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INDICE
1. PRESENTACION...PAG 2
2. INTRODUCCIONPAG 3
3. OBJETIVOPAG 4
4. MARCO TEORICO.PAG 5
5. SECUENCIA DE LA PRACTICAPAG 6
6. MATERIALES.PAG 7

7. CONTENIDO...PAG 8 35
8. ESTADISTICA.PAG 36
9. CONCLUSIONPAG 37
10. LOGROS.PAG 38
11. BIBLIOGRAFIAPAG 39

PRESENTACIN
En esta oportunidad presentare el siguiente informe que rene fundamentos
tericos acerca de Banco de Sangre los cuales nos ayudan a realizar diferentes

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interpretaciones de las distintas pruebas y tcnicas realizadas en este rea las


cuales las hicimos con las personas responsables del rea

INTRODUCCIN
La transfusin de componentes y derivados de la sangre humana sirve para tratar
pacientes con trastornos y enfermedades graves que no pueden ser corregidas

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con otros medicamentos. A pesar que se cuenta con algunos sustitutos de la


sangre que permiten mantener su volumen y su consistencia, la mayor parte de
los componentes celulares y plasmticos de la sangre humana poseen una
actividad biolgica que los hace el tratamiento ms eficaz para una gran variedad
de afecciones. En general, las situaciones de urgencia vinculadas con accidentes,
actos de violencia y ciruga mayor; las enfermedades crnicas,
oncohematolgicas, los trastornos de la coagulacin y las complicaciones del
embarazo y el parto requieren el uso de algn componente o derivado sanguneo.
Por eso contar con hemocomponentes y hemoderivados para transfusin en los
centros asistenciales resulta indispensable para evitar la muerte o prevenir
complicaciones mayores en los pacientes muy graves.

OBJETIVO

Realizar programas dirigidos al fomento de donaciones de sangre.

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Seleccionar y extraer sangre a los donantes que cumplan con los requisitos
preestablecidos.

Mantener el inventario ptimo de sangre o componentes sanguneos

MARCO TERICO

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Banco de Sangre:
Un banco de sangre se define como la institucin que funciona de intermediaria
entre las personas sanas en disposicin de condicin para donar sangre y las
personas enfermas que la requieren. Este tipo de instituciones se deben de
localizar dentro de los diferentes hospitales para facilitar el traslado del producto
desde el donador hasta el receptor en el menor tiempo posible. Por su parte, el
Banco de Sangre es el departamento encargado del mantenimiento de las
reservas adecuadas de sangre y componentes sanguneos de calidad., para cubrir
las necesidades de la totalidad de pacientes internos en los dems departamentos
que conforman el hospital, en situaciones ordinarias y de emergencia.

SECUENCIA DE LA PRCTICA

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Limpieza de las mesas antes y despus de los procedimientos

Pesar y medir al donante.

Tipificacin de grupo sanguneo y hematocrito.

Extraccin para PT.

Lavado de material.

Esterilizacin del material.

Fraccionamiento de las unidades.

Extraccin al donante.

Tamizaje.

Toma de muestra en pisos para prueba de coombs.

Registro de los resultados.

Tiempo de Practica:
Inicio: 1 de noviembre del 2014
Final: 31 de diciembre del 2014

MATERIALES
Silln de donante.
Equipo de Afresis.

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Sellador biosealer.
Bao mara.
bolsas de transfusin.
Reactivos (grupo sanguneo).
Reactivos para tamizaje (hepatitis B, HIV, HTLV, sfilis, etc.)
Lector de Elisa automatizado.
Balanza agitadora.
Refrigeradora LCR7357.
Microscopio ptico.
Centrifuga.
Tubos.
Balanza.
Probeta.
Pipetas de vidrio de plstico.
Vasos de precipitacin.
Viales.
Guantes.
Suero fisiolgico.
Agua destilada.
Punteras.

CONTENIDO

1. DETERMINACION DE GRUPO SANGUINEO ABO RH


2. DETERMINACION DE VARIANTE Du

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3. HEMATOCRITO
4. CELULAS CONTROL COOMBS (CCC)
5. PRUEBAS DE TAMIZAJE
6. EXTRACCIN DE SANGRE
7. FRACCIONAMIENTO

1. DETERMINACION DE GRUPO SANGUINEO ABO RH

Fundamento:
Tiene por objeto tipificar la sangre mediante el sistema ABO y factor Rh.
Landsteiner diferencia 3 grupos de sangre, sobre la base de dos aglutingenos (A

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y B) y dos aglutininas denominadas alfa i beta. Con estos elementos existen las
cuatro combinaciones biolgicas que son:

Grupo AB: Contiene los dos aglutingenos en sus glbulos y carece de


aglutininas en su suero.

Grupo A: Contiene un aglutingeno en sus glbulos y se aglutina en los


sueros.

Grupo B: Contiene un aglutingeno en los glbulos i se aglutina en los


sueros.

Grupo O: carece de aglutingenos en sus glbulos pero contiene dos


aglutininas en el suero.

Factor Rh: se fundamenta en la existencia de un aglutingeno en los


hemates humanos denominado factor Rh, su presencia en los hemates
humanos se denomina Rh positivo, los hemates que no poseen este
aglutingeno o factor Rh son denominados Rh negativos.

MUESTRA: Sangre entera o coagulada y suero, plasma.


A) GRUPO SANGUINEO EN PLACA:

Rotular la placa o la lmina excavada identificando la muestra.


Colocar una gota de Anti A en un pozo.
Colocar una gota de Anti B en un pozo.
Colocar una gota de Anti D en un pozo.
Agregar una gota de glbulos rojos en estudio.
Mezclar con la ayuda de una Bagueta.
Observar la presencia de aglutinacin a partir de los 10 seg. Hasta los 2

minutos.
Leer, interpretar y registrar los resultados.

INTERPRETACIN:

LA AGLUTINACIN DE LOS GLBULOS ROJOS EN ESTUDIO


CONSTITUYE RESULTADOS POSITIVOS

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LA RESUSPENCIN DE LAS CELULAS CONSTITUYE UNA RESULTADO


NEGATIVO

INTERPRETACION DE RESULTADOS:
DETERMINANCION EN PLACA
GLOBULOS
DESCONOCIDOS
B)

ROJOS
INTERPRETACION

ANTI-A

ANTI-B

ANTIAB

AB

GRUPO SANGUINEO EN TUBO:


a. Fase celular:

Preparar una suspensin de glbulos rojos en estudio al 5% en

solucin salina al 0.9%


Colocar una gota de Anti A en un tubo limpio y rotulado A.
Colocar una gota de Anti B en un tubo limpio y rotulado B.

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Colocar una gota de Anti D en un tubo limpio y rotuladoD.


Agregar una gota de la suspensin al 5% de glbulos rojos en

estudio, a cada tubo.


Mezclar con suavidad y centrifugar de acuerdo con las instrucciones

por 15 seg. a 3,500 rpm. por 1 min. A 1,000 rpm.


