UNIVERSIDAD DE LAS FUERZAS ARMADAS ESPE

DEPARTAMENTO DE CIENCIAS DE LA VIDA Y LA AGRICULTURA

INGENIERA EN BIOTECNOLOGA
LABORATORIO DE CITOLOGA

Nombre: Jairo Quimbita

03 de noviembre de 2013

Fecha:
NCR: 4572

TEMA: Identificacin microscpica de clulas sanguneas a partir de

muestras tomadas de la puncin del dedo pulgar, utilizando tincin Wright.
OBJETIVOS:
General:
Identificar eritrocitos y leucocitos de nuestra sangre.
Especficos:
Teir la muestra con el fin de que las clulas sean visibles en el
microscopio.
Identificar morfologa y color de tincin que adoptan las clulas.
INTRODUCCIN:
Funciones del tejido sanguneo:

Transporte
Distribuye el oxgeno desde los pulmones hacia todas las
clulas del cuerpo.
Remueve parte del dixido de carbono producido por el
metabolismo celular.
Distribuye las hormonas producidas por las glndulas
endocrinas.
Transporta las sustancias nutritivas que son absorbidas desde
los intestinos
Reguladora
Mantiene el equilibrio bioqumico entre los lquidos y los tejidos
del organismo
Inmunitaria
Protege al organismo de diversas agresiones externas
Hemosttica
Interviene en los procesos de coagulacin en el caso de lesin
tisular y rotura de vasos.
Excretora

Transporta hacia los riones las sustancias de desecho celular

El volumen ocupado por las clulas de la sangre se llama hematocrito y se

expresa como un porcentaje del volumen del total de sangre. En
condiciones normales, el 99% de las clulas sanguneos son glbulos rojos.
La sangre del hombre representa el 7% del peso corporal. El 55% del volumen de la sangre est
constituido por un lquido denominado plasma sanguneo, el 45% restante representa los
elementos formes de la sangre llamados as porque adems de clulas contiene fragmentos
celulares. Estas clulas tienen una vida corta, de das o meses, por lo que estn en continua
renovacin. La reproduccin de la sangre se denomina hematopoyesis. (Curtis, 2008)
Eritrocitos: Tiene forma de disco bicncavo y sus dimensiones en el hombre son 7.5 x 2
m aproximadamente. (Paniagua, 2007)
Leucocitos neutrfilos y heterfilos: Los neutrfilos tienen forma globular. Su ncleo es
heterocromtico y posee de 3 a 5 lbulos, lo que le da un aspecto polinuclear, pero en realidad
los lbulos siempre quedan unidos por un fino puente. (Paniagua, 2007)
Leucocitos Eosinfilos o Acidfilos: Se hallan en todos los vertebrados aunque en diferentes
proporciones. Su aspecto es globular. El ncleo presenta un par de lbulos unidos por un puente
grueso, lo que le da un aspecto de gafas antiguas. (Paniagua, 2007)
Leucocitos Basfilos: No parece que estos leucocitos estn presentes en todos los vertebrados.
Los leucocitos tienen un ncleo menos heterocromtico que el de los Eosinfilos y es
redondeado, de contorno algo irregular. (Paniagua, 2007)
Monocitos: Son redondeados y tienen ms citoplasma que los linfocitos. El ncleo es
arrionado y menos heterocromtico que el de los linfocitos.(Paniagua, 2007)
Linfocitos: Son los leucocitos ms pequeos. Miden unos 8 m . Poseen ncleo esfrico
heterocromtico, con nuclolo poco visible, y escaso citoplasma. (Paniagua, 2007)
Plaquetas: Son componentes exclusivos de los mamferos. Tienen forma biconvexa y contorno
irregular, ms bien oval. (Paniagua, 2007)
El Plasma: El plasma sanguneo est formado en un 90% por agua, y por
lo tanto funciona qumicamente como un solvente polar; es un lquido que
contiene diversos componentes. (Weineck, 2004)
MATERIALES Y MTODOS:
Muestras: Gota de sangre obtenida de la puncin del dedo pulgar de cada
estudiante.
Equipos: Microscopios pticos de campo claro (lentes objetivos 4, 10 y 40x)
Materiales de proteccin personal: Mandil, guantes, mascarilla.
Reactivos: Colorante Wright, metanol, agua destilada, alcohol antisptico
(nuevo).

