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UNIVERSIDAD CENTROCCIDENTAL

LISANDRO ALVARADO
DECANATO DE CIENCIAS DE LA SALUD
DEPARTAMENTO DE CIENCIAS FUNCIONALES
SECCIN DE FISIOLOGA

MANUAL DE PRCTICAS
DE LABORATORIO
DE FISIOLOGA
IV SEMESTRE
PROGRAMA DE MEDICINA

BARQUISIMETO, Noviembre 2014

UNIVERSIDAD CENTROCCIDENTAL
LISANDRO ALVARADO
DECANATO DE CIENCIAS DE LA SALUD
DEPARTAMENTO DE CIENCIAS FUNCIONALES
SECCIN DE FISIOLOGA

MANUAL DE PRCTICAS
DE LABORATORIO
DE FISIOLOGA
IV SEMESTRE
PROGRAMA DE MEDICINA

Dr. Gregorio Tiskow


Compilador-Editor
Modificado Noviembre 2014

BARQUISIMETO, VENEZUELA

CONTENIDO
Pgina
.- Presentacin.

.- Propsitos y objetivos del manual...

.- Dedicatoria....

.- Requisitos bsicos para asistir a las prcticas..

.- Instrucciones dirigidas a los estudiantes para el buen desarrollo de la prctica..

.- Prctica No. 1: Estudio de la Fragilidad Osmtica del Eritrocito..

.- Prctica No. 2: Naturaleza Biofsica del Potencial de Reposo y del Potencial de


Accin Celular

21

.- Prctica No. 3: Estudio de los Reflejos y la Sensibilidad Somtica. .

44

.-Prctica No. 4: Sensibilidad Especial: La Visin. .

54

.-Prctica No. 5: Bases Elctricas de la Actividad Cerebral: Electroencefalografa..

67

.- Prctica No. 6: Determinacin de la Sedimentacin Globular, Hematocrito y


Valoracin de la Hemostasia..

79

.- Anexo No. 1: Toma de una Muestra de Sangre Venosa .

93

.- Anexo No. 2: Campmetro de Goldmann..

95

.- Anexo No. 3: El Uso de los Programas Simuladores en la Fisiologa Mdica.

97

.- Anexo No. 4: Enlaces Electrnicos de Inters ....

101

Presentacin
Las Ciencias de la Salud, y en especial la Fisiologa Humana, son ciencias dinmicas, en
constante evolucin y progreso. Con el avance de las tcnicas de investigacin, pruebas clsicas
de biofsica y fisiologa, modelos dinmicos, programas simuladores y otros artificios de los que
se valen los fisilogos para estudiar el funcionamiento del cuerpo humano, se ha podido
transmitir a los estudiantes del rea todo el cmulo de conocimientos alcanzados a lo largo de
dcadas de anlisis y experimentacin, para una mejor comprensin de nuestro organismo.
Este Manual, y en consonancia con la Visin y Misin de nuestra Universidad y en
particular de nuestro Decanato de Ciencias de la Salud y de la Seccin de Fisiologa, pretende
dar un impulso integral al acto educativo, formando profesionales de la salud con valores
cientficos, tecnolgicos y humansticos, con calidad profesional como talento humano que
egresa con alta pertinencia social, para tratar de salvar vidas humanas.
El presente Manual de Prcticas de Fisiologa Humana para estudiantes de Fisiologa I
del Programa de Medicina, representa un esfuerzo contundente para consolidar en el mismo,
un grupo de actividades seleccionadas de laboratorio que pretende ensear el trabajo en
equipo, con una metodologa cientfica apropiada, con tcnicas verificadas que permiten
ensear el funcionamiento normal de distintos grupos de clulas, tejidos y rganos que
integran al organismo humano como sistema integral.
Cada prctica diseada incluye, una breve introduccin al tema, las instrucciones
generales para el buen desarrollo de la misma, las actividades a ejecutar en el laboratorio y una
gua de auto-evaluacin que permita al estudiante valorar lo aprendido en la respectiva
experiencia.

Prof. Gregorio Tiskow ()

Propsitos y Objetivos del Manual


El presente manual permitir al estudiante de medicina

orientarlo en su proceso de

aprendizaje. Uno de los objetivos fundamentales del Programa de Fisiologa y de ste guion en
particular, es realizar e interpretar algunas pruebas que permitan al estudiante evaluar el
funcionamiento de los sistemas orgnicos humanos. Aparte de ello, las prcticas buscan aplicar
los conocimientos impartidos y adquiridos en la parte terica de la presente asignatura.
Mediante la estrategia de observacin el estudiante podr afianzar sus aprendizajes, evaluar
sus variables y analizar los resultados obtenidos. Las prcticas permiten tambin la promocin
del trabajo en equipo, la actitud participativa de los mismos y su actitud crtica hacia la
investigacin.

OBJETIVOS
.-Presentar a los estudiantes del cuarto semestre de medicina, una gua de desarrollo para cada
sesin de prctica en el laboratorio docente.
.-Plantear problemas prcticos que se deben resolver integrando los conocimientos de
fisiologa.
.-Buscar que el estudiante desarrolle un pensamiento estructurado, integrando la prctica con
la teora.
.-Permitir observar los diferentes fenmenos fisiolgicos y su debida interpretacin cuando
stos varan por distintos estmulos internos o externos.

Dedicatoria
El

presente Manual de Laboratorio de Actividades Prcticas de Fisiologa I, est

dedicado a todos los Profesores de la Seccin de Fisiologa que en su momento planificaron las
actividades docentes, tanto tericas como prcticas; a aquellos docentes que hoy da no nos
acompaan fsicamente o que ya se encuentran disfrutando de su justa etapa de jubilacin y en
especial al Maestro de Maestros, al egregio Dr. Luis Batalla Sotelo () quien ha dedic su vida
profesional a ensear la fisiologa a estudiantes de pregrado y de postgrado, a proyectar valores
humansticos y ticos, gua espiritual y tutor de muchos de los docentes que hoy
orgullosamente formamos parte de la Seccin de Fisiologa del Decanato de Ciencias de la
Salud de la Universidad Centroccidental Lisandro Alvarado.

REQUISITOS BSICOS PARA ASISTIR A LAS PRCTICAS

Estimada(o) estudiante,
Para asistir a las actividades prcticas, Ud debe:

Usar bata blanca de laboratorio: Normas de Higiene y Seguridad Industrial.

Asistir con zapatos cerrados: Normas de Higiene y Seguridad Industrial.

Leer previamente y con detalle el guion correspondiente a cada actividad.

Repasar los conocimientos tericos facilitados por el docente instructor y consultar su


texto gua.

Seguir debidamente las instrucciones que se encuentran al comienzo de cada actividad


y las que se indiquen en el laboratorio.

No se permitir la entrada al laboratorio docente a aquellos estudiantes que lleguen con


15 minutos de retraso. Gracias por su colaboracin en este sentido: responsabilidad y
tica primero.

Cada grupo de prctica (A y B) ser sub-dividido en 2 sub-grupos para lograr el mximo


aprovechamiento del acto educativo. Cada sub-grupo tiene asignado un docente de
laboratorio. El docente ser responsable de impartir y evaluar las actividades
acadmicas realizadas dentro del laboratorio por los alumnos de dicho sub-grupo,
mediante su participacin y su desempeo en todas y cada una de las diferentes
prcticas.

No habr cambios de alumnos(as) de grupo o entre sub-grupos de laboratorio, que no


sean realizados mediante el trmite administrativo correspondiente ante la Secretara
de Seccin y en el perodo estipulado para tal fin.

INSTRUCCIONES DIRIGIDA A LOS ESTUDIANTES PARA EL BUEN


DESARROLLO DE LA PRCTICA
Para el buen desempeo de las actividades docentes, en cada grupo se seleccionarn
voluntarios que colaborarn en la donacin y extraccin de fluidos orgnicos (cuando sea
requerido). Todos los estudiantes debern participar de las actividades programadas para el
cumplimiento de los objetivos propuestos.

En el Laboratorio:
Los estudiantes encontrarn los materiales e insumos necesarios para desarrollar la actividad
prctica. Cada subgrupo ocupar un mesn y sus integrantes observarn con atencin las
experiencias y maniobras del instructor(a). Anoten sus resultados en los espacios destinados
para tal fin en este guion prctico. Posterior a la culminacin de las experiencias se establecer
la discusin correspondiente. Se les sugiere participar pro-activamente.

PRCTICA N

ESTUDIO DE LA FRAGILIDAD OSMTICA DEL ERITROCITO

PRESENTACIN

La presente gua constituye la primera actividad prctica (Unidad V) de la asignatura


Fisiologa del cuarto semestre del Programa de Medicina. Por medio de esta actividad se
pretende que el estudiante desarrolle un sentido de aplicabilidad de los conceptos biofsicos
bsicos de smosis y turgencia celular mediante la utilizacin de clulas sanguneas (eritrocitos)
colocadas en distintas clases de soluciones salinas con propiedades osmticas diferentes entre
s.

INTRODUCCIN
Las propiedades reolgicas de la sangre han sido investigadas durante muchos aos.
Estas propiedades incluyen la combinacin del estado funcional de las clulas sanguneas
(movilidad, deformidad y agregacin de los eritrocitos, leucocitos y plaquetas), la viscosidad
sangunea (dada por la concentracin de protenas y lpidos) y la osmolaridad sangunea
(dependiente de la concentracin de glucosa). Los eritrocitos o glbulos rojos son
fundamentales en el establecimiento de las propiedades reolgicas
de la sangre ya que sus membranas constituyen un modelo de la
organizacin molecular de las membranas plasmticas. Los
eritrocitos

son

clulas

sanguneas

anucleadas

que

miden

aproximadamente 8 m de dimetro (as, unos 3000 eritrocitos en


fila ocupan 2,5 cm de longitud) y tienen forma de disco bicncavo.
La membrana del eritrocito es un complejo de lpidos y protenas
(bicapa lipdica), el cual es importante para mantener la elasticidad celular y la permeabilidad
selectiva.
El eritrocito o glbulo rojo es una clula fcil de obtener a travs de un muestreo
sanguneo y que por sus caractersticas fsico-qumicas, es ideal para la observacin de
9

fenmenos biofsicos que afecten su forma y tamao. La ruptura de la membrana celular


produce la salida del contenido de hemoglobina, por lo que se puede medir la ruptura de los
eritrocitos cuantificando la cantidad de hemoglobina liberada al medio mediante tcnicas
espectrofotomtricas. Es por estas condiciones que se ha empleado el eritrocito como un
osmmetro perfecto al estimar las propiedades de una solucin cualquiera.
La fragilidad osmtica del eritrocito depende de caractersticas tales como la edad de la
clula, su tamao, forma y las dems condiciones propias de la estructura interna de la clula.
Como se emplea una poblacin de millones de clulas, la fragilidad osmtica sigue la
distribucin de una curva normal. En condiciones fisiolgicas, los eritrocitos se encuentran en
equilibrio osmtico con la sangre que los contiene (valor de osmolaridad del plasma sanguneo:
290 10 mOsm/L), por lo cual se dice que la sangre es una solucin isosmtica e isotnica. Si la
osmolaridad del plasma llega a disminuir significativamente (plasma hipotnico), el agua como
lquido, entra al interior

de la clula aumentando su volumen. Si por el contrario, la

osmolaridad del plasma se incrementa, ste se torna hipertnico y el agua sale del eritrocito
ocurriendo una reduccin del volumen celular.
La forma y el volumen de los eritrocitos cambian cuando vara la cantidad de agua
contenida en su interior, pudiendo tomar una forma estrellada o irregular al ocurrir prdida de
volumen (fenmeno de crenacin) o bien aumentar su volumen hasta adquirir la forma de una
esfera. Cuando la clula no puede resistir la carga de agua que recibe, la membrana se rompe
(fenmeno de hemlisis) y se libera la hemoglobina la cual puede ser cuantificada por mtodos
espectrofotomtricos. La hemlisis es un proceso que ocurre en una poblacin mixta de clulas
por lo que no ocurre en un solo punto y a la misma velocidad en todos los casos. Como el
efecto final es un tanto difcil de apreciar experimentalmente debido a que la hemlisis ocurre
en forma que se hace asinttica al 100 % (curva aplanada), se prefiere analizar el tiempo de
hemlisis al alcanzar el 50%.

1.-OBJETIVOS DE LA PRCTICA:
.-Explicar la Fragilidad Osmtica del Eritrocito (FOE).
.-Explicar la Resistencia Globular del Eritrocito (RGE).
.-Elaborar, a partir de una serie de datos, la curva de Fragilidad Osmtica del Eritrocito.
.-Indicar el 50 % de hemlisis en una curva de Fragilidad Osmtica.

10

2.-MATERIAL REQUERIDO PARA LA EXPERIENCIA PRCTICA:


Tubos de ensayo de vidrio de 75 x 10 mm, 2 inyectadoras de 10 cc, guantes estriles, gradillas,
torniquete, cronmetro, algodonera, heparina, soluciones de NaCl 1%, Manitol 3,1% y MgCl2
3,46%, pipetas volumtricas, agua destilada, espectrofotmetro digital, centrfuga clnica, lpiz
graso, marcadores, pizarra acrlica.

3.-PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL:
Para la ejecucin de este procedimiento experimental, un estudiante proceder a
extraer sangre de la vena del pliegue del codo de uno de sus compaeros en cantidad
aproximada de 6 cc (Ver Anexo N 1 para conocer el mtodo de extraccin sangunea).
Seguidamente se colocar dicha sangre en un tubo con dos gotas de heparina.
Se organizarn cuatro grupos de estudiantes los cuales tendrn cada uno un juego de
tubos numerados del 1 al 12, colocados ordenadamente en la gradilla respectiva.
Adicionalmente, cada grupo tendr una de las cuatro soluciones salinas de trabajo que sern
NaCl 0,2%, 0,45%, 3% y al 10%, las cuales sern empleadas para preparar diluciones
decrecientes de las mismas en los tubos numerados agregando agua en las proporciones
indicadas en la Tabla N 1 para el NaCl (0,2%), Tabla N 2 para el NaCl (0,45%), Tabla N 3 para
el NaCl (3%) y Tabla N 4 para el NaCl (10%).
Seguidamente, agregar a cada tubo dos gotas de sangre heparinizada y mezclar muy
suavemente. Adicionalmente, se preparar un tubo con 10 ml de agua destilada nicamente al
cual se le agregar dos gotas de la misma muestra de sangre heparinizada. Este tubo ser
empleado como referencia de obtencin de un 100 % de hemlisis.
Dejar los tubos en reposo por espacio de 30 minutos para que los eritrocitos reaccionen
con la solucin. Agitar suavemente de nuevo y centrifugar por 5 minutos a 2000 rpm en
centrfuga clnica.
En compaa de su preparador docente o del tcnico de laboratorio, proceda a medir la
absorbancia en el espectrofotmetro del laboratorio. Para ello, saque los tubos con cuidado de
la gradilla y extraiga el sobrenadante con una pipeta Pasteur (tenga mucho cuidado de no tocar
el botn de eritrocitos que se form en el fondo del tubo) y colquelo en la cubeta del
espectrofotmetro destinada para tal fin y proceda a leer el registro que le proporciona el
equipo a 540 nm de longitud de onda.

11

Anote en la Tabla N 4 los valores de absorbancia obtenidas para cada uno de los

sobrenadantes y determine el porcentaje de hemlisis para cada uno de ellos empleando el


tubo control (sangre + agua destilada) como el 100 % de hemlisis.

Tabla No. 1
Tubo N

Volumen de NaCl

Volumen de agua

Concentracin de

0,2% (ml)

(ml)

NaCl (%)

8,5

1,5

7,5

2,5

6,5

3,5

6.0

4,0

5,5

4,5

5,0

5,0

4,5

5,5

4,0

6,0

3,5

6,5

10

3,0

7,0

11

2,0

8,0

12

1,0

9,0

mOsm/L
NaCl PM: 58,4 g/mol

12

Tabla No. 2
Tubo N

Volumen de NaCl

Volumen de agua

Concentracin de

mOsm/L

0,45% (ml)

(ml)

NaCl (%)

NaCl PM: 58,4


g/mol

8,5

1,5

7,5

2,5

6,5

3,5

6.0

4,0

5,5

4,5

5,0

5,0

4,5

5,5

4,0

6,0

3,5

6,5

10

3,0

7,0

11

2,0

8,0

12

1,0

9,0

Tabla No. 3
Tubo N

Volumen de NaCl

Volumen de agua

Concentracin de

mOsm/L

3% (ml)

(ml)

NaCl (%)

NaCl PM: 58,4 g/mol

8,5

1,5

7,5

2,5

6,5

3,5

6.0

4,0

5,5

4,5

5,0

5,0

4,5

5,5

4,0

6,0

3,5

6,5

10

3,0

7,0

11

2,0

8,0

12

1,0

9,0

13

Tabla No. 4
Tubo N

Volumen de NaCl

Volumen de agua

Concentracin

mOsm/L

10% (ml)

(ml)

de NaCl (%)

NaCl PM: 58,4 g/mol

8,5

1,5

7,5

2,5

6,5

3,5

6.0

4,0

5,5

4,5

5,0

5,0

4,5

5,5

4,0

6,0

3,5

6,5

10

3,0

7,0

11

2,0

8,0

12

1,0

9,0

Clculo de la osmolaridad de cada tubo de ensayo:


Una vez obtenidas las lecturas espectrofotomtricas de cada tubo de ensayo, se puede

calcular ahora la osmolaridad de cada uno de ellos.


Se ha determinado que una solucin 1 Molar (1 mol/L) de NaCl ejerce una osmolaridad
de aproximadamente 2000 mOsm/L (2 Osm/L). Por otra parte es sabido que el peso molecular
del NaCl es de 58,4 g/mol. Entonces:
1 mol/L de NaCl ejerce un efecto osmtico de 2000 mOsm/L (2 Osm/L)
y 1 mol de NaCl equivale en masa a su peso molecular en gramos a 58,4 g los cuales
ejercen un efecto osmtico de 2000 mOsm en un litro de agua

Una solucin de 1% de NaCl, que es la concentracin de la solucin inicial, tendr 1 g de


NaCl en 100 ml de agua; para equiparar este valor de concentracin a osmolaridad, lo
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expresaremos primeramente a 1000 ml de solucin ya que esa es la unidad en la que se

expresa la osmolaridad (OSMOL/LITRO) (en un litro hay 1000 ml):

1 g NaCl

100 ml

1000 ml

X = 10 g NaCl
58,4 g NaCl

ejercen efecto osmtico de 2000 mOsm/L

10 g NaCl

ejercern un efecto osmtico de X (Osm/L)

Resolviendo la operacin se obtiene que:


X = 342 mOsm/L (esta es la osmolaridad de la solucin inicial)

Hacer los clculos de la misma manera para cada uno de los tubos con las tres soluciones.
Posteriormente discutir con su instructor(a) qu tipo de solucin tiene en cada tubo
(isotnica, hipertnica o hipotnica).

