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Conoc

imient
o del
micro
scopi
o
ptico
comp
uesto

Practica 1.2
Introduccin

Un aparato fundamental para la


investigacin biolgica ha sido el
microscopio, con base en la
microscopia,
se
ha
podido
escudriar
en
un
mundo
extremadamente pequeo. Los
antecedentes de los modernos
microscopios datan de la Grecia
clsica y los rabes, quienes ya
conocan los mecanismos de la
ptica. Pero la aparicin del
microscopio compuesto se da en
el Renacimiento y fue Galileo
Galilei quien acoplo dos lentes en
un
tubo,
mismo
fue
perfeccionado a fines del siglo
XVI por los hermanos holandeses
Jans y Zaccharias Jansen.Es
relevante
el
trabajo
del
astrnomo y matemtico Robert
Hooke sobre la observacin de la
estructura del corcho, a travs
de un microscopio fabricado por el mismo. Por ltimo,
esta Antn Van Leeuwenhoek, quien no tena
preparacin acadmica y se convirti en un experto
tallador de microscopios, fue tal su grado de
perfeccin, que pudo observar varios tipos de
microorganismos.Llamo tanto la atencin que la Royal
Society of London (primera asociacin cientfica
reconocida
en
el
mundo)
mando
algunos
investigadores cientficos para corroborar sus notas,
que envi durante 20 aos. El nico defecto que tenan
sus microscopios era la aberracin cromtica, lo cual
corrigi a fines del siglo XIX el qumico alemn Ernst
Abbe.Del microscopio compuesto se han derivado
otros, entre ellos el microscopio de contraste de fases
y el microscopio estereoscpico o de diseccin,
empleados
principalmente
en
los
laboratorios
escolares. Posteriormente, en el siglo XX se

desarrollaron otros tipos de microscopios que


permitieron una mayor definicin en lo observado.
Estos son el microscopio electrnico de trasmisin
(MET), con el cual se ha logrado observar los
organelos celulares; y el microscopio electrnico
de barrido (MEB), con el cual se ha logrado
observar los organelos celulares; y el microscopio de
barrido (MEB), que permite observar los objetos en 3
dimensiones.

Objetivos
Identificar, con ayuda de un esquema y un
microscopio, cada una de
las partes y sistemas
que conforman el microscopio ptico compuesto para
poder familiarizarse con su funcionamiento.

Materiales y Reactivos

Cuaderno de notas
Microscopio ptico compuesto
Agua
Papel cebolla
Gotero
Regla
Papel milimtrico
Cubre y portaobjetos
Papel peridico
Aceite de inmersin
Xilol

Procedimiento
1. En un principio se le explicara al alumno cmo
se debe manejar un microscopio, cmo
sostenerlo, en qu posicin de la mesa se
coloca y como debe limpiarse.
2. En el esquema del microscopio de la figura
1.1,sealar las siguientes
partes:oculares,revolver,objetivos,tornillos
micromtrico,pinzas,platina,condensador,diafra
gma,brazo,espejo o lmpara, pie o base,

describiendo brevemente la funcin de cada


una.
3. Las partes anteriores se deben agrupar con
ayuda de un cuadro sinptico en los siguientes
sistemas: sistema ptico, sistema mecnico y
sistema de iluminacin, explicando la funcin
integrada de cada uno.
4. Para empezar a familiarizarse con el manejo
del microscopio se har lo siguiente:
1. Preparacin de una muestra. Corta un pedazo de
papel peridico o milimtrico de aproximadamente 1
cm.Colocalo sobre un portaobjetos limpio y seco.
Con ayuda del gotero pon un poco de agua sobre el papel, y
cuando este se humedezca, coloca el cubreobjetos sobre l,
evitando que se formen burbujas.
2. Observacin en el microscopio. Coloca la muestra
sobre la platina, asegurndola con las pinzas. Emplea
primero el objetivo de 10X, seguido por el de 40X, y
si es posible, por el de 100X.Con ayuda del tornillo
macromtrico, baja el tubo o la platina (segn sea el
caso) hasta el tope. Mirando a travs del ocular,
ajusta la imagen, en el caso del papel peridico,
busca la letra e hasta que se vea ntida.
Para saber cuntas veces aumenta la imagen, pon la
preparacin del papel milimtrico o la regla, y
observa cuanto abarca la divisin ms pequea
(1mm2), multiplica lo observado por el aumento del
objetivo usado y despus por el aumento del ocular
(por ejemplo, supn que al mirar por el ocular, se
observa un solo cuadro, entonces ser: 1 mm 2 X 10 X
10 = 100, por tanto, tendremos una imagen
aumentada cien veces).Dibuja tus observaciones.

