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FACULTAD DE CIENCIAS
ESCUELA PROFESIONAL QUIMICA
MANUAL DE PRACTICAS
L A B O R A T O R I O DE
BIOLOGA
CH 061
ACTIVIDAD
FECHA
25, 26 marzo
07 - 08 abril
14 - 15 abril
21 -22 abril
28 - 29 abril
05 - 06 mayo
** confirmar fecha
19 - 20 mayo
10
26 - 27 mayo
11
02 - 03 junio
12
09 - 10 junio
13
Entrega de notas
16 - 17 junio
16
** confirmar fecha
17
** confirmar fecha
Observa donde dejas el material caliente, cerciorndote que este frio antes de tomarlo
con la mano.
2. Cuando calientes un tubo de ensayo, no lo apuntes hacia ti o hacia tus compaeros,
pude proyectarse su contenido.
3. Si cae sobre ti o en tu ropa un material corrosivo, lvate inmediatamente con
abundante agua, e infrmalo al profesor del curso.
4. Nunca pruebes una sustancia.
5. Al detectar el olor de un lquido, no coloques la cara sobre la boca del recipiente, con
tu mano abanica hacia ti el aroma.
6. Antes de usar un reactivo lee dos veces la etiqueta de su contenido.
7. Los tubos de ensayo no pueden calentar ser por el fondo sino por las paredes, para
evitar su expulsin del contenido.
8. No arrojes cuerpos slidos en los lavaderos, no viertas directamente los cidos.
9. Rotula tu material de trabajo, as te ser fcil identificarlos.
10. Cuando trabajes con el mechero mantn tu cabello recogido.
11. Nunca emplear papel para encender el mechero.
3
Resumen (1 p)
Qu teoras lo sustentan? En relacin al desarrollo de los experimentos.
II.
Objetivos especficos (2 p)
Tema central de estudio para cada experimento desarrollado
III.
IV.
V.
Conclusiones (2 p)
Qu significan los resultados?
Las conclusiones estn relacionadas con los objetivos.
Es el anlisis del cumplimiento de cada uno de los objetivos de la prctica
VI.
Cuestionario (2 p)
Preguntas relacionadas al tema
GRUPO
RECONOCIMIENTO DE BIOMOLECULAS
Calificacin
Fecha
Recuerde que el PREINFORME debe de entregarlo de manera individual, el da de realizacin del laboratorio,
escrita a mano, se presenta en hojas A4 bond, Nota mxima de 4 puntos
C
a. Identificacin de azucares reductores
b. Hidrolisis de la sacarosa
c. Reconocimiento del almidn
d. Reconocimiento de protenas
e. Coagulacin de protenas
f. Solubilidad de lpidos
2. Cuestionario:
a. Qu es la inversin de la sacarosa?
b. Qu sucede qumicamente al aadir lugol a las muestras positivas para la reaccin?
c. Cul es la reaccin que tiene lugar entre el reactivo de Biuret y las protenas?
d. Cul es el valor de la polaridad de la acetona y el cloroformo?
e. En nuestro sistema digestivo, Qu enzima se encarga de solubilizar las grasas que
consumimos?
3. Bibliografa: cite correctamente la bibliografa consultada
GUIA DE LABORATORIO N 1
MATERIALES Y REACTIVOS
Tubos de ensayo, mechero, placas petri, vasos de precipitado, gradillas, pipetas graduadas,
propipetas, pinzas de madera, pisceta, almidn.
Reactivo de Fehling, solucin de azucares, solucin de almidn, acetona, cloroformo, sulfato de
cobre, hidrxido de sodio
Por grupo: un huevo, 5 ml leche, 1 papa (elementos crudos)
6
Reaccin de Fehling:
Es una reaccin cualitativa que sirve para determinar la presencia de un azcar reductor que
no sea sacarosa (carece de carbono anomrico y no es azcar reductor).
El reactivo de Fehling presenta sulfato de cobre, carbonato de sodio, citrato de sodio, y agua.
