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Olga Busto
Qumica Analtica Enolgica y de los Alimentos. Unidad de Enologa del CeRTA
Departamento de Qumica Analtica y Qumica Orgnica. Facultad de Enologa
Universidad Rovira i Virgili, Tarragona (Espaa)
Tradicionalmente, el aroma de los alimentos se ha analizado empleando tcnicas de anlisis sensorial
y/o tcnicas cromatogrficas con sistemas de deteccin universal como la espectrometra de
masas(MS) o la ionizacin de llama (FID). Estas ltimas han sido, adems, las que han permitido
cuantificar los componentes individualizados que constituyen la fraccin voltil del alimento. En los
ltimos aos, otras tcnicas como la cromatografa de gases con deteccin olfatimtrica (GCO) han
complementado los resultados de las tcnicas ms clsicas, puesto que han permitido cuantificar los
componentes voltiles pero, adems, identificar aquellos que aportan alguna nota aromtica al
alimento en cuestin. Es decir, la GCO podra considerarse un punto intermedio entre el anlisis
sensorial y las tcnicas cromatogrficas. No obstante, esta tcnica, como tcnica cromatogrfica que
es, adolece de una falta de rapidez analtica que la hace poco til en control de calidad. La nariz
electrnica, sin embargo, s posee esta caracterstica, puesto que procesa la fraccin voltil del
alimento (y, por lo tanto, el aroma) de forma global, igual que hace la nariz humana, permitiendo
clasificar los diferentes alimentos en funcin de su similitud aromtica, aunque no determina la
composicin de dicho aroma.
La nariz electrnica se define como un instrumento dotado de sensores qumicos y de un programa
quimiomtrico de reconocimiento de modelos, que es capaz de reconocer y comparar olores
individuales o complejos. Al igual que el sistema olfativo humano, su objetivo es relacionar el aroma
que se percibe con una respuesta que, tras ser almacenada en la memoria, servir como modelo en
ulteriores anlisis (figura 1).
Todos los sistemas de nariz electrnica que existen actualmente en el mercado constan de tres partes
bien diferenciadas. La primera de ellas implica la toma de muestra que, en este caso, y dadas las
caractersticas de volatilidad de la misma, se fundamentar en la tcnica del espacio de cabeza
(headspace) esttico. Los voltiles, concentrados por calentamiento en la fase vapor que est sobre la
muestra (lquida o slida) son introducidos en el sistema de sensores que medir las diferentes
propiedades fsico-qumicas de los componentes del aroma, convirtiendo el olor en la seal mensurable
que un ordenador se encargar de procesar mediante tcnicas quimiomtricas, proporcionando un
grfico que representar la huella digital de dicho olor. As pues, toma de muestra, conjunto de
sensores y sistema de tratamiento de datos sern las partes esenciales de cualquier tipo de nariz
electrnica comercial.
La diferencia fundamental entre los sistemas de olfato electrnico reside en la tipologa de los sensores
empleados. Los llamados sensores de gases son los ms consolidados. Estos sensores, que funcionan
en batera (sistemas multisensor) y estn constituidos por diferentes materiales (xidos metlicos,
polmeros conductores, cristales piezoelctricos, etc.), modifican sus propiedades elctricas cuando
interaccionan con los compuestos voltiles, proporcionando una huella olfativa de la fraccin voltil que
han percibido. Estos sistemas han demostrado ampliamente su utilidad para el anlisis de alimentos,
pero no son adecuados para analizar bebidas alcohlicas por la saturacin que conlleva la presencia
mayoritaria del etanol en la fraccin voltil.
En los ltimos aos, ha aparecido en el mercado un nuevo tipo de nariz electrnica, basado en la
espectrometra de masas (HS-MS). Mediante esta tcnica, cuya capacidad analtica ha sido
suficientemente probada, se consigue obtener un espectro que equivaldra a un multisensor con tantos
sensores como iones formados. Para este tipo de sistema, la presencia de componentes como el etanol
no supone un problema, puesto que las interferencias pueden soslayarse prescindiendo de analizar sus
iones caractersticos. Otra ventaja sustancial es el hecho de que no sea necesario ningn
acondicionamiento del sensor ni de la muestra, con lo que es una tcnica muy competitiva para el
control de calidad. Adems, permite obtener informacin adicional de la composicin de la fraccin
voltil, ya que los iones contienen informacin directa de las molculas, con lo que puede mejorarse la
sensibilidad y la selectividad de la medida.
As pues, sea cual sea el tipo de sensor empleado, se tratar de sistemas multisensor, con lo que la
respuesta ser una matriz de datos multidimensional (figura 2) que las herramientas quimiomtricas
(anlisis de agrupaciones, tcnicas de clasificacin, redes neuronales, anlisis de componentes
principales, etc.) se encargarn de transformar en informacin analtica de utilidad (figura 3).
