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Universidad Nacional del Altiplano

FACULTAD DE ENFERMERA
ESCUELA PROFESIONAL DE ENFERMERA

TRABAJO ENCARGADO
CURSO:

PARASITOLOGA

DOCENTE:

URIEL MARCA QUISPE

PRESENTADO POR: MOLLOCONDO CHOQUE DAYSI


SEMESTRE:

I-B
PUNO PER
2014

INTRODUCCIN
La Parasitologa es la disciplina que se encarga de estudiar el parasitismo producido por
protozoarios, helmintos, y artrpodos. El parasitismo se da entre un organismo llamado
parsito y otro denominado hospedero. El primero vive en y a expensas del segundo y le
causa dao.
Las enfermedades parasitarias representan una de las principales causas de enfermedad,
se presentan en todas las edades, aunque con mayor frecuencia en nios, e influyen las
condiciones sociales y econmicas; de hecho la pobreza conlleva casi siempre a la
parasitosis. Los individuos inmunocomprometidos presentan enfermedades parasitarias
oportunistas. Las enfermedades parasitarias clnicamente son muy variadas y van desde
asintomticas hasta fatales.
El diagnstico de los parsitos se fundamenta en la observacin y el reconocimiento de
sus caractersticas morfolgicas, macroscpicas y microscpicas, obtenidas de muestras
biolgicas que faciliten la identificacin del agente infeccioso mediante la utilizacin de
exmenes directos.
La capacidad para confirmar la sospecha de una enfermedad, est directamente
relacionada con la calidad de las muestras remitidas, para el diagnstico. El profesional
de campo tiene la responsabilidad de seleccionar, recolectar, preservar y enviar
adecuadamente las muestras convenientes, para el diagnstico. Para la recoleccin de
cualquier tipo de muestra, se debe utilizar material limpio y seco. Los envases utilizados
para el envo de muestras deben ser en lo posible irrompibles, hermticos y de
dimensiones adecuadas. Las precauciones a considerar, varan con la clase de muestra,
temperatura ambiente y transporte.

OBJETIVOS

Actualizar los conceptos, con relacin a la toma, transporte y conservacin de las

muestras para un estudio parasitolgico.


Identificacin de las tcnicas ms comunes de recoleccin, conservacin y envi

de muestras al laboratorio.
Reconocer los medios de conservacin ms adecuados para la conservacin de

muestras para diagnstico de parasitosis.


Manejar los criterios adecuados para que las muestras renan las condiciones y
caractersticas necesarias para ser utilizadas en el diagnstico parasitolgico.

I. BIOSEGURIDAD EN EL LABORATORIO

El trabajo en el laboratorio implica el peligro d potencial de accidentes, debido a la


naturaleza de las sustancias y elementos que se utilizan. Adems existe la posibilidad de
errores humanos al realizar la experimentacin. Entre los accidentes ms comunes
podemos mencionar: incendios, explosiones, cortes, quemaduras, intoxicaciones, etc.
Existen ciertas reglas que deben tenerse en cuenta al realizar trabajos en el laboratorio;
su cumplimiento disminuye los riesgos, y muchas veces, logran evitar accidentes.
La primera regla que todo aquel que trabaja en el laboratorio debe cumplir es la
siguiente: EL LUGAR DE TRABAJO DEBE ESTAR EN PERFECTO ORDEN. El
orden es fundamental para evitar accidentes. Mantenga el rea de trabajo ordenada, sin
libros, abrigos, bolsas y cosas innecesarias o intiles. Mantenga las mesas y vitrinas
extractoras siempre limpias. Se tienen que limpiar inmediatamente todos los productos
qumicos derramados. Limpie siempre perfectamente el material y equipo despus de su
uso.
Otras normas bsicas son las siguientes:

Siga todas las indicaciones que el instructor o responsable del laboratorio le

indique.
Este siempre equipado con guardapolvo y anteojos de proteccin. No utilice
lentes de contacto, ya que estos no pueden quitarse con la rapidez necesaria si
ocurrieran proyecciones de lquidos al ojo. Por otro lado, las lentes blandas

pueden absorber los vapores orgnicos.


Nunca debe comer, fumar o beber en el laboratorio; tampoco apoye comida

sobre la mesada.
En caso de accidente, por pequeo que parezca, comunquelo inmediatamente al

instructor o ayudante de laboratorio.


Trabaje con la mayor ventilacin posible.
Si tiene el pelo largo, debe recogrselo.
Utilice calzado cerrado.
En el armado de equipos, asegrese de usar soportes que tengan un buen apoyo,

y controle el funcionamiento de los mismos.


