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ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO DE LOS ALIMENTOS

ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO DE LOS ALIMENTOS PRÁCTICA No.5: ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO DE LOS ALIMENTOS.

PRÁCTICA No.5: ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO DE LOS ALIMENTOS.

Mauricio Ortiz Aragón 1330114 Juan David Ortega 1329842 Brayan Stevens Ortiz 1324444 Universidad del Valle Facultad De Ingeniería, Escuela De Ingeniería De Alimentos. Santiago de Cali, Noviembre 12 del 2014.

RESUMEN

La práctica consistió en la determinación de la calidad microbiana presente en los alimentos, en este caso el producto a analizar fueron los jamones utilizados en las colitas cubanas del edificio 320 de la Universidad del Valle. Pasada las 24-48 horas de incubación se revisaron las muestras, obteniendo las

ilustraciones de las disoluciones que se muestran en la figura 1. Se observa que en
ilustraciones de las disoluciones que se muestran en la figura 1. Se observa que en la disolución 10
^
-1
10
^
-2 hubo turbidez, por lo tanto hubo crecimiento bacteriano. En las diluciones 10
^
-1, 10
^
-2
hubo

presencia de burbujas en la campana de Durham, indicando que presencia de coliformes totales,

fecales. Además, pasadas las 24hr - 48hr, se realizó la observación de los mesófilos en agar PCA,

Se

encontró que en la disolución 10

Después de las observaciones se

realizó en recuento de las colonias bacterianas mesófilos, enterobacterias, hongos y levaduras presentes en su respectivo agar. Para así analizar la calidad del producto en términos de contaminación bacteriana.

disolución 10

-1 se presentó el mayor crecimiento bacteriano, y que en la

enterobacterias en agar cristal violeta y se observaron los hongos y levaduras en agar Saboraud.

^
^
^
^

-3 se presentó el menor crecimiento bacteriano.

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INTRODUCCIÓN

Según el diccionario Ingles de Oxford, alterar es “desposeer de cualidades buenas o efectivas”. Cuando un alimento se altera, sus características resultan perjudiciales de modo que ya no es aceptable. Tales modificaciones no siempre tiene una causa microbiológica; un producto se puede convertir en inaceptable como consecuencia de un daño por insectos, de desecación total, de decoloración, de envejecimiento o de rancidez, por ejemplo, pero, por lo general, la mayor parte de las alteraciones de los alimentos son consecuencia de la actividad microbiana.

Una característica general de la alteración microbiana es la aparición relativamente repentina; no parece ser que se desarrolle gradualmente, día tras día un poco peor, sino que con más frecuencia es un descubrimiento inesperado y desagradable. Este hecho es un reflejo del carácter exponencial del crecimiento microbiano y de su consecuencia de que el metabolismo microbiano también puede avanzar a una velocidad exponencialmente creciente.

En particular la carne comestible de los animales comprende principalmente los tejidos musculares pero también incluye órganos tales como el corazón, el hígado y los riñones. La mayor parte de los estudios microbiológicos sobre la carne han sido llevados a cabo con tejidos musculares y es en estos en los que se basa la información que aquí se ofrece. Cada fibra muscular está rodeada por una membrana celular, el sarcolema, en cuyo interior están contenidas las miofibrillas, complejos de las dos proteínas principales actina y miosina, rodeados por el sarcoplasma. Su elevada actividad de agua y sus abundantes nutrientes hacen de la carne un medio excelente para mantener el crecimiento microbiano. Aunque algunos de los microorganismos que crecen sobre la carne son proteolíticos, al principio crecen a expensas de los sustratos que son utilizados muy fácilmente,; la reserva hidrosoluble de carbohidratos y el nitrógeno no proteico. La proteólisis amplia únicamente tiene lugar en las últimas fases de la descomposición cuando la carne ya suele estar totalmente alterada desde el punto de vista organoléptico ( ADAMS, 1997), por esta razón se hace de suma importancia el análisis

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microbiológico de forma preventiva en la industria de los alimentos.

OBJETIVOS

Determinar la calidad del producto en términos de contaminación microbiana.

Establecer

el

número

y

tipo

de

microorganismos que se encuentran en distintos alimentos.

