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FILIAL AREQUIPA
FACULTAD DE MEDICINA HUMANA Y CIENCIAS DE LA
SALUD
ESCUELA ACADMICO PROFESIONAL DE FARMACIA
Y BIOQUMICA
ANTEPROYECTO:
DETERMINACIN DE LA PRESENCIA DE
MICROORGANISMOS PATGENOS EN LOS
LAVATORIOS DE LOS BAOS DE MUJERES DEL
PABELLN G REALIZADO EN LA UNIVERSIDAD
ALAS PERUANAS -AREQUIPA 2015
PRESENTADO POR:
ARONI ARIAS MAURA
CONDORI CUEVA MELISA
AREQUIPA 2015
1. INTRODUCCIN
Algunos microorganismos son capaces de penetrar y multiplicarse en otros seres
vivos, a los que perjudican, originando una infeccin; son los denominados
microorganismos patgenos. Los problemas que causa una infeccin dependen del
tipo de patgeno, el modo en que se transfiere, dosis o concentracin de patgenos,
persistencia de los microorganismos y la resistencia del organismo infectado.
En un bao pblico puede haber estreptococo, estafilococo, E. coli y bacterias
causantes
de
estas
alteraciones
son
las
bacterias
Micrococcuss,
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AUTOR: Guevara Nestor
TITULO: Identificacin de microorganismos existentes en el edificio Torre de Cristal
Jose Lopez Portillo, Chile (2004)
RESUMEN: Este trabajo nos brinda informacin sobre los factores que pueden
afectar El crecimiento bacteriano ya que se necesita de una serie de sustancias y
de ambientes que faciliten su desarrollo. Estas pueden ser:
Temperatura: teniendo en cuenta la temperatura, podemos clasificar a los
microorganismos en:
Mesfilos: son capaces de desarrollarse a temperaturas que pueden oscilar entre
los 20-45C. Temperatura ptima = 35-37C.
Termfilos: son capaces de desarrollarse a temperaturas superiores a los 45C.
Sicrfilos: son capaces de desarrollarse a temperaturas que oscilan entre 0-20C.
Ph: el Ph ptimo en el que se desarrollan la mayora de los microorganismos es
neutro, que oscila entre 6,5-7,5. Los microorganismos que se desarrollan a pH = 4
se denominan acidfilos. En ocasiones, como consecuencia del metabolismo
bacteriano, se producen residuos que acidifican el medio. Para mantener el medio
neutro se utilizan tampones. El ms utilizado es el de sales fosfato, que adems
sirven de alimento a los microorganismos.
Condiciones adecuadas de humedad y la luz ambiental son tambin uno de los
factores que puede afectar el crecimiento bacteriano.
.
Autor: Osanz Mur Ana Cristina
Ttulo: Recuento de bacterias aerobias mesofilas totales en canales bovinas
mediante el mtodo de hisopado en un camal de Lima Metropolitana (2010)
Resumen:
3
Este trabajo nos brinda informacin sobre el mtodo por hisopado , para la toma de
muestra de las superficies :se utilizaron hisopos estriles de algodn para la toma
de muestra para cada rea, el primer hisopo fue humedecido en la solucin de
peptona 0.1% y cloruro de sodio al 0.85% durante cinco segundos ,(diluyente
recomendado por
3. HIPTESIS
Es probable que en los lavatorios de los baos de mujeres del pabelln G se
encuentren microorganismos patgenos debido a los malos hbitos de higiene y a
la cantidad de personas que lo usan diariamente.
4. OBJETIVOS
4.1. Objetivos general
Determinar la presencia de microorganismos patgenos en los lavatorios de
los baos de mujeres del pabelln G Realizado en la universidad Alas
Peruanas, utilizando distintos mtodos.