Nunca caliente un sistema cerrado.
Si calienta un tubo de ensayo, no mire hacia el interior del mismo; tampoco

apunte la boca del tubo hacia un compaero.


Manipule las sustancias corrosivas con mximo cuidado.

No fuerce los tapones o uniones de ltex en los tubos de vidrio o cualquier


material quebradizo. Utilice detergente o glicerina que facilitan la tarea de

quitarlos.
No use nunca equipo de vidrio agrietado o roto. Deposite el material de vidrio

roto en un contenedor para vidrio, no en una papelera.


En el laboratorio nunca debe trabajar solo, para poder recibir ayuda en caso de

accidentes.
Trabaje sin prisa, pensando cada momento en lo que est haciendo. Nunca corra
en el laboratorio.

Dada la gran toxicidad de muchas sustancias con las que se trabaja en el laboratorio
debe tener en cuenta las siguientes precauciones:
EVITE INGERIR, INHALAR O TOCAR COMPUESTOS ORGNICOS (muchos
de estos son rpidamente absorbidos por la piel y resultan tan txicos como si fueran
inhalados). Por esto se recomienda:

No arroje residuos slidos insolubles en la pileta.


No mezcle sustancias orgnicas que puedan generar compuestos txicos.
No mueva los reactivos del rea designada para su manejo y medida. Debe
transportar las botellas o frascos de reactivos tomndolos por el fondo, nunca de

la tapa.
No pruebe ninguna sustancia (slida o en solucin) a menos que sea

especficamente indicado por el instructor.


Si debe oler una sustancia hgalo a una distancia de 12 a 20 cm de la nariz,
mueva lentamente la mano hacia la nariz y aspire con precaucin. Si no detecta
ningn olor, mueva un poco el recipiente que lo contiene, y huela ms

fuertemente. Nunca inhale.


Evite derramar productos qumicos sobre la mesada. Si sucediera esto, vise al
instructor o ayudante de laboratorio; pero sobre todo, trabaje con precaucin
para evitar ese accidente.

EVITE CONTAMINAR EL AIRE:

Coloque las tapas en los frascos inmediatamente despus de usarlos. No slo


reducir la evaporacin, sino que tambin evitar la contaminacin de los

reactivos.
No traslade las sustancias qumicas del rea designada para su manejo y medida.

Use bao de hielo cuando destile lquidos con punto de ebullicin inferiores a

40C.
Evite una condensacin incompleta. Lo conseguir asegurndose que el agua
fluya por el refrigerante cuando destile o caliente a reflujo.

PRECAUCIONES PARA EL USO DE CIDOS Y BASES FUERTES:

Use las cantidades especificadas en la tcnica correspondiente.


Para preparar mezclas de cido con agua o alcohol, agregue el cido al agua o
alcohol lentamente, agitando y enfriando. Si se trata de una mezcla de dos
cidos, aada en porciones, y con sumo cuidado, el ms concentrado sobre el
menos concentrado, agitando y enfriando. Recuerde: No hay que darle de beber

al cido.
Proteja los ojos cuando trabaje con sustancias corrosivas.
Lave con grandes cantidades de agua la piel si la misma hubiera tomado
contacto con sustancias corrosivas. Luego, siga el tratamiento correspondiente
para cada caso.

PELIGROS DEL FUEGO:

No acerque nunca recipientes que contengan lquidos voltiles a una llama.


No encienda ninguna llama en el laboratorio si detecta olor a gas.
No vuelque sodio en las piletas. la reaccin es violenta y pude provocar un

incendio.
Si arden pequeas cantidades de disolvente, cubra con arena. Para grandes
cantidades, use extinguidores.

PRIMEROS AUXILIOS
QUEMADURAS:
Trate las quemaduras como se indica a continuacin y luego llame por atencin
especializada.

Con lcalis: En la piel: despus de lavar la zona afectada con agua, trate con
solucin de cido actico al 5%. En los ojos: despus de lavar repetidas veces
con agua, trate con solucin de cido brico al 1%.

Con cido: En la piel: despus de lavar con agua, trate con solucin de
bicarbonato de sodio al 5%. En los ojos: despus de lavar con agua, trate con

solucin de brax al 5%.


Con bromo: Trate inmediatamente con glicerina.
Con fuego, agua hervida o superficies metlicas calientes. Trate inmediatamente
con hielo durante 30 minutos.