Cmo calcular ahora el porcentaje de hemlisis en cada tubo de ensayo:


Recuerde que preparamos un tubo de ensayo marcado como tubo control y que slo

contena agua destilada (solucin muy hipotnica); se le agregaron dos gotas de sangre; pues
en ese tubo ocurri, y as lo tomaremos, el 100% de hemlisis. A ese tubo tambin se le hizo
lectura del sobrenadante en el espectrofotmetro. Esa lectura origin un valor.
Entonces: para calcular el porcentaje de hemlisis en el tubo No.1 de cada solucin salina
procederemos as:
Si el tubo control representa

100 % hemlisis

Y este tubo control origin una lectura en el espectrofotmetro de XX unidades,


reformulamos lo anterior as:
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Lectura del tubo control

100 % hemlisis

Lectura del tubo No. 1

? %

hemlisis

Resolviendo la regla de tres, obtenemos el valor del porcentaje de hemlisis en el Tubo No. 1.
Aplique esta simple regla de tres a cada uno de los tubos de cada solucin salina y hallar el
porcentaje de hemlisis en cada uno de ellos.

Tabla No. 4
Tubo
N

D.O
NaCl
0,2%

%
HEMLISIS

D.O
NaCl
0,45%

%
HEMLISIS

D.O
NaCl
3%

%
HEMLISIS

D.O
NaCl
10%

%
HEMLISIS

1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11

12

D.O: Densidad ptica o absorbancia leda por el espectrofotmetro.


Lectura de D.O del Tubo control (agua destilada) = __________________

16

4.-ELABORACIN DE LA CURVA DE FRAGILIDAD OSMTICA:

Utilizando de preferencia una hoja de papel milimetrado, graficar los siguientes

parmetros biofsicos:
-Porcentaje (%) de Hemlisis en el eje de las ordenadas (Y).
-Porcentaje (%) o concentracin de solucin salina o nmero de tubo en el eje de las abscisas
(X).
Recordar que el porcentaje de solucin salina vara del tubo 1 al tubo 12
-Proceda a graficar cada valor obtenido.

% Hemlisis

Nmero de Tubo

10

11

12
17

Obtenga la Curva de Fragilidad uniendo los puntos graficados. Determine a partir de la


curva el tubo o porcentaje de solucin salina en la cual ocurre o sucede el 50% de hemlisis.
Este ser el valor de Fragilidad Osmtica Promedio.

Figura No. 1
Curva Normal de Fragilidad Osmtica de los eritrocitos

5.-DISCUSIN DE LOS RESULTADOS:


.-Los parmetros a tener en cuenta para evaluar los resultados son:
Forma y desplazamiento de la curva respecto a la curva basal.
Fragilidad Osmtica Promedio o concentracin de la sal en la que se produce el 50 % de
hemlisis.
Resistencia Globular Mnima: Concentracin de la sal en la que se inicia la hemlisis.
Resistencia Globular Mxima: Concentracin de la sal en la que se produce la hemlisis
total (100%).

.-Tips de inters general:


En los sujetos normales se obtiene una curva de fragilidad osmtica tipo sigmoidea
simtrica. El extremo inferior de la curva corresponde a la fase l o comienzo de la hemlisis, la

18

porcin media o fase II (fase exponencial) corresponde a la salida de hemoglobina en gran


cantidad y el extremo superior o fase III a la hemlisis total. Un aumento de la fragilidad
osmtica del eritrocito desplaza la curva hacia la izquierda, mientras que una disminucin de la
fragilidad la desplaza hacia la derecha.
Normalmente, se obtiene un 10 % de hemlisis a una concentracin de solucin salina
que vara de 0,48% a 0,44% (promedio: 0.45%) mientras que el 90 % del hemlisis se produce a
una concentracin que va de 0,40 % a 0,30 % (promedio: 0,35%).
La fragilidad osmtica de los eritrocitos se incrementa en algunos padecimientos como
la esferocitosis congnita, anemia hemoltica adquirida, enfermedad hemoltica del recin
nacido debido a la incompatibilidad sangunea ABO y puede estar disminuida en la talasemia,
anemia de clulas falciformes, ictericia y anemia por deficiencia de hierro.

BIBLIOGRAFA CONSULTADA
.- Frumento AS. Biofsica. Tercera Edicin. Editorial Mosby/Doyma; 1995.
.- Guyton A, Hall J. Tratado de Fisiologa Mdica. Decimosegunda Edicin. Editorial ElsevierSaunders; 2011.
.- http://www.fundabiomed.fcs.uc.edu.ve/inicio_montoreano.html
.- Ganong W. Fisiologa Mdica. 24va Edicin. Editorial Mc Graw Hill; 2012.

CONCLUSIONES DE LA ACTIVIDAD PRCTICA:


A continuacin, y con sus propias palabras proceda a elaborar las principales conclusiones
obtenidas de la experiencia efectuada en el laboratorio. Esta actividad la puede realizar
posterior a la prctica. Reflexione y piense sobre los datos obtenidos y la importancia de las
experiencias efectuadas. Para su futuro profesional: Cul sera la importancia de tales
experiencias?, Qu aplicabilidad tendran para Ud?
_____________________________________________________________________________

19

GUIA DE AUTOEVALUACIN POST-LABORATORIO


.- Defina smosis y d ejemplos de su rol en el movimiento de lquidos entre compartimientos
corporales.
.- Por qu los eritrocitos incrementan su volumen e inclusive son hemolizados, cuando son
colocados en una solucin de 0,2% de NaCl?
.- Qu es fragilidad osmtica y cul fue la encontrada por Ud en la actividad prctica?
.- Qu ocurrira si para la experiencia prctica de hoy en lugar de NaCl se hubiese utilizado
Al2(SO4)3? La curva de fragilidad osmtica se desplazara a la derecha o a la izquierda?
Justifique su respuesta.
.- Una solucin salina que es isotnica para eritrocitos es necesariamente isotnica para otro
tipo de clulas?
.- Cul ser la presin osmtica ejercida por una solucin de glucosa la cual tiene la misma
osmolaridad de una solucin de KCl 0,75 M, tomando en cuenta que ambas soluciones se
encuentran a 30C?
.- Diferenciar entre una lista de soluciones, cuya composicin se especifique, las que son
isotnicas, hipertnicas o hipotnicas respecto al plasma sanguneo.
.- Dada una serie de valores de porcentaje de hemlisis y de osmolaridad de las soluciones,
construir una grfica que permita deducir la fragilidad osmtica del eritrocito e identificar la
que muestre la mxima fragilidad globular.
.- Cul ser la osmolaridad de una solucin que contiene 110 mg/dl de glucosa?
.- Cul es la osmolaridad de una solucin que contiene 142 mEq/L de Na+, 110 mEq/L de Cl- y
28 mEq/L de HCO3-?

20

PRCTICA N

NATURALEZA BIOFSICA DEL POTENCIAL DE REPOSO Y


DEL POTENCIAL DE ACCIN CELULAR

PRESENTACIN

La presente gua constituye la segunda actividad prctica (Unidad VIII) de la asignatura


Fisiologa I del Programa de Medicina. Por medio de esta actividad se pretende que el
estudiante comprenda en un sentido amplio e integral, la aplicabilidad de los conceptos
biofsicos relacionados con la generacin del potencial de membrana en reposo y los
mecanismos involucrados en el desencadenamiento del potencial de accin celular.

INTRODUCCIN
La biofsica es una rama de las ciencias bsicas que integra los principios de la biologa y
los principios de la fsica, a modo tal de profundizar en la comprensin de la funcin de la
fisiologa celular y la fisiologa de sistemas. Es por esta razn que la biofsica se ha convertido en
una herramienta fundamental para el estudiante de fisiologa, dado que a travs de la
aplicacin de los principios que ella genera es posible predecir y comprender la funcin del
cuerpo humano en trminos matemticos, fsicos, qumicos y biolgicos.
Esta prctica permitir al estudiante de fisiologa humana visualizar de manera prctica
los principios biofsicos que rigen la naturaleza del potencial de reposo celular y el potencial de
accin de clulas excitables del cuerpo humano, tales como neuronas y clulas musculares, a
travs del empleo de simuladores fisiolgicos.
En el siglo XXI, absolutamente nadie puede negar que los organismos vivientes que
habitan este nuestro planeta, funcionamos con base a fenmenos electromagnticos y, que el
mismo es, la causa de una gran diversidad de notables fenmenos naturales visibles o no al ojo
humano. La electricidad generada dentro de nuestro organismo sirve para el control y
operatividad de nervios, msculos y rganos. Esencialmente, todas las funciones y actividades
del cuerpo humano involucran el uso de la electricidad de alguna u otra manera. La actividad
21

cerebral y cardaca, por ejemplo, es esencialmente elctrica; todas las seales nerviosas desde
y hacia el cerebro se basan en el flujo de corrientes elctricas. El cerebro, considerado un
centro computacional integrador y procesador de seales, recibe seales externas e internas
y elabora posteriormente una respuesta adecuada. La contraccin muscular como respuesta de
salida, por ejemplo, tambin est basada en seales elctricas. Toda la informacin es
transmitida como seales elctricas a lo largo de las fibras nerviosas. Y qu decir del
pensamiento humano; probablemente en pocas dcadas los cientficos tendrn que admitir
que su esencia es electricidad pura, al igual que el universo en el cual estamos sumergidos.
Para llevar a cabo y en forma integral sus funciones, el cuerpo humano genera muchas
seales elctricas, las cuales son el resultado de la accin electroqumica de diversos tipos
celulares y, lo ms importante, estas seales elctricas pueden ser apropiadamente detectadas
y registradas. Midiendo estas seales en forma selectiva, se convierten en informacin clnica
de primera mano acerca de la funcionalidad de un rgano en particular. Hoy da, con el avance
de la fsica, bioingeniera, informtica, ciberntica y de los sistemas de informacin, podemos
registrar con mucha precisin, seales elctricas provenientes del cerebro, registrados en un
electroencefalograma (EEG); del corazn, registrados como un electrocardiograma (ECG); de los
msculos esquelticos, el electromiograma (EMG); de la retina, un electroretinograma (ERG);
de los msculos oculares, un electrooculograma (EOG) y electro-gustometra (EGM), para la
exploracin del gusto.

El Potencial de Membrana en Reposo


En clulas excitables (clulas nerviosas y musculares) la diferencia de potencial
mantenida a travs de la membrana celular, en ausencia de cualquier estmulo, se denomina
potencial de reposo y se dice que la clula se halla en reposo.
Las membranas celulares estn sometidas a una diferencia de potencial elctrico
existente entre las superficies interna y externa de las mismas. Esta diferencia de potencial es
debida a la presencia de iones (+) y (-) distribuidos entre ambos compartimientos intra y
extracelular. Se ha calculado que el valor del potencial de membrana en reposo de una clula
tipo neurona promedia los -70 mV, o puede llegar a ser de -90 mV en una clula de Purkinje
cardaca. Esta diferencia de potencial crea sin duda, un campo elctrico importante entre
ambas caras de la membrana celular. Esto significa que, el potencial en el interior de la clula,

22

es -70 mV ms negativo que el potencial del espacio extracelular.

Pero, Por qu ese valor de potencial de membrana en reposo en la clula?...


Qu lo origina?... Qu factores estn involucrados?...

El potencial de reposo de la membrana es generado en virtud de que la membrana


celular presenta permeabilidades diferenciales a los distintos iones (bsicamente Na+, K+ y Cl-),
as como a la distribucin asimtrica de estos iones entre los dos compartimientos intra y
extracelular. Hoy da se admite que la principal fuente del potencial de reposo es la distribucin
desigual de iones inorgnicos como el Na+ y el K+, y particularmente de la distribucin del ion
K+ a ambos lados de la membrana. De igual forma, se ha descrito que la bomba o ATPasa de NaK, al ser de carcter electrognica, contribuye mnimamente al establecimiento del potencial de
membrana en reposo celular.

Permeabilidades relativas de los distintos iones. Ecuacin de Goldman-Hodking-Katz


Como se ha mencionado, los principales iones sometidos a gradiente qumico, capaces
de difundir a travs de la membrana plasmtica son el Na+, K+ y Cl- los cuales se hallan
distribuidos asimtricamente entre el interior y exterior de la membrana. Bajo condiciones de
equilibrio, cada ion va a tender a llevar el potencial de membrana a su propio potencial de
difusin o de equilibrio. De la misma forma, la diferencia de concentracin es el factor
preponderante en la determinacin de la magnitud del potencial de equilibrio de un ion el cual
est determinado por la ecuacin de Nernst:
a 37 C
Ce: concentracin extracelular del ion
Ci: concentracin intracelular del ion

Como se ha determinado electrofisiolgicamente, en clulas excitables de mamferos la


situacin es ms compleja a causa de la presencia de estos iones, con 3 distintos coeficientes
de permeabilidad. Sin embargo, como la membrana plasmtica no es permeable por igual a
todos los iones (la permeabilidad del K + en reposo es 50 veces la del Cl- y cerca de 100 veces la
del Na+), no todos participarn de igual forma en el establecimiento del potencial de membrana

23

en reposo; los iones ms difusibles sern los que ms participen.


La ecuacin que se desarroll para calcular el potencial de membrana en reposo,
considerando las permeabilidades relativas de los 3 iones mencionados y las concentraciones
relativas de cada uno de ellos en los compartimientos extra e intracelular, fue deducida por
David Goldman, Alan Hodgkin y Bernard Katz, y se la conoce como la ecuacin de GoldmanHodgkin-Katz:

Ya que la permeabilidad al Na+ (PNa+) es relativamente baja en situacin de reposo con


relacin a la permeabilidad al K+ (PK+), el Na+ contribuye poco al establecimiento del valor del
potencial en reposo (Vm). Se puede predecir a partir de la ecuacin de Goldman que, cambios
en la concentracin externa de Na+ producirn muy ligeros cambios en el potencial de
membrana en reposo y ya que la (PK+) es mayoritaria en esas condiciones, al modificarse las
concentraciones de K+ extracelular en el sentido de un aumento de su concentracin, el
potencial de membrana en reposo (Em) aumentar, es decir, tender ms hacia la
electropositividad en el interior celular.
La contribucin de los iones Cl- al potencial de membrana en reposo, puede ser
prcticamente despreciable, ya que este ion tiene una permeabilidad muy baja en relacin al
K+, y por el contrario, el Cl- ajusta sus concentraciones en los medios extra e intracelular, de
acuerdo con el nivel de potencial existente en la membrana celular, mostrando una tendencia
hacia la no movilidad. Adems se debe tener en cuenta que, para la generacin del potencial de
membrana en reposo, se requiere de un nmero muy pequeo de cargas elctricas y que las
concentraciones totales de cationes y aniones es similar en todos los sitios de la clula
(tendencia a la electroneutralidad), a excepcin de las superficies interna y externa de la
membrana plasmtica.

24

El Potencial de Accin Celular


Los tejidos excitables propagan, transmiten su informacin a travs de seales elctricas
que en lo sucesivo denominaremos el potencial de accin. La comprensin de los mecanismos
inicos y biofsicos involucrados son esenciales para entender los mecanismos neurobiolgicos
del funcionamiento normal del tejido muscular (cardaco, estriado esqueltico y liso). Un
potencial de accin o tambin llamado impulso elctrico, es una onda de descarga elctrica que
viaja a lo largo de la membrana celular. Los potenciales de accin se utilizan en el cuerpo para
llevar informacin entre unas clulas y otras.
El potencial de accin una vez generado, no se mantiene en un punto de la membrana
plasmtica, sino que viaja a lo largo de la membrana de manera unidireccional. Puede
desplazarse a lo largo de un axn a mucha distancia, por ejemplo, transportando seales desde
el cerebro hasta el extremo de la mdula espinal.
Los potenciales de accin se desencadenan cuando una despolarizacin inicial alcanza
un umbral. Este potencial umbral vara, pero normalmente est en torno a -55 a -30 milivoltios
sobre el potencial de reposo de la clula, lo que implica que la corriente de entrada de iones
Na+ supera la corriente de salida de iones K+. El flujo neto de carga positiva que acompaa los
iones Na+ despolariza el potencial de membrana, desembocando en una apertura de los
canales de Na+ dependientes de voltaje. Estos canales aportan un flujo mayor de corrientes
inicas hacia el interior, aumentando la despolarizacin en una retroalimentacin positiva que
hace que la membrana llegue a niveles de despolarizacin elevados.
El umbral del potencial de accin puede variar cambiando el equilibrio entre las
corrientes de Na+ y K+. Por ejemplo, si algunos de los canales de Na+ estn inactivos,
determinado nivel de despolarizacin abrir menos canales de sodio y aumenta as el umbral
de despolarizacin necesario para iniciar el potencial de accin. Esta es el principio del
funcionamiento del periodo refractario (que puede ser relativo o absoluto).
Los potenciales de accin son muy dependientes de los equilibrios entre iones Na+ y K+
(aunque hay otros iones que contribuyen minoritariamente a los potenciales, como el Ca++ y/o
Cl-), y por ello los modelos se hacen utilizando slo dos canales inicos transmembrana: un
canal de Na+ dependiente de voltaje y un canal de K+ pasivo. En la presente actividad prctica
se trabajar con 3 iones: Na+, K+ y Cl-.
25

1.- OBJETIVO GENERAL:


Identificar la naturaleza inica y elctrica del potencial de reposo celular y del potencial
de accin a travs del empleo de dos simuladores fisiolgicos de acceso libre.

2.- OBJETIVO TERMINAL:


Al finalizar la actividad prctica el estudiante estar en capacidad de identificar los
factores fisicoqumicos que afectan el potencial de reposo celular de una clula excitable, as
como tambin la naturaleza inica y elctrica del potencial de accin.

3.- MATERIALES Y EQUIPOS NECESARIOS PARA LA PRCTICA:


Programas simuladores en software libre, laptop, pantalla de proyeccin.

26

PARTE I

USO DEL SIMULADOR MACROMEDIA FLASH PLAYER


POTENCIAL DE REPOSO
Para cada ion (p. ej. K+, Na+ y Cl-) usted encontrar tres pasadores (ver Fig. No. 1). Cada
uno de ellos permite activar la posibilidad de modificar varias condiciones fsico-qumicas que
cambiarn el potencial de equilibrio para cada ion o el potencial de reposo celular mediante la
aplicacin de la ecuacin de Nernst o la ecuacin de Goldman respectivamente (revise su
bibliografa para ms detalles respecto al principio de estas ecuaciones). Si emplea la ecuacin
de Nernst, solo podr tener uno de los pasadores activos a la vez (para el ion K+, Na+ Cl-), sin
embargo, si emplea la ecuacin de Goldman, el simulador le permitir manipular todas las
variables de los tres iones de manera simultnea (razone por qu razn el simulador permite
realizar esta accin de esta manera).

