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Algunos agentes no virales que causan enfermedades similares a los virus son
incluidos y tratados en la virologa. Organismos parecidos a los micoplasmas, los
fitoplasmas, son la causa de enfermedades denominadas amarillamientos del Aster
y escoba de brujas las cuales fueron consideradas de origen viral por ms de 30
aos. Los fitoplasmas son organismos que parasitan clulas floemticas y que estn
constituidos por clulas pleomrficas rodeadas de una membrana trilaminar, son
transmitidos por insectos y se reproducen por fisin binaria. Otro grupo de agentes
que antes se confundan con los virus son los viroides. El viroide del tubrculo
fusiforme de la papa (PSTVd) fue el primer viroide caracterizado (Figura 2.1). Sus
caractersticas particulares lo convirtieron en un modelo en los estudios de
estructura, composicin y replicacin, de tal forma que PSTVd es al presente el
agente patgeno de plantas mejor conocido a nivel molecular. Los viroides son
agentes constituidos por RNA de bajo peso molecular, desprovistos de protena y
capaces de autorreplicarse. Hasta ahora se conoce ms de una docena de viriodes
cuya estructura ha sido determinada con precisin.
Figura 2.4. Principales etapas del ciclo viral de un RNA de polaridad positiva a nivel celular.
Fuente: Alhoy y Devergne, 2000.
protenas. Entre las protenas sintetizadas estn las protenas virales estructurales
(cpside) y no estructurales (replicasas, protenas de difusin); el RNA viral
(filamento +) va a servir de modelo a la replicasa para la produccin de molculas
complementarias del RNA (filamento -) que sern utilizadas a su vez para la sntesis
de muchas molculas de RNA (+). A partir de este centro primario de infeccin que
es la clula hospedera, el virus se propaga ms o menos rpidamente a las clulas
prximas del tejido parenquimtico donde inicia otros ciclos de infeccin. El paso de
clula a clula tiene lugar a nivel de los puentes citoplsmicos que son los
plasmodesmos y est dirigido por una protena viral denominada protena de
difusin (Figura 2.5); generalmente, cuando el virus alcanza los tejidos vasculares
se produce la invasin total de la planta; entonces la infeccin se considera como
sistmica y conduce a una enfermedad vrica generalizada y permanente (figura
2.6). A veces, sin embargo, la progresin del virus es limitada en el espacio y en el
tiempo y entonces el virus queda localizado en las clulas o en la vecindad de las
clulas inicialmente infectadas por mecanismos de defensa de la planta.
Figura 2.6 Progresin del virus del Mosaico del Tabaco inoculado en Tomate.
Fuente: Cornuet, 1992.
Sintomatologa
Generalmente, la infeccin viral se manifiesta sobre la planta enferma por
modificaciones de su aspecto o de su desarrollo. Lo ms frecuente es que dichas
alteraciones sean perjudiciales a la planta, bien cuantitativamente por ocasionar una
disminucin de produccin, bien cualitativamente porque deprecian su valor
comercial. Sin embargo, en horticultura existen algunos ejemplos en los que los
sntomas de origen vrico que tienen cierto valor ornamental son explotados
comercialmente.
1. Sntomas sobre las flores: Estos sntomas son evidentemente los mejor
percibidos por ser los que ms directamente pueden perjudicar al producto
comercializado. Lo ms corriente es que se manifiesten por alteraciones de la
pigmentacin (variegados) aunque tambin por necrosis y deformaciones. Los
variegados que afectan a los ptalos o a los spalos se producen por la ausencia
de pigmentos antocinicos vacuolares creando zonas decoloradas en donde se
multiplica el virus. Adems de los tulipanes flameados infectados por los Potyvirus
(TBV) (figura 2.7), otras muchas especies muestran alteraciones del mismo tipo: el
gladiolo, la violeta, el guisante de olor, el clavel, y los alheles.
Figura 2.7 Sntomas ocasionados por Tulip breaking virus (TBV) en tulipn.
Fuente: http://www.apsnet.org/education/IntroPlantPath/PathogenGroups/plantViruses/
2. Sntomas sobre las hojas: La mayor parte de los fitovirus provocan sobre las hojas
alteraciones ms o menos graves que se manifiestan tambin por anomalas de la
pigmentacin, necrosis o deformaciones. Los mosaicos son alteraciones cromticas
sobre las hojas debidas a una deficiencia en pigmentos cloroflicos, a la destruccin
de dichos pigmentos, o a la alteracin de la estructura de los cloroplastos. Esas
modificaciones generalmente solo afectan a grupos de clulas, delimitando de esta
forma zonas diversamente coloreadas, que se pueden presentar en forma de zonas
irregularmente distribuidas, con contornos difusos, o como manchas alargadas. Las
necrosis foliares se presentan cuando se observa una coloracin pardusca debida
a la muerte de las clulas (Figura 2.8). El crecimiento desigual de las clulas
alteradas por la presencia de un virus provoca deformaciones del borde foliar el cual
se vuelve enrollado, hinchado o crispado, llevando incluso a una rizadura o
encrespamiento.
Figura 2.8 Necrosis foliar ocasionada por el virus del bronceado del tomate (TSWV).
Fuente: http://www.scielo.cl/scielo.php?pid=S0365-28072005000300001&script=sci_arttext
Virus no persistentes y
semipersistentes
Virus persistentes
Vectores
Pulgones o cicadelidos
Transmisin por
Ingestin/excrecin
Ingestin/insalivacin
Entrada retencin
Canal alimentario
Canal alimentario
Salida
Canal alimentario
Canal salival
Latencia
Sin latencia
Persistencia
absorbentes o en las clulas corticales de las races que atraviesan gracias a sus
estilos. Los hongos capaces de transmitir virus son parsitos obligatorios cuya
actividad vectora est asegurada por el estadio zoospora. Solamente el 3% de los
fitovirus estn relacionados con este tipo de transmisin.
momento de la infeccin. Esta tasa, que es frecuentemente baja (del orden del 510%), puede ser excepcionalmente elevada.