1. MATERIALES Y METODOS

1.1 APARATOS, INSTRUMENTOS Y MATERIALES

*Cajas petri esterilizadas *Pipetas esterilizadas *Pipetas pasteur esterilizadas *Frasco con 90mL de agua peptonada *Tubos de ensayo con 9 mL de caldo de lactosas *Erlenmeyer con agar PCA *Erlenmeyer con agar Saboraud *Erlenmeyer con agar EMB *Gradilla para tubos *Mechero *Caldo Laury sulfato *Caldo brilla *Caldo Triptona *Reactivo de Kovacs. *Agar Cristal Violeta

1.2 MÉTODOS

Dilución de la muestra alimento.

● Se prepararon diluciones del alimento 10 -1 , 10 - 2 , 10 -3

● La dilución 10 -1 se preparó midiendo 10mL de la muestra en un frasco que contenía 90 mL de diluyente agua peptonada

● Transferir 1 mL de la dilución 10 -1 a un tubo que contenga 9 mL de diluyente para obtener la dilución 10 -2 y así sucesivamente se prepara la dilución 10 -3

Número más probable de coliformes totales y fecales.

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Prueba presuntiva.

Pipetear 1 mL de cada una de las diluciones (10 -1 a 10 -3 ) en tubos con caldo lauryl sulfato utilizando 3 tubos por dilución.

Los tubos se inocularon a 37°C por 24 -48 horas.

Cuando pasaron las 24 - 48 horas se miró la producción de gas en los tubos, lo cual se de- terminó por el desplazamiento del tubo Durham.

Prueba confirmativa para coliformes totales.

Los tubos que presentaron producción de gas en la prueba presuntiva se les agregó 4 gotas del reactivo de kovacs

La presencia de un anillo rojo en la superficie del tubo indicó una reacción positiva

Interpretación de resultados.

Se analizó la tabla del NMP con lo cual se de- terminó un resultado para coliformes totales con base en los tubos positivos para la prueba anterior.

Los tubos positivos se sembraron en agar EMB.

Se incubó por 24-48 horas

Pasado el tiempo estimado se hizo la lectura de las colonias típicas de coliformes.

Recuento de organismos mesófilos.

Se transfirieron alícuotas de 1mL de cada una de las diluciones 10 -1 a 10 -3 en cajas petri va- cías y estériles.

Verter en las cajas agar PCA fundido.

Se mezcló y se dejó solidificar el agar.

Cuando se solidificó se procedió a incubar las cajas petri a 37°C durante 24 horas.

Una vez pasado el tiempo se hizo un recuento de mesófilos presentes.

Recuento de enterobacterias.

Se transfirieron alícuotas de 1mL de cada una de las diluciones 10 -1 a 10 -3 en cajas petri va- cías y estériles.

Verter en las cajas agar cristal violeta.

Se mezcló y se dejó solidificar el agar.

Cuando se solidificó se procedió a incubar las cajas petri a 37°C durante 24 horas.

Una vez pasado el tiempo se hizo un recuento de enterobacterias presentes.

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Recuento de hongos y levaduras.

● Se transfirieron alícuotas de 1mL de cada una de las diluciones 10 -1 a 10 -3 en cajas petri va- cías y estériles.

● Verter en las cajas agar Saboraud fundido.

● Se mezcló y se dejó solidificar el agar.

● Cuando se solidificó se procedió a incubar las cajas petri a 37°C durante 24 horas.

● Una vez pasado el tiempo se hizo un recuento de hongos y levaduras presentes.

2.

RESULTADOS

Determinación del número más probable de coliformes totales y fecales. Al someter muestras por triplicado de las diferentes soluciones en tubos de ensayo para cada una de las concentraciones, se obtuvo presencia de gas en las campanas de Durham

-2 a las 24h de incubación a 37°C

Figuras 1, lo cual indica que en estas disoluciones hay presencia de lactasas características de los coliformes, es decir, que 6 tubos son positivos por lo cual según la Tabla de NMP la relación sería 3:3:0.

10

^ -1 y 10 ^
^
-1 y 10
^
la Tabla de NMP la relación sería 3:3:0. 10 ^ -1 y 10 ^ Figura 1.

Figura 1. Muestra la presencia de gas en las campanas de Durham en las diluciones 10 -1 , 10 -2 por triplicado respectivamente para la prueba de presencia de Coliformes Totales en Caldo Lauryl sulfato.

