Identificacin de bacterias en agua potable y agua purificada

durante la supervisin de un sistema tpico de purificacin de

agua
Vessoni Thereza Christina Penna * , Silva Alzira Maria
Martins y Priscila Gava Mazzola
*Autor para la correspondencia: Vessoni TC
Penna tcvpenna@usp.br
Afiliaciones de los autores
Departamento de Bioqumica y Tecnologa Farmacutica de la
Facultad de Ciencias Farmacuticas de la Universidad de So Paulo,
So Paulo, Brasil
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BMC Salud Pblica 2002, 2 : 13 doi: 10.1186 / 1471-2458-2-13
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Recibido:
01 de marzo 2002
Aceptado:
15 de agosto 2002
Fecha de publicacin:
15 de agosto 2002
2002 Penna et al; licenciatario BioMed Central Ltd Este es un
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Abstracto
Fondo
Un sistema de purificacin tpico que proporciona agua purificada que
cumple con los estndares qumicos inicos y orgnicos, debe ser
protegido de la proliferacin microbiana para reducir al mnimo la
contaminacin cruzada para su uso en la limpieza y preparaciones en
las industrias farmacuticas y en entornos de salud.
Metodologa
Las muestras de agua se tomaron directamente desde el tanque de
agua de distribucin pblica en doce etapas diferentes de un sistema
de purificacin tpica se analizaron para la identificacin de las
bacterias aisladas. Se utilizaron dos kits miniatura: (i) el sistema de
identificacin (api 20 NE, Bio-Mrieux) por bacilos gramnegativos no
entricos y no de fermentacin; y (ii) el sistema de identificacin
(cristal de BBL, Becton y Dickson) para entrica y bacilos
gramnegativos no fermentadores. La eficacia de los desinfectantes
qumicos utilizados en las etapas del sistema, sobre las bacterias
aisladas e identificadas en el agua de muestreo, se evalu por el
mtodo de concentracin mnima inhibitoria (CMI).

Resultados
Las 78 colonias aisladas se identificaron como las siguientes
bacterias: gneros Pseudomonas, Flavobacterium y .
Acinetobacter Segn los kits miniatura utilizados en la identificacin,
hubo una prevalencia de aislamiento
de P. aeruginosa 32,05%, P. pickettii (pickettii
Ralstonia) 23,08%, P.vesiculares 12,82%, P. diminuta 11,54%, F. aureu
m 6,42%, P. fluorescens 5,13%, A. lwof 2,56%, P.putida 2,56%, P. Alc
aligenes 1,28%, P. paucimobilis 1,28%, y F. multivorum 1,28%.
Conclusiones
Encontramos que la investigacin se requiere para la identificacin de
bacterias no fermentadoras gram-negativas, que se aislaron a partir
de sistemas de agua potable y de purificacin de agua, ya
quePseudomonas gneros representa patgenos oportunistas que se
dispersan y se adhieren fcilmente a las superficies, formando una
biopelcula que interfiere con la procedimientos de limpieza y
desinfeccin en hospitales y entornos industriales.
Palabras clave:
Sistema de purificacin de agua; Pseudomonas ; Concentracin
mnima inhibitoria (MIC); Bacterias Gram-negativas no fermentadoras
Fondo
El agua es uno de los elementos ms importantes para todas las
formas de vida y es indispensable para el mantenimiento de la vida
en la Tierra y esencial para la composicin y la renovacin de las
clulas.El agua representa el 70% de nuestro cuerpo, participa en la
composicin de los tejidos, y transporta las ms diversas sustancias
en todo nuestro organismo. No obstante, los seres humanos cada vez
continan contaminando las reservas que an se conservan,
provocando enfermedades que pueden poner en riesgo a la
poblacin[ 1 ].
Bioacumulacin, alcantarillado, agrcolas, industriales, radiactivos y
residuos trmicos son los principales contaminadores del agua en
nuestro planeta.
Agua Purificada
El agua es esencial para fines industriales, farmacuticos y
hospitalarios, en la preparacin y elaboracin de los medicamentos y
otros productos sanitarios. En la mayora de los casos, el agua es una
entrada, que debe ser incorporado en el producto durante el
procesamiento. En otras ocasiones, incluso si no est presente en la
preparacin, que se utiliza especialmente para fines de limpieza y de
higiene. Se reconoce que la mayor demanda de agua se destina al
consumo humano, su calidad est relativamente garantizado hasta el
punto en que la red de transporte tubera termina.
Aunque el agua potable es apta para el consumo humano, no
garantiza que la llamada calidad potable tambin podra ser utilizado
en instalaciones industriales, equipos de preparacin de
medicamentos, alimentos, cosmticos, materiales
chemopharmaceutical, o unidades de los centros de salud para la

limpieza y lavado de las zonas semi-crticos o dispositivos anteriores a

la aplicacin de los procedimientos de desinfeccin o esterilizacin.
Por esta razn, cada planta industrial o farmacutica relacionada con
productos de salud debe basarse en sistemas de purificacin de agua
adecuados, lo que le permite cumplir con sus requerimientos
particulares, sobre todo en cuanto a los problemas relacionados con
el almacenamiento y la distribucin interna. Este procedimiento debe
garantizar el suministro de acuerdo con el volumen requerido y de
acuerdo con los puntos de consumo de calidad exigidos.
El agua purificada se utiliza como un recurso en la produccin de
preparados oficiales, farmacutica (industrial, y en unidades de
centros de salud) aplicaciones tales como la limpieza de dispositivos
semi-crticos, reas y equipos, as como en la preparacin de
productos qumicos farmacuticos y bacteriolgica medios de
comunicacin. Tambin se utiliza como el componente principal en las
soluciones de dilisis peritoneal en los hospitales, en las soluciones de
nutrientes (incluyendo botellas de enfermera) y soluciones de
nutrientes enterales lquidos, preparado en el lactarium hospital y se
administra a los nios y pacientes dbiles que pueden comer
alimentos slidos regular.
El agua purificada se obtiene a partir de agua potable [ 1 ] a travs de
un sistema de purificacin de agua tpico de operaciones de la
unidad, cumpliendo con las normas establecidas por las directivas
1978/1990 emitido por el Ministerio de Salud de Brasil[ 2 ]. Sistemas
de agua purificada deben ser validados a fin de que el agua para
satisfacer las necesidades [ 3 ]: por la pureza de inica (conductividad
1,3 microsiemens / cm, a 25 C) y de compuestos orgnicos totales
(COT <0,5 mg / L), e incluso debe ser protegido de la proliferacin
microbiana (enumeracin total de <100 UFC / mL), prevencin de la
formacin de pirgenos. Se requiere que el estndar bacteriolgica
1.0 Unidad de endotoxina (EU / ml) para el agua purificada estril
utilizado en el lavado de dispositivos crticos antes de la esterilizacin
en autoclave.
El sistema de agua purificada que produce, almacena y circula agua
bajo condiciones de fondo es "susceptible al establecimiento de
biofilms adhesivas o microorganismos", que puede ser la fuente de
niveles indeseables de microorganismos viables o endotoxinas en el
agua efluente. Estudios recientes han demostrado que los sistemas
de purificacin de agua casi todas las grandes pueden causar la
formacin de biofilm en la tubera. Este biofilm puede propagar
microorganismos dentro del sistema y contribuir a un aumento de
partculas, bacterias, y el nivel de carbono orgnico total (TOC). La
contaminacin puede afectar a todo el proceso en la industria
farmacutica o entorno hospitalario.Estos sistemas requieren
saneamiento frecuente y la vigilancia microbiolgica para asegurar
que el agua de la calidad microbiolgica adecuada (lmite microbiana
en los puntos de uso)[ 3 ].
Los datos de seguimiento se analizarn en forma permanente a fin de
garantizar que el proceso contina a realizar dentro de lmites
aceptables. Debe reconocerse que los niveles de alerta y la accin

