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PROFESOR Universidad

PRCTICA:Nacional
DEMIRTHA
LABORATORIO
ROQUE
N
Mayor
deALCARRAZ
San1 Marcos
ASIGNATURA
: deMICROBIOLOGA
APLICADA
Control
de ambientes:
aire, de
personal
Universidad
Per, Decana
Amrica y

superficies

SEMESTRE ACADMICO: 2014- 0


INTEGRANTES
: FARMACIA Y BIOQUMICA
FACULTAD DE
-

CHAMBIE.A.P.
CHOQUE
JOHANNA Y
CAROLINA
FARMACIA
BIOQUMICA
RIOS CONEJO KATHIA ROCIO
MOLINA VILCA PAOLA DEL CARMEN
INFANTES AGUILERA VANESSA GISELA
VARGAS HINOSTROZA ALEX

Jardn Botnico, Febrero del 2014

Control de ambientes: aire, personal y superficies

INTRODUCCIN
En la prctica realizada en el laboratorio de microbiologa se realiz el control de
ambientes, tomando como lugar de muestreo el aula de teora de microbiologa a fin de
minimizar el riesgo de contaminacin por partculas o microorganismos, en aire
personal y superficie,para el control de aire, se colocaron placas cerca de la ventana, el
control de superficie como el personal se utilizo el mtodo del hisopado.
Esta prctica consiste en hacer un control microbiolgico de distintas zonas y lugares
mediante el recuento de bacterias aerobias mesofilas, de mohos y levaduras, para poder
evaluar el grado de eficacia de la limpieza y de la desinfeccin que se realiza en los
ambientes del laboratorio de microbiologa y de los estudiantes.

Agar TSA.- Es un medio de uso general que permite el crecimiento tanto de


microorganismos exigentes como no exigentes, que incluyen bacterias aerobias
y anaerobias. Permite visualizar reacciones hemolticas que producen muchas
especies bacterianas. Tiene por base una fuente proteica (digeridos trpticos,
digeridos proteicos de soja) con una pequea cantidad de hidratos de carbono
naturales, cloruro sdico y 5% de sangre.
Agar ASD.- Tambin llamado Agar Sabouraud. Es por los nutrientes que
contiene y debido a las altas concentraciones de carbohidratos que promueve el
crecimiento de varias levaduras y hongos filamentosos.
Se utiliza comnmente para el aislamiento de hongos patgenos, especialmente
los dermatofitos. Puede contener cicloheximida presente que se utiliza para
seleccionar los dermatofitos, inhibiendo parcial o totalmente el crecimiento de
hongos en el aire, mientras que el cloranfenicol inhibe el crecimiento de
bacterias y algunos hongos filamentosos.
Sin embargo, debe tenerse en cuenta que esta sustancia puede inhibir el
aislamiento de hongos oportunistas tales como Aspergillus sp. Histoplasma
capsulatum en la fase de levadura y ciertas levaduras patgenas de los gneros
Candida y Cryptococcus.

Control de ambientes: aire, personal y superficies

Control de ambientes
Aire
Analistas: Johanna Chambi; Kathia Rios; Paola Molina; Vanessa Infantes; Alex Vargas
Nivel de actividad: Alto
Mtodo de Sedimentacin
Procedimiento. Se dej las dos placas de agar TSA y ASD en el ambiente que se seleccion
Medio de cultivo TSA,ASD
Agar TSA

Tiempo de exposicin de las placas: 20min


Fecha y hora de muestreo de muestreo: 28/01/14 12:30
Fecha y hora de lectura de resultados: 03/02/14 12:40
Lugar de muestreo para el control de aire: Aula de teora del departamento de

microbiologa aplicada (cerca de la ventana)


Area de muestreo: 53.472m3

Medidas:
Largo: 510 cm
Ancho: 660 cm
Altura: 280 cm

Resultados
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Agar ASD

Control de ambientes: aire, personal y superficies

Agar

Resultado de Crecimiento

Resultado en ufc/ cm3

TSA

++

27 ufc/53,472 m3

ASD

+++

Hongos: 3 ufc /53,472 m3


Levaduras: 13 ufc/53,472 m3

Leyenda:
+++: Abundante crecimiento de microorganismos
++: Poco crecimiento de microorganismos

Agar TSA con crecimiento de


bacterias.
Se hizo el conteo de 27
ufc/53407200 cm3

Agar ASD con crecimiento de hongos y levaduras.