Re suspender con suavidad las celular

macroscpicamente en busca de aglutinacin


Leer, interpretar y registrar los resultados

examinar

b. Fase srica o inversa:

Rotular 2 tubos como A1 y B (nota. Si se usan glbulos rojos A2 se

rotula en el tubo adicional).


Agregar 2gotas de suero en estudio en cada tubo.
Agregar una gota de clulas A 1 (preparadas al 10 %) al tubo

rotulado como A 1.
Agregar una gota de clulas B

(preparadas al 10 %)

al tubo

rotulado como B.
Agregar una gota de clulas A 2 (preparadas al 10 %)

al tubo

rotulado como A 2. Si correspondiera.


Mezclar con suavidad y centrifugar de acuerdo con las instrucciones

por 15 seg. a 3,500 rpm por 1 min. A 1,000 rpm.


Re suspender con suavidad las clulas

macroscpicamente en busca de aglutinacin.


Leer, interpretar y registrar los resultados.

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examinar

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INTERPRETACION DE RESULTADOS:

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PRUEBA CELULAR
GLOBULOS
DESCONOCIDOS

PRUEBA SERICA
ROJOS

SUERO DESCONOCIDO

INTERPRETA
CION

ANTI-A

ANTI-B

ANTIAB

A1

AB

2. DETERMINACION DE VARIANTE Du
Fundamento:
Algunos glbulos rojos expresan los antgenos D en forma tan dbil que la
mayora de los reactivos Anti-D no aglutina de manera directa esas clulas. La
expresin D dbil se aprecia mejor mediante la prueba de antiglobulina indirecta
despus de incubar los glbulos rojos con anti-D.
El factor Rh es una clase de protena que se encuentra en los glbulos rojos de la
sangre, cuando se tiene el antgeno D se le considera Rh Positivo. Cuando no la
tiene es Rh Negativo. El factor Rh es hereditario.
MUESTRA.- Sangre entera anticoagulada.

PROCEDIMIENTO:

Suspensin al 5% de los glbulos rojos en estudio en solucin salina al

0.9%
Colocar una gota de anti-d en un tubo limpio y rotulado d.

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Colocar una gota de suero control Rh o albumina 22%en un tubo limpio y

rotulado control.
Agregar una gota de la suspensin al 5% de glbulos rojos en estudio, a

cada tubo.
Mezclar con suavidad y centrifugar de acuerdo por 15 seg. a 3000 rpm. o

por 1 min. a 1000 rpm.


Re suspender con suavidad las clulas y examine macroscpicamente en

busca de aglutinacin.
Leer, interpretar y registrar los resultados. si reaccin es negativa continuar.
Incubar en bao mara durante 30 min.; luego repetir el paso 5 y 6 si es

negativo continuar.
Lavar los tubos con sol. salina por 4 veces decantando totalmente en el

ltimo lavado.
Agregar 2 gotas de suero Coombs, mezclar con suavidad y centrifugar.
Comprobar con las clulas control de Coombs

INTERPRETACIN

LA GLUTINACION DE LOS GLOBULOS ROJSO EN ESTUDIO


CONSTITUYEN RESULTADOS POSITIVOS.
LA RESUSPENSION DE LAS CELULAS CONSTITUYE UN RESULTADO
NEGATIVO.
LA VALIDACION COMO RH NEGATIVO SE DARA SI AMBOS TUBOS NO
AGLUTINAN.

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TABLA RH NEGATIVO TIPICO


D

CONTROL RH

INTERPRETACION

LECTURA INMEDIATA

CONTINUAR

LECTURA INCUBACION

CONTINUAR

LECTURA
COOMBS

CONTINUAR

1+ / 2+

1+ / 2+

NEGATIVO

CONTROL RH

INTERPRETACION

LECTURA INMEDIATA

CONTINUAR

LECTURA INCUBACION

CONTINUAR

LECTURA SUERO
COOMBS
NOTA:

POSITIVO

SUERO

DE

CONTROL DE COOMBS
TABLA RH POSITIVO DEBIL

DE

realizar un control negativo de 1+


manera
CONTROL Se
DEdebe
COOMBS
/ 2+simultnea (autocontrol)
POSITIVO
TABLA RH NO DETERMINADO
D

CONTROL RH

INTERPRETACION

LECTURA INMEDIATA

NEGATIVO?

LECTURA INCUBACION

NEGATIVO?

LECTURA
COOMBS

1+

INVALIDO

SUERO

DE

CONTROL DE COOMBS

3. HEMATOCRITO

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Fundamento:
Es la relacin, entre el volumen de la masa de eritrocitos y la masa total de la
sangre. Refleja la concentracin de los eritrocitos, ms no la masa total de estos.
El hematocrito se expresa en porcentaje o preferiblemente de acuerdo al sistema
internacional de unidades.
El tamao de los glbulos rojos, ser otra variable que influye en la valoracin del
hematocrito, si los glbulos rojos son muy pequeos, ocupan menor volumen y de
igual manera si son ms grandes ocuparan mayor volumen, ambas situaciones de
hecho son patolgicas.

PROCEDIMIENTO:

Llenar un capilar hasta las 2/3 partes aproximadamente, sellando la parte


inferior con plastilina y llevarlo a la micro-centrfuga, por 5 a 10 minutos

entre 10000 y 5000 rpm respectivamente.


Sostenga el capilar frente a la escala de manera que el fondo de la columna
de eritrocitos quede exactamente al mismo nivel de la lnea horizontal

correspondiente al cero.
Desplace el capilar a travs de la escala hasta que la lnea marcada con el
nmero 1,0 quede al nivel del tope de la columna de plasma. Vigile que el
fondo de la columna de eritrocitos contine sobre la lnea cero. El capilar

debe encontrarse en posicin vertical.


La lnea que pase al nivel del tope de la columna de eritrocitos indicar la

fraccin de volumen de stos.


Se lee con una tabla estndar, y se informa en porcentaje %.

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INTERPRETACION:
La lectura se realiza con una escala estandarizada que expenden en el comercio.
La determinacin del Hto debe realizarse por duplicado y la diferencia entre los
dos valores obtenidos no debe ser nunca superior a 0,01.
VALORES DE REFERENCIA:
Hombres

45% - 55%

Mujeres

38% - 44%

Nios (5 aos)

38% - 44%

Lactantes (3 meses)

37% - 42%

Recin nacidos

50% - 60%

CAUSAS DE ERROR:

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Las fugas de muestra al no quedar bien sellado los capilares producen


una disminucin en el valor, al perderse mayor proporcin de clulas que de

plasma.
El uso de anticoagulantes lquidos provoca un error por dilucin de la

muestra
En muestras capilares no descartar la primer gota, produce una mezcla con

los lquidos tisulares que provoca hemodilucin.


En muestras de sangre venosa, el lazo colocado durante un cierto tiempo

produce hemoconcentracin.
La lectura no inmediata de los capilares, provoca que el sedimento de
hemates vaya tomando forma de bisel si el capilar permanece en posicin
horizontal.