microbiana establecidos para cualquier sistema de agua farmacutica

estn obligatoriamente vinculados al mtodo de monitorizacin
elegido. El uso de las metodologas recomendadas generalmente
considerados, los niveles de accin adecuados son 500 unidades
formadoras de colonias (UFC) por ml de agua potable, 100 UFC / mL
de agua purificada, y 10 UFC / ml de agua para inyeccin (WFI); los
lmites de pirgenos son <1,0 endotoxina Unidad / mL de agua
purificada, <0,5 UE / ml de WFI y <0,25 UE / ml de WFI
estril[ 2 , 3 ]. Para la fermentacin de bacterias gram-negativas en el
agua potable, las normas indican que los coliformes totales deben ser
menos de 10 -2 UFC / ml a la del agua potable. Ni las normas
federales de Brasil ni la USP 24[ 3 ] incluye los niveles de bacterias no
fermentadoras gram-negativas, tales como
las Pseudomonas especies, que son la principal causa de las
biopelculas y enterotoxinas[ 4 ] en agua purificada.
Durante el desempeo de un sistema tpico de purificacin de agua,
los efectos del presente trabajo fueron: (i) examinar la eficiencia de
cada etapa de tratamiento; (Ii) para caracterizar las bacterias aisladas
en cada etapa, desde el tanque de almacenamiento de agua hasta
suministrado pblicamente hasta el punto final de consumo de agua
purificada. Tambin se estudi la concentracin inhibitoria mnima
(CIM) de los principales agentes qumicos utilizados en la desinfeccin
del sistema de purificacin de agua sobre las bacterias aisladas e
identificadas.
Mtodos
Las muestras de agua
Se analizaron muestras procedentes de trece puntos de un sistema de
purificacin de agua tpica (10.000 L / da) por triplicado. Tres
analistas recogieron muestras de agua desde todos los puntos
indicados en la hoja de flujo de un sistema tpico de purificacin de
agua USFilter [ 5 ], colocado en el Edwards Lifesciences Macchi, SP,
Br.
Antes de muestreo del agua, se hizo todo lo del grifo de muestreo
(punto) sanitaria con acetato de 70% de alcohol, se abri la vlvula y
el agua se dej fluir (aproximadamente 3 l / min) libremente durante
unos 60 segundos, seguido por la toma de una muestra de 100 ml de
agua en una bolsa de polietileno estril (Millipore, Bedford, MA,
EE.UU.).
Diagrama de flujo de un sistema tpico de purificacin de agua
Punto 1: Tanque de almacenamiento (agua de alimentacin)
Punto 2: Dos Filtros multimedia (filtracin primaria)
Punto 3: Dos ablandadores de agua (reduccin de la dureza)
Punto 4: Un filtro de carbn activado (eliminacin de cloro)
Punto 5: Un filtro de 5,0 micras (eliminacin de materiales de
partculas)
Punto 6: Un sistema de membrana de smosis inversa (eliminacin de
sustancias orgnicas e inorgnicas)
Punto 7: Una columna de desionizacin continua (extraccin de
minerales y sales disueltas)

Punto 8: Un tanque de almacenamiento (agua tratada)

Punto 9: la luz UV: 254 nm (reducir TOC)
Punto 10: Tres 0.05 micras filtros en paralelo (eliminacin de
partculas y bacterias)
Puntos 11, 12, 13: Loop de distribucin de agua purificada para el
consumo
El sistema de purificacin de agua se presenta en la hoja de flujo [ 5 ]
incluye las siguientes etapas y posterior del aparato, desde donde se
tomaron muestras de los puntos de agua:
Punto 1: El tanque de almacenamiento fue alimentado con el agua
potable distribuida por SABESP [ 1 ] (Compaa de Saneamiento
Bsico del Estado de So Paulo). El tanque de almacenamiento de
polietileno tiene una cubierta cerrada y una capacidad de 10.000
LH 2 O diseado con una vlvula sifn instalado en la parte inferior de
la salida del tanque. Tambin est equipado con una bomba
centrfuga de presin (acero inoxidable, 40 L / min / 414 kPa), que
presuriza el agua al punto 02 a travs de los filtros multimedia.
Punto 2: Dos filtros multimedia paralelos entre s (US Filter, fxxfa
rlzms12, Warrendale, PA, EE.UU.) ofrece una eliminacin altamente
eficiente de materia fragmentada suspendido del agua. Se
seleccionan las tres capas de medios de comunicacin (arena,
antracita y cuarzo) de acuerdo con su tamao en particular, la
gravedad especfica y la capacidad para atrapar partculas de rangos
de tamao especficos ( 10 micra). A medida que el agua fluye hacia
abajo a travs del lecho, se encuentra una capa de medios de
comunicacin con la disminucin de porosidad / permeabilidad para
que las partculas sucesivamente ms pequeas se encuentran
atrapados en cada capa, proporcionando filtracin en profundidad.
Punto 3: Dos ablandadores de agua de una resina de sodio alternado
(filtro de EE.UU., rlzsd12fxxya) que eliminan minerales duros del
agua. Agua de intercambio inico intercambios suavizantes de los
cationes calcio y magnesio del agua con un nmero equivalente de
cationes de sodio.
Punto 4: Un filtro de carbn activado (US Filter relzcs12fxxfa) se utiliza
para eliminar el cloro, cloraminas, y se disolvi sustancias orgnicas
del agua. Los filtros de carbn se utilizan frecuentemente como el
pretratamiento de membranas de smosis y resinas de intercambio
inico, evitando daos por sustancias oxidantes, tales como cloro.
Punto 5: Un 5,0 micra de polietileno microporoso profundidad filtro de
pantalla (US Filter, fcrof2005) se utiliza a menudo por delante de otras
operaciones de purificacin de agua, tales como desionizacin, y la
smosis inversa, como un filtro de pulido para retirar la resina, finas
coloides de carbono, y los microorganismos.
Punto 6: Un sistema de membrana de smosis inversa (polmeros de
poliamida, US Filter, rsolv204021133) - El proceso natural de la
smosis se produce cuando una solucin con diferentes
concentraciones de sales se separa por una membrana semipermeable. Como la presin osmtica impulsa el agua a travs de la
membrana, el agua diluye soluciones ms concentradas, hasta que se
alcanza un equilibrio. El agua pura permeado se recoge en el lado