ENVENENAMIENTO POR INGESTIN:

cidos: suministre 100 a 200 g de magnesia diluida en leche o huevo batido con

agua (vomitivos).
lcalis: trate con limonada, vinagre en leche (vomitivos).
Cianuros: inmediatamente suministre 1 g de tiosulfato de sodio por va venosa.
Inhale oxgeno (antdoto).

ETIQUETAS DE SOLVENTES Y REACTIVOS:


No debe utilizar un reactivo sin haber ledo previamente toda la informacin contenida
en su etiqueta; preste especial atencin a los smbolos de peligrosidad y a las
recomendaciones para su correcto manejo.

II. MUESTREO,

CONSERVACIN

ENVIO

DE

MUESTRAS A LABORATORIO
MUESTRAS FECALES (DIAGNSTICO DE LOS PARSITOS INTESTINALES
DEL HOMBRE)
Las muestras fecales se examinan para detectar la presencia de protozoos y larvas o
huevos de helmintos.
En las heces, los protozoos suelen encontrarse en la fase de trofozoto y de quiste. Los
helmintos aparecen habitualmente en forma de huevos y de larvas, aunque a veces

tambin pueden observarse gusanos adultos enteros o en segmentos. Por lo general, las
tenias adultas y sus segmentos resultan visibles a simple vista, pero los huevos, las
larvas, los trofozotos y los quistes solo pueden verse al microscopio. La observacin de
esas estructuras exige la preparacin y el examen correcto del material.
CONDICIONES GENERALES
Los parsitos intestinales del hombre son protozoarios y/o helmintos, llamados
comnmente gusanos intestinales (Anexo A). Estos helmintos o gusanos pueden ser
cilndricos (nemtodes), anillados o segmentados (cstodes).
Para observar los trofozotos, quistes u ooquistes de los protozoarios, as como las
larvas y huevos de helmintos, se debe usar un microscopio; en cambio, la mayor
parte de los gusanos o helmintos adultos son macroscpicos y su morfologa puede
estudiarse directamente, con ayuda de un estereoscopio o una lupa.
Los protozoarios intestinales eliminan con las heces sus formas evolutivas
(trofozoto, quiste, ooquiste y espora), segn la especie involucrada.
Los helmintos intestinales adultos (progltidos de Taenia sp., Enterobius
vermicularis y Ascaris lumbricoides) pueden salir al exterior espontneamente o
despus del tratamiento.
Los gusanos intestinales se eliminan con las heces.
Los mtodos de diagnstico de los parsitos intestinales pueden ser: directo o por
concentracin de los elementos parasitarios que se eliminan en las heces.
En las heces podemos encontrar formas adultas y microscpicas (huevos, larvas,
trofozoitos, quistes, ooquistes y esporas) de los parsitos intestinales; por ello, es
importante obtener una buena muestra fecal, as como la conservacin ptima del
espcimen.
La muestra debe ser obtenida (entre 3 y 6 gramos) lo ms fresca posible (mximo 90
minutos, si se busca Entamoeba histolytica), y depositada en un frasco de boca
ancha con tapa rosca y rotulada correctamente con los datos de identificacin.
La muestra debe obtenerse antes del uso de medicamentos antiparasitarios, o hasta 2
a 5 das despus de su administracin.
Las heces depositadas en el suelo no son las recomendadas para el diagnstico,
debido a que pueden contaminarse con formas biolgicas, como por ejemplo: larvas
similares a los enteroparsitos del hombre, larvas de nemtodes, huevos de caros o
insectos, etc.
Si el paciente no es regular en la evacuacin de sus deposiciones y ha evacuado en
la noche anterior al examen, se recomienda guardar la muestra en una refrigeradora