4. CELULAS CONTROL COOMBS (CCC)


Fundamento:

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Obtencin de clulas mediante la centrifugacin y se usaran en caso de presencia


de anticuerpos bloqueados o incompletos las CCC permitirn demostrar presencia
de anticuerpos usando un segundo anticuerpo denominado antiglobulina.
Las clulas control de Coombs son clulas rojas humanas sensibilizadas con IgG
Grupo O Rhesus D-positivo, que han sido sensibilizadas in vitro con diferentes
cantidades

de

anticuerpos anti-D (IgG).

Las clulas control de Coomb han sido preparadas para producir una aglutinacin
menos fuerte en la presencia de reactivos activos de antiglobulina.
PROCEDIMIENTO:

Tomar un volumen de 5 ml de glbulos rojos o Rh positivo


Lavar 4 a 5 veces con solucin salina fisiolgica. Eliminar totalmente la

SSF.
Re-suspender el paquete de G.R. al 50% en SSF (Ejm: 1 ml de gr + 1 ml

SSF).
Preparar una dilucin del suero Anti-D al 1/8 en solucin salina.
Mezclar partes iguales de los G.R. re-suspendidos en solucin salina con el

suero anti D diluido (vol./vol.)


Incubar a 37C por 60 minutos. Mezclar suavemente cada 15 minutos.
Lavar los G.R. sensibilizados 4 veces con solucin salina, eliminando en

cada lavado el sobrenadante.


Preparar una suspensin al 5 % de los G.R. en solucin salina.

CELULAS
COOMBS

CONTROL

DE

ANTIGLOBULINA HUMANA

TUBO 1

TUBO 2

1 GOTA

1 GOTA

1 GOTA

1 GOTA

CENTRIFUGAR POR 15 SEGUNDOS


LECTURA:
REACTIVIDAD: DEBE SER DE 2 + A 3+

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A) COOMBS DIRECTO
Determina la existencia de glbulos rojos recubiertos con inmunoglobulinas y/o
complemento in vivo, en particular IgG y C3d, se realiza a pacientes en los primeros
momentos de una reaccin hemoltica y en el diagnstico de anemias hemolticas auto
inmunes, hemlisis inducidas por drogas, y enfermedad hemoltica del recin nacido.
MUESTRA: Sangre entera anticoagulada.
a. COOMBS DIRECTO CUANLITATIVO:

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PROCEDIMIENTO:

Suspensin al 5% de glbulos rojos en estudio en solucin salina al 0.9%

lavados 4
veces.
Agregar una gota de suero de Coombs Poli especfico.
Mezclar con suavidad las clulas y centrifugar de acuerdo con las

instrucciones por 15 segundos a 3,500 rpm por 1 min. A 1,000 rpm.


Leer, interpretar y registrar los resultados. De salir Positivo realizan la
misma operacin con los sueros mono especficos.

INTERPRETACIN

La aglutinacin de los glbulos rojos en estudio constituye resultados

positivos.
La re suspensin de las clulas constituye un resultado Negativo.
Los resultados negativos deben ser comprobados con las clulas control
de Coombs, si el resultado es negativo la prueba es no valida y deber
repetirse.

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b. COOMBS DIRECTO CUANTITATIVO:

PROCEDIMIENTO:

Suspensin al 5% de glbulos rojos en estudio en solucin salina al 0.9%

lavados 4 veces en cada tubo rotulado.


Realizar la dilucin del suero de Coombs al ; ; 1/8; 1/16; 1/32; 1/64;

1/128; 1/256; 1/512.


Agregar una gota de suero poli-especfico previamente diluido en cada

tubo.
Mezclar con suavidad las clulas y centrifugar de acuerdo con las

instrucciones por 15 seg. a 3,400 rpm por 1 min. A 1,000 rpm.


Leer, interpretar y registrar los resultados. De salir Positivo realizan la
misma operacin con los sueros mono especficos.

INTERPRETACIN

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La aglutinacin de los glbulos rojos en estudio constituye resultados

positivos.
La re suspensin de las clulas constituye un resultado Negativo.
Los resultados negativos deben ser comprobados con las clulas control
de Coombs. Si el resultado es negativo la prueba es no valida y deber
repetirse.

NOTA:

La sumatoria del contaje de los puntos en estudio segn la

aglutinacin ser el score asignado.

B) COOMBS INDIRECTO (PRUEBA DE COMPATIILIDAD)


Son realizados en los eritrocitos normales que son incubados in vitro con el suero
en estudio, durante este periodo, si existe un anticuerpo este se fija sobre un
respectivo determinante o antgeno una vez fijada los eritrocitos son igualmente
lavados i se agrega el reactivo de coombs.
UTILIDAD:

Prueba de compatibilidad.

Deteccin e identificacin de anticuerpos irregulares.

Deteccin de antgenos no demostrables por otras tcnicas: Kell, Duffy,


kidd, etc.

Deteccin e identificacin de anticuerpos en fluidos de glbulos rojos.


En estudio de investigacin tales como pruebas de consumo de
antiglobulinas, anticuerpos, antileucocitarios y antiplaquetarios.

PROCEDIMIENTO:

Dispensar una gota de Glbulos Rojos en cada uno de los tubos

debidamente rotulados.
Agregar 2 gotas de suero problema cada tubo.
Mezclar con suavidad las clulas y centrifugar de acuerdo con las
instrucciones por 15 seg. a 3,400 rpm por 1 min. A 1,000 rpm.

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Leer, aglutinacin y/o hemlisis, resuspender completamente el botn

celular y anotar el resultado


Agregar 2 gotas de Albmina Bovina al 22%
Mezclar, centrifugar y leer.
Incubar a 37 C por 15 minutos.
Mezclar, centrifugar y leer.
Lavar los G.R. con solucin salina 0.9% por 4 veces decantando totalmente

en l ultimo lavado.
Agregar 2 gotas de Suero de Coombs poliespecfico.
Mezclar, centrifugar y leer.
Agregar 1 gota de clulas Control de Coombs en aquellos tubos sin

aglutinacin.
Mezclar, centrifugar y leer.

INTERPRETACIN

La aglutinacin de los glbulos rojos en estudio constituye resultados

positivos.
La re-suspensin de las clulas constituye un resultado Negativo.

Cent.
Inmediato

Albmina 370 C

Coomb
s

CCC

Cell 1

3+

Cell 2

3+

3+

------

FACTORES QUE AFECTAN LA PRUEBA:

Temperatura
Medio de reaccin
Proporcin de clulas y suero
Tiempo de incubacin
Tiempo de lavado

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RESULTADO

COMPATIBLE
INCOMPATIB
LE

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Contaminacin del reactivo, etc.

PROCEDIMIENTOS DE LAS PRUEBAS INMUNOSEROLOGICAS EN BANCO


DE SANGRE

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5. PRUEBAS DE TAMIZAJE
Las pruebas de inmuno-serologa son de gran utilidad para evitar la transmisin de
enfermedades infecciosas por transfusin sangunea, de acuerdo al artculo 42,
que establece que los Bancos de Sangre deben realizar a todas y cada una de las
unidades recolectadas las mencionadas pruebas serolgicas.
Las 7 pruebas que una unidad extrada debe pasar para ser considerada como
apta para ser transfundida son las siguientes: Elisa para HIV, Sfilis, Elisa para
hepatitis B, prueba de anticore para antgenos de hepatitis, HTLV1, Chagas, Elisa
para hepatitis C
PROCEDIMIENTO DE LA TCNICA DE ELISA

Determinar el nmero total de pocillos teniendo en cuenta todos los


controles que indica el inserto del kit y control de calidad interna. Retire
las tiras necesarias.