Concentraciones Inicas
Al activar cualquiera de los tres pasadores, ste le permitir controlar las
concentraciones intra y extracelulares del ion que usted est manipulando, las cuales pueden
ser modificadas en un rango que oscila entre 1 y 600 mM, respectivamente (ver Fig No. 1). Para
modificar estas concentraciones inicas, lo nico que usted tendr que hacer es arrastrar con el
ratn de la computadora el indicador de concentracin inica hasta la nueva concentracin que
Ud desee ajustar. Adicionalmente, en el lado derecho de la pantalla del simulador Ud
encontrar una casilla que indicar en tiempo real el valor de potencial de equilibrio inico o de
reposo celular en funcin del caso que est analizando.
Este simulador le permitir iniciar su experiencia prctica con valores de
concentraciones inicas que simularn de manera parcial las caractersticas del axn del
calamar gigante.

Permeabilidad de Membrana
Un tercer control que usted encontrar en cada pasador es el que ajusta la
permeabilidad del ion a la membrana celular (Px). Este valor puede ser ajustado de manera

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arbitraria en un rango que oscila entre 1 y 10.000, sin embargo, este control slo estar
funcional cuando usted active la ecuacin de Goldman. (Podra explicar por qu no se puede
controlar esta variable cuando trabaja en el modo de ecuacin de Nernst?) (ver Fig No. 1).
Formalmente, las unidades de permeabilidad de la membrana a un ion son en cm/seg y en el
caso nuestro, este valor reflejar el flujo de conductancia neta de las especies inicas en
cuestin.

Temperatura
Adicionalmente en el simulador Ud encontrar un control que le permitir modificar la
temperatura. El valor indicado est expresado en C, sin embargo en la ecuacin de Nernst o
Goldman el simulador automticamente re-expresar la temperatura en grados Kelvin. (Podra
usted indicar a que se debe esto?). El simulador tambin le permitir forzar las condiciones a
una temperatura constante de 37 C. Para modificar la temperatura a la cual va a ocurrir el
experimento simulado, Ud deber utilizar su ratn y desplazar el indicador de temperatura
hasta una nueva posicin de temperatura que usted desee. En la parte inferior del programa,
Ud tambin podr observar una ventana que representar el movimiento cintico del ion o los
iones presentes en la clula hipottica, el cual se modificar de manera directamente
proporcional en funcin de la temperatura que usted le asigne al mismo (Ver Fig. No. 2).

Constantes R y F
R es la constante para los gases, cuyo valor es de 8,314 J.K-1.mol-1.
F es la constante de Faraday (la cantidad de cargas elctricas elementales que hay en un
mol de electrones) y esta tiene el valor de 96.485 coulombios.mol-1.
Manejando todas estas variables, usted podr observar que el simulador de manera
instantnea calcular el potencial de equilibrio para cada uno de los iones si Ud tiene activa la
funcin de ecuacin de Nernst o le presentar el potencial de reposo celular terico si Ud tiene
activa la funcin de ecuacin de Goldman en su simulador. Este clculo usted lo encontrar en
el lado derecho superior de la pantalla de su simulador (ver Fig. No. 2).

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Registro en tiempo real del


potencial de reposo celular.

Pasador 1

Pasador 2

Pasador 3

Figura No. 1
Aspecto general de la pantalla inicial del simulador para registro del potencial de membrana
celular, aplicando la ecuacin de Nernst o la ecuacin de Goldman (en este caso est activo el
modo ecuacin de Goldman). Ntese que el Pasador 1 permite controlar las
concentraciones intracelulares de potasio [K+]i as como tambin las concentraciones
extracelulares para potasio [K+]o. De la misma manera, el Pasador 2 permitir controlar las
concentraciones del ion Na+ y el Pasador 3 para el ion Cl-

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Ecuacin de Nernst y clculo del potencial de


equilibrio para el in.

Pasador activo.
Control de
concentracin de
+
Na .

Control de la
temperatura del
fenmeno.

Movimiento cintico de los iones Na y


potencial de equilibrio.

Figura No. 2
Simulador activo en el modo de Ecuacin de Nernst. Ntese que slo est activo un pasador
(el que controla al ion Na+ en este caso) y no est habilitada la funcin de control del
coeficiente de permeabilidad para este ion (PNa+). El simulador de manera automtica activa la
ecuacin de Nernst y presenta su potencial de equilibrio en funcin de las concentraciones
inicas del sodio intra y extracelular y la temperatura

30

EJERCICIOS PRCTICOS CON EL SIMULADOR DE


POTENCIAL DE REPOSO CELULAR
Luego que se haya familiarizado con el uso de este simple pero prctico simulador para
el clculo del potencial de equilibrio para cada ion y para el clculo del potencial de reposo
celular terico mediante el uso de la Ecuacin de Nernst y la Ecuacin de Goldman
respectivamente, Ud deber seguir los siguientes ejercicios en su laboratorio y, posteriormente,
analizar cada uno de los fenmenos observados.

Aplicacin de la ecuacin de Nernst

Ejercicio 1 - Usando el simulador


Una vez iniciada la ejecucin del simulador, observe cual es el potencial de equilibrio
para cada uno de los iones (K+, Na+ y Cl-) (debe estar la temperatura ajustada a 37 C y activa la
ecuacin de Nernst en el simulador). Para observar el potencial de equilibrio de cada ion, Ud
deber ir activando cada uno de los tres pasadores. Anote sus observaciones y discuta las
diferencias encontradas para cada uno de ellos.

Ejercicio 2 - Efecto de la temperatura Hipertermia


Activando nuevamente el pasador para el ion K+, ajuste la temperatura del simulador a
40 C (imagine Ud un estado febril en un paciente). Qu observa en la cintica y el potencial
de equilibrio para el ion? Explique la razn de este cambio comparndolo con el estado inicial.
Repita la misma experiencia para los otros iones.
Vuelva a realizar este mismo experimento para cada ion incrementando la temperatura
en esta ocasin a 100 C y observe las diferencias encontradas en relacin al caso previo. Este
ltimo experimento es irreal en trminos fisiolgicos, podra decir la razn del porqu de esta
afirmacin?
31

Ejercicio 3 - Efecto de la temperatura Hipotermia


Active el pasador para el ion K+ y en esta ocasin descienda la temperatura a 15C
(imagine un estado de hipotermia en el paciente). Anote sus observaciones. Repita la misma
experiencia para los otros dos iones (si desea, puede realizar el mismo experimento
descendiendo la temperatura a 0C). Discuta las diferencias encontradas.

Ejercicio 4 - Cambios en la concentracion inica extracelular


Colocando nuevamente el pasador para el ion K+, habilite ahora el simulador en la
funcin de ecuacin de Nernst a 37C. Observe que el simulador cambia la expresin
matemtica empleada. Podra discutir a qu se debe esta diferencia?
Ahora reduzca la concentracin extracelular del ion K+ a 2 mM (Hipopotasemia). Qu
sucede con el potencial de equilibrio para este ion? Discuta su observacin.
Seguidamente, incremente la concentracin extracelular del ion a 20 mM
(Hiperpotasemia). Qu sucede en el experimento? Compare sus resultados con respecto a la
experiencia previa. Analice las consecuencias fisiolgicas de cambios en la concentracin
extracelular de este ion para el potencial de reposo celular de una clula excitable.
Ahora active el pasador para el ion Na+ y descienda la concentracin extracelular a 50
mM (Hiponatremia). Anote sus resultados. Seguidamente incremente la concentracin
extracelular de Na+ a 130 mM (Hipernatremia). Anote sus resultados. Podra discutir cules
podran ser las consecuencias fisiolgicas de alterar las concentraciones inicas extracelulares
del sodio considerando los casos analizados?
Repita esta experiencia para el ion Cl-. Qu observa en este caso respecto al potencial
de equilibrio del ion?

Ejercicio 5 - Cambio de la concentracin inica intracelular


Manteniendo el simulador a 37 C, active nuevamente el pasador al ion K+ y reajuste la
concentracin extracelular a 10 mM (observe como cambia nuevamente el potencial de
equilibrio para este ion).
32

Ahora Ud incrementar la concentracin intracelular del K+i a 150 mM. Anote sus
observaciones.
Active el pasador para el ion Na + y ajuste la concentracin extracelular al estado inicial
(100 mM). Aumente la concentracin de Na+i a 30 mM. Anote lo observado en la experiencia.
Repita el mismo procedimiento para el ion Cl-i. Anote sus observaciones.
Active nuevamente el pasador para el ion K+. Ajuste ahora la concentracin intracelular
a 40 mM y analice el potencial de equilibrio para este ion.
A continuacin active el pasador para el ion Na+, reduzca la concentracin de Na+i a 2
mM y observe lo que ocurre con el potencial de equilibrio. Analice y discuta lo observado.
Repita la misma experiencia para el ion Cl- ajustando previamente la concentracin extracelular
a 100 mM.
Activando el pasador para el ion K+ iguale las concentraciones intra y extracelulares.
Qu sucede con el potencial de equilibrio para el ion? De qu depende el potencial
electroqumico de un ion?

Aplicacin de la ecuacin de Goldman

Ejercicio 6 - Usando la ecuacin de Goldman


Ha llegado el momento de ver qu sucede cuando analizamos el potencial
electroqumico de una clula cuando se encuentra una poblacin heterognea de partculas
cargadas elctricamente a ambos lados de la membrana celular. Para realizar esto, lo primero
que deber hacer es activar la aplicacin de ecuacin de Goldman en su simulador. Esto lo
podr realizar activando la segunda pestaa que se encuentra en la esquina superior derecha
(contando de derecha a izquierda).
Podr notar que ha activado correctamente la ecuacin de Goldman porque se han
activado todos los pasadores para los iones K+, Na+ y Cl-, as como el coeficiente de
permeabilidad (Px) de cada uno de ellos. Tambin podr notar que ha cambiado la ecuacin
presentada y en la ventana cintica ahora se observan en constante movimiento tres clases de
partculas (correspondiente a los tres iones). Finalmente notar que al lado de la ecuacin de
Goldman habr un valor en milivoltios (mV) correspondiente al potencial terico de reposo

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celular (Em) el cual es distinto del potencial de equilibrio inico para cada uno de los iones
analizados (Ex). Podra decir a que se debe esta diferencia? Qu significa un potencial de
reposo celular con valor negativo para la clula? Cmo es la polarizacin de la membrana
celular?
Ahora deber asegurarse que las concentraciones inicas para el K+ sean de 100 mM
para el espacio intracelular y de 10 mM para el espacio extracelular. Tambin ajuste las
concentraciones inicas del Na+ y el Cl- en 100 mM para el espacio extracelular y de 10 mM
para el espacio intracelular.

Ejercicio 7 - Efecto de la temperatura sobre el potencial de reposo celular


Inicialmente Ud ajustar la temperatura a 37C y anotar el valor de potencial de reposo
celular terico.
Incremente la temperatura del simulador a 42C y anote el nuevo valor de potencial de
reposo celular. Compare este nuevo valor con el de 37C y discuta las diferencias encontradas.
Discuta si la clula se despolariza o hiperpolariza. Cmo estar la excitabilidad celular en un
paciente que presente esta temperatura?
Ahora descienda la temperatura a 15C y observe cmo se altera el potencial de reposo
celular. En esta situacin, cmo ser la excitabilidad celular?
Considera que los cambios observados para las dos temperaturas estudiadas (15C y
42C) son suficientes para generar cambios significativos en la funcin nerviosa del cuerpo
humano?

Ejercicio 8 - Efecto de la permeabilidad de un ion a la membrana celular


Antes de iniciar los experimentos de este ejercicio ajuste nuevamente la temperatura a
37C. Si coloca el simulador en funcin de ecuacin de Goldman a 37C notar que la ecuacin
presentada cambia. A qu se parece el cambio observado?
Habr notado que su simulador presenta diferentes valores de coeficientes de
permeabilidad para cada uno de los iones. Podra decir en funcin de los valores indicados,
cul de ellos presenta mayor permeabilidad a la membrana en estado de reposo? De qu
manera influye la permeabilidad de un ion en una clula en el establecimiento del potencial

34

de membrana celular?
Ajuste el PK+ a un valor de 10. Observe que ocurre con el potencial de membrana de la
clula. Cmo ser la excitabilidad celular bajo estas nuevas condiciones? Si observa el
potencial de equilibrio (EK) en esta situacin notar que no ha cambiado respecto a la condicin
experimental previa. Podra explicar por qu razn no cambia el potencial de equilibrio para
el K+ a pesar de que s cambia el potencial de membrana de la clula cuando se reduce el
coeficiente de permeabilidad?
Incremente ahora el PNa+ a un valor de 100 (sin alterar el PK+ anteriormente
modificado). Anote lo observado y discuta. Cmo ser la excitabilidad celular? Diga cmo ser
la polaridad de la membrana celular en esta circunstancia. Compare este resultado con el
fenmeno de potencial de accin y diga que analoga hay entre ambos.

35

PARTE II

USO DEL SIMULADOR HHSIM HODGKIN-HUXLEY

Este simulador que Ud tiene la oportunidad de manejar, al igual que el simulador que
usted emple en la seccin previa de la prctica, es til para facilitar la comprensin de la
funcin elctrica de clulas excitables y, en particular, de los fenmenos dinmicos que ocurren
en una clula excitable cuando sta ha recibido un estmulo elctrico apropiado capaz de
modificar el potencial de reposo celular.
Antes de continuar con un conjunto de actividades prcticas en esta segunda parte, Ud
deber aprender a manipular el simulador HHsim Hodgkin-Huxley por lo que es muy
importante que lea detenidamente este guion de instrucciones as como tambin cuente con
acceso a un computador de modo tal que pueda familiarizarse con la manipulacin del mismo.

Controladores del simulador


Una vez que se haya iniciado el programa, Ud observar dos trazados (ver Fig. No.3) que
tienen en comn la variable tiempo representado en milisegundos (msec) en el eje de las
abscisas, mientras que el trazado superior presenta en el eje de las ordenadas al potencial de
membrana en milivoltios (mV). El trazado inferior mostrar en el eje de las ordenadas unidades
arbitrarias, sin embargo, estas unidades sern modificadas y adaptadas en funcin del
fenmeno que usted desee analizar en el simulador.
En la seccin inferior izquierda (ver Fig. No. 3) encontrar dos botones de color violeta
rotulados como Stim1 y Stim2 los cuales son dos generadores de estmulos elctricos sobre
la superficie de la clula excitable hipottica que estamos analizando. Cuando Ud utilice alguno
de estos botones podr visualizar que la clula ha recibido un estmulo elctrico de manera
grfica observando una lnea violeta que es generada en el trazador superior del simulador.
Al lado derecho de los botones Stim1 y Stim2, podr encontrar tres botones de color
verde, mostaza y rojo, rotulados como Run, Nudge y Stop respectivamente (ver Fig. No.
3), los cuales sirven para controlar el desplazamiento de los trazadores. Si Ud presiona el botn
Run, observar que comenzarn a desplazarse unas lneas tanto en el trazador superior como

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en el inferior. Si presiona el botn Stop, las lneas que se dibujan en los trazadores se
detendrn inmediatamente. Por otra parte, si presiona el botn intermedio Nudge (traduce
empujn), observar que las lneas en los trazadores avanzarn nicamente 2 milisegundos
(msec), luego de lo cual se detendrn automticamente.
Finalmente, en la parte superior de los botones Run, Nudge y Stop, usted
encontrar tres pasadores (amarillo, verde y azul) (ver Fig. No. 3) los cuales le permitirn
indicar qu es lo que su trazador inferior mostrar en la simulacin. Note que el color de cada
pasador corresponde a un color de las lneas representadas en el trazador inferior. Sin prdida
de tiempo ajuste el pasador amarillo a la posicin de [g_Na(pS)] y el pasador verde a la
posicin [g_K(pS)]. El pasador azul lo ajustar a la posicin blank. Note cmo han cambiado
las posiciones de las lneas amarilla y verde a 0 pS para g_Na, 0 pS para g_K y la lnea
azul ha desaparecido del trazador inferior. En esta situacin, lo que Ud ha hecho es indicarle al
simulador que desea observar los valores de conductancia para los iones Na+ (g_Na) y K+ (g_K)
en tiempo real. Podra definir que es conductancia para un ion? Qu quiere decir pS?
Podra indicar de qu manera cambios en la conductancia inica modifican el potencial de
membrana celular?

Modificando parmetros experimentales


Los controles principales para modificar las variables de sus experimentos simulados los
encontrar en la seccin superior izquierda de la pantalla del programa (vea nuevamente la Fig.
No. 3). Notar que el primer botn (contando de izquierda a derecha) indica Membrane y si
lo presiona, el simulador generar una ventana nueva que le permitir modificar las
concentraciones inicas intra y extracelulares en miliMolar (mM) para los iones Na +, K+ y Cl(fjese en las relaciones de concentraciones indicadas para cada ion y diga si stas son normales
para un sistema celular real). En la misma ventana encontrar el control de la temperatura en
(C), la resistividad de la membrana (Rm) y la capacitancia de la membrana (Cm). Podra usted
definir Rm y Cm desde el punto de vista biofsico?
El segundo botn es Channels y al activar este botn aparecer una ventana que le
permitir modificar algunos parmetros de conductancia elctrica para canales inicos (Na+, K+
y Cl-) pasivos y activos. Podra decir qu diferencia hay entre estas dos clases de canales
inicos? Para los canales pasivos, el nico parmetro modificable es la conductancia en (S).

37

Para los canales activos (fast sodium y delayer rectifier), se desplegar una nueva ventana
que permitir ajustar las propiedades cinticas y elctricas para cada subunidad del canal de
Na+ voltaje-dependiente.
El tercer botn que usted encontrar es Stimuli y al activar el mismo una nueva
ventana permitir controlar las caractersticas de los estmulos elctricos tales como intensidad
y duracin, de los botones Stim1 y Stim2 previamente mencionados. Note que el
parmetro de estimulacin elctrica del botn Stim1 est preestablecido a un estmulo
simple de +10 nA de intensidad y 1 msec de duracin. Por otra parte, el botn Stim2 est
ajustado para generar un estmulo elctrico de -10 nA de intensidad y 2 msec de duracin.
Podra indicar que diferencia fisiolgica existe para una clula excitable (y en nuestro caso
para el simulador) que se aplique un Stim1 o un Stim2 con las caractersticas anteriormente
mencionadas? Qu estmulo de los anteriormente sealados espera usted que sea capaz de
generar un potencial de accin? Razone sus respuestas.
El cuarto botn Drugs le permitir aplicar a la clula excitable simulada cantidades
controladas en mM de Tetrodotoxina (TTX), Tetraetilamonio (TEA) o Pronasa. Podra usted
indicar de qu manera cada una de estas sustancias afecta la capacidad de generar un
potencial de accin?

