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INTRODUCCION
La transfusin es un tratamiento de un tejido vivo y que por lo tanto le confiere unas
caractersticas especiales a otros tratamientos mdicos. A pesar de los esfuerzos
realizados en seguridad transfusional, existen una serie de riesgos que pueden llegar a
ser mortales, por otro lado hay que tener presente que es un bien escaso, puesto que
todava en Espaa el nivel de autoabastecimiento es bajo, por lo que hay que tener
presente que es un producto caro ya que, aunque la donacin es altruista, las tareas de
promocin, extraccin, fraccionamiento, conservacin, tcnicas serolgicas y su
distribucin generan un gasto importante. Por eso la transfusin solo debe emplearse en
circunstancias muy justificadas, los beneficios superan los riesgos, y sus indicaciones
deben ser muy cuidadas. El presente documento no trata ms que de ayudar al mdico,
mediante unas orientaciones que han tenido el mayor consenso entre los miembros de la
Comisin de Hemoterapia del Hospital y la SETS (Sociedad Espaola de Transfusin
Sangunea) para conseguir que el proceso de indicar una transfusin y la administracin
de los distintos componentes se realice de la forma ms segura posible.

MANEJO DE LOS HEMODERIVADOS

Al paciente que lo necesite
el componente adecuado
en el momento preciso
con indicacin correcta.

PRUEBAS PRETRANSFUSIONALES
Previamente a la realizacin de las pruebas cruzadas de compatibilidad, es recomendable
ratificar en una muestra obtenida del tubo colector de la unidad de sangre o concentrado
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eritrocitario, el grupo ABO y antgeno Rho (D),mediante una prueba de aglutinacin

directa
PRUEBAS DE COMPATIBILIDAD
DETERMINACION DE GRUPO SANGUINEO ABO

Un grupo sanguneo es una forma de agrupar ciertas caractersticas de la sangre que

dependen de los antgenos presentes en la superficie de los glbulos rojos y en el suero
de la sangre.
Esta ha sido la base para que se pueda clasificar a la sangre en cuatro grupos en cuanto
al sistema ABO: grupo A, grupo AB, grupo B y grupo O; y en dos con respecto al sistema
Rh: Rh negativo o Rh positivo. Con lo que se puede formar ocho grupos posibles por las
combinaciones posibles entre ambos sistemas.
Las transfusiones de sangre entre grupos incompatibles pueden provocar una reaccin
inmunolgica que puede desembocar en muerte.
Las personas con sangre del tipo A tienen glbulos rojos que expresan antgenos de tipo A
en su superficie y anticuerpos contra los antgenos B en el suero de su sangre.
Las personas con sangre del tipo B tienen la combinacin contraria, glbulos rojos con
antgenos de tipo B en su superficie y anticuerpos contra los antgenos A en el suero de
su sangre.
Los individuos con sangre del tipo O no expresan ninguna de los dos antgenos (A o B) en
la superficie de sus glbulos rojos pero pueden fabricar anticuerpos contra ambos tipos,
mientras que las personas con tipo AB expresan ambos antgenos en su superficie y no
fabrican ninguno de los dos anticuerpos.
A causa de estas combinaciones, el tipo O puede ser transfundido sin ningn problema a
cualquier persona con cualquier tipo ABO y el tipo AB puede recibir de cualquier tipo ABO.
Los donantes de sangre y los receptores deben tener grupos compatibles. El grupo O es
compatible con todos, por lo que quien tiene dicho grupo se dice que es un donante
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universal. Por otro lado, una persona cuyo grupo sea AB+ podr recibir sangre de
cualquier grupo, y se dice que es un receptor universal.
Clasificacin ABO Rh (Tubo)
Fundamento
El primer sistema de grupo sanguneo identificado y el ms significativo en medicina
transfusional es el ABO, por tanto su determinacin es obligatoria y rutinaria en el banco
de sangre y debe incluir la prueba celular y la prueba srica, en el primer caso se utilizan
anticuerpos (antisueros) anti A y

anti B para determinar la presencia o ausencia de

antgenos del grupo A, B o A, B en los glbulos rojos del donante. En el segundo caso se
emplean glbulos rojos A1 y B como reactivo para detectar anticuerpos naturales anti A y
Anti B y confirmar el grupo detectado en la prueba globular o eritrocitaria. Por otra parte
los antgenos D del sistema RH son los ms relevantes despus de los antgenos A, B y
A, B del sistema ABO y su presencia en los donantes debe ser evaluada obligatoriamente
y de rutina, empleando antisueros que permitan detectar las variantes parciales y dbiles
del mismo.
Muestras requeridas