Materiales e insumos: Placas portaobjetos, pipetas desechables, vasos de

precipitacin 500 ml y 100 ml, picetas, bandeja para depositar colorantes,
lancetas, vasos de coplin, papel especial para limpieza de microscopios,
torundas de algodn, papel toalla.
Organismos: Estudiantes de la clase de Laboratorio de Biologa celular

Procedimiento: Toma de muestra y preparacin de frotis

1. Se limpi una placa porta objetos con papel toalla y alcohol
antisptico.
2. Se limpi con una torunda de algodn y alcohol antisptico el dedo
pulgar.
3. Con una lanceta estril, se pinch firmemente el dedo pulgar.
4. Se deposit una gota de sangre en el extremo de la placa
portaobjetos limpia y nueva.
5. Se limpi el dedo con alcohol antisptico y se desech la lanceta en el
recipiente corto punzante infeccioso.
6. Con otra placa portaobjetos en forma inclinada (ngulo de 45), se
extendi la gota de sangre hacia el lado contrario firme y
rpidamente.
7. Se aadi 1 o 2 gotas de metanol, cubriendo la muestra para fijarla y
teniendo cuidado de no inhalarlo.
8. Se dej al aire libre para que se seque, durante 3 a 5 minutos.
9. Se procedi con la tincin seleccionada.
Tincin Wright
1. Se ti la muestra, cubrindola con 1 o 2 gotas de colorante
Wright, durante 30 segundos a 1 minuto (se mantuvo la placa
sobre la bandeja para depsito de colorantes).
2. Se aadi a la placa agua destilada en la misma cantidad que se
aadi Wright, se dej actuar durante 1 minuto.
3. Se enjuag con agua destilada desde el borde de la placa
portaobjetos.
4. Se sec la placa al aire libre o con papel toalla.
5. Se observ en el microscopio ptico de campo claro con los
objetivos: 4, 10 y 40x e identific las clulas sanguneas.
6.
RESULTADOS Y OBSERVACIONES:

Eritrocitos (40x)

Plaquetas (40X)

Eosinfilo, neutrfilo y eritrocitos (40x)

Basfilos (40x)

DISCUSIN:

Para poder observar clulas sanguneas se necesit el uso de tincin

Wright el cual segn Virologa Mdica (s.f.) consiste en azul de metileno y
sus productos de oxidacin, as como eosina Y o eosina B. El azul de
metileno tie de color azul las partes acidas de las clulas y eosina que tie
las partes alcalinas, determinando as nuestros eritrocitos de un color ms
oscuro que los leucocitos que en su mayora se tieron con azul. Este tipo
de colorante se lo utiliza la mayora de veces en tincin simple. (Acosta)
En la prctica se logr identificar 5 tipos diferentes de clula. Los eritrocitos
que como menciona (Paniagua, 2007) tienen forma bicncava y en nuestra
observacin se tio de color ms oscuro con un negro; en el caso de
nuestros glbulos blancos o leucocitos se tieron de color azul al igual que
las plaquetas, de tal modo que en estas estructuras influyo el azul de
metileno. Visualizamos Neutrfilos los cuales se presentan tal y como los
describe (Paniagua, 2007) ya que poseen varios ncleos unidos por una fina
hilera, del mismo modo los eosinfilos pero solo con dos ncleos un poco

mas grandes. Las clulas con ncleo circular que pudimos observar fueron
basfilos ya que presentan aun una parte citoplasmtica lo que les
diferencia de los linfocitos. (Paniagua, 2007). Las plaquetas se presentaron
de color azul y son finos grnulos agrupados en el plasma sanguneo.
(Weineck, 2004)
CONCLUSIONES:
Durante la prctica se prepar, tintur y observo clulas sanguneas
diferenciando en ellas su morfologa nuclear y membranas de tal modo que
encontramos: membranas: eritrocitos y plaquetas; y, nucleares: neutrfilos,
eosinfilos, basfilos.

