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Resultados
La eleccin de las condiciones de incubacin para la enumeracin de
bacterias
bacterias heterotrficas se cultivaron primero en cultivo mixto de las algas y
bacterias a 20 C durante 20 das y en diferentes valores de pH. Las bacterias
fueron cultivadas en agar con diferentes valores de pH y temperatura de
incubacin, Jen y Bell informaron que al 95% de intervalo de confianza, la
exactitud se enumeraba dentro de 20%. Esto significa que el tiempo mnimo de
incubacin puede ser determinada como la duracin despus del recuento de
bacterias hetertrofas el cual supera el 80% del nmero de clulas capaces de
formar una colonia. Este tiempo mnimo de incubacin se determin
matemticamente mediante la ecuacin como se describe a continuacin. Donde
N0 es el nmero de clulas capaces de formar colonias, N es el nmero de clulas
en el tiempo, t es el tiempo desde las colonias comenzaron a formarse, lambda es
un parmetro probabilstico y se calcul a partir de la pendiente.
Se obtuvo una regresin lineal cuando se represent frente el tiempo de retraso, t
se define como el tiempo cuando las colonias comenzaron a formarse ya se
vertieron las placas. El tiempo de retardo se determin como se muestra en la
Figura 2. La ecuacin (2) se utiliz para estimar el tiempo total, T, necesario para
N clulas que se formaron, ya se vertieron las placas, tasa de formacin de los
mismos y de la temperatura de incubacin
Figura 3. Muestra que la formacin de colonias es considerablemente ms lenta a
20 C que a 35 C. Se observaron resultados similares a pH 9,0 y pH 3,0, pero en
colonia
La figura 4 muestra un buen ajuste de la ecuacin para el cultivo crecido a pH de
3.0, 5.0, 7.0 y 9.0 cuya placas se enumeraron en la temperatura de incubacin de
35 C. Cuando las bacterias se incubaron a 20 C, el retraso de al menos 24 h se
observ, a excepcin del cultivo heterotrfica a pH 3,0. Como se observa en la
Tabla 2, el nmero de clulas capaces de formar colonias en un cultivo para un pH
dado es independiente de los valores N, temperatura de incubacin a 20 C para
el cultivo de pH de 3.0, 5.0, 7.0 y 9,0 respectivamente. Excepto para el cultivo de
pH de 3,0, N, fueron superiores a 35 C que a 20 C, aunque las bacterias se
cultivaron a 20 C.
para la glucosa, con Chlorella tiene una mayor capacidad para la absorcin de
bacterias.
Efecto del pH sobre la poblacin bacteriana en cultivos discontinuos
alimentados
La Figura 7 muestra el efecto del pH del cultivo en la densidad bacteriana
heterotrfica a 10 C. Las densidades bacterianas fueron 20,1 5,5 x 106 ufc / ml
a un pH de 6,0 y 4,5, respectivamente. En ph alcalino, densidades bacterianas
disminuy ligeramente a 10,9 1,7 x 106 ufc / ml a un pH de 9,0. A pH 10.0, las
poblaciones bacterianas fueron mayores que a pH 7,0. Resultados similares se
repitieron a los 30 y 20 C (fig 6). El anlisis estadstico en el intervalo de
confianza del 95% muestra que las diferencias en la poblacin bacteriana a pH 7.0
y 10.0 fueron insignificantes a 30 C, pero significativa a las 10, 15 y 20 C. Es
posible que las altas actividades de algas y bacterias cerca de pH neutro fueran
responsables de este comportamiento haciendo que la glucosa fuese un factor
que limita el crecimiento. A pH 10,0 fue asimilada slo alrededor del 64% de la
glucosa. Esto significa que las algas y las bacterias no tienen que competir por la
glucosa. La poblacin bacteriana en pH 11,0 disminuy a 1,1 0,8 x 104 ufc / ml.