Dado que seis tubos presentaron gas, se agregó a cada tubo 4-5 gotas de reactivo de Kovac, observando la formación de un anillo rojo en todos los seis tubos, Figuras 2, lo cual es un indicativo que en cada uno de los seis tubos, de las tres diluciones, hubo presencia de indol, el cual es resultado del metabolismo de la Tripofanasa, característica de coliformes fecales, dando una relación de 3:3:0 para la tabla de NMP indicando que las muestras presentaron un número de 240 por 100 mL.

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240 por 100 mL. ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO DE LOS ALIMENTOS Figura 2. Presencia de un anillo rojo

Figura 2. Presencia de un anillo rojo vermellon en las diluciones 10 -1 , 10 -2 por triplicado respectivamente para la prueba de presencia de coliformes Fecales en Caldo Lauril con 4 –5 gotas de reactivo de Kovac.

Con los tubos positivos se hizo una siembra en agar EMB en donde se pudo apreciar el crecimiento característicos de los coliforme el

cual se aprecia en la formación del color verde metálico en las líneas de inoculación Figura

3.

verde metálico en las líneas de inoculación Figura 3. Figura 3. Siembra por estría en superficie

Figura 3. Siembra por estría en superficie de placa con agar EMB.

Recuento de mesofilos presentes en PCA. Posterior a la siembra e incubación Figura 4.

se realizó un conteo del número de colonias

mesofilas presentes en las cajas petri con PCA

concentraciones 10 -1 , 10 -2 y 10 -3 . Los resultados se tabularon en la Tabla 1.

a

Tabla

1.

Muestra

el

número

de

colonias

contadas mesofilas diluciones.

en

las

diferentes

Tabla 1. Muestra el número de colonias contadas mesofilas diluciones. en las diferentes 3

3

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ORTIZ.A-ORTEGA-ORTIZ Figura 4. Muestra las colonias mesófilas presentes en agar PCA. Recuento de enterobacterias. Luego

Figura 4. Muestra las colonias mesófilas presentes en agar PCA.

Recuento de enterobacterias. Luego a la siembra e incubación Figura 5. se hizo un conteo del número de colonias presentes en las cajas petri con agar cristal violeta a concentraciones 10 -1 , 10 -2 y 10 -3 . Los resultados se muestran en la tabla 2.

Tabla 2. Muestra el número de colonias bacterianas presentes en agar EMB .

el número de colonias bacterianas presentes en agar EMB . Figura 5 . Muestra las colonias
el número de colonias bacterianas presentes en agar EMB . Figura 5 . Muestra las colonias

Figura 5. Muestra las colonias bacterianos presentes en el agar Cristal violeta. Recuento de hongos y levaduras. Después de la siembra e incubación Figura 6. se hizo un conteo del número de colonias presentes en las cajas petri en agar Saboraud a

Los

concentraciones

resultados se muestran en la tabla 3.

10

^ -1, 10 ^ -2 y 10 ^
^
-1,
10
^
-2
y
10
^

3.

Tabla 3. Muestra el número de colonias contadas en las diferentes diluciones sembradas en agar Saboraud.

en las diferentes diluciones sembradas en agar Saboraud. 4 ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO DE LOS ALIMENTOS Figura 6

4

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agar Saboraud. 4 ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO DE LOS ALIMENTOS Figura 6 . Muestra de colonias de hongos

Figura 6. Muestra de colonias de hongos y levaduras presentes en el agar Saboraud.

3.

DISCUSION

Todos los animales sanos llevan consigo una compleja flora microbiana, una parte de la cual puede ser muy especializada y adaptada al crecimiento y supervivencia de su hospedador y otra parte puede ser temporal, reflejando las interacciones inmediatas del animal con su medio (ADAMS, 1997). Ahora, para el caso particular de la pasada practica se hizo necesario conocer el número de coliformes totales y fecales, llamadas Enterobacteriacea lactosa-positiva o grupo coli-aerogenes que constituyen un grupo de bacterias que se definen más por las pruebas usadas para su aislamiento que por criterios taxonómicos. Pertenecen a la familia Enterobacteriaceae y se caracterizan por su capacidad para fermentar la lactosa con producción de acido y gas(Figura 1), mas o menos rápidamente, en un periodo de 48 horas y con una temperatura de incubación comprendida entre 30-37ºC. Son bacilos gram-negativos, aerobios y anaerobios facultativos, no esporulados. Del grupo “coliformes” forman parte varios generos:

Escherichia

Enterobacter

Klebsiella

Citrobacter.