Dispensar los microlitros indicados (segn el inserto) de sueros


controles positivos y negativos, sueros problema y sueros control interno
en los respectivos micropocillos, mezclar suavemente.

Incubar a la temperatura indicada por el tiempo necesario, generalmente


en esta etapa se cubren los micropocillos con papel adhesivo que
acompaa al kit, para evitar su evaporacin.

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27

Retirar el material adhesivo y proceder con los ciclos de lavado teniendo


en cuenta el volumen dispensado y el tiempo de remojo indicados en el
instructivo. Despus del ltimo lavado secar la microplaca sobre un
papel absorbente dndole pequeos golpes para remover cualquier
exceso de lquido de los pocillos.

Colocar la cantidad necesaria de conjugado en cada pocillo, la dilucin


del conjugado debe realizarse durante el ltimo ciclo de lavado.

Cubrir la placa con el papel adhesivo e incubar a

la temperatura

indicada por el tiempo necesario. Retirar el material adhesivo y proceder


con los ciclos de lavado.

Durante el lavado prepare el volumen requerido de la solucin substratocromgeno, la cual debe estar a temperatura ambiente y debe ser
incolora, si se observa alguna coloracin descartar la solucin.

Colocar la cantidad necesaria de substrato en cada pocillo e incubar en


oscuridad a temperatura ambiente O A 37 C de acuerdo a la prueba a
realizar por el tiempo indicado.

Detener la reaccin agregando la cantidad indicada de solucin de


parada en la misma secuencia que se agreg el substrato.

Leer la absorbancia de los pocillos en un lector de ELISA teniendo en


cuenta los filtros indicados. Es recomendable una lectura bicromtica
teniendo como filtro de referencia 620-630 nm. l Leer la microplaca en el
tiempo indicado por el inserto.

Evaluar la prueba teniendo en cuenta los criterios de validacin que se


indican en el instructivo del kit y suero control interno. Si la prueba es
vlida calcular el valor de corte e interpretar los resultados.

Las muestras con resultados no reactivos se informan como tales.

Las unidades de sangre cuyas muestras tienen resultados reactivos


debern ser eliminadas.

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Los donantes cuyos resultados son reactivos deben ser remitidos a la


unidad de epidemiologa.

INTERPRETACIN DE RESULTADOS
REACTIVO: Se detecta la presencia de antgeno y/o anticuerpo del agente
etiolgico correspondiente.
NO REACTIVO: No se detecta la presencia de antgenos y/o anticuerpos del
agente etiolgico correspondiente.
ZONA GRIS: Valores comprendidos inmediatamente por debajo del valor de corte
de la prueba de acuerdo a lo indicado en el inserto.

CONSIDERACIONES GENERALES PREVIAS AL DESARROLLO DE LA


TCNICA

Toda

muestra

potencialmente

de

sangre

infeccioso

debe
y

ser

seguir

las

considerada
medidas

como
de

material

bioseguridad

establecidas en el Manual de Bioseguridad vigente.


Las muestras a procesar no deben presentar hemlisis ni turbidez. Deben
estar rotuladas con el cdigo y fecha de obtencin de muestra y ser

conservadas en refrigeracin (4C), hasta su procesamiento.


Utilizar kits con fecha de vencimiento vigente. No mezclar reactivos

procedentes de diferentes lotes.


Conservar los kits a temperaturas especificadas por el fabricante.
Dejar que todos los reactivos alcancen la temperatura ambiental (18-25C)

antes de empezar el ensayo.


Mezclar suavemente los reactivos lquidos antes de su uso.
Diluir la solucin de lavado concentrada segn lo indicado por el fabricante,
empleando agua destilada. Rotular el frasco con fecha de preparacin y el
kit al que pertenece. Debido a su

alta concentracin

en algunos kits,

pueden formar cristales por lo cual se debe homogenizar previamente a la


dilucin. El remanente de la solucin diluida debe conservarse segn las
indicaciones del fabricante,

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29

Seguir estrictamente las instrucciones proporcionadas por el fabricante y


descritas en el inserto del kit tanto para el procesamiento de las muestras
como para analizar la validez. Incluir todos los sueros controles positivos,

negativos, pocillo blanco indicados en el inserto.


La validez del ensayo debe de hacerse de acuerdo a las indicaciones del

kit ms el suero control de calidad interno.


Calcular el valor de corte y la zona indeterminada segn indicaciones del

kit. Todo kit debe indicar la zona gris o indeterminada


Utilice protocolos de trabajo de acuerdo a la tcnica a utilizar
Emplear equipos e instrumentos en buenas condiciones de operatividad
con mantenimiento preventivo y calibrado (incubadora, lector ELISA,

lavador de placas, micropipetas, termmetro ambiental).


Seguir los instructivos de uso de cada equipo, chequear los filtros del lector

ELISA antes de iniciar los ensayos y llevar el registro de tiempo de uso.


Preparar los protocolos de trabajo o mapas de distribucin de muestras que

sern procesadas.
Realizar y registrar el control diario de

la temperatura ambiental del

laboratorio y de los siguientes equipos: Refrigerador donde se conservan


los kits, incubadora

empleada para los pasos de incubacin 37 C

congeladora donde se conservan los sueros controles y otros reactivos.


Utilizar agua destilada o desionizada, de alta calidad.

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A. HBCAB :
Es una enfermedad del hgado causada por el virus de la hepatitis B,
perteneciente a la familia Hepadnaviridae (virus ADN hepatotrpico). Es una
enfermedad infecciosa del hgado causada por el virus y caracterizada por
necrosis hepato celular e inflamacin. Puede causar un proceso agudo o un
proceso crnico, que puede acabar en cirrosis (prdida de la "arquitectura"
heptica por cicatrizacin y surgimiento de ndulos de regeneracin) del
hgado, cncer de hgado, insuficiencia heptica e incluso la muerte.

TRANSMISIN:
Resulta de la exposicin a sangre infectada o fluidos corporales que contengan
sangre. Las formas posibles de transmisin incluyen contacto sexual, transfusin
sangunea, reutilizacin de agujas y jeringuillas, y transmisin vertical de madre a
hijo durante el parto. Sin ninguna intervencin, una madre positiva para HBsAg
confiere un riesgo del 20% de pasar la infeccin a su descendencia durante el
momento del nacimiento.
PRINCIPIO:
El ensayo es la base del principio de competencia donde los anticuerpos en la
muestra compiten con un anticuerpo monoclonal para la unin del antgeno en la
fase slida.