aguas abajo de la membrana. La smosis inversa elimina el 90% 99% de las partculas, coloides, bacterias, pirgenos, sustancias
orgnicas e inorgnicas disueltas superiores a 200-300 peso
molecular (MW) de rango o mayor que el tamao de poro de la
membrana de 150 a 200 angstroms. La conductividad del agua a la
entrada es de 150 mS y en la salida es de 5 mS. Se utilizan cuatro
membranas (10,16 cm x 101,6 cm) con una capacidad de salida de
16 L / min. La vida til de la membrana es de entre 2 y 3 aos y el
saneamiento se lleva a cabo a travs de la asociacin de cido
peractico con una solucin de perxido de hidrgeno.
Punto 7: Una desionizacin continua (US Filter, cdi = ccdis20 1)
columna que elimina los minerales y sales disueltas, as como algo de
materia orgnica disuelta, a partir de las resinas de intercambio
inico de cruce corriente de agua. La operacin de intercambio inico
elimina cationes cargados positivamente, tales como calcio,
magnesio, sodio y del agua mediante resinas de intercambio
catinico, que se reemplazan por iones de hidrgeno. Aniones
cargados negativamente tales como cloruro, nitrato, y la slice se
eliminan del agua mediante resinas de intercambio de aniones fuertes
basadas, y iones hidrxido forman entonces las molculas de agua. La
corriente de agua pasa a travs de un lecho mixto de resinas de
intercambio catinico y aninico, que produce una muy alta calidad
de agua con una resistencia de hasta 1,3 S / cm (18,3 megohm-cm) a
25 C.
Punto 8: Un tanque de almacenamiento de polietileno (1,500 L) con el
agua tratada, de los cuales el depsito tiene un diseo de la cubierta
cerrada con una bola de pulverizacin en la parte superior para
difundir el agua, mantenindolo en movimiento continuo a fin de
evitar cualquier riesgo de contaminacin . El depsito est tambin
provisto de una vlvula de sifn instalado en la parte inferior de la
salida del tanque, un alivio de presin, y un filtro de 0,2 micras
ventilacin. El bucle de distribucin para los puntos de uso se lleva a
cabo a travs de dos bombas.
Punto 9: Luz Ultravioleta ( = 254 nm, US Filter, SL-1) se utiliza como
un paso final en el tratamiento para el propsito de prevenir el
crecimiento de microorganismos, y la reduccin de carbono orgnico
total (TOC).
Punto 10: Tres 0.05 micras filtros se establecen paralelos entre s (US
Filter, Zha 153.107). Filtros microporosos se utilizan para eliminar las
partculas y bacterias, que van de 0,05 a 0,5 micras contaminantes,
que no sera ordinariamente pueden eliminar por filtracin en
profundidad.
Puntos de uso 11,12 y 13: Cada punto de uso se proporciona con 3
filtros de 0,05 micras conjunto paralelo entre s. A partir de esos
puntos, el agua purificada para el consumo es proporcionada por un
bucle de distribucin y se utiliza para la limpieza de dispositivos
crticos (oxigenadores de membrana y tubos de PVC), el lavado de las
reas semi crticos, la preparacin de soluciones qumicas, y el
bacteriolgicos cultura medios de comunicacin.

Los medios de cultivo, enzimtica y las reacciones

bioqumicas de las pruebas de eficiencia
La prueba de la eficiencia de los medios de cultivo se llev a cabo con
cepas estndar: Aspergillus nigerATCC 16404, Bacillus subtilis ATCC
6633, Candida albicans ATCC 10231, y Pseudomonas aeruginosaATCC
27853, Escherichia coli ATCC 25922, de conformidad con USP
24[ 3 ]. La evaluacin de las reacciones enzimticas y bioqumicos,
realizado en la identificacin de las colonias aisladas, se llevaron a
cabo con cepas estndar de Pseudomonas aeruginosa ATCC
27853, Aeromonas hydrophila ATCC 35654, Alcaligenes faecalis ATCC
35655, y Flavobacterium multivorum ATCC 35656.
Filtracin de la muestra
Las muestras fueron sometidas al mtodo de filtracin por 0,45
micras membranas en una cmara de flujo laminada clase 100. Esto
fue seguido por un perodo de incubacin de 72 horas a 30-35 C
(soja trptico Agar, TSA, Difco, Detroit, Michigan, EE.UU.) para el
recuento total de bacterias (hetertrofos), y durante 22 horas a 34,5 a
35,5 C ( m Endo Agar Menos, Difco) para el recuento de coliformes
totales, de acuerdo con la Farmacopea de Estados Unidos Formulario
Nacional, en el captulo: "El agua para uso farmacutico USP 24 / NF
2000" [ 3 ]. Cada grifo de muestreo (punto) se analiz por triplicado
para los recuentos de bacterias hetertrofas y coliformes totales. Con
el fin de estimular el crecimiento de las bacterias estresadas y sin
cloro tolerante, que acaba de comenzar utilizando R2A Agar para
mejorar la enumeracin de organismos hetertrofos en agua potable
tratada.
Aislamiento de colonias
De cada cultivo TSA, las colonias se transfirieron a la superficie de la
cetrimida (Difco) en placas y se incubaron a 30-35 C durante 18-24
h. Las colonias desarrolladas se presentaron luego a la oxidasa y indol
pruebas, seguido de gneros bioqumica y pruebas de identificacin
de especies. En cada placa, se aislaron todas las colonias
desarrolladas para la identificacin. Los criterios utilizados fueron
morfologa de la colonia y color colonia. El nmero total de colonias
encontrar en cada punto de muestreo (CFU / 100 ml) y se recogi
para la identificacin, se muestran en las Tablas01 y2 .
Tabla 1. Nmero (y porcentaje) de gneros y especies de bacterias
gram-negativas identificadas a travs del porcentaje de las
reacciones positivas de las colonias aisladas.
Tabla 2. enumeracin total (UFC / 100 ml) y la identificacin de
bacterias Gram-negativos no fermentadores de los
gneros: Pseudomonas, Flavobacterium, Acinetobacter identificado
por el kit de BBL Crystal (Becton Dickinson) y API 20 NE kit
(bioMrieux), a cada punto de muestreo.
Pruebas de identificacin

