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TESIS DE GRADO
Previo a la obtencin del Grado de:
MAGSTER EN BIOTECNOLOGA AGRCOLA CON
MENCIN EN AGRICULTURA ORGNICA
Presentada por:
Ing. Homero Santiago Robalino Robalino
GUAYAQUIL ECUADOR
Ao: 2011
AGRADECIMIENTO
En primer lugar quiero dejar sentado mi profundo agradecimiento al Centro de
Investigaciones Biotecnolgicas del Ecuador (CIBE) en la persona de su principal la Dra.
Esther Lilia Peralta y todo su equipo de trabajo por brindarme todas las facilidades para
la realizacin de la presente investigacin. Al Ing. Alberto Ortega por su incomparable
ayuda y orientacin, fundamentales para llevar a exitoso trmino el presente trabajo. Mi
gratitud con los vocales Ing. Edwin Jimnez y Dr. Pal Herrera por sus valiosas
correcciones y aportes.
Igualmente mi agradecimiento para con la Procesadora Nacional de Alimentos C.A
PRONACA, por darme todas las facilidades para ejecutar esta investigacin y su
invalorable apoyo econmico. Resalto el gran aporte del Ing. Jorge Burneo, Director de
I+D Agrcola de PRONACA, que con su visin y tenacidad nos llenaron de ejemplo para
llegar a la finalizacin de este esfuerzo.
A la Facultad de Ingeniera Mecnica y Ciencias de la Produccin (FIMCP) y al programa
de Maestra en Biotecnologa Agrcola, por haber organizado exitosamente este
programa de post grado. A todos los profesores y compaeros con los que compartimos
la colegiatura por la gran cantidad de conocimientos, experiencias y amistad que
intercambiamos.
Extiendo mi reconocimiento al Colegio Tcnico Agropecuario Galo Plaza Lasso de Daule
por facilitarme el uso de sus instalaciones. Tambin a todos los agricultores que
desinteresadamente colaboraron facilitando reas de sus fincas para la realizacin de la
etapa de campo de esta tesis.
Agradezco a toda mi familia que siempre ha estado pendiente del desarrollo de esta
investigacin y por ser mi apoyo permanente en cada una de las actividades que
emprendo.
Finalmente, no puedo dejar de reconocer el trabajo de todo el personal operativo que en
campo me ayud a establecer los diferentes lotes de trabajo tanto en arroz como en
maz, cuya sencillez y generosidad fueron una de las inspiraciones de este trabajo.
DEDICATORIA
TRIBUNAL DE GRADUACIN
DECLARACIN EXPRESA
intelectual
ESCUELA
SUPERIOR
de
la
misma
POLITCNICA
LITORAL .
Homero Robalino R.
la
DEL
vi
RESUMEN
El uso de fertilizantes fermentados anaerbicamente en diversos cultivos en el Ecuador
cada da toma mayor importancia, reportndose cada vez ms experiencias documentadas
sobre su uso con excelentes resultados. Pese a su importancia dentro del contexto agrcola
Ecuatoriano, en los cultivos de arroz y maz el efecto de dichos fermentos ha sido poco
investigado. Adems, se requiere profundizar en algunos factores claves para mejorar su
calidad y eficacia como los son la relacin C/N inicial y las fuentes de microorganismos
utilizados como inculo para el proceso. Por lo antes expuesto, el presente trabajo tuvo los
siguientes objetivos especficos: 1) comparar dos relaciones C/N iniciales y cuatro fuentes
de inculo para la produccin de biofermentos basados en la caracterizacin de cada uno de
sus ingredientes; 2) analizar qumica y microbiolgicamente cada uno de los biofermentos
obtenidos, y 3) evaluar a nivel de campo en los cultivos de arroz y maz cada uno de los
biofermentos resultantes en tres dosis de aplicacin. Se cuantific el contenido de carbono y
nitrgeno de cada uno de los ingredientes de los fermentos (estircol bovino, melaza, suero
de leche) al igual que de los inoculantes a evaluar (hojarasca de bosque, contenido ruminal,
inoculante para biol y estircol bovino) y con una metodologa sencilla de clculo, se
establecieron con precisin las relaciones C/N iniciales en estudio de
25 y 30. De la
combinacin de dichas relaciones C/N y de las cuatro fuentes de inculo se obtuvieron ocho
tratamientos a nivel de biodigestores. Luego de los cuatro meses que dur la fermentacin,
los anlisis qumicos practicados a cada tratamiento mostraron contenidos de N, P y K muy
similares en todas las frmulas, el pH vari desde 5,6 (T4) hasta 7,2 (T1). Las bacterias de
los gneros Bacillus, Lactobacillus y Peseudomonas fueron las ms abundantes y
estuvieron presentes en el 100%, 71% y 54% de las frmulas de fermentos analizados
respectivamente. La levadura Sacharomyces en el 75% y los hongos Trichoderma en el
46%, Aspergillus y
vii
viii
ABSTRACT
The use of fermented organic fertilizer under anaerobic conditions in different crops has been
taken great importance in Ecuador. There are many documents experiences reported about
the used with excellent results. Despite its importance over Ecuadorian agricultural context,
the effects of fermented organic fertilizer in rice and maize have not been investigated.
