TRANSFORMACIN GENTICA DE PLANTAS

A lo largo de los siglos, el hombre ha manipulado genticamente a diversas especies

vegetales, con el propsito de obtener variedades ms productivas. El conocimiento
progresivamente ms amplio y profundo de los principios que rigen la herencia en los
seres vivos, y de la naturaleza qumica del material gentico ha incrementado la
habilidad del hombre para desarrollar lneas genticamente mejoradas de sus cultivos,
con el consecuente impacto en la produccin agrcola mundial.
La tcnica de ingeniera gentica representa la fase ms reciente de esta evolucin en
la capacidad de intervenir deliberadamente sobre el material gentico de los organismos.
El surgimiento de esta nueva tcnica ha abierto una amplia y prometedora gama de
posibilidades para el mejoramiento gentico de las especies cultivadas por el hombre,
creando lo que se supone ser una nueva revolucin en la agricultura.
El nacimiento de esta tcnica ha sido posible gracias a dos hechos fundamentales.
Primeramente el desarrollo de la llamada tecnologa de ADN recombinante que nos da
la posibilidad de aislar, manipular, y transferir genes, y por otro lado, los avances de los
sistemas de cultivos vegetales, que nos da la posibilidad de controlar hasta cierto punto
los procesos morfognicos in vitro y regenerar plantas completas partiendo de una sola
clula.
La transformacin gentica de plantas consiste en introducir al genoma de stas, nueva
informacin gentica que les confiera caractersticas diferentes. Los nuevos genes
transferidos e insertos dentro del genoma del husped determinan la formacin de
productos (por ejemplo protenas) con efecto en el fenotipo, ya sea en la proteccin de
la planta frente a enfermedades, en el rendimiento, en sus propiedades nutritivas o en
otras caractersticas.
La fuente de esta nueva informacin puede ser cualquier organismo vivo, por lo que no
existen barreras taxonmicas cuando se utiliza esta metodologa.
Son varios los mtodos para transferir genes a clulas o tejidos vegetales:
1- Sistemas de transferencia de ADN basados en vectores biolgicos
- Sistemas basados en Agrobacterium tumefaciens y Agrobacterium rhizogenes.
- Sistemas basados en virus vegetales.
2- Sistemas de transferencia directa de ADN
- Transferencia por biobalstica.
- Transferencia mediada por cationes divalentes y/o electroporacin
- Transferencia con whiskers de carburo de silicio.
- Transferencia por microinyeccin.
Para las plantas, el mtodo al que se recurre con ms frecuencia es el que utiliza como
vector la bacteria del suelo Agrobacterium tumefasciens. Los investigadores insertan el

gen o genes deseados en la bacteria y seguidamente infectan a la planta hospedante. Los

genes deseados se transmiten a sta junto con la infeccin. Este mtodo se utiliza
principalmente con especies dicotiledneas como el tomate y la papa. Algunos cultivos,
en particular las especies monocotiledneas como el trigo y el centeno, no son
naturalmente susceptibles de transformacin por medio de A. tumefasciens, aunque
recientemente se ha utilizado con xito el mtodo para transformar trigo y otros
cereales. La tcnica aplicada con ms frecuencia a esos cultivos es la biobalstica que
consiste en revestir el gen deseado con partculas de oro o tungsteno y utilizar un
lanzagenes para conseguir que el gen penetre a gran velocidad en el organismo
hospedante.
Una vez transferido el gen, el cultivo debe ser sometido a una prueba para cerciorarse de
que el gen se expresa debidamente y se mantiene estable a lo largo de varias
generaciones de mejoramiento; para ello se utilizan genes reporteros y marcadores de
seleccin as como las tcnicas de PCR, Southern blot, Western blot, ELISA, entre
otros.
Pasos de la modificacin gentica moderna
Identificar, aislar e insertar genes en un vector
Agregar genes marcadores
Transferir las construcciones a las clulas vegetales
Seleccionar clulas transformadas
Regenerar plantas completas con nuevas caractersticas
Evaluar las plantas transgnicas

Cruzamiento tradicional vs. Modificacin gentica

Entre especies sexualmente compatibles. Entre especies sexualmente incompatibles.
Miles de genes pertenecientes a una Posee TODOS los genes que conforman su
s
planta son mezclados con los miles de
ge
genes de su compaera de cruzamiento.
genoma, MAS el gen de inters.
Transfiere aquella caracterstica deseada, Transfiere solo la caracterstica dada por el gen
pero tambin puede transferir rasgos no
incorporado.
deseados.

Con la ingeniera gentica aplicada a la mejora de los alimentos tenemos un mayor y

mas preciso conocimiento de lo que hacemos, mientras que con la hibridacin lo
hacemos al azar.

La ingeniera gentica puede ser considerada como una desviacin radical de las
tcnicas convencionales de mejoramiento porque confiere a los cientficos la capacidad
de transferir material gentico entre organismos que no podran obtenerse por los
medios clsicos.

Para qu se puede modificar un cultivo por biotecnologa?