Se encuentran en el intestino del hombre y de los animales, pero también en otros ambientes:

suelo, plantas,etc. Aunque su especificidad como indicadores no es buena, se suelen usar como índice de contaminación fecal:

Su frecuencia en las heces.

Su fácil detección en el laboratorio.

Sus características semejantes a las de algún miembro patógeno de la familia Enterobacteriacae.

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Dentro de este grupo, son lo coliformes fecales los que tienen significado sanitario y, por consiguiente, los que más interesan en el análisis microbiológico de alimentos.

Se consideran coliformes fecales como presuntos Escherichia Coli. Sus principales características son:

Aptitud para desarrollar entre 43,5-

45,5ºC.

Capacidad para crecer en presencia de sales biliares.

Facultad para producir indol en agua de peptona.

Así, en relación con la facultad de producir indol, basado en la formación de un complejo de color rojo (Figura 2) cuando el indol reacciona con el grupo aldehído del p- dimetilaminobenzaldehído, producto químico activo de los reactivos de Kovac y de Ehrlich(KONEMAN, 2008), dando una relación de 3:3:0 que permite ver un NMP de 240*gr. Acto seguido, para realizar un análisis más específico de NMP se realizó una siembra por estría en un medio especifico conocido como agar EMB (eosina azul de metileno), que permite observar un crecimiento de colonias de color verde metálico (Figura 3), para la E.Coli, sin embargo la figura observada no presenta una visualización optima de las colonias debido a dos razones de suma importancia; primero se realizó una siembre por estría de forma inadecuada pues no se tuvo en cuenta el patrón estándar para obtener colonias separadas y pueda realizarse un análisis semi- cuantitativo (FORBES et al, 2009) y segundo debido a las distintas fases del crecimiento, que va desde una fase de retraso, luego una exponencial, estacionaria y de declinación, se observaron las colonias con una población microbiana con cierta cantidad de colonias muertas que se equilibran con el de las colonias vivas, las razones del cese del crecimiento exponencial no siempre son claras, también llamada fase estacionaria. Se supone que el agotamiento de los nutrientes, la acumulación de productos de desecho y los cambios perjudiciales del pH pueden participar en este proceso. (TORTORA,2007)

Luego para el recuento de microorganismos mesofilos se estima la flora total, pero sin

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especificar el tipo de germen. Esta determinación refleja la calidad sanitaria de los productos analizados indicando, además de las condiciones higiénicas de la materia prima, la forma como fueron manipulados durante la elaboración. Tiene un valor limitado como indicador de la presencia de patógenos o sus toxinas. Un recuento total de aerobios mesofilos bajo no asegura que un alimento esté exento de patógenos o toxinas; tampoco un recuento total alto significa inevitablemente, presencia de flora patógena. Excepto en productos que se elaboran en fermentación, un alto recuentos microbianos se consideran poco aconsejables para la mayor parte de los alimentos. Su significado es diverso:

excesivamente

Materia

Prima

contaminada.

Deficientes métodos de manipulación durante la elaboración de los productos.

La posibilidad, por tratarse de microorganismos mesofilos de que entre ellos pueda haber patógenos, dado que esta flora suele ser mesofila.

Altos recuento suelen ser signo de inmediata alteración del producto. Tasas superiores a 10 6- 10 7 germenes por gramo suelen ser ya materia en descomposición.

(PASCUAL- CALDERON,1999)

De este modo es posible observar que el alimento presenta una grande cantidad de mesófilos (Tabla 1) en el análisis correspondiente. Para finalizar el análisis microbiológico entonces, hacen falta dos pruebas importantes, la de enterobacterias y hongos y levaduras. Las enterobacterias como ya fue descrito en la parte superior son bacterias que tiene como habitad natural el intestino de hombres y animales, familia formada por gram-negativas, no esporulados, algunos tiene movilidad por flagelo peritricos, son anaerobios y anaerobios facultativos. Casi todos estas bacterias de los miembros de esta familia crecen bien en medios de cultivos