4.2. Objetivos especficos
Diferenciar bacterias Gram + y Gram - por Tincin Gram
Identificar bacterias segn su morfologa por Tincin simple
Comparar las distintas morfologas y disposiciones que adoptan las
endosporas porTincin usando el mtodo de Wirtz
Determinar la presencia de hongos y levaduras por medio de cultivo
con Agar glucosa Sabouraud
5. ALCANCE,
TRASCENDENCIA,
IMPORTANCIA
CONTRIBUCIN
DEL
ESTUDIO
El presente anteproyecto tiene alcances significativos ya que los lavatorios de los
baos son sitios empleados por mayora de personas para realizar una higiene
adecuada despus de utilizar los servicios higinicos.
La trascendencia del anteproyecto de investigacin se basara en
realizar la
6
a utilizar consiste en un tubo de ensayo provisto de un hisopo estril
sumergido en 10 ml de solucin diluyente estril y un tampn que evita la
evaporacin del solvente y/o contaminacin de la muestra a analizar.
Procedimiento: humedecer el hisopo con la solucin diluyente estril (agua
peptona), humedecer en una direccin determinada la superficie del equipo o
utensilio, repetir el hisopado pero en direccin perpendicular al pasado inicial.
Las muestras debern ser contenidas en un contenedor, si la muestra va a
tardar en ser analizada se debe mantener en refrigeracin menor a 10 C por
un periodo de tiempo no mayor a 1 hora.
6.2. MTODOS
6.2.1. TINCIN SIMPLE
Fundamento: La tincin simple se basa en la afinidad del colorante por
los componentes celulares. La tincin puede ser uniforme o presentar
algunos grnulos en su interior. Utiliza un solo colorante (violeta de
genciana, azul de metileno, fuscina diluida).
Procedimiento: Sobre el extendido seco se colocan unas gotas de azul
de metileno y se deja actuar unos minutos. Se elimina el exceso de
colorante con agua de forma suave, con ayuda de una piseta. Se seca
el extendido y se observa al microscopio.
6.2.2. TINCION GRAM
Fundamento: La tincin gran requiere cuatro soluciones, primer
colorante es un colorante bsico que en contactos con las clulas
cargadas negativamente, reacciona con ellas colorendolas. El ms
utilizado es el cristal de violeta y aumenta la afinidad entre el colorante y
las clulas .los mordientes empleados suelen ser sales metlicas ,
acidos o bases , como por ejemplo una solucin diluida de yodo . el
agente decolorante , es un disolvente organico por ejemplo , alcoholacetona (1:1). Colorante de contraste, es un colorante bsico de distinto
color que el primer colorante como, por ejemplo la safranina . las
bacterias gram positivas se tien de color azul por el cristal de violeta y
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no pederan esta coloracin durante los pasos sucesivos . las bacterias
gram negativas perderan la coloracin incial del cristal de violeta en ,los
siguientes pasos y se teirn de color rosa debido a la safranina
Procedimiento: Sobre un portaobjetos se coloca una pequea muestra.
Se coloca un gota de cristal violeta por un minuto, lavar con abundante
agua, cubrir con lugol por un minuto, lavar con agua el exceso de lugol ,
decolorar con alcohol acetona hasta la que la preparacin deje de
perder color ( unos 30seg.) , lavar con abundante agua para eliminar el
resto de disolvente , teir con safranina durante un minuto , lavar con
agua para eliminar el colorante de contraste , secar la preparacin y
examinar al microscopio .
6.2.3. TINCIN DIFERENCIAL POR EL MTODO DE WIRTZ
Fundamento: Las endosporas poseen unas cubiertas exclusivas que
las hacen resistentes a los factores ambientales adversos. Adems,
estas cubiertas hacen que las esporas aparezcan en el microscopio
como estructuras refrigerantes y de difcil tincin la tincin especfica de
esporas requiere dos colorantes. Verde malaquita, capaz de teir las
esporas en calientes. Safranina colorante de contraste que tie las
formas negativas
Procedimiento: Se teir con verde malaquita .colocar un pedacito de
papel del filtro encima de la muestra sobre el porta. Aadir el colorante
hasta empapar bien el papel de filtro. De esta forma se evitara que el
colorante salpique y manche toda la zona de trabajo. Con unas pinzas
de madera colocar la muestra encima de la llama del mechero de forma
que el colorante humee durante cinco minutos , lavar con abundante
agua el exceso de colorante , teir con safranina por un minuto , lavar
con abundante agua el exceso de colorante ,secar la preparacin y
observar la preparacin en el microscopio.