Transmisin planta a planta
A diferencia de los hongos y de las bacterias, los fitovirus no son transportados por
el viento o la lluvia. Sin embargo, las virosis pueden diseminarse rpidamente planta
a planta aunque estas no puedan desplazarse como lo hacen los animales. La casi
totalidad de los virus son transmitidos experimentalmente por injerto, nico medio
que permite comprobar el carcter patgeno de algunas enfermedades no
transmisibles mecnicamente y para las que no se conoce ningn vector. El polen
representa otra forma de dispersin para algunos virus que infectan sobre todo a
los arbustos ornamentales. Segn los casos, el virus puede estar albergado en el
interior del grano de polen que transmite de esta forma la enfermedad a la
descendencia de la misma forma que una transmisin por la semilla o, simplemente,
ser transportado por esta, adhirindose a su superficie; entonces las plantas son
infectadas mecnicamente despus de haber sido visitadas por los insectos (trips,
abejas, etc.).
Transmisin mecnica por contacto
La mayor parte de los virus pueden tambin transmitirse mecnicamente por simple
contacto entre plantas. Muchos virus son transmisibles mecnicamente mediante
inoculacin experimental a plantas-test, pero solamente un reducido nmero de
ellos (Tobamovirus, Carmovirus, Potexvirus), que no necesitan la intervencin de
un vector especfico, estn relacionados por esta forma de diseminacin bajo
condiciones naturales. En ese caso, son particularmente temibles para los cultivos
con alta densidad de plantacin y en especial para los realizados en invernadero.
La contaminacin de las plantas por va mecnica supone siempre heridas en los
tejidos que pueden ser provocadas por el simple rozamiento entre las hojas por la
accin del viento (que lesiona las clulas y rompe los pelos epidrmicos), aunque
ms frecuentemente por las mismas prcticas culturales como podas, pinzamientos,
desyemado, extraccin de esquejes, de injertos y recoleccin de flores y frutos. Tal
forma de diseminacin tendr, por lo tanto, un importante impacto econmico en los
cultivos en que dichas prcticas sean frecuentes.
Otros virus (Carmo, Tombus, Diantho, Tobarnovirus) pueden propagarse de una a
otra planta por el suelo sin la intervencin de vectores. Las partculas virales
liberadas en medio acuoso infectan a las plantas sanas que presentan
microheridas que pueden proceder del crecimiento de las races. Tambin se sabe
que algunos Tobamo, Tombus y Dianthovirus pueden persistir en el suelo durante
varios meses en los residuos vegetales secos o muertos. El papel jugado por el
agua en la diseminacin de esos fitovirus ha sido muy estudiado recientemente.
As es como se han encontrado en elevada concentracin en las aguas de
drenaje, de ros y lagos, los virus del mosaico del tabaco (TMV), del Tomato bushy
stunt (TBSV) y de las manchas anilladas del clavel (CRSV). De esta forma, el
transporte de los virus queda asegurado por diferentes vas. La implicacin del
medio acuoso en la transmisin de los virus amenaza con importantes
repercusiones en la agricultura.
Fuente: http://www.pv.fagro.edu.uy/fitopato/cursos/fitopato/practicas/2/PLRV_precult.JPG
PVY
El PVY pertenece a la familia Potyvirus. El virin mide 684-740 nm y su ssRNA
genmico est constituido por 10400 nucletidos, cuya estrategia de expresin es
a travs de poliprotena, por lo cual posee un solo ORF.
El virus Y de la papa es un potyvirus cosmopolita que, puede infectar
experimentalmente a numerosas especies vegetales de diversas familias
botnicas, pero ataca casi exclusivamente a solanceas cultivadas a las que
causa graves daos. En la naturaleza existen hospederos espontneos del virus,
por ejemplo Solanum nigrum, S. dulcamara, Cirsium sp., etc. El PVY est
representado en la naturaleza por diversas cepas, de acuerdo a los sntomas
inducidos sobre alguna planta indicadora y sobre la transmisibilidad por fidos. Se
encuentran tres cepas: PVY0, que son cepas poco difundidas; PVYN, las cepas de
la necrosis nervial del tabaco; y PVYC, las cepas de la estriacin punteada de la
papa. En lneas generales se puede decir que existe una notable especializacin
de las cepas, como, por ejemplo, que las cepas que infectan al pimiento no
Figura 2.11 Necrosis nervial inducida por una cepa necrgena del PVY en papa
Cuando la infeccin por cepas PVY0 se suma a la del virus X de la papa (PVX) se
tiene un mosaico rugoso muy grave y consiguiente reduccin del desarrollo.
Tambin puede ser inducida una ligera rugosidad de las hojas por cepas del PVY,
adems de una reduccin ms o menos marcada del tamao, aunque no se
manifiestan sntomas especficos en los tubrculos.
PVX
El PVX pertenece al grupo de los Potexvirus. Morfolgicamente es una barra
flexuosa de 470-580 nm de largo y 13 nm de dimetro, con simetra helicoidal. El
genoma est formado por una molcula lineal de RNA, de sentido positivo. El
extremo 5' presenta la estructura de cofia, mientras el extremo 3' presenta una
cola de poli A y presenta 5 ORFs.
El virus X de la papa (PVX) se encuentra entre los que afectan con mayor
frecuencia los cultivos de este tubrculo. Aunque el PVX esta entre los virus
menos malignos, se presenta como un potencial problema econmico en los
cultivos debido al efecto sinergistico en presencia de otros virus. En Colombia se
demostr en una variedad de papa que la disminucin en la produccin cuando
haba coinfeccin de PVX, PVY y PLRV alcanzaba hasta el 61,2% (Tabla 2.2).