En la reaccin para determinar a los azucares reductores los agentes estabilizantes de la
reaccin son el carbonato y citrato, el sulfato de cobre es el reactante especficamente el Cu
que va a reaccionar con los grupos qumicos de aldehdos y cetonas. Que en reacciones de
oxido reduccin el Cu se convierte en CuO dando un color rojo ladrillo que precipitar
posteriormente, como lo expresa la siguiente reaccin (figura 2):
PROCEDIMIENTO
-
COMPONENTES
1
1.Solucin de glucosa
1%
1%
4.Solucin de sacarosa
1%
Reactivo de Fehling A
1 ml
2.Solucin de fructuosa 1%
3.Solucin de lactosa
1ml
1 ml
1 ml
1 ml
1 ml
1 ml
1 ml
mezclar
Reactivo de Fehling B
1 ml
1 ml
1 ml
1 ml
mezclar
Calor por ebullicin
PROCEDIMIENTO
-
Mezclar por inversin el reactivo con cada uno de sus componentes, ver la tabla 3.
Someter a la accin del calor hasta ebullicin
Tabla N2. Componentes de la hidrolisis de la sacarosa
Muestra
sacarosa
COMPONENTES
Solucin de sacarosa
0.5%
2 ml
1M
1 ml
1 5
Enfriar
Hidrxido de sodio NaOH 1M
1 ml
Reactivo de Fehling A
1 ml
Reactivo de Fehling B
1 ml
bao mara
1 minuto
La reaccin ser positiva si en la muestra se forma un precipitado color rojo ladrillo
(CH2O), ser negativa, si la hidrlisis no se ha realizado correctamente, apareciendo
una coloracin verde en el tubo de ensayo.
Calor por ebullicin
PROCEDIMIENTO
-
TUBO DE ENSAYO
1
1 ml
Papa rallada
1 gr
Albmina
Reactivo de Lugol
-
1 ml
3 gotas
3 gotas
3 gotas
Mezclar por inversin y anotar los resultados, ser positivo si se torna azul, violceo.
Calentar suavemente, sin que llegue a hervir, hasta que pierda el color.
Enfriar el tubo de ensayo en agua fra, observar como a los 2-3 minutos reaparece el
color azul.
// ANOTAR SUS OBSERVACIONES Y RESULTADOS
10
Las protenas debido al gran tamao de sus molculas forman con el agua soluciones
coloidales que pueden precipitar formndose cogulos al ser calentadas a temperaturas
superiores a 70C o al ser tratadas con soluciones salinas, acidas, alcoholes, etc.
Una de las reacciones coloreadas especficas de las protenas, que sirven para su
identificacin, cabe resaltar la reaccin de Biuret (figura 8). Esta reaccin los producen los
pptidos y las protenas, pero no los aminocidos, ello se debe a la presencia del enlace
peptdico CO-NH que se destruye al liberarse los aminocidos
Reaccin de Biuret (figura 8)
Se debe a los componentes que presenta: el hidrxido de sodio y sulfato de cobre (II); el cual el
agente denaturante de las protenas es el hidrxido y el reactante es el sulfato de cobre. Las
protenas despus de ser denaturadas facilitan la interaccin del Cu con los pares de
electrones sin compartir del grupo amino del pptido mediante enlaces de coordinacin con la
formacin de un complejo coloreado prpura violceo, cuya intensidad depende de la
concentracin de protenas.
11
PROCEDIMIENTO
-
COMPONENTES
1
Albmina (huevo)
1 ml
Casena (lcteo)
1 ml
Sol. almidn
NaOH
1 ml
5%
0,5 ml
0,5 ml
0,5 ml
Rvo. Biuret:
Cu2SO4 1%
0,5 ml
0,5 ml
0,5 ml
Observe la formacin del color violeta en los tubos que presentan protenas, siendo
Biuret (+), de no haber un cambio de color ser Biuret (-).
12
PROCEDIMIENTO
-
Colocar en tres tubos de ensayo una pequea cantidad de clara de huevo (puede diluirse en
un poco de agua para obtener una mezcla espesa) o 2-3ml de leche.
Calentar uno de los tubos al bao Mara, aadir a otro 1ml de HCl concentrado, 2 o 3ml de
alcohol etlico.
Observar los resultados.
