como resultado solo se
observan conidios.

2. Los nombres genricos de muchos hongos son derivados de caractersticas


morfolgicas. De cuales derivaran los nombres Penicillium, Aspergillus y
Rhizopus?

Penicillium: palabra derivada del latn penicillus, diminutivo de peniculus que


significa pincel (a su vez diminutivo de penis, plumero, cepillo), esto debido a
que sus conidiforos se ramifican formando dicha forma.

Aspergillus: palabra derivada del latn que significa Hisopo o Apersorio (que
serva para rociar agua antiguamente) y provienen del parecido de su
conidiforo maduro con tal aparato.

Rhizopus: palabra derivada del griego rhiza que significa raz y pous (pie) y
se le dio a los hongos que forman estructuras de sujeccin de apariencia
radicular denominada rizoides.

3. Por qu razn algunas colonias aisladas del medio ambiente no desarrollan


esporas en el medio de cultivo utilizado?

Algunas colonias no desarrollan esporas en el medio de cultivo porque la


formacin de esporas est estrechamente relacionada con las necesidades
especficas de los distintos hongos para dispersarse a nuevos ambientes
apropiados. As podemos concluir las siguientes razones: Medio de cultivo
adecuado para el desarrollo de las bacterias
Temperatura ambiente
Temperatura de incubacin

Ejercicio 2
1.
Cul es la ventaja del empleo de la cmara hmeda en el estudio de
los hongos?
La cmara hmeda tiene el propsito de crear condiciones favorables de humedad
para el rpido desarrollo de hongos que pueden estar involucrados en la produccin
de sntomas de enfermedad, pero cuya presencia no es detectada en el momento de
la primera observacin. Como los saprfitos pueden ser favorecidos por las
condiciones creadas, debe procederse con cautela al interpretar los resultados. La
cmara hmeda se prepara en un recipiente con tapa, que permita un grado de
aireacin adecuada para la respiracin. Adems, proporciona al hongo un ambiente
ms adecuado para su crecimiento y proliferacin, pudiendo aislarlo de la muestra o
de su medio para un estudio ms profundo de sus caractersticas y de las medidas
que se tomarn para la detencin de su propagacin, especialmente en caso de ser
patgenos.
2.
Existen diferencias entre los hongos a nivel del crecimiento y
diferenciacin del micelio?, Por qu?
Existen diferencias tanto macroscpicas como microscpicas, esto se puede observar
al realizar un cultivo en cmara hmeda ya que de esta manera se lleva a
cabo el seguimiento del desarrollo de un hongo (desde su inicio).
A nivel macroscpico: la nica diferencia es que las colonias poseen diferentes
colores, con esto se puede separar por especies de hongos. Fuera de esto, a este
nivel su crecimiento es aparentemente igual.

A nivel microscpico: es aqu donde se observan mayores diferencias, como tamao y


forma. Se observa el crecimiento desde la formacin de micelios, los cuales
inicialmente parecen poseer la misma estructura pero al continuar el desarrollo se
observa que son diferentes porque ya van tomando una forma caracterstica de cada
especie. Es en este nivel donde se puede realizar una diferenciacin de hongos de
acuerdo a su especie, ya que se pueden observar las caractersticas fsicas propias de
cada una.
Las diferencias de hongos a nivel de crecimiento se da porque cada especie necesita
condiciones especficas para su desarrollo; estas pueden ser temperatura, luz, aire,
humedad, entre otras. Las cuales son fundamentales para un buen desarrollo y
proliferacin de hongos.
BIBLIOGRAFIA

Josep Mensa. 2008. Gua Teraputica Antimicrobiana. Editorial Elsevier,


Espaa.

Llop, Valdez-Dapena, Zuazo. Microbiologa y Parasitologa mdicas. Tomo I.


cap41.

Prescott, L.M; J. P. Harley 1999.Microbiologa. Cuarta edicin. Mc Graw HillInteramericana.Madrid.

Trtora, Funke y Case. 2007. Introduccin a la microbiologa. Editorial Ed.


Mdica Panamericana.