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Controladores de variables experimentales

Trazadores

Botones
estimuladores
elctricos

Control de desplazamiento
de los trazadores

Pasadores para el control de


registro del trazador inferior
Figura No. 3

Vista general del simulador HHsim Hodgkin-Huxley. El mismo le permitir realizar registros de
potenciales de accin en tiempo real en funcin de la aplicacin de estmulos elctricos de tipo
despolarizantes o hiperpolarizantes. Adicionalmente usted podr modificar variables tales
como capacitancia o resistencia de la membrana, conductividad de canales inicos y
administracin de drogas que alteran la funcin elctrica celular de la clula hipottica.

39

EJERCICIOS PRCTICOS CON EL SIMULADOR DE


POTENCIAL DE ACCIN

Ejercicio 9 - Umbral de excitacin, estmulo despolarizante hiperpolarizante


Una vez est familiarizado con el uso del simulador HHsim Hodkin-Huxley, lo primero
que deber hacer es asegurarse que el trazador inferior est indicando los valores de
conductancia para el Na+ y para el K+, tal y como tuvo que haberlo ajustado en la seccin de
instrucciones previa. Active la ventana Stimuli y para el botn Stim1 colocar una
intensidad de 0 nA (cero). Cierre esta ventana, presione el botn Nudge y luego el botn
Stim1. Observe que sucede en los trazadores superior e inferior y anote sus observaciones.
Reajuste la intensidad del botn Stim1 de la misma manera que lo acaba de hacer
pero ahora incremntela a 1 nA. Presione el botn Stim1 y anote sus observaciones. Repita la
operacin incrementando en cada ciclo 1 nA la intensidad del estmulo hasta que logre generar
un potencial de accin. Responda lo siguiente Cul es el umbral de excitacin de la clula?
Qu se observ en los estmulos sub-umbrales? Qu observa respecto a los cambios de
conductancia para el Na+ y el K+ en este experimento? Podra correlacionar estos cambios de
conductancias con el potencial de accin observado? Identifique en el potencial de accin el
perodo de latencia.
Repita todo el procedimiento anterior utilizando ahora el botn Stim2 pero en esta
ocasin ajustar la intensidad del estmulo a valores negativos (llegue hasta -5 nA). Qu
observa con el potencial de membrana celular? Por qu en esta ocasin no es posible
generarse un potencial de accin? Podra correlacionar los cambios de conductancia inica
observadas con el cambio de potencial de membrana observado cuando se aplican los
estmulos elctricos negativos?

Ejercicio 10 - Efecto de la duracin del estmulo


Active la ventana de control de estmulo y ajuste la intensidad a 1 nA en el botn
Stim1 (esta intensidad permanecer constante en todo el ejercicio). Ahora ajuste la duracin
del estmulo a 1 msec y cierre la ventana. Presionar 6 veces de manera pausada el botn

40

Stim1 y anotar sus observaciones. Seguidamente incremente la duracin del estmulo en 1


msec y aplique nuevamente 6 estmulos elctricos. Repita la operacin de incrementar la
duracin del estmulo hasta que observe un potencial de accin. Cul fue la duracin mnima
necesaria del estmulo para generar un potencial de accin? A qu se debe este fenmeno?
Qu observ en el potencial de membrana celular en la medida que se incrementaba la
duracin del estmulo?

Ejercicio 11 - Sumacin de estmulos subumbrales


Ajuste la intensidad del Stim1 a 3 nA (estmulo subumbral) y 1 msec de duracin. En
este mismo botn ajuste la intensidad del segundo estmulo a 3 nA y 1 msec de duracin (debe
haber in intervalo inter-pulso de 1 msec). Cierre la ventana de control de estmulo y presione el
botn Stim1 (hgalo 4 veces de manera pausada). Anote sus observaciones. Por qu razn
dos estmulos subumbrales generan un potencial de accin?

Ejercicio 12 - Papel de los iones Na+ y K+ sobre el potencial de accin


Papel del Na+: Ajuste el botn Stim1 a un estmulo sencillo de 6 nA de intensidad y 1
msec de duracin (ya debera saber cmo se realiza esta operacin). Genere 3 potenciales de
accin.
Ahora active la ventana Membrane y reduzca la concentracin de Na+ extracelular
(Cout mM) a 220 mM (Hiponatremia) (observe cmo se modifica el E Na). Cierre la ventana
Membrane y genere 3 potenciales de accin. Qu diferencias observa en este potencial de
accin respecto al potencial de accin inicial? A qu se debe la diferencia encontrada?
Seguidamente reduzca la concentracin de Na+ extracelular a 50 mM, haga 3 rplicas y anote
sus observaciones. Discuta las diferencias encontradas comparando con los resultados previos.
Ajuste la concentracin extracelular de Na+ nuevamente a 440 mM y genere 3
potenciales de accin. Posteriormente incremente la concentracin del Na+ a 500 mM
(Hipernatremia) y genere 3 potenciales de accin. Compare las alturas de las espigas a 440 mM
y 500 mM del ion.
41

Repita la experiencia incrementando la concentracin extracelular del Na+ a 600 mM y


nuevamente analice la altura de la espiga. Por qu existe una dependencia de la
concentracin de Na+ extracelular y la altura de la espiga?
Papel del K+: Activando la ventana Membrane, presione el botn Reset para
restablecer las concentraciones inicas iniciales. Genere 3 potenciales de accin bajo estas
condiciones y seguidamente reduzca la concentracin de K+ extracelular a 10 mM
(Hipopotasemia). Observe como el potencial de membrana se reajusta inmediatamente. A
qu se debe este fenmeno? Analice los potenciales de equilibrio de este ion a 20 mM y 10
mM de concentracin extracelular. Genere 3 potenciales de accin en condiciones de
Hipopotasemia y anote sus observaciones. Por qu no es posible generar un potencial con un
estmulo supraumbral?
Restablezca las concentraciones inicas de K+ originales y genere 3 potenciales de
accin. Seguidamente incremente la concentracin de K+ extracelular a 25 mM
(Hiperpotasemia). Anote sus observaciones. Por qu razn la clula genera potenciales de
accin espontneos?

Ejercicio 13 - Accin de la Tetrodotoxina (TTX) sobre el potencial de accin


Restablezca los gradientes inicos de concentracin originales con el botn Reset y
asegrese que est el botn Stim1 ajustado para generar un estmulo simple de 6 nA de
intensidad y 1 msec de duracin. Ajuste el pasador azul que se encuentra en la parte inferior de
la pantalla de la posicin blank a la posicin I_Na (A). Este cambio agregar una lnea azul
al trazador inferior y la misma corresponde a la corriente transmembranal generada por el paso
de Na+ a travs de la misma. Genere 3 potenciales de accin (analice la corriente de Na+ y
discuta al respecto). Posteriormente active la ventana Drugs y para la droga TTX
(Tetrodotoxina) inhiba las corrientes de Na+ en un 10 %. Cierre la ventana Drugs y genere 3
potenciales de accin. Compare el aspecto general de los potenciales de accin en ambas
situaciones (sin inhibicin vs 10% inhibicin). Compare las conductancias inicas para el Na+ y el
K+ en ambas situaciones. Compare las corrientes de Na+ observadas. A qu se deben las
diferencias encontradas?

42

Ahora incremente el porcentaje de inhibicin de la corriente de Na+ al 20 %, genere 3


potenciales de accin y compare los resultados encontrados. Repita el procedimiento
inhibiendo la corriente de Na+ al 25 %. Compare y analice los resultados encontrados.
En funcin de los resultados hallados por Ud, analice el mecanismo de funcionamiento
de los canales de Na+ voltaje-dependientes. Cul compuerta de los canales de Na+ voltaje
dependientes estn bloqueados con la TTX?

Enlace electrnico para descargar o manipular el software de instruccin: software libre

http://www.nernstgoldman.physiology.arizona.edu/

BIBLIOGRAFA CONSULTADA
.- Frumento AS. Biofsica. Tercera Edicin. Editorial Mosby/Doyma; 1995.
.- Guyton A, Hall J. Tratado de Fisiologa Mdica. Decimosegunda Edicin. Editorial ElsevierSaunders; 2011.
.- http://www.fundabiomed.fcs.uc.edu.ve/inicio_montoreano.html
.- Ganong W. Fisiologa Mdica. 24va Edicin. Editorial Mc Graw Hill; 2012.
.- Randall D, Burggren W, French K. Eckert Animal Physiology. Quinta Edicin. Editorial W.H.
Freeman.

43

PRCTICA No.

ESTUDIO DE LOS REFLEJOS Y LA SENSIBILIDAD SOMTICA

PRESENTACIN

La presente gua constituye la tercera actividad prctica (Unidad IX) de la asignatura


Fisiologa I del Programa de Medicina. Por medio de esta actividad se pretende que el
estudiante conozca y describa en forma integral los mecanismos bsicos que participan en la
elaboracin de los reflejos en el hombre, sus mecanismos intrnsecos y sus respuestas
fisiolgicas.

1.- OBJETIVOS DE LA PRCTICA:


Al finalizar la prctica los alumnos sern capaces de:
.- Describir el circuito neuronal de los reflejos monosinpticos y polisinpticos.
.- Identificar la utilidad de estudiar los reflejos monosinpticos y polisinpticos en la prctica
clnica.
.- Obtener los principales reflejos de utilidad en la prctica clnica.
.- Enunciar el concepto de receptor.
.- Describir la representacin central de las vas sensoriales.
.- Identificar la va sensorial.
.- Identificar las poblaciones de receptores en las distintas partes del cuerpo humano.
.- Describir los principales mtodos de exploracin de las sensibilidades.

2.-MATERIAL REQUERIDO PARA LA EXPERIENCIA PRCTICA:


Martillos percutores, agujas finas o alfileres, escobillas, compas, envase con hielo, envase con
agua caliente, objetos de pesos diferentes, camilla clnica, sillas, marcadores, pizarra acrlica.

44

PARTE I

ESTUDIO Y EVALUACIN DE LOS REFLEJOS EN EL HOMBRE


3.- MANIOBRAS EXPERIMENTALES:
Por qu estudiar o evaluar los reflejos?
La evaluacin de los reflejos en el hombre permite detectar cualquier manifestacin de una
lesin a nivel del sistema nervioso. Constituye un mtodo objetivo de examen. Si evaluamos los
sistemas motor y sensitivo, stos tienen que estar ntegros, sanos; el arco reflejo debe
funcionar adecuadamente. De igual manera, si exploramos un grupo de msculos agonistas, en
forma indirecta estaremos evaluando un grupo de msculos antagonistas ya que se aplica en
este caso, la Ley de Inervacin Recproca de Sherrington, la cual nos dice que si por accin
refleja se contrae un grupo muscular flexor, simultneamente relajar el correspondiente grupo
muscular extensor y viceversa. Siempre la exploracin de los reflejos se debe asociar al
resultado del estudio de otras funciones del sistema nervioso. Es importante describir las bases
anatomo-funcionales: Un voluntario proceder a esquematizar en la pizarra el Huso
Neuromuscular y sus conexiones aferentes y eferentes con el SNC

Tcnicas y recomendaciones generales para explorar los reflejos en el hombre


El individuo a explorar debe estar cmodo y relajado. Se buscarn los reflejos en forma
simtrica para comparar los resultados; en condiciones normales las respuestas son simtricas.
Existen zonas bien precisas donde se debe aplicar el estmulo y a esa zona corresponde un
centro nervioso tambin localizado. Para buscar los reflejos se debe utilizar el martillo percutor
del cual existen varios modelos. Algunos traen incorporada una aguja y un cepillo pequeo para
explorar las zonas sensitivas. El martillo percutor tiene la punta de caucho y un mango
metlico. Se lo debe tomar con la mano, por su base y siempre percutir con suavidad la zona a
explorar.

45

3.a) EXPLORACIN DE REFLEJOS MONOSINPTICOS O MIOTTICOS


.-Exploracin del reflejo Orbicular de los Prpados:
a) Maniobra: colocndose detrs del paciente (para evitar el reflejo de
oclusin palpebral defensivo), percutir con suavidad la zona de la raz de la
nariz.
b) Respuesta a obtener: oclusin palpebral bilateral.
c) Segmento de Integracin: En la Protuberancia Cerebral. Va Receptora: V
par craneal (Nervio Trigmino); Va Efectora: VII par craneal (Nervio Facial).

.-Exploracin del reflejo Maseterino:


a) Maniobra: paciente con la boca ligeramente entreabierta, se le percute
directamente el mentn, interponiendo entre el martillo y el mentn el
dedo pulgar del explorador.
b) Cierre brusco de la boca por accin de los msculos maseteros y
temporales.
c) Segmento de Integracin: La Protuberancia Cerebral. Tanto la va receptora como efectora lo
forman ramas del Nervio Trigmino.

.-Exploracin del reflejo Bicipital:


a) Maniobra: percusin con el martillo de nuestro dedo pulgar
sobre el tendn del bceps con el antebrazo del sujeto en
semiflexin y semisupinacin.
b) Respuesta a obtener: flexin del antebrazo sobre el brazo.
c) Segmento de Integracin: C5-C6.

.-Exploracin del reflejo del Supinador Largo (Estiloradial):


a) Maniobra: percusin del estiloide radial con el antebrazo en
semiflexin y semisupinacin de 45o.
b) Respuesta a obtener: contraccin del supinador largo con flexin del
antebrazo.
c) Segmento de Integracin: C6

46

.-Exploracin del reflejo Tricipital:


a) Maniobra: percusin con el martillo del tendn del trceps por
encima del olecranon con el antebrazo en semiflexin.
b) Respuesta a obtener: extensin del antebrazo.
c) Segmento de Integracin: C7.

.-Exploracin del reflejo de los Pronadores (o cubital)


a) Maniobra: percusin con el martillo del estiloide cubital en su cara
dorsal con el antebrazo en semiflexin y semipronacin.
b) Respuesta a obtener: movimiento de pronacin.
c) Segmento de Integracin: C6, C7 y C8.

.-Exploracin del reflejo Rotuliano o Patelar (o del Cuadrceps):


a) Maniobra: con el sujeto sentado en la camilla con las piernas
colgando, se percute el tendn rotuliano.
b) Respuesta a obtener: extensin de la pierna.
c) Segmento de Integracin: L4 (L: segmento medular lumbar).

.-Exploracin del reflejo Aquleo (o del Trceps Sural):


a) Maniobra: con el sujeto arrodillado con los pies libres y en semiflexin dorsal, se percute el tendn de Aquiles.
b) Respuesta a obtener: flexin plantar del pie.
c) Segmento de Integracin: S1 (S: segmento medular sacro).

3.b) EXPLORACIN DE REFLEJOS POLISINPTICOS O NOCICEPTIVOS


.-Exploracin del reflejo Corneal:
a) Maniobra: Haciendo mirar al paciente al frente, tocar muy suavemente
la crnea con un trocito de algodn o un hisopo limpios, abordando la
zona lateralmente.
b) Respuesta a obtener: oclusin de ambos prpados y elevacin del
47

globo ocular.
c) Segmento de Integracin: Respuesta es bilateral. Centro de integracin a nivel del ncleo del
nervio facial (VII par craneal). Rama aferente: rama oftlmica del trigmino. Rama eferente:
nervio facial.

.-Exploracin del reflejo Cutneo Plantar:


a) Maniobra: Estimular el borde externo de la planta del
pie, siempre de atrs hacia adelante con un objeto
ligeramente agudo (una aguja o un alfiler).
b) Respuesta a obtener: flexin plantar de los dedos del
pie. Este reflejo da respuesta a partir de los 3 aos de
edad, o ms tarde an.
c) Segmento de Integracin: L5, S1, S2.

.-Exploracin del reflejo Cutneo-Abdominal:


a) Maniobra: con el sujeto en decbito dorsal (acostado), rozar la
piel del abdomen con un objeto agudo (ejemplo, un alfiler), en
tres zonas: superior (epigstrica), media (umbilical) e inferior
(hipogstrica).
b) Respuesta a obtener: contraccin de la zona de la pared
abdominal estimulada.
c) Segmento de Integracin: zona superior: D7-D8-D9; zona media:
D9-D10-D11; zona inferior: D11-D12 (D es: segmento medular dorsal).

Valor semiolgico de las alteraciones de los reflejos


Explorados los reflejos en el paciente, stos tienen valor como elementos de localizacin
topogrfica y que, unidos a hechos o hallazgos patolgicos, permite un diagnstico clnico.
Los reflejos pueden presentar las siguientes alteraciones:
a) Ser normales con un paciente totalmente funcional.
b) Estar disminuidos (hiporreflexia) o abolidos (arreflexia).
c) Estar exaltados (hiperreflexia)

48

Escala de gradacin de los reflejos

3.c) EXPLORACIN DEL TONO MUSCULAR


El tono muscular es difcil de medirlo cuantitativamente. Se requiere de cierta
experiencia previa. Normalmente el msculo ofrece una ligera resistencia a la movilizacin
pasiva. El paciente debe estar completamente relajado. Comience hablando de temas
generales con l. Inspeccione sus 4 miembros. Lo ms importante del examen es la resistencia
pasiva de los msculos a su manipulacin cuando estn relajados. Lo ideal es explorar los
msculos de las extremidades. Movilice las articulaciones suavemente al comienzo y luego con
mayor velocidad; podr notar una pequea resistencia a los cambios de posicin de los diversos
segmentos mioarticulares.

ESTUDIO DE LA SENSIBILIDAD SOMTICA EN EL HOMBRE


Toda informacin proveniente del entorno o medio ambiente que nos rodea es captada por los
receptores sensoriales ubicados en nuestro organismo. Los estmulos que excitan a los
receptores que se encuentran distribuidos por todo el organismo, y envan su informacin al
sistema nervioso central para procesarla e integrarla por distintas fibras nerviosas constituyen
la sensibilidad somtica. Cada receptor est diseado para responder a un tipo de estmulo.
Existen varias clasificaciones para los receptores sensoriales y cada una de ellas considera una
caracterstica del receptor o del estmulo.
49

1.- MANIOBRAS EXPERIMENTALES:

Recomendaciones generales: para la exploracin de este tipo de sensibilidades es

necesario explicar al paciente que se evaluarn en l una serie de sensaciones, y que no debe
alarmarse. No hay que sugerirle al paciente las maniobras a realizar ni las respuestas ya que
podra acarrear errores en los resultados. El paciente debe estar relajado, sentado o acostado.
La exploracin deber hacerse en forma simtrica.