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simples, no son exigentes en sus requerimientos nutricionales, pero se han ideado medios especializados para aquellos casos en los que la muestra presenta varias especies bacterianas. Todos estos medios obstaculizan el crecimiento de las bacterias gam-positivas y favorecen el crecimiento de lo bacilos gram-negativos. Una gran parte de las muestras para investigar e identificar enterobacterias son materias fecales, y en general, se trata de identificar enteropatogenos. Por esta razón se han diseñado tres tipos de medios especiales para enterobacterias: diferenciadores, selectivos y enriquecidos. Para este caso en particular los medios diferenciadores permiten el crecimiento enterobacterias y saprobios, pero las colonias de uno y de otros se distinguen por la diferente coloración que producen. Sin embargo en la Figura 3 y la Tabla 2, no se logra observar una caja Petri con un número mínimo de 30 colonias, lo que tendría una contradicción con el gran número de mesófilos del procedimiento anterior, que presenta un numero bastante elevado de NMP por gr, en consecuencia uno de los errores más posible a la hora del sembrado en el medio diferencial fue con una temperatura mayor a 45ºC lo que produjo una muerte de muchas de las enterobacterias pues estas presentan una temperatura optima de crecimiento entre 30- 37ºC, es por esto que en cambio se observa un crecimiento favorable de una colonia bastante grande de E.coli. (Figura 5), pues esta puede crecer en un rango de temperatura de 43,5-

45.5ºC.

Y finalmente para terminar, al observar la Figura 6. Se encuentra una representativa presencia de pequeñas levaduras, hongos que crecen regularmente en forma de agregados sueltos de células independientes, que pueden ser globosas, ovoides, piriformes, alargadas y casi cilíndricas, las levaduras cuando crecen sobre medios sólidos, forman colonias de aspecto característico que recuerdan a la colonias bacterianas (PASCUAL- CALDERON,1999), a diferencia de los hongos que presenta una consistencia aldosa; sin embargo cuando maduran la superficie adquiere una contextura azucarada o granular a medida que se producen los conidios (KONEMAN,2008), por lo tanto en la

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Figura 6 junto con los datos suministrados en la Tabla , representan solamente presencia de levaduras debido a que el tiempo necesario para que exista un crecimiento óptimo de hongos es de 3-5 días, tiempo que no fue tomado en cuenta para el análisis realizado en la práctica.

Ahora, teniendo presente cada dato experimental, se realizó una comparación con la normatividad vigente para las condiciones microbiológicas para la carne, que se muestra a continuación:

para la carne, que se muestra a continuación: (RTCA 67.04.50:08,2001) Según la cual el alimento que

(RTCA 67.04.50:08,2001)

Según la cual el alimento que fue analizado en el laboratorio presenta unos valores demasiado elevados para lo mínimos, o incluso la existencia de microorganismos que no son permitidos en el alimento.

CONCLUSIONES

El alimento presenta una gran cantidad

de coliformes totales y fecales, incluyendo una gran persistencia de E.Coli indicador de y desinfección inadecuadas, o de una industrialización o tratamientos incorrecto del alimento.

El tiempo en el cual se debe observar lo cultivos sembrados en las cajas Petri debe corresponder a la fase en la cual el microorganismo este en estado logarítmico además cuenta la

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temperatura óptima para que los microorganismo no mueran en el momento de ser sembrado en las cajas Petri

El alimento presenta además una deficiencia en el proceso de elaboración y una contaminación en la manipulación durante el empaque, razón por la cual se encuentra una gran cantidad de mesofilos en el alimento, que exceden el NMP mínimo en 240*gr en alimentos cárnicos.

La observación de hongos debe ser llevada a cabo en un tiempo mínimo determinado para poder observar con segura su crecimiento.

PREGUNTAS.

¿Cual es el fundamento de las diferentes pruebas que ha realizado?

R// MÉTODOS

1. dilución de la muestra de alimento Dado el tamaño de las poblaciones microbianas que pueden estar presentes en un alimento, que van desde algunos miles hasta varios millones de células por gramo, su determinación cuantitativa requiere la preparación de diluciones conocidas de la muestra; y es costumbre utilizar cifras decimales para facilitar los cálculos. (CAMACHO, A. et al 2009)

FUNDAMENTO Posteriormente a la toma de muestra y como parte del análisis, se hace una dilución primaria cuya finalidad es lograr obtener una muestra representativa del alimento, esto es, tanto en el aspecto cualitativo (diferentes tipos de bacterias) como en el cuantitativo, y así lograr una distribución lo más uniforme posible, de los microorganismos contenidos en la muestra destinada al análisis. Con este fin, se utiliza un diluyente que favorezca la recuperación de los microorganismos presentes, para ponerlos de manifiesto cuando se cultiven; para lograrlo, el diluyente debe tener la osmolaridad y el pH favorables para