Tabla 8. Coagulacin de protenas
TUBO DE ENSAYO
COMPONENTES
Leche
2 ml
2 ml
2 ml
2 ml
2 ml
x
1 ml
NaOH 10M
NaCl 10M
Alcohol etlico 96C
1 ml
1 ml
1 ml
13
1 ml
1 ml
1 ml
2 ml
Acetona
Cloroformo
-
2 ml
2 ml
14
GRUPO
RECONOCIMIENTO DE BIOMOLECULAS
Nombre del alumno
(Apellidos, Nombre)
Pre
informe
(4 p)
Test
(4p)
Reporte
(12 p)
Desempeo
Nota
1 Resumen (1p)
15
2.
3.
4.
5.
6.
16
glucosa
fructuosa
lactosa
sacarosa
Reductor
Importante: Es necesario indicar la formacin de precipitado y la cantidad con un signo (+++).
17
SI
NO
Hidroliza
18
almidn
papa
huevo
Almidones?
Importante: Es necesario indicar la intensidad del color con un signo (+++).
19
albmina
casena
almidn
Protenas
Importante: Es necesario indicar la intensidad del color con un signo (+++).
20
2 ml
2 ml
2 ml
2 ml
2 ml
x
1 ml
1 ml
1 ml
1 ml
21
Aceite
+ agua destilada
Aceite
+ acetona
Aceite
+ cloroformo
Soluble?
22
23
5. Conclusiones (2 p)
1.
2.
3.
4.
5.
6.
6. Cuestionario (2 p)
a. Qu azcares son reductores?
b. En el experimento 2: reconocimiento del almidn, al trabajar con el lugol Por qu se da
el cambio de coloracin despus de sometido al calor? Fundamente su respuesta.
c. Cules son los factores que afectan la naturaleza de las protenas?
d. Qu es una emulsin transitoria?
e. Qu es una emulsin permanente?
24
Cuestionario (2 p)
25
ANEXO 1
PREPARACION DE REACTIVOS
LABORATORIO: RECONOCIMIENTO DE BIOMOLECULAS
a. Soluciones de azucares glcidos al 1%
Glucosa, maltosa, lactosa, fructuosa, galactosa, sacarosa, almidn.
Se pesa 1 gramo de un glcido y se disuelve en 100 ml de agua destilada, agitando
hasta disolverse por completo.
Se vierte en un frasco limpio y se rotula, indicando la fecha de preparacin.
As para cada uno de ellos.
Para el caso del almidn, debe emplearse agua destilada caliente y agitacin constante
b. Solucin de almidn al 2%
Se pesa 2 gramos de almidn y se disuelve en 100 ml de agua destilada caliente y en
agitacin constante.
c. Hidrxido de sodio al 5%
Se pesa 5 gramos de NaOH y se disuelve en 100 ml de agua destilada.
d. Reactivo de Fehling
Solucin A:
solucin al 3% de sulfato cprico cristalizado
Pesar 30 g de sulfato cprico Cu2SO4 y aforar en un litro con agua
destilada
Solucin B:
solucin al 15% de sal de Rochelle (tartrato de sodio y potasio) en
solucin acuosa al 5% de hidrxido de sodio NaOH.
Preparar un litro de hidrxido de sodio al 5% (50 grs en 1 L) y adicionarle
150 g de tartrato de sodio y potasio
e. Solucin de lugol: yodo/yoduro de potasio
Adicionar 2 g de yoduro de potasio y1 g de yodo a 80 ml de agua destilada, agitar hasta
solubilizar los reactivos Aforar 100ml de agua.
f.
Reactivo de Biuret
Solucin A:
17.3 g de sulfato de cobre Cu2SO4 en 100 de agua destilada caliente
Solucin B:
17.3 g de citrato sdico Na2CO3y 100 g de bicarbonato de sodio anhidro
NaHCO3 en 800 ml de agua destilada caliente.
Se mezclan ambas soluciones, se enrazan a un litro y se ponen en un matraz cubierto
para evitar la accin de la luz. El reactivo se guarda en un frasco color mbar.
26
GRUPO
Calificacin
Fecha
Recuerde que el PREINFORME debe de entregarlo de manera individual, el da de realizacin del laboratorio,
escrita a mano, se presenta en hojas A4 bond, Nota mxima de 4 puntos
A
Se indica el proceso (Se adiciona se separa)
2. Cuestionario:
- Qu es cdigo gentico?