o en un lugar fresco no expuesto a la luz solar, para que no se alteren las formas
parasitarias. Cuando la muestra va a demorar en llegar al laboratorio varias horas o
das, se recomienda adicionarle lquido fijador y/o conservador (PAF, PVA,
formalina 10%, SAF, acetato de sodio, etc.).
En algunos parasitismos relacionados al parasitismo intestinal, es necesario el
examen de bilis, esputo, secrecin, biopsia, tejido de necropsia o frotis perianal.
MUESTRA PARA EXAMEN PARASITOLGICO
Comprende las siguientes muestras: heces, bilis o jugo duodenal, esputo, secrecin,
biopsia o preparaciones histolgicas, siendo heces, la ms frecuente.
Heces
Caractersticas de la muestra
Recipiente o contenedor: boca ancha, con tapa rosca.
Cantidad : 3 - 6 g
Condiciones ptimas: No estar mezclado con orina, que no exista el antecedente de
haber ingerido bario u otros productos de contraste, y llevar la muestra al laboratorio
en corto tiempo (de 2 - 4 horas de su obtencin).
Registro de datos
Se debe consignar la siguiente informacin: Nombre, edad, sexo, ocupacin, sntomas y
signos, fecha de inicio de sntomas y diagnstico presuntivo.
Procesamiento de la muestra
Debe realizarse lo antes posible y en un lugar apropiado (que no le llegue la luz directa).
Las muestras diarreicas y las que contienen sangre, deben examinarse en forma
macroscpica y microscpica apenas lleguen al laboratorio.
ENVIO Y TRANSPORTE DE LA MUESTRA
Condiciones especficas
Las muestras deben mantenerse en un ambiente fresco y lejos de la luz solar, se deben
evitar las temperaturas extremas o el desecamiento, deben contener cantidades ptimas
y estar en frascos o contenedores rotulados y con soluciones conservadoras (Tabla N1).
Tabla N 1. Condiciones del envo de la muestra segn el tipo y tiempo de demora en
llegar al laboratorio para el diagnstico parasitolgico.

Procedimiento
Colocar la muestra elegida en un envase apropiado, rotulado correctamente y en un
recipiente secundario (podra ser de plstico u otro material resistente a roturas)
(Figura N 1).
Enviar la muestra al laboratorio lo antes posible; en caso fuera fresca, dentro de las 2
a 4 horas de obtenida.
Si el envo de la muestra va a demorar ms de un da en llegar al laboratorio, debe
guardarse en un fijador conservador, aplicando las medidas de bioseguridad
correspondientes (Tabla N 1).
Si se enviara la muestra a otro laboratorio, el personal responsable del envo debe
elegir la forma apropiada para la ptima conservacin de sta.
Cuando la muestra no rene las condiciones o cantidades ptimas para los anlisis,
as como los datos, se recomienda establecer contacto con la persona responsable
para efectuar las correcciones respectivas.

Rechazo de una muestra


Es importante controlar cada hoja de pedido y verificar si tiene toda la informacin
(etiquetado). De no cumplirse ello, se debe establecer contacto con la persona
responsable para efectuar las correcciones necesarias.
Los criterios para rechazar una muestra son los siguientes:
No indicar el tipo de muestra o procedencia.
No indicar el examen requerido.
Demora en el envo al laboratorio.
Muestra sin rotular o mal rotulada.
Muestra que presente evidencia de haber sido derramada.
Recipiente o contenedor inapropiado.
Muestra con contaminacin.
Muestra escasa o seca en el hisopo o contenedor.
Presencia de una sola muestra, a pesar de la presencia de varias rdenes.
Volumen o cantidad inadecuada.
En casos de rechazar una muestra, el personal de laboratorio debe explicar al
solicitante las observaciones y motivos en la ficha de solicitud de diagnstico. Si no
fuera posible la obtencin de otra muestra, revisar nuevamente los exmenes
realizados.
Tener en cuenta el examen parasitolgico por macroscopa.
CONSERVACION DE LAS MUESTRAS
Rotlense dos viales de 20 ml con el nombre o el numero del paciente, escriba una F
en el ngulo superior derecho de la etiqueta de un vial, escrbase PVA en el ngulo
superior derecho de la etiqueta de un vial del otro vial.
Rellnese el vial F hasta la mitad con conformidad al 10%. Rellnese el vial PVA
hasta aproximadamente la mitad con fijador del PVA.
Con un palillo aplicador, tomar una pequea parte del excremento que tenga partes
del interior y exterior de la muestra y mezcla r con la formalina al 10%. Es
importante mezclar muy bien; deshacer los granos. Utilice una cantidad suficiente,
aunque no exagerada, del excremento de modo que la mezcla ocupe entre dos
tercios y tres cuartos del vial.
Con un palillo aplicador, tomar una porcin de la parte mas blanda del excremento y
mezclar con el fijador PVA como en el caso de la formalina. La cantidad total de
mezcla del excremento y PVA no debe ocupar ms de tres cuartas partes del vial. Es
preciso cerciorarse de que el excremento queda completamente mezclado con el
fijador. Deshacer los fragmentos aplastndolos las paredes del vial.

