Documentos de Académico
Documentos de Profesional
Documentos de Cultura
Instrucciones
Pluripeptona
5.0
Extracto de carne
3.0
Crecimiento
Bueno
Bueno
Bueno
Bueno
Bueno
Bueno
Instrucciones
Pluripeptona
5.0
Extracto de carne
3.0
Cloruro de sodio
8.0
Agar
15.0
Microorganismos
Crecimiento
Bueno-excelente
Bueno-excelente
Bueno-excelente
Bueno-excelente
Bueno-excelente
Bueno-excelente
Crecimiento
Hemlisis
Abundante
Beta
Abundante
Alfa
Abundante
Alfa
Almacenamiento
Medio deshidratado: a 10-35 C.
Medio preparado: a 2-8 C.
375.0
Peptona
10.0
Cloruro de sodio
5.0
Agar
15.0
Resultados
Microorganismos
Crecimiento
Hemlisis
Abundante
--
Abundante
Beta
Abundante
Beta
Abundante
Alfa
Abundante
Alfa
Limitaciones
-Las reacciones hemolticas de muchos microorganismos son diferentes al
usar sangre de caballo respecto a la sangre de carnero, tal es el caso de
Instrucciones
Infusin de cerebro de
ternera
200.0
10.0
Cloruro de sodio
5.0
Glucosa
2.0
Fosfato disdico
2.5
Agar
15.0
Resultados
Microorganismos
Crecimiento
Aspergillus niger
Bueno
Neisseria meningitidis
Bueno
Bueno
Almacenamiento
Medio deshidratado: a 10-35 C.
Medio preparado: a 2-8 C.
Fundamento
Es un medio muy rico en nutrientes, que proporciona un adecuado
desarrollo microbiano. La infusin de cerebro de ternera, la infusin de
corazn vacuno y la peptona, son la fuente de carbono, nitrgeno, y
vitaminas. La glucosa es el hidrato de carbono fermentable, el cloruro de
Instrucciones
Infusin de cerebro de
ternera
200.0
10.0
Cloruro de sodio
5.0
Glucosa
2.0
Fosfato disdico
2.5
Crecimiento
Neisseria meningitidis
Bueno a excelente
Bueno a excelente
Bueno a excelente
Control Negativo
Resultado
Sin cambio
1.0
Pluripeptona
10.0
Instrucciones
Suspender 111 g de polvo por
litro de agua destilada. Reposar 5
minutos y mezclar calentando a
d-Manitol
10.0
Cloruro de sodio
75.0
Agar
15.0
Rojo de fenol
0.025
Siembra
Sembrar en superficie un inculo denso de la muestra.
Incubacin
De rutina: durante 18-24 horas a 35-37 C, en aerobiosis.
La American Public Health Association (A.P.H.A) recomienda la incubacin
durante 3 das a 32 C, en aerobiosis.
Resultados
Microorganismos
Crecimiento
Caractersticas de las
colonias
Amarilla
Staphylococcus epidermidis
ATCC 14990
Roja
Bueno
Inhibido
Inhibido
17.0
Pluripeptona
3.0
Lactosa
10.0
5.0
Agar
13.5
Rojo neutro
0.03
Cristal violeta
0.001
Instrucciones
Colonias
Rosadas mucosas
Incoloras,
transparentes
Incoloras,
transparentes
Incoloras,
transparentes
Diminutas, incoloras,
opacas
Almacenamiento:
Medio deshidratado: a 10-35 C.
Medio preparado: a 2-8 C.
Instrucciones
Extracto de levadura
5.0
Peptona de carne
5.0
Triptena
5.0
Citrato de sodio
10.0
Tiosulfato de sodio
10.0
Bilis de buey
8.0
Sacarosa
20.0
Cloruro de sodio
10.0
Citrato frrico
1.0
Azul de bromotimol
0.04
Azul de timol
0.04
Agar
15.0
Crecimiento
Caractersticas de las
colonias
Vibrio cholerae
Bueno
Amarillas de 2-3 mm de
dimetro, de borde
traslcido
V. parahaemolyticus
Bueno
V. alginolyticus
Bueno
Amarillas grandes
Aeromonas spp.
Inhibido
--
E. coli
Inhibido
--
5.0
Extracto de carne
5.0
Lactosa
10.0
8.5
Tiosulfato de sodio
8.5
Citrato frrico
1.0
Agar
13.5
Verde brillante
0.0003
3
Rojo neutro
0.025
Instrucciones
Colonias
Shigella flexneri
Incoloras
Shigella sonnei
Incoloras
Rosadas a rojas
15.0
Extracto de levadura
5.0
Glucosa
5.5
Cloruro de sodio
2.5
Tioglicolato de sodio
0.5
Agar
0.75
L-cistina
0.5
Resazurina
0.001
Instrucciones
Suspender 29,5 g del medio
deshidratado en un litro de agua
destilada. Calentar y agitar con
frecuencia hasta disolucin total.