Aplicaciones
Son muchas y muy variadas las aplicaciones que han aparecido de la nariz electrnica en el control de
calidad alimentario. Algunas de ellas, desarrolladas por nuestro grupo de investigacin con un sistema
de nariz electrnica basado en la tcnica HS-MS, han abierto las puertas al anlisis del aroma de vinos
y aguardientes, bebidas que, por su elevado contenido en etanol, tenan vetado el acceso a estas
tecnologas.
Una de las aplicaciones ha consistido en ver la efectividad del sistema HS-MS como emulador de un
panel de catadores expertos que llevan a cabo un test triangular. El objetivo de este ensayo es
distinguir, entre tres muestras (dos de ellas iguales), cul es la que es diferente. Para este estudio se
han empleado dos vinos, uno procedente de la DO Tarragona y otro de la DOC Priorat. Ambos vinos se
han analizado, aleatoriamente, por sextuplicado, con lo que se han procesado un total de 18 muestras,
12 de ellas iguales entre s. El tiempo total de anlisis para cada muestra ha sido de solamente 10
minutos. Como puede apreciarse en el anlisis de agrupaciones, las muestras de Tarragona son muy
similares entre s y, lo que es ms importante, son diametralmente diferentes a las del Priorat.
En esta misma lnea de investigacin, otros estudios han consistido en diferenciar vinos segn su DO o
su variedad. En la figura 4A puede apreciarse, empleando en esta ocasin la tcnica de anlisis de
componentes principales (PCA), vinos de dos zonas geogrficas colindantes y obtenidos con las
mismas variedades (garnacha y cariena). En la figura 4B, por su parte, puede apreciarse el PCA que
diferencia las variedades Merlot y Cabernet sauvignon, independientemente de la zona geogrfica que
procedan.
Otras aplicaciones cualitativas, realizadas con narices electrnicas basadas en el sistema clsico de
sensores, han permitido diferenciar alimentos como el caf (incluso tratndose de mezclas de las
mismas variedades) o los aceites de diferentes DO espaolas y con distintas caractersticas nutritivas y
organolpticas.
Tambin existe la posibilidad de emplear tcnicas de regresin (por ejemplo, PLS) con el fin de
correlacionar la respuesta de la nariz electrnica (por ejemplo, espectro de masas), con el valor de una
propiedad (por ejemplo, concentracin de una determinada sustancia). As se consigue disponer de un
modelo matemtico (una recta en el caso ms simple) que permite determinar, por interpolacin, el
valor que tendra esa propiedad para una muestra desconocida. As, por ejemplo, nuestro grupo de
investigacin ha podido establecer, con un elevado grado de precisin, una buena correlacin entre los
meses de aejamiento de rones cubanos y los correspondientes espectros de masas de la fraccin
voltil (figura 5). Esto quiere decir que, si se analizara una muestra de ron problema, podra
precisarse, con un error en este caso inferior a 3 meses (para un intervalo total de 40 meses de
aejamiento), cul es el tiempo que ese ron ha permanecido en barrica.
Todos los estudios descritos hasta aqu podramos calificarlos como estudios cualitativos (o, como
mximo semicuantitativos) basados en el procesado de los datos obtenidos a partir del sistema
multisensor. sta es la aplicacin ms importante que han tenido hasta este momento los sistemas de
olfaccin electrnica. Las aplicaciones cuantitativas, siempre reservadas a los sistemas de anlisis
cromatogrfico, no haban sido abordadas hasta que los sistemas HS-MS han irrumpido en el mercado,
posiblemente debido a que el inters principal que han tenido los sistemas de nariz electrnica ha sido
el emular el sistema olfativo humano el cual, ciertamente, cualifica los aromas, sin cuantificarlos
estrictamente.
La cuantificacin de componentes aromticos no era, pues, una cuestin primordial, sobre todo porque
implicaba un alargamiento excesivo del anlisis. No obstante, el hecho de que los sistemas HS-MS
permitan obtener datos de la estructura misma de las molculas, as como su abundancia, permite
abordar estudios cuantitativos rpidos, si se trabaja con tcnicas de regresin (PLS) de forma
equivalente a la descrita para el estudio de aejamiento de los rones. Abordar el problema de la
cuantificacin mediante sistemas de nariz electrnica es necesario si se desea controlar, por
ejemplo,defectos aromticos (off flavours) que no deberan estar presentes en las muestras a analizar
y que, si lo estn, es a bajos niveles de concentracin. Tal es el caso del llamado sabor a corcho (cork
taint), defecto que preocupa al sector enolgico (tanto al productor de vinos como al de tapones de
corcho para las botellas), principalmente debido a su bajo umbral de deteccin sensorial.