Enroscar fuertemente las tapas de los viales. Sellar con un trozo de cinta adhesiva
para evitar que se derrame el contenido.
Embalar cuidadosamente los viales en una caja o recipiente y enviar al laboratorio
de referencia. Hay cerciorarse de que los viales estn rodeados de material
absorbente (por ejemplo, algodn o papel de peridico) y se han envasado de modo
que no puedan romperse.
Es imprescindible incluir la informacin necesaria; nombre o nmero del paciente,
fecha de envo, microorganismos encontrados.

III. RECONOCIMIENTO
REACTIVOS

DE

DE

MATERIALES

LABORATORIO

Y
DE

PARASITOLOGA
Los elementos de uso comn en un laboratorio de parasitologa se clasifican segn el
material del que estn constituidos y del uso. As se tiene de: metal, vidrio, plstico,
porcelana, madera y otros.

Figura 1. Material de vidrio

MATERIAL DE LABORATORIO (VIDRIO). Descripcin de materiales de acuerdo


a la figura 1.

Caja Petri: En forma de plato plano con bordes elevados que consta de una base
y una tapa. En el rea de parasitologa nos sirve de apoyo para el depsito de
parsitos, cultivo de larvas y como depsito de heces para la identificacin de

huevecillos de elevado peso especfico.


Cubreobjetos: Placa de vidrio delgada, de forma cuadrada o rectangular que

sirve para colocarlo sobre frotis hmedos o fijos.


Embudo: Instrumento empleado para trasvasar principalmente lquidos y otros

materiales slidos granulares a recipientes con bocas estrechas.


Matraz Erlen Meyer: Tiene forma acampanada con el fondo plano, graduado,
sirve para preparar medios de cultivo, reactivos, colorantes, soluciones o para

mantener en medio lquido una gran cantidad de microorganismos.


Pipeta: Tubo de vidrio o plstico de punta larga o corta, que es utilizada para
separar muestras lquidas y adems, permite depositar sustancias de volumen

variable.
Portaobjetos: Placa de vidrio rectangular indispensable en la realizacin de

frotis.
Probeta graduada: Son cilindros de dimetro variable. La base de la probeta es
amplia y plana y en el extremo superior generalmente tiene doblado el borde en
forma de pico. Su capacidad es variable ya que las hay desde 10 ml hasta 2000

ml o ms. Son utilizados para medir volmenes variables.


Termmetro: El termmetro es un instrumento que se usa para medir la
temperatura. Su presentacin ms comn es de vidrio, el cual contiene un tubo
interior con mercurio, que se expande o dilata debido a los cambios de
temperatura. Para determinar la temperatura, el termmetro cuenta con una
escala debidamente graduada, que la relaciona con el volumen que ocupa el

mercurio en el tubo.
Tubos de ensayo: Tubo de cristal con base convexa, y en el otro extremo una
abertura que puede ser lisa o con rosca, hay en diversos tamaos, sirven para

contener sustancias lquidas, slidas o semislidas.


Varilla de vidrio: Instrumento que consiste en un fino cilindro macizo de vidrio
(puede ser de punta roma), que sirve para agitar soluciones.

Vaso de precipitado: Tiene forma cilndrica con base plana, y en su borde


superior una ranura triangular, que sirve para verter lquidos, son graduados y

los hay de diferentes capacidades.


Luna de reloj: Permite contener sustancias, se utiliza principalmente para cubrir
recipientes, pesar y transferir slidos.

SOLUCIONES:

Figura 2. Soluciones de uso en parasitologa


Descripcin de soluciones de acuerdo a la Figura 2.

Agua destilada: Es aquella que como todo tipo de agua, su composicin se basa
en la unidad de molculas H2O, solo que se le han eliminado los iones e

impurezas mediante la destilacin.


Alcohol: El alcohol etlico, es un producto que se obtiene a partir de la melaza,
uno de los subproductos de la caa de azcar, actualmente tiene diferentes usos

y aplicaciones.
Formol (al 5 y 10%): Es el aldehdo frmico, obtenido por oxidacin cataltica
del alcohol metlico. El formol es un lquido incoloro, con olor sofocante,
miscible en agua, acetona, benceno, cloroformo, alcohol y ter etlico.

Solucin glucosada: Solucin isotnica (entre 275 y 300 miliosmoles/L) de


glucosa. Para su elaboracin se requiere de 1280 g. de azcar, 1000 ml de agua

caliente y 20 g de fenol.
Solucin saturada de sal (S. S. NaCl): Es aquella en la que se ha disuelto la
mxima cantidad de soluto que pueda disolverse, a una temperatura determinada

(25C). Est compuesta de la siguiente manera: NaCl = 331 g, H2O = 1000 ml.
Sulfato de zinc (ZnSO4). Compuesto qumico, cristalino, incoloro y soluble en
agua, aunque siempre va acompaado de un determinado nmero de molculas

de agua.
Aceite de inmersin

COLORANTES:

Figura 3. Colorantes de uso en parasitologa


Descripcin de colorantes de acuerdo a la Figura 3.