Besides it is necessary to go deeper in different key factors in order to improve the quality
and effectiveness such as the C/N relation at initial stages and the source of microorganism
used as inoculums for the process. For these reasons, the present research had different
objectives: 1) To compare two relations C/N relations at initial stage and four different
sources of inoculums for the organic fermented production based on each formulas
ingredients characterization; 2) To analyze chemical and microbiological each organic
fermented product, and 3) To evaluate on fields specifically on rice an maize crops, each
organic fermented product with three different application doses. It was quantified the carbon
and nitrogen content from each one of the formulas ingredients (cow manure, molasses,
whey) such as the inoculums evaluation (forest litter, rumen contents, biol inoculants and
cattle manure) and with a simple calculation methodology, it was established precisely the
C/N relation at initial stage at 25 and 30. From the combination of these C/N relations and
with the four inoculums sources it was obtain eight treatments at bio-digester level. After four
months of fermentation, chemical analysis were done for each treatment that very similar
shown N, P, K content on every formula, pH changed between 5,6 (T4) and 7,2 (T1). Bacteria
of the genera Bacillus, Lactobacillus and Pseudomonas were the most abundant and were
present at a 100%, 71% and 54% for each formula analyzed respectively.
Yeast of
Sacharomyces spp. was at 75% and fungus Trichoderma spp. was at 46%, Aspergillus spp.
and Penicillium spp. were both at 42%. Each one with the eight organic ferment were
produced and evaluated in the fields to quantify the effect over rice and maize yield with
three doses applications (60, 90 and 120 liters/Ha/cycle on rice and 45, 68 and 90
liters/Ha/cycle on maize), on every case it was compare with a control without any
application that generated 25 treatments for each crop. Treatments yields were statistically
compared; interactions between factors were analyzed: inoculums source, C/N relation and
application doses. It was also analyzed single and multiple correlations between yields and
chemical analysis results. For field applications statistical differences were not found respect
with the control group without application, however T11 (formula T4 at bio-digester level that
corresponds to cow manure inoculums and C/N of 25 at the intermediate dose on field
application) reached a numerically yield superior on rice and maize. Only on maize it was
found statistically differences at doses application being superior the 90 liters of fermented
ix
fertilizer per hectare and for cycle. The correlation between inoculums and C/N relation in
both crops were statistically different, resulting for rice the best combination: cow manure in
C/N relation of 25 and forest rhizosphere with C/N relation of 30. In maize, the inoculums IB
(inoculums for biol) in C/N relation of 25 and cow manure with C/N relation of 25. Both single
and multiple correlations were determined that pH and nitrogen content of the fermented
products were inversely proportional to the field performance for both crops.
NDICE GENERAL
Resumen....vi
Abstract........viii
ndice general........x
ndice de figuras.......xii
ndice de tablas.......xiii
Abreviaturas.....xvi
Captulo 1.