Uno de los responsables del este defecto es el 2,4,6-tricloroanisol (TCA). Cuando se trabaja con el
Mart M.P.; Busto O.; Guasch J.: Anlisi de l'aroma del vi mitjanant un nas electrnic, Segona
Trobada de Joves Investigadors dels Pasos Catalans. Societat Catalana de Qumica, Girona, 2002.
Mart M.P.; Mestres M.; Busto O.; Guasch J.: Aplicacin de la nariz electrnica en el control de calidad
de vinos, Alimentacin, Equipos y Tecnologa 2000; 9: 129-133.
Mart M.P.; Mestres M.; Busto O.; Guasch J.: Aplicacin de la nariz electrnica al anlisis del aroma
del vino, XXIX Reunin Cientfica del Grupo de Cromatografa y Tcnicas Afines. Alcal de Henares,
2000.
Mielle P.: Electronic noses: towards the objective instrumental characterization of food
aroma, Trends in Food Science & Technology, 1996; 7: 432-438.
Schneider R.; Baumes R.; Bayonove C.; Razungles A.: Volatile compounds involved in the aroma of
sweet fortified wines (vins doux naturels) from Grenache noir, J Agric Food Chem 1998; 46: 32303237.
Strike D.J.; Meijerink M.G.H.; Koudelka-Hep M.: Electronic noses: a mini review,Fresenius J Anal
Chem 1999; 364: 499-505.
Figura 2 Tipo de respuestas obtenidas con olfatos artificiales: a) sensores de gases, b) espectrometra de masas
Figura 3 Anlisis de agrupaciones de vinos de las DOC Priorat [1] y DO Tarragona [2]
Figura 4 a) PCA que diferencia los vinos procedentes de la DOC Priorat de los de la DO Terra Alta. b) PCA que
diferencia las variedades merlot y cabernet sauvignon de diferentes zonas geogrficas
Figura 6 PLS que correlaciona el valor predicho con el valor real de la concentracin de TCA condiciones, en el
ao 2001
CIENCIA Y TECNOLOGA
OTROS
ARTCULOS
CIENTFICOS
El aroma del vino se analiza tradicionalmente mediante mtodos sensoriales o por cromatografa de
gases. Ambas metodologas analticas son lentas y caras, por lo que el inters por mtodos rpidos se
ha incrementado en los ltimos tiempos. Entre otros, la nariz electrnica (e-nose) destaca por su alta
sensibilidad, rapidez, bajo coste y una mnima, o ninguna, preparacin de la muestra. 1 Las primeras
narices electrnicas aparecieron en el mercado en la dcada de los noventa y hasta el momento
presente han tenido una amplia aplicacin en el anlisis y caracterizacin de alimentos. 2-7
En este artculo se revisan las aplicaciones de la nariz electrnica en el sector vitivincola, pero para
ello es necesario conocer como funciona una nariz electrnica. Adems se debe tener presente que en
anlisis de alimentos la tendencia actual es el desarrollo de mtodos simples y rpidos, ya que ello
facilita el anlisis del gran nmero de muestras que son necesarias para la correcta caracterizacin un
tipo de vino, una variedad o un proceso tecnolgico.
El instrumento
La nariz electrnica es un instrumento, dotado de sensores qumicos y de un programa quimiomtrico
de reconocimiento de modelos, capaz de reconocer y comparar olores individuales o complejos de las
sustancias.8Est diseada para detectar compuestos voltiles y consta de un sistema de muestreo, un
sistema de deteccin (sensores) y un sistema de procesamiento de datos (fig. 1).
Sistema de muestreo: El muestreo es una etapa crtica y cuya importancia es a veces ignorada. Se
utiliza para llevar una muestra representativa de los compuestos voltiles al sistema de deteccin. Se
han utilizado diferentes tcnicas,2 pero normalmente se utiliza la tcnica del espacio de cabeza (HS),
ya que es rpido y automatizable. La muestra (vino), se coloca en un vial hermticamente cerrado, se
deja que se alcance el equilibrio entre la fase lquida (vino) y la gaseosa (compuestos voltiles del
vino) y una fraccin de esta fase voltil se inyecta automticamente en el sistema de deteccin.
Sistema de deteccin: Hay dos tipos de instrumentos. La nariz electrnica clsica utiliza un
conjunto de sensores de gases.2 Estos sensores, normalmente entre 8 y 32, interaccionan de forma no
especfica con los compuestos voltiles. Se utilizan diferentes tipos de sensores 5 que responden de
forma no especfica a diferentes propiedades de las molculas (polaridad, estructura, propiedades
redox, tamao, conductividad, etc.). El conjunto de las respuestas de todos sensores es el perfil
(fingerprint) caracterstico de la de la muestra (vino) analizada.