Se hizo el conteo de:
Hongos: 3 ufc /53407200 cm3
Levaduras: 13 ufc/53407200 cm3

Personal
Analistas: Johanna Chambi; Kathia Rios; Paola Molina; Vanessa Infantes; Alex Vargas.
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Control de ambientes: aire, personal y superficies

Nivel de actividad: Alto


Mtodo de Hisopado

Procedimiento.-

Utilizado para superficies irregulares, se procede a hisopar el bolsillo de mandil


un rea de 100cm2, Se deja en solucin de 3ml agua peptonada se extrae 0.1ml
del tubo a las dos placas de agar TSA y ASD.
Medio de cultivo TSA, ASD
Volumen de muestra: 3ml
Fecha y hora de muestreo de muestreo: 28/01/14 12:30
Fecha y hora de lectura de resultados: 03/02/14 12:40
Lugar de muestreo para el control del personal: Bolsillo de Mandil de

microbiologa de estudiante Molina Vilca.


Area de muestreo:100cm2

Medidas:
Largo: 10cm
Ancho: 10cm
Area: 100cm2

Resultados
Agar

Resultado de Crecimiento

Resultado en ufc/ cm3

TSA

+++

960 ufc/100 cm2

ASD

++

2040 ufc/100 cm2

Control de ambientes: aire, personal y superficies

Leyenda:
+++: Abundante crecimiento de microorganismos
++: Poco crecimiento de microorganismos

Agar ASD: 2040 ufc/100 cm2, Agar TSA: 960 ufc/100 cm2

Superficies
Analistas:
Chambi;
Paola Molina; Vanessa Infantes; Alex Vargas

Johanna
Kathia Rios;

Nivel de actividad: Alto


Mtodo de Hisopado
Procedimiento.-

Utilizado para superficies no lisas, se procede a hisopar el piso en diferentes


direcciones y en un solo sentido un rea de 100cm 2, Se deja en solucin de 3ml

agua peptonada se extrae 0.1ml del tubo a las dos placas de agar TSA y ASD.
Medio de cultivo TSA, ASD
Volumen de muestra: 3ml
Fecha y hora de muestreo de muestreo: 28/01/14 12:30
Fecha y hora de lectura de resultados: 03/02/14 12:40
Lugar de muestreo para el control de superficie: piso de aula terica del

departamento de microbiologa aplicada.


Area: 100cm2

Control de ambientes: aire, personal y superficies

Medidas:
Largo: 10cm
Ancho: 10cm
Area: 100cm2

Resultados
Agar

Resultado de Crecimiento

Resultado en ufc/ cm3

+++

11940 ufc/100 cm2

++

13680 ufc/100 cm2

TSA
ASD

Leyenda:
+++: Abundante crecimiento de microorganismos
++: Poco crecimiento de microorganismos

Agar TSA: 11940 ufc/100 cm2


Agar ASD: 13680 ufc/100 cm2,

Discusiones
El control del ambiente se realiz en el aula de
teora del departamento de

microbiologa

aplicada, que corresponde a un rea no crtica,


en el caso que se tratara de un rea controlada
segn la Federal Estndar 209E correspondera

Control de ambientes: aire, personal y superficies

a la clase 100000 en donde debera encontrarse menos de 100 ufc/m 3 de aire como
tambin de 3,530,000/m3
Segn los parmetros dados el aula de teora:
El aire posee 27 ufc/53,472 m3 en TSA, en ASD Hongos: 3ufc/53,472 m3 y Levaduras:
13ufc/53,472 m3, siendo la cantidad presente menor de 100ufc/m 3, personal TSA960
ufc/100 cm2 ASD2040 ufc/100 cm2 en bolsillo de mandil y en la superficie se obtuvo
TSA: 11940 ufc/100 cm2 ASD: 13680 ufc/100 cm2.
No solo se evalua la cantidad de microorganismos encontrados si no tambin su
naturaleza y el tipo de riesgo que pueda generar por lo que se utiliza dos tipos de agares
TSA.- Este tipo de agar permite el crecimiento de una amplia gama de
microorganismos aerobios como no aerobios; La aportacin de casena y peptonas de
soja hace el medio muy nutritivo por el suministro de nitrgeno orgnico,
particularmente aminocidos y pptidos de cadena ms larga. La presencia de estas
peptonas en el medio permite el cultivo de una gran variedad de grmenes que crecen
rpidamente, as como los del gnero Candida. Tambin permite el crecimiento de
algunos

