Está en la página 1de 6

Universidad Autnoma Chapingo

Departamento de Irrigacin
Fundamentos de Fitotecnia

PIGMENTOS FOTOSINTTICOS
EXTRACCIN, SEPARACIN E IDENTIFICACIN.

4 A
ING. MA. ESPERANZA ORTZ ESTRELLA
Equipo 2:
Navarro lvaro Manuel
Girn Mndez Pedro
Paredes Roca Gustavo
Vzquez Arturo

Chapingo, Mxico, 31 de Agosto 2015.

Introduccin
Los pigmentos son sustancias que absorben luz; algunos absorben luz de todas las
longitudes de onda y, por lo tanto, parecen negros. Otros, solamente absorben ciertas
longitudes de onda, transmitiendo o reflejando las longitudes de onda que no absorben. La
clorofila, el pigmento que hace que las hojas se vean verdes, absorbe luz en las longitudes
de onda del violeta y del azul y tambin en el rojo. Dado que refleja la luz verde, parece
verde. Por esa razn es que los cloroplastos son de color verde.
En el reino vegetal existen principalmente dos tipos bsicos de pigmentos fotosintticos:
las clorofilas y los carotenoides. Las clorofilas estn compuestas por una porfirina que
lleva incorporado un tomo de magnesio en el centro del ncleo tetrapirrlico. El in Mg2*
est coordinado con los cuatro tomos de nitrgeno centrales, lo que hace de la clorofila
un complejo extraordinariamente estable. Existen varios tipos de clorofilas, las ms
importantes de las cuales son la "a", y la "b". La estructura de las molculas de clorola
tiene dos partes: un anillo de porrina que contiene magnesio y cuya funcin es absorber
luz, y una cadena hidrfoba de tol cuya funcin es mantener la clorola integrada en la
membrana fotosinttica. En cambio, los carotenoides actan como pigmentos accesorios
en el proceso de la fotosntesis.
Sin embargo, lo que en realidad existe en los cloroplastos es una mezcla de pigmentos
representados principalmente por dos tipos de clorofila (clorofila a y clorofila b), por
caroteno y por xantofila. Todas estas sustancias presentan un grado diferente de
solubilidad, lo cual permite su separacin cuando una solucin de la misma asciende por
capilaridad por una tira de papel poroso (papel de filtro), ya que las ms solubles se
desplazarn a mayor velocidad, pues acompaarn fcilmente al disolvente a medida que
ste va ascendiendo. De esta forma, al cabo de cierto tiempo, a lo largo del papel de filtro
se irn situando los distintos pigmentos en forma de bandas coloreadas, tanto ms
desplazadas cuanto ms solubles sean los pigmentos a que pertenecen y tanto ms
anchas cuanto mayor sea la abundancia de estos en la mezcla

PIGMENTOS FOTOSINTTICOS
Los pigmentos son sustancias que absorben luz; algunos absorben luz de todas las
longitudes de onda y, por lo tanto, parecen negros. Los ms abundantes son: la clorofila a,
la clorofila b, los carotenos y las xantofilas. Cada uno de ellos presenta distinta color y
solubilidad, caractersticas que permite su separacin.
Las clorolas son una familia de pigmentos de color verde que se encuentran en las
cianobacterias y en todos aquellos organismos que contienen cloroplastos en sus clulas,
lo que incluye a las plantas y a los diversos grupos de protistas, crtica en la fotosntesis,
proceso que permite a las plantas absorber energa a partir de la luz solar.
Los carotenoides actan como pigmentos accesorios en el proceso de la fotosntesis.
Existen dos tipos: los carotenos y las xantofilas. Los carotenos son hidrocarburos
isoprenoides que no contienen oxgeno, formados por largas molculas con un sistema de
enlaces conjugados alternantes, dobles y sencillos, tienen color amarillo-anaranjado. Las
xantofilas tienen una estructura muy similar a la de los carotenos y su diferencia estriba en
la incorporacin de oxgeno en los extremos de la molcula. Son de color amarillo.
El siguiente listado muestra un resumen de los pigmentos fotosintticos.
Clorofila a: verde intenso (mayor solubilidad en disolventes orgnicos (no polares)). diere
de la clorola b en que el radical de la posicin 3 del grupo tetrapirrlico es -CH3 (metilo)
en lugar de -CHO (grupo funcional de los aldehdos).
Clorofila b: verde amarillento (mayor solubilidad en disolventes polares)
Las clorolas c1 y c2 son caractersticas de un extenso y diverso clado de protistas que
coincide con el superlo Chromista y que incluye grupos tan importantes como las algas
pardas, diatomeas, xantofceas, hapttas y cripttas.
La clorola d slo se ha conocido durante decenios por una observacin aislada y no
repetida en un alga roja. Luego se ha encontrado en unas cianobacterias que parece
especialmente apta para explotar luz roja cuando crece bajo ciertas ascidias. No debe en
todo caso interpretarse de la tabla que su presencia es una caracterstica comn de las
algas rojas.
La clorola f ha sido encontrada en cianobacterias de estromatolitos de Australia.
Carotenos: amarillo anaranjado (mayor solubilidad en disolventes orgnicos).
Xantofilas: amarillo (mayor solubilidad en disolventes polares).