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iniciar la recuperación y actividad de las células microbianas presentes, así como para favorecer aquellas que se buscan entre una población mixta. Se pretende encontrar el número de microorganismos por unidad de volumen, hasta asegurar que después de la incubación se obtenga un resultado cuantificable, esto se logra después de realizar tantas diluciones decimales seriadas como sea necesario, en el mismo diluyente. Este resultado puede ser la cuenta de colonias en placas o la observación de resultados proporcionales al tamaño de la población, en el caso de tubos o matraces. (CAMACHO, A. et al 2009)

2. inoculación del alimento Número más probable de coliformes totales y fecales FUNDAMENTO La determinación de microorganismos coliformes totales por el método del Número más Probable (NMP), se fundamenta en la capacidad de este grupo microbiano de fermentar la lactosa con producción de ácido y gas al incubarlos a 35°C durante 48 h., utilizando un medio de cultivo que contenga sales biliares. Esta determinación consta de

dos fases, la fase presuntiva y la fase confirmativa. En la fase presuntiva el medio de cultivo que se utiliza es el caldo lauril sulfato de sodio el cual permite la recuperación de los microorganismos dañados que se encuentren presentes en la muestra y que sean capaces de utilizar a la lactosa como fuente de carbono. Durante la fase confirmativa se emplea como medio de cultivo caldo lactosado bilis verde brillante el cual es selectivo y solo permite el desarrollo de aquellos microorganismos capaces de tolerar tanto las sales biliares como

el verde brillante.

La determinación del número más probable de microorganismos coliformes fecales se realiza

a partir de los tubos positivos de la prueba

presuntiva y se fundamenta en la capacidad de las bacterias para fermentar la lactosa y producir gas cuando son incubados a una temperatura de 44.5 °C por un periodo de 24 a 48 h. Finalmente, la búsqueda de Escherichia coli se realiza a partir de los tubos positivos de caldo EC, los cuales se siembran por agotamiento en medios selectivos y diferenciales (Agar Mac

Conkey, Agar eosina azul de metileno) y

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posteriormente realizando las pruebas bioquímicas básicas (IMViC) a las colonias típicas. (ARIAS, L. et al 2010).

3. Recuento de microorganismos Recuento en placa por siembra en profundidad. Consiste en añadir medio de cultivo fundido y enfriado a 50ºC sobre placa de Petri que contiene una cantidad determinada de la muestra diluida. Se tapa la placa y se rota para mezclar la muestra en el agar. Cuando el agar solidifica se incuban las placas. Las colonias se desarrollan tanto dentro del agar como en la superficie. Es un método generalmente utilizado para el recuento de microorganismos anaerobios facultativos o microaerofilos.

¿Cuales son los componentes de cada uno de los medios de cultivo y porque se utilizan?

R// Los componentes del PCA (Plate Count Agar) son: Triptona 5g, extracto de levadura 2.50 g, dextrosa 1g, agar 12g y agua destilada 1000mL. Es un medio de cultivo usado para la multiplicación y recuento por inclusión de todos los microorganismos aerobios mesófilos poco exigentes, en alimentos. (ALLAERT- ESCOLÁ, 2002)

Los componentes del VRBG son: peptona de carne 7g, extracto de levadura 3g, glucosa 10g, sales bilares 1,5 g, cloruro sódico 5g, rojo neutro 0,03g, violeta cristal 0,002g, agar bacteriológico 13 g y agua destilada 1000mL. Es un medio de cultivo selectivo utilizado para aislamiento y recuento de enterobacterias en alimentos. (ALLAERT- ESCOLÁ, 2002)

El agar saboraud esta compuesto de peptona, glucosa, agar y agua destilada. El medio contiene nutrientes en cantidad mínima y lleva un pH ácido que lo hace selectivo. Suele adicionarse de antibioticos para potenciar su selectividad, y de actidiona para el cultivo de hongos dermatofilos; también se añade trifeniltetrazolio para diferenciar especies de levadura que reducen sal y originan colonias rojas. ( FERNANDEZ, M et all, 1994)

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Los componentes del agar EMB son: peptona, fosfato dipotásico, lactosa, eosina, azulde metileno, agar y agua destilada. Se usa para el aislamiento selectivo de enterobacterias que se caracterizan por contener lactosa y un indicador de cambio de pH que detecta la actividad fermentadora de lactosa. ( FERNANDEZ, M et all, 1994)

4.

BIBLIOGRAFIA

 

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