Suspensin de glbulos rojos 3 5%

-Suero del donante o receptor
Reactivos
Para efectos prcticos, los antisueros y clulas utilizados fueron controlados antes de la
prctica: dicho control consisti en: prueba de potencia, avidez y especificidad para
antisueros y para reactivos celulares prueba de especificidad.

-Antisuero Anti A, Anti B, Anti A, B y Anti D.

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-Antisuero Lectina A1 (La utilizacin de este solo se dar cuando la muestra sea grupo A o
AB).
-Clulas para prueba inversa de la hemoclasificacin: A1, A2, B y O.
-Solucin salina 0,9%( control negativo de la prueba directa)
-Control del Rh.

Equipos y materiales
-

Tubos de Kahn

Pipetas: 10 100 uL; 20 200 uL y 100 a 1000 uL.

Puntas par pipeta.
Serofuga.

Desarrollo del procedimiento

-

Para la prueba directa marque seis (6) tubos de la siguiente forma con el No de la
muestra asignada (XXX) y agregue los reactivos en volumen y orden de acuerdo al
grafico:

ABO

1.

Rh

XXXX

XXXX

XXXX

Anti
A

Anti
B

Anti
A,B

50 uL anti A
anti D

50 uL anti B

XXXX

XXXX

S.S

Anti
D

50 uL anti A,B

50 uL S.S

XXXX
Ctrol

50 uL

Control Rh
+

+
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2.

50 uL Mx

Mx

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50 uL Mx

50 uL Mx

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50 uL Mx

50 uL

50 uL Mx

Suspensin de glbulos rojos 3 5%

-

Para la prueba inversa marque cuatro (4) tubos de la siguiente forma con el No de
la muestra asignada (XXX) y agregue los reactivos en volumen y orden de acuerdo al
grafico:

1.

XXXX

XXXX

XXXX

XXXX

Cel
A1

Cel
A2

Cel
B

Cel
O

50 uL clulas A1

50 uL clulas A2

50 uL celulas B

50

uL clulas O
+

+
2.

100 uL Mx

100 uL Mx

100 uL Mx

100 uL Mx

Suero
-

Agite suavemente y centrifugue los tubos el tiempo, establecido para la centrifuga a

utilizar (Tiempo de lectura).

Lea aglutinacin o hemolisis en cada uno de los tubos y reporte en formato

correspondiente.

Registre la interpretacin de la clasificacin sangunea, de acuerdo al siguiente cuadro

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Anti A

3+

Anti B

4+
3+

Anti

Contro

A,B

3+

3+

Cel A2

3+

4+

4+

3+

3+

4+

4+

3+

3+

3+

4+

4+

4+

3+

3+

3+

4+

4+

4+

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Cel B

Anti D

3+

3+

3+

3+

4+

4+

4+

4+

3+

3+

3+

4+

4+

4+

3+

3+

4+

4+

3+

4+
3+

Cel A1

4+

4+

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Contro

Interpretaci

O Positivo

O
Negativo

A Positivo

A Negativo

3+

B Positivo

4+

3+

3+

4+

4+

3+

3+

4+

4+

4+

Negativo

3+

AB Positivo

AB

4+

Negativo

Confirmacin del Antgeno D

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Fundamento.
No todos los glbulos rojos pueden ser clasificados como Rh positivo o Rh negativo,
mediante las pruebas de aglutinacin directa con los sueros anti Rh. La mayora de
muestras de sangre de donantes generan aglutinaciones de tres o cuatro cruces, bien
definidas y claras inmediatamente despus de la centrifugacin y por tanto pueden ser
fcilmente clasificadas como Rh positivo. Sin embargo las muestras para las que no se
evidencia aglutinacin directa al contacto con el antisuero Anti D, no pueden ser
clasificadas inmediatamente como Rh negativo, dado que es posible que el antgeno D
est presente en las clulas del donante en una expresin dbil que puede ser:
Antgeno D