PROCEDIMIENTO:

BLANCO
3 CONTROLES NEGATIVOS
2 CALIBRADORES
1 CONTROL POSITIVO

MICROPLACA
BLANC
O

CONTROL
ES
NEGATIVO

CALIBRADOR CONTROL MUESTRA


ES
POSITIVO

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31

S
DILUYENTE

---------

50 ul

50 ul

50 ul

50 ul

CONTROL
NEGATIVO

---------

50 ul

---------

---------

---------

CALIBRADOR

---------

---------

50 ul

---------

---------

CONTROL
POSITIVO

---------

---------

---------

50 ul

---------

MUESTRA

---------

---------

---------

---------

50 ul

INCUBAR 60 MINUTOS A 37 C, LAVAR DE 4 A 5 VECES (350 ul POR POCILLO)


CONJUGADO

---------

100 ul

100 ul

100 ul

100 ul

INCUBAR 60 MINUTOS A 37 C, LAVAR DE 4 A 5 VECES (350 ul POR POCILLO)


SUSTRATO TMB

100 ul

100 ul

100 ul

100 ul

100 ul

INCUBAR A TEMPERATURA AMBIENTE POR 20 MINUTOS (18 - 24C)


SOLUCION STOP

100 ul

100 ul

100 ul

100 ul

SOLCUION DE LAVADO (20X): 4 5 LAVADOS (50 ul) POR COLUMNA.

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100 ul

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B. HTLV I & II
Est considerado como Retroviridae (es de la familia de los virus que comprende a
los retrovirus y pertenecen a la subfamilia de los oncovirinae). Se denominan
retrovirus porque en una parte de su ciclo vital revierten los procesos normales de
la transcripcin de DNA a RNA.
TRANSMISIN:
Resulta de la exposicin a sangre infectada o fluidos corporales que contengan
sangre. Las formas posibles de transmisin incluyen contacto sexual, transfusin
sangunea, reutilizacin de agujas y jeringuillas, y transmisin vertical de madre a
hijo durante el parto.
PRINCIPIO:
Las micro placas se recubren con HTLV I & II antgenos especficos sintticos
inmuno-dominantes derivados de gp46 I, gp46 II, gp21 I. al enzima
capturada en la fase slida, que acta sobre la mezcla de sustrato/ cromgeno,
genera una seal ptica que es proporcional a la cantidad de anticuerpos anti

Informe de la Prctica Profesional

33

HTLV I & II presentes. Despus de bloquear la reaccin enzimtica, su densidad


ptica se mide con un lector de ELISA.
PROCEDIMIENTO:

BLANCO
3 CONTROLES NEGATIVOS
2 CALIBRADORES
1 CONTROL POSITIVO

MICROPLACA

BLANC
O

CONTROL
ES
NEGATIVO
S

CALIBRADOR CONTROL
MUESTRA
ES
POSITIVO

CONTROL
NEGATIVO

---------

100 ul

---------

---------

---------

CALIBRADOR

---------

---------

100 ul

---------

---------

CONTROL
POSITIVO

---------

---------

---------

100 ul

---------

MUESTRA

---------

---------

---------

---------

100 ul

INCUBAR 45 MINUTOS A 37 C, LAVAR DE 4 A 5 VECES (350 ul POR POCILLO)


CONJUGADO

---------

100 ul

100 ul

100 ul

100 ul

INCUBAR 45 MINUTOS A 37 C, LAVAR DE 4 A 5 VECES (350 ul POR POCILLO)


SUSTRATO TMB

100 ul

100 ul

100 ul

100 ul

100 ul

INCUBAR A TEMPERATURA AMBIENTE POR 15 MINUTOS (18 - 24C)


SOLUCION STOP

100 ul

100 ul

100 ul

Informe de la Prctica Profesional

100 ul

100 ul

34

SOLCUION DE LAVADO (20X): 4 5 LAVADOS (50 ul) POR COLUMNA.

C. HCV
La hepatitis es una enfermedad del hgado causada por el virus de la hepatitis C,
este se transmite a travs de la sangre, y las causas de infeccin ms comunes
son las prcticas de inyecciones poco seguras y las transfusiones sanguneas.
PRINCIPIO:
La muestra es diluida 10 veces en el diluyente de muestra. Los Ac HCV en la
muestra de prueba son incubados con AG HCV ligados en micro pozos (primera
reaccin). Luego de lavado, los AC HCV de la muestra ligada al Ag en los micro
pozos son detectados por un Ac secundario (IgG anti-humano conjugado con
peroxidasa) (segunda reaccin), Luego de lavado, el prximo paso es la reaccin

Informe de la Prctica Profesional

35

del desarrollo de color de sustrato, si est presente otro Ac se oxidara resultando


en el desarrollo de color azul claro dependiendo de la cantidad del segundo
anticuerpo ligado, la reaccin de color se mide con un lector de ELISA.
PROCEDIMIENTO:

BLANCO
2 CONTROLES NEGATIVOS
2 CONTROLES POSITIVOS

MICROPLACA

BLANCO

CONTROLES
NEGATIVOS

CONTROLES
POSITIVOS

MUESTRA

---------

---------

---------

100 ul

CONTROL
NEGATIVO

---------

100 ul

---------

---------

CONTROL
POSITIVO

---------

---------

100 ul

---------

MUESTRA

---------

---------

---------

10 ul

DILUYENTE
MUESTRA

DE

INCUBAR 30 MINUTOS A 37 C, LAVAR 5 VECES


CONJUGADO

---------

100 ul

100 ul

INCUBAR 30 MINUTOS A 37 C, LAVAR 5 VECES


CROMOGENO A

50 ul

50 ul

50 ul

50 ul

CROMOGENO B

50 ul

50 ul

50 ul

50 ul

MEZCLAR Y INCUBAR 10 MINUTOS A 37C

Informe de la Prctica Profesional

36

SOLUCION STOP

50 ul

50 ul

50 ul

50 ul

SOLCUION DE LAVADO (25X): PREPARAR PARA 5 LAVADOS (50 ul POR


COLUMNA).

D. HBSAG
Significa antgeno de superficie de la hepatitis B, tambin conocido como antgeno
Australia, ya que fue demostrado inicialmente en un aborigen australiano.
Descubierto en 1963 por Baruch Blumberg, consta de una glucoprotena que se

Informe de la Prctica Profesional

37

inserta en la superficie del Virus de la hepatitis B (VHB) y cuando se detecta en


el torrente sanguneo indica infeccin actual de hepatitis B aguda y crnica.
PRINCIPIO:
El HBsAg EIA es un inmuno ensayo de fase solida simultanea de sndwich, que
emplea anticuerpos monoclonales y policlonales especficos para HBsAg pozos de
micro titulacin recubiertos con Ac. Especficos para HBsAg. El espcimen es
agregado al pozo de micro titulacin recubierto con Ac, junto con conjugado
enzimtico con Ac policlonales. Si el HBsAG, est presente, formara un complejo
Ac-HBsAG-Ac-enzima. La placa es lavada para remover material no ligado.
Finalmente, una solucin de sustrato enzimtico (TMB) es agregada a los pozos e
incubada, se desarrollara color en proporcin de la cantidad presente de HBsAg
en la muestra, se agrega la solucin stop.
PROCEDIMIENTO:

BLANCO
2 CONTROLES NEGATIVOS
2 CONTROLES POSITIVOS

MICROPLACA

BLANCO

CONTROLES
NEGATIVOS

CONTROLES
POSITIVOS

MUESTRA

CONTROL
NEGATIVO

---------

50 ul

---------

---------

CONTROL
POSITIVO

---------

---------

50 ul

---------

MUESTRA

---------

---------

---------

50 ul

CONJUGADO

---------

50 ul

50 ul

50 ul

INCUBAR POR 60 MINUTOS A 37 C, LAVAR 5 VECES

Informe de la Prctica Profesional

38

CROMOGENO A

50 ul

50 ul

50 ul

50 ul

CROMOGENO B

50 ul

50 ul

50 ul

50 ul

50 ul

50 ul

50 ul

INCUBAR 15 MINUTOS A 37C


SOLUCION STOP

50 ul

SOLCUION DE LAVADO (25X): PREPARAR PARA 5 LAVADOS (50 ul POR


COLUMNA).