Azul de metileno: Colorante cargado positivamente.


Giemsa: Es un colorante compuesto ya que es una mezcla de colorante Giemsa,

azul de metileno fosfatado y buffer fosfatado gota gruesa Giemsa.


Lugol: Es una disolucin de yodo molecular y yoduro potsico en agua

destilada.
Violeta de genciana (Cloruro de metilrosanilina): Colorante de anilina, utilizada
para teir ncleos. Tambin tiene propiedades bactericidas, bacteriostticas y
actividad fungicida.

EQUIPO DE LABORATORIO:

Figura 4. Equipos

Descripcin

del

equipo de uso en

laboratorio,

de

acuerdo a la Figura

5.

Balanza de precisin: Es un tipo de balanza, utilizada para determinar o pesar la


masa de objetos. Suelen tener capacidades de 2 2,5 kg y medir con una

precisin de hasta 0,1 0,01 g.


Centrfuga: Aparato que pone en rotacin, una muestra para separar por fuerza
centrfuga sus componentes o fases (generalmente una slida y una lquida), en

funcin de su densidad.
Equipo Mc Master (cmara y tubo): Consiste en una cmara de conteo, que
posibilita el examen microscpico de un volumen conocido de suspensin de
materia fecal (2 x 0.15 ml). Tambin se integra un tubo que permite la correcta

homogenizacin, y equilibrio de la muestra fecal, con la solucin glucosada.


Microscopio Estereoscpico: Instrumento que hace posible la visin

tridimensional de los objetos.


Microscopio Compuesto (ptico): Se trata de un instrumento ptico, que
contiene una o varias lentes u objetivos, que permiten obtener una imagen

aumentada del objeto y que funciona por refraccin.


Pinza Mhr: Es un instrumento metlico, que se utiliza para obstruir el paso de

un lquido o gas, a travs del tubo ltex.


Soporte universal: Es un utensilio de hierro que permite sostener varios
recipientes. Pieza bsica en el montaje de los sistemas y aparatos como pinzas y
anillos de metal.

IV. EXMEN O EVALUACION PARASITOLGICA


PROCEDIMIENTOS

DE

LABORATORIO

PARA

EL

DIAGNSTICO

PARASITOLGICO HECES
EXAMEN DIRECTO MACROSCPICO
Fundamento
Permite observar directamente las caractersticas morfolgicas de los parsitos adultos,
enteros o fraccionados, as como los cambios en las caractersticas organolpticas de las
heces eliminadas, (color, presencia de sangre y/o moco, consistencia, etc.).
Materiales

Suero fisiolgico.
Aplicador (baja lengua).
Pinza de metal.
Coladera de plstico o malla metlica.

Procedimiento.

Agregar suero fisiolgico en cantidad suficiente para homogeneizar la muestra.


En caso de presencia de parsitos adultos, tamizar o colar la muestra.

Observacin.
Observar las caractersticas organolpticas de las heces, tiles para la ayuda diagnstica
(consistencia, color, presencia de moco, sangre, alimento sin digerir), as como la
presencia de gusanos cilndricos, anillados o aplanados (enteros o parte de ellos) como
se muestra en la figura.

Ascaris lumbricoides macho adulto (der.) y progltido grvido de Taenia solium (4X)
(izq.), coloracin: Tionina
Resultado.
En caso que la muestra no sea normal, es decir, contenga informacin til para el
diagnstico (ejemplo: presencia de glbulos rojos, fibras musculares no digeridas,
mucus, etc.), se debe adicionar al informe del examen parasitolgico las caractersticas
macroscpicas de las heces.
EXAMEN DIRECTO MICROSCPICO
Fundamento.
Buscar, principalmente en muestras frescas, la presencia de formas evolutivas mviles
de parsitos de tamao microscpico (trofozotos, quistes de protozoos: Entamoeba
histolytica, Giardia lamblia, Balantidium coli, etc.; as como larvas o huevos de
helmintos: Strongyloides stercoralis, Ancylostoma duodenale, Necator americanus,
Trichostrongylus sp., Paragonimus, Fasciola, etc.).
Materiales

Lminas portaobjetos.
Laminillas cubreobjetos.
Aplicador de vidrio o madera.
Microscopio ptico.
Marcador de vidrio.
Suero fisiolgico.
Solucin de lugol.
Verde brillante.
Rojo neutro.