Modernamente se han desarrollado una nariz electrnica basada en la espectrometra de masas (MS)
como sistema de deteccin.4,6 En sta la fraccin voltil del HS se inyecta en la cmara de ionizacin
del MS donde todas las molculas de los compuestos voltiles del aroma son ionizadas y fragmentadas
y sus fragmentos son caracterizados por su relacin masa/carga. En este caso el perfil caracterstico de
cada muestra obtenido es el espectro de masas global de la misma.
Sistema de procesamiento de datos: En la nariz electrnica para cada muestra se obtiene un
perfil caracterstico que est constituido por una serie ms o menos larga de datos, que corresponden
a las respuestas de los diferentes sensores de gases utilizados o a las abundancias de los diferentes
fragmentos obtenidos en el MS. As, cada muestra est definida en un espacio de n coordenadas
(variables) y para poder extraer la informacin se utilizan tcnicas quimiomtricas. Se utilizan tcnicas
de reconocimiento de modelos, que permiten buscar similitudes/diferencias entre las muestras y con
las muestras similares se que pueden establecer patrones de clasificacin, todo ello sin necesidad de
identificar ni cuantificar ninguno de sus compuestos individuales.
Proceso analtico
La gran utilidad de la nariz electrnica es que es la nica tcnica capaz de valorar, de forma muy
rpida, propiedades de las muestras que dependan de la fraccin voltil, como, por ejemplo, la
variedad de una vinfera o un defecto aromtico.
De acuerdo con la figura 1, el proceso analtico se inicia con muestras representativas de la propiedad
que queramos estudiar. Se colocan las muestras en viales, se puede adicionar NaCl para favorecer la
volatilidad de los compuestos del aroma y se cierran hermticamente. Se dejan equilibrar y se inyectan
automticamente en el sistema de deteccin donde se obtiene el perfil caracterstico de cada una de
las muestras. Con todas las muestras (Mm) se obtiene una matriz de datos (fig. 2) formada por las
respuestas (Xij) de todos sensores (Sn), ya sean las respuestas elctricas de los sensores de gases o la
abundancia de los fragmentos del espectro de masas. En esta matriz cada muestra (vino) est definida
por una fila de datos.
La matriz de datos obtenida (Xij) contiene informacin de todas las molculas de los compuestos
voltiles de las muestras, que pueden tener propiedades diferentes (P m). En el caso de los vinos
pueden ser la variedad, el origen geogrfico, la denominacin de origen, la vinificacin, la crianza, un
Estudios sobre la autenticidad del origen de los quesos Emmental han sido desarrollados por
Pillonel et al. (48) y Grsoy et al. (42), quienes clasificaron con alta precisin los quesos
Emmental en funcin del pas de origen, utilizando narices electrnicas comerciales. El
modelo de clasificacin propuesto por estos autores fue validado mediante el anlisis de
rplicas de quesos, obteniendo precisiones superiores al 90% para la diferenciacin entre los
quesos suizos y los quesos provenientes de otros pases.
Otros trabajos asociados con las aplicaciones de la nariz electrnica en el control de calidad
de quesos bien documentados en la literatura, tratan sobre la distincin de diferentes
variedades de quesos (39, 42, 49), la identificacin de la microbiota de varios tipos de
quesos (50), las caractersticas del aroma generado por diversas bacterias lcticas en
diferentes variedades de quesos (51-55), la caracterizacin del aroma del queso Cheddar
(56-59), la identificacin de off-flavours del queso Emmental (60-61), y la evaluacin y
clasificacin de quesos (62).
Aplicaciones de la nariz electrnica en el anlisis de leches fermentadas
Los estudios sobre las aplicaciones de la nariz electrnica en el control de calidad de leches
fermentadas no son muy abundantes, y el principal objetivo de los satisestudios disponibles
ha sido el control del proceso de la fermentacin de la leche. Cimander et al. (63)
monitorearon el proceso de elaboracin de yogur empleando una nariz electrnica
compuesta por 10 sensores MOFSET y 19 sensores de xido de estao. Estos autores
indicaron que luego del tratamiento de los datos de la nariz electrnica utilizando redes
neuronales artificiales (ANN), fue posible predecir en tiempo real el valor de pH, as como las
concentraciones de galactosa, lactosa y lactato, durante el proceso de fermentacin de la
leche. Resultados similares fueron obtenidos por Navratil et al. (64), quienes combinando la
tecnologa de espectrometra de infrarrojo cercano (NIR) con nariz electrnica, reportaron la