Figura

1.1

Ocular: Lente situado cerca del ojo del observador. Capta y


ampla la imagen formada en los objetivos.
Objetivo: Lente situado en el revlver. Ampla la imagen,
es un elemento vital que permite ver a travs de los
oculares.
Condensador: Lente
que
luminosos sobre la preparacin.

concentra

los rayos

Diafragma: Regula la cantidad de luz que llega al


condensador.
Foco: Dirige los rayos luminosos hacia el condensador.
Tubo: Es la cmara oscura que porta el ocular y los
objetivos. Puede estar unida al brazo mediante una
cremallera para permitir el enfoque.
Revlver: Es el sistema que porta los objetivos de
diferentes aumentos, y que rota para poder utilizar uno u
otro, alinendolos con el ocular.
Tornillos macro y micromtrico: Son tornillos de
enfoque, mueven la platina o el tubo hacia arriba y hacia
abajo. El macromtrico permite desplazamientos amplios
para un enfoque inicial y el micromtrico desplazamiento
muy corto, para el enfoque ms preciso. Pueden llevar

incorporado un mando de bloqueo que fija la platina o el


tubo a una determinada altura.
Platina: Es una plataforma horizontal con un orificio
central, sobre el que se coloca la preparacin, que permite
el paso de los rayos procedentes de la fuente de
iluminacin situada por debajo. Dos pinzas sirven para
retener el portaobjetos sobre la platina y un sistema de
cremallera que permite mover la preparacin. Puede estar
fija o unida al brazo por una cremallera para permitir el
enfoque.
Brazo: Es la estructura que sujeta el tubo, la platina y los
tornillos de enfoque asociados al tubo o a la platina. La
unin con la base puede ser articulada o fija.
Base o pie: Es la parte inferior del microscopio que
permite que ste se mantenga de pie.

Sistema mecanico
El pie y soporte
La columna o brazo
El tornillo macromtrico o
macroscpico
El tornillo micromtrico o
microscpico
La platina
Las pinzas
El revlver
El caon
Sistema
ptico
El ocular
Los objetivos(objetivos secos y
objetivos de inmersion)

Sistema de iluminacin

Fuente de iluminacin
El espejo
Condensador
Diafragma

Preguntas
1. Da un ejemplo de un microscopio sencillo y uno
compuesto, sealando quien puede magnificar ms las
imgenes.

El
microscopio
compuesto puede magnificar ms las imgenes puesto que
el aumento de un microscopio compuesto puede
multiplicarse gracias a la lente adicional. Si la lente objetivo
de un microscopio compuesto aumenta diez veces el
tamao de una imagen y la lente ocular permite aumentar
40 veces el tamao, entonces el aumento total disponible
es 400 veces el tamao del objeto. Esto significa que la
imagen resultante es 400 veces ms grande que el tamao
a simple vista. Mientras que en un microscopio simple el
aumento del tamao es fijo pues solo consta de un lente.
2. En qu situaciones se emplea el microscopio ptico
compuesto y cuando el microscopio estereoscpico?
Los microscopios compuestos se utilizan especialmente
para examinar objetos transparentes, o cortados en lminas
tan finas que se transparentan. Se emplea para aumentar o
ampliar las imgenes de objetos y organismos no visibles a
simple vista.
El microscopio estereoscpico
tambin llamado lupa
binocular, es distinto y su utilidad es diferente, pues se
utiliza para ofrecer una imagen estereoscpica (3D) de la