Las pruebas de identificacin para los gneros y especies se

realizaron mediante el uso de dos sistemas de micro-mtodo
estandarizado: (i) de la API 20 NE kit de bioMrrieux que se utiliz
para la identificacin de bacilos gram-negativos no fastidiosos [ 6 ]
que no pertenecen a la Enterobacteriaceafamilia; (I) BBL entrico
cristal / no fermentadores kit ID de Becton Dickinson y que se utiliz
para la identificacin de bacterias gram-negativas aerobias que
pertenecen a la familia de Enterobacteriacea , as como algunos de la
fermentacin aislado ms frecuentemente glucosa y no bacilos
gramnegativos fermentacin.
Los micro-mtodos empleados son modificaciones de los mtodos
clsicos y los principios bsicos de las reacciones siguen las normas
bioqumicas y enzimticas descritas para las bacterias de
fermentacin entricos / no por Murray et al.[ 4 ].
El kit ms especfica NE API 20 est compuesto de 20 microtubos que
contienen los medios de comunicacin y / o sustratos deshidratados,
combinando 8 pruebas convencionales y 12 pruebas de
asimilacin. La interpretacin de las reacciones se realizaron de
acuerdo con las mesas de lectura utilizando el software de
identificacin con el cristal de BBL o API 20 NE base de datos.
Se emplearon las pruebas bioqumicas en el sistema de identificacin
de bioMerieux y las respectivas reacciones fueron: (a) nitrato de
potasio (NO 3 ) para la reduccin de nitrato a nitrito, (b) el triptfano
(trp) para la produccin de indol, y (c) glucosa ( glu) para el medio de
acidificacin. Los sustratos utilizados para las reacciones de hidrlisis
enzimticas fueron: (d) arginina (adh) para arginina dihidrolasa, (e)
urea (URE) para ureasa, (f) esculina (esc) para -glucosidasa, (g) de
gelatina (gel) para proteasa, y (h) p-nitrofenil--D-galactopiransido
(PNPG). Para las pruebas de asimilacin, los sustratos empleados
fueron los siguientes: glucosa (GLU), arabinosa (ARA), manosa (MNE),
manitol (MAN), N-acetil-glucosamina (NAG), maltosa (MAL), gluconato
(GNT), caprato (PAC), adipato (ADI), malato (MLT), citrato (CIT) y fenilacetato (PAC). Cuando el sustrato fue asimilado por el
microorganismo, su crecimiento fue detectado por la turbidez visible
en el medio correspondiente. Las reacciones se visualizaron mediante
la adicin de agentes reactivos y un cambio en el indicador.
El kit de cristal de BBL es un mtodo en miniatura de identificacin
que comprende modificado sustratos convencionales y cromognicos,
que se distribuyen en 30 deshidratado sustratos enzimticos y
bioqumicos en los paneles. Las pruebas bioqumicas utilizan los
siguientes hidratos de carbono: glucosa, arabinosa, manosa,
sacarosa, melibiosa, ramnosa, sorbitol, manitol, inositol y. La
utilizacin de los resultados de hidratos de carbono en un pH ms
bajo y un cambio en el indicador. Pruebas cromognico, a su vez,
utilizan nitrofenil fosfato, nitroanilida prolina, xilsido nitrofenilo,
arabinsido, glucurnido y la glucosamina, esculina, fenilalanina,
arginina, lisina, urea, glicina, citrato, y malonato.
Concentracin mnima inhibitoria (MIC prueba)

Las bacterias de referencia utilizados fueron Pseudomonas

aeruginosa, Pseudomonas fluorescens, Pseudomonas, Alcaligenes
pickettii Pseudomonas, Flavobacterium aureum, y Acinetobacter
lowf(Tablas1 y2 ), que se aislaron de los puntos seleccionados del
sistema tpico de purificacin de agua, y se mantuvieron en un
trptico inclinado de agar de soja (TSA, Difco) a 4 C, con
transferencias mensuales. Los cultivos de 24 horas desarrollados en
TSA a 30-35 C se recogieron en un caldo de soja trptico (TSB,
Difco), se centrifug (1000 g / 15 min / 4 C), y suspendido en
solucin salina (0,95% de NaCl 0,1 plus % de peptona) para una
poblacin final (por vertido placa) de 10 6 UFC / mL, y las
suspensiones se aplicaron a las pruebas de CIM.
La concentracin inhibitoria mnima (MIC) se determin mediante el
mtodo de dilucin en caldo de dos veces [ 7 ]. A partir de una
solucin de agente qumico, diluciones en serie se prepararon en TSB
inoculado con las poblaciones bacterianas de prueba entre 1,2 y 3,0
10 6 UFC / mL. La MIC fue identificado como que tiene la
concentracin ms baja del agente qumico, lo que result en la
inhibicin de confirmado el crecimiento del microorganismo
ensayado, despus de 24 h de condiciones ptimas de
incubacin. Las soluciones de agentes qumicos, comenzaron las
concentraciones y los valores de pH empleadas se muestran en la
Tabla03 .
Tabla 3. Las concentraciones mnimas inhibitorias (CMI) de agentes
qumicos para la reduccin de las poblaciones de bacterias sobre 6log 10 .
Los agentes qumicos, soluciones respectivas, y las
concentraciones utilizadas en el ensayo de MIC
1. Alcohol etlico 70% v / v (Ferreira, SP, Br). Solucin de etanol al
70% (pH = 7,2) fue utilizado como el desinfectante en las superficies
externas de grifos de muestreo y vlvulas.
2. hipoclorito de sodio NaOCl (Nuclear, SP, Br). Puesto que la
concentracin de hipoclorito de sodio comercial es variable, con el fin
de calcular la cantidad de hipoclorito de sodio (H) para ser diluido en
agua purificada y para llevar a cabo aproximadamente 0,5% v / v, la
siguiente frmula se aplic: H = (5,4 * V ) / (% de concentracin
NaOCl); donde H es el volumen de NaOCl al 10% (w / v) para diluir y V
es el volumen final deseado de la solucin de NaOCl al 0,5%
(aproximadamente 1% del volumen del tanque); y NaOCl es en una
concentracin inicial de 10%. La concentracin del cloro disponible
total se determin por el mtodo yodomtrica[ 7 ]. La solucin de
NaOCl al 0,5% (pH = 11,9) para la exposicin 60 min se utiliza en la
liquidacin de los tanques de alimentacin de agua (punto 01), el
almacenamiento (punto 08) y en el bucle de distribucin (antes de los
puntos 11, 12 y 13 ).
3. Una solucin de 4,5% (v / v) de cido peractico y el 22% (v / v) de
perxido de hidrgeno ms 10 mg / L de cido actico (Minncare, pH
= 1,3, Minntech Corporation, Minneapolis, MN, EE.UU.) se utiliz por