- Cuntos genes tiene el hombre?
- Presente un diagrama de flujo de la extraccin de ADN en una de las siguientes
muestras: en cabellos, sangre, tejido seo,
- Cmo se puede preservar el ADN despus de haberlo extrado?
- Cul es la diferencia de extraer ADN animal, vegetal y bacteriano? (sealarlas)
- Elabore el diagrama de flujo del procedimiento de la extraccin de ADN vegetal
3. Bibliografa: cite correctamente la bibliografa consultada
27
GUIA DE LABORATORIO N 2
28
MATERIALES Y REACTIVOS
Tubos de ensayo, agua mineral, palillo, vasos desechables, pipeta de 10 ml, bagueta,
propipeta, gradilla de madera, tubos eppendorf, NaCl 6%, alcohol de 96 muy frio, alcohol de
70, detergente/shampu, una probeta.
Por persona: vasos desechables, cucharitas de plstico, agua mineral, alcohol de 96,
alcohol de 70, (100ml), muestra biolgica: epitelio bucal
Por grupo:
alcohol de 96, alcohol de 70, (100ml)
FUNDAMENTO
El ADN se encuentra en el interior del ncleo celular, disperso y replegado, unido a protenas
para formar la cromatina. Para extraerlo es necesario homogenizar el tejido y romper las
clulas para separar el ncleo, al lograrlo se libera el ADN, se debe separar de las protenas y
precipitarlo para extraerlo de la solucin. Se visualizara como un agregado de fibras
blanquecinas que se podrn adherir a una varilla de vidrio.
Preparar un tubo de ensayo con alcohol etlico de 96 por cada alumno y poner a enfriar lo
mximo que sea posible (p.e. en bao de agua con hielo, mientras se realizan los pasos
siguientes.
1.
2.
3.
4.
5.
29
GRUPO
Pre
informe
(4 p)
Test
(4p)
Reporte
(12 p)
Desempeo
Nota
1. Resumen (1p)
30
31
5. Conclusiones (2 p)
32
6. Cuestionario (2 p)
a. Explique, cmo se puede determinar la concentracin del ADN.
b. Cul es la importancia de estudiar el ADN en muestras arqueolgicas?
Y en la actualidad?
33
GRUPO
Calificacin
Fecha
Recuerde que el PREINFORME debe de entregarlo de manera individual, el da de realizacin del laboratorio,
escrita a mano, se presenta en hojas A4 bond, Nota mxima de 4 puntos
A
Se indica el proceso (Se adiciona se separa)
Cuestionario:
a. Qu es un grupo sanguneo?
b. Qu es el factor Rh? De dnde proviene?
c. Cmo se da reaccin para identificar un grupo sanguneo?
d. Cul es la importancia del grupo sanguneo en el trasplante de rganos?
e. Que es coagulacin? Que es aglutinacin?
34
GUIA DE LABORATORIO N 3
Grupo sanguneo
AB
Glbulos rojos
En la membrana
Antgeno A
En el plasma
Anti-B
Antgeno B
Anti-A
No antgenos
Antgenos A y B
No anticuerpos
Anti-A y
Anti-B
35
OBJETIVOS
Determinar el grupo sanguneo.
Presenciar la tcnica, observar la aglutinacin de los hemates e interpretar dicha
tcnica.
MATERIALES Y REACTIVOS
Portaobjetos, lanceta (material punzocortante estril), alcohol 96C, algodn, agua oxigenada,
palillos mezcladores.
Reactivos: suero anti A, anti B, anti D IgG/IgM
Por grupo:
alcohol medicinal.
36
GRUPO
1.
Pre
informe
(4 p)
Test
(4p)
Reporte
(12 p)
Desempeo
Nota
Resumen (1p)
37
2. Objetivos especficos (2 p)
Muestra 1
Muestra 2
Muestra 3
*Indicar:
38
39
5. Conclusiones (2 p)
6. Cuestionario (2 p)
a. Qu es un antgeno?
b. Qu es un anticuerpo?
c. En qu consiste una reaccin antgeno-anticuerpo?
d. Cal es el grupo donante universal? Por qu?
40
LABORATORIO N 4
Presentac.
de un
Proyecto
Articulo
cientfico
Nota PC4
Exposicin
PARTE 1
1.