CUESTIONARIO:
Qu son las clulas sanguneas?
Son las encargadas de transportar, excretar, proteger al organismo de
patgenos.
Qu forma tienen las clulas sanguneas?
Circulares membranales, ncleos en diferente morfologa.
Qu tamao tienen las clulas sanguneas?
7.5 x 2

m aproximadamente.

Qu estructuras presentan las clulas sanguneas?

Ncleo y membranas celulares son lo que se puede observar bajo el
microscopio ptico.
Cules son las funciones de las clulas sanguneas?

Transporte
Reguladora
Inmunitaria
Hemosttica
Excretora

Existe diferencia entre una tincin y otra?

La diferencia ms notable es en la tincin de aniones ya que en la Wright se
coloreo de negro y en la Giemsa de azul.
En qu ocasiones se presentan un mayor o menor nmero de
determinado grupo de clulas sanguneas?
Ya que los leucocitos son los encargados de proteger la inmunidad del
organismo estos se presentaran en mayor cantidad cuando exista una

amenaza ante l, los eritrocitos estarn en menor proporcin cuando la

cantidad de oxigeno sea menor.
Por qu el hombre tiene un nmero mayor de eritrocitos que la
mujer?
Porque en la mujer los valores disminuyen debido a las dietas, las
hemorragias mensuales (menstruacin), durante el embarazo
El volumen promedio de sangre de un hombre es de 5,5 litros, y el de una
mujer de aproximadamente un litro menos.
Cul es la razn del incremento de leucocitos en la sangre durante
una infeccin?
La necesidad de proteger al organismo contra esta infeccin.

Por qu los eritrocitos no poseen ncleo?

Porque no lo requieren, la funcin de un glbulo rojo, no es reproducirse,
sino ser parte de un sistema de transporte.
Qu diferencias existen entre los leucocitos y eritrocitos?
La presencia de ncleo en los leucocitos y la ausencia de los mismos en los
eritrocitos.
Para qu sirve la fijacin de muestras con mtodos qumicos?
Para la preservacin de la morfologa y composicin qumica de la clula.
Durante la fijacin, las sustancias albuminoides del tejido pasan del estado
sol, como se encuentran en vida, al de gel, cuyo contenido de agua es
menor. De esta manera, se detienen los procesos posmortem y las
estructuras se conservan con un mnimo de artificios.
Cul es la funcin de la tincin Giemsa y Wright utilizada en la
prctica de laboratorio?
La coloracin de giemsa se emplea tambin para teir frotis de sangre en el
examen para protozoos. Se puede emplear, como variaciones, otras
coloraciones como es la tcnica de citoconcentracin para parsitos
sanguneos, la cual tiene un bajo coste y ofrece la posibilidad de aislar e
identificar en el mismo sedimento el parsito principal.
La tincin de Wright es un tipo de tincin usada en histologa para facilitar la
diferenciacin de los tipos de clulas de la sangre. Se usa principalmente
para teir frotis de sangre y punciones medulares, para ser examinadas al
microscopio.

Bibliografa
Acosta, S. (s.f.). Microeinmuno. Obtenido de
http://microeinmuno.files.wordpress.com/2011/09/tincic3b3n-dewright.pdf
Curtis, H. (2008). Biologa. Madrid: Panamericana.
Paniagua, R. (2007). Citologa e Histologa Vegetal y Animal. Madrid:
McGRAW-HILL-INTERAMERICANA DE ESPAA.
Stevens, A., & Lowe, J. (2006). Histologa Humana. Gnova: Elseiver.
Weineck, J. (2004). La Anatoma Deportiva 4 Edicin. Barcelona: Paidotribo.