muestra. Para ello, y como ocurre en la visin binocular


convencional, es necesario que los dos ojos observen la
imagen con ngulos ligeramente distintos.
El microscopio compuesto es utilizado en multitud de sitios,
desde un laboratorio de investigacin mdica hasta una
casa particular, Sirve para diagnosticar daos en clulas y
tejidos humanos, para identificar muestras de drogas
El microscopio estereoscpico o tambin llamado lupa
binocular se utiliza para visualizar en detalle objetos
(animales, vegetales, hongos etc.). Pequeos, de entre
200micras.
3. A qu se refieren los trminos de seco dbil, seco fuerte
e inmersin?
Seco dbil tiene un aumento de 10x.
El seco fuerte de 40x.
El de inmersin de 100x y se llama as porque necesita para
su uso un tipo de aceite (normalmente de cedro).
4. Investiga los fundamentos del MET y el MEB y
compralos por medio de un esquema con el microscopio
ptico.
MET: En microscopia electrnica, la fuente de iluminacin
son electrones que llevan asociada una onda de muy
pequea longitud de onda que permite una mejora
considerable del lmite de resolucin en relacin con el
microscopio ptico todo el espacio atravesado por los
electrones debe estar en alto vaco (10-7milibares) para
que los electrones no se dispersen y sean absorbidos por
molculas de aire.
MEB: Revela la arquitectura de la superficie de las clulas y
orgnulos. La corriente de electrones se enfoca en un punto
de la superficie de la muestra por medio de un sistema de
lentes electromagnticas condensadoras. El punto se
mueve rpidamente (scan) sobre la superficie externa de la
muestra mediante placas cargadas deflectoras del haz o de
corriente situadas entre las lentes condensadoras y la
muestra. El punto de luz excita molculas a niveles altos de
energa y emiten electrones secundarios que son recogidos
por un detector localizado por encima y a un lado de la

muestra generando una imagen de su superficie. El


componente esencial del detector es un detector de
centelleo que emite fotones cuando es excitado por los
electrones que inciden sobre l. Los fotones generan una
seal electrnica sobre una pantalla de video. La seal
hacia la pantalla de video esta sincronizada con el
movimiento del haz de electrones primarios sobre la
muestra por el circuito deflector (generador de barrido).
5.

Explica la diferencia entre aumento y el poder de resolucin


El aumento de un instrumento ptico te permite conocer
hasta cuantas veces ms grande puedes observar un objeto
dado, mientras el poder de resolucin te hace referencia a
la capacidad del instrumento ptico para diferenciar dos
puntos entre s; es decir, un instrumento te puede
aumentar una imagen s que en ella puedas reconocer
figura alguna (una imagen aumentada pero distorsionada),
pero si a ello le agregas un cierto poder de resolucin, el
instrumento adems de aumentarte un objeto te permite
verlo con muchas nitidez y claridad.

Manej
o del
Practica 1.3
micro
Introduccin
scopi
o
comp
uesto

La microscopia nos permite conocer como estn


formados los oraganismos.En la prctica anterior se
conocieron las partes de un microscopio. Ahora se
distinguir el uso de los dos tipos ms comunes en el
laboratorio. El microscopio ptico se emplea
regularmente para observar organismos completos
muy pequeos (bacterias, protozoos, hongos, caros,
etc.) o preparaciones frescas o fijas de un tejido u
rganos. El microscopio estereoscpico se usa para
hacer disecciones de organismos ms grandes o sus
partes.