E. SFILIS

Informe de la Prctica Profesional

39

Es una espiroqueta delgada con forma de sacacorchos que posee motilidad


rotatoria lenta y es el agente causal de la sfilis.
TRANMISIN
La transmisin ocurre por contacto con superficies mucosas (relaciones sexuales
con una persona que tiene una lesin sifiltica primaria o secundaria activa) o por
sangre, en el caso de la infeccin congnitasta ocurre por va transplacentaria.
La enfermedad se inicia con una lesin en el punto de entrada, por lo general una
lcera genital. Despus de cicatrizar esta lesin, los microorganismos invaden al
cuerpo, y la enfermedad reaparece semanas ms tarde como una erupcin
maculopapular generalizada denominada sfilis secundaria. Luego entra en una
segunda fase denominada de remisin o latencia, sta puede ser resuelta o
reaparecer aos o decenios despus y se le denomina sfilis terciaria.
Sfilis primaria. Consiste en una ppula que evoluciona hasta una lcera en el
sitio de la infeccin, la ubicacin suele encontrarse en los genitales externos o en
el cuello uterino, la lesin se indura pero se conserva indolora y evoluciona hasta
una lcera con base firme y bordes elevados a la que se le denomina chancro
sifiltico; el perodo de incubacin entre el contacto y la aparicin de la lesin es
de unas tres semanas y se cura de manera espontnea despus de cuatro a seis
semanas.
Sfilis secundaria. Se desarrolla de dos a ocho semanas despus de la aparicin
del chancro, se caracteriza por una erupcin maculopapular mucocutnea
simtrica, con aumento de tamao y no doloroso de los ganglios linfticos
inguinales, acompaada de un sndrome seudogripal con dolor de garganta,
cefalea, fiebre, mialgias, anorexia, linfadenopatas, exantema mucocutneo
generalizado y malestar general. Las lesiones cutneas se distribuyen entre el
tronco y las extremidades, a menudo abarcan las palmas, plantas y cara; cerca de
la tercera parte de los pacientes desarrollan erosiones verrugosas indoloras en las
mucosas (condilomatosis lata), las cuales se localizan en sitios tibios y hmedos
como los genitales y el perineo. Las lesiones son abundantes en espiroquetas y
muy contagiosas, estas lesiones tambin se resuelven de manera espontnea
despus de semanas.
Sfilis latente. Etapa en la que no hay manifestaciones clnicas pero persiste la
infeccin, en los primeros aos de latencia puede verse interrumpida por recadas

Informe de la Prctica Profesional

40

de sfilis secundaria que en lo sucesivo son menos graves; en la sfilis latente


tarda en menos de cuatro aos se interrumpen las recadas y los pacientes se
vuelven resistentes a la infeccin; prosigue el riesgo de transmisin por la sangre y
las madres pueden transmitir la bacteria a los neonatos durante todo el periodo
lactante.
Sfilis tarda. Las manifestaciones pueden aparecer slo cinco aos despus de
la infeccin, pero se produce de manera caracterstica de los quince a los veinte
aos post-infeccin.

PRINCIPIO:
Sfilis es un ELISA de doble sndwich para la deteccin de anticuerpos a T.
pallidum. Anticuerpos especficos T. pallidum contenidos en la muestra de anlisis
se unirn a los Ag recombinantes T. pallidum que cubren la placa y posteriormente
se unirn al conjugado enzimtico para formar un complejo Ag/AC/Ag-enzima. Los
pozos son lavados para retirar el material no ligado. Agregar la solucin sustrato.
Durante la incubacin la solucin desarrollara un color azul si los Ac especficos
estuvieran presentes en la muestra, la reaccin enzimtica es detenida por la
adicin de cido sulfrico.
PROCEDIMIENTO:

BLANCO
2 CONTROLES NEGATIVOS
2 CONTROLES POSITIVOS

MICROPLACA

BLANCO

CONTROLES
NEGATIVOS

CONTROLES
POSITIVOS

Informe de la Prctica Profesional

MUESTRA

41

CONTROL
NEGATIVO

---------

50 ul

---------

---------

CONTROL
POSITIVO

---------

---------

50 ul

---------

MUESTRA

---------

---------

---------

100 ul

50 ul

50 ul

INCUBAR 30 MINUTOS A 37 C, LAVAR 5 VECES


CONJUGADO

---------

50 ul

INCUBAR 30 MINUTOS A 37 C, LAVAR 5 VECES


CROMOGENO A

50 ul

50 ul

50 ul

50 ul

CROMOGENO B

50 ul

50 ul

50 ul

50 ul

MEZCLAR Y INCUBAR 10 MINUTOS A 37C (OSCURIDAD)


SOLUCION STOP

50 ul

50 ul

50 ul

50 ul

SOLCUION DE LAVADO (25X): PREPARAR PARA 5 LAVADOS (50 ul POR


COLUMNA).

Informe de la Prctica Profesional

42

F. CHAGAS
La enfermedad o mal de Chagas es provocada por el Tripanosoma cruzi, un
parsito emparentado con el tripanosoma africano que causa la tripanosomosis
africana o enfermedad del sueo. La enfermedad es propagada por la picadura de
los redvidos o chupasangre y es uno de los mayores problemas de salubridad en
Amrica del Sur. Debido a la inmigracin, la enfermedad tambin afecta a
personas en los Estados Unidos.
TRANSMISIN
La forma ms frecuente es a travs de la mordedura de la chinche (transmisin
vectorial; la chinche es el vector que transporta el parsito).
Estas vas alternativas son:

Trasfusin sangunea y trasplante de rganos: poco frecuente, dado los


controles que se realizan.
Contagio a travs de la placenta: de madres infectadas a fetos.
Ingesta de carne poco cocinada: procedente de animales infectados con el
parsito.
Contagio accidental: en el laboratorio.
A travs de la leche materna: poco frecuente, pero documentada.