Distribuir en recipientes
adecuados y esterilizar a 121C
durante 15 minutos. Enfriar y
guardar a temperatura ambiente
protegido de la luz. Si el medio
preparado presenta ms de un
30% de oxidacin volver a
calentar para eliminar el oxgeno
absorbido.
Crecimiento
Bueno
Clostridium perfringens
Bueno
Bueno
Bueno
Instrucciones
Peptona
5.0
Sales biliares
1.0
Carbonato de calcio
10.0
Tiosulfato de sodio
30.0
6.0
Ioduro de potasio
5.0
Agua
20.0
Siembra
Puede realizarse la siembra partiendo de un caldo de preenriquecimiento o
en forma directa conservando la proporcin 1:10.
Incubacin
Durante 12-24 horas a 35-37 C, en aerobiosis
Resultados
Microorganismos
Crecimiento
Salmonella typhi
Escaso
Bueno-excelente
Bueno-excelente
Escaso
Instrucciones
Peptona
5.0
Lactosa
4.0
Fosfato de sodio
10.0
Selenito de sodio
4.0
05/06), Hektoen Entrico Agar (B02-110-05/06), Verde Brillante Agar (B02124-05/06), Mac Conkey Agar (B02-114-05/06).
Resultados
Microorganismos
Crecimiento
Bueno
Bueno
Regular-Escaso
Regular-Escaso
Limitaciones
-Se aconseja usar el medio el mismo da de la preparacin.
-No incubar el medio de cultivo sembrado por mas de 24 horas, debido a
que el efecto inhibitorio del selenito disminuye luego de las primeras 6-12
horas de incubacin, y adems porque no es favorable para la mayora de
las cepas de Salmonella, que pueden no recuperarse.
-La nica ventaja de incubar durante 48 horas es el incremento de la
recuperacin de Salmonella pullorum.
Caractersticas del medio
Medio preparado: mbar claro, traslcido.
Almacenamiento
Medio deshidratado: a 10-35 C.
Medio preparado: a 2-8 C.
3.0
Pluripeptona
20.0
Cloruro de sodio
5.0
Lactosa
10.0
Sacarosa
10.0
Glucosa
1.0
Sulfato de hierro y
amonio
0.2
Tiosulfato de sodio
0.2
Rojo de fenol
0.025
Agar
13.0
Instrucciones
Pico/Fondo
Produccin de gas
Produccin
decido
sulfhdrico
A/A
K. pneumoniae ATCC
700603
A/A
S. typhimurium ATCC
14028
K/A
S. enteritidis ATCC
13076
K/A
P. aeruginosa ATCC
27853
K/K
A: cido
K: alcalino
Instrucciones
Citrato de sodio
2.0
Cloruro de sodio
5.0
Fosfato dipotsico
1.0
Fosfato monoamnico
1.0
Sulfato de magnesio
0.2
Azul de bromotimol
0.08
Agar
15.0
Citrato permeasa
Positivo
Azul
Positivo
Azul
Negativo
Verde
Negativo
Verde
Limitaciones
-Si se usa un inculo denso para sembrar el medio de cultivo, puede variar
el color del pico del verde al amarillo-amarronado.
Esto no afecta el color verde del resto del medio de cultivo, pero puede
afectar la visualizacin azul de un resultado positivo.
-Inculos muy densos, pueden originar resultados falsos positivos.
-Cuando se siembra una serie de pruebas bioqumicas a partir del mismo
cultivo, se debe esterilizar la aguja de inoculacin antes de inocular la
prueba del citrato o sino inocularla primero. Cualquier arrastre de materia
orgnica puede originar resultados falsos positivos.
Caractersticas del medio
Medio preparado: verde.
Almacenamiento
Medio deshidratado: a 10-35 C.
Medio preparado: a 2-8 C.
5.0
Extracto de levadura
3.0
Glucosa
1.0
Lisina
10.0
Citrato de hierro y
amonio
Tiosulfato de sodio
0.5
0.04
Instrucciones
Suspender 35 g del medio
deshidratado en un litro de agua
destilada. Dejar embeber unos 15
minutos. Calentar
cuidadosamente, agitando con
frecuencia y hervir durante un
minuto hasta la disolucin
completa. Distribuir y esterilizar a
121C durante 15 minutos.
Enfriar en pico de flauta dejando
un fondo vertical apto para la
puncin.
Agar
15.0
Rojo
Amarillo
Negativo
Prpura
Prpura
Positivo
Prpura
Positivo
Providencia spp.
Rojo
Amarillo
Negativo
Citrobacter freundii
Prpura
Amarillo
Positivo
Morganella spp.*
Rojo
Amarillo
Negativo
Edwarsiella spp.