Objetivos
Distinguir las diferencias entre el microscopio
ptico y el microscopio estereoscpico mediante su
uso.
Adquirir, por medio del uso de los microscopios, la
destreza necesaria para manejar ambos tipos y poder
hacer observaciones precisas y confiables.

Materiales y Reactivos
Cuaderno de notas

Microscopio ptico compuesto


Microscopio estereoscpico
Papel cebolla
Gotero
Cubre y portaobjeto
Navaja
Aguja de diseccin
Corte de corcho y nopal
Aceite de inmersin
Xilol
Agua

Procedimiento
1. En un dibujo o esquema de ambos microscopios,
sealar las partes comunes y las diferencias fsicas.
2. Cada vez que emplees el microscopio, sigue las
siguientes instrucciones:
a) Transporta el microscopio empleando ambas
manos, sosteniendo la base y el brazo.
b) Coloca el microscopio cuando menos a 20 cm del
borde de la mesa hasta el tope.
c) Limpia el microscopio con un pao y los lentes con
un papel seda o cebolla y una gota de xilol.
d) Conctalo a la corriente elctrica.
e) Asegrate que el primer objetivo sea el 4X o el de
10X.
f) Coloca la preparacin sobre la platina y asegrala
con las pinzas, cuida que la parte por observar
coincida con el orificio de la platina.
g) Ajusta el foco con el tornillo macromtrico,
observando que la preparacin no golpee el
objetivo.
h) Ajusta la imagen con el tronillo micromtrico.
i) Si el campo aparece muy claro u oscuro, regula la
entrada de luz con la apertura del diafragma o
ajustando el condensador.
j) Al cambiar de objetivo con el revlver, asegrate
de no golpear los lentes con la preparacin.

k) Al terminar de observar, apaga el microscopio,


enrolla el cable, retira la preparacin y limpia la
platina y los lentes como al inicio.
3. Con la navaja o bistur, corta un fragmento del tejido
del nopal o corcho, lo ms fino posible, que se vea casi
transparente por lo menos en las orillas. Con la aguja
de diseccin coloca el corte en el portaobjetos, agrega
una gota de agua o colorante. Coloca el cubreobjetos y
observa la preparacin. Los mismos cortes y las partes
completas del corcho y el nopal, observando en el
microscopio estereoscpico. Haz esquemas de tus
observaciones.

Preguntas
1. Qu le ocurre al campo de observacin al cambiar los
objetivos?
Al cambiar los objetivos se cambian los puntos de vistas de
la observacin, se desva o se desajusta la observacin. Los
puntos de vistas van a ser otros.
2. diferencia hay entre el corte de corcho y el nopal, lo
que observaste en
ambos casos son clulas?
En el nopal se puede observar la capsula de la clula a grandes rasgos a
40X.
En el corcho se observa claramente la pared celular de cada clula a 100X, esta
pared se asemejan a un panal de abejas.
Ambas son clulas vegetales.

3. Cul es el aumento mximo en el microscopio


estereoscpico y cul es el del microscopio ptico?
Para hallar el aumento debes de multiplicar el aumento del
objetivo por el del ocular, as si tu objetivo te da 100
aumentos (x), lo multiplicas por el del ocular (10x), el
resultado seria 1,000x o aumentos, esto es lo ms comn
en microscopios de luz compuestos, si tiene algunos
oculares que te dan 12.5 y hasta 15x por lo que el aumento
total seria de 1250 a 1500x.

En los estereoscpicos la frmula es la misma objetivo (el


que est ms cerca de la muestra), por el ocular (el que
est ms ceca de tus ojos).
No solo busques aumento en un microscopio, debes de
revisar el ndice aberracin, no vale la pena un microscopio
que te da miles de aumentos si no tiene una buena
definicin.
Un error comn es intentar ver una muestra con el mximo
de aumentos de manera inmediata, un buen microscopista
inicia con la lupa y poco a poco va cambiando de objetivo.

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