PRINCIPIO:
EL TEST ELISA CHAGAS III es un ensayo inmunoenzimatico en fase slida para
la deteccin cualitativa de Ac contra T. cruzi, se realiza en placas cuyos pocillos
han sido activados con extractos totales de las cepas de T. cruzy Tulahuen y Mn,
incluyendo antgenos de membrana altamente inmunogenicos.
PROCEDIMIENTO:

2 CONTROLES NEGATIVOS
2 CONTROLES POSITIVOS

MICROPLACA

Informe de la Prctica Profesional

43

CONTROLES
NEGATIVOS

CONTROLES
POSITIVOS

MUESTRA

200 ul

200 ul

200 ul

CONTROL
NEGATIVO

20 ul

---------

---------

CONTROL
POSITIVO

---------

20 ul

---------

MUESTRA

---------

---------

20 ul

DILUYENTE
MUESTRA

DE

INCUBAR 30 MINUTOS A 37 C, LAVAR 5 VECES


CONJUGADO

100 ul

100 ul

100 ul

INCUBAR 30 MINUTOS A 37 C, LAVAR 5 VECES


SUSTRATO

100 ul

100 ul

100 ul

INCUBAR 30 MINUTOS A TEMPERATURA AMBIENTE (OSCURIDAD)


SOLUCION STOP

100 ul

100 ul

100 ul

SOLCUION DE LAVADO (25X): PREPARAR PARA 5 LAVADOS (50 ul POR


COLUMNA).

Informe de la Prctica Profesional

44

Informe de la Prctica Profesional

45

G. HIV 1 -2
Es un lentivirus (de la familia Retroviridae), causante del sndrome de
inmunodeficiencia adquirida (sida). Fue descubierto y considerado como el agente
de la naciente
epidemia
de sida por el
equipo
deLuc
Montagnier en Francia en 1983.
TRANSMISIN

Trasfusin sangunea y trasplante de rganos: poco frecuente, dado los


controles que se realizan.
Contagio accidental: en el laboratorio.
Transmisin sexual.
Transmisin perinatal

PRINCIPIO:
Utiliza un sistema de deteccin donde los pozos del micro placa estn recubiertos
con

antgenos

recombinantes

correspondientes

segmentos

altamente

antignicos de HIV-1/HIV-2 envoltura y anticuerpo P24. Especmenes de suero o


plasma, controles son agregados a los pozos. Durante la incubacin; anticuerpos
especficos para HIV-1 y HIV-2 presentes en el espcimen se unirn a los
antgenos recombinantes y/o anticuerpos P24 fijados a los pozos de las placas.
Los pozos son lavados para retirar materiales no ligados, los conjugados se unirn
al complejo antgeno anticuerpo y el exceso de conjugados son retirados por el
lavado. El sustrato enzimtico (TMB), es agregado despus de la incubacin el
sustrato ser hidrolizado por la enzima ligada y desarrollara un color azul o azul
verdoso en los pozos que contengan antgenos y/o anticuerpos especficos HIV-1
y/o HIV-2. La reaccin enzimtica es parada por la adicin de la solucin stop y
luego leda en un lector de ELISAS.
PROCEDIMIENTO:

BLANCO
2 CONTROLES NEGATIVOS
2 CONTROLES POSITIVOS HIV-1
1 CONTROL POSITIVO HIV-2
1 CONTROL POSITIVO DE AG P24

Informe de la Prctica Profesional

46

MICROPLACA

BLAN
CO

CONTROL
CONTROL ES
ES
POSITIVO
NEGATIV
S
OS
HIV - 1

CONTRO
L
POSITIV
O

CONTRO
L
POSITIV MUEST
RA
OS

HIV - 2

AG P24

CONTROL
NEGATIVO

---------

75 ul

---------

---------

---------

---------

CONTROL
POSITIVO HIV-1

---------

---------

75 ul

---------

---------

---------

CONTROL
POSITIVO HIV-2

---------

---------

---------

75 ul

---------

---------

---------

---------

---------

---------

75 ul

---------

MUESTRA

---------

---------

---------

---------

---------

75 ul

CONJUGADO 1

---------

25 ul

25 ul

25 ul

25 ul

25 ul

100 ul

100 ul

100 ul

CONTROL
POSITIVO
AG P24

INCUBAR 60 MINUTOS A 37 C, LAVAR 5 VECES


CONJUGADO 2

---------

100 ul

100 ul

INCUBAR 30 MINUTOS A 37 C, LAVAR 5 VECES


CROMOGENO B

50 ul

50 ul

50 ul

50 ul

50 ul

50 ul

CROMOGENO A

50 ul

50 ul

50 ul

50 ul

50 ul

50 ul

50 ul

50 ul

50 ul

50 ul

INCUBAR 10 MINUTOS A 37C


SOLUCION STOP

50 ul

50 ul

SOLCUION DE LAVADO (20X): 5 LAVADOS (50 ul) POR COLUMNA.

Informe de la Prctica Profesional

47

PROCEDIMIENTOS EN LA PREPARACIN DE HEMOCOMPONENTES EN


BANCO DE SANGRE

Informe de la Prctica Profesional

48

6. EXTRACCIN DE SANGRE
Una vez que el paciente est en condiciones de donar sangre es decir cumple con
todos los requisitos necesarios se procede a la extraccin de 450 ml en las bolsas
colectoras el cual durara aproximadamente entre 5 a 10 minutos
TECNICA:

No usar ninguna bolsa si la solucin anticoagulante no est transparente.

Informe de la Prctica Profesional

49

Identificar la unidad con el paciente.

Colocar un torniquete unos tres centmetros por arriba del pliegue del brazo;
palpar bien la vena.

Se procede a desinfectar la superficie cutnea con torundas con jabn


quirrgico, isodine o alcohol.

Tomar la bolsa colectora y pinzar el tubo piloto para evitar la entrada de aire
contaminado, una vez hecho esto, se quita el protector de la aguja en forma
vertical y se realiza la puncin en el rea desinfectada, dar posicin y fijar la
aguja con una tela adhesiva, despinzar el tubo piloto para que fluya la
sangre hacia la bolsa colectora.

Homogenizar el conservador de la bolsa colectora con la sangre.

Pesar la bolsa y una vez que tenga el volumen adecuado (para el caso de
Baxter, triple ACD, 630 grs.), pinzar la bolsa por el tubo colector y quitar el
torniquete al paciente, retirar la aguja y colocar una torunda con alcohol en
el sitio donde se puncion, indicar al paciente que doble el brazo y lo
mantenga as por 15 minutos.

Informe de la Prctica Profesional

50

7. FRACCIONAMIENTO
Consiste en la separacin y transformacin de la sangre en productos derivados
de la misma para uso en medicina humana
La eleccin cuidadosa del elemento a fraccionar favorece el aprovechamiento
ptimo de la sangre, es decir la donacin de una persona puede beneficiar a
cuatro pacientes al separarse en:
Concentrados eritrocitarios, plasma fresco congelado, concentrado plaquetario y
concentrado de factor VIII o crioprecipitado. La sangre y sus componentes se
indican para sustituir el elemento especfico en dficit, los glbulos rojos para
transporte de O2, plasma para restituir volumen, protenas pro-coagulantes y
plaquetas para trombocitopenia y factor VIII en hemofilia.

