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PRCTICA 8

EFECTO DE LAS GIBERELINAS EN EL CRECIMIENTO DE HIPOCOTILOS


INTRODUCCIN
Los bioensayos son pruebas biolgicas basadas en la actividad fisiolgica que
ejercen las fitohormonas (auxinas, giberelinas, etc) que permiten establecer
una relacin entre la dosis de fitohormona y la respuesta fisiolgica. Se realizan
usando una planta completa o una parte de la misma, bajo unas condiciones
controladas, de forma que puedan repetirse y as poder establecer una relacin
tanto cualitativa como cuantitativa, entre la fitohormona y la respuesta
fisiolgica que produce.
En general las condiciones requeridas para un bioensayo son: especificidad,
sensibilidad, sencillez y ausencia de interferencias. Las tres primeras
condiciones son imprescindibles, la ltima puede a veces no cumplirse. Las
interferencias de tipo endgeno son difciles de evitar (estado de desarrollo del
material vegetal, interaccin de la fitohormona ensayada con otras, etc.).
Los bioensayos son tiles como detectores especficos de la actividad del
extracto inicial y de las muestras del proceso de purificacin. Sin embargo, no
son un mtodo fiable de cuantificacin de ninguna fitohormona. Los ms
utilizados son los basados en medir el crecimiento en longitud de un tejido u
rgano (segmento de tallo, coleptilo, segmento de raz, etc.). La respuesta
que se mide en estos ensayos, incremento en longitud, es proporcional al
logaritmo de la concentracin de fitohormona.
OBJETIVO
Determinar el efecto de distintas concentraciones de cido giberlico
(GA3) en la elongacin del hipoctilo de lechuga (Lactuca sativa var. batavia).
MATERIALES
6 placas Petri
Semillas de lechuga (var. batavia)
Pipetas: 0,5; 2; 5 y 10 mL
Regla
Papel de filtro
Tijera
Agua destilada
Solucin de cido giberlico (20 mg/L): 20 mg de cido giberlico se disuelven
en 1 ml de etanol 95%, y una vez que la solucin est absolutamente
transparente se aade agua destilada hasta 1000 ml.

MARCO TERICO
HORMONAS
Las plantas segregan sustancias en muy baja concentracin, con una funcin
fisiolgica concreta, y que se transportan muy fcilmente a travs de los vasos
conductores. Dichas sustancias reciben el nombre de hormonas, y se agrupan
en funcin del tipo de receptor celular que presentan o de su funcin.
Las hormonas cumplen funciones de control qumico en los organismos
multicelulares. Las plantas no solo necesitan luz solar, agua, CO2 y nutrientes
del suelo, sino tambin hormonas, las cuales se mueven a travs de los fluidos
regulando el crecimiento
Las fitohormonas u hormonas vegetales regulan los procesos fisiolgicos de las
plantas. Las fitohormonas se producen en pequeas cantidades en tejidos
vegetales, a diferencia de las hormonas animales, sintetizadas en glndulas.
Pueden actuar en el propio tejido donde se generan o bien a largas distancias,
mediante transporte a travs de los vasos del xilema y floema.
Las hormonas vegetales controlan un gran nmero de sucesos, entre ellos el
crecimiento de las plantas, la cada de las hojas, la floracin, la formacin del
fruto y la germinacin. Una fitohormona interviene en varios procesos, y del
mismo modo todo proceso est regulado por la accin de varias fitohormonas.
Se establecen fenmenos de balance hormonal que conducen a una regulacin
precisa de las funciones vegetales.
Las principales hormonas vegetales son:
Auxinas
Citoquininas
Giberelinas
cido abcsico
Etileno
Brasinoesteroides

GIBERELINA.
Tambin conocidas como Acido Giberelico (GA), hormona del crecimiento. Su
designacin es AG seguida de un nmero y al momento hay ms de 150
formas conocidas de hormonas.
Hormona vegetal que controla el crecimiento y afecta considerablemente la
formacin de las flores cuando se desarrollan externamente a la planta. Induce
la formacin de las flores en la mayora de las plantas.
Las hormonas vegetales tienen una funcin crtica en el desarrollo de las
plantas, ya que segn su presencia en el sitio y momento adecuado pueden
estimular o inhibir procesos fisiolgicos especficos para tener un cierto
crecimiento, diferenciacin, metabolismo, etc, que se refleja en la fenologa.