1.1.- Exploracin de la Sensibilidad Exteroceptiva


Para la exploracin de este tipo de sensibilidad debemos recordar la distribucin por
metmeras (distribucin metamrica) de las aferencias nerviosas de tal forma que en los
miembros la exploracin la haremos en forma circular a los mismos y, en las zonas del trax,
abdomen y espalda en forma vertical o perpendicular a las lneas de los dermatomas.
.-Para explorar la sensibilidad tctil se puede usar la yema de nuestro dedo, un trozo de
algodn o un hisopo, un pincel suave, pues el estmulo debe ser suave y delicado.
.-Para explorar la sensibilidad trmica se explora con dos tubos de ensayo, uno conteniendo
agua tibia y el otro agua fra.
.-Para explorar la sensibilidad dolorosa se puede emplear la punta de un alfiler o aguja.

1.2.- Comentar la estructura y funcin del rgano Tendinoso de Golgi con los estudiantes

50

GUA DE AUTOEVALUACIN POST-LABORATORIO


.- Qu se entiende por estmulo?
.- Qu es un reflejo?
.- Mediante un dibujo, esquematice un arco reflejo e indique sus elementos.
.- Haga una clasificacin general de los receptores conocidos.
.- Explique por qu un sujeto siente en algunas ocasiones las dos puntas del comps y en otras
slo siente una.
.- Defina nocicepcin.
.- Seale la opcin verdadera:
El reflejo miottico:
a.

Tiene una funcin postural.

b.

Aumenta su actividad por la accin de las motoneuronas alfa.

c.

Produce una prdida del tono muscular.

d.

Es consecuencia de una respuesta muscular, al contraer el msculo ste responde


con un estiramiento.

.- Seale la opcin verdadera:


Un movimiento dirigido a un objetivo depende de:
a.

La seleccin del plan.

b.

El lugar que ocupa el cuerpo en el espacio.

c.

Su ejecucin.

d.

Todo lo anterior.

.-Seale la opcin verdadera:


Los rganos tendinosos de Golgi:
a.

Estn inervados por axones sensoriales Ia.

b.

Se encuentran en la unin del msculo y el tendn.

c.

Proporcionan a la mdula informacin sobre la longitud muscular.

d.

Son la nica fuente de aferencia propiceptiva desde el msculo.

51

GLOSARIO DE TRMINOS BSICOS


.-Reflejo: un reflejo es una respuesta predecible a un estmulo sensorial (sensitivo) especfico.
Los reflejos son involuntarios o procesos automatizados ya que ocurren sin que el individuo
piense en ello.
.-Estmulo: cualquier evento que puede desencadenar o generar una respuesta en el cuerpo
humano.
.-Arco Reflejo: es la ruta, la va para que pueda ocurrir un reflejo. Es un circuito neuronal.
Abarca comnmente el msculo, los nervios que inervan el msculo y las neuronas ubicadas en
la mdula espinal.
.-Sinapsis: es una estructura anatmica (ultraestructural) y en el cual ocurre la transmisin de la
informacin entre dos neuronas.
.-Transmisin Sinptica: es el evento de la transmisin de la seal la cual puede ser de
naturaleza qumica o elctrica.
.-Reflejo Monosinptico: el ms simple de los arcos reflejos. Slo tiene una sinapsis entre los
nervios aferentes sensoriales y los nervios eferentes motores.
.-Reflejo Polisinptico: es el ms complejo de los arcos reflejos ya que envuelve mltiples
sinapsis neuronales.
.-Sistema Motor Somtico: la musculatura somtica est inervada por las neuronas motoras
somticas del asta ventral de la mdula espinal. Las neuronas que inervan la musculatura distal
y proximal se encuentran en los engrosamientos cervical (segmentos espinales C3-T1) y lumbar
(segmentos espinales L1-S3) de la mdula espinal, mientras que las de la musculatura axial se
encuentran a todos los niveles.
.-Mdula Espinal: estructura cilndrica con sentido cfalo-caudal, es la porcin intrarraqudea
del sistema nervioso.
.-Potencial de Accin: lenguaje de sealizacin universal del sistema nervioso; es la corriente
elctrica que se genera y se transmite como informacin en una neurona.
.-Neurona: clula muy especializada y fundamental del sistema nervioso en los seres vivos.
.-Axn: proyeccin o proceso que emerge de una neurona. Generalmente es larga.
.-Dendrita: proyeccin o proceso que emerge de una neurona. Generalmente es corta.
52

.-Interneuronas: neuronas de asociacin. Pueden ser aferentes o eferentes.

.-Receptores: estructuras sensoriales que reciben o captan informacin del entorno.


.-Unidad Motora: es una estructura compuesta por la motoneurona y las fibras musculares que
inerva.
.-Tiempo de Latencia: perodo de tiempo que transcurre entre un estmulo y la obtencin de
una respuesta.
.-Tono Muscular: estado de tensin de los msculos (de origen reflejo) existente cuando estn
relajados, o lo que es lo mismo, es la resistencia pasiva al movimiento cuando el control
voluntario est ausente. Contribuye a los ajustes de la postura y de la actividad en general.

53

PRCTICA No.

SENSIBILIDAD ESPECIAL: LA VISIN


PRESENTACIN

La presente gua constituye la cuarta actividad prctica (Unidad XXIV) de la asignatura


Fisiologa I del Programa de Medicina. Por medio de esta actividad se pretende que el
estudiante comprenda los mecanismos neurofisiolgicos que intervienen en la captacin,
elaboracin, procesamiento e integracin de las seales que conducen a la visin en el ser
humano, as como evaluar su funcionalidad.

INTRODUCCIN
La visin es un sistema sensorial crucial en la relacin con nuestro entorno o mundo
exterior. La visin nos permite percibir la luz, la sombra, el color y la forma de la naturaleza. Hay
que acotar tambin que la percepcin por el sistema visual es un campo muy propicio para
desarrollar investigaciones experimentales; as, es posible intervenir en el estmulo del sistema
visual con la luz o hacerlo a nivel de receptores de la retina o trabajar con la transmisin de la
informacin desde los ojos a la corteza visual cerebral, entre otros. Las maniobras que se
presentan en esta gua prctica no persiguen contestar preguntas de actualidad cientfica, sino
sencillamente tienen una finalidad puramente didctica y dentro del estudio de la sensibilidad
especial se ha elegido la visin, porque el resultado de su experimentacin es ms objetivable,
y esto porque es a travs de ella que nos relacionamos con el mundo exterior percibiendo la
luz, la forma, los colores.
La visin se nutre de mltiples fuentes de informacin para interpretar el mundo que
nos rodea. As, el uso de dos ojos permite la visin binocular, con la cual podemos percibir la
distancia a la que se encuentra un objeto o la diferencia entre el movimiento de un pjaro y el
movimiento del fondo de matorrales sobre el que sita, nos permite distinguir al animal
portando una ramita.
Cmo se forma la imagen visual? Hay que recordar que es el estmulo que impresiona
la retina es la luz. La luz consta de ondas electromagnticas de determinadas longitudes de
54

onda y que se propaga por distintos medios. El cristalino se acomoda (porque puede alterar su
poder de refraccin) a fin de proporcionar una visin diferente cada vez. Si se mira a un objeto
a ms de 6 metros (objeto distante), los rayos de luz sern virtualmente paralelos entre s. Si el
poder del ojo es suficiente para proporcionar una imagen aguda, el punto lejano de visin
puede localizarse a unos 6 metros; ste es el punto ms cercano a partir del cual un objeto
puede ser focalizado sin necesidad de acomodacin del cristalino (recurdelo a 6 metros). Si
los rayos de luz son producidos por un objeto muy cercano (a menos de 6 metros), stos son
divergentes, o sea no son paralelos, y es necesario un mayor poder de refraccin (mayor
acomodacin del cristalino) para focalizarlos en la retina.
Aunque los detalles de la anatoma ocular no son objeto de la actividad prctica
presente, echemos un vistazo a lo ms importante en la Fig. No. 1.

1.- OBJETIVOS DE LA PRCTICA:


.- Describir los parmetros anatomofisiolgicos que intervienen en la percepcin de la luz,
color, sombra y forma.
.- Identificar desde el punto de vista fisiolgico los constituyentes del quebrado de Snellen.
.- Indicar los parmetros anatomofisiolgicos que intervienen en el estudio del campo visual.
.- Caracterizar la funcionalidad de la musculatura intrnseca y extrnseca del ojo humano.

2.- MATERIALES Y EQUIPOS NECESARIOS PARA LA PRCTICA:


Linternas de mano, campmetros visuales, cartas de Snellen, campmetro, apuntadores,
marcadores, pizarra acrlica.

3.- MANIOBRAS EXPERIMENTALES:


Aunque la exploracin netamente no forma parte del estudio de la fisiologa,
perteneciendo sta ms a la semiologa o exploracin clnica, cuando se examina el sentido de
la visin en un paciente, es importante explorar los globos oculares, siempre hacindolo en
forma simtrica; su ubicacin es importante dentro de la cavidad ocular. Puede presentarse una
protrusin de los globos oculares (uni o bilateral), o sea, un exoftalmos, o al revs, estar
hundidos dentro de la cavidad orbitaria lo que se llama enoftalmos. Se observa la simetra de
los ojos. Se explora visualmente la esclertica (el blanco de los ojos), la pupila, el iris.

55

Luego se procede a palpar con dos dedos y en forma alternativa, la tensin de los globos
oculares, que puede estar aumentada como en el caso del glaucoma, o disminuida como en el
coma diabtico y en toda deshidratacin severa.
Tambin se puede percibir la direccin de los globos oculares, que puede estar desviada
en uno o ambos ojos, caso del estrabismo, que se llama convergente o divergente segn se
acerquen o alejen entre s los globos oculares. Observe con detalle la crnea; pueden existir
ulceraciones u opacidades. El anillo blanco-grisceo cerca del limbo ocular, es muy frecuente en
los ancianos (el llamado arco senil). En las pupilas se examinan el tamao, la forma, la simetra,
y los reflejos fotomotor y de acomodacin. La miosis son las pupilas contradas y la midriasis
son las dilatadas.

Figura No. 1
Seccin esquemtica del ojo humano

3.1..-EXPLORACIN DE LA AGUDEZA VISUAL:


Qu es la agudeza visual?
Sencillamente es la capacidad del ojo para distinguir entre dos puntos cercanos entre s.
Nos permite percibir la forma y figura de los objetos con detalle.

Cmo se explora?
Mediante el uso de los Carteles o Cartas de Snellen (Fig. No. 2). Es una prueba que se
utiliza para determinar las letras ms pequeas que una persona puede leer en una tabla o

56

tarjeta estandarizada sostenida a una distancia de 6 metros (20 pies). Estn formados por filas
de letras que van de tamao ms grande a ms pequeo conforme bajamos la mirada. Cuanto
ms abajo logre ver ntido el paciente, mayor agudeza visual tendr.
Este examen se puede realizar en el consultorio del mdico, en una escuela, en un sitio
de trabajo o en cualquier otra parte. El paciente permanece sentado a una distancia de 6
metros de la tabla. Se deben retirar los anteojos o los lentes de contacto. Ambos ojos deben
permanecer abiertos y uno de ellos cubierto con la palma de la mano, con un vaso de papel o
con un trozo de papel mientras se lee en voz alta la lnea ms pequea de las letras que la
persona pueda leer en el cartel.
Si el paciente no est seguro de la letra, puede adivinar. Se repite el procedimiento con
el otro ojo. A la persona se le puede pedir que lea letras o nmeros de una tarjeta sostenida a
35 cm de la cara, con el fin de evaluar la visin cercana.
Cmo se representa o expresa el resultado?
Sencillamente como una fraccin: el llamado Quebrado de Snellen. Por ser un
quebrado, el nmero superior se refiere a la distancia entre el paciente y la tabla, la cual es
generalmente de 6 metros (20 pies en medida inglesa). El nmero inferior indica la distancia a
la que una persona con vista normal podra leer la misma lnea que la persona ley
correctamente. Por ejemplo, 20/20 se considera vision normal; 20/40 indica que la lnea que el
paciente ley correctamente a los 20 pies (6 metros) pudo ser leda por una persona con vision
normal a los 40 pies (12 m).

20/20 es la visin NORMAL


(el sujeto es emtrope: la imagen se forma normalmente sobre la retina)

Ejemplos:

Si la visin es 20/15 la visin es mejor que la normal.


Si la visin es 20/100 la visin est disminuida, alterada.

57

Un poco de Biofsica!

Las Dioptras. La longitud focal del cristalino (f), es una medida de

su poder de refraccin; por ser una lente, el cristalino puede refractar la luz. La unidad del
poder de refraccin es la dioptra, definida como la inversa de la longitud focal (1/f) expresada
en metros. Ejemplo: una lente con longitud focal de 0,5 metros, poseer un poder de refraccin
de 2 dioptras (1/f = 1/0,5= 2). El poder de refraccin del cristalino es 12 dioptras.

Figura No. 2
Carta de Snellen

Procedimiento paso a paso:


.- Se le coloca al paciente sentado frente del cartn de Snellen a 6 metros de distancia.
.- El paciente se tiene que cubrir un ojo sin oprimirlo.
.- Instruir al paciente para que lea progresivamente hasta las letras ms pequeas y que llegue
a no distinguirlas.
58

.- Anotar las lneas ms pequeas que pudo leer el paciente (20/20, 20/30, etc.; cuanto menor
sea el valor de la fraccin ms grave ser la miopa).
.- Repetir con cada ojo (hay que realizar la prueba con rapidez, evitando que el paciente
memorice la tabla).
Para nios pequeos y analfabetas, existen cartas de Snellen especiales
basadas en figuras que ellos(as) pueden reconocer sin dificultad
La imagen visual, captada por los receptores retinianos, transmite la informacin a
travs del nervio ptico (derecho e izquierdo), que luego pasa al quiasma ptico (donde hay
entrecruzamiento de la informacin visual). Las imgenes formadas en el cuadrante temporal
de la retina, se dirigen por la cintilla ptica ipsilateral (del mismo lado) hacia el cuerpo
geniculado lateral del tlamo. Las imgenes formadas en el cuadrante nasal de la retina
atraviesan el quiasma para finalizar en el cuerpo geniculado contralateral. En el cuerpo
geniculado lateral, todas las fibras de las cintillas pticas terminan y hacen sinapsis con las
neuronas ah localizadas. Los axones de estas neuronas se dirigen hacia la corteza visual, donde
hacen numerosas sinapsis a distintas profundidades.

3.2.- EXPLORACIN DEL CAMPO VISUAL: LA CAMPIMETRA


La mejor definicin de campo visual nos la da el autor Robert Cubbidge campo visual
es todo el espacio que puede ver el ojo en un instante. El campo visual nos indica los lmites
de la visin perifrica, es decir, el espacio en el cual puede ser visto un objeto mientras la
mirada permanece fija en un determinado punto (Fig. No. 3). Las dimensiones monoculares (un
solo ojo) se extienden aproximadamente hasta 600 a nivel superior y hasta los 700 a nivel
inferior. En el sentido horizontal se extiende nasalmente hasta los 600 y en el sentido temporal
hasta los 1000. Estos campos estn limitados por la anatoma facial del individuo, posicin del
prpado, el peinado que utilice, la prominencia de las cejas y la nariz. Teniendo en cuenta los
dos ojos (visin binocular), los dos campos visuales se solapan, lo que origina una visin
estereoscpica de unos 1200 en la dimensin horizontal. La periferia temporal extrema del
campo binocular se ve con un solo ojo.
59

Cmo se puede evaluar el campo visual de un individuo?


Mediante el empleo de la CAMPIMETRA o PERIMETRA (ver Anexo 2). Es un examen del
campo visual que emplea una pantalla tangente (es la que se emplea en el Laboratorio de
Fisiologa). Se hace por separado para cada ojo. La misma determinacin del campo visual se
hace con seales de distintos colores. Se comprobar que el campo visual para los colores es
menor en relacin al blanco y negro. El campo visual para el amarillo y azul es mayor que para
el rojo y el verde.

Pasos a seguir:
.- Siente al paciente a 1 metro de la pantalla tangente. El ojo que va a ser evaluado debe estar
alineado con el punto de fijacin central. Chequee regularmente que el paciente mantenga la
fijacin.
.- El paciente debera usar su correccin habitual para lejos. Ocluya completamente el ojo que
no va a ser evaluado.
.- Mantngase a un lado de la pantalla, temporalmente al ojo evaluado del paciente. Comience
fuera de la pantalla, mueva lentamente el objetivo sobre la pantalla a lo largo del meridiano
horizontal. Cuando el paciente diga que el objetivo es visible, gire la varilla de modo que el
objetivo se vuelva negro, y retrelo de la pantalla. Use movimientos suaves y lentos cuando
maniobre la varilla y el disco del objetivo contra la pantalla.
.- Evale el campo visual nasal. Mueva el objetivo a lo largo de los meridianos nasales oblicuos
que irradian desde la fijacin a intervalos de 30.
.- Mueva el objetivo a lo largo de los meridianos verticales, desde arriba hacia abajo. Evale el
campo visual temporal.
.- Camine hacia el otro lado de la pantalla (el lado de la pantalla nasal al ojo evaluado). Mueva
el objetivo a lo largo de los meridianos temporales de una manera similar a lo descrito antes.
Hoy da, gracias a los adelantos tecnolgicos, el Oftalmlogo emplea la perimetra
automatizada: el paciente debe sentarse frente a un domo cncavo (con soporte estabilizador)
y fijar la vista en un objeto central. Un programa computarizado hace titilar pequeas luces en
diferentes lugares de la superficie del domo y el paciente debe presionar un botn para indicar
que detect las pequeas luces en su visin perifrica. Las respuestas del paciente se

60

comparan con grupos de control de edades equivalentes para determinar la presencia de


defectos en el campo visual.

Figura No. 3
Campos Visuales

Campo Nasal

Temporal

Campo Visual Izquierdo

Temporal

Campo Visual Derecho

Figura No. 5
Campos Visuales Normales en el Ser Humano
Los resultados anormales pueden indicar la presencia de enfermedades del sistema
nervioso central, tales como tumores que lesionan o comprimen las partes del cerebro que
tienen que ver con la visin. Otras enfermedades que pueden afectar el campo visual del ojo
son diabetes, hipertiroidismo, hipertensin arterial, enfermedades de la glndula pituitaria y
esclerosis mltiple, entre otras.