INTRODUCCIN..1
MARCO CONCEPTUAL..4
xi
MATERIALES Y MTODOS.26
3.1 Comparacin de dos relaciones C/N iniciales y cuatro fuentes de inculo para la
produccin de biofermentos basados en la caracterizacin de cada uno de los
ingredientes que intervienen en el proceso...26
3.2 Anlisis qumico y microbiolgico de los biofermentos obtenidos....29
3.3 Evaluacin a nivel de campo en los cultivos de arroz y maz de cada uno de los
biofermentos obtenidos en tres dosis de aplicacin................29
Captulo 4.
RESULTADOS Y DISCUSIN....31
4.1 Comparacin de dos relaciones C/N iniciales y cuatro fuentes de inculo para la
produccin de biofermentos basados en la caracterizacin de cada uno de los
ingredientes que intervienen en el proceso...31
4.2 Anlisis qumico y microbiolgico de los biofermentos obtenidos....32
4.3 Evaluacin a nivel de campo en los cultivos de arroz y maz de cada uno de los
biofermentos obtenidos en tres dosis de aplicacin.35
4.3.1 Estudio de las interacciones entre los factores en estudio....39
4.3.2 Anlisis de las correlaciones simples....42
4.3.3 Anlisis de las correlaciones mltiples.....44
Captulo 5.
CONCLUSIONES.....47
Captulo 6.
RECOMENDACIONES.....49
Captulo 7.
BIBLIOGRAFA.............................................................................................50
Anexos. ...54
xii
NDICE DE FIGURAS
Figura 2.1
anaerbicas......4
Figura 2.2 Evolucin del pH en el interior y en el efluente de un biodigestor que trabaja con
excretas de cerdo destinado para la produccin de biogs...12
Figura 2.3.
xiii
NDICE DE TABLAS
Tabla 2.1. Productos de la fermentacin de Bacillus cereus cultivado en medios aerbicos y
anaerbicos......6
Tabla 2.2. Diversidad microbiolgica de los microorganismos fermentativos productores de
H2.......8
Tabla 2.3.
biofermentos
enriquecidos...18
Tabla 2.8.
xiv
Tabla 2.11.
xv
Tabla 4.7. Anlisis de los factores en estudio y sus interacciones en el cultivo de arroz y
maz....40
Tabla 4.8. Test Duncan al 5% para la interaccin fuente de inculo x relacin C/N en el
cultivo de arroz...41
Tabla 4.9. Test Duncan al 5% para la interaccin fuente de inculo x relacin C/N en el
cultivo de maz.......41
Tabla 4.10. Test Duncan al 5% para las dosis de aplicacin de los biofermentos en el cultivo
de maz.......41
Tabla 4.11. Anlisis de correlacin entre los principales resultados del anlisis qumico de
los biofermentos y el rendimiento en campo de los cultivos de arroz y maz..42
Tabla 4.12. Anlisis de correlacin entre los parmetros registrados en el anlisis qumico de
los fermentos entre s.44
xvi
ABREVIATURAS
C/N
Relacin carbono/nitrgeno
IB
EB
CEB
NEB
CM
NM
SL
CSL
NSL
CI
NI
CU
UN
CAPTULO 1.
1.1
INTRODUCCIN
1.2
1.3
Objetivos
1.3.1
Objetivo General
Objetivos Especficos
Comparar dos relaciones C/N iniciales y cuatro fuentes de inculo para la produccin
de biofermentos basados en la caracterizacin de cada uno de los ingredientes que
intervienen en el proceso.
Evaluar a nivel de campo en los cultivos de arroz y maz cada uno de los
biofermentos resultantes en tres dosis de aplicacin.
1.4
Hiptesis
1.4.1
Hiptesis Nula
Hiptesis Alternativa
CAPTULO 2.