Procedimiento.

Colocar en un extremo de la lmina portaobjeto una gota de suero fisiolgico y,


con ayuda de un aplicador, agregar 1 a 2 mg de materia fecal, emulsionarla y

cubrirla con una laminilla cubreobjeto.


Colocar en el otro extremo de la lmina portaobjeto, una gota de lugol y

proceder a la aplicacin de la muestra fecal como en el prrafo anterior.


Con el suero fisiolgico, los trofozotos y quistes de los protozoarios se observan

en forma natural, y con lugol, las estructuras internas, ncleos y vacuolas.


En algunos casos, se recomienda el uso de colorantes vitales, debido a que no
alteran la actividad del trofozoto. Los ms usados son verde brillante 0,2% y
rojo neutro 0,01%.

Observacin

Observar al microscopio a 10X 40X. No es aconsejable usar objetivo de

inmersin (100X), pues se puede ensuciar el microscopio.


Recorrer la lmina siguiendo un sentido direccional, ejemplo: de derecha a
izquierda, o de arriba a abajo.

Trofozoito de Giardia lamblia con solucin lugol (200X)


Resultado
En un formato y en el cuaderno de registro correspondiente, se anotar el nombre de la
especie del parsito y su estado evolutivo, indicando la densidad (nmero de formas
parasitarias por campo microscpico) expresado en cruces.
EXAMEN INDIRECTO - MTODOS DE CONCENTRACIN
Los trofozotos, quistes, ooquistes, larvas y huevos, pueden concentrarse por diversos
procedimientos, lo cual permite corroborar el hallazgo del mtodo directo y conocer la

intensidad del enteroparasitismo. Estos procedimientos de concentracin pueden ser:


flotacin, sedimentacin, o por combinacin de ambos mtodos. La eleccin de cada
procedimiento depender de las facilidades del laboratorio, el adiestramiento del
personal, la procedencia de la muestra (zona geogrfica), el conocimiento de la
prevalencia de los parsitos (zona costea, andina y selvtica o rea rural o urbana), y la
especie del parsito que se desea investigar.
MTODOS DE CONCENTRACIN POR SEDIMENTACIN.
Tcnica de la sedimentacin espontnea en tubo (Tcnica de concentracin por
sedimentacin, sin centrifugacin):
Fundamento.
Se basa en la gravidez que presentan todas las formas parasitarias para sedimentar
espontneamente en un medio menos denso y adecuado como la solucin fisiolgica.
En este mtodo es posible la deteccin de quistes, trofozotos de protozoarios, huevos y
larvas de helmintos.
Materiales.

Tubos de vidrio o plstico de 13 x 100, 16 x 150, o tubos de 50 mL de capacidad

que terminen en forma cnica.


Lminas portaobjetos.
Laminillas de celofn recortadas adecuadamente (22 x 22 mm 22 x 30 mm.).
Solucin fisiolgica.
Pipetas de vidrio o plstico.
Agua destilada, hervida o de lluvia.
Gasa recortada en piezas de 9 x 9 cm.

Procedimiento.

Tomar una porcin de heces (1 - 2 g) y homogeneizar con suero fisiolgico en

un tubo limpio o en el mismo recipiente en que se encuentra la muestra.


Colocar una gasa, hundindola en la abertura del tubo y sujetndola con una liga

alrededor de ella.
Filtrar el homogeneizado a travs de la gasa, llenando el tubo hasta la cuarta

parte de su contenido.
Agregar suero fisiolgico hasta 1 cm por debajo del borde del tubo.
Ocluir la abertura del tubo con una tapa, parafilm o celofn.

Agitar enrgicamente el tubo por 15 segundos aproximadamente.


Dejar en reposo de 30 a 45 minutos. En caso que el sobrenadante est muy
turbio, eliminarlo y repetir la misma operacin con solucin fisiolgica o agua

filtrada.
Aspirar la parte media del tubo con una pipeta y colocar 1 2 gotas en una

lmina portaobjeto.
Aspirar el fondo del sedimento con una pipeta y depositar 1 2 gotas del

aspirado en los extremos de la otra lmina portaobjeto.


Agregar 1 2 gotas de solucin lugol a una de las preparaciones.
Cubrir ambas preparaciones con las laminillas de celofn y observar al
microscopio.