Tabla 2.2 Limitacin en la produccin de papa por PVX asociado a otros virus
Agente limitante
Virus X (PVX) solo
PVX + Virus del enrollamiento de la hoja de papa
(PLRV)
PVX + PLRV + PVY (Virus Y de la papa)
61.2%
ctricos son susceptibles a diferentes plagas que pueden causar diferentes grados
de dao y afectar la cantidad y la calidad del producto. Casi todos los problemas
de plagas y enfermedades pueden ser combatidos en el campo a travs de
mtodos convencionales de control. Sin embargo, para los problemas virales y de
viroides no se conocen curas a no ser que sea la induccin de cultivares libres de
estos patgenos, dentro de programas basados en el diagnstico temprano y la
eliminacin de plantas contaminadas y de los agentes causantes.
CTV
El CTV (virus de la tristeza de los ctricos) es miembro de la familia Closterovirus,
morfolgicamente consiste en un virin largo y flexuoso de 2000 x 11 nanmetros.
El genoma consiste en una secuencia de RNA de cadena sencilla de sentido
positivo, de 20 kilobases (kb), la ms larga dentro de los virus vegetales. Est
organizado en 12 marcos abiertos de lectura (ORF), que codifican
aproximadamente 19 protenas, con regiones no traducibles (UTR) en los
extremos 3 y 5.
La enfermedad causada por el CTV es considerada la ms destructiva dentro de
los ctricos porque conduce a un bloqueo de los vasos conductores impidiendo la
nutricin y causando, en el peor de los casos, la muerte. Se ha reportado la
prdida de millones de rboles en Brasil, Argentina, Estados Unidos, Espaa y
Venezuela. Los primeros sntomas externos son: clorosis de la nervadura central,
consistencia coricea, defoliacin y prdida de vigor a medida que avanza la
enfermedad. Otras caractersticas son acanalamiento del tallo, rpido
declinamiento, amarillamiento de plntulas y muerte progresiva de ramillas que
culmina con la muerte de todas las hojas, las cuales permanecen en el rbol
dndole el caracterstico aspecto triste (Figura 2.13).
Exocortis
La exocortis se caracteriza por la aparicin de escamas y grietas verticales en la
corteza, manchas amarillas en los brotes tiernos y enanismo, en especies
sensibles (Figura 2.14). La enfermedad es producida por el viroide de la exocortis
de los ctricos (CEVd), un agente patgeno mucho ms pequeo que los virus. Los
daos debidos a la exocortis son variables y dependen de la estirpe del patgeno,
la edad del rbol en el momento que tiene lugar la infeccin y las condiciones
climticas de la zona en la que se desarrolla el cultivo. Los rboles afectados por
exocortis presentan enanismo que puede llegar a ser muy acusado e ir asociado
con un amarilleamiento progresivo, seca de ramas y decaimiento general de la
copa. Las prdidas econmicas se deben fundamentalmente a las bajas
producciones de los rboles enfermos que alcanzan un tamao inferior al
esperado. Aunque la calidad de la fruta no suele verse afectada, las prdidas en
produccin pueden ser de hasta un 60%.
Psorosis
El citrus psorosis virus (CPsV) pertenece al gnero Ophiovirus, es un virus
multipartita, sin envoltura, con un genoma constituido por 3 RNAs, de polaridad
negativa. Las partculas virales observadas por microscopa electrnica son finos
filamentos circulares con un dimetro de 3 nm y una longitud de 400 hasta 2000
nm. La psorosis fue la primera enfermedad de los ctricos a la que se atribuy una
etiologa viral, y se asocia con el descamamiento tpico de la corteza en troncos y
ramas de naranjo dulce, mandarina y toronja.
Se diferencian dos tipos sintomticos de psorosis: psorisis A, que se caracteriza
por una descamacin lenta del tronco y ramas principales, y la psorosis B, que se
desarrolla ms rpido afectando incluso a ramas delgadas. Ambos tipos tienen
aire libre puede llegar a un porcentaje de frecuencia superior del 10%, pero en
invernadero puede llegar al 80%.
BCMV
El virus del Mosaico Comn del Frijol (BCMV) pertenece al gnero Potyvirus. Como
en todos los Potyvirus, las partculas de BCMV son filamentos flexuosos de 720-880
nm de longitud, con un dimetro de 12 a 15 nm, formados por una sola molcula
RNA revestida de una cpside proteca. El RNA que representa el 15% del peso de
la partcula, es monocatenario de polaridad positiva. El virus es transmitido de
manera mecnica, por fidos en forma no persistente y a travs de semilla y polen
dePhaseolus spp. Se han registrado por lo menos 10 cepas o patotipos de BCMV,
distinguibles mediante pruebas biolgicas, serolgicas y qumicas.
En condiciones naturales, el BCMV ha sido aislado casi nicamente en especies
pertenecientes al gnero Phaseolus,generalmente P. vulgaris, el frijol comn, P.
acutifolius var. Latifolius y en menor medida en P. coccineus. El BCMV es sobre
todo un virus especfico de P. vulgaris, y esta presente donde se cultiva esta planta
TYLCV
El virus de Enrollado Foliar Amarillo del Tomate (TYLVC) pertenece a la familia
Geminivirus. Las partculas virales de TYLVC son geminadas, es decir compuestas
por dos icosaedro incompletos y miden 18x30 nm. A diferencia de otros geminivirus,
las partculas de TYLVC encapsidan una sola molcula circular de DNA
monocatenario de unos 2770 nucletidos que constituyen el genoma viral.
EL TYLVC tiene una difusin muy amplia registrndose en muchos pases alrededor
del mundo. El virus es transmitido eficientemente por poblaciones de la mosca
blanca Bermisia tabaco. Tanto las larvas como los adultos del insecto son capaces
de adquirir el virus de las plantas infectadas durante la fase de alimentacin.
Despus de haber adquirido el virus, especialmente en el estado larvario, el vector
est en condiciones de transmitirlo durante 25-50 das, es decir durante toda la vida
del adulto. En el insecto adulto, el virus se localiza en las glndulas salivares, en la
musculatura de las alas y en el tejido adiposo.
