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BIOQUMICA DE ALIMENTOS

Nombre: .

ENZIMAS
1. Las velocidades iniciales a varias concentraciones de sustrato para una reaccin catalizada por
una enzima son:
[S] (moles/L)
5x10-2
5x10-3
5x10-4
5x10-5
5x10-6
5x10-7

V (umoles/min)
0.25
0.25
0.25
0.20
0.071
0.0096

REGRESION LINEAL
0.3

f(x) = 0.05x - 0.01


R = 0.82

0.25
0.2
Velocidad inicial 0.15
0.1
0.05
0
0

Concentracion del sustrato

BIOQUMICA DE ALIMENTOS

Nombre: .

ENZIMAS
0.3
0.25
0.2
velocidad Inicial 0.15
0.1
0.05
0
0

Concentracion del suatrato

a) cul es la velocidad mxima de esta reaccin? 0.25moles/ min


b) por qu la velocidad inicial permanece constante a una [S] mayor a 5x10-4
Porque todas las enzimas est ocupadas transformando un sustrato
c) cul es la km de la enzima = 1.25x10-5

Vo=

Vmax [ S ]
Km+ [ S ]

Km +

Km=

[ S ]=

Vmax [ S ]
Vo

0.25( 5 x 105 )
5 x 105
0.20

Km = 1.25x10-5

BIOQUMICA DE ALIMENTOS

Nombre: .

ENZIMAS

d) calcular la velocidad inicial para [S] = 1x10-6 y [S]= 1x10-1M

Vo=

Vmax [ S ]
Km+ [ S ]

0.25 x ( 1 x 106 )
Vo=
1.25 x 105 + ( 1 x 106 )

Vo=0.018

Vo=

mol
min

Vmax [ S ]
Km+ [ S ]

0.25 x ( 1 x 101 )
Vo=
1.25 x 105 + ( 1 x 101 )
Vo=0.25

mol
min

2. En el siguiente experimento con la enzima fosfatasa cida de semillas de trigo germinadas se


vari la concentracin de enzima en cada tubo de ensayo con dos concentraciones de sustrato y
se obtuvieron los resultados siguientes:
[enz] (uL)
5
10
15
20
25
30

[FP] 0,1 mM
V= (nmol/min)
1.920
4.059
5.956
7.766
9.479
11.844

[FP] 10 mM
V= (nmol/min)
6.307
13.169
19.145
25.694
32.282
37.882

BIOQUMICA DE ALIMENTOS

Nombre: .
[enz] (uL)

[FP] 0,1 mM
V=
(nmol/min)

1.92

10

4.059

15

5.956

20

7.766

25

9.479

30

11.844

ENZIMAS

[FP] 0,1 mM
15
f(x) = 0.39x + 0.07
R = 1

10

Velocidad inicial

5
0
0

10

15

20

25

30

35

Cantidad de enzima

Vmax=0.3868( nmol/min)

[FP] 10 mM
40
f(x) = 1.27x + 0.24
R = 1

30

Velocidad inicial 20
10
0
0

10

15

20

25

30

Cantidad de sustrato

35

BIOQUMICA DE ALIMENTOS

Nombre: .

ENZIMAS
[enz]
(uL)

[FP] 10 mM
V= (nmol/min)

6.307

10

13.169

15

19.145

20

25.694

25

32.282

30

37.882

Vmax=1.2672(nmol /min)

a) cmo vara la velocidad de reaccin en funcin de la cantidad de enzima aadida?


La segunda velocidad mxima es mayor con 0.8802

(nmol /min) con respecto a la velocidad del

primer ensayo.
b) Qu ocurre al dividir la velocidad registrada por la cantidad de enzima aadida a cada ensayo?
[FP] 0,1 mM [enz] (uL)
V=
(nmol/min)

V/[enz]

1.92

0.384

4.059

10

0.4059

[FP]5.956
10 mM
V= 7.766
(nmol/min)
9.479

[enz]15(uL)
20
25

0.3971
V/[enz]
0.3883

11.844
6.307

305

0.3792
0.3948
1.2614

13.169

10

1.3169

19.145

15

1.2763

25.694

20

1.2847

32.282

25

37.882

30

1.2913
1.2627

La relacin de la velocidad
con respecto a la cantidad de
enzima aumenta y disminuye
a medida que
aumenta la
velocidad durante todo el