Absorcin de luz de Clorofilas a y b

Estructura qumica de Clorofilas a y b

Las clorolas tienen tpicamente dos tipos de absorcin en el espectro visible, uno en el
entorno de la luz azul (400-500 nm de longitud de onda), y otro en la zona roja del
espectro (600-700 nm); sin embargo reejan la parte media del espectro, la ms nutrida y
correspondiente al color verde (500-600 nm). Esta es la razn por la que las clorolas
tienen color verde y se lo coneren a los organismos, o a aquellos tejidos, que tienen
cloroplastos activos en sus clulas, as como a los paisajes que forman.
Slo una molcula de clorola a en cada fotosistema convierte propiamente la energa
radiante (luz) en energa qumica, cuando recibe un fotn con energa suciente desde las
molculas de la antena, que se la van pasando. 5G
Las tcnicas para la separacin de estas sustancias se basan en las diferencias de
solubilidad en algunos disolventes. Un mtodo muy sencillo y conocido es la
cromatografa. Esta tcnica consiste en la separacin de sustancias presentes en una
mezcla (pigmentos y disolvente) utilizando un trozo de papel de filtro, en funcin de la
afinidad (solubilidad) que presenten los pigmentos por este disolvente recorrern mayor o
menor espacio en el papel (a mayor o menor velocidad), separndose as los diferentes
pigmentos.

Objetivo

Extraer los pigmentos fotosintticos mediante el uso de solventes orgnicos y, con la


ayuda de la cromatografa en papel, separar e identificar dichos pigmentos por medio del
color y el clculo del Rf, en cada uno de ellos.
Materiales, reactivos y mtodos
MATERIALES
Micro pipeta
Mortero y pistilo

REACTIVOS
15-30 ml de acetona
8 ml de solvente (100 partes de
benzina de petrleo y 20 ml de acetona
pura)

2 tubos de ensayo grandes


2 tapones de hule
Bote
Papel filtro
Hojas (material vegetal)
Vaso de precipitado de 100 ml
Embudo
Papel filtro
Tira de papel filtro Whatman no. 1, de 2
x 20 cm.
Cromatografa de pigmentos.
1. Obtencin del extracto. Moler las hojas en el mortero hasta extraer los pigmentos
de las hojas agregndole paulatinamente ml de acetona pura hasta conseguir el
extracto. Filtre el extracto (con papel filtro) y recbalo en el vaso de precipitado.
Dejar que se evapore la acetona para que se concentre el extracto.
2. Obtencin del cromatograma. Colocar un tubo de ensayo con el solvente (100/20
de benzina de petrleo y acetona pura, respectivamente) dentro del bote (se
necesita de oscuridad), luego con la micro pipeta, colocar 2 a 3 gotas del extracto
en la lnea inicial (marcada con lpiz) de la tira de papel filtro, ahora colocarlo dentro
del tubo de ensayo que est en el bote, esperar de 10 a 15 min.
3. Obtencin de los valores Rf. Marque con un lpiz las distancias recorridas por los
solventes y los pigmentos.

Resultados

La relacin entre la distancia viajada por un compuesto y la del solvente se conoce como
valor Rf (Arditti y Dunn,1969).
Rf =

distancia ( desde el origen ) que viaj elcompuesto


distancia ( desde el origen ) que viaj el solvente

EQUIPO
Caroteno
s
(amarillo)
Clorofila
(a)
Clorofila
(b)

0.88

0.98

0.97

0.90

0.96

0.94

0.92

0.82

0.90

0.86

0.90

0.86

0.91

0.90

0.72

0.80

0.71

0.80

0.73

0.89

0.82

La variacin de los Rf es debida a la diferencia de solubilidad que existe en cada


pigmento, la diferencia en el peso molecular de cada una y su estructura qumica, as
como las diferentes capacidades de adsorcin (adhesin). Por las caractersticas del color
y los Rf se puede identificar de qu pigmento se trata.

Bibliografa consultada
IEs; Sotomayor Sotomayor, 16 jun. 2010; El mundo vegetal como recurso educativo;
consultado

el

dia

04

de

Septiembre

en

https://sites.google.com/site/plantasensecunadria/2o-eso/pigmentos-fotosinteticos
S. W. Jerey 1976. HE OCCURRENCE OF CHLO- ROPHYLL C1 AND C2 IN ALGAE
Journal of Phyco- logy. Volumen 12, Issue 3, pages 349354
Universidad Nacional de Colombia; s/f; LOS PIGMENTOS FOTOSINTETICOS;
consultado el dia 04 de septiembre de 2015 en el siguiente link:
http://www.virtual.unal.edu.co/cursos/ciencias/2000051/lecciones/cap02/02_04.htm