61

ALTERACIONES QUE PUEDEN DETECTARSE EN LOS CAMPOS VISUALES


Los pequeos defectos en los campos visuales suelen denominarse ESCOTOMAS y los
defectos mayores suelen denominarse ANOPSIAS.
Los escotomas son reas del campo visual en las que existe una disminucin parcial o
total de la visin y que estn rodeados por reas de visin normal. Cuando la disminucin de la
sensibilidad es total, es decir, que no se detecta ningn estmulo luminoso y por lo tanto,
estamos en una zona de ceguera el defecto recibe el trmino de escotoma absoluto. Por el
contrario, si son detectados estmulos luminosos de intensidad superior a la normal nos
hallamos ante escotomas relativos.
Dentro de las anopsias se pueden encontrar las Hemianopsias las cuales representan
prdidas absolutas o el dficit importante de la visin en la mitad del campo visual. Segn qu
mitades del campo visual se hallen afectadas las podemos clasificar en:

a.1.-Hemianopsia altitudinal: Es la prdida de la mitad superior o inferior del campo visual de


manera que se aprecia en l un nivel horizontal que delimita el nivel de la lesin. Es tpica de las
neuritis ptico-isqumicas.
a.2.-Hemianopsia heternima: Prdida de las mitades nasales o temporales de cada ojo, segn
sea una u otra la dividimos en:
a.2.1.-Hemianopsia heternima binasal: Es el defecto campimtrico que afecta a la
mitad nasal de ambos ojos.
a.2.2.-Hemianopsia heternima bitemporal: Es el defecto campimtrico que afecta a la
mitad temporal de ambos ojos.
a.3.-Hemianopsia homnima: Defecto campimtrico en las mitades simtricas de ambos ojos.
Se suele generalizar que los defectos homnimos independientemente de su extensin, son
debidos a lesiones en la va ptica retroquiasmtica. A su vez la podemos dividir en:
a.3.1.-Hemianopsia homnima derecha: son los casos en los que se afecta la mitad del
campo visual derecho de ambos ojos, es decir: temporal del ojo derecho y la mitad nasal del
62

ojo izquierdo.

a.3.2.-Hemianopsia homnima Izquierda: En este caso la afectacin se encuentra en el


hemicampo temporal del ojo izquierdo y en el nasal del ojo derecho.
a.4.-Cuadrantanopsia: Es la prdida absoluta o dficit importante de la visin en un cuadrante
del campo visual. De la misma manera que en las hemianopsias, las cuadrantanopsias se
clasifican en temporales o nasales, superiores o inferiores dependiendo del cuadrante afectado.
3.3.-ESTUDIO DE LOS REFLEJOS OCULARES:

3.3.1.-Reflejo Fotomotor o pupilar directo:


Se refiere a la contraccin (miosis) que presentan las pupilas cuando se iluminan. Se
debe utilizar una linterna de mano para ello. Es conveniente que el haz de luz llegue desde el
lado y no apuntando directamente al ojo. La va del reflejo fotomotor comienza en la retina,
sigue por el nervio ptico prosigue por quiasma y cintillas pticas hasta el cuerpo geniculado
externo, donde se separa de la va ptica dirigindose al tubrculo cuadrigmino anterior
(ncleos pretectales), desde aqu se proyectan los estmulos al ncleo de Edinger-Westphal ipsi
y contralateral. Desde aqu, sigue la va efectora parasimptica haciendo sinapsis en el ganglio
ciliar, hasta que llega al esfnter del iris.

3.3.2.-Reflejo Fotomotor consensual o indirecto:


La respuesta constrictora pupilar a la entrada de luz en el ojo examinado (iluminado)
recibe el nombre de reflejo fotomotor directo, reaccionando de la misma forma el ojo
contralateral en condiciones normales, en cuyo caso hablamos de reflejo fotomotor
consensual. La estimulacin luminosa de una retina provoca una contraccin de la pupila en el
ojo contralateral y ello es que, si recordamos que parte la proyeccin a los ncleos de EdingerWestphal es bilateral, tendremos la explicacin del reflejo consensual.

3.3.3.-Reflejo de Acomodacin:
El reflejo de acomodacin es la contraccin de la pupila (miosis) al enfocar la vista en
algn objeto distante. Ahora, al dirigir la visin desde un punto lejano a un objeto cercano, la
contraccin de los msculos rectos internos hace converger los ejes oculares, se contraen los

63

msculos ciliares y el cristalino se engruesa para aumentar su poder refractario, y la pupila se


contrae para concentrar las ondas luminosas en la porcin ms gruesa del cristalino.

Cmo se evala?
Se coloca un dedo a unos 50-60 cm del paciente y se le pide que se fije en l. Al
acercarlo a la cara se produce contraccin de la pupila, que se acompaa de convergencia de
los ojos y acomodacin del cristalino. El arco reflejo pasa por el nervio ptico, cuerpo
geniculado lateral, corteza visual primaria, proyecciones corticotectales, colculo superior,
ncleo de Edinger-Westphal, nervio oculomotor y ganglio ciliar.

3.4-DETERMINACIN DEL PUNTO CIEGO DEL OJO:


En una tarjeta blanca de unos 8 x 12 cm dibuje una (X) de un centmetro de longitud; a 6
cm a la izquierda de la equis dibuje un crculo relleno de unos 2 cm de dimetro. Al mirar la cruz
con el ojo derecho (manteniendo cerrado el ojo izquierdo) y sosteniendo la tarjeta con su brazo
extendido (unos 30 cm), acerque lentamente la tarjeta y habr una distancia (que debe anotar)
en la que ya no notar el crculo negro. Es el punto ciego. A qu porcin de la retina
corresponde el punto ciego? Haga la maniobra ahora con el ojo izquierdo empleando otro
cartn.

3.5-ESTUDIO DE LA MUSCULATURA OCULAR EXTRNSECA DEL OJO:


Empleando una varilla de color, se proceder un ojo a la vez, cubriendo el otro- a
mover la varilla en las direcciones que nos permitan discernir acerca de la integridad de los
msculos rectos superiores, inferiores, laterales y mediales; as como de los oblicuos superiores
e inferiores y finalmente se explorar el elevador del prpado de cada ojo. Es importante que el
estudiante est familiarizado con la inervacin de los msculos mencionados.

64

BIBLIOGRAFA CONSULTADA

.- Guyton A, Hall J. Tratado de Fisiologa Mdica. Decimosegunda Edicin. Editorial ElsevierSaunders; 2011.
.- Ganong W. Fisiologa Mdica. 24va Edicin. Editorial Mc Graw Hill; 2012.
.- Mollins N, Balcells A. Exploracin Clnica Prctica. 21va Edicin. Editorial Cientfico-Mdica
Barcelona; 1980.
.- Mazzei E, Rozman C. Semiotecnia y Fisiopatologa. 6ta Edicin. Editorial EL Ateneo; 2002.

CONCLUSIONES DE LA ACTIVIDAD PRCTICA:

A continuacin, y con sus propias palabras proceda a elaborar las principales conclusiones
obtenidas de la experiencia efectuada en el laboratorio. Esta actividad la puede realizar
posterior a la prctica. Reflexione y piense sobre los datos obtenidos y la importancia de las
exploraciones efectuadas. Para su futuro profesional: Cul sera la importancia de tales
maniobras?, Qu lograra con ellas?
65

GUIA DE AUTOEVALUACIN POST-LABORATORIO

.- Defina agudeza visual.


.- Cmo explora Ud en un paciente la agudeza visual?
.- Qu es la campimetra? Cul es su utilidad?
.- Qu es el quebrado de Snellen? Sus componentes, Qu representan?
.- Qu representa una dioptra?
.- Mencione al menos tres anormalidades en la refraccin del ojo.
.- Haz en tu cuaderno un esquema de las vas visuales. Seale sus partes.
.- Qu entiende por punto o mancha ciega?
.- Cmo estn divididos los campos visuales?
.- Qu son las hemianopsias?
.- Cules reflejos fotomotores explora Ud en la prctica clnica?
.- Cules son los pares craneales que inervan la musculatura del ojo?
.- Dnde se localiza la corteza visual primaria?
.- Defina qu es un escotoma?
.- Describa el reflejo de acomodacin ocular.
.- Cmo explora Ud la pupila en la prctica?
.- Cmo se llama la anomala en el campo visual cuando hay lesin del quiasma ptico?
.- Mencione los 6 msculos responsables del movimiento de los ojos.

66

PRCTICA No.

BASES ELCTRICAS DE LA ACTIVIDAD CEREBRAL:


ELECTROENCEFALOGRAFA
PRESENTACIN

La

presente gua constituye la quinta actividad prctica (Unidad XXII) de la asignatura

Fisiologa I del Programa de Medicina. Por medio de esta actividad el estudiante al concluir la
misma conocer la metodologa para el registro de la actividad elctrica cerebral, sus
mecanismos de generacin e identificar los ritmos cerebrales normales.
INTRODUCCIN
La Electroencefalografa, la cual representa una tcnica de diagnstico no invasiva, es el
registro y evaluacin de los potenciales elctricos generados por el cerebro y obtenidos por
medio de electrodos situados sobre la superficie del cuero cabelludo. El electroencefalograma
(EEG) es el registro de la actividad elctrica de las neuronas piramidales de la corteza cerebral.
Dicho registro posee formas muy complejas que varan entre individuos y con la colocacin y
ubicacin de los electrodos en el crneo; esto es debido al gran nmero de interconexiones
que presentan las neuronas y por la estructura no uniforme del encfalo.
La electroencefalografa se efectu por vez primera en animales despiertos en el siglo
XIX por el fisilogo Richard Caton en 1875; pero fue en 1929 cuando el psiquiatra alemn Hans
Berger ide un mtodo que prometa una investigacin de la actividad elctrica cerebral y
acu el trmino de electroencefalograma descubriendo lo que se conoci como ritmo de
Berger. Sin embargo, debido a su falta de conocimientos tcnicos, no fue hasta algunos aos
despus cuando se reconoci su importancia. Mientras tanto, las posibilidades de la
electroencefalografa clnica se discutan, por primera vez, en una reunin en el Laboratorio
Central de Patologa del Hospital Maudsley de Londres en 1929.
El cerebro es la parte ms evolucionada del encfalo y en l estn localizadas las
funciones conscientes del sistema nervioso. Posee dos partes llamadas hemisferios que se
relacionan con las partes opuestas del cuerpo. La subdivisin ms importante del encfalo es la

67

corteza cerebral que contiene unos 9 de los 12 billones de neuronas que hay
aproximadamente en el cerebro humano. La corteza es en realidad una capa ms bien fina de
neuronas situada en la periferia del cerebro que contiene muchas fisuras o pliegues
penetrantes para dar una mayor rea superficial. Algunas de las fisuras ms profundas,
llamadas tambin surcos, se utilizan como lmites para dividir la corteza en ciertos lbulos.

Figura No. 1
Corteza Cerebral y sus divisiones
El tejido nervioso presenta como una de sus funciones bsicas la capacidad de generar
potenciales elctricos, potenciales que son la base de la excitabilidad del organismo. Para
comprender la forma en que se generan estos potenciales es preciso un conocimiento de la
estructura y las conexiones de aquellas partes del cerebro que los originan. En sentido amplio,
todo el sistema nervioso posee capacidad electrognica. Sin embargo, para los propsitos del
EEG, bastar con considerar la corteza cerebral y las regiones directamente relacionadas con
ella. El EEG puede registrar las diferencias de potencial que se producen entre 2 electrodos
colocados sobre la piel del cuero cabelludo y en este caso se habla de registro bipolar o puede
ser el resultado del registro de la diferencia de potencial entre un electrodo colocado en la

68

superficie del cuero cabelludo y un electrodo neutro colocado sobre otra regin del cuerpo
(por ejemplo, las orejas), tratndose en este caso de un registro monopolar.
1.- OBJETIVOS DE LA PRCTICA:
.- Identificar los conceptos biofsicos elementales para registro de electroencefalogramas.
.- Describir las tcnicas para el registro del electroencefalograma.
.-Identificar en un electroencefalograma las distintas ondas cerebrales.
.- Describir los diferentes montajes y programas utilizados.
.- Identificar las caractersticas de los distintos ritmos cerebrales.
2.- MATERIAL REQUERIDO:
Registros electroencefalogrficos con ritmos basales normales, pizarra acrlica, marcadores.

3.- ACTIVIDADES A REALIZAR EN EL LABORATORIO:


3.1- Componentes de un Electroencefalgrafo:
El electroencefalgrafo es el aparato utilizado para registrar la actividad elctrica cortical.
Consta de:

Electrodos de registro (Electrodos de Superficie) de metal de ptima conduccin (plata

clorurada, oro o zinc), que se colocan sobre el cuero cabelludo perfectamente limpio de grasa
que acta como aislante, (electrodos activos en nmero de 19) y en los lbulos de las orejas
(electrodos neutros en nmero de 2), para un total de 21 electrodos. Para mejorar la
conduccin se le aplica una pasta electroltica de alto ndice de conduccin. Estos electrodos
interconectados registran variaciones de potencial entre 2 electrodos activos del cuero
cabelludo (montaje bipolar) o entre uno activo del cuero cabelludo y uno neutro en la oreja
(montaje referencial o monopolar).
Como regla general, los electrodos del lado izquierdo llevan numeracin impar, mientras
que los del lado derecho la llevan par. Adems, como ya se dijo, los electrodos de la lnea
media reciben el subndice z (por zero, cero en ingls) y los de las orejas se identifican con
la letra A.

69

Sistema Amplificador: Amplifica la actividad cortical que es normalmente en

microvoltios (V), de tal manera que ste aparezca como un grafoelemento en el que una
altura de 7 mm = 50 V (puede haber otras variaciones).

Sistema Inscriptor (plumillas) para electroencefalografa convencional o analgica, y

para EEG digital, el sistema inscriptor es el PC que graba el registro para su posterior anlisis.
Este sistema traduce la actividad elctrica en elementos grficos sobre una base milimetrada,
dibujando ondas positivas (inscripcin hacia abajo), y ondas negativas (inscripcin hacia arriba).
La velocidad de desplazamiento del sistema inscriptor generalmente circula a una velocidad de
30 mm/seg.
3.2. Tcnica de Registro:
Previa colocacin de los 20 electrodos siguiendo el sistema Internacional 10-201
(Recomendacin de la Federacin Internacional de Sociedades de Neurofisiologa y
Electroencefalografa)2, el registro se realiza con el sujeto en reposo, generalmente acostado
con los ojos cerrados y se los hace abrir para ver la reaccin de bloqueo (Reaccin de Bloqueo
de Berger) del ritmo alfa. Existen mltiples montajes3 para interconectar los electrodos
(combinar derivaciones), pero los que se estudiarn en la prctica son dos: Uno monopolar o
referencial (figura No. 3) y otro bipolar (figura No. 4). Se denomina Derivacin a la
combinacin de dos electrodos. En la derivacin monopolar se combina un electrodo activo y
uno de referencia (ejemplo, uno en la superficie craneal y otro de referencia en la oreja del
mismo lado). En la bipolar se combinan dos electrodos activos cercanos entre s. El nmero de
derivaciones que puedan registrarse simultneamente depende del nmero de canales
(amplificadores) que tenga el sistema de registro, por ejemplo 8, 16, 32, 64, etc. Los electrodos
de referencia que se colocan en el lbulo de la oreja para un registro monopolar se denominan
1

La denominacin de esta convencin deriva de la fraccin del dimetro ceflico medido en centmetros donde se
colocan los electrodos de forma equidistante, esto es: 10% y 20% de la distancia medida.
2

Este sistema toma como base 3 puntos clave de la cabeza: El nasin, punto ubicado en la base de la nariz sobre la
sutura fronto-nasal. El inin, situado en la parte posterior de la cabeza y que corresponde a la protuberancia
occipital. Los puntos interauriculares, localizados al comienzo del hueso cigomtico delante del trago.
3

Se denomina montaje a la combinacin de derivaciones que se registran simultneamente pudiendo ser


combinaciones de derivaciones en sentido longitudinal, transversal o circunferencial, esto depende del nmero de
canales del equipo utilizado y de las preferencias del electrofisilogo o el neurlogo.

70

(A1) el izquierdo y (A2) el derecho (A: por auricular).


Durante el registro observarn que al paciente se le hace inspirar y espirar por la boca
durante 3 minutos, esto se emplea como mtodo de activacin cortical (existen otros mtodos
de activacin como lo son el sueo, la estimulacin luminosa intermitente (ELI), estmulos
auditivos y estmulos tctiles).
Para iniciar el registro el sujeto de estudio deber estar cmodamente acostado,
relajado y quieto. Se recomienda mantener ligeramente abierta la boca durante el registro para
relajar los msculos temporales y evitar la interferencia por actividad muscular. De la misma
manera la apertura y cierre de los ojos se deber efectuar de manera suave.
Es importante sealar que en ocasiones se observan grafoelementos en el trazado que
no corresponden a actividad electroencefalogrfica y que se denominan "artefactos" y los
podemos considerar de 2 tipos:
1) Artefactos biolgicos: Parpadeo, actividad muscular, sudoracin, marcapasos
cardiaco, temblor.
2) Artefactos originados por el sistema: inadecuada conexin a tierra, lnea base
defectuosa, movimientos del cable, electrodos defectuosos o mal colocados.

3.3.- Anlisis del Registro:


Un registro de electroencefalografa est compuesto por varios parmetros, entre los
que se pueden encontrar:
1) Forma (morfologa) de la onda: por ejemplo, se pueden presentar ondas en arcadas,
puntas, ondas de frente abrupto, entre otros.
2) Frecuencia: la actividad del electro-encefalograma est compuesta por diferentes ondas
que se clasifican en bandas de frecuencia. Es el nmero de ondas cerebrales que
ocurren en la unidad de tiempo (un segundo).
3) Amplitud: es la medida de la distancia vertical de la onda y se expresa en V. La
diferencia entre los valores mximos y mnimos determina la amplitud.
4) Simetra: La simetra se refiere a que la seal del electro-encefalograma es igual en
amplitud, morfologa y frecuencia en dos zonas homlogas.
5) Distribucin: se refiere a la ocurrencia de la actividad elctrica registrada por los

71

electrodos colocados en diferentes partes del crneo. Los patrones del electroencefalograma pueden aparecer en una gran rea, a ambos lados del crneo, sobre un
solo lado o en una pequea rea.