grmenes

exigentes

como

Estreptococos,

Pneumococos,

Brucella,

Corinebacterias, Erysipelothrix y Pasteurella. Los Microorganismos del TSA Agar


generalmente los que crecen son; Escherechia coli, Staphylococcus aureus, Bacillus
subtilis, Candida albicans, Aspergillus niger y Pseudomonas aeuroginosa.
En la prctica realizada al ver el resultado del crecimiento de microorganismos en el
agar TSA se podra decir que se trata de Bacillus subtilis, pseudomona aeruginosa y
quizas algunas colonias de Candida albicans, y/o Aspergillus niger.
ASD.- Este agar promueve el crecimiento de varias levaduras y hongos filamentosos. Ya
que el bajo pH del medio resulta favorable para el crecimiento de los hongos y es
ligeramente inhibitorio para las bacterias. Generalmente crecen colonias de Candida
albican, Candida Parapsilosis, Trichophyton mentagrophytes despus de 72 horas de la
incubacin; si en el agar hay presencia de cloranfenicol entonces hay crecimiento de
Aspergillus brasiliensis y se inhibe el crecimiento de Escherichia coli.
En la vista de la placa con agar ASD se puede indicar que hay presencia de Candida
albicans debido a que estas se caracterizan por presentar colonias cremosas de color
blanco amarillento, lustrosas, poco elevadas y de bordes bien definidos, como se ve en
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Control de ambientes: aire, personal y superficies

los resultados obtenidos. Tambin se puede indicar la presencia de Aspergillus flavus,


debido a que las colonias se caracterizan por ser de color verde amarillo, la textura de
las colonias es pulverulenta con surcos radiales, rugosas o granulosas, ocasionalmente
algodonosas en el centro o margen de la colonia. La presencia de pelculas se puede
deber a que algunas especies de Candida, Geotrichum

y Trichosporon producen una

pelcula sobre la superficie del medio. Pero la identificacin exacta de levaduras y


hongos presentes en el medio de ASD se podra determinar con mejor exactitud con las
pruebas bioqumicas.

Conclusiones

Control de ambientes: aire, personal y superficies

Se concluye la presencia de hongos y levaduras en el ambiente del aula de


teora de microbiologa proviene tanto del interior y alrededores en TSA 27
ufc/53407200 cm3, en ASD Hongos: 3ufc/53407200cm3 y Levaduras:
13ufc/53407200cm3 respecto al vestuario del personal se tomo muestra en
bolsillo de mandil obtenindose TSA960 ufc/100 cm 2 ASD2040 ufc/100 cm2 y
en la superficie se obtuvo Agar TSA: 11940 ufc/100 cm 2 Agar ASD: 13680
ufc/100 cm2.

La presencia de microorganismos en el aire, superficie y personal indica que la


limpieza o desinfeccin del ambiente de trabajo, como del vestuario no se
realiz de manera adecuada con efectividad.

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

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Control de ambientes: aire, personal y superficies

1. Manual de Procedimientos y Tcnicas de Laboratorio para la Identificacin de


los principales Hongos oportunistas causantes de Micosis Humanas.
MINISTERIO DE SALUD- INSTITUTO NACIONAL DE SALUD. ISBN:
978-9972-857-62-1
(Lima,
2007)
disponible
en:
http://www.ins.gob.pe/insvirtual/images/otrpubs/pdf/Manual%20Hongos.pdf
2. BBL Sabouraud Dextrose Agar with Chloramphenicol. ATCC is a trademark of
the American Type Culture Collection. L007492 (10 de diciembre 2012).
Disponible en: https://www.bd.com/resource.aspx?IDX=22894
3. Identificacin de levaduras. Revista Iberoamericana de Micologa - ISBN: 97884-611-8776-8 Mara Jos Linares Sicilia, Francisco Sols Cuesta. (2007).
Disponible en: http://www.guia.reviberoammicol.com/Capitulo11.pdf

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