Está en la página 1de 19
UNIVERSIDAD NACIONAL DE HUANCAVELICA FACULTAD DE CIENCIAS DE INGENIERIA INGENIERIA AMBIENTAL Y SANITARIA FACULTAD DE CIENCIAS DE INGENIERIA ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERIA AMBIENTAL Y SANITARIA INFORME DE PRACTICA N° 01 TEMA: SEMESTRE: ASIGNATURA: SECCION: DOCENTE: ESTUDIANTES: HUANCAVELICA – PERU 2015 UNIVERSIDAD NACIONAL DE HUANCAVELICA FACULTAD DE CIENCIAS DE INGENIERIA INGENIERIA AMBIENTAL Y SANITARIA INTRODUCCIÓN El siguiente informe trata acerca del reconocimiento, uso y manejo de cada uno de los equipos de laboratorio, para tener un conocimiento de la forma de actuar frente a situaciones de experimentación. La esencia del trabajo es saber interpretar los procedimientos del manejo de los equipos, aprovechando su utilidad y saber los límites de tales usos; para que se eviten accidentes y errores; ya que en muchas ocasiones los estudiantes por falta de información no siguen los procedimientos que se les da. El uso del equipo para llevar a cabo una prueba, cualquiera que sea, es de suma importancia para que se realice en forma adecuada. La elección del equipo estará de acuerdo con las características y funciones que éste tenga y nos sea útil para una práctica determinada. UNIVERSIDAD NACIONAL DE HUANCAVELICA FACULTAD DE CIENCIAS DE INGENIERIA INGENIERIA AMBIENTAL Y SANITARIA I. OBJETIVOS:  Reconocer de manera adecuada los diferentes equipos de laboratorio.  Tener conocimiento del uso y funciones de cada uno de ellos.  Tener en cuenta el manejo adecuado de cada uno de los equipos.  Conocer los propósitos de cada instrumento. II. FUNDAMENTOS TEORICOS: Los equipos de laboratorio (espectrofotómetro, baño maría, centrifugas, balanza analítica, balanza de precisión, peachimetro): Los equipos de laboratorio son importantes para las prácticas de laboratorio ya que cada equipo tiene una función correspondiente y son esenciales para las prácticas de bioquímica. III. MATERIALES: EQUIPOS: IV.  Espectrofotómetro.  Baño maría.  Centrifugas.  Balanza analítica digital.  Balanza de precisión.  Peachimetro digital. METODOS: Explicación de cada uno de los equipos de laboratorio de bioquímica (Espectrofotómetro, baño maría, centrifugas, balanza analítica digital, balanza de precisión, peachimetro digital), indagando y agregando información sobre cada uno de los equipos vistos en la práctica. BIOQUIMICA (PRÁCTICA) 3 UNIVERSIDAD NACIONAL DE HUANCAVELICA FACULTAD DE CIENCIAS DE INGENIERIA INGENIERIA AMBIENTAL Y SANITARIA “Espectro” → Espectro de radiación electromagnética “Foto” → Luz visible “Metría” → Medición  El espectrofotómetro mide la concentración, absorbancia (el equivalente en mg) y transmitancia (cantidad de luz que transmite) de la sustancia. Se tiene que realizar un calentamiento previo de 15 minutos antes. Para este equipo se hace uso de las cubetas de color transparente que pueden ser descartables, cuarzo y vidrio y se tiene que tener un estricto cuidado en cuanto a su limpieza. (Chavéz, 2015)  Hacemos uso del blanco que es un reactivo y solo podemos poner agua destilada si es absorbancia y tiene que llegar a 0 y en caso de ser transmitancia llega al 100%. (Chavéz, 2015)  Estudio cuantitativo del espectro lumínico. Sirve para efectuar análisis de sustancias orgánicas o inorgánicas, dentro de rangos de longitud de onda determinados. (Connor, "Curso de análisis farmacéutico", 1980) En general, cuando la luz pasa a través de una solución una parte de la misma será absorbida por esta, mientras que otra parte pasará o será transmitida a través de la solución. La luz absorbida depende de la longitud de onda, la concentración de la