2.1
MARCO CONCEPTUAL
2.3
2.3.1
Hidrlisis y fermentacin
Microorganismo
Anaerobios obligados
Clostridium spp. N 2
C. paraputrificum M-21
C. butyricum LMG 121
3tl
C. butyricum SC-El
C. butyricum IFO 13949
Anaerobios facultativos
Enterobacter
aerogenes E.82005
Enterobacter
aerogenes E.82005
Enterobacter
aerogenes E.82005
Enterobacter
aerogenes E.82005
E. aerogenes HU-101
wt
E. aerogenes HU-101
(mutante AY-2)
Sustrato
Glucosa
Xilosa
N-acetil-D-
2,5
Glucosa
Batch
1,5
Glucosa
Glucosa
Otro
Otro
1,4-2
1,9
Melaza
Batch
1,24
Melaza
Suspensin
0,81
Melaza
Otros
1,58
Melaza
Tanisho y Ishiwata
(1994)
Tanisho y Ishiwata
(1994)
Tanisho y Ishiwata
(1994)
Tanisho y Ishiwata
(1994)
Batch
0,6
Glucosa
Batch
1,17
2,2
3,8
2,49
1,5
2,28
Estudio en proceso
Glucosa
Bacillus Spp.
1,1
Glucosa
E. cloacae DM 11
saccharolyticus)
Cultivos mixtos
Clostridium spp. +
azcar)
Batch
glucosamina
Sucrosa
Caldicellulosiruptor
Referencia
E. cloacae IIT-BT 08 wt
BTS1
Termfilos
Thermotoga maritime
T. neapolitana
T. elfii +
(mol/mol de
2
2,1
Glucosa
JK1
Bacillus coagulans IIT-
cultivo
H2 obtenido
Batch
Batch
E. cloacae IIT-BT 08 wt
Mtodo de
Glucosa
Residuos de
trigo
Glucosa
Flujo
continuo
Flujo
continuo
Flujo
continuo
Batch
Batch (pH
6,0)
Batch (37C,
pH inicial 6,5)
Sucrosa
Glucosa
Otros
Batch
4
0,53
Glucosa
Batch
3,3
Sucrosa
Batch
1,53
E. aerogenes HU-101 +
Rhodobacter
Glucosa
sphaeroides RV
2.3.2
Inmovilizadas
en agar
3,15
Acetognesis
Son las conocidas como bacterias sintrficas obligadas que se caracterizan por su
imposibilidad de crecer en un cultivo puro. Necesitan asociarse estrechamente con
microorganismos
consumidores
de
H 2.
Pertenecen
gneros
diversos
como
2.3.3
Metanognesis
10
ellas a su vez pueden emplear tambin formiato, algunas pocas isopropanol e isobutirato
(Frioni, 1999). Todos los metangenos utilizan NH+ como fuente de nitrgeno algunas
especias fijan N2 (Methanosarcina, Methanococcus). El nquel es un componente de
coenzimas metanognicas y est adems presente en las enzimas hidrogenasa y CO deshidrogenasa. Estos organismos tambin requieren de hierro y cobalto para su
crecimiento (Carrillo, 2003). Existen algunas diferencias claras en las fases de acidognesis
y metanognesis que se resumen en la Tabla 2.3; la principal resulta en el tipo de
metabolitos producidos donde en la fase acidognica son los cidos orgnicos muy tiles
para las plantas, mismos que en la fase metanognica son consumidos.
Tabla 2.3.
Fase metanognica
Bacterias anaerbicas estrictas
Reproduccin lenta (baja tasa reproductiva)
Muy sensibles a cambios de acidez y
temperatura
Principales productos finales, metano y
dixido de carbono
2.4
2.4.1
pH
En digestores operados con estircol bovino, los valores ptimos de operacin oscilan entre
6.7 y 7.5 con lmites de 6.5 a 8.0 (Carrillo, 2003).
El proceso de digestin anaerbica produce biogs a un pH entre 6.5 y 7.5, un medio
prcticamente neutro. El pH mantiene ese rango solo si el digestor est funcionando
correctamente. Si el pH se torna muy cido la accin de las bacterias metanognicas se
inhibe aumentando la proporcin de gas carbnico en el biogas. Las causas por las cuales
se puede acidificar la fase lquida contenida dentro del biodigestor son: a) un cambio
excesivo de la carga; b) el permanecer por largo tiempo sin recibir carga; c) la presencia de
11
Figura 2.2 Evolucin del pH en el interior y en el efluente de un biodigestor que trabaja con
excretas de cerdo destinado para la produccin de biogs (Romero y Simanca, 2005). Se
observa tanto en el caldo (entrada) como el efluente (salida) inician el proceso con un pH
cercano a 7, en las semanas 8 y 9 el pH baja entre 6 a 5.5, en adelante el pH sube y se
mantiene alto en el caldo y el efluente.