Crecimiento de bacterias heterotrficas en presencia y ausencia de algas
Para determinar si el bajo nmero de bacterias hetertrofas a 30 C fue el
resultado de la temperatura, se llevaron a cabo ms estudios en ausencia de
algas. Bacterias hetertrofas primero se aislaron de las colonias que se han
formado en las placas. Activamente las clulas bacterianas en crecimiento se
prepararon en un matraz de 1000 ml que contiene 2000 mg de extracto de glucosa
triptona y se cultivaron a 30 C despus de 2 das, las clulas bacterianas
heterotrficas se transfirieron a reactores, ajustada a pH 7,0 y 10,0. Glucosa se
aaden a diario en forma granular para proporcionar una concentracin de entrada
de se proporcion 75 mg / L del volumen restante del cultivo y la composicin
nutricional que aparece en la tabla 1. De la figura 8, se puede observar que, en la
presencia de algas, el nmero de bacterias hetertrofas fue menor en
comparacin con un sistema similar en ausencia de algas. Esta evidencia sugiere
que algn factor inhibe el crecimiento de bacterias heterotrficas en presencia de
Chlorella vulgaris. Dos posibles causas para este comportamiento se considera
que la produccin de agentes bactericidas por algas o la competencia por el
sustrato.
Efectos de pH y la temperatura sobre la degradacin de la glucosa
Captacin de glucosa por el sistema de algas bacteriana se calcul como una
pendiente de glucosa consumida contra la glucosa aadida y los resultados
de 30c que era similar a la temperatura de del entorno a partir del cual se
obtuvieron las bacterias (28-30c). Curiosamente a las temperaturas de incubacin
de 20, 25 y 35c, Jean y Bell (1982) no observaron ninguna diferencia significativa
en el nmero de bacterias en el tiempo de incubacin superior a 96 horas. Estos
resultados son similares a los resultados de la tabla 2.
Si la temperatura ambiente era el factor determinante para la seleccion de la
temperatura de incubacin, entonces el mayor nmero de bacterias debera haber
sido obtenido a 20c que a 35c. Esto significa que la temperatura ambiente del
medio ambiente no era el factor que regula una mayor recuperacin de las
bacterias hetertrofas.
Este trabajo ha demostrado que el metabolismo de la glucosa disminuye
significativamente a valores altos de pH particularmente por encima de pH 9,0.
Curiosamente aunque las densidades bacterianas heterotrficas fueron mayores a
pH 10.0 que el pH neutro 7.0 para todas las temperaturas investigadas, el
metabolismo de la glucosa disminuyo considerablemente. La fuerte disminucin de
la eficiencia de utilizacin de la glucosa a pH alcalino (Fig 9).corresponde tambin
a la fuerte reduccin de las tasas de crecimiento de Chlorella vulgaris Estos
resultados sugieren que tal vez Chlorella era ms responsable del metabolismo de
la glucosa que las bacterias hetertrofas, y est de acuerdo con otros hallazgos en
la literatura.
Abeliovich y Weisman reportaron un crecimiento insignificante y la actividad de las
bacterias hetertrofas en el estanque y lleg a la conclusin de que las bacterias
desempean un papel secundario en la degradacin de la materia orgnica en los
estanques de oxidacin. Mayo Anda Noike encontraron que la mitad de las
constantes de saturacin tasa, K, para el crecimiento de Chlorella vulgaris y de
bacterias heterotrficas fueron 181 y 27 mg / l, respectivamente. Wright y Hobbie
observaron la aparente K, valor de 7 microgramos por litro de poblaciones
naturales de cultivo bacteriano alimentado glucosa en el ambiente oligotrfico.
Esta baja constante de saturacin para las bacterias sugiere su papel de menor
importancia en la asimilacin de la glucosa.
Hubo una evidencia de que las bacterias hetertrofas crecieron menos
vigorosamente en la presencia de Chlorella vulgaris que en la ausencia de clulas
de Chlorella.
Conclusiones
Sobre la base de los resultados experimentales obtenidos se hacen las siguientes
conclusiones.