solución y la longitud de la trayectoria. La luz transmitida permite determinar propiedades como la concentración de las sustancias, aspecto que en el campo de la salud básica sirve para efectuar multitud de análisis necesarios para determinar el estado de salud de un paciente. (Connor, "Curso de análisis farmacéutico", 1980)  La medida de la absorción de la luz por una sustancia en solución es un método importante en el análisis bioquímico. BIOQUIMICA (PRÁCTICA) 4 UNIVERSIDAD NACIONAL DE HUANCAVELICA FACULTAD DE CIENCIAS DE INGENIERIA INGENIERIA AMBIENTAL Y SANITARIA  La cantidad de luz absorbida es proporcional a la concentración de la sustancia en solución. La absorción varía con la longitud de onda de la luz, debiendo efectuarse la medida usando luz de longitud de onda de máxima absorción λ máx.), que es característica de cada sustancia. Las sustancias coloreadas tienen una _λ máx. En la región visible del espectro. Otras sustancias absorben luz de otras regiones del espectro (por ejemplo los ácidos nucleicos absorben luz ultravioleta) y no son detectadas por el ojo humano. (Miñones, 1978) Para conocer la concentración de una sustancia coloreada en solución se podría comparar visualmente la intensidad de color de dicha solución frente a una o varias soluciones de concentración conocida. Sin embargo resulta más preciso utilizar un aparato, el espectrofotómetro, que mide la cantidad de luz que atraviesa una solución.  El espectrofotómetro es un aparato que mide la cantidad de luz que pasa a través de una solución. Está compuesto por las siguientes partes: FUENTE DE ENERGIA: lámpara que emite un haz luminoso que contiene un rango de longitudes de onda. MONOCROMADOR: se llama también selector de longitud de onda. Consiste en una red de difracción que separa las diferentes radiaciones procedentes de la fuente y selecciona la longitud de onda requerida. RENDIJA: es un dispositivo que sirve para seleccionar un haz fino de radiación que será el que incida sobre la muestra, evitando que la atraviese la luz difusa. BIOQUIMICA (PRÁCTICA) 5 UNIVERSIDAD NACIONAL DE HUANCAVELICA FACULTAD DE CIENCIAS DE INGENIERIA INGENIERIA AMBIENTAL Y SANITARIA COMPARTIMENTO DE MUESTRA: en él se coloca la solución problema, que va a absorber un haz fino de luz monocromática. DETECTOR: es un sistema que transforma la energía luminosa que atraviesa la muestra en energía eléctrica. Posee además un amplificador de la señal eléctrica recibida que posibilita su medición posterior. MEDIDOR: traslada la energía eléctrica producida en el paso anterior hasta un galvanómetro de aguja dónde figuran dos escalas graduadas; una mide la absorbancia y la otra el tanto por ciento de transmitancia. Cuando se mide la concentración de una solución se usa la escala de absorbancia. Los espectrofotómetros más modernos dan una lectura digital y algunos incluso pueden transformarla en concentración. En la figura 1 se representa un esquema de un espectrofotómetro básico. Fuente Monocromador Rendija Cubeta Detector Medidor BIOQUIMICA (PRÁCTICA) 6 UNIVERSIDAD NACIONAL DE HUANCAVELICA FACULTAD DE CIENCIAS DE INGENIERIA INGENIERIA AMBIENTAL Y SANITARIA El concepto de baño María implica el calentamiento indirecto, por convección térmica del medio que es agua destilada. (Alvaréz, 2015) Función principal: Calentar la sustancia indirectamente (es indirectamente, porque mediante el vapor se calienta). (Alvaréz, 2015)  Esterilizar.  Saponificación  Calentar sustancias y reactivos Partes del baño maría:  Tapa, aislar la sustancia de la contaminación.  Rejilla.  Tablero.  Transmisor de calor.  Punto de desfoque.  