Ondas del electroencefalograma (Fig. No.2)


Poseen amplitudes que van desde los 10 mV en registros sobre el crtex a 100 mV en la
superficie del cuero cabelludo. Las frecuencias de estas ondas se mueven entre 0,5 y 100 Hz y
dependen mucho del grado de actividad del crtex cerebral. Los diferentes ritmos que pueden
distinguirse en un electroencefalograma son:
Ritmo Alfa (): Se registran en sujetos normales despiertos, en reposo y con los ojos
cerrados (reposo fsico y mental), localizndose sobre todo en las regiones posteriores del
cerebro (zona occipital); En los infantes se puede identificar desde los 6 aos, pero se estabiliza
alrededor de los 10 aos. En algunas ocasiones se presenta en rfagas, y normalmente es
bloqueado por la apertura palpebral. Su amplitud (voltaje) est comprendida entre 50 y 100
V. La frecuencia oscila entre 8 13 Hz.
Ritmo Beta (): Se registran fundamentalmente en las regiones parietal y frontal. Son
de menor amplitud o voltaje. La frecuencia es mayor de 13 Hz. Amplitud de 5 a 50 V. Es
caracterstica del estado de vigilia y atencin.
Ritmo Theta (): Estas ondas poseen frecuencias entre 4 y 7 Hz y se presentan en la
infancia aunque tambin pueden presentarlas los adultos en perodos de stress emocional y
frustracin. Prominente durante el sueo MOR (movimientos oculares rpidos). Se localizan en
las zonas parietal y temporal. Amplitud entre 75 y 125 V.
Ritmo Delta (): Son ondas grandes y lentas; se presentan durante el sueo profundo y
en enfermedades orgnicas cerebrales graves. En los adultos su aparicin en estado de vigilia es
patolgica, pero puede encontrarse en nios y su proporcin indica el grado de madurez
electrocortical.
Frecuencia de 0,5 3.5 Hz. (Todo lo que se ubica por debajo de 4 Hz se considera ritmo Delta).
Amplitud de unos 200 V.
72

La ausencia de actividad elctrica cerebral (electro-encefalograma isoelctrico), puede


definirse como MUERTE CEREBRAL (utilidad o aplicacin mdico-legal)

Alfa

Beta

Theta

Delta

Ojos abiertos

Ojos cerrados

Figura No. 2
Ritmos normales en un electroencefalograma

Cuando el ritmo predominante es el alfa, y el sujeto abre sus ojos, dicho patrn es
sustituido por una actividad rpida e irregular de bajo voltaje. A este fenmeno se le denomina
Reaccin de Bloqueo de Berger (ver Fig. No. 2).
Ya se ha mencionado cmo la actividad cerebral durante la vigilia modifica
sustancialmente el electro-encefalograma. Algo parecido ocurre durante el sueo, en el que
tienen lugar de forma cclica cambios muy notables, pudiendo ser cualquier diferencia
indicativa de una patologa cerebral. En la Figura No. 3 se distinguen distintas fases del sueo
que corresponden sucesivamente a los estados de alerta o excitacin, de relajacin, de
73

somnolencia, de sueo y, finalmente, de sueo profundo. Obsrvese que la frecuencia de las


ondas del EEG va disminuyendo progresivamente.

Alerta

Relajacin

Somnolencia

Sueo ligero

Sueo profundo

Figura No. 3
Electroencefalograma durante distintas fases del sueo normal

74

Figura No. 4
Montaje de electrodos Monopolares o Referenciales

Sensibilidad: 7 V = 1 mm

Velocidad del papel: 30 mm = 1 segundo


Puede ser modificada a 15 mm/seg,
40 mm/seg, dependiendo del equipo

75

Figura No. 5
Montaje de electrodos bipolares o parasagitales
76

BIBLIOGRAFA CONSULTADA
.- Frumento AS. Biofsica. Tercera Edicin. Editorial Mosby/Doyma; 1995.
.- Guyton A, Hall J. Tratado de Fisiologa Mdica. Decimosegunda Edicin. Editorial ElsevierSaunders; 2011.
.- Mountcastle V. Medical Physiology. Dcimacuarta Edicin. Editorial Mosby; 1979.
.- Fernndez N. Manual de Laboratorio. Cuarta Edicin. Editorial Mc Graw Hill Interamericana;
1999.

CONCLUSIONES DE LA ACTIVIDAD PRCTICA:

A continuacin, y con sus propias palabras proceda a elaborar las principales conclusiones
obtenidas de la experiencia efectuada en el laboratorio. Esta actividad la puede realizar
posterior a la prctica. Reflexione y piense sobre los datos obtenidos y la importancia de las
exploraciones efectuadas. Para su futuro profesional: Cul sera la importancia de tales
maniobras?, Qu lograra con ellas?

77

GUIA DE AUTOEVALUACIN POST-LABORATORIO

.- Defina actividad elctrica cerebral.


.- En un registro electroencefalogrfico, identifique los principales ritmos cerebrales
.- Mencione y describa los 2 tipos de registros electroencefalogrficos.
.- Qu entiende Ud por reaccin de bloqueo de Berger?
.- Cmo se modifica la actividad cerebral dependiendo de la fase de sueo y del estadio en
que se encuentre el individuo?
.- Describa la tcnica para realizar un electroencefalograma.
.- Realice un dibujo donde ubique topogrficamente los electrodos segn el Sistema
Internacional de Registro 10-20.
.- Examine los ritmos theta y delta. Cundo los ojos estn abiertos, hay un aumento en la
actividad theta y delta? Explique su observacin.
.- Qu podra explicar la diferencia de amplitud de ondas registradas desde un sujeto analizado
solo en un cuarto oscuro, y sujetos analizados en un laboratorio lleno de estudiantes hablando
y arrastrando los bancos de sentarse?
.-Examine las formas de las ondas alfa para los cambios entre los estados ojos cerrados y
ojos abiertos.
.- Cundo los ojos estn abiertos, ocurre desincronizacin del ritmo alfa?

78

PRCTICA No.

DETERMINACIN DE LA SEDIMENTACIN GLOBULAR,


HEMATOCRITO Y VALORACIN DE LA HEMOSTASIA

PRESENTACIN

La

presente gua constituye la sexta actividad prctica (Unidad XXVII) de la asignatura

Fisiologa I del Programa de Medicina. Por medio de esta actividad el estudiante al concluir la
misma conocer la metodologa para la determinacin de la velocidad de sedimentacin
globular, cmo calcular el valor hematocrito y su importancia y los diferentes mtodos para
valorar la hemostasia.
INTRODUCCIN
La sangre es un tejido lquido complejo de color rojo la cual se encarga del transporte
de gases tales como O2 y CO2 a travs de todo el cuerpo, as como tambin del transporte de
hormonas, nutrientes y sustancias de desecho. Por otra parte, otros fenmenos pueden ser
atribuidos al tejido sanguneo entre los que se pueden citar la termorregulacin, homeostasis
del agua, balance de electrolitos, la inmunidad a agentes extraos o infecciosos y la
hemostasia. Esta prctica, pretende ser una actividad en la cual el estudiante pueda verificar
mediante la experimentacin, el mtodo por el cual se determina la velocidad de
sedimentacin globular y el valor del hematocrito y la existencia de fenmenos fisiolgicos
intrnsecos al tejido sanguneo que tienen relacin con la coagulacin (hemostasia) y algunos
factores fisicoqumicos que la alteran.
No es complicado determinar en un laboratorio de fisiologa ciertos parmetros
hematolgicos que sirven para obtener un perfil hematimtrico de un paciente. Es importante
conocer la fundamentacin de cada mtodo con el que se trabaja, lo que permite tener bases
slidas para interpretar cualquier resultado y orientar algn diagnstico.
79

Entre los varios parmetros hematolgicos que se pueden medir en el laboratorio, dos
son muy interesantes por sus basamentos biofsicos y son los que se van a estudiar en la
actividad de hoy: la Determinacin de la Velocidad de Sedimentacin Globular (VSG) y el Valor
Hematocrito (Hto). La diferencia de gravedad especfica entre los eritrocitos y el plasma
sanguneo ocasiona la precipitacin de los primeros en el fondo de un tubo que contiene
sangre anticoagulada con una velocidad que es medida en determinada cantidad de tiempo y
de denomina Velocidad de Sedimentacin Globular (VSG). La eritrosedimentacin es una
prueba que detecta reactantes de fase aguda; desde el punto de vista clnico es muy
inespecfica. Se encuentra elevada en infecciones, enfermedades inflamatorias, reacciones
autoinmunes y enfermedades malignas. La eritrosedimentacin es particularmente til en las
enfermedades reumatolgicas, especialmente en la artritis reumatoidea, en la evaluacin de
arteritis temporal y en la polimialgia reumtica; pueden existir variaciones fisiolgicas que se
deben tener en cuenta ya que la VSG se puede acelerar en caso de nios y ancianos, en la
mujer se aumenta antes y despus de la menstruacin, durante el embarazo y puede estar
elevada uno o dos meses despus del parto; la toma de anticonceptivos orales puede tambin
acelerar la velocidad.
El Hematocrito (Hto) mide la relacin porcentual ocupada por eritrocitos respecto del
volumen total de una muestra de sangre, o expresado de otra forma, es la relacin entre el
volumen de eritrocitos y el de la sangre total. Se expresa como porcentaje (%)
Se halla aumentado en quemaduras, infecciones, intoxicaciones, policitemia e insuficiencia
respiratoria crnica. Se encuentra disminuido en concentraciones bajas de volumen globular,
anemias crnicas, cirrosis, insuficiencias cardacas y ciertas hiperproteinemias.
Los fenmenos de la hemostasia (Fig. No. 1) son los que permiten evitar o detener el
sangrado en los vasos sanguneos que en un momento dado pueden ser lesionados. La
hemorragia se produce cuando la integridad de los vasos sanguneos se altera y es detenida
cuando se activan o participan 3 factores:

Vascular
Plaquetario
Activacin de la cascada de la coagulacin
80

La reaccin vascular consiste en un proceso de vasoconstriccin local que ocurre de


forma inmediata una vez lesionado el vaso. Sucede por la liberacin de agentes
vasoconstrictores locales como la serotonina.
La respuesta plaquetaria, que ocurre en forma simultnea a la anterior, sucede por
fases, dndose en primer lugar la adhesin plaquetaria por la exposicin de la colgena
vascular, luego la activacin de las plaquetas y por ltimo, la agregacin de estos elementos
formes, formndose el tapn plaquetario o tapn primario, el cual suele ser laxo los primeros
minutos.
La participacin de una variedad de protenas circulantes en el plasma sanguneo,
conduce a la activacin de la cascada de la coagulacin, la cual consta de varias etapas: la
primera o fase tromboplstica tarda de 3 a 10 minutos en producirse; la segunda, llamada la
va comn tarda de 12 a 15 segundos, y la tercera, que es la conversin del fibringeno en
fibrina, de 1 a 2 segundos.

Figura No. 1
Fases de la hemostasia
1.- OBJETIVOS DE LA PRCTICA:
- Describir el mtodo y el procedimiento necesario para determinar el valor de Velocidad de
Sedimentacin Globular del Eritrocito (VSG).
- Describir el mtodo de determinacin del Valor Hematocrito (Hto).
- Identificar varios factores fsicos y qumicos que pueden alterar el proceso de coagulacin

81

sangunea.
- Describir ciertos ndices que permiten valorar la hemostasia sangunea.

2.- MATERIAL NECESARIO:


Guantes desechables, tubos de ensayo de vidrios de 75 x 10 mm, astillas de madera o palillos,
alcohol etlico, algodn, perlas de vidrio, papel de filtro, envase con trozos de hielo, heparina
sdica, gradillas para tubos de ensayo, jeringas descartables y estriles de 10 cc, torniquetes,
cronmetros, algodonera, pipetas Pasteur con bulbos de goma, pipetas volumtricas de vidrio,
succionador para pipetas, beakers de 25 ml, bao de mara regulado a 40C, silicn en spray,
agua destilada, lancetas estriles, tubos de Westergreen, tubos de Wintrobe, centrfuga clnica,
marcadores, pizarra acrlica.

3.- TOMA DE MUESTRAS DE SANGRE:


3.1. Sangre Venosa: referirse al anexo No. 1 para detalles del procedimiento de extraccin.

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PARTE I

ESTUDIO DE LA VELOCIDAD DE SEDIMENTACIN GLOBULAR


DETERMINACIN DEL VALOR HEMATOCRITO
1.a.- ESTUDIO DE LA VELOCIDAD DE SEDIMENTACIN GLOBULAR (V.S.G)
Recuerda, qu es la Velocidad de Sedimentacin Globular (VSG)? Es la velocidad a la
que precipitan (sedimentan) los glbulos rojos en un perodo de tiempo de 1 hora (60 minutos).
Se mide en mm/hora. Para medirlo, se requiere de un tubo de ensayo especial llamado tubo de
Westergreen. Qu se necesita para medirlo? En primer lugar, tomar una muestra de sangre
venosa de uno de tus compaera(o)s quien voluntariamente deber acceder a donarla. En
segundo lugar emplear la tcnica o mtodo de Westergreen.
Procedimiento Experimental:
Verter con mucho cuidado mediante una pipeta Pasteur de punta larga en el tubo de
Westergreen, una muestra de sangre con heparina (anticoagulante). Dejarla deslizar muy
lentamente sobre los bordes del tubo. El tubo de Westergreen es un tubo cilndrico de vidrio
con una graduacin que va del 0 a 100 mm ledo de arriba hacia abajo, con separacin de 1 mm
entre cada graduacin. Sus extremos son abiertos. Llenar con sangre la pipeta hasta la marca
cero y luego colocarla en una gradilla especial que cierra ambos extremos del tubo, mediante
unos rodetes de goma. Luego de transcurrida una hora, leer en milmetros la columna de
plasma que se forma encima de la masa de eritrocitos sedimentados.
Valores de referencia (valores basales o normales):
En adultos sanos: Valores promedio:
Hombres:

0 mm a 15 mm /1 hora

Mujeres:

0 mm a 20 mm/ 1 hora

Los valores pueden variar dependiendo del sexo, edad y el mtodo empleado.
83

2.a.- DETERMINACIN DEL VALOR HEMATOCRITO (Hto)


Recuerdas qu es el valor Hematocrito o volumen globular? Muy sencillo; es la relacin
entre el volumen de eritrocitos (masa de glbulos rojos) y el de la sangre total. Se expresa
como porcentaje (%). Para su determinacin se emplea el mtodo de Wintrobe.

Procedimiento Experimental:
Con una pipeta Pasteur tome con cuidado una muestra de sangre heparinizada recin
extrada y proceda a llenar el tubo de Wintrobe con delicadeza para no provocar la presencia de
espuma, comenzando desde el fondo hasta la marca superior que indica 10 del lado derecho.
Proceda a centrifugar a 3000 rpm durante media hora. Leer ahora directamente en el tubo
graduado y expresar los resultados en porcentaje.
Valores de referencia (valores basales o normales):
En adultos sanos: Valores promedio:
Hombres:
Mujeres:

45 % a 54 %
36 % a 47 %

Los valores pueden variar con el sexo, la edad y el mtodo empleado (ejemplo: el uso del
mtodo del micro-hematocrito).

ANOTE LOS RESULTADOS OBTENIDOS EN LA PRCTICA (PARTE I)


TABLA No. 1
Parmetro evaluado
Velocidad de Sedimentacin
Globular (VSG)

Valor obtenido

Unidades

Valor Hematocrito (Hto)

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PARTE II

ESTUDIO DE LA COAGULACIN SANGUNEA


II.1- Algunos factores que pueden alterar el tiempo de coagulacin:
Procedimiento experimental:
Para el estudio de ciertos factores que pueden alterar el proceso normal de la
coagulacin sangunea, se requerir una muestra de sangre NO heparinizada de una(o) de
la(o)s estudiantes del grupo de prcticas (aproximadamente unos 8 cc) (ver Anexo No. 1).
Antes de recoger la muestra, se dividir el trabajo en la siguiente forma: se seleccionar
a un(a) alumna(o) que se encargar de recibir un tubo de ensayo marcado para cada
experimento y del cual ser responsable en cuanto a la medicin del tiempo de coagulacin (los
tubos se hallarn numerados del 1 al 7). Al obtener la muestra (recuerda que no est
heparinizada) cada alumno (a) recibir rpidamente 1 ml de la muestra de sangre en el tubo de
ensayo del cual es responsable. Cuidar el respectivo tubo.
Experiencia No. 1: Determinacin del tiempo de coagulacin. Efecto de la agitacin.
El tubo marcado con el No. 1 se mover (agitar) con movimientos suaves de manera continua.
Cada 30 segundos se deber revisar el menisco de la muestra de sangre en el tubo. Cuando
exista inmovilidad del menisco durante la operacin de movimiento suave del tubo, ello
indicar que la sangre ha coagulado. Anota el tiempo transcurrido en la Tabla No. 2. Ese tiempo
ser el tiempo de coagulacin del tubo No. 1
El tubo No. 2, una vez recibida la muestra de sangre, deber ser colocado en una gradilla y
dejado en reposo hasta que el tubo No. 1 haya coagulado. Repite ahora las mismas operaciones
que hiciste en el tubo No. 1. Anota el tiempo de coagulacin.

Experiencia No. 2: Efecto de la heparina sdica.


El tubo No. 3 contendr 0,2 ml de una solucin de heparina sdica y al cual se le colocar 1 ml
de sangre. Observe los resultados y anote.
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Experiencia No. 3: Efecto de la temperatura.


.-Efecto del fro: El tubo No. 4 ser aquel el cual estar colocado en un beaker con hielo
(0-2C). Recibida la muestra de sangre sumerja de inmediato el tubo en hielo. Cada 30
segundos este pendiente de la movilidad o no del menisco. Observe y anote los resultados.

.-Efecto del calor: El tubo No. 5 ser aquel que una vez recibida la muestra de sangre,
deber ser sumergido en un bao de incubacin caliente (40-42C). Cada 30 segundos est
pendiente de la movilidad o no del menisco. Observe y anote los resultados.
Experiencia No. 4: Efecto de la superficie de contacto.
.-Efecto del silicn aplicado a la superficie interna del tubo: El tubo No. 6 ser aquel que
previamente el tcnico de laboratorio ha impregnado de silicn su superficie interna. Observe
el menisco cada 30 segundos. Discuta los resultados.

.-Efecto de la colocacin de perlitas de vidrio en el interior del tubo: El tubo No. 7 ser
aquel que el tcnico de laboratorio le ha colocado en su interior una cantidad de perlitas de
vidrio, que ocupen un volumen aproximado de 0,25 ml (ello permitir aumentar la superficie de
contacto). Al ser colocada la muestra de sangre, cada 30 segundos observe el menisco y anote
los resultados.
TABLA No. 2
TIEMPOS DE COAGULACIN DE LAS EXPERIENCIAS OBSERVADAS
Tubo con la experiencia observada
1 (Movilidad)
2 (Reposo)
3 (+ Heparina)
4 (en fro)
5 (en calor)
6 (+ silicn)
7 (+ perlas de vidrio)

Tiempo de coagulacin (min)

Recuerda que el tiempo normal de coagulacin en un sujeto sano oscila en promedio


entre 1 a 10 minutos.
86

II.2.- Determinacin del Tiempo de Sangra (mtodo de Duke):


Limpie con alcohol el lbulo de la oreja de un(a) voluntaria(o). Con una lanceta estril
puncione el centro del lbulo de la oreja y deje que la sangre fluya sin hacer presin en la zona.
Con un papel filtro, toque levemente la zona punzada cada medio minuto hasta que deje de
observar manchas de sangre en el papel filtro. Anote el tiempo de sangra y exprselo en
minutos. Recuerda que el Tiempo de Sangra oscila en promedio en un sujeto sano entre 1 y 6
minutos. Permite evaluar la fase vascular y la fase plaquetaria de la hemostasia sangunea.