Minncare disolviendo en agua purificada, realizando 0,45% de PAA y

2,2% de H 2 O 2 , alcanzando un pH final de entre 2,0 y 2,3 en el
tanque. Esta solucin Minncare 1% (PAA + H 2 O 2 ) se aplica a la
limpieza de membranas de smosis inversa (punto 6) y la
desionizacin continua aparato (punto 7) durante tres horas, a fin de
obtener agua purificada, y 18 horas para WFI que se utiliza para
preparar soluciones parenterales, incluyendo soluciones de dilisis
peritoneal.
4. Una solucin de hidrxido de sodio (Nuclear, SP. Br) se prepar
disolviendo 200 g de NaOH en 50 litros de agua purificada, la
realizacin de 0,4% (w / v) con un pH final de 12,8 en el tanque. Una
solucin de 0,4% de hidrxido de sodio se utiliza para ajustar el valor
de pH de agua cida en la smosis inversa (punto 06) y la
desionizacin continua (punto 07).
5. Un cido ctrico (Ciro, SP, Br) solucin se prepar disolviendo 225 g
de cido ctrico en 45 litros de agua purificada, la realizacin de 0,5%
(w / v) con un pH final de entre 2,0 y de 2,5 en el tanque . Una
solucin de cido ctrico 0,5% se utiliza para acidificar el agua en las
membranas de smosis inversa (punto 06), antes de la aplicacin de
1% de la (PAA + H 2 O solucin).
6. Una solucin de cido clorhdrico (Synth, SP, Br) se prepar
mediante la adicin de 5,5 litros de cido clorhdrico al 37% v / v a 40
litros de agua purificada, realizando 5,0% (pH = 0,3). La solucin final
de 0,3% de HCl se aplica en el ajuste del pH del agua en las columnas
de desionizacin (punto 7).
7. Una solucin de bisulfito de sodio (Ciro, SP, Br) se prepar
disolviendo 1 kg de bisulfito de sodio en 100 litros de agua purificada,
la consecucin de 1,0% w / v (pH de 4,0). La solucin de bisulfito de
sodio a una concentracin del 0,5% se utiliza para conservar los filtros
multimedia (punto 02), ablandadores de agua (punto 03) y en la
decloracin de filtros de lecho de carbono (punto 04).
Resultados y discusin
Aislamiento de colonias
De los trece puntos, que fueron analizadas por triplicado, setenta y
ocho fueron aislados (78) colonias, con diferentes aspectos: la
viscosidad circular, puntiagudos y brillantes, opacas, de color marrn
claro a marrn oscuro, la calabaza, rosa, blanco y de color
crema. Todas las colonias fueron confirmados como bacterias del
grupo no fermentativa bacilos gram-negativos (NFGNB),
estrictamente aerbico, positivo para indol y negativo para oxidasa,
con la excepcin de la lwof Acinetobacter , que tena una reaccin
negativa para oxidasa.
Las barras no fermentacin gramnegativos aislados e identificados de
los gneros Pseudomonas, Flavobacterium y Acinectobacter se
consideran patgenos oportunistas y muy comn en la naturaleza:
tierra, agua, plantas (incluyendo frutas y verduras), los animales y la
materia orgnica en descomposicin (alcantarillado ). Tambin se
encuentran frecuentemente en sistemas de tratamiento de agua, lo
que demuestra una adaptacin a los entornos con una baja

concentracin de nutrientes, y para una amplia gama de

temperatura, a partir de 4 C a 42 C[ 4 , 8 ].
De acuerdo con los kits miniatura utilizados en la identificacin de
bacterias no fermentadoras gram-negativas (Tablas 1 y2 ), hubo una
prevalencia de aislamiento por P. aeruginosa , 25 cepas
(32,05%);P. pickettii (Ralstonia pickettii) , 18 cepas
(23,08%); P. vesiculares , 10 cepas (12,82%); P. diminuta , 09 cepas
(11,54%); F. aureum , 5 cepas (6,42%); P. fluorescens , 4 cepas
(5,13%); A. lowf , 02 cepas (2,56%); P. putida , 02 cepas
(2,56%); P. alcaligenes , cepa 01 (1,28%); P. paucimobilis , cepa 01
(1,28%); y F. multivorum , cepa 01 (1,28% ). Los dos sistemas de
identificacin complementan entre s, ya que P. aeruginosa fue
identificado en todas las etapas por el kit de Becton y Dickinson,
mientras que P. pickettii fue identificado por el kit Bio-Mrieux.
Las caractersticas qumicas y microbiolgicas del agua desde los
puntos de muestreo fueron en cumplimiento de las leyes y normas
pertinentes [ 1 - 3 ]. Para los puntos 1, 4, 11, 12 y 13,
respectivamente, los valores de pH fueron 7,15, 7,39, 5,60, 5,60,
5,70; conductividad fue 155,2 mu s, 148,2 mu s, 1,2 mu s, 0,8 mu s,
0,9 mu s. Los compuestos orgnico total (COT) fueron <0,5 mg / L
para los puntos 11, 12 y 13.
Se observ que la enumeracin de bacterias hetertrofas para
aumentar de uno a dos ciclos logartmicos para el cruce agua a travs
de los puntos 3 y 4, respectivamente, las dos resinas de ablandadores
y el lecho del filtro de carbn activado (Tabla 2 ). Este aumento en el
recuento total de bacterias anulado los multimedia (punto 02) de
efecto mediante la reduccin de un ciclo de la poblacin inicial
(promedio de 507 UFC / 100 ml) de agua potable pblica (punto
01). La smosis inversa (punto 06) mostr la mejor reduccin de la
filtracin a una poblacin residual mximo de 10 CFU / 100 ml,
aunque las bacterias no fermentadoras gram-negativas estaban
todava all cruzar y llegar a la siguiente etapa de la desionizacin
continua. Aunque en el tanque de almacenamiento (punto 08) se
mantuvo la enumeracin total de alrededor de 40 UFC / 100 ml, la
diversidad de las bacterias no fermentadoras gramnegativos todava
exista. La radiacin ultravioleta (UV) y el filtro de 0,05 micras no
alteraron la poblacin de bacterias hetertrofas o
las Pseudomonas especies que se encuentran en los puntos
anteriores de la hoja de flujo. Tanto la luz UV y el ltimo filtro de 0,05
micras se encontraron para mantener la poblacin heterotrfica
precio tan bajo como 100 CFU / 100 ml de agua purificada, aunque los
dos aparatos no mostr eficacia sobre las bacterias no formadoras de
gram-negativas, tales como las especies de Pseudomonas,
Flavobacterium , y Acinetobacter.
El flujo dinmico de agua, pasando por las etapas de purificacin,
llevado y difundir carga biolgica a travs de cada punto de las
unidades operativas. Aunque la enumeracin heterotrfica se redujo
en al menos un ciclo de registro de la 7 a la 8 etapa en el tanque
de almacenamiento, la diversidad de bacterias gram-negativas se
encontr que era ms alta que en los otros puntos. En el punto 08, la