2.
3.
PARTE 2
4.
5.
6.
7.
8.
PARTE 3
9.
1.
TITULO
2.
3.
2.2.1
Objetivos Generales
2.2.2
Objetivos especficos
2.2.3
Hiptesis
2.2.4
MARCO TEORICO
3.1 Antecedentes
3.2 Definicin de conceptos
4.
METODOLOGIA
4.1 Diseo de la investigacin
4.2 Variables de estudio
4.3 Tcnicas de anlisis y procesamiento de datos
5.
RESULTADOS
6.
DISCUSIN
7.
CRONOGRAMA
8.
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
42
El texto completo, debe ser escrito en formato Microsoft Word, tamao de pgina A4.
Mrgenes; izquierdo 3 cm, derecho 3 cm, superior 3 cm, inferior 3 cm. Espacio 1.5, fuente
Times New Romn, estilo de fuente regular (salvo indicacin contraria), color de fuente
negro (texto y grficos) y tamao de fuente 12. Se imprimir de manera vertical. Todo el
texto, excepto el ttulo, debe estar alineado a la derecha y a la izquierda (usar la opcin
justificar). Los decimales deben llevar coma.
Resumen
(Mayscula, Times New Roman 14, en negrita y centrado)
(Times New Roman 12) Resume cada seccin principal del artculo cientfico, en una oracin
cada una. Por ejemplo: El tema principal del laboratorio fue (concepto, principio, procedimiento,
etc.) y su principal objetivo fue..(esto se saca de la Introduccin). El experimento se realiz
(breve descripcin de cmo se hizo el laboratorio)(esto se saca de la Parte experimental).
Los resultados generales fueron. (esto se saca de Resultados). Estos resultados se
relacionaron con (el concepto, principio, procedimiento, etc.) . (esto se saca de Discusin).
En este experimento aprendimos (concepto, principio, procedimiento, etc.)(esto se saca de
Conclusin). FINALMENTE COLOCA TODAS LAS ORACIONES JUNTAS (sin ttulos) EN
UN SOLO PRRAFO.
Adems, despus del Resumen se deber incluir entre 3 y 6 palabras clave, en espaol. Se
escriben a la izquierda del texto, con tamao de fuente 12 y en negrita.
43
Introduccin
(Mayscula, Times New Roman 14, en negrita y centrado)
(Times New Roman 12) Iniciar el prrafo de Introduccin estableciendo el concepto, principio,
teora o ley cientfica, as como el procedimiento de laboratorio relacionados al experimento.
Luego desarrolla estos puntos detalladamente haciendo uso de tu gua de laboratorio,
anotaciones, libros de texto, etc. Recuerda que debes citar a las referencias usadas en el
texto, para ello introduce una numeracin en superndice, la cual debe coincidir con la
numeracin de las referencias. Por ejemplo:
.los coeficientes de una ecuacin balanceada indican los nmeros relativos de moles de
reactivos y productos 1.
Referencias
1.
PARTE EXPERIMENTAL
(Mayscula, Times New Roman 14, en negrita y centrado)
(Times New Roman 12) Haciendo uso de tu gua de laboratorio, cuaderno y
anotaciones, describe cmo hiciste el experimento. El punto es demostrar que tienes una
comprensin slida de los procedimientos del laboratorio. Describe detalladamente los
materiales usados y los mtodos seguidos, de tal manera que otra persona podra repetir el
procedimiento. Asegrate de anotar cualquier modificacin del procedimiento descrito en la
gua con respecto a lo que realmente hiciste en el laboratorio, ello podra ayudarte cuando
elabores la discusin de los resultados. Recuerda que en esta parte se debe describir lo que
hiciste en el laboratorio y no los resultados. Normalmente se escribe en tiempo pasado, porque
describe algo que ya hiciste.
RESULTADOS Y DISCUSIN
(Mayscula, Times New Roman 14, en negrita y centrado)
(Times New Roman 12) En los resultados, es importante que a continuacin de cada tabla,
grfico, esquema se coloque una frase breve que resuma la informacin mostrada, por
ejemplo: El tiempo de reaccin disminuy al incrementarse la concentracin de la solucin
(Tabla 1).