Las plantas de tomate infectadas precozmente con TYLVC se muestran con talla
notablemente reducida, con las yemas apicales y axilares erectas. Las hojas se
presentan arrolladas, pequeas y coriceas, con el limbo ms o menos
marcadamente amarillento. Las hojas que se desarrollan en los primeros estadios
de la infeccin aparecen arrolladas hacia la parte inferior de sus nerviaciones
medianas mientras que las que se desarrollan ms tarde presentan los bordes
vistosamente amarillentos y vueltos hacia arriba (hojas de cuchara) (Figura 2.18).
El clima hmedo y clido bajo el que crece gran parte del maz en los trpicos es
sin duda favorable al crecimiento y a la difusin de una gran variedad de
patgenos que causan importantes daos econmicos a su produccin. Entre las
enfermedades del maz causadas por virus se encuentran el virus del mosaico y
enanismo del maz, el rayado fino, y otras enfermedades que no estn
ampliamente difundidas y que parecen estar confinadas a las Amricas: la
enfermedad del enanismo arbustivo, el virus del enanismo, el virus del bandeado,
el virus de la necrosis letal, el virus del mosaico y el virus del rayado fino del maz.
En Colombia se han registrado cuatro enfermedades de origen viral. La
importancia de estas enfermedades depende de las condiciones ambientales que
favorecen el establecimiento, incremento y migracin de los insectos vectores, de
la poca de inoculacin de la enfermedad, del grado de severidad y de la
susceptibilidad de los genotipos.
MMV
El virus del Mosaico del maz (Maize mosaic nucleorhabdovirus, MMV) tiene
partculas baciliformes con tamaos entre 48-90 nm de ancho y entre 225-242 nm
de largo, y se multiplica en el ncleo. Su cido nucleico es RNA de cadena
sencilla, con un tamao de 12,54 kb. La cubierta est compuesta por cinco clases
de protena, con tamaos de 75.000, 50.000, 45.000, 33.000 y la protena M.
El virus ha sido reconocido por muchos aos como uno de los virus ms
importantes en el cultivo del maz en los pases de Amrica y, en general, en todas
las zonas clidas donde se siembra dicho cultivo. Adems del maz, el
sorgo (Sorghum bicolor), la caminadora (Rottboellia exaltata) y el pasto escudilln
o limpiafrascos (Setaria vulpiseta), pueden actuar como plantas hospedantes. El
virus es transmitido en forma persistente y de manera intermitente por el Delfcido
del maz (Peregrinus maidis). El virus es retenido en la muda y se multiplica en el
insecto pero no es transmitido a su progenie a travs del huevo. El perodo de
adquisicin es de menos de 24 h y el de incubacin en el insecto de ms de 11
das.
Los primeros sntomas se caracterizan por rayas clorticas o amarillas en las
hojas jvenes, paralelas a la nervadura central, que al avanzar pueden llegar a
distribuirse en toda la lmina foliar. Se distinguen rayas gruesas de
aproximadamente 1 mm de dimetro y rayas muy finas a lo largo de la hoja
(Figura 2.19). Plantas infectadas en los primeros estados de su desarrollo
presentan acortamiento severo de entrenudos, marcado enanismo, prdida de
vigor y con frecuencia el cogollo se dobla. Cuando el acortamiento de entrenudos
es muy severo, todas las hojas emergen de un mismo vrtice y dan la apariencia
de roseta. El grado de enanismo depende de la edad de la planta al momento de
la infeccin. Algunas plantas pueden morir prematuramente y las que sobreviven
nunca producen mazorca.
Figura 2.19 Sntomas causados por MMV en maz. A: Rayado. B: Apariencia de roseta.
Fuente: Varon y Sarria, 2006
MDMV
La partcula viral del mosaico del enanismo del maz (MDMV) tiene una longitud de
770 nm, este virus pertenece a la familia potyvirus, por lo tanto su estructura es
filamentosa. El genoma es ssRNA de 9515 nucletidos flanqueado por regiones
URT 3y 5. Contiene un solo ORF del cual se derivan al parecer 10 protenas
putativas.
El virus del mosaico del enanismo del maz ocasiona una de las enfermedades
ms importantes que afectan al maz, se encuentra ampliamente distribuido en
Colombia, especialmente en el Valle del Cauca y en todas las zonas productoras
de maz en el mundo. Asociados con el cultivo del maz se han registrado cuatro
potyvirus que inducen los mismos sntomas o muy parecidos: Maz Dwarf Mosaic
Virus (MDMV), Sugarcane Mosaic Virus (SCMV), Johnson Grass Mosaic Virus
(JGMV) y Sorghum Mosaic Virus (SrMV). Las hospedantes de estos potyvirus
MRFV
Las partculas del virus del rayado fino de maz (MRFV) son isomtricas, de 30 nm
de dimetro, redondeadas. Contienen 33 % de cido nucleico y 67% de protena.
El cido nucleico consiste de cadenas sencillas de RNA lineal, con un genoma
monopartita de 67 kb y la protena tiene un peso molecular de 22.000 daltons. El
virus se encuentra en las hojas, en el mesfilo, en la epidermis, en el parnquima
vascular, en el citoplasma y en las vacuolas de las clulas en forma de agregados
dispersos. El virus pertenece al gnero Marafivirus, siendo la especie tipo para el
mismo.