Otros compuestos adicionales como nutrientes, azcares, protenas, etc.,


tambin intervienen en esa regulacin, pero su funcin no es tan especfica
como el de las hormonas. Desde su descubrimiento, las GIBERELINAS (GA)
tomaron su posicin como hormonas crticas en el desarrollo de las plantas, su
nombre proviene del hongo Gibberella fujikuroi de donde fueron extradas
originalmente.
Se conocen en la actualidad ms de 125 hormonas diferentes de este grupo.
Las descubrieron los japoneses realizando un estudio de un extracto del hongo
(Gibberellum fugikunoi) responsable de la enfermedad bakanae en los cultivos
de arroz. Dicha enfermedad se caracteriza porque todas las plantas de arroz se
tumban en lugar de crecer erectas que es lo que tocara.
Al analizar el extracto, se encontr cido giberlico y de ah, que a este grupo
de hormonas se las conozca como giberelinas.
TIPOS DE GIBERELINA.
Existen varios tipos de giberelinas, siendo las ms comunes GA1, GA3, GA4,
GA7 y GA9.
En el reino vegetal se ha establecido que existen aproximadamente 120
diferentes tipos de giberelinas, las cuales se han ido numerando segn se han
ido descubriendo. Las diferencias entre ellas estn en ligeros cambios en
nmero de carbonos, grupos oxidrilos, etc. En las plantas se han identificado
cerca de 65 gibelinas, mientras que 12 estn exclusivamente en el hongo
Gibberella; en semillas de manzano se han encontrado 24 distintas giberelinas.
En condiciones de estrs para la planta, algunas giberelinas se asocian con
azcares y con ello pierden efectividad. De las distintas giberelinas, la nmero
3 ha sido la ms estudiada por su alta efectividad y presencia en los tejidos
vegetales; sin embargo, la nmero 1 es reconocida como la ms activa de
todas. A la nmero 3 se le conoce como cido Giberlico.
Son diterpenoides tetracclicos cidos derivados del ent- Kaureno.
Dos tipos:
De 20 carbonos
De 19 carbonos (ms activos): porque perdieron un tomo de carbono
durante una reaccin de "clivage".
El C7 tiene que haber un carboxilo para que sea activa (el receptor las
reconoce por ah).
Los procesos regulados por GA, son especficos para cada giberelina.
SNTESIS.
Cualquier tejido vegetal puede producir GA: raz, tallo, hojas, semillas, pulpa de
fruto, pice de ramas, de todos stos se reconoce que las hojas jvenes son
los rganos en donde hay ms sntesis. En trminos generales las GA se
producirn en mayor cantidad en etapas de intensa actividad de crecimiento, y
en particular cuando hay mucho alargamiento celular en los tejidos. Cuando
hay condiciones adversas a una planta, se reduce la sntesis de giberelinas, se
descomponen molculas de la hormona, y se unen con azcares; todo esto
provoca una reduccin o detencin del crecimiento. La aplicacin de GA a un
tejido puede inducirle a que sintetice esa misma hormona, con lo que el efecto
alcanzado puede ser superior o ms prolongado; excesos de la aplicacin de
GA pueden estimular sntesis de etileno, hormona que provoca efectos
degradativos o deformativos en los tejidos. Las giberelinas se encuentran en