dbil: Antgeno D que cuenta con todos los epitopes antignicos del

antgeno D convencional, sin embargo su expresin hereditariamente o por interaccin

gentica es dbil y generalmente su reaccin es negativa o muy baja al enfrentarlo con el
antisuero anti D en fase salina. Los individuos que lo poseen no se sensibilizan con el
antgeno D dado que su estructura antignica esta completa.
Antgeno D parcial: Antgeno D que estructuralmente presenta ausencia de una o ms
subunidades y generalmente su reaccin es negativa o muy baja al enfrentarlo con el
antisuero anti D en fase salina. Los individuos que lo poseen pueden sensibilizarse o
crear anticuerpos anti D contra la subunidad ausente
Y para demostrar su presencia se requiere potenciar la unin antgeno anticuerpo y la
aglutinacin llevando la reaccin a incubacin a 37oC y fase de coombs o prueba de anti
globulina.
DE ACUERDO A LO ANTERIOR ESTA PRUEBA SOLO SE REALIZARA PARA
MUESTRAS Rh NEGATIVO

Muestras requeridas:
Suspensin de glbulos rojos 3 5%.

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Reactivos

-Antisueros Anti D.
-Solucin salina 0,9%.
-Potenciador Dia LISS
-Suero de Coombs
-Clulas Control Coombs

Equipos y materiales: los mismos requeridos en la clasificacin sangunea.

Desarrollo del procedimiento.

Marque dos (2) tubos de la siguiente forma con el No de la muestra asignada (XXX)
y agregue los reactivos en volumen y orden de acuerdo al grafico:

XXXX

Anti
D 50

Ctrol

uL anti D
50 uL Control Rh
+
+
50 uL mx (suspensin de glbulos rojos 3-5%)

1.
2.

XXXX

Agite y centrifugue los tubos el tiempo, establecido para la centrifuga a utilizar

(Tiempo de lectura).

Lea aglutinacin o hemolisis en cada uno de los tubos y reporte en formato

correspondiente.

Agregue 4 gotas de potenciador DiaLISS.

Mezcle e incube durante 5 minutos a 37oC.

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Centrifugue los tubos el tiempo, establecido para la centrifuga a utilizar ( Tiempo de

lectura).

Lea aglutinacin o hemolisis en cada uno de los tubos y reporte en formato

correspondiente.

Lave tres (3) veces con solucin salina isotnica 0,9%:

Desprenda bien el botn de glbulos rojos del fondo del tubo, con
movimientos circulares suave (si aplica).
Agregue aproximadamente 1 ml de solucin salina al 0,9% con frasco lavador,
agite suavemente y complete el volumen hasta 1cm antes de la boca del tubo
(evite llenarlo completamente para evitar contaminacin).
Centrifugue

los tubos el tiempo establecido para la centrifuga a utilizar

(Tiempo de lavado).
Decante el sobrenadante en solucin desinfectante, volteando el tubo una
sola vez firmemente.
Repita este procedimiento tres veces seguidas. Despus del ltimo lavado y
decantacin de la solucin salina:
-

Agregue dos (2) gotas de suero de coombs y agite suavemente.

Centrifugue los tubos el tiempo, establecido para la centrifuga a utilizar (Tiempo de

lectura).

Lea aglutinacin o hemolisis en cada uno de los tubos y reporte en formato

correspondiente.

Para descartar aglutinacin, observe al microscopio los tubos negativos.

Para los tubos negativos (en los que no se observa reaccin), observe al microscopia
para descartar aglutinacin, agregue 1 gota de clulas control coombs y centrifugue,
con el fin de evaluar la eficacia de todo el procedimiento; si este se realizo de forma
adecuada se obtendr aglutinacin. Reporte los resultados obtenidos en el formato
correspondiente.