renovacin del agua es ms lenta y la temperatura ambiente del

tanque favoreci ajuste microorganismo. Despus de la exposicin a
la luz ultravioleta, la diversidad de las bacterias gram-negativas se
redujo drsticamente en la especie P. aeruginosa y P. paucimobilis ,
(kit de identificacin de BBL Crystal) y P. pickettii (API kit de
identificacin 20 NE), las poblaciones de que se mantiene constante
en el agua que fluye a travs del filtro de 0,05 micras. El proceso
oxidativo luz UV y el filtro de 0,05 micras en el punto - de - uso fueron
capaces de garantizar el mantenimiento de la enumeracin total
menor que el mximo de 40 CFU detectado en 100 ml de agua y
restringir la distribucin de las bacterias gram-negativas. Tal vez se
estableci un biofilm y bacterias podra continuar para ser liberado de
la biopelcula en el agua a granel. Desinfeccin adecuada del sistema
de tratamiento de agua eliminara la biopelcula. Esta es una de las
principales razones por las que estamos estudiando el mejor
rendimiento de cada desinfectante qumico aplicado en cada punto de
muestreo.
Los procedimientos deben ser aplicados al sistema a intervalos de
corto plazo, con el fin de controlar la entrada gram-negativa en el
sistema de la fuente de agua potable municipal (Punto 01).
La concentracin mnima inhibitoria (CMI)
Los intervalos de MIC se expresaron en porcentaje y en mg / L del
agente qumico en contacto con las bacterias probadas, y se
muestran en la Tabla 3 .
1. Alcohol etlico (70%, pH = 7,2)
En cuanto a la exposicin a etanol 70%, P. aeruginosa mostr la
mayor MIC en 17,5%, superior a la CIM de 8,75% que se encontr
para la B. subtilis y B. stearothermophilus , obtenido por Vessoni
Pennaet al.[ 7 ], haciendo hincapi en la importancia de la validacin
del sistema de purificacin de agua para la identificacin
de P. aeruginosa .
Trautmann et al.[ 9 ] no obtuvo resultados aceptables a largo plazo
mediante el uso de la cloracin y filtracin para eliminar las cepas
de P. aeruginosa desde todos los grifos de agua en la UCI. Sin
embargo, los autores observaron que las cepas de P. aeruginosa no se
aislaron regularmente de personal del hospital, cuyas manos fueron
desinfectados con alcohol (etanol 70%) antes y despus del contacto
con los pacientes.
2. Hipoclorito de sodio (NaOCl, 0,5%; pH11.9)
Todas las bacterias estudiadas mostraron el mismo nivel de
resistencia, es decir, una MIC de 0,25% (2500 mg / L). Segn Vessoni
Penna et al.[ 7 ], E. coli presenta una media de 0.156 MIC% (1.560 mg
/ L) en los compuestos clorados, dejando claro que la vigilancia de las
aguas cloradas para P. aeruginosaes necesario y sobre todo crtica
para las clidas aguas potables, incluyendo la limpieza de los circuitos
de agua, hidroterapia, baos y piscinas. El P. aeruginosa
de resistencia a los agentes de cloro liberacin (ACC) est bien
informado. Wirtanen et al.[ 10 ] estudiaron los efectos de cuatro
desinfectantes comerciales: (a base de alcohol 100%) que contiene