Prpura
Prpura
Positivo
Prpura
Prpura
Negativo
Prpura
Prpura
Negativo
Almacenamiento
Medio deshidratado: a 10-35 C.
Medio preparado: a 2-8 C.
Instrucciones
Triptena
20.0
Peptona
6.1
Sulfato de hierro y
amonio
0.2
Tiosulfato de sodio
0.2
Agar
3.5
Cepas mviles: producen turbidez del medio, que se extiende mas all de la
lnea de siembra.
Cepas inmviles: el crecimiento se observa solamente en la lnea de
siembra.
Cepas SH2 positivas: ennegrecimiento a lo largo de la lnea de siembra o en
todo el medio.
Cepas SH2 negativas: el medio permanece sin cambio de color.
Cepas indol positivas: desarrollo de color rojo luego de agregar el reactivo
de Kovacs o de Erlich.
Cepas indol negativas: sin cambio de color.
Microorganismo
Movilidad
Indol
Produccin
de cido
sulfhdrico
K. pneumoniae ATCC
700603
S. typhimurium ATCC
14028
S. enteritidis ATCC
13076
Limitaciones
-En las bacterias aerobias estrictas, que slo crecen en superficie, la
movilidad puede ser difcil de observar.
-Algunas bacterias productoras de melanina como M. morganii, pueden dar
un color parduzco, que no debe confundirse con el color negro debido a la
produccin de cido sulfhdrico.
Caractersticas del medio
Medio preparado: mbar.
Almacenamiento
Medio deshidratado: a 10-35 C.
Medio preparado: a 2-8 C.
Fundamento
En el medio de cultivo, la triptena y la glucosa, aportan los nutrientes para
el desarrollo de microorganismos. El cloruro de sodio mantiene el balance
osmtico, y el rojo de fenol es el indicador de pH.
Algunas bacterias hidrolizan la urea por medio de la enzima ureasa
liberando amonaco y dixido de carbono. Estos productos alcalinizan el
medio haciendo virar el rojo de fenol del amarillo al rojo. En este medio, la
fermentacin de la glucosa activa la enzima ureasa, acelerando la velocidad
del metabolismo en aquellos organismos que hidrolizan lentamente la urea,
como especies de Enterobacter o Klebsiella.
Frmula (en gramos por litro)
Instrucciones
Triptena
1.0
Glucosa
1.0
Cloruro de sodio
5.0
Fosfato monopotsico
2.0
Rojo de fenol
0.012
Agar
15.0
Resultados
Microorganismo
Actividad uresica
Positiva
Rojo-Rosado
K. pneumoniae ATCC
700603
Positiva dbil
Rojo-Rosado
Negativa
Amarillo
Negativa
Amarillo
S. typhimurium ATCC
14028
Negativa
Amarillo
Limitaciones
-Bacterias que hidrolizan lentamente la urea, como ser Klebsiella,
Enterobacter y Citrobacter, viran al color rojo-rosado de todo el medio de
cultivo luego de varios das de incubacin.
-No calentar o sobrecalentar el medio de cultivo porque la urea se
descompone facilmente.
Caractersticas del medio
Medio preparado: amarillo
Almacenamiento
Medio deshidratado: a 10-35 C.
Medio preparado: a 2-8 C.
Instrucciones
Pluripeptona
7.0
Glucosa
5.0
Fosfato dipotsico
5.0
15 minutos.
Siembra
Por inoculacin directa, a partir del cultivo en estudio.
Incubacin
En aerobiosis, a 35-37C por 3 das.
Revelado de pruebas bioqumicas
a-Prueba del rojo de metilo:
Aadir unas gotas de una solucin de rojo de metilo al 0.04%, observar el
color del medio.
b-Prueba del Voges Proskauer:
Aadir 0,6 ml de alfa naftol al 5% en alcohol etlico absoluto y 0.2 ml de
hidrxido de potasio al 40% a 2.5 ml de cultivo. Agitar vigorosamente el
tubo, y dejar a temperatura ambiente durante 10-15 minutos. Observar el
color de la superficie del medio.
Resultados
1-Prueba del rojo de metilo:
Positivo: color rojo.
Negativo: color amarillo.
2-Prueba de Voges Proskauer:
Positivo: desarrollo de un color rojo en pocos minutos despus de una
completa agitacin del tubo.
Negativo: ausencia de color rojo.
Microorganismo
Crecimiento
RM
VP
Bueno
K. pneumoniae ATCC
700603
Bueno
S. typhimurium ATCC
14028
Bueno
Citrobacter freundii
Bueno
Limitaciones
En algunas cepas positivas para la prueba VP, pueden no desarrollar el color
rojo en la superficie mediante el revelado por la metodologa descripta