Ventilador. BIOQUIMICA (PRÁCTICA) 7 UNIVERSIDAD NACIONAL DE HUANCAVELICA FACULTAD DE CIENCIAS DE INGENIERIA INGENIERIA AMBIENTAL Y SANITARIA El baño de María es un equipo que se utiliza en el laboratorio para realizar pruebas serológicas y procedimientos de incubación, aglutinación, inactivación, biomédicos, farmacéuticos y hasta industriales. Por lo general, se utilizan con agua, pero también permiten trabajar con aceite. Los rangos de temperatura en los cuales normalmente son utilizados están entre la temperatura ambiente y los 60 °C. También se pueden seleccionar temperaturas de 100 °C, utilizando una tapa de características especiales. Los baños de María son fabricados con cámaras cuya capacidad puede seleccionarse entre los 2 y los 30 litros. (Ettorre & Angeletti, 2012) BIOQUIMICA (PRÁCTICA) 8 UNIVERSIDAD NACIONAL DE HUANCAVELICA FACULTAD DE CIENCIAS DE INGENIERIA INGENIERIA AMBIENTAL Y SANITARIA PARTES GENERALES DEL BAÑO MARIA: Agitador. Dispositivo diseñado para añadir energía cinética a un fluido contenido en un recipiente, con el fin de mantener homogéneas sus propiedades; por ejemplo: temperatura, color, densidad. Bandeja difusora. Dispositivo que se coloca en el fondo de los baños de María, con el fin de soportar los recipientes que se colocan dentro del tanque; además, permite que las corrientes de convección térmica, que se generan en el fluido que contiene el tanque, circulen de arriba - abajo - arriba, manteniendo la temperatura de forma homogénea en los niveles seleccionados por el operador. Por lo general, la bandeja difusora es de acero inoxidable. Fusible. Dispositivo de seguridad que protege los circuitos eléctricos de los excesos de corriente. Se fabrican con materiales cuyas dimensiones y propiedades los habilitan para trabajar bien dentro de unas condiciones predefinidas. Si por alguna razón se extralimitan los parámetros de diseño, se funde el material y se interrumpe el paso de corriente. Pintura electrostática. Procedimiento mediante el cual se genera una gran diferencia de potencial (80-150 kw) entre la pieza que se quiere pintar y la unidad de atomización que suministra la pintura, en forma de partículas finamente pulverizadas. Las partículas de pintura se cargan eléctricamente y se depositan por atracción de las cargas eléctricas, sobre la pieza que quiere pintar, cubriéndola completamente. Se introduce entonces la pieza cubierta de partículas de pintura en un horno eléctrico que funde las partículas de pintura, haciendo que las mismas se adhieran con gran fortaleza sobre la pieza. Resistencia (eléctrica). Propiedad que tienen las diferentes sustancias o materiales, en virtud de la cual se impide en mayor o menor grado el paso de la corriente eléctrica. En los textos se identifica la resistencia con la letra [R]. Para un cuerpo de sección uniforme, por ejemplo: un alambre, la resistencia [R] es una magnitud directamente proporcional a la longitud [l] e inversamente proporcional al área seccional [a]. La resistencia se representa mediante la siguiente ecuación donde: BIOQUIMICA (PRÁCTICA) 9 UNIVERSIDAD NACIONAL DE HUANCAVELICA FACULTAD DE CIENCIAS DE INGENIERIA INGENIERIA AMBIENTAL Y SANITARIA k = constante que depende de las unidades empleadas l = longitud del conductor a = área seccional del conductor La unidad de resistencia es el ohmio y se representa normalmente por la letra griega. Resistencia de inmersión. Resistencia eléctrica que se encuentra instalada dentro de un tubo sellado. Se utilizan generalmente para calentar fluidos como agua o aceite. (Ettorre & Angeletti, 2012) El docente nos dio a conocer dos tipos de centrifugas uno de ellos es el microcentrifuga (V=1300 