El virus del rayado fino se caracteriza inicialmente por puntos clorticos ubicados
ordenadamente paralelos a la nervadura central y en la base de las hojas jvenes,
que inician su aparicin 3 4 das despus de que ocurre la infeccin. Con el
avance de la infeccin los puntos se unen y originan un rayado muy fino que
puede llegar a cubrir toda la lmina foliar (Figura 2.21). En cultivares muy
susceptibles hay necrosis de clulas con ruptura de la lmina foliar, acompaada a
veces de marchitamiento. Si la infeccin ocurre despus de floracin, los sntomas
no son muy evidentes y algunas veces no se manifiestan. Pero si ocurre en la
etapa de plntula, los granos no se forman bien y su llenado es deficiente. Se han
registrado como hospederas, adems del maz, algunas subespecies de
teosinte. El MRFV se encuentra ampliamente distribuido en Colombia, aunque en
los ltimos aos su incidencia ha disminuido, posiblemente por las aplicaciones
que se hacen para reducir las poblaciones de su insecto vector. Se ha observado
que en varios pases de Centroamrica reduce el rendimiento hasta en un 43%. El
virus es transmitido de manera persistente nicamente por el insecto
Cicadellidae, Dalbulus maidis. El porcentaje de transmisin se encuentra entre 10
y 34 por ciento. La partcula viral se multiplica en el insecto vector y es retenida
durante las mudas pero no es transmitida a su progenie a travs del huevo.
MStpV
El Virus del bandeado del maz (MStpV) se conoce tambin como el virus de la
hoja blanca del maz. La enfermedad tiene como agente causal un Tenuivirus, el
cual es transmitido de manera persistente por el delfcido Peregrinus maidis. El
virus tiene un periodo de incubacin en la planta de 3 a 24 das y en el insecto de
18 a 24 das. Todos los estados del insecto (ninfas y adultos braqupteros y
alados) son capaces de adquirir y transmitir el virus. La enfermedad se encuentra
distribuida en las zonas clidas donde se cultiva este producto. Fue incidente en la
dcada de los noventa y en la actualidad, se encuentra espordicamente en
algunas zonas del Valle del Cauca.
Los sntomas iniciales se presentan como puntos clorticos o rayas muy finas en
la base de las hojas jvenes. Posteriormente esas lesiones se unen y llegan a
cubrir toda la lmina foliar, la que se torna clortica o blanca, o presenta bandas
amarillas que alternan con zonas verdes y claras (Figura 2.22). Las plantas
muestran enanismo, entrenudos muy cortos y cuando la infeccin ocurre en
estado de plntula, el cogollo se dobla debido a que la mayora de las hojas salen
muy juntas por el acortamiento de los entrenudos. Algunas veces se presenta
marchitamiento y las plantas mueren prematuramente. Plantas muy afectadas no
producen mazorca y si esta se forma tiene muy pocos granos. Como hospedera
del Tenuivirus adems del maz, se ha encontrado Rottboellia exaltata.
Viroides
Hasta el momento, la secuencia de los cidos nucleicos de 25 viroides ha sido
determinada. Los viroides encontrados hasta el momento se han dividido en dos
familias: Avsunviroidae y Pospiviroidae (Tabla 2.3). El grupo Pospiviroidae es el ms
grande, ya que para el grupo Avsunviroidae solo se conocen dos representantes.
Grupo
Avsunviroidae
Pospiviroidae
Representantes
Avocado sunblotch viroid y
Peach latent mosaic viroid
Subgrupo
1
Subgrupo
2
foliolos pequeos. Las flores con filodia pueden proliferar y producir brotes
vegetativos, as mismo pueden producir tubrculos areos. Las plantas afectadas
por "stolbur" muestran clorosis y enrollamiento de los foliolos tipo cuchara,
generalmente las plantas se secan y marchitan. Los tubrculos son blandos y
pueden desarrollar brotes delgados y ahilados.
Figura 2.24 Sntomas causados en papa por fitoplasmas. A: Brotes anormales. B: Races con
aspecto de pelos.
Fuente: http://www.bspp.org.uk/ndr/jan2005/2004-66.asp
Cada virus se caracteriza por su gama de hospederos, algunos pocos virus ubicuos
tienen una gama de hospederos muy extensa. La infeccin experimental de plantas
elegidas de entre la gama de hospedadores del virus es corrientemente utilizada
con fines de identificacin. Para los virus restringidos solamente en algunas
especies, la eleccin de plantas es evidentemente restringida. En el caso de los
virus ubicuos, la reaccin de una sola especie no es suficiente en general para la
identificacin y se utilizan frecuentemente varias plantas denominadas hospederos
diferenciales. De esta forma, cualquier virus puede tericamente ser identificado
gracias a las reacciones acumuladas de un espectro de hospederos comunes.
Citopatologa
Existe una serie de modificaciones observables en las clulas de los tejidos
vegetales que son el resultado de un metabolismo alterado por la infeccin viral y
que son en parte responsables de los sntomas macroscpicos. Los productos de
la expresin del genoma viral adems de producir efectos citopatolgicos diversos
segn a la funcin la que estn destinados, se acumulan en el interior de la misma
clula en formas especficas y lugares preferenciales dando origen a una
multiplicidad de estructuras conocidas como cuerpos de inclusin. El valor
diagnstico de estas estructuras es elevado aunque su deteccin no es rpida ni
fcil. La observacin detallada de los cuerpos de inclusin puede ser llevada a cabo
con el microscopio electrnico. Uniendo las tcnicas de microscopia electrnica a
las serolgicas (inmunomicroscopa electrnica) se puede avanzar hasta la
identificacin de la cepa viral.
En el caso de los potyvirus, su RNA genmico codifica para al menos 7 protenas
no estructurales adems de la protena de la cpside. Algunas de estas protenas
cuya actividad especfica es actualmente conocida, se ubican en las clulas
infectadas a nivel de inclusiones caractersticas. Existen inclusiones cilndricas
citoplasmticas, que aparecen en cortes transversales en forma de rodetes
o pinwheels y en cortes longitudinales en forma de gavilla o bundles (Figura 2.25).
Las inclusiones nucleares son cristalinas (en el caso de BYMV virus del mosaico
amarillo del frjol), fibrosas, fibriladas o globulosas en lagunas. Las inclusiones
amorfas tienen forma granular, tubular o en bastoncillos.
Serologa
Las tcnicas serolgicas o inmunolgicas se basan en las propiedades antignicas
de las protenas virales (viriones, protenas estructurales de la cpside o protenas
de inclusiones). Utilizan anticuerpos o inmunoglobulinas obtenidas despus de
inmunizacin de animales con preparaciones purificadas de esas protenas. La
principal caracterstica de los test inmunolgicos es la especificidad de la reaccin
antgeno-anticuerpo, lo que hace de los mtodos inmunolgicos muy buenas
herramientas para la identificacin.