6.2.4. MEDIO DE CULTIVO A SABOURAUD GLUCOSADO AGAR
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Fundamento: Medio de cultivo recomendado para el aislamiento y
desarrollo de hongos, particularmente los asociados con infecciones
cutneas (piel, pelo, etc.).
En el medio de cultivo, la pluripeptona y la glucosa, son los nutrientes
para el desarrollo de microorganismos. El alto contenido de glucosa, la
presencia de cloranfenicol y el pH cido, favorecen el crecimiento de
hongos por sobre el de bacterias.
Adems, al medio de cultivo, pueden agregarse otros agentes selectivos
de crecimiento.
Procedimiento: Suspender 65 g de medio deshidratado en un litro de
agua destilada. Calentar agitando frecuentemente y dejar hervir durante
1 minuto para disolver completamente los ingredientes. Evitar el
sobrecalentamiento. Esterilizar a 121C durante 15 minutos. Distribuir y
enfriar a temperatura ambiente antes de su utilizacin.
7. CALENDARIO DE ACTIVIDADES
El presente cronograma es elaborado de acuerdo a la temporalidad del presente
anteproyecto y proyecto de investigacin, se da a partir de marzo del 2015 a junio
2015 y el tiempo que se considera necesario para su presentacin y sustentacin.
Cronograma de actividades
MARZO
Actividades
ABRIL
X
X
MAYO
JUNIO
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Ultima
correccin
del
anteproyecto
Aprobacin
del
anteproyecto
Elaboracin del proyecto
Primera correccin del
proyecto
Segunda correccin del
proyecto
Ultima
correccin
del
proyecto
Aprobacin del proyecto
Recoleccin de datos
Anlisis de datos
Elaboracin del informe
final
Presentacin del informe
final
Sustentacin del informe
final
Cantidad/
Materiales
unidades
20
porta objetos
50
hisopos
tubos de ensayo
matraz
10
autoclave
balanza
bagueta
luna de reloj
pizeta
Microscopio
mechero
10
Placas Petri
Asa de micrn
8.2.Reactivos
El presente cuadro da a conocer los reactivos que se van a utilizar para la
determinacin de microorganismos patgenos.
CUADRO N 3
REACTIVOS
Violeta de cristal
Lugol
Alcohol
Safranina
Verde malaquita
Azul de metileno
Agua peptonada
9.
PRESUPUESTO
Agar sabouraud
glucosado
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El presente cuadro de presupuesto es elaborado de acuerdo al precio unitario y
el precio total dependiendo de la cantidad y/o tiempo empleado por cada rubro
designado en el cuadro.
CUADRO N 4
Rubros
Precio
Cantidad
Total
unitario
y/o tiempo
S/.
Materiales biolgicos
1.00
50 g
50.00
Internet
1.00
20 horas
20.00
Copias
0.10
50
50.00
Impresiones
0.10
50
50.00
Pasajes
0.80
15.00
Otros gastos
40.00
Total
225.00
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10. BIBLIOGRAFA
1. Guillem P. Microbiologa y Parasitologa Mdicas Ed.Mdica Panamericana
2013
2. Ral Romero Cabello Microbiologa y Parasitologa Humana Bases etiolgicas
de las enfermedades infecciosas y parasitarias Editorial Mdica Panamericana
2007
3. Lopez I. Manual prctico de microbiologa 2da edicin Barcelona .