Revisa todos los datos de tu experimento y resume en un prrafo corto los principales
hallazgos. Este prrafo te ayudar a iniciar la seccin de Resultados. Por ejemplo: Los
resultados del experimento muestran que la variable X se incrementa tanto como Y y Z al
aumentar la temperatura.
El orden en el que se presentan los resultados es el siguiente:
a. El prrafo corto que resume los principales hallazgos a partir de todos los datos del
experimento. Este prrafo permitir mostrar si has comprendido adecuadamente los
hallazgos obtenidos en el experimento.
La secuencia de tablas, grficos, esquemas, acompaados por sus respectivos resmenes de
la informacin mostrada. Las tablas, figuras y esquemas, que no deben ser mayores que una
pgina A4, tienen numeracin arbiga seguida de punto. A continuacin se coloca la leyenda
que explique su significado. La numeracin y leyenda en una tabla, cuyo formato debe ser
bsico 1, se colocan en la parte superior a diferencia de las figuras y los esquemas que se
ubican en la parte inferior.
44
(Times New Roman 12) En la discusin, se inicia explicando lo que puedes interpretar a partir
de tus resultados en trminos del concepto cientfico o procedimiento de laboratorio
relacionados al experimento. En otras palabras, discute la conexin entre los datos
recolectados y lo que se supona ibas a aprender haciendo el experimento. Si es necesario,
puedes hacer referencia a los grficos, tablas, esquemas, etc. de los resultados que sustenten
tu explicacin.
En la parte final de la discusin, escribe acerca de las posibles fuentes de error que tal vez
hayan influido en tus resultados. As mismo, en los artculos cientficos es usual que se
comparen los resultados obtenidos con los de otros cientficos, t podras comparar los tuyos
con algunas referencias bibliogrficas y comentar cualquier semejanza o diferencia entre ellos y
dar alguna posible explicacin para las diferencias identificadas.
Conclusin
(Mayscula, Times New Roman 14, en negrita y centrado)
(Times New Roman 12) Escribe un prrafo que resuma lo que aprendiste en relacin al
concepto cientfico o procedimiento de laboratorio. Puedes ayudarte hacindote las
siguientes preguntas:
Tu comprensin del tema (concepto o procedimiento) mejor o no al hacer el
experimento?
Qu aspectos especficos del experimento contribuyeron a tu aprendizaje?
Qu dificultades tuviste durante la etapa previa al laboratorio y cmo ellas fueron
superadas al realizar el experimento?
Cmo lo que aprendiste en el laboratorio podra ser aplicado en el futuro?
Asimismo, escribe prrafos que resuma si se han cumplido con los objetivos planteados al
inicio del trabajo experimental.
REFERENCIAS
(Mayscula, Times New Roman 14, en negrita y centrado)
(Times New Roman 12) Las referencias, se citan en el texto correlativamente como
superndice. El nmero de estas referencias no debe ser excesivo. Debern fluctuar entre 7 y
15. Las abreviaturas de la revistas se escribirn segn:
Chemical Abstracts Service Source Index (http://www.cas.org/sent.html) y List of Journals
Indexed in Index Medicus,. (http://www.nlm.nih.gov/tsd/serials/lsiou.html)
Las referencias citadas se escribirn con el tamao de fuente 10 y se seguir el estilo de:
Ejemplo de referencia a libro:
Bajtn, M. (1982). Esttica de la creacin verbal. Mxico: Siglo veintiuno editores.
Ejemplo de referencia a captulo de libro:
Brew, A. (2003). La autoevaluacin y la evaluacin por los compaeros. En S. Brown y A.
Glasner (Eds.) Evaluar en la universidad. Problemas y nuevos enfoques (pp. 179-189). Espaa:
Narcea S. A. de ediciones.
Ejemplo de referencia a artculo:
Coll, C. y Sol, I. (1989). Aprendizaje significativo y ayuda pedaggica. Cuadernos de
Pedagoga, 168, 16-20.
Ejemplo de referencia a documento extrado de Internet:
Andru, J. (2004, 7 de diciembre). Las tcnicas de anlisis de contenido: una revisin
actualizada. Recuperado el 7 de julio del 2007, de:
http://public.centrodeestudiosandaluces.es/pdfs/S200103.pd
45