Registre la interpretacin de la prueba de acuerdo al siguiente cuadro:

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Anti D

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Control Rh ( Negativo)

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Interpretacin
Rh : NEGATIVO

Negativo: 0+

Negativo: 0+

Confirmacin del D : NEGATIVO

La unidad debe ser rotulada como Rh
Negativo y el donante o receptor
catalogado como tal.
Rh : POSITIVO
Se evidencia la presencia de un antgeno
D dbil o antgeno D parcial, por tanto la

Positivo
1+ a 4 +

unidad debe ser rotulada como:

Negativo: 0+

0/ weak : fase coombs

Rh: negativo
Du: positivo
Con el fin de no generar confusin.
Para el caso del receptor debe ser
clasificado como Rh: Negativo con el fin
que sea transfundido como tal

Positivo: 1+ a 4+

Positivo: 1+ a 4+

Prueba no valida, se debe investigar

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0/ weak: fase coombs

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0/ week: fase coombs

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coombs directo positivo.

Rastreo de anticuerpos irregulares

Fundamento.
El rastreo debe ser realizado a todas las unidades recolectadas y receptores de sangre o
componentes, en busca de anticuerpos irregulares de significancia clnica. La deteccin
de anticuerpos irregulares en los donantes previene su transferencia pasiva al receptor,
pues la deteccin origina la eliminacin de componentes plasmticos; en los receptores
como prueba pretransfusional aporta mayor seguridad a la transfusin pues el hallazgo de
anticuerpos irregulares obliga la identificacin del anticuerpo y la bsqueda de unidades
que no contengan el antgeno correspondiente, independiente del resultado de la prueba
cruzada mayor. En ambos casos esta prueba contribuye a disminuir el riesgo de
reacciones adversas a la transfusin.

El rastreo de anticuerpos irregulares se realiza enfrentando el suero o plasma del donante

o receptor con clulas que exhiben la mayora de antgenos generadores de anticuerpos
de significancia clnica, de manera que si en la muestra estudiada se encuentran
anticuerpo(s) irregulares su unin con el antgeno presente en la clula testigo o de
rastreo, generara aglutinacin o hemolisis, es importante aclarar que esta unin debe ser
potenciada por diferentes mecanismos por lo que se hace necesario someter la reaccin a
la prueba de antiglobulina indirecta con el fin de potenciar la unin antgeno anticuerpo y
hacerla visible.

Muestras requeridas:
Suspensin de glbulos rojos 3 5% y suero o plasma
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Reactivos
-

Clulas de rastreo de anticuerpos: I, II y III

-Solucin salina 0,9%.
-Potenciador Dia LISS
-Suero de Coombs
-Clulas Control Coombs
Equipos y materiales:
Los mismos requeridos en las pruebas anteriores.
Desarrollo del procedimiento.
-

Marque cuatro (4) tubos de la siguiente forma con el No de la muestra asignada

(XXX) y agregue los reactivos en volumen y orden de acuerdo al grafico:

1.

XXXX

XXXX

XXXX

XXXX

Cel I

Cel II

Cel III

Auto
Ctrol

50 uL Cel I
suspension GR
+

50 uL Cel II

50 uL Cel III
+

50 uL
+

+
2.

100 uL Mx
uL Mx

100 uL Mx

100 uL Mx

Suero
-

Agite y centrifugue los tubos el tiempo, establecido para la centrifuga a utilizar

( Tiempo de lectura).

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100

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Lea aglutinacin o hemolisis en cada uno de los tubos y reporte en formato

correspondiente.
Agregue 4 gotas de potenciador DiaLISS.
Mezcle e incube durante 5 minutos a 37oC.
Centrifugue los tubos el tiempo, establecido para la centrifuga a utilizar ( Tiempo de
lectura).
Lea aglutinacin o hemolisis en cada uno de los tubos y reporte en formato
correspondiente.
Lave tres (3) veces con solucin salina isotnica 0,9%:
Desprenda bien el botn de glbulos rojos del fondo del tubo, con
movimientos circulares suave ( si aplica).
Agregue aproximadamente 1 ml de solucin salina al 0,9% con frasco lavador,
agite suavemente y complete el volumen hasta 1cm antes de la boca del tubo
(evite llenarlo completamente para disminuir riesgo de contaminacin).
Centrifugue los tubos el tiempo establecido para la centrifuga a utilizar
( Tiempo de lavado).
Decante el sobrenadante en solucin desinfectante, volteando el tubo una
sola vez firmemente.
Repita este procedimiento tres veces seguidas. Despus del ltimo lavado y
decantacin de la solucin salina:

Agregue dos (2) gotas de suero de coombs y agite suavemente.