Informe de la Prctica Profesional

51

PROCEDIMIENTO:

a. Preparacin de glbulos rojos (Bolsa doble) y plasma fresco congelado


(P.F.C.).

Para este procedimiento se debe de usar una unidad de recoleccin que


tenga una bolsa de transferencia. La separacin del plasma de los glbulos
rojos puede ser o hacerse de la siguiente forma:

Por centrifugacin entre (3000) RPM Durante 15 minutos la temperatura de


la centrfuga debe ser de 4C.

Informe de la Prctica Profesional

52

TCNICA DE SEPARACIN:

Una vez centrifugadas las bolsas de sangre como se indic anteriormente


siguiendo siguientes pasos:

Colocar la bolsa de sangre centrifugada en el extractor de plasma.

Libere el mecanismo de presin suavemente.

Cierre con una pinza hemosttica el tubo que comunica a una de las bolsas
satlite.

Romper el sello de la bolsa madre y dejar fluir el plasma en la otra bolsa


satlite. Se debe usar una bolsa para medir la cantidad de plasma obtenido.

Cerrar con otra pinza hemosttica el tubo de comunicacin, por el cual est
fluyendo el plasma, cuando haya pasado la cantidad estipulada, sellar el
tubo piloto con un sellador electrnico (hematrn).

Identificar la unidad de plasma con el mismo sistema que se us para la


bolsa madre, cortar el piloto despus de haber sellado.

Pilotear con una separacin de 5 10 cm. de separacin todo el tubo piloto


que qued en la bolsa del concentrado eritrocitario y colocarlo a un costado
de la bolsa para pruebas futuras.

Del mismo modo para el paquete de plasma como se indic anteriormente,

Informe de la Prctica Profesional

53

pilotear el tubo y adicionarlo al extremo de la bolsa.

El concentrado eritrocitario debe ser guardado en un refrigerador especial a


una temperatura entre 4 y 6C para su conservacin.

El plasma se guarda o se debe mantener a una temperatura de -20C para


su conservacin.

b. Preparacin de Concentrados Plaquetarios:


En la recoleccin de sangre para preparar plaquetas, se debe observar la
siguiente recomendacin:
Dejar la sangre a temperatura ambiente que es entre 20-24C , hasta que inicie el
proceso de separacin. Es necesario practicar dos centrifugaciones, la primera a
baja velocidad produce el plasma rico en plaquetas (PRP) y la segunda a alta
velocidad, produce un concentrado de plaquetas ms una unidad de plasma pobre

Informe de la Prctica Profesional

54

en plaquetas (PRP).
Se sealan tres factores importantes en este procedimiento:

El tiempo y la fuerza gravitacional de centrifugacin.

La tcnica de resuspensin de plaquetas despus de la centrifugacin.

El pH del plasma.

Tcnica de Preparacin.

La centrfuga refrigerante debe tener una temperatura de 20C.

Centrifugar a 1800 RPM, durante 10 minutos.

Colocar la bolsa de sangre en el extractor y separar el plasma rico en


plaquetas en una bolsa satlite, pinzar el tubo piloto por donde fluye el
plasma o sellar una vez terminado el paso de separacin de PRP y cortar.

Anotar datos del donador como son nombre, grupo sanguneo y Rh. sin
poner la etiqueta

Informe de la Prctica Profesional

55

Que quedar al final. (Esto es para tener un mejor control en la


identificacin de los productos a obtener.

Centrifugar el plasma rico en plaquetas P.R.P. a una velocidad de 3000


R.P.M. x 10 minutos, a una temperatura de 20C.

Colocar la bolsa en el extractor y transferir el plasma sobrenadante a la


segunda bolsa satlite, dejar un volumen de plasma, no menor de 50ml.,
as las plaquetas sern conservadas a 20C.

Identificar los productos, tanto el PRP, como el C.P. con las etiquetas
elevadas sealando la fecha, hora de preparacin y vencimiento.

Colocar los concentrados plaquetarios en un agitador para plaquetas a


+20C, (es aproximadamente de 1 a 2 horas.) de 3 a 5 das de la bolsa
colectora.

El plasma pobre en plaquetas se guarda y conserva a una temperatura de


-20C para su almacenamiento por un ao.

NOTA:
Los concentrados de plasma deben tener un volumen de 50 ml, un numero de
plaquetas no menor a 5.5 x 10 10 y un PH= a 6 por lo menos en el 75 % de las
unidades preparadas al final del periodo de expiracin.

c. Crioprecipitado de Factor VIII.


El crioprecipitado de factor VIII o factor antihemoflico (FAH) (es la porcin del

Informe de la Prctica Profesional

56

plasma que precipita en frio, despus de que el P.F.C. ha sido descongelado bajo
condiciones congeladas.) Contiene la mayor parte del factor VIII y cierta cantidad
de fibringeno, de los existentes en la unidad original de plasma. Es la protena
que precipita a temperatura de -120C y posteriormente de descongelar el plasma.

Tcnica de Preparacin:

Colocar la sangre total del donador en bolsas triples y una vez obtenida y
centrifugar a 3000 RPM durante 15 minutos.

Pasar con un extractor el plasma a una bolsa satlite , pesando en una


balanza para precisar el volumen, sellar el tubo piloto y separar el P.G.
refrigerndolo de 2 a 6C.

Poner los datos correspondientes a la bolsa del plasma (no etiqueta).

Congelar el plasma rpidamente con hielo seco y acetona para que de un


proceso de congelacin (completa o dejar congelar a una temperatura de
20C durante toda una noche 14 a 18 Horas) de -120C.

Una vez congelado el plasma, descongelarlo a una temperatura de 1 a


6C.

Ya que estn descongelados, centrifugar el plasma a 4000 RPM durante 15


minutos, a una temperatura de 4C.

Terminada la centrifugacin, colocar la bolsa en un extractor de bolsas y


separar el plasma en la segunda bolsa satlite.

Separado ya el plasma, etiquetar debidamente los productos ya


fraccionados con todos los datos.

Informe de la Prctica Profesional

57

Los plasmas y crioprecipitados se guardarn a una temperatura de -20C


para su conservacin.

Informe de la Prctica Profesional

58

Informe de la Prctica Profesional

59

CARACTERISITCAS DE LOS HEMOCOMPONENTES

Informe de la Prctica Profesional

60

Nmero de Exmenes de Banco de Sangre Realizados en el


Hospital Regional Durante el 1 de noviembre al 31 de diciembre
Informe de la Prctica Profesional

61

300

250

200

150

100

50

del 1 de noviembre hasta 31 de diciembre

Informe de la Prctica Profesional

62

CONCLUSIN

En el rea de banco de sangre es muy importante porque


nos permite salvar vidas, ya sea transfundiendo paquete
g l o b u l a r, p l a s m a f r e s c o c o n g e l a d o , c r i o p r e c i p i t a d o s , e t c .

Utilizando en las diferentes patologas como leucemia, hemofilia, anemias.

Informe de la Prctica Profesional

63

BIBLIOGRAFA

Informe de la Prctica Profesional