Pretratamiento de la muestra: extraccin y limpieza

El pretratamiento de los alimentos para la determinacin de

aditivos es
muy variable dependiendo de la naturaleza de las muestras
(muestras lquidas o
Aditivos Alimentarios slidas, muestras con alto contenido en
lpidos, protenas o carbohidratos) o de la tcnica analtica para la
determinacin del aditivo. En muchos casos, las muestras ms
sencillas (muestras lquidas) no requieren ningn tipo de
tratamiento previo o si existe es muy sencillo [9098]. La mayora
de los alimentos han de tratarse previamente a la determinacin de
Los aditivos, siendo con frecuencia el primer paso una extraccin
lquidolquido (LLE, LiquidLiquid Extraction), con el objeto de
eliminar interferencias. La LLE puede ser simple o repetitiva(con el
mismo disolvente y combinando finalmente todos los extractos).El
extractante y el mtodo de extraccin empleados dependen
fundamentalmente de la naturaleza de la muestra. Como se puede
observar en la Tabla 3.1.1, la extraccin puede realizarse con un
solo disolvente, principalmente nhexano [99101], agua o agua
acidificada [102105], acetonitrilo [106108], diclorometano [109
111], etanol o metanol [112,113], ter dietlico o de petrleo
[111,114,115],acetona [116] y cloroformo [117], o bien con una
mezcla binaria de los mismos [112,118121] e incluso ternaria
[122,123], en la que se combina un disolvente muy polar como
agua o un
alcohol con otros disolventes menos polares.

Sin embargo, junto con los analitos tambin se extraen otros

compuestos procedentes de la matriz. Por ello, es necesaria una
etapa de limpieza del extracto, la cual depende del sistema de
deteccin empleado. As, si el detector utilizado es suficientemente

selectivo, no se necesita una limpieza demasiado rigurosa del

extracto [91,93,94,9698,100,106111,113,117,118], pero si no es
as, entonces esta etapa debe ser lo suficientemente efectiva para
eliminar la mayor parte posible de los coextractos que pueden
interferir en la determinacin. Por otra parte, puesto que la
concentracin de los aditivos en este extracto no permitira
alcanzar los lmites establecidos por la legislacin, es necesario
incluir una etapa de preconcentracin de los analitos. La LLE es una
tcnica muy conocida y utilizada para la separacin de los aditivos
de sus coextractos [115,120]. Sin embargo, las tendencias
actuales estn reemplazando la LLE a favor de la extraccin en fase
slida (SPE, Solid Phase Extraction). La SPE se introdujo a principio
de los aos 70 para evitar o minimizar los inconvenientes de la LLE.
La SPE presenta varias ventajas frente a sta como son (a) sencillez
de uso, (b) la disminucin del volumen de muestra y/o extractante
requeridos en la extraccin, (c) el menor tiempo requerido en el
tratamiento, (d) la menor manipulacin de las muestras, (e) los
mayores factores de preconcentracin y (f) se evita la formacin de
emulsiones [124,125]. Es posible emplear la SPE como nica etapa
de limpieza [126137], o bien como una adicional tras la LLE
[99,102104,116]. El uso de la SPE ha sido impulsado por la gran
variedad de slidos sorbentes polares y no polares e
intercambiadores inicos existentes. Los slidos sorbentes que ms
se utilizan para la preconcentracin de antioxidantes, conservantes
y/o colorantes se recogen en la Tabla 3.1.1, entre los que destacan:
RPC18 [102104,116,126,128,129,131,134, 135], gel de slice
[99,116], sorbentes con grupos amino [131,137], sorbente
polimrico XAD2 [130,133], poliamida [127] y lana [132,136].
La extraccin con un fluido supercrtico (SFE, Supercritical Fluid
Extraction) tambin es una tcnica que se utiliza para la extraccin
de aditivos en muestras de alimentos [138141]. Presenta la
ventaja de que ahorra tiempo y disolventes, siendo el disolvente
ms utilizado el dixido de carbono [138141] por su temperatura
(31C) y su presin (73 atm) crticas moderadas. Adems, el CO2
no es inflamable, ni txico y no es demasiado caro. El metanol se
utiliza en algunos casos como modificador para ajustar el poder de
disolucin del fluido [138,141]. Tambin existen otras tcnicas de
extraccin, relativamente recientes, que estn empezando a
utilizarse en la determinacin de aditivos alimentarios, pero que
an no se encuentran muy extendidas:
Cromatografa
a
contracorriente(CCC,CounterCurrent
Chromatography) [142,143]: Se trata de un tipo de
cromatografa de reparto cuya caracterstica ms importante
es que la fase estacionaria no se encuentra retenida sobre un
soporte slido,
Cromatografa en gel (GPC, Gel Permeation Chromatography)
[144]: es una tcnica de limpieza que se emplea para la
separacin de protenas y biomolculas, en base al tamao
molecular, particin o adsorcin. As, las diferentes fracciones

