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Nombre: .
ENZIMAS
1. Las velocidades iniciales a varias concentraciones de sustrato para una reaccin catalizada por
una enzima son:
[S] (moles/L)
5x10-2
5x10-3
5x10-4
5x10-5
5x10-6
5x10-7
V (umoles/min)
0.25
0.25
0.25
0.20
0.071
0.0096
REGRESION LINEAL
0.3
0.25
0.2
Velocidad inicial 0.15
0.1
0.05
0
0
BIOQUMICA DE ALIMENTOS
Nombre: .
ENZIMAS
0.3
0.25
0.2
velocidad Inicial 0.15
0.1
0.05
0
0
Vo=
Vmax [ S ]
Km+ [ S ]
Km +
Km=
[ S ]=
Vmax [ S ]
Vo
0.25( 5 x 105 )
5 x 105
0.20
Km = 1.25x10-5
BIOQUMICA DE ALIMENTOS
Nombre: .
ENZIMAS
Vo=
Vmax [ S ]
Km+ [ S ]
0.25 x ( 1 x 106 )
Vo=
1.25 x 105 + ( 1 x 106 )
Vo=0.018
Vo=
mol
min
Vmax [ S ]
Km+ [ S ]
0.25 x ( 1 x 101 )
Vo=
1.25 x 105 + ( 1 x 101 )
Vo=0.25
mol
min
[FP] 0,1 mM
V= (nmol/min)
1.920
4.059
5.956
7.766
9.479
11.844
[FP] 10 mM
V= (nmol/min)
6.307
13.169
19.145
25.694
32.282
37.882
BIOQUMICA DE ALIMENTOS
Nombre: .
[enz] (uL)
[FP] 0,1 mM
V=
(nmol/min)
1.92
10
4.059
15
5.956
20
7.766
25
9.479
30
11.844
ENZIMAS
[FP] 0,1 mM
15
f(x) = 0.39x + 0.07
R = 1
10
Velocidad inicial
5
0
0
10
15
20
25
30
35
Cantidad de enzima
Vmax=0.3868( nmol/min)
[FP] 10 mM
40
f(x) = 1.27x + 0.24
R = 1
30
Velocidad inicial 20
10
0
0
10
15
20
25
30
Cantidad de sustrato
35
BIOQUMICA DE ALIMENTOS
Nombre: .
ENZIMAS
[enz]
(uL)
[FP] 10 mM
V= (nmol/min)
6.307
10
13.169
15
19.145
20
25.694
25
32.282
30
37.882
Vmax=1.2672(nmol /min)
primer ensayo.
b) Qu ocurre al dividir la velocidad registrada por la cantidad de enzima aadida a cada ensayo?
[FP] 0,1 mM [enz] (uL)
V=
(nmol/min)
V/[enz]
1.92
0.384
4.059
10
0.4059
[FP]5.956
10 mM
V= 7.766
(nmol/min)
9.479
[enz]15(uL)
20
25
0.3971
V/[enz]
0.3883
11.844
6.307
305
0.3792
0.3948
1.2614
13.169
10
1.3169
19.145
15
1.2763
25.694
20
1.2847
32.282
25
37.882
30
1.2913
1.2627
La relacin de la velocidad
con respecto a la cantidad de
enzima aumenta y disminuye
a medida que
aumenta la
velocidad durante todo el
Vel
(umol/min)
0.444
2.031
[OxG]=0.02mM
[Asp]
Vel
(mM)
(umol/min)
0.007
0.411
0.048
1.268
[OxG]=0.5mM
[Asp]
(mM)
0.007
0.048
Vel
(umol/min)
0.468
2.017
BIOQUMICA DE ALIMENTOS
Nombre: .
ENZIMAS
0.037
0.063
0.094
0.493
2.781
3.336
3.376
4.324
0.171
0.335
0.547
1.016
1.722
1.850
1.983
2.031
0.171
0.335
0.547
1.016
3.317
3.866
4.123
4.324
1/ Vel
(umol/min)
2.2523
0.4924
0.3596
0.2998
0.2962
0.2313
[Asp]=1mM
2.5000
2.0000
f(x) = 0x + 0.25
1.5000
VELOCIDAD
1.0000
0.5000
SI X=0
0.0000
0.00
Y= 0.246
Y=
100.00
300.00
400.00
CONCENTRACION DE SUSTRATO
1
Vmax
Vmax=
200.00
1
Y
1
500.00
600.00
BIOQUMICA DE ALIMENTOS
Nombre: .
ENZIMAS
1
Km= X
Km=
1
100
[OxG]=0.02mM
1/[Asp]
(mM)
1/Vel
(umol/min)
142.8571
2.4331
20.8333
0.7886
5.8480
0.5807
2.9851
0.5405
1.8282
0.5043
0.9843
0.4924
[OxG]=0.02mM
3.0000
2.5000
f(x) = 0.01x + 0.49
2.0000
VELOCIDAD
1.5000
1.0000
SI X=0
0.5000
Y= 0.4926
Y=
0.0000
0.0000
1
Vmax
Vmax=
50.0000
100.0000
150.0000
CONCENTRACION DE SUSTRATO
1
Y
1
200.0000
BIOQUMICA DE ALIMENTOS
Nombre: .
ENZIMAS
1
Km= X
Km=
[OxG]=0.5mM
1/[Asp]
(mM)
1/Vel (umol/min)
142.8571
2.1368
20.8333
0.4958
5.8480
0.3015
2.9851
0.2587
1.8282
0.2425
0.9843
0.2313
1
50
BIOQUMICA DE ALIMENTOS
Nombre: .
ENZIMAS
OxG]=0.5mM
2.5000
2.0000
1.5000
VELOCIDAD
1.0000
0.5000
-
50.0000
100.0000
150.0000
200.0000
CONCENTRACION DE SUSTRATO
SI X=0
Y= 0.0134
Y=
1
Vmax
Vmax=
1
Km= X
Km=
1
16.32
1
Y
1
b) Cambian la Vmax?
Por qu?
Si cambia la velocidad porque se encuentra a diferentes concentraciones del sustrato , es decir a mayor
concentracin de sustrato mayor es la velocidad
c) Explicar que pas en el segn experimento respecto al tercero
la velocidad mxima en el tercer experimento es mayor que la velocidad mxima del segundo
experimento, a pesar de que contiene el mismo sustrato , la diferencia es que se encuentran a diferentes
concentraciones.
d) Cuntos y cules valores de km se debe considerar para describir la afinidad de la enzima por
sus sustratos?
BIOQUMICA DE ALIMENTOS
Nombre: .
ENZIMAS
2 valores que son :
Km =0.01 y Km= 0.02
e) Qu conclusin se podra sacar con esos datos?
Se concluye que mientras menos se el valor de Km mayor ser la afinidad de la enzima por el sustrato.