rpm, es mayor por capilaridad) y el otro es la centrifuga de mesa (V= 5200 rpm). (Sánchez, 2015) Siempre tienen que estar los tubos de forma paralela. (Sánchez, 2015) Entran capilares de vidrio (Sánchez, 2015) Se puede subir y bajar para calibrar la velocidad. (Sánchez, 2015) El tiempo depende de la muestra, viscosidad, fluido, tamaño y tipo de soluto. Por la velocidad llega a decantarse. (Sánchez, 2015) El centrifugación es el proceso de separación de diferentes sustancias mezcladas haciendo lo girar varias veces. Las velocidades de sedimentación que se dan en condiciones naturales son muy bajas. Con motivo de incrementar esa velocidad de sedimentación, se utiliza la técnica de la Centrifugación. (Ambler, 1961) El estudio de la separaciones solido-liquido por centrifugacion esta basado en la teoria de la sedimentacion. Esta permite desarrollar algunas predicciones del comportamiento de los equipos centrifugos, no solo para poder especificarlos y dimensaionarlos, sino que tambien ofrece un apoyo adecuado para su correcta operación. (Ambler, 1961) BIOQUIMICA (PRÁCTICA) 10 UNIVERSIDAD NACIONAL DE HUANCAVELICA FACULTAD DE CIENCIAS DE INGENIERIA INGENIERIA AMBIENTAL Y SANITARIA La teoria de la sedimentacion esta basad aen la Ley de Stokes que establece los aspectos del movimiento de un solido en un liquido cuando existe un gradiente de densidad. (Ambler, 1961) Este movimeinto puede ser causado por la fuerza gravitacional o por una fuerza centrifuga. En base a lo anterior, esta seccion se centra en cuatro aspectos fundamentales: (Ambler, 1961) La Ley de Stokes. La sedimentacion por accion de la gravedad. La sedimentacion por accion de una fuerza centrifuga. El factor G. COMPONENTES DE LA CENTRÍFUGA: Los componentes más importantes de una centrífuga son los siguientes5: El control eléctrico/electrónico que dispone generalmente de los siguientes elementos: (Moir, 1988) 1) Control de encendido y apagado, control de tiempo de operación, temporizador, control de velocidad de rotación, en algunas centrífugas, control de temperatura en centrífugas refrigeradas, control de vibraciones mecanismo de seguridad y sistema de freno. 2) Sistema de refrigeración, en las centrífugas refrigeradas. 3) Sistema de vacío, en ultracentrífugas. (No consta en la ilustración). 4) Base. 5) Tapa. 6) Carcaza. 7) Motor eléctrico. 8) Rotor. Existen rotores de diverso tipo, los más comunes son los de ángulo fijo, los de cubo pivotante, los de tubo vertical y los de tubo casi vertical, los cuales se explican a continuación. BIOQUIMICA (PRÁCTICA) 11 UNIVERSIDAD NACIONAL DE HUANCAVELICA FACULTAD DE CIENCIAS DE INGENIERIA INGENIERIA AMBIENTAL Y SANITARIA BIOQUIMICA (PRÁCTICA) 12 UNIVERSIDAD NACIONAL DE HUANCAVELICA FACULTAD DE CIENCIAS DE INGENIERIA INGENIERIA AMBIENTAL Y SANITARIA Es una balanza (monoplato automática) que permite hacer pesadas con gran rapidez y exactitud, es muy utilizada en todos los laboratorios. (Ehu, s.f.) La balanza representa una palanca de primer grado con un apoyo central y dos brazos opuestos de igual longitud. Es asimétrica, dado que posee un solo platillo suspendido del extremo frontal de la cruz. (Ehu, s.f.) Es un instrumento de medición que se utiliza para saber cuánta masa tiene un objeto determinado. A diferencia de la BALANZA GRANATARIA, la analítica es un instrumento mucho más preciso y por lo tanto más delicado, una balanza analítica nos proporciona un margen de error menor que cualquier balanza granatoria. (Ehu, s.f.) Actualmente existen balanzas analíticas que pueden manejar cantidades del orden de los microgramos. Una de las desventajas de este tipo de balanzas es su