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INTRODUCCIN

Em este presente trabajo desarrollamos el tema de Reconocimiento de


protenas y para esto hemos realizado un trabajo de investigacin mediante el
cual estamos exponiendo las diferentes formas de reconocer la presencia de
las protenas en una sustancia ( clara de huevo), las reacciones a utilizar, etc.
Este informe en completo tambin contiene la experiencia en el laboratorio,
imgenes de ella y algunos resultados que se peda en la realizacin de
informe y que se requera saber en cada experimentacin.

RECONOCIMIENTO DE PROTENAS

I.

MARCO TERICO

PROTEINAS:
Son biomoleculas de gran tamao y peso molecular formadas por C, H, O, y N.
Son macromolculas o polmeros de aminocidos.

AMINOACIDOS
Son molculas orgnicas que presentan grupo amino (- NH2) y un grupo
nacido carboxi8lico (- COOH).
En disolucin los aminocidos forman iones dobles denominados (Zwitteriones)
debido a sus grupos acido y base; adems, un aminocido, dependiendo del
PH de la solucin, puede comportarse como acido o como base por esta razn
se les denomina anftera.

AMINOACIDOS
NO ESENCIALES
Acido aspartico
Acido glutamico
prolina
serina
tirosina
asparagina
glutamina
cistena
glicina
alanina

ESENCIALES
Histidina
treonina
triptfano
leucina
isoleucina
valina
fenilalanina
Lisina
metionina
arginina

ESTRUCTURA DE LAS PROTEINAS:


Estructura primaria: es la secuencia de aminocidos de la protena (en forma
lineal).

Estructura secundaria: La estructura secundaria es la disposicin de la


secuencia de aminocidos en el espacio. La a (alfa)-hlice Esta estructura se
forma al enrollarse helicoidalmente sobre s misma la estructura primaria.
La conformacin beta En esta disposicin los aminocidos no forman una

hlice sino una cadena en forma de zigzag.

Estructura terciaria: informa sobre la disposicin de la estructura secundaria


de un polipptido al plegarse sobre s misma originando una conformacin
globular. Aparecen varios tipos de enlaces:(el puente disulfuro, los puentes de
hidrgeno, los puentes elctricos, las interacciones hidrfobas)

Estructura cuaternaria: Esta estructura informa de la unin, mediante enlaces


dbiles (no covalentes) de varias cadenas polipeptdicas con estructura terciaria, para
formar un complejo proteico. Cada una de estas cadenas polipeptdicas recibe el
nombre de protmero.

Reacciones de reconocimiento

Reaccin de Biuret

El reactivo de Biuret est formado por una disolucin de sulfato de cobre en


medio alcalino, este reconoce el enlace peptdico de las protenas mediante la
formacin de un complejo de coordinacin entre los iones Cu 2+ y los pares de
electrones no compartidos del nitrgeno que forma parte de los enlaces
peptdicos, lo que produce una coloracin rojo-violeta.

Reaccin de Millon

Reconoce residuos fenlicos, es decir aquellas protenas que contengan


tirosina. Las protenas se precipitan por accin de los cidos inorgnicos
fuertes del reactivo, dando un precipitado blanco que se vuelve gradualmente
rojo al calentar.

Reaccin xantoproteica

Reconoce grupos aromticos, es decir aquellas protenas que contengan


tirosina o fenilalanina, con las cuales el cido ntrico forma compuestos nitrados
amarillos.

MATERIALES Y MTODOS
MATERIALES Y REACTIVOS:
Para la prctica y experimentacin sobre reconocimiento de protenas se
utilizaron los siguientes elementos.
REACTIVOS
Acido ntrico concentrado
Hidrxido de sodio al 40 %
Hidrxido de sodio al 20%
Sulfato cprico al 1%
Acetato de plomo al 5%
MATERIALES
Tubo de ensayo
Gradilla
Varillas de vidrio
Mechero
Vaso precipitado
Vagueta
Pipeta
MUESTRA
Clara de huevo
METODOLOGIA:
Existen varios mtodos diferentes para el reconocimiento de protenas uno de
estos es la coagulacin de protenas debido al gran amao de sus molculas,
tambin esta la reaccin xantoproteica que es debida a la formacin de un
compuesto aromtico nitrado de color amarillo, otra es la reaccin de biuret y
finalmente la reaccin de los aminocidos azufrados.

IV.

DESCRIPCION DE LA PRCTICA
REACCIN XANTOPROTEICA:
Poner en el tubo de ensayo de 2 a 3 cc. de solucin problema
(clara de huevo).

Aadir 1 cc. de HNO3 concentrado.

Calentar al
bao mara a
100 0C.

Enfriar en agua fra.


Aadir gota a gota una disolucin de sosa al 40%.