Observacin.
Examinar primero la preparacin con solucin fisiolgica para observar formas mviles
y de menor peso especfico (trofozotos, quistes y larvas) y luego la preparacin con
lugol para observar sus estructuras internas, de estos y de otros parsitos de mayor peso
especfico (huevos, larvas).
Resultado.
Informar la presencia de las formas evolutivas de los parsitos.
MTODOS DE CONCENTRACIN POR FLOTACIN
Sheather Sugar: Mtodo de concentracin por flotacin con centrifugacin en una
solucin de azcar:
Fundamento.
Se basa en la flotacin de quistes, ooquistes y huevos de parsitos en una solucin de
azcar que posee mayor densidad que ellos. Esta tcnica es til para la concentracin de
quistes y ooquistes de protozoos y huevos de helmintos y se usa como mtodo
preferencial en el diagnstico de los coccidios: Cryptosporidium, Cyclospora, Isospora,
etc.

Materiales.

Tubos de ensayo 13 x 100.


Lminas portaobjetos.
Laminilla cubreobjetos.
Aplicador.
Solucin saturada de azcar.
Asa de platino.
Gradilla para tubos de ensayo.
Suero fisiolgico.
Embudo de vidrio.
Gasa.

Procedimiento.

Homogeneizar 1 a 2 g de materia fecal en suero fisiolgico.


Colocar un embudo de vidrio con una gasa doblada en la abertura del tubo de

ensayo y filtrar el material homogeneizado.


Centrifugar el tubo con el material homogeneizado a 1 500 r.p.m. durante 2 a 5

minutos.
Eliminar el sobrenadante, y agregar la solucin de azcar hasta 1 cm del borde
del tubo, agitar hasta disolver el sedimento, centrifugar como en el paso anterior,
completar con la solucin de azcar hasta el borde y esperar de 2 a 5 minutos la

formacin de un menisco.
Con la ayuda del asa de platino, tomar una muestra de la superficie del menisco
y colocarla en una lmina portaobjeto, agregar lugol, cubrir con una laminilla y
observar al microscopio. En el caso de observar coccidios, de la superficie del
preparado, tomar con la asa de platino o con una pinza curva, una muestra para
preparar un frotis para teir por el mtodo de Ziehl-Neelsen modificado.

Observacin.
Esta tcnica es apropiada para la observacin y registro de ooquistes de Isospora,
Cryptosporidium, Cyclospora y Sarcocystis.
Resultado.
Informar la presencia de las formas evolutivas de los parsitos encontrados y su
cantidad, expresado en cruces.
BIBLIOGRAFA

MANUAL

DE

PROCEDIMIENTOS

DE

LABORATORIO

PARA

EL

DIAGNSTICO DE LOS PARSITOS INTESTINALES DEL HOMBRE.


Ministerio de Salud - Instituto Nacional de Salud - Centro Nacional de Bibliografa
Instituto Nacional De Salud Laboratorios en Salud Pblica - Red Nacional de
Laboratorios de Salud. Serie de Normas Tcnicas N. 37. Lima, 2003.
METODOS BASICOS DE LABORATORIO EN PARASITOLOGIA MDICA.
Organizacin Mundial de la Salud. Ginebra 1992.
MANUAL DE PROCEDIMIENTOS DE LABORATORIO

PARA

LA

OBTENCIN Y ENVO DE MUESTRAS (1). Ministerio de Salud - Instituto


Nacional de Salud - Centro Nacional de Laboratorios en Salud Pblica - Red
Nacional de Laboratorios de Salud. Serie de Normas Tcnicas N. 15 - Lima,
diciembre 1995, Art. Lautrec.
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Segunda Edicin. Ministerio de Salud, Instituto Nacional de Salud. Centro Nacional
de Laboratorios de Salud Pblica. Red Nacional de Laboratorios de Salud. Lima, Art
Lautrec. 98 pgs.
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LABORATORIOS DE SALUD PBLICA. Ministerio de Salud - Instituto Nacional
de Salud - Centro Nacional de Laboratorios en Salud Pblica - Red Nacional de
Laboratorios de Salud. Lima, enero 1995.
MANUAL DE BIOSEGURIDAD EN EL LABORATORIO
Organizacin Mundial de la Salud - Segunda edicin, Ginebra, 1994.
MANUAL PARA LA TOMA, TRANSPORTE Y REMISIN DE MUESTRAS AL
LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA. Ministerio de Salud - Instituto
Nacional de Salud Santa F de Bogot, septiembre 1993.

ANEXOS

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