Está en la página 1de 5

Bacteriología Veterinaria

Agentes químicos no específicos

En Medicina Veterinaria para manipular el medio ambiente y oponerse a la transmisión de las bacterias e impedir su penetración al huéspedes utilizan agentes químicos no específicos, cuando se realiza la operación de eliminación de bacterias hablamos desinfección y antisepsia.

La desinfección, es la destrucción de microorganismos sobre objetos inanimados, todos los desinfectantes son activos contra células vegetativas, pero no contra esporas.

La antisepsia, es el proceso de inactivación o destrucción de las bacterias que se encuentran sobre los individuos

Dentro de los compuestos químicos podemos encontrar agentes esterilizantes, desinfectantes y antisépticos. La efectividad de estos agentes químicos y su acción antimicrobiana depende de varios factores:

1.

Concentración: varía con el tipo de agente y de microorganismo, pues una misma concentración del agente puede producir un efecto diferente en distintos microorganismos.

2.

Tiempo: los microorganismos no son susceptibles a un agente en la misma forma, por lo que no todos los microorganismos mueren al mismo tiempo.

3.

pH: afecta tanto a los microorganismos como a los agentes químicos. El aumento de pH por encima de 7 incrementa la carga negativa de los microorganismos afectando la concentración del agente sobre la célula. El pH determina el grado de disociación y la efectividad del agente químico, pues a menor disociación mayor permeabilidad y mayor efectividad.

4.

Temperatura: las reacciones

químicas

se

aceleran

al

aumentar

la

temperatura. Cada 10ºC aumenta al doble la actividad bactericida y con algunos

desinfectantes como los fenoles la actividad aumenta 5 o 10 veces

 

5.

Naturaleza del microorganismo: Dependiendo del tipo y número de microorganismos, de la fase en que se encuentren dentro de la curva de crecimiento y de la presencia de estructuras como esporas y cápsula, la actividad de un desinfectante puede verse afectada en forma significativa.

6.

Presencia de material extraño: La presencia de material orgánico (sangre, suero, exudado purulento, heces y residuos de alimento) pueden inactivar a los desinfectantes por alguno de los siguientes mecanismos:

- Absorción del compuesto por proteínas coloidales

- Formación de compuestos inerte o menos activos

- Unión de compuestos a grupos activos de proteínas extrañas, los más afectados son las anilinas, mercuriales y detergentes catiónicos.

Mecanismo de acción de los agentes químicos no específicos

Los desinfectantes y/o antisépticos actúan por inducción de cambios químicos en diferentes componentes de la célula bacteriana pudiendo clasificarse:

a) Daño a la membrana celular

Bacteriología Veterinaria

b) Desnaturalización o modificación de los grupos funcionales de las proteínas

a) Agentes químicos que dañan la membrana celular

Los agentes que producen daño a la membrana afectan la organización de dicha estructura, así como sus funciones, propiciando la salida de metabolitos y lisis celular.

a.1) Agentes surfactantes, poseen grupos hidrofílicos e hidrofóbicos, intervienen alterando la tensión superficial y afectan principalmente a los lípidos de la membrana. Pueden ser aniónicos, catiónicos, no iónicos y anfotéricos.

Sus principales ventajas se hallan en que son inodoros, no tiñen, no son corrosivos de metales, estables, no tóxicos y baratos.

a) Catiónicos: Son los más eficaces, en ellos la parte hidrofóbica es neutralizada por la parte

hidrofílica, la cual esta cargada positivamente sales de amonio cuaternarias. Tienen mayor actividad a pH alcalino y los Gram + son más susceptibles. b) Aniónicos: Jabones y ácidos grasos. Estos se disocian produciendo iones cargados negativamente, causando alteraciones en la membrana celular. Son más efectivos en pH ácido, Tienen mayor actividad a pH ácido y son eficaces contra Gram +.

c) Anfótericos: Actúan como catiónicos o aniónicos según el pH, se ionizan en contacto con el agua dando sales amino y cediendo cationes, aniones e iones ambivalentes

d) No iónicos: no son tóxicos y algunos como el Tween 80 se usan como aditivos en los medios

de cultivo para promover el crecimiento

a.2) Solventes orgánicos: Dentro de los diferentes compuestos que integran este grupo, los alcoholes son los que ofrecen mayor eficacia. La acción de los alcoholes es debida a la desorganización que causan en la membrana celular, específicamente al penetrar en la cadena de hidrocarburos de los lípidos. El uso de los alcoholes se ve limitado debido a su incapacidad para destruir esporas. Los alcoholes de cadena corta son los más efectivos.