del eluido pueden contener diferentes tipos de compuestos

separando los aditivos de sus coextractos,
Destilacin [116]: esta tcnica consiste en separar los
componentes de una mezcla basndose en las diferencias en
los puntos de ebullicin de los distintos componentes, para lo
cual se produce un aporte energtico, en forma de calor, a la
mezcla a separar,
Separacin a travs de membrana [145]: esta tcnica se basa
en la transferencia de los analitos, que se encuentra en
disolucin, a travs de una membrana que acta como
barrera selectiva (tamao de poro) al transporte de
determinadas sustancias siempre que exista una diferencia
de potencial qumico entre las dos disoluciones que separa la
membrana,
Dilisis [105,135] y microdilisis [146]: esta tcnica se refiere
a aquellas separaciones que tienen lugar a travs de
membrana en las que la fuerza impulsora de la separacin es
una diferencia de concentracin a travs de la misma,
producindose un paso selectivo de los aditivos mientras que
los solutos coloidales de mayor peso molecular no atraviesan
la membrana,
Extraccin con disolventes asistida por microondas (MAE,
Microwave Assisted Extraction) [135]: esta tcnica utiliza la
energa de las microondas para favorecer y acelerar la
extraccin con disolventes, siendo ms eficaz que la clsica
extraccin Soxhlet,
Extraccin con disolventes asistida por ultrasonidos [102]: al
igual que en el caso anterior, esta tcnica utiliza la energa de
los ultrasonidos para favorecer y acelerar la extraccin con
disolventes,
Microextraccin con disolventes (SME, Solvent Micro
Extraction) [147]: es una LLE que emplea microvolmenes de
un disolvente orgnico para la extraccin de analitos desde
una fase acuosa,
Microextraccin en fase slida (SPME, Solid Phase Micro
Extraction) [148]: en esta tcnica los analitos se adsorben en
una fibra recubierta con polmeros, bien al sumergirla en la
muestra si sta es lquida, o bien utilizando la tcnica de
espacio de cabeza si son slidas; tiene la ventaja de la
introduccin directa al
cromatgrafo de gases,
Extraccin mediante barra de adsorcin (SBSE, Stir Bar
Sorptive Extraction) [149]: en esta tcnica se utiliza una barra
agitadora recubierta con polmeros donde se adsorben los
analitos, al colocarla dentro de la muestra lquida.

Los colorantes

Se han dado ocasionalmente reacciones a la tartracina (E102, un

colorante artificial amarillo) y a la carmina (E120 o cochinilla roja)
en personas sensibles. Entre los sntomas que se asocian a los
mismos estn las erupciones cutneas, la congestin nasal y la
urticaria (se estima que se da en 1-2 personas de cada 10.000) y
muy raramente se han dado reacciones alrgicas a la carmina
mediadas por IgE. Tambin se han dado casos en los que la
tartracina ha provocado asma en personas sensibles, aunque la
incidencia es muy baja.

Antioxidantes
Evitan la oxidacin de los alimentos e impiden el enranciamiento y
la decoloracin. Se utilizan en productos horneados, cereales,
grasas y aceites, y en aderezos para ensaladas. Los principales
antioxidantes liposolubles son:
Tocoferoles (E306-309), BHA (Butilhidroxianisol E320) y BHT
(Butilhidroxitoluol E321) -evitan que las grasas alimenticias,
los aceites vegetales y los aderezos para ensaladas se
pongan rancios.
cido ascrbico (E300) y cido ctrico (E330) - conservan el
color de las frutas y verduras recin cortadas
Carbohidratos
Los hidratos de carbono son una de las clases principales de
alimentos
componentes junto con lpidos y protenas.
Todos los alimentos, con pocas excepciones, contienen
carbohidratos, que puede variar en forma de un monosacrido a un
polisacrido ms complejo.
La Tabla 2 describe los carbohidratos ms importantes en los
alimentos, junto con sus caractersticas y dnde se encuentran
normalmente. Los hidratos de carbono (Azcares) son una
importante fuente de energa para el ser humano. Sus funciones
son muy variadas. Se utilizan por la industria alimentaria para
mejorar, por ejemplo, el gusto, el aspecto y la vida til de los
productos alimenticios.
Existe, pues, una necesidad continua para controlar los niveles de
hidratos de carbono en los alimentos con el fin de predecir y
controlar las propiedades de estos, as como las interacciones entre
sus componentes.