Para obtener anticuerpos dirigidos contra los virus de la planta, es necesario utilizar
animales, quienes son los nicos capaces de una reaccin inmunitaria. Lo ms
comn es emplear el conejo. La inmunizacin, que consiste en inyectar una
preparacin antgena, conduce a la sntesis de anticuerpos que se recuperan en la
sangre o en el suero (el ms sencillo), el cual puede ser empleado en los test
serolgicos. Tambin se pueden utilizar anticuerpos (inmunoglobulinas) purificadas
a partir de este suero. La sangre o suero recuperados son denominados
policlonales porque contienen muchos anticuerpos de diferentes reactividades.
Por lo tanto, para mejorar la especificidad de un reactivo policlonal, es necesario
perfeccionar el mtodo de purificacin del antgeno utilizado para la inmunizacin.
Esto consiste frecuentemente en una preparacin de viriones purificados que han
sido separados de los constituyentes normales de la planta-fuente por
centrifugacin en gradientes de densidad, aunque esta separacin es a veces difcil.
Por ltimo, tambin se puede utilizar como inmunizante, en lugar de los mismos
viriones, protenas de inclusiones, pero son los anticuerpos monoclonales los que
ofrecen sin duda la mayor especificidad. Los anticuerpos se pueden emplear en
diferentes tcnicas para la deteccin viral, tales como las pruebas de precipitacin,
las pruebas de aglutinacin, pruebas de ELISA, Dot blot e inmunoimpresin.
Mtodos moleculares
El estudio de la estructura del genoma de los fitovirus, secuencia de algunos de los
cuales es completamente conocida hoy en da, ha permitido aplicar las tcnicas de
hibridacin molecular al diagnstico de virus. En los ensayos de deteccin
particularmente sensibles se utilizan sondas genmicas especificas del virus. Esta
tcnica se fundamenta en la formacin de una molcula de cido nucleico de doble
cadena por hibridacin entre una molcula de la secuencia del genoma vrico y una
molcula sonda constituida por un cido nucleico complementario de esta
secuencia. La principal dificultad reside en la eleccin de la secuencia de la que
depender la especificidad del mtodo y en la construccin de la sonda que deber
ser clonada en un plsmido recombinante para luego ser integrado en una bacteria
competente. La comprobacin de la doble cadena viene asegurada gracias al
marcado de la sonda por un elemento radiactivo clido (P 32), o por un marcador
fro como la biotina, el acetilamino-fluoreno (AAF), la citosina fluorada o la
digoxigenina. La utilizacin de sondas moleculares se revela como particularmente
interesante para la deteccin de los viroides que, estando desprovistos de cpside,
no pueden ser reconocidos con la ayuda de sondas inmunoqumicas.
El principio relativamente simple del mtodo de PCR (Polymerase chain reaction)
se basa en la capacidad de sntesis de una cadena de DNA por una enzima de
replicacin, la DNA polimerasa, utilizando primers de cortas secuencias
nucleotdicas de alrededor de 20 pares de bases. Los dos cebos, complementarios
de cada una de las dos cadenas del DNA, permiten ampliar el fragmento de DNA
comprendido entre las zonas de apareamiento. Cuando se trata de detectar un virus
con genoma RNA, antes de la reaccin PCR se adiciona una etapa previa durante
la cual este RNA es recopiado en DNA con la ayuda de una transcriptasa inversa.
En ese caso el mtodo se denomina RT-PCR. Como aspectos positivos de la
tcnica de PCR estn: alta especificidad, posibilidad de diferenciacin entre cepas
virales, la realizacin de anlisis filogenticos con las secuencias obtenidas. Por
otra parte, las desventajas incluyen la imposibilidad de realizar anlisis masales
debido a los costos y la necesidad de personal altamente calificado para su
realizacin.
Cultivo de meristemos
La ausencia de virus en los meristemos de algunas plantas virosadas permite utilizar
el cultivo in vitro de fragmentos apicales para regenerar plantas atacadas por el
mosaico y variedades de patata infectadas por el virus Y (PVY). Las plntulas que
proceden de cultivos de pices in vitro no estn todas libres de virus. Las
probabilidades de xito dependen en primer lugar del tamao del explante extrado.
El cultivo de meristemos consiste en poner en cultivo in vitro un fragmento muy
pequeo de la cpula apical que es una zona en general libre de virus o en la cual
el virus se inactiva durante esta manipulacin; los inhibidores de virus, como el
virazol, permiten aumentar las posibilidades de saneamiento. La micropropagacin
entra en la segunda fase de una seleccin sanitaria. Despus de haber probado con
el mayor cuidado posible la ausencia de virus en un clon proveniente de meristemos,
es necesario multiplicarlo en condiciones aspticas.
Termoterapia
La utilizacin de temperaturas elevadas para la eliminacin de los fitovirus fue
realizada inicialmente en melocotones y fresas. Ms tarde, la termoterapia ha sido
exitosa en floricultura para el saneamiento de bulbos y tubrculos (begonia) y, sobre
todo, para la regeneracin de especies leosas (rosal, arbustos ornamentales). La
tcnica consiste en colocar los rganos o las plantas infectadas en condiciones de
temperatura en las que la multiplicacin viral es detenida. Para los bulbos, los
tubrculos o la madera de multiplicacin, el tratamiento vara entre algunos minutos
y algunas horas entre 35 y 54 C en agua caliente. En el caso de plantas en
vegetacin, los pies madre infectados son colocados en un recinto a 36-38 C con
un grado higromtrico cercano a la saturacin, durante tres a cuatro semanas y, a
veces, varios meses. A veces, resulta necesaria una pretermoterapia durante 8-15
das a temperatura ligeramente mas baja (30-35 C) con el fin de aclimatar las
plantas a las condiciones del tratamiento. De esta manera se logra tambin una
alternancia de temperaturas diurnas y nocturnas diferentes. El porcentaje de xitos
aumenta con la duracin del tratamiento que, con frecuencia, se prolonga hasta que
las plantas estn a punto de marchitarse. Si los virus son sensibles al calor, este
factor favorece por el contrario la replicacin de los viroides. Por ello, los
tratamientos a baja temperatura (crioterapia) han sido recomendados para la
eliminacin de algunos viroides como el de los tubrculos fusiformes de la patata
(PSTVd).