Los alcoholes alifáticos son utilizados como desinfectantes cutáneos debido a su acción bactericida y a su capacidad para remover lípidos, Se utilizan en concentraciones del 50 al 70%. los más utilizados son el etanol e isopropílico.

b) Agentes químicos que desnaturalización o modificación de los grupos funcionales de las

proteínas

Las proteínas son constituyentes esenciales para la estructura y funcionamiento celular, cada proteína tiene una configuración particulada la cual es importante para el correcto funcionamiento de la misma.

b.1) Compuestos fenólicos: Además de los efectos directos sobre la membrana citoplasmática, los fenoles producen precipitación de proteínas, afectando así a enzimas deshidrogenasas y oxidasas que están presentes en la membrana. Por su solubilidad en agua se combinan con detergentes emulcificantes, aumentando su solubilidad. El fenol no es usado a menudo como desinfectante por su olor desagradable, por ser muy irritante y por el resido que queda luego de tratar las superficies. Los derivados del fenol más utilizados son el hexaclorofeno (compuesto difenílico).

b.2) Ácidos y álcalis: La actividad antimicrobiana de estos compuestos está dada por la acción de sus iones de hidrógeno e hidroxilo libres, sobre las moléculas no disociadas del microorganismo. Otro mecanismo de acción es por la alteración del pH del medio en donde se encuentran los microorganismos. La potencia de los ácidos inorgánicos y de los álcalis esta dada por la capacidad

Bacteriología Veterinaria

de disociación que presenten. Dentro de los compuestos alcalinos más utilizados se encuentra: la cal, sosa cáustica, carbonato de sodio.

b.2.1) La cal viva u oxido de calcio (CaO), al combinarse con agua produce la cal apagada, o hidróxido de calcio, el cual tiene un poder de desinfección muy adecuado, se usa como lecherada de cal en un concentración del 10 al 20%. Esta se debe utilizar dentro de las 10 horas siguientes a su preparación.

b.2.2) La sosa cáustica, se utiliza en soluciones del 2-4%, en soluciones calientes es más efectiva, en solución su actividad se mantiene por varios días, es muy corrosiva, por lo que se limita su uso.

b.2.3) El carbonato de sodio se usa en solución 4-5%, es menos corrosivo que la sosa.

b.2.4) Los ácidos orgánicos, aunque presentan menor capacidad de disociación que los ácidos inorgánicos, en ocasiones son más potentes. El ácido benzoico es más potente que el ácido clorhídrico. El ácido benzoico se usa en la preservación de alimentos, demostrando que no solo los iones son activos, sino también la molécula completa y sus radicales orgánicos.

b.3) Metales pesados:

Las sales solubles de mercurio, del arsénico, de la plata y de otros metales pesados son dañinos para algunas enzimas, ya que reaccionan con los grupos sulfhídricos de los residuos de cisteína, produciendo así mercapéptidos. La reacción puede ser reversible si es que en el medio se encuentran grupos sulfhídricos libres como los proporcionados por el tioglicolato de sodio. Existen varios compuestos a base de mercurio, tales como el cloruro de mercurio que es de uso limitado por ser tóxico, y los mercuriales orgánicos como el timerosal, el nitrofenilmercurio, el metafen y el merthiolate que se utilizan como

Los compuestos a base de plata se usan como antisépticos, se presentan en forma de sales solubles o plata coloidal. Los compuestos a base de plata son bastante eficaces como bactericidas, pero son muy irritantes y cáusticas. Los compuestos coloidales están formados por la unión de plata a proteínas, a partir de los cuales los iones de plata son liberados lentamente, son bacteriostáticos, se usan con frecuencia en bacteriología.

b.4) Agentes oxidantes:

Dentro de este grupo se encuentran los halógenos. Actúan sobre los grupos funcionales sulfhídrico (-SH) de las enzimas, oxidándolos a grupos disulfuro (S-S).

b.4.1) Halógenos: Los agentes más empleados de este grupo son el cloro, el yodo, peroxido de hidrógeno y permanganato de potasio.

b.4.1.1) Iodo: Es un agente oxidante que modifica grupos funcionales de proteínas y ácidos nucleicos. Inactiva proteínas y enzimas por oxidación de los grupos -SH a S-S, pudiendo atacar también grupos amino, indoles, etc. Se utiliza como desinfectante de la piel (tintura de iodo: yodo molecular 2% y yoduro de sodio 2% en alcohol), aunque es irritante. Es efectivo contra esporas en una concentración de 1600 ppm de iodo libre.

b.4.1.2) Cloro: El cloro, los hipocloritos y las cloraminas son desinfectantes que actúan sobre proteínas y ácidos nucleicos de los microorganismos. Oxidan grupos -SH, y atacan grupos aminos, indoles y al hidroxifenol de la tirosina. El producto clorado más utilizado en desinfección es el hipoclorito de sodio (agua lavandina), que es activo sobre todas las bacterias, incluyendo esporas, y además es efectivo en un amplio rango de temperaturas. La actividad bactericida del hipoclorito de sodio se debe al ácido hipocloroso (HClO) y al Cl 2 que se forman cuando el hipoclorito es diluido en agua. La actividad germicida del ion hipocloroso es muy reducida debido a que por su carga no puede penetrar fácilmente en la célula a través de la membrana citoplasmática. En cambio, el

Bacteriología Veterinaria

ácido hipocloroso es neutro y penetra fácilmente en la célula, mientras que el Cl 2 ingresa como gas.