40%

REACCIN DE BIURET:
Tomar un tubo de ensayo y poner unos 3 cc. de albmina de huevo.

Aadir 2cc. de solucin de hidrxido sdico al 20%.

A continuacin 4 5 gotas de solucin de sulfato cprico diluida al 1%.


Debe aparecer una coloracin violeta-roscea caracterstica.

Sulfato cprico 1%

4 a 5 gotas

REACCIN DE LOS AMINOCIDOS AZUFRADOS:


Poner en el tubo de ensayo de 2 a 3 cc. de albmina de huevo (clara de
huevo).

Aadir 2 cc. de solucin de hidrxido sdico al 20%.

Aadir 10 gotas de solucin de acetato de plomo al 5%.

Calentar el tubo hasta ebullicin.

Si se forma un precipitado de color negruzco nos indica que se ha


formado sulfuro de plomo, utilizndose el azufre de los aminocidos, lo
que nos sirve para identificar protenas que tienen en su composicin
aminocidos con azufre.

Resultados final de las diferentes reacciones para


identificar protenas

V.

RESULTADOS Y DISCUSIONES

Cmo se manifiesta la desnaturalizacin de la clara de


huevo?
La desnaturalizacin de protenas se da en la clara de los huevos, que son en
gran parte albminas en agua. En los huevos frescos, la clara es transparente y
lquida; pero al cocinarse se torna opaca y blanca, formando una masa slida
intercomunicada. Esa misma desnaturalizacin puede producirse a travs de
una desnaturalizacin qumica, por ejemplo volcndola en un recipiente con
acetona.
Desnaturalizacin irreversible de la protena de la clara de huevo y prdida de
solubilidad, causadas por la alta temperatura (mientras se la fre)

Cul de los tres agentes utilizados tiene mayor poder de


desnaturalizacin?

El efecto de la temperatura, cuando la temperatura es elevada aumenta la


energa cintica de las molculas con lo que se desorganiza la envoltura
acuosa de las protenas y, se desnaturalizan.

Cmo podramos saber que una sustancia desconocida


es una protena?
Para saber si una sustancia desconocida, es una protena se utiliza el Reactivo
de Biuret es aquel que detecta la presencia de protenas, pptidos cortos y
otros compuestos con dos o ms enlaces peptdicos en sustancias de
composicin desconocida.
Est hecho de hidrxido potsico (KOH) y sulfato cprico (CuSO 4), junto con
(KNaC4O64H2O). El reactivo, de color azul, cambia a violeta en presencia de
protenas, y a rosa cuando se combina con polipptidos de cadena corta. El
Hidrxido de Potasio no participa en la reaccin, pero proporciona el medio
alcalino necesario para que tenga lugar.

Qu coloracin da la reaccin del Biuret?


La coloracin que presenta es el color violeta, indicando la presencia de
protenas.

Una protena coagulada podra dar la reaccin del


Biuret?
Las protenas, debido al gran tamao de sus molculas, forman con el agua
soluciones coloidales. Estas soluciones pueden precipitar con formacin de
cogulos al ser calentadas a temperaturas superiores a los 70 C o al ser
tratadas con soluciones salinas, cidos, alcohol, etc.
Si una protena coagulada podra dar la reaccin de Biuret, porque el reactivo
reacciona con cualquier protena, liquida o slida, por ejemplo cuando haces
una cuantificacin de protenas en suero (liquida) o cuando haces una prueba
cualitativa en huevos, carne, papas, etc.

Si se realiza la reaccin del Biuret sobre un aminocido


como la Glicina es positiva o negativa? Por qu?

La glicina no reaccion con el reactivo de Biuret porque est en forma libre y no


hay enlaces peptdicos con los que pueda reaccionar este reactivo. De esta
manera, la glicina dio una prueba negativa. Adems en la reaccin
xantoprotica da negativo porque carece de grupos aromticos.

VI.

CONCLUSIONES

Las protenas constituyen una de las molculas ms importantes en el


organismo ya que cumplen muchas funciones
Las protenas estn constituidas por aminocidos por los cuales los
mtodos se basan en el reconocimiento de los aminocidos
Al realizar las diferentes pruebas con la albmina se pudo comprobar
experimentalmente efectivamente que se trata de una protena
Las protenas son sensibles con las sales metlicas pesadas
(mercurio ,cobre ,plomo) formando precipitados
En las reacciones donde se obtuvo precipitacin se debi a un cambio
en el estado fsico de la protena , mientras que en la coagulacin se ha
producido un cambio en el estado fsico y en la estructura qumica por
eso es irreversible

VII. BIBLIOGRAFA
http://www.monografias.com
Ediciones Pamer
http://es.wikipedia.org/wiki/Protenas
http://www.proteinas.org.es