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IV.

Crecimiento
Microbiano
Dra. Dulce Mara Daz Montao

Temas a revisar
4.1 Estequiometria de crecimiento
4.2 Cintica de crecimiento
4.3 Consumo de sustrato
4.4 Mantenimiento celular
4.5 Requerimiento de oxgeno-Tolerancia a etanol del
microorganismo
4.6 Efecto de pH y la temperatura sobre el crecimiento

Objetivo
Que el estudiante tenga el conocimiento sobre:
la estequiometria de crecimiento, la cintica de crecimiento,
consumo de sustrato y mantenimiento del microorganismo.
Que el estudiante entienda la importancia del requerimiento
de oxgeno-Tolerancia a etanol del microorganismo, as como
el efecto de pH y la temperatura sobre el crecimiento.

Es importante conocer la
cintica de crecimiento del
microorganismo
que
utilizamos?

4.2 Cintica de crecimiento


Es importante conocer la cintica de crecimiento de los
cultivos microbianos para predecir cmo va a evolucionar un
cultivo, cmo va a ir consumindose el substrato y cmo se
van a ir acumulando los productos del cultivo.

4.2 Cintica de crecimiento


Sin conocer estos factores es muy imprudente iniciar el cultivo
en un fermentador de 10,000 litros, por ejemplo, con el coste
que ello supone, puesto que no podemos predecir qu va a
pasar, cundo va a completarse el crecimiento, cmo se va a
acumular el producto, etc.

4.2 Cintica de crecimiento


Las clulas aisladas cultivadas en un volumen finito de medio
de cultivo apropiado, van utilizando los nutrientes que tienen
disponibles con la mayor eficiencia y rapidez que pueden,
sintetizando sus propios componentes celulares y
dividindose en cuanto han podido duplicar su masa
gemacin), y su material gentico.

4.2 Cintica de crecimiento


El tiempo que tarda una clula en hacer todo lo anterior es lo
que conocemos como tiempo de generacin () y puede
variar desde unas horas, en condiciones ptimas hasta varios
meses en condiciones del suelo.
Cada vez que transcurre un tiempo de generacin, el nmero
de clulas se duplica, siguiendo, por tanto, un incremento
exponencial.

4.3 Consumo de sustrato


En la figura, se va consumiendo un substrato cuya
concentracin decrece de forma proporcional al crecimiento
de la biomasa.

4.3 Consumo de sustrato


Definiremos el rendimiento de utilizacin del substrato (Yx/s)
al valor que representa la cantidad de biomasa producida por
unidad de substrato consumido:
Yx/s=dX/dS

Datos de una cintica


Tiempo (h)

X (g/L)

S (g/L)

120

100

Concentracin (g/L)

80

X(g/L)

60

S(g/L)
ETOH (g/L)
40

20

10

15

20
Tiempo (h)

25

30

35

X(g/L)
Datos det(h)
una
cintica
0
0.1
2
4
6
8
10
12
14
16
18
20
22
24
26
28
30

0.2
0.5
0.9
1.4
2
2.6
3.1
3.9
4
4.1
4.2
4.4
4.3
4.2
4.3

S(g/L)

ETOH (g/L)

99.5
91
80
72
64
50
44
26
15
3
3
4
5
3
2
3

0.245
4.41
9.8
13.72
17.64
24.5
27.44
36.26
41.65
47.53
47.53
47.04
46.55
47.53
48.02
47.53

4.3 Consumo de sustrato


Haciendo las transformaciones que se indican a continuacin
sobre la frmula que relaciona la variacin de biomasa con la
de substrato (8), llegamos a la definicin de un nuevo
concepto qs denominado tasa especfica de consumo de
substrato por el organismo.

Yx/s = dX/dS
dX/dt = Yx/s (dS/dt)
(dN/dt)/X= Yx/s (dS/dt)/X
= (dX/dt)/X
= Yx/s qs
qs, Esto es, la velocidad especfica de consumo de substrato
qs = /Yx/s

4.3 Consumo de sustrato

Como se obtendra la
velocidad especifica de
formacin de producto, qp?