Centrifugue los tubos el tiempo establecido para la centrifuga a utilizar (Tiempo de
lectura).
- Lea aglutinacin o hemolisis en cada uno de los tubos y reporte en formato
correspondiente.
- Descarte aglutinacin en los tubos negativos, observando al microscopio.
- Para los tubos negativos ( en los que no se observa reaccin), agregue 1 gota de
clulas control coombs y centrifugue, con el fin de evaluar la eficacia de todo el
procedimiento; si este se realizo de forma adecuada se obtendr aglutinacin.
Reporte los resultados obtenidos en el formato correspondiente.
Registre la interpretacin de la prueba.
Negativo: ausencia de aglutinacin o hemolisis en todos los tubos.
Positivo: presencia de aglutinacin o hemolisis en uno o varios tubos.

Coombs directo
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Fundamento.
Es usada para detectar sensibilizacin in vivo de los glbulos rojos. Es de gran utilidad en
el diagnstico de enfermedad hemoltica del recin nacido, anemia hemoltica
autoinmune, anemia hemoltica, sensibilizacin inducida por drogas e investigacin de
reacciones transfusionales. Consiste en evaluar la presencia de anticuerpos
sensibilizando el glbulo rojo del paciente o donante mediante la utilizacin de la prueba
de antiglobulina directa, en la cual se enfrentan los glbulos rojos en estudio con un anti
anticuerpo. La presencia de aglutinacin o hemolisis evidencia la unin del anticuerpo
unido al glbulo rojo (sensibilizacin in vivo) y en anti anticuerpo agregado en el suero de
coombs o antiglobulina.

Muestras requeridas:
Suspensin de glbulos rojos 3 5%.
Reactivos:
Suero de Coombs
Equipos y materiales:
Los mismos requeridos en las pruebas anteriores.

Descripcin del procedimiento

Marque un (1) tubo de la siguiente forma con el No de la muestra asignada (XXX) y

agregue los reactivos en volumen y orden de acuerdo al grafico:

XXXX
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Coom
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bs
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50 uL suspensin de glbulos rojos 3 5% (Mx)

+
50 uL de suero de Coombs

1.
2.
-

Agite y centrifugue los tubos el tiempo establecido para la centrifuga a utilizar

(Tiempo de lectura).
- Lea aglutinacin o hemolisis en cada uno de los tubos y reporte en formato
correspondiente.
Registre la interpretacin de la prueba:
Negativo: ausencia de aglutinacin o hemolisis.
Positivo: presencia de aglutinacin o hemolisis.

ANEXO 1 Lectura e interpretacin de reacciones de aglutinacin

0/weak: No se ve aglutinacin macroscpica, solo al microscopio.
1+: Sobrenadante turbio y muchos aglutinados pequeos.
2+: Sobrenadante claro y varios aglutinados medianos.
3+: Sobrenadante claro y aglutinado grande acompaado de varios de menor tamao.
4+: Sobrenadante claro y un botn solido de eritrocitos.

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BIBLIOGRAFIA
1. Circular n 26, del 11 de abril del 2000 del MINSAL Recomendaciones para el
uso de transfusiones de sangre y sus componentes
2. Resolucin exenta n 2.171 del 06 de diciembre de 1999
3. Gua del comit medicina transfusional del Hospital San Camilo
4. Terapia transfusional del Hospital Clnico de la Universidad de Chile
5. Instructivo para solicitar transfusiones, Sociedad Chilena de Hematologa,
capitulo de medicina transfusional
6. Dr. Pedro Meneses, Uso y abuso de la terapia transfusional, SS Valparaso-San
Antonio, 2002

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