Quimioterapia
Las enfermedades producidas por virus nunca han podido ser combatidas de
manera directa por va qumica. Si bien se han citado casos de curacin por
quimioterapia (asociados frecuentemente al cultivo in vitro), hay que reconocer
que los resultados conseguidos hasta ahora no han respondido a las esperanzas
que haban suscitado, tanto en el reino vegetal como animal. Teniendo en cuenta
La seleccin sanitaria
Desde hace varios aos, la produccin de material vegetal sano bajo esquemas
de condiciones controladas se ha desarrollado considerablemente. El principio de
esa seleccin sanitaria es sencillo: basta con elegir plantas sanas, sin virus, que
sirvan de material inicial y multiplicarlas en condiciones que permitan conservar su
buen estado sanitario. A veces, dichos esquemas necesitan importantes
modificaciones en los sistemas de produccin existentes y la realizacin de
pruebas frecuentemente costosas. Su puesta a punto no est desprovista de
dificultades lo que incrementa sensiblemente el coste de los productos
comercializados. Mientras que la transmisin de los virus por la semilla es
relativamente rara y no tiene lugar ms que en proporciones pequeas, su
propagacin por la multiplicacin vegetativa es la regla general con proporciones
que alcanzan cerca del 100%. Para no correr el riesgo de multiplicar plantas
infectadas a veces de forma latente, conviene respetar escrupulosamente el
Para eliminar las plantas infectadas de forma latente, las pruebas de indexacin
incluyen mtodos: biolgicos (injerto, inoculacin mecnica de plantas test),
inmunolgicos o moleculares. En la etapa de produccin, la eleccin del mejor
mtodo depende de varios factores, tericamente los test que alcanzan mayor
sensibilidad son los mejores. Sin embargo, pueden requerir de prcticas
prolongadas o delicadas, o ser costosos. En la figura 2.26 se muestra un ejemplo
de un sistema de produccin para plantas de Dalia. En la primera fase se trata de
constituir el material de partida con un nmero limitado de plantas analizadas
individualmente que proceden de una seleccin de plantas reconocidas como
Variedades resistentes
La creacin de variedades resistentes a los virus es un medio eficaz y econmico
para luchar contra enfermedades virales, pero es un trabajo muy difcil, los genes
fuertes son muy raros y pueden ser superados rpidamente por el patgeno,
siendo un recurso bastante contradictorio y que necesita muchos cruzamientos.
Por el contrario, la seleccin de variedades relativamente tolerantes se ha
logrado de forma natural cuando las variedades ms sensibles haban sido
eliminadas por los obtentores. Sin embargo, desde hace algunos aos y gracias a
los progresos recientes de la biologa molecular, se han podido tener en cuenta
nuevas estrategias de lucha utilizando plantas resistentes obtenidas por
transgnesis.
Operaciones agronmicas
Las labores agronmicas para el control viral son variadas, y en combinacin entre
si pueden proporcionar buenos resultados. Adems tienen la ventaja de respetar
el equilibrio ambiental y de ser ejecutadas a unos costes moderados. Algunas de
estas prcticas son:
Eliminacin de residuos de los cultivos anteriores (hojas, tallos, races), es vlida
sobre todo para invernaderos por los virus transmisibles sin vector a travs del
suelo.
Propagacin en el campo con la eliminacin de las plantas infectadas que puede
ser til en el caso de los virus transmitidos por vectores. Es importante que las
plantas atacadas sean eliminadas evitando as la dispersin de los vectores.
Alternativa de cultivos o rotacin de cultivos, con cultivos no susceptibles a los
virus, tambin puede servir para controlar las poblaciones de vectores.
Realizacin de cultivos en lugares aislados, fuera del alcance de insectos
vectores.
Destruccin anticipada de la parte area del cultivo para evitar infecciones
tardas a los rganos de multiplicacin vegetativa, como tubrculos y bulbos para
semilla.
Anticipacin o retraso de las siembras y de los trasplantes en pleno campo,
teniendo en cuenta la curva de vuelo de los vectores para evitar en lo posible que
las plantas queden expuestas a la inoculacin durante los periodos de actividad
migratoria ms intensa de los vectores.
Interrupcin del cultivo: de una especie susceptible durante un periodo
determinado con el fin de interrumpir los ciclos de infeccin que se suceden en el
curso del ao sobre plantas hospederas continuamente presentes.
Proteccin cruzada
A inicios del siglo siglo 20, los virlogos vegetales observaron que cuando una
planta era deliberadamente contaminada por dos agentes que ocasionaban
diferentes sintomatologas, se presentaba una interferencia. Cuando una planta
infectada por el TMV es infectada con un virus de mosaico amarillo, esta no
presenta sntomas. En contraste, cuando una planta previamente infectada con
otro tipo de mosaico es infectada con el mosaico amarillo, si presenta sntomas.
Esta interferencia se da slo entre virus fuertemente relacionados y se llama
"proteccin cruzada" (Crossprotection, preinmunizacin). En adelante la
proteccin cruzada se emple para reconocer virus relacionados entre si, pero
cay en desuso con el desarrollo de nuevos mtodos serolgicos y moleculares
que permitieron realizar anlisis filogenticos ms exhaustivos. Pero el uso ms
potencial e importante de la proteccin cruzada fue en el control de enfermedades
o al menos de los sntomas ms severos. De esta forma, en 1950 se report el
empleo de la proteccin cruzada en algunos cultivares para contrarrestar los
efectos de agentes virales. Actualmente la proteccin cruzada con cepas suaves
es empleada en algunos pocos cultivares.