Ito (2006), evaluando la calidad de diferentes fertilizantes orgnicos fermentados (FOF)
realizados utilizando como ingredientes principales estircol, melaza y suero de leche en
12
Tabla 2.4.
Relacin C/N
15 das
4,27
3,58
3,83
3,69
3,88
3,56
3,7
3,62
4,08
3,58
3,79
3,64
3,77
30 das
4,15
3,5
3,92
3,52
3,95
3,49
3,69
3,61
3,99
3,54
3,72
3,59
3,72
45 das
4,07
3,56
4,02
3,47
4,02
3,55
3,61
3,62
4,3
3,57
3,68
3,61
3,76
Promedio
4,16
3,55
3,92
3,56
3,95
3,53
3,67
3,62
4,12
3,56
3,73
3,61
3,75
13
La relacin ptima de 30:1, cuando la relacin es muy estrecha (10:1) hay prdidas de
nitrgeno asimilable, lo cual reduce la calidad del material digerido. Si la relacin es muy
amplia (40:1) se inhibe el crecimiento debido a la falta de nitrgeno (Soria et. al., 2001).
El nitrgeno es utilizado para la multiplicacin bacteriana y como catalizador en el proceso
de produccin de biogs. Si su nivel es alto el proceso se retarda por el exceso de amoniaco
y por la alcalinizacin de la fase lquida, y puede llegar a detenerse (Botero y Preston, 1987).
Para el crecimiento y sobrevivencia de varios grupos de microorganismos son necesarios
algunos macro y micro nutrientes. Los macronutrientes necesarios son el carbono, fsforo y
azufre. La necesidad de nutrientes es baja debido a que la generacin de biomasa es baja.
El ratio de C:N:P:S es de 600:15:5:1 suele ser suficiente en la mayora de casos (Weiland,
2009).
2.4.3
Otros factores
14
agrcola con la que pueden reducir o sustituir los abonos qumicos de alta solubilidad,
permitiendo al productor disminuir su dependencia de insumos externos (Pacheco, 2006).
En el Ecuador existen varias experiencias exitosas poco documentadas sobre el uso de
fermentados anaerbicos lquidos conocidos como Bioles en diversos cultivos como banano,
cacao, arroz. Los resultados alcanzados son exitosos a criterio de los productores que los
utilizan y se evidencian en mejor tolerancia al ataque de plagas y enfermedades e
incrementos de rendimiento. No se conocen de experiencias documentadas de la aplicacin
de Bioles en cultivos de arroz y maz, donde su uso puede beneficiar significativamente a los
agricultores. A continuacin destacamos algunas experiencias exitosas documentadas en
diversos cultivos.
Los biofermentos pueden jugar un papel sumamente importante, disminuyendo la incidencia
de plagas y enfermedades en los cultivos; al colonizar las superficies de las plantas, los
microorganismos presentes en este tipo de abonos fermentados presentan relaciones
antagnicas y de competencia con diferentes microorganismos fitopatgenos, colaborando
de esta forma en la prevencin y combate de enfermedades en las plantas (Pacheco, 2006).
Uno de los biofermentos ms utilizados y evaluados es el EM. En la Universidad Earth,
como parte del manejo integrado de la Sigatoka negra en el cultivo de banano, luego de
varias experiencias se concluy que la aplicacin de la tecnologa EM logr consolidar, en el
rea tratada una reduccin de la carga qumica del fungicida Mancozeb de un 39% y del
aceite mineral en un 15.7% (Figura 2.3). Lo anterior mediante la aplicacin de 13 ciclos de
EM dentro del programa de control de la enfermedad que incluy 48 ciclos de aplicacin en
la Finca Agrocomercial Earth, Costa Rica, durante los aos 2007 y 2008 (Earth, 2009). Se
resalta que el ndice de infeccin del programa comercial es muy similar y a veces superior
al que genera el uso de EM durante un ao entero de evaluaciones y frente a pocas con
altos niveles de precipitaciones.