UNIVERSIDAD AUTNOMA DE CHIAPAS

FACULTAD DE CIENCIAS QUMICAS C-IV

EXTENSIN OCOZOCOAUTLA DE ESPINOSA
LIC. QUMICO FARMACOBILOGO
BIOQUMICA CLNICA I
5 SEMESTRE
PRCTICA 5: Hemoglobina glicosilada (HbA1c)
Prof. M en C. Martn Velzquez Gmez

Nombre del alumno (a):

Asignatura:
Fecha:
I. Introduccin
En la diabetes mantener los valores de glucemia cercanos a los normales (mximo 110 mg/dl en ayuno de 10
a 12 horas) puede disminuir sustancialmente el riesgo de complicaciones como retinopata, dao renal o
alteraciones nerviosas, o bien retrasar su progresin en caso de estar ya presentes en cualquiera que sea el
tipo de Diabetes. La hemoglobina glicosilada (HbA1c) es un anlisis de laboratorio muy til en la evaluacin a
largo plazo de los valores de glucemia de pacientes diabticos, aqu la contribucin de esta prueba en el
control de este padecimiento.
La HbA1c es un porcentaje de la hemoglobina (sustancia contenida en los glbulos rojos o eritrocitos) a la
cual se enlaza la glucosa. La glucosa se encuentra en la sangre y los glbulos rojos que la constituyen no
requieren insulina para que sta penetre, por tanto mientras ms glucosa est presente en la sangre
(glucemia elevada) durante ms tiempo, mayor ser la cantidad de hemoglobina que se glucosila. Una vez
que la glucosa se ha pegado al glbulo rojo no puede desprenderse, por lo que la hemoglobina permanece
glicosilada durante los 120 das de vida promedio del eritrocito.
II. Objetivo
El alumno determinar el porcentaje de hemoglobina eritrocitaria ligada a la glucosa de un paciente diabtico,
con la finalidad de analizar el control y seguimiento de la concentracin de glucosa srica.
III. Materiales

Kit para determinar hemoglobina glicosilada

Sangre anticoagulada con EDTA
Jeringas o agujas estriles
Micropipetas semiautomticas
Espectrofotmetro
Tubos de ensaye de cristal de 13x100 cc
Agua destilada o tridestilada
Gradilla metlica o plstica
Torundas con alcohol
Sanitas o servilletas
Guantes
Cubreboca

IV. Mtodo
1. Tomar una muestra de sangre en tubo con EDTA de un paciente diabtico
2. Atemperar el lisante y la resina del kit para determinacin de HbA1c

UNIVERSIDAD AUTNOMA DE CHIAPAS

FACULTAD DE CIENCIAS QUMICAS C-IV
EXTENSIN OCOZOCOAUTLA DE ESPINOSA
LIC. QUMICO FARMACOBILOGO
BIOQUMICA CLNICA I
5 SEMESTRE
3. Medir 500 uL de lisante, colocar en un tubo de 13x75 cc y agregar 100 uL de sangre total con EDTA
y dejar reposar por 5 minutos
4. Medir 3 mL de resina en un tubo de 13x100 cc, previamente mezclado por inversin unas 10 veces,
y agregar 100 uL de muestra hemolisada
5. Medir 5 mL de agua destilada en un tubo de 13x100 cc y agregar 100 uL de muestra hemolisada
6. Colocar a ambos tubos el pipetor con el filtro interno dejando un espacio de 1 cm aproximadamente
entre la muestra diluida y el filtro de goma
7. Mezclar por inversin ambos tubos durante 5 minutos
8. Insertar el pipetor sobre la muestra diluida hasta un momento que ya no permita insertar ms el
pipetor.
9. Recoger el filtrado en un tubo de 13x75 cc y leer las absorbancias en el espectrofotmetro, de
ambos tubos.
10. Realizar el clculo correspondiente siguiendo las instrucciones del protocolo del reactivo
V. Informe de resultados
a)
b)
c)
d)
e)
f)
g)

Nombre del paciente: ___________________________________________________________

Edad: _______ Sexo: ___________ Fecha: _________________ Folio: ___________________
Diagnstico presuntivo: _________________________________________________________
Absorbancia del estndar: ____________________________
Absorbancia de la Hb glicosilada: ______________________
Absorbancia de la Hb Total: __________________________
Hemoglobina glicosilada (%): _________________________

VI. Cuestionario
1.
2.
3.
4.
5.

Qu es la hemoglobina glicosilada?
Por qu es til la hemoglobina glicosilada?
A quin se recomienda practicar un anlisis de hemoglobina glicosilada?
Qu condiciones se requieren para practicar el anlisis?
Cmo se realiza la prueba y cuales con los resultados normales?

VII. Conclusiones

VIII. Referencias bibliogrficas consultadas