4.3 Consumo de sustrato


Por ltimo, nos falta relacionar la tasa de crecimiento () con
la concentracin de substrato (S).
En condiciones de substrato abundante, la concentracin de
este no afecta al valor de ; pero cuando el substrato se hace
limitante, s existe ese efecto.
La expresin matemtica que relaciona ambos parmetros se
conoce con el nombre de ecuacin de Monod y es la
siguiente:

= max [S/(Ks+S)]

MONOD
En esta ecuacin la tasa de crecimiento () depende de la mxima
que puede alcanzar el microorganismo (max), de la concentracin
de substrato (S) y de un valor constante, Ks, que representa la
concentracin de substrato a la que se alcanza una tasa de
crecimiento igual a la mitad de la mxima.
La ecuacin de Monod tendr mucha importancia al tratar de
cultivos continuos. Para que se cumpla esta ecuacin el rendimiento
debe ser independiente de la concentracin de substrato.
En la prctica, los valores de Ks suelen ser muy bajos, lo que indica
que los microorganismos crecen con tasas () muy prximas a las
mximas (max) a concentraciones de substrato bajas y slo cuando
estas son extremadamente bajas, la velocidad de crecimiento se
reduce. Esto es debido a que los sistemas de transporte de
nutrientes suelen tener valores de Km considerablemente reducidos
(La Km indica la concentracin de substrato a la que la velocidad de
transporte es la mitad de la mxima)

Ejercicio: encuentre max


tiempo (h)

S= 20g/L
0
2
4
6
8
10
12
14
16
18
20
22
24

S=40g/L
0.08
0.11
0.23
0.35
0.45
0.5
0.53
0.6
0.66
0.77
0.8
0.8
0.8

0.08
0.1
0.15
0.25
0.33
0.45
0.5
0.53
0.6
0.65
0.65
0.65
0.65

4.4 Mantenimiento celular


Adems del consumo de sustrato para producir nuevas clulas,
parte de los sustratos se emplean simplemente para mantener
las actividades cotidianas de las clulas

m= masa de sustrato consumid para


mantenimiento/(masa
de clulas*
tiempo)
Valor tpico de m es: 0.05 gS/gX h-1
Velocidad de consumo de S para
mantenimiento: rs=mX

4.5 Requerimiento de oxgeno-Tolerancia a


etanol del microorganismo
La tolerancia al alcohol depende de la
habilidad de la clula para exportar el etanol
del interior al medio externo, un proceso
que depende de la composicin de la
membrana y de la fluidez de la misma.

4.5 Requerimiento de oxgeno-Tolerancia a


etanol del microorganismo
La clula modifica la composicin en cidos
grasos de la membrana para minimizar los
efectos que produce el etanol.
La adaptacin de las levaduras al etanol
tambin obedece a una modificacin de la
composicin lipdica de las membranas
debido bsicamente a un enriquecimiento
de las mismas en esteroles y acido grasos de
cadena larga.

4.5 Requerimiento de oxgeno-Tolerancia a


etanol del microorganismo
Para que las levaduras puedan adaptarse a
altas concentraciones de alcohol, debe
existir un aumento del contenido de cidos
grasos insaturados con respecto a los
saturados y un aumento en la longitud de las
cadenas carbonadas de los cidos grasos
(Tomasso, 2004).

4.6 Efecto de pH y la temperatura sobre el


crecimiento

4.6 Efecto de pH y la temperatura


sobre el crecimiento
1.- Temperatura:
Cada microorganismo tiene una temperatura
de crecimiento adecuada. La temperatura de
cultivo ptima, es en donde se observa la
velocidad mxima de crecimiento.

4.6 Efecto de pH y la temperatura


sobre el crecimiento

4.6 Efecto de pH y la temperatura


sobre el crecimiento
2.- pH: Es un parmetro crtico en el crecimiento de microorganismos
ya que cada tipo de microorganismo slo puede crecer en un rango
estrecho de pH fuera del cual mueren rpidamente.
El pH interno en la mayora de los microorganismo est en el rango
de 6.0 a 7.0.
Sin embargo, las levaduras tienen rango ptimo de pH que va desde
3.5 hasta 5.5.

Fin