mantenimiento, debido a que para lograr una mayor precisión, el equipo se vuelve más sensible al medio ambiente y por lo tanto su mantenimiento debe ser riguroso. (Ehu, s.f.) El buen uso de la balanza analítica depende del cuidado que nosotros le dediquemos, ya que este instrumento es sumamente sensible al medio, de manera que las medidas que debemos tomar respecto a su cuidado son las siguientes: 1. Las balanzas analíticas deberán encontrarse en un lugar cerrado, cuando entremos en él no se deberá dejar nunca la puerta abierta, ya que el aire puede mover la balanza y por su alta sensibilidad puede alterarse la lectura correspondiente. 2. Antes de empezar a trabajar con la balanza se debe limpiar cuidadosamente el área de trabajo, es decir, el platillo, el área alrededor del platillo y la mesa en donde se encuentra, pues de otro modo el polvo o basuritas pueden introducirse en la balanza y afectar el peso. 3. Nunca hay que recargarse ni escribir en la mesa de trabajo pues se puede descalibrar la balanza, produciéndose los consecuentes errores. BIOQUIMICA (PRÁCTICA) 13 UNIVERSIDAD NACIONAL DE HUANCAVELICA FACULTAD DE CIENCIAS DE INGENIERIA INGENIERIA AMBIENTAL Y SANITARIA La balanza de precisión viene calibrada desde la fábrica, pero debemos tener en cuenta los datos que nos muestra en la pantalla digital. (Sanchez, 2015) Como también es de suma importancia la nivelación debemos de hacerlo antes de cada uso. (Sanchez, 2015) Para la nivelación debemos tener en cuenta que la burbuja de aire debe estar en el centro de la burbuja, a continuación debemos ajustar la sensibilidad de la balanza. Esta balanza de precisión nos indica valores en kg. (Ohaus, s.f.)  Nos da datos de PH, temperatura, y conductividad eléctrica. (Castañeda, 2015)  Los pH–metros son uno de los instrumentos más importantes de un laboratorio químico moderno y están destinados a medir una característica de las sustancias que presenta gran interés para estimar el carácter ácido o básico de una sustancia: el pH. Aunque este concepto es relativamente moderno, la división entre sustancias ácidas y sustancias básicas o álcalis es una de las clasificaciones más antiguas de la historia de la química. (Bertomeu, 2010)  El concepto de ‘‘pH’’ fue introducido muy posteriormente al uso de estas sustancias en las determinaciones analíticas. Este concepto está relacionado con la teoría iónica, defendida por Svante Arrhenius a finales del siglo XIX, que afirma que las sustancias como las sales se disocian en disolución en electrolitos de carga eléctrica opuesta (Crawford, 1PP6). De acuerdo con esta idea, una disolución de sal común (cloruro sódico) en agua está formada por iones positivos llamados ‘‘cationes’’ de sodio e iones negativos ‘‘aniones’’ de cloro. A principios del siglo XX, Soren Sørensen (1868–1P3P) introdujo la noción de pH como una función logarítmica relacionada con la concentración de cationes de hidrógeno (H+): (Bertomeu, 2010)  pH = –log [H+] BIOQUIMICA (PRÁCTICA) 14 UNIVERSIDAD NACIONAL DE HUANCAVELICA FACULTAD DE CIENCIAS DE INGENIERIA INGENIERIA AMBIENTAL Y SANITARIA  ESCALA DE PH. BIOQUIMICA (PRÁCTICA) 15 UNIVERSIDAD NACIONAL DE HUANCAVELICA FACULTAD DE CIENCIAS DE INGENIERIA INGENIERIA AMBIENTAL Y SANITARIA  Tiene un frasco que contiene agua destilada se debe a la presencia de dos sensores que transmiten los datos, y estos deben permanecer humedecidos ya que pueden llegar a descalibrarse. (Castañeda, 2015) UNIVERSIDAD NACIONAL DE HUANCAVELICA FACULTAD DE CIENCIAS DE INGENIERIA INGENIERIA AMBIENTAL Y SANITARIA V. RESULTADOS: EQUIPOS 01 RESULTADOS ESPECTROFOTÓMETRO  Es un equipo utilizado en el análisis químico.  