Control biolgico
El control biolgico consiste en utilizar organismos vivos como agentes de control
de plagas. El rpido aumento del empleo de abejorros para la polinizacin sirvi
de fuerte estimulo para la aplicacin del control biolgico ya que los plaguicidas
qumicos no podan compaginarse con la utilizacin de abejorros. Los abejorros
ahorran trabajo en comparacin con la polinizacin manual y por ello los
agricultores muestran una mejor disposicin para pagar ms por el control
biolgico. Cuando se necesita tener disponibles enemigos naturales de forma
contina durante largos periodos, puede resultar ms econmico crear plantas
refugio que sirvan como alimento y para la reproduccin de parsitos
depredadores.
Se puede conseguir un control de las enfermedades virales tratando de afectar el
comportamiento de sus insectos vectores. Los insectos se comunican con su
entorno por seales de luz que identifican mediante fotorreceptores especiales
que forman parte de su sistema de visin, incluyendo la cadena de
acontecimientos que empieza con su orientacin hacia la planta desde la distancia
y termina con su establecimiento sobre la misma con fines de alimentacin y
oviposicin. Al interferir en diferentes fases a lo largo de esta trayectoria, podemos
prevenir un contacto entre vector y planta. Los materiales fotoselectivos de
cubierta de invernaderos pueden servir de enormes filtros para eliminar partes del
espectro de luz inhibiendo de esta forma el desarrollo de epidemias causadas por
insectos y virus.
Hace poco se descubri que los cultivos de hortalizas y especias plantados en
invernaderos tipo tnel cubiertos con polietileno que absorbe los rayos UV estaban
altamente protegidos contra la infestacin de diferentes plagas y enfermedades
virales. En invernaderos tipo tnel de tamao comercial cubiertos con polietileno
absorbente de radiacin UV la incidencia del TYLCV fue solamente del 1%
comparado con el 90% en los tneles control cubiertos con plsticos normales. En
ensayos con verduras cultivadas en invernaderos tipo tnel, la utilizacin de
plsticos absorbentes de radiacin UV redujo considerablemente la incidencia de
tres plagas importantes: B. tabaci, F. occidentalis y L. trifolii. El efecto de
proteccin de mallas de 50 mesh (hilos/pulgada) contra plagas de insectos mejor
de forma considerable al aumentar su capacidad para filtrar la radiacin de la
gama ultravioleta. Se demostr que las mallas de 50 mesh que absorben rayos UV
son notablemente ms eficaces para bloquear la invasin de moscas blancas,
pulgones y minadores que la tradicional malla antivirus de 50 mesh. Se sugiere
que la eliminacin de radiacin UV del espectro de luz interfiere con la capacidad
de orientacin de moscas blancas y otros insectos controlada por fotorreceptores
situados en los ojos de los insectos.
Otras metodologas incluyen el uso de diferentes materiales. Se ha comprobado
que resulta ser eficaz para reducir o prevenir una infeccin viral repeler los
pulgones mediante acolchados de superficie reflectante o pulverizaciones con
materiales reflectantes. Se obtuvo un efecto similar de proteccin al colocar mallas
blancas de 2-8 mesh por encima del cultivo camuflando as las plantas de los
pulgones cortos de vista. El uso de acolchados amarillos de polietileno pegajoso
es altamente eficiente en el control de virus transmitidos por mosca blanca. Se
sugiere que las moscas blancas son activamente atradas por la superficie de
color quedndose all el tiempo suficiente hasta que mueren por el calor generado.
Finalmente, se pueden usar plantas cebo y cultivos trampa, que se han utilizado
con xito para reducir la incidencia de virus propagados por insectos vectores. Los
grandes monocultivos proporcionan normalmente un ambiente favorable para la
transmisin de virus de una plantacin a otra. La plantacin de barreras de cultivos
susceptibles alternativos puede reducir de forma significativa la proporcin de virus
propagados en el campo. La preferencia de las moscas blancas por ciertos
cultivos puede utilizarse para reducir su aterrizaje en el cultivo a proteger
plantando un cultivo cebo al lado.
Control qumico
El uso de plaguicidas qumicos ha sido predominante en el manejo de plagas
desde 1950. Estos qumicos pueden controlar eficazmente la propagacin de virus
transmitidos de forma circulativa debido a los largos periodos de alimentacin
necesarios para la adquisicin y transmisin, y el periodo de latencia entre las
La transferencia de genes
a transferencia de genes consiste en modificar de forma estable el patrimonio
hereditario de una planta introduciendo en su genoma un fragmento ajeno de DNA
portador de una nueva informacin gentica: a tal planta se la denomina
transgnica. De esta manera se puede expresar en una planta genes de
diversos orgenes, como, por ejemplo, un gen viral susceptible de dotarle de una
determinada resistencia. La transformacin de la clula vegetal se realiza por
intermedio de vectores naturales como la bacteria Agrobacterium tumefaciens, o
directamente por medios fsicos o qumicos (electroporacin). La bacteria
fitopatgena A. tumefaciens, agente de una proliferacin tumoral, es el origen, en
las plantas que infecta, de un proceso de transformacin natural, transfiriendo al
genoma de la clula hospedera una parte (DNA-T) de un gran plsmido Ti. Por
ese mismo proceso, un gen clonado e insertado en el DNA-T del plsmido Ti
(desarmado, es decir no oncognico) podr ser transferido al genoma de la clula
vegetal. A continuacin, ser necesario regenerar plantas enteras a partir de esas
clulas transformadas. El dominio de dicha regeneracin (capacidad de las clulas
para dividirse y transformarse en yemas) es un factor decisivo para el xito. Esta
etapa clave constituye actualmente el factor limitante para la transformacin de
algunas especies, particularmente de las monocotiledneas.