3. La enzima aspartato transaminasa cataliza la reaccin:


aspartato + oxoglutarato glutamato + oxaloacetato
Se realizaron los siguientes tres experimentos :
[Asp]=1mM
[OxG]
(mM)
0.002
0.018

Vel
(umol/min)
0.444
2.031

[OxG]=0.02mM
[Asp]
Vel
(mM)
(umol/min)
0.007
0.411
0.048
1.268

[OxG]=0.5mM
[Asp]
(mM)
0.007
0.048

Vel
(umol/min)
0.468
2.017

BIOQUMICA DE ALIMENTOS

Nombre: .

ENZIMAS
0.037
0.063
0.094
0.493

2.781
3.336
3.376
4.324

0.171
0.335
0.547
1.016

1.722
1.850
1.983
2.031

0.171
0.335
0.547
1.016

3.317
3.866
4.123
4.324

a) Calcular Km y Vmax para cada sustrato


[Asp]=1mM
1/[OxG]
(mM)
500.00
55.56
27.03
15.87
10.64
2.03

1/ Vel
(umol/min)
2.2523
0.4924
0.3596
0.2998
0.2962
0.2313

[Asp]=1mM
2.5000
2.0000

f(x) = 0x + 0.25

1.5000
VELOCIDAD

1.0000
0.5000

SI X=0

0.0000
0.00

Y= 0.246
Y=

100.00

300.00

400.00

CONCENTRACION DE SUSTRATO

1
Vmax

Vmax=

200.00

1
Y
1

Vmax=) 0.246 = 4.065 umol/min)

500.00

600.00

BIOQUMICA DE ALIMENTOS

Nombre: .

ENZIMAS

1
Km= X
Km=

1
100

[OxG]=0.02mM
1/[Asp]
(mM)

1/Vel
(umol/min)

142.8571

2.4331

20.8333

0.7886

5.8480

0.5807

2.9851

0.5405

1.8282

0.5043

0.9843

0.4924

[OxG]=0.02mM
3.0000
2.5000
f(x) = 0.01x + 0.49
2.0000
VELOCIDAD

1.5000
1.0000

SI X=0

0.5000

Y= 0.4926
Y=

0.0000
0.0000

1
Vmax

Vmax=

50.0000

100.0000

150.0000

CONCENTRACION DE SUSTRATO

1
Y
1

Vmax=) 0.4926 = 2.030 umol/min)

200.0000

BIOQUMICA DE ALIMENTOS

Nombre: .

ENZIMAS
1
Km= X
Km=

[OxG]=0.5mM
1/[Asp]
(mM)

1/Vel (umol/min)

142.8571

2.1368

20.8333

0.4958

5.8480

0.3015

2.9851

0.2587

1.8282

0.2425

0.9843

0.2313

1
50

BIOQUMICA DE ALIMENTOS

Nombre: .

ENZIMAS

OxG]=0.5mM
2.5000
2.0000

f(x) = 0.01x + 0.22

1.5000
VELOCIDAD
1.0000
0.5000
-

50.0000

100.0000

150.0000

200.0000

CONCENTRACION DE SUSTRATO

SI X=0

Y= 0.0134
Y=

1
Vmax

Vmax=

1
Km= X
Km=

1
16.32

1
Y

1
b) Cambian la Vmax?
Por qu?

Vmax=) 0.0134 = 74.62 umol/min)

Si cambia la velocidad porque se encuentra a diferentes concentraciones del sustrato , es decir a mayor
concentracin de sustrato mayor es la velocidad
c) Explicar que pas en el segn experimento respecto al tercero
la velocidad mxima en el tercer experimento es mayor que la velocidad mxima del segundo
experimento, a pesar de que contiene el mismo sustrato , la diferencia es que se encuentran a diferentes
concentraciones.
d) Cuntos y cules valores de km se debe considerar para describir la afinidad de la enzima por
sus sustratos?

BIOQUMICA DE ALIMENTOS

Nombre: .

ENZIMAS
2 valores que son :
Km =0.01 y Km= 0.02
e) Qu conclusin se podra sacar con esos datos?
Se concluye que mientras menos se el valor de Km mayor ser la afinidad de la enzima por el sustrato.

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