isopropanol, un perxido perxido-base que contiene hidrgeno (0,52,0%) y cido peractico en la formulacin, y un hipoclorito de sodio
cloro-base que contiene (0,3 -0,8%, pH> 9,0). Los autores
encontraron que el desinfectante a base de perxido era el ms eficaz
en bacterias de biopelcula, y confirmaron que el tratamiento
prolongado con el desinfectante de cloro-base era especialmente
eficiente en Pseudomonas biofilms.
Por lo tanto, hay una necesidad urgente para la bsqueda de la gama
de las ACC y el tiempo de contacto adecuado que no inducir
resistencia en las bacterias, que inhibe la formacin de biopelculas y
la adhesin al aparato porosa del sistema. Sin embargo, los
desinfectantes deben ser elegidos de acuerdo a la operacin en
curso, teniendo en cuenta la interferencia de sustancias orgnicas en
la actividad y la eficacia del desinfectante.
3. Asociacin de cido peractico (PAA, 0,45%), adems de
perxido de hidrgeno (H 2 O 2 2,2%). Solucin al 1% (PAA +
H 2 O 2 , pH = 2,3)
Para una solucin de cido peractico (0,45%) + perxido de
hidrgeno (2,2%), P. aeruginosa, P. pickettii, F.
aureum, y A. lowf present el mayor rango de MIC de 0,11% a
0,55%, un intervalo de los cuales ha demostrado ser dos, cuatro y
ocho veces mayor que la de P. diminuta (MIC = 0,056% y
0,275%), P. Alcaligenes (MIC = 0,028% y 0,137%)
y P. fluorescens (MIC = 0,014% y 0,068%), respectivamente.
Teniendo en cuenta que las condiciones establecidas para MIC se
mantuvieron constantes, independientemente de las bacterias
ensayadas, de acuerdo con Vessoni Penna et al.[ 7 ], cuando las
clulas vegetativas como Acinetobacter calcoaceticus, Enterobacter
cloacae, Escherichia coli, Serratia marcescens , y Staphylococcus
aureus fueron sometidos a un H 2 O 2 solucin al 4,0%, Escherichia
colimostraron la mayor resistencia entre ellos con una CIM de 0,25 %,
que es la mitad de la obtenida paraP. aeruginosa . Cuando las mismas
bacterias se ensayaron frente a cido peractico, E. coli mostr una
MIC de 0,23%, que es el doble de lo que para P. aeruginosa en una
mezcla de cido peractico + perxido de hidrgeno, lo que
demuestra que P. aeruginosa y E. coli debe tanto se requiere en el
control de las aguas tratadas. La solucin de PAA + H 2 O 2 en 1% se
aplica a la limpieza de las membranas de smosis inversa y el
aparato de desionizacin continua durante tres horas, a fin de
obtener agua purificada, y 18 horas para WFI que se utilizarn para
preparar parenteral soluciones, incluyendo soluciones de dilisis
peritoneal.
4. Hidrxido de sodio (0,4%; pH = 12,8)
P. fluorescens y P. Alcaligenes fueron las bacterias que fueron los
menos resistentes a hidrxido de sodio, que presenta una MIC de
0,15%, en relacin a la resistencia mostrada por las otras bacterias
(MIC> 0,4%). La principal actividad de este compuesto qumico es el
ajuste del pH del agua cida en la smosis inversa (punto 06) y la

desionizacin continua (punto 07), con alguna actividad de

saneamiento previsto.
5. cido ctrico (0,5%; pH = 2,5)
La bacteria menos resistente a la solucin de cido ctrico
era A. lowf (0,06% = 600 mg / L). El ms resistente
fue P. pickettii (0,5% = 5,000 mg / L); el resto mostr una MIC de
0,25% = 2.500 mg / L.Este agente qumico se utiliza en la smosis
inversa (punto 06) en el ajuste del pH de agua de limpieza antes de la
desinfeccin con una solucin de 1% de PAA + H 2 O 2 .
6. cido clorhdrico (0,3%; pH = 0,3)
Las bacterias eran menos resistentes A. lowf (MIC 0,039% = 390
mg / L) y P. fluorescens (MIC 0,078% = 780 mg / L); el resto tena una
MIC de 0,156% (1560 mg / L).
Es digno de mencin que P. aeruginosa no se vio afectada por los
compuestos adyuvantes qumicos tales como NaOH (0,4%), cido
ctrico (0,5%) y HCl (0,3%) en la concentracin aplicada a las
unidades del sistema de purificacin. Sin embargo, se espera que
estas soluciones qumicas para mostrar alguna actividad
desinfectante, que no es exigente.
7. bisulfito de sodio (0,5%; pH = 4,0)
Todas las bacterias mostraron el mismo nivel de resistencia (MIC =
0,078%) a bisulfito de sodio. Este adyuvante qumico se utiliza para el
propsito de decloracin y la preservacin de filtros multimedia;se
utiliza ms en los ablandadores de agua y el filtro de lecho de carbn
activado.
Perfil de los microorganismos identificados
Las bacterias gram-negativas de agua pueden ser contaminantes
significativos en los sistemas de hemodilisis. Ferreira et al.[ 13 ],
realizaron anlisis en muestras tomadas de los suministros de agua,
despus de cada etapa de tratamiento y dializado en unidades de
hemodilisis en Ro de Janeiro entre 1999 y 2001. Ellos encontraron
que las bacterias ms comnmente aisladas fueron: Pseudomonas
aeruginosa, Stenotrophomonas maltophilia, Acinetobacter anitratus,
lowf Acinetobacter, Pseudomonas (Brevundimonas) diminuta,
Pseudomonas fluorescens, Achromobacter xylosoxidans, Moraxella
atlantae, Moraxella osloensis, Enterobacter cloacae, y Enterobacter
aerogenes . Estas bacterias aisladas indicaron un riesgo real para los
pacientes de hemodilisis con desarrollo de bacteriemia por
gramnegativos, reacciones pirognicas, y peritonitis. Los autores
hicieron hincapi en la necesidad de un programa urgente para la
desinfeccin de los sistemas de agua y mquinas de dilisis[ 14 ], en
los centros de atencin de salud.
Pseudomonas se han aislado a partir de una gran variedad de
materiales, incluyendo suelos, fresca o agua de mar, aguas
residuales, muchos tipos de muestras clnicas, y elementos
comnmente se manejan en los laboratorios clnicos (incluida el agua
destilada y soluciones antispticas), alimentos variados y residuos de
la industria alimentaria, flores, frutas, verduras y plantas y los
animales enfermos. Las Pseudomonas especies en lugar

de P. aeruginosa no lo frecuentemente causa

infecciones[ 4 , 8 , 11 ]. P. aeruginosa se ha encontrado de vez en
cuando en la piel, aislado a partir de material clnico[ 15 ] retira de la
garganta (5%), y en las heces (3%) de las personas no
hospitalizados.El porcentaje de pacientes con problemas
gastrointestinales de esta bacteria aumenta en un 20% despus de
72 horas de hospitalizacin. A partir de la frecuencia con la que este
patgeno oportunista est implicada en enfermedades humanas, se
ha considerado el patgeno humano ms importante con respecto al
nmero y los tipos de infecciones que causan y su asociacin con la
morbilidad y la mortalidad. P. aeruginosa puede ser tambin
responsable de un brote de infeccin en una comunidad en peligro de
extincin no inmune [ 4 ].
P. aeruginosa se asocia frecuentemente con agua potable
contaminada o incluso agua o soluciones, como la gastroenteritis
travs de alimentos contaminados tratada, otitis en nadadores,
infecciones de los ojos a travs de soluciones contaminadas y agua
del grifo durante el cuidado de las lentes, infecciones de heridas
causadas por el agua del grifo, y las infecciones del tracto respiratorio
causada por el equipo contaminado. La comunidad ms grave que
adquirieron infecciones son la endocarditis en los usuarios de drogas
por va intravenosa, como resultado del uso de soluciones
parenterales contaminados con frmacos aadidos, y peritonitis en
individuos sometidos contaminados soluciones de dilisis peritoneal.
Los principales reservorios de P. aeruginosa en un entorno
hospitalario son[ 4 , 8 , 11 , 12 ]: desinfectantes, equipos de
respiracin artificial, equipos de hidroterapia y tanques, alimentos,
alcantarillas, desages, grifos, barras de jabn, trapos de piso,
marcos de cama, aire, sillas, toallas de tela y perchas torre,
colchones, mangueras y tubos. La difusin se produce a travs de las
manos del personal (o personal) resultantes del contacto directo con
grifos y depsitos de agua. La contaminacin de tal agua puede ser el
resultado de materiales clnica, fecales y de orina.
Conclusin
Kawai et al.[ 16 ] analizaron, mediante la desnaturalizacin
electroforesis en gel de gradiente (DGGE), "la comunidad bacteriana
en agua parcialmente purificada, que se prepara mediante un
intercambio de iones del agua del grifo y se utiliza en los procesos de
fabricacin de productos farmacuticos". Los autores verificaron que
"la bacteria dominante en agua purificada" (menor que la de otros
entornos acuticos) no puede ser detectado por la casena de soja
digerir (SCD) y los medios de comunicacin R2A, a pesar de que
presentan actividad esterasa. Por lo tanto, los autores hicieron
hincapi en "la importancia de los mtodos de la cultura
independiente de control de calidad de agua farmacutica".
El agua utilizada en las zonas del centro de salud y en las industrias
farmacuticas debe analizarse peridicamente como medida
preventiva contra la propagacin de microorganismos, permitiendo