El hipoclorito de sodio se comercializa en soluciones concentradas (50-100 g/l de Cloro activo), a pH alcalino y en envases oscuros que favorecen su estabilidad, pero es inactivo como desinfectante. A causa de esto, es que deben utilizarse soluciones diluidas en agua corriente (que tiene un pH ligeramente ácido), con el objeto de obtener ácido hipocloroso. Generalmente, se utilizan soluciones con una concentración del 0.1-0.5% de Cloro activo. Su actividad está influida por la presencia de materia orgánica, pues puede haber en las medias sustancias capaces de reaccionar con los compuestos clorados que disminuyan la concentración efectiva de éstos.

b.4.1.3) Peroxido de hidrógeno: Comúnmente denominado agua oxigenada, es un oxidante activo que se descompone fácilmente con el agua y oxígeno. Se utiliza principalmente como antiséptico en concentraciones del 3%. La susceptibilidad de las bacterias depende de la producción de la enzima catalasa, la cual inactiva al agua oxigenada.

b.4.1.4) Permanganato de potasio: Es un oxidante energético, su actividad aumenta en soluciones ácidas. Una solución de permanganato de potasio al 1% y ácido clorhídrico al 1.1% es capaz de destruir las esporas del ántrax en 30 segundos. Uno de sus principales usos es la desinfección de locales e incubadoras contaminadas, en combinación con el formol. Se combina con el formol en una proporción de 18 grs del primero y 36 ml del segundo por cada 3 m 3 a desinfectar. Al mezclar los reactivos de inmediato se empieza a producir un gas altamente microbicida

b.5) Agentes alquilantes: El formaldehído y el oxido de etileno remplazan a los iones de hidrógeno, uniéndose covalentemente a los grupos –NH 2 y OH, los cuales son abundantes en las proteínas y en los ácidos nucleicos

b.5.1) Aldehídos: Son agentes alquilantes que actúan sobre proteínas, lo que provoca modificación irreversible de enzimas e inhibición de la actividad enzimática Adición nucleofílica de grupos -NH 2 y -SH). Se utilizan como desinfectantes y esterilizantes. Destruyen esporas. El glutaraldehído es el único esterilizante efectivo en frío. El formaldehído como gas se utiliza para descontaminar edificios, ambientes, etc. El formaldehído gaseoso se obtiene por calentamiento del paraformaldehído (OH (CH 2 O) n -H), lo que produce las despolimerización de este compuesto.

b.5.2) Oxido de Etileno: Es un agente alquilante que se une a compuestos con hidrógenos lábiles como los que tienen grupos carboxilos, amino, sulfhídricos, hidroxilos, etc. Es utilizado en la esterilización gaseosa, generalmente en la industria farmacéutica. Sirve para esterilizar material termosensibles y plástico, equipos electrónicos, bombas cardiorrespiratorias. Es muy peligroso por ser altamente inflamable y explosivo, y además cancerigeno

b.6) Colorantes: Dentro del grupo de los colorantes las anilinas y acridinas tienen actividad bacteriostática. Tienen gran afinidad por el ácido fosfórico de los ácidos nucléicos. Interfieren en la síntesis de ácidos nucleicos y proteínas (acridina) o interfieren en la síntesis de la pared celular (derivados del trifenilmetano). La acridina se inserta entre dos bases sucesivas del DNA separándolas físicamente. Esto provoca errores en la duplicación del DNA. Los los colorantes las anilinas son derivados del trifenilmetano (violeta de genciana, verde de malaquita y verde brillante) bloquean la conversión del ácido UDP-acetilmurámico en UDP-acetilmuramil-péptido.

Se puede medir la eficiencia de un desinfectante mediante la concentración mínima inhibitoria o coeficiente fenólico.

1.- Coeficiente fenólico: Este valor expresa la capacidad de un desinfectante para destruir bacterias cuando se compara con el fenol. En la prueba autorizada, un cultivo en caldo se diluye

Bacteriología Veterinaria

1:10 con concentraciones diferentes del compuesto a analizar. El punto final es la concentración menor que produce muestras del todo estériles después e de incubar por 10 minutos a 20°C. Los microorganismo autorizados para pruebas son una cepas de Salmonella thypi y Staphylococcus aureus.

2.- Método de la microdilución: Es método utilizado para probar la sensibilidad de la bacterias a diferentes sustancias químicas, se inoculan posos de microtitulación que contiene diluciones dobles seriadas del agente químico con un inóculo estándar de la bacteria; las placas se incuban toda la noche, transcurrido el tiempo se da lectura, la concentración más baja del agente químico que impide el crecimiento de las bacteria es la concentración mínima inhibitoria (CMI) del agente químico.