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Expresa la mxima cantidad de agua que puede ser retenida por gramo de
material seco en presencia de una exceso de agua bajo a accin de una fuerza
patrn.
Materiales
Procedimiento:
Se pasa 0.5 gramos de muestra en un tubo de ensayo,se adicion un exceso de
agua (10m) y se agit durante 30 minutos. Luego se centrifuga durante 10
minutos a 3000rpm; se retira el sobrenadante y se pesa el sedimento. Los
resultados se expresaron en gramos de agua por gramos de muestra.
CAA= (Peso sedimento(g)-Peso muestra(g))/Peso muestra(g)
Solucin estndar de glucosa diluida. Diluya 10ml del estndar de glucosa a 100
ml de agua destilada (1ml = 0.1mg de glucosa).
Materiales y Equipo
Espectrofotmetro.
Procedimiento
Extraccin:
1. Pese con aproximacin de 0.001g 1.0g de muestra seca 2.5g de muestra
hmeda conteniendo aproximadamente de 60 a 300 mg de carbohidratos totales
disponibles.
2. Transfiera cuantitativamente a una probeta graduada de 100 ml con tapn.
3. Adicione 10 ml de agua y agite con una varilla de vidrio para dispersar la muestra.
4. Adicione 13 ml de la solucin de cido perclrico. Agite constantemente con la
varilla de vidrio durante 20 minutos.
5. Enjuague la varilla con agua destilada y lleve el volumen a 100 ml. Mezcle y filtre a
un matraz volumtrico de 250 ml.
6. Enjuague la probeta graduada con agua destilada y adicione al matraz
volumtrico. Afore el matraz con agua destilada y agite.
Determinacin:
1. Diluya 10 ml del extracto a 100 ml con agua destilada. Con una pipeta pase a un
tubo de ensaye 1 ml del filtrado diluido.
2. Tome con la pipeta dos muestras de 1 ml de agua destilada que servirn como
blancos por duplicado y coloque cada uno de ellos en un tubo de ensaye.
3. Tome dos blancos duplicados de 1 ml usando la solucin de glucosa diluida.
4. Agregue rpidamente a todos los tubos 5ml de reactivo de anthrone recin
preparado. Tape los tubos y mezcle vigorosamente. Colquelos en un bao mara
y caliente durante 12 minutos.
5. Enfre rpidamente a temperatura ambiente. Transfiera la solucin a celdas para
espectrofotmetro de 1 cm. El color verde es estable slo por 2 horas.
8. Lea la absorvancia a 630 nm contra el blanco.
Clculos
Carbohidratos totales disponibles (% de glucosa) = (25 b)/(a W)
Donde
W = Peso en g de la muestra.
a = Absorvancia del estndar diluido1.
b = Absorvancia de la muestra diluida.
1
El grfico es una lnea recta n el rango de 0 0.15 mg de glucosa (manual) 0.0 1.5 mg de glucosa (automtico).
FIGURA 14