Tiempo de Sangra obtenido: ___________________________ (min)

Factores que se oponen a la coagulacin sangunea


En los vasos sanguneos intactos, la cubierta endotelial normal forma una superficie lisa
en la que las plaquetas no pueden adherirse. As, no hay liberacin de los factores plaquetarios
y no se desencadena el mecanismo de coagulacin de la sangre en los vasos sanguneos
normales.
Adems la sangre contiene sustancias llamadas antitrombinas, que inactivan a la
trombina, y por lo tanto, el fibringeno no puede convertirse en fibrina. La heparina es un
constituyente normal de la sangre que acta como agente antitrombina. Su concentracin
normal en sangre es muy baja. Las inyecciones de heparina se usan para prevenir la formacin
de cogulos en los vasos. La cumarina (otro tipo de anticoagulante) altera la utilizacin
heptica de la vitamina K, por lo tanto de manera indirecta, retrasa la coagulacin.

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Factores que aceleran la coagulacin


Un sitio de lesin en el endotelio vascular y la lentitud excesiva en la corriente
circulatoria, facilitan la formacin de trombos. La aterosclerosis causa irregularidades en sitios
endoteliales y aumenta la tendencia a la trombosis. La inmovilidad causa trombosis porque se
enlentece el flujo sanguneo. Una vez que se ha comenzado a formar, el cogulo tiende a
crecer. Las plaquetas atrapadas en la red de fibrina, se rompen y liberan ms factores de la
coagulacin.

Disolucin del cogulo


La fibrinlisis es el mecanismo fisiolgico que causa disolucin de los cogulos. De
manera ininterrumpida actan los dos fenmenos antagnicos de formacin de cogulos y
fibrinlisis. La sangre posee una enzima, la fibrinolisina, que cataliza la hidrlisis de la fibrina, lo
cual produce disolucin del cogulo. Hay otros factores ms que participan en esta disolucin.
II.3.- Prueba de Retraccin del Cogulo:
Esta prueba constituye una medicin indirecta que se utiliza para confirmar algn
problema plaquetario, como una trombocitopenia (disminucin en la cantidad normal de
plaquetas). nicamente se deja coagular la sangre en un tubo de ensayo sin anticoagulante y
se coloca en un bao de mara a 37 C hasta observar que se efecte la retraccin del cogulo.
Se basa en el hecho de que la sangre total que coagula normalmente, se retrae de las paredes
de su recipiente, con lo que se separa el suero transparente y el cogulo. Las plaquetas son
muy importantes en el mecanismo de la retraccin del cogulo, as que esta reaccin se altera
cuando las plaquetas disminuyen o funcionan de manera anormal. Adems, esta reaccin
tambin depende del contenido de fibringeno del plasma y de la relacin entre el volumen
plasmtico y eritrocitos.
Valor de referencia: normalmente la retraccin del cogulo comienza a la hora (60 min) y se
completa dentro de las primeras 24 horas.

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Fundamento: cuando la cascada de coagulacin se completa, se formar un cogulo. La


trombina acta sobre el factor XIII, el cual causa que los filamentos se contraigan. La capacidad
del cogulo para contraerse (retraerse) depende de la existencia de un nmero adecuado de
plaquetas y de la accin de la trombina; se piensa que las plaquetas pueden proporcionar la
energa necesaria a travs del ATP. Los filamentos de fibrina del cogulo se unen a los bordes y
la retraccin es esencial para el proceso de la hemostasia. Por lo general, el cogulo disminuye
a la mitad de su tamao original en una hora, el fibringeno sin suero se expulsa y es visible un
margen definido entre el cogulo, el suero y la pared del tubo de ensayo. El cogulo resultante,
de ser normal, es mucho ms firme que el original.
Significado fisiolgico: el proceso de retraccin del cogulo conduce a la consolidacin de un
cogulo hemosttico o trombo. La retraccin ocurre por la interaccin entre los pseudpodos
de las plaquetas y las hebras de fibrina. Esto ocurre dentro de los 60 minutos y el cogulo
ocupa el 50% del volumen total de sangre. La retraccin del cogulo resulta en una masa
estabilizada de plaquetas y de fibrina que cierra firmemente el vaso lesionado para prevenir
prdidas de sangre importantes.
La retraccin del cogulo est reducida en la trombocitopenia, enfermedad de von
Willebrand cuando las plaquetas son de mala calidad, y en las alteraciones causadas por
eritrocitos. La retraccin del cogulo aumenta en la anemia e hipo-fibrinogenemia como
resultado de la formacin del cogulo pequeo al aumentar el volumen plasmtico.
Utilidad clnica:

Evaluar la funcin plaquetaria y la estructura de la fibrina en inducir la retraccin del


cogulo.

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BIBLIOGRAFA CONSULTADA
.- Constanzo L. Fisiologa. Cuarta Edicin. Editorial McGraw-Hill Interamericana; 2011.
.- Guyton A, Hall J. Tratado de Fisiologa Mdica. Decimosegunda Edicin. Editorial ElsevierSaunders; 2011.
.- Fernndez N. Manual de Laboratorio de Fisiologa. Quinta Edicin. Editorial McGraw-Hill;
2011.

CONCLUSIONES DE LA ACTIVIDAD PRCTICA:


A continuacin, y con sus propias palabras proceda a elaborar las principales conclusiones
obtenidas de la experiencia efectuada en el laboratorio. Esta actividad la puede realizar
posterior a la prctica. Reflexione y piense sobre los datos obtenidos y la importancia de las
experiencias efectuadas. Para su futuro profesional: Cul sera la importancia de tales
experiencias?, Qu aplicabilidad tendran para Ud?
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GUIA DE AUTOEVALUACIN POST-LABORATORIO

.- Mencione las 3 maniobras bsicas para efectuar una adecuada determinacin de la Velocidad
de Sedimentacin Globular (VSG).
.- Cul es el mtodo para determinar la V.S.G?
.- Mencione los valores normales de V.S.G. en un adulto sano.
.- Mencione dos o tres condiciones fisiolgicas en las que puede aumentar la V.S.G.
.- Mencione dos o tres condiciones fisiolgicas en las que puede disminuir la V.S.G.
.-Definir el valor de Hematocrito.
.- Cules son los valores normales del hematocrito en un adulto sano?
.- En qu condiciones fisiolgicas puede variar el valor hematocrito?
.- Consignar el valor normal de osmolaridad del plasma sanguneo.
.- Describir las caractersticas ms resaltantes de la sangre coagulada.
.- Describa cmo acta la heparina como anticoagulante.
.- Mencione el valor normal del tiempo de coagulacin sangunea.
.- Mencione el valor normal del tiempo de sangra.
.- Describa el efecto del fro sobre el tiempo de coagulacin.
.- Describa el efecto del calor sobre el tiempo de coagulacin.
.- Describa el efecto del aumento de la superficie de contacto sobre el tiempo de coagulacin.
.- Consignar los valores normales de plaquetas en el plasma sanguneo.
.- Mencione los 3 factores fundamentales que intervienen en el proceso de hemostasia.

91

ANEXOS

92

ANEXO N

TOMA DE UNA MUESTRA DE SANGRE VENOSA


Para la toma de una muestra de sangre, por lo general se utiliza una de las venas del
pliegue del codo. Ya lo has visto en los laboratorios clnicos cmo lo hacen; hoy te tocar
hacerlo a ti. Verifica que todos los elementos o insumos estn listos y a la mano. Colquese
guantes desechables, ya que se trabajar con muestras o fluidos orgnicos.
El voluntario(a) deber estar sentado cmodamente o acostado si es posible. Aplica el
torniquete de goma unos 3 a 4 dedos por encima del pliegue del codo y sujeta con un medio
nudo pero en forma suave. Limpia la zona de extraccin con alcohol isoproplico. El (la) donante
deber abrir y cerrar la mano durante unos segundos y luego la mantendr cerrada para as
lograr visualizar mejor las venas del codo. Recuerda que la aguja de la jeringa deber tener el
bisel hacia arriba. Ahora coloca la aguja en direccin paralela a la vena, perforando la piel y
penetrando con suavidad la vena.
Aspira ahora la jeringa hasta el volumen necesario para la actividad. Retira el torniquete
e indica al (la) donante que deje de apretar el puo. Coloca una torunda de algodn seco
encima de la zona de puncin y retira la aguja. Retira la aguja de la jeringa y deja correr
lentamente la sangre por los bordes de un tubo de ensayo (o un vial) que contenga un
anticoagulante, por lo general heparina (0,5 ml sern suficientes). Agita con suavidad y en
crculos el tubo de ensayo para homogenizar mejor la muestra de sangre con la heparina.

Venas de la fosa cubital (pliegue del codo)


93

Tiene que tener presente que la muestra de sangre puede tomarse de distintas zonas
del cuerpo: capilar o perifrica, venosa y rara vez, arterial. Al tomar una muestra de sangre,
sta se utiliza para valorar distintos parmetros fisiolgicos de nuestro sistema corporal. La
muestra a analizar puede ser la sangre total o una fraccin de la misma (plasma o suero).
La sangre capilar o perifrica se obtiene por lo general de las yemas de los dedos, borde
del lbulo de la oreja y del taln (sobre todo en nios muy pequeos). Debes tener en cuenta
que muchos parmetros a medir pueden variar al tomar una muestra de sangre perifrica
comparada con una venosa. Para tomas de muestras venosas es preferible utilizar agujas o
scalps de calibre 21 para adultos y calibre 22 para nios y neonatos.

94

ANEXO N

CAMPMETRO DE GOLDMANN

95

96

ANEXO N

EL USO DE LOS PROGRAMAS SIMULADORES


EN LA FISIOLOGA MDICA

Hoy

en da es posible mejorar la definicin convencional de una alternativa. Los

desarrollos en la tecnologa y en el pensamiento tico y los ejemplos creativos para reemplazar


el uso de animales alcanzado en todas las disciplinas de las ciencias de la vida colaboran con
dicha mejora. Especficamente, la definicin de alternativas dentro de la educacin se puede
hacer ms rigurosa para que incluya solamente alternativas de reemplazo y puede ser ampliada
para incluir enfoques que impliquen un trabajo imparcial o beneficioso con animales
individuales. Tal definicin va ms all de la reduccin, reemplazo y refinamiento de los
experimentos con animales. Es ms apropiado para la naturaleza del conocimiento y la
adquisicin de tcnicas dentro de la educacin de la ciencias biolgicas y refleja las
posibilidades y oportunidades actuales para el reemplazo.
Consecuentemente, las alternativas son soportes educativos humanitarios y enfoques
pedaggicos que pueden reemplazar el uso de animales o pueden complementar la educacin
humanitaria. Son usadas tpicamente en combinacin para alcanzar los objetivos pedaggicos
existentes y proporcionar otros resultados pedaggicos que no se pueden obtener a travs de
experimentos con animales. stas incluyen pelculas y videos, modelos, maniques y
simuladores, simulacin por computadora en multimedia, cadveres y tejidos de animales
obtenidos de fuentes ticas, trabajo clnico con pacientes y voluntarios, auto-experimentacin
por parte del estudiante, laboratorios in-vitro y finalmente estudios de campo.
La reciente tecnologa digital presenta nuevas oportunidades para desarrollar
creativamente y maximizar el potencial de los recursos pedaggicos basados en videos en
conjuncin con software de computadora. La digitalizacin de videos es sencilla y de bajo costo.
La edicin de videos digitales, incluyendo la incorporacin de comentarios auditivos, fotos y
grficos, su copia y distribucin, pueden lograrse con un hardware de computadora comn, el
software adecuado y tcnicas informticas bsicas. La digitalizacin permite acceder

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rpidamente a video-clips y usarlos con facilidad durante una conferencia o laboratorio prctico
y se pueden proporcionar las copias va Internet. El uso creativo de esta tecnologa puede
proporcionar un soporte para un aprendizaje altamente efectivo.

Modelos, maniques y simuladores


Estas alternativas que no usan animales incluyen tanto objetos sintticos para
capacitacin diseados para simular rganos, miembros o animales completos, como aparatos
para la capacitacin y simulacin de funciones fisiolgicas o tcnicas y escenarios clnicos. Los
trminos descriptivos se usan flexiblemente y a veces de manera intercambiable. En general,
'modelos' se refiere a objetos diseados para observar la estructura anatmica; los 'maniques',
o a veces los 'simuladores', son representaciones reales de animales o seres humanos
diseados para la capacitacin de tcnicas clnicas y los simuladores son herramientas para la
prctica de tcnicas clnicas, ciruga y cuidado crtico, e incluyen maniques computarizados,
dispositivos de capacitacin quirrgica e instructores de suturas.
Los modelos plsticos de animales que muestran sus estructuras internas son
comnmente usados para la enseanza de la morfologa en todo el mundo. Por ejemplo, a
travs de la plastinacin, se puede hacer la diseccin de cadveres de animales verdaderos y
preservarlos. Dentro de la ortopedia en medicina humana y veterinaria, comnmente se usan
huesos de plstico para ilustrar fracturas.
Se pueden usar simuladores sencillos y de bajo costo para la prctica efectiva de las
tcnicas psicomotoras y clnicas tales como coordinacin ojo-mano o visual-manual, manejo de
instrumentos y suturas. Los simuladores de piel y rganos huecos, los simuladores de
anastomosis intestinal, instructores de microciruga y otros estn hechos de plsticos o ltex
especialmente preparados para simular de manera realista los tejidos u rganos relevantes. Por
ejemplo, patologas tales como quistes pueden ser incluidas en ciertos simuladores para
practicar la extirpacin. Incluso las cmaras de las llantas para bicicletas son a veces usadas
como equipo prctico apropiado para el nivel bsico en la adquisicin de tcnicas.

Simuladores dinmicos
Un simulador quirrgico que se usa para la capacitacin de la ciruga mnimamente
invasiva puede abarcar rganos de animales obtenidos de fuentes ticas, sobre los cuales se

98

realice la perfusin y la prctica. Otro bajo desarrollo, usa la perfusin en un cadver de un ser
humano obtenido de fuentes ticas, o parte del mismo para proporcionar una alternativa
realista a la ciruga en seres vivos. Se llenan las venas y arterias dinmicamente de un lquido
teido con una bomba especialmente diseada. sta tambin aplica una presin pulsante que
puede transmitirse a los vasos, y por ende simula confiablemente el rbol vascular, todo dentro
de un sistema cerrado. Se puede realizar disecciones y una variedad de enfoques quirrgicos y
micro-quirrgicos tales como suturas vasculares, anastomosis y reparacin, aplicaciones de
grapas para aneurismas, reseccin de parenquima interno, manejo del sangrado, y
procedimientos endoscpicos. Consecuentemente, se puede practicar una ciruga realista y
potencialmente aplicar la tcnica a fuentes conformadas por cadveres de seres humanos y de
animales.
Otros simuladores incluyen aparatos construidos por profesores para ilustrar procesos
dinmicos tales como la fisiologa de la circulacin. Pueden ser fcilmente creados usando
recursos bsicos de laboratorio tales como bombas, tuberas, vlvulas y lquidos teidos o
pueden ser simuladores de circuito electrnico para la ilustracin de procesos neurofisiolgicos.

Simulacin por computadora en multimedia


La aparicin y aplicacin de tecnologas informticas han revolucionado la ciencia y la
sociedad en su conjunto. Los procesadores de alta velocidad y los poderosos software han
transformado el modo en que se recopila y se procesa la informacin, cmo se moldean y
explican los procesos biolgicos y cmo se transfiere el conocimiento. Las oportunidades
asociadas con el desarrollo de la tecnologa basada en la informtica que contribuyen a una
efectiva educacin de las ciencias de la vida han crecido de manera exponencial en la ltima
dcada. La Internet y el software multimedia disponible en CD-ROM y DVD desempean
impactantes papeles en muchas universidades y tienen aplicaciones en laboratorios y
conferencias, clases individuales y proyectos que pueden ir desde disecciones virtuales y
experimentos en laboratorios bien equipados los cuales los alumnos pueden realizar en un
monitor, hasta simulaciones completas de realidad virtual de tcnicas clnicas con estructuras
tactilares, las posibilidades del aprendizaje asistido por computadora estn limitadas slo por
fronteras tcnicas e imaginativas.

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Mientras que las primeras simulaciones por computadora no eran ms que libros de
texto en disco, los programas interactivos multimedia de hoy integran un laboratorio virtual,
imgenes fotogrficas y grficos en 3D, video clips, e informacin textual para mejorar
significativamente la calidad y profundidad del aprendizaje. Creado por profesores para cumplir
mejor con los objetivos de enseanza de cursos especficos, estos paquetes diseados
profesionalmente pueden facilitar la habilidad de los alumnos para visualizar y comprender
estructuras y procesos, experimentar y aprender estrategias para resolver problemas, y obtener
una serie de otras tcnicas sin la necesidad de sacrificar animales, lo cual es antitico.

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ANEXO N

ENLACES ELECTRNICOS DE INTERS


.- http://www.ucla.edu.ve/La pgina de la Universidad Centroccidental Lisandro Alvarado.
.- http://www.ucla.edu.ve/dmedicin/DEPARTAMENTOS/fisiologia/default.htm/La pgina web de
la Seccin de Fisiologa.
.- http://www.biologia.arizona.edu/ Recursos interactivos en lnea para aprender Biologa.
.- http://www.cellsalive.com/Pgina web donde pueden encontrarse imgenes de clulas vivas
y otros organismos, muy tiles para campos como la educacin y la investigacin biomdica.
.- http://www.investigacion.fcs.uc.edu.ve/Pgina web de la Universidad de Carabobo donde se
encuentran disponibles mltiples simuladores.
.- http://www.physiologyeducation.org/Pgina en ingls sobre cmo aprender a estudiar
fisiologa.
.- http://wps.aw.com/bc_physioex_6/Demo del simulador Physioex.6.
.- http://ocw.unican.es/ciencias-de-la-salud/fisiologia-humana-2011-g367/materiales-de-clase/
Temas de Fisiologa Humana.

Para enlazarse con la respectiva pgina Web hacer: Ctrl+clic para seguir el
vnculo.

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