medidas de mejora que deben tomarse rpidamente, segn se

requiera.
El anlisis de agua tratada para las bacterias hetertrofas
incluyendo Pseudomonas especies es valioso en la prevencin de la
formacin de biopelculas y en la reduccin de la cantidad de
pirgenos.
Varias superficies slidas pueden albergar biolfilms en los sistemas de
agua de purificacin, tales como acero inoxidable, materiales de
nylon (aparatos desionizacin), y polmeros de poliamida (Osmose
membranas inversa). Las superficies porosas que se encuentran en
las resinas de desionizacin y la osmosis inversa membranas
proporcionan una excelente oportunidad para atrapar partculas
inorgnicas y bacterias que comienzan la formacin de
biopelculas. En general, todos los agentes qumicos de limpieza
funcionan mejor en agua blanda (despus aparato descalcificador de
agua).Agentes de cloro se han demostrado ineficaces en la
eliminacin de biopelculas. Agentes de cloro se utilizan para
mantener los tanques de almacenamiento y distribucin de bucle en
densidades microbianas bajos. El perxido de hidrgeno, perxido que
contiene desinfectantes y agentes qumicos de cido peractico se
han encontrado para ser altamente eficaz en la prevencin y
eliminacin de biopelculas, en un corto perodo de contacto (1-2
minutos) y que son relativas no corrosivo.
Este trabajo hizo hincapi en la necesidad urgente en el seguimiento
continuo del rendimiento de purificacin de agua, incluyendo la
evaluacin de la eliminacin efectiva de las bacterias gram-negativas
no de fermentacin, con especial atencin a Pseudomonas sp , que
mostr la mayor resistencia a los agentes qumicos, al Las
concentraciones utilizadas en el sistema. Tal vez el tiempo de
contacto entre los agentes sanitarios (NaOCl y PAA + H 2 O 2 ) y los
puntos del sistema debe ser revisado. El NaOCl 0,5% despus de 18 h
de contacto se demostr suficiente para reducir la poblacin de
bacterias sobre 6-log 10 . Como todas las bacterias probadas
mostraron MIC similares, tal vez el contacto de corta duracin de 60
min de esta solucin (0,5% NaOCl) en el tanque con el agua de
alimentacin debe haber sido mayor para garantizar que las bacterias
gram-negativas que entraron en el sistema a travs de la fuente
municipal de agua potable no sobrevivira. Incluso el tiempo de
contacto de este agente sanitario (0,5% NaOCl) en el bucle de
distribucin debera haber sido ms largo para asegurar 10 -2 CFU /
mL de agua purificada con menos posibilidades de la Pseudomonas
spcruce a travs de los filtros de punto de consumo. El bucle de
distribucin debera haber sido limpiada primero con PAA + H 2 O 2 y
luego con NaOCl para prevenir la supervivencia de cualquier
microorganismo y el posible desarrollo. Por lo tanto, el tiempo de
contacto de los desinfectantes y los diferentes puntos de aplicacin
debe ser revisada y evaluada de acuerdo con la compatibilidad de los
equipos y dispositivos de material.
La aplicacin eficaz del PAA + H 2 O 2 en las membranas de smosis
inversa requiere un mayor tiempo de contacto en las columnas de

desionizacin, que mostraron mayor enumeracin hetertrofos. La

doble aplicacin de primera PAA + H 2 O 2 , seguido de soluciones
NaOCl (excepto las membranas de smosis inversa) sera tanto
reforzar la eficacia sobre las bacterias gram-negativas no
fermentadores.El PAA + H 2 O 2 agente sanitario es conocida por su
eficacia en la prevencin de la formacin de biopelculas y su bajo pH
puede ampliar la actividad NaOCl favoreciendo la eficacia microbiana.
El hidrxido de sodio, cido clorhdrico y cido ctrico se utilizaron
como adyuvantes qumicos en el ajuste del pH del flujo de cido o
alcalino del agua en las membranas de smosis inversa, la
desionizacin continua y los ablandadores de agua. A las
concentraciones utilizadas, ninguna actividad de saneamiento se
exigi de su aplicacin, de las cuales la capacidad sobre la poblacin
microbiana probado no se confirm, a pesar de que despus de 18 h
de contacto. Algunos eficacia mostrada por los adyuvantes qumicos
era debido a la alteracin de los valores de pH del medio
ambiente. Incluso para exposiciones prolongadas, Pseudomonas sp ha
demostrado ser el ms resistente a los agentes qumicos a las
concentraciones ensayadas.
Por lo tanto el lavado de (tanques de almacenamiento) depsitos,
columnas de desionizacin, membranas de smosis inversa, as como
el saneamiento de los circuitos de distribucin deben ser llevadas a
cabo por la determinacin de un horario establecido para el control de
calidad (bacteriolgica y qumica) de los sistemas de agua en el
riesgoso reas.
Agradecimientos
Agradecemos becas y fondos de pregrado ofrecidos por el brasileo
Comits FAPESP, CAPES y CNPq, incluyendo la asistencia de Bilogo
Irene Machoshvili y Edwards Lifesciences Macchi.