Nos indica indirectamente la cantidad de sustancia que se encuentra en la muestra.  Nos ayuda a leer la absorbancia, concentración y transmitancia de cada muestra. 02 BAÑO MARÍA  Es una ayuda universal de gran importancia donde se necesitan temperaturas fiables.  Es un equipo que calienta indirectamente por convección térmica del agua destilada.  Se puede realizar la saponificación y la esterilización. 03 MICROCENTRIFUGA  Nos ayuda a sedimentar y decantar las muestras teniendo como resultados, dos fases: fase dispersa y fase dispersante. 04 BALANZA ANALÍTICA  Se tenía la idea que el oxígeno molecular intervenía en el peso realizado, sin embargo el Ingeniero mencionó que cuando las dos puertas laterales estaba abierta no interviene, eso quiere decir que nos da un mismo resultado. 05 BALANZA DE PRECISIÓN  La balanza de precisión nos da resultados en kilogramos a comparación de la balanza analítica que nos da en miligramos.  Esta se utiliza para muestras en mayor cantidad. BIOQUIMICA (PRÁCTICA) 17 UNIVERSIDAD NACIONAL DE HUANCAVELICA FACULTAD DE CIENCIAS DE INGENIERIA INGENIERIA AMBIENTAL Y SANITARIA 06 VI. PEACHIMETRO  Es un sensor utilizado en el método electroquímico para medir el PH de una solución.  Con el equipo se puede medir el PH, la temperatura y la conductividad eléctrica de una determinada muestra. DISCUSION: El ingeniero del curso (Chavéz, 2015) nos mencionó que el espectrofotómetro sirve para hacer el análisis químico (la absorción de sustancias). Sin embargo el Autor Carlos Brunatti nos menciona que en el espectrofotómetro se puede estudiar la absorción de sustancias, no solamente en la zona del espectro visible, sino también en ultravioleta e infrarrojo. Muchos autores nos dan a conocer un mismo resultado y una misma utilidad de los equipos mencionados. Es por esa razón que se encontró solo una diferencia en cuanto al espectrofotómetro. VII. CONCLUSIONES:  Los equipos de laboratorio en mención son importantes para el desarrollo de las próximas prácticas de laboratorio.  Teniendo en cuenta el propósito de los equipos debemos darle una utilización correcta.  Debemos tener en consideración la calibración y la nivelación del equipo. Bibliografía: Alvaréz, A. (27 de Abril de 2015). Baño María. (G. 2, Entrevistador) Ambler, C. (1961). Centrifugation equipment. Theory. Ind. Eng. Chem. Bertomeu, J. (2010). PH-METROS Y OTROS ELEMENTOS DE ELECTROQUIMICA. Castañeda, J. (27 de Abril de 2015). Peachimetro digital. (G. 2, Entrevistador) Chavéz, E. (27 de Abril de 2015). Espectrofotómetro. (G. 2, Entrevistador) Connor, K. (1980). "Curso de análisis farmacéutico". Reverté. Connor, K. (1980). "Curso de análisis farmacéutico". Reverté. BIOQUIMICA (PRÁCTICA) 18 UNIVERSIDAD NACIONAL DE HUANCAVELICA FACULTAD DE CIENCIAS DE INGENIERIA INGENIERIA AMBIENTAL Y SANITARIA Ehu, S. (s.f.). www.sc.ehu.es/sbweb/fisica/.../medidas/medidas.htm. www.sc.ehu.es/sbweb/fisica/.../medidas/medidas.htm. Obtenido de Ettorre, A., & Angeletti, A. (2012). Balanaza Analítica. Miñones, J. (1978). "Manual de técnicas instrumentales". Círculo editor Universo. Moir, D. N. (1988). Sedimentation Centriges. Chemical. Ohaus. (s.f.). http:// www. básculas-balanzas.com/ balanzas - laboratorio/ ohaus-adventrurarpro.pdf. Obtenido de http:// www. básculas-balanzas.com/ balanzas - laboratorio/ ohausadventrurar-pro.pdf. Sanchez, V. (27 de Abril de 2015). Balanza de presición . (G. 2, Entrevistador) Sánchez, V. (27 de Abril de 2015). Centrifugás. (E. Sandoval, Entrevistador)  www.sc.ehu.es/sbweb/fisica/.../medidas/medidas.htm. www.sc.ehu.es/sbweb/fisica/.../medidas/medidas.htm. (s.f.). Obtenido BIOQUIMICA (PRÁCTICA) de 19