Primera Ola: Resistencia y Tolerancia

o Tolerancia a herbicidas (RR)
Ejemplos: soja, algodn, maz, remolacha, canola.
o Resistencia a insectos (Bt)
Ejemplos: tomate, tabaco algodn, maz.
o Resistencia a virus
Ejemplos: papa, papaya.

Segunda Ola: Caracteres de calidad

Ejemplos:
- Papa con menor contenido de almidn para que absorba menos aceite.
- Cereales ms crocantes.
- Algodn teido desde la planta.

Tercera Ola: Las plantas como bioffricas

Ejemplos:
- Plantas productoras de medicamentos incluyendo vacunas y anticuerpo.
- Arroz Dorado.
- Dentfrico con anticuerpos contra las caries.
- Vacunas comestibles (frutas).
- Insulina Humana.
- Animales Transgnicos PAMPA

Cuarta Ola: Biotecnologa y Ambiente

Ejemplos:
- Alamo tolerante a mercurio.
- Papaya tolerante a aluminio.
- Plantas que fijan Nitrgeno del aire.

Otras aplicaciones
Cultivos modificados con nuevas caractersticas.
Plantas micropropagadas in vitro y plantas de mejor calidad sanitaria.
Bioproductos a partir de tejidos, plantas y animales.
Nuevos mtodos de diagnstico de enfermedades de plantas y animales.
Nuevos mtodos de deteccin de agentes causantes de enfermedades transmitidas por
alimentos.
Nuevas vacunas.
Bancos de germoplasma in vitro.

La mayora de los cultivos transgnicos plantados hasta la fecha slo incorporan un

nmero muy limitado de genes destinados a conferir resistencia a insectos o tolerancia a
herbicidas.
Se estn realizando actividades similares para mejorar la tolerancia de las plantas a otras
condiciones desfavorables, como la sequa, la salinidad del suelo y las temperaturas
extremas.
La mejora nutricional de los cultivos puede contribuir de manera significativa a reducir
la malnutricin por carencia de micronutrientes en los pases en desarrollo. La
aplicacin conjunta de diversas biotecnologas puede impulsar el bioenriquecimiento, es
decir la obtencin de alimentos con un contenido nutricional mejorado.

PARTE PRCTICA DE LABORATORIO

Cmo extraer ADN de cualquier cosa viviente
Primero necesitas encontrar algo que contenga ADN. Ya que el ADN es el plano de
instrucciones para la vida, cualquier cosa viviente contiene ADN.
Para este experimento preferimos usar arvejas verdes, pero tambin hay montones de
otras fuentes de ADN, como por ejemplo, espinacas, hgado de pollo, cebollas, brcoli,
etc.
Necesitas alcohol, detergente y enzimas (ablandador de carne).
Sigue estos tres sencillos pasos:
Pon en una licuadora:
Tu fuente de ADN (ms o menos 100 ml o 1/2 de taza de arvejas)
Un puado grande de sal de mesa (menos de un ml o 1/8 de cucharadita)

Agua fra. El doble de la cantidad de tu fuente de ADN (ms o menos 200 ml o 1 de

taza)
Lica todo a alta velocidad por 15 segundos.
El licuado separa las clulas de las arvejas unas de otras, por lo que ahora tienes una
muy diluida sopa de clulas de arvejas.
1. Cuela tu sopa de clulas de arvejas. Cunta sopa de arvejas tienes? Aade como 1/6
de esa cantidad de detergente lquido (ms o menos 30 ml o dos cucharadas soperas) y
mzclalo. Deja reposar la mezcla entre 5 y 10 minutos.
Vierte la mezcla en tubos de ensayo u en otros contenedores pequeos de vidrio, cada
uno como 1/3 lleno.
2. Aade un pellizquito de enzima a cada tubo de ensayo y agtalo suavemente. Se
cuidadoso! Si lo agitas demasiado fuerte rompers el ADN hacindolo ms difcil de
ver.
Usa ablandador de carne como enzima. Si no puedes encontrar ablandador, intenta usar
jugo de pia o solucin limpiadora para lentes de contacto.
3. Ladea tu tubo de ensayo y lentamente vierte el alcohol (isoproplico al 70-95% o
alcohol etlico) sobre la pared del tubo de manera que forme una capa sobre la mezcla
de arvejas. Sigue vertiendo hasta que tengas en el tubo aproximadamente la misma
cantidad de alcohol que de mezcla de arvejas.
El ADN se elevar desde la mezcla de arvejas hasta la capa de alcohol. Puedes usar un
palito de madera u otro tipo de gancho para arrastrar el ADN que est en el alcohol.

El alcohol es menos denso que el agua, por lo que flota en la parte superior. Debido a
que se formaron dos capas separadas, toda la grasa y protena que rompimos en los dos
primeros pasos, irn al fondo, que es la capa acuosa, donde se sienten ms confortables,
mientras que el ADN prefiere la capa superior, el alcohol.
Felicitaciones! Acabas de completar una extraccin de ADN!