cantidades particularmente abundantes en rganos jvenes de las plantas,


especialmente en los puntos de crecimiento del vegetal (zonas apicales) y en
las hojas jvenes en proceso de formacin.
En rganos reproductores (flores, semillas inmaduras, embriones germinando).
En tejidos vegetativos (pices, tallos, races, y hojas jvenes)
El embrin libera giberelina que difunde hacia la capa aleurnica. La giberelina
hace que las clulas de aleurona sinteticen enzimas que digieren las reservas
alimenticias del endosperma convirtindolas en molculas ms pequeas.
Estas molculas son transportadas a las regiones del embrin en crecimiento.
La sntesis de giberelinas se lleva a cabo a travs de la va de los terpenoides y
tiene lugar en los plastidios y en el citoplasma. Comienza con formacin de
anillos para dar lugar al
Para que la giberelina pueda realizar sus funciones, en la planta no debe haber
deficiencia de nitrgeno, pues este elemento es el encargado de hacer que en
la planta se d el follaje o el crecimiento de los tejidos (en la planta).
Las giberelinas tambin se pueden ver afectadas por el exceso de azucares en
la planta, pues estas pueden combinarse y generar compuestos totalmente
neutros, lo cual ocasiona que el crecimiento de la planta se vea afectado y de
esta manera se acumule el nitrgeno en la planta generando un colapso
generalizado en el proceso de produccin. Si los vasos del xilema que son los
encargados de transportar las giberelinas a toda la planta no funcionan bien,
tambin se complica el crecimiento, puesto que la reaccin de las auxinas es
mas retardada que la de las giberelinas, la relacin de tiempo auxina: giberelina
es de 10:2 minutos despus de producidas para que puedan ayudar en los
procesos.
En base a esto se hacen anlisis para as saber si la planta tiene o no
deficiencia en alguno de alguno de los elementos mayores, y determinar si es o
no necesario la aplicacin de gieberelinas de manera artificial, es decir utilizarla
como un fertilizante de
Pero adems, las giberelinas actan como repelente al frio o al calor segn la
necesidad de la planta, durante la noche, el funcionamiento de estas hormonas
se hace ms lento que durante el da, puesto que el metabolismo de la planta
es ms lento
EFECTOS
Los efectos de las giberelinas son:
Estimulan el crecimiento de los tallos (elongacin) e hipoctilos.
Tienen un papel mayor que las auxinas en plantas con crecimiento de
entrenudos.
En la reproduccin.
Estimulan la floracin, sobre todo en aquellas plantas con floracin por
factores ambientales o floracin del da largo como las conferas. No son
universales, en algunas especies puede inhibir la floracin (angiospermas
leosas y frutales).
Producen partenocarpia (reproduccin sin fecundacin donde el fruto se
genera sin semillas). Tienden a producir plantas masculinas en especies
dioicas. Provocan la reversin a fases juveniles de la planta.

Pueden suplir los fotoperiodos y los termoperodos necesarios para el


crecimiento.
La germinacin es su principal efecto. Casi todas las semillas germinan
inducidas por GA. Posibilitan la movilizacin de reservas en la semilla.
Sustituyen requisitos ambientales.
PROCEDIMIENTO
En una placa Petri con papel de filtro y 10 mL de agua destilada, se siembran
semillas de lechuga que permanecen en oscuridad a 25 C hasta que las
radculas alcancen 6-8 mm de longitud (aproximadamente 2 das). Poner
semillas en exceso para poder seleccionar plntulas uniformes.
A partir de una solucin de cido giberlico 20 mg/L, preparar 10 mL de las
siguientes concentraciones: 10,1, 0.1 y 0.01 mg/L.
En 6 placas Petri con discos de papel de filtro, poner 10 mL de cada una de las
concentraciones de cido giberlico (la placa 6 se utiliza como control y se
ponen 10 mL de agua destilada). Colocar 10 plntulas de lechuga de longitud
radicular similar (aproximadamente de 6-8 mm) en cada placa y dejarlas bajo
luz difusa durante 7 das.
Al cabo de este tiempo medir la longitud de los hipoctilos y representar los
resultados (medias de los distintos grupos para cada tratamiento) frente al
logaritmo de las concentraciones de GA3 ensayadas.

RESULTADOS
GA3 g/ml

Media

10-2

2.2

10-1

2.5

2.6

10

2.7

20

2.1

REPRESENTAR GRFICAMENTE LOS RESULTADOS OBTENIDOS

Referencia bibliogrfica
http://es.scribd.com/doc/35592184/Giberelinas.
http://umh1152.edu.umh.es/material/videos/practica-12-efecto-de-lasgiberelinas-en-el-crecimiento-de-hipocotilos/.
http://www.feriadelasciencias.unam.mx/anteriores/feria20/feria155_01_h
ormonas_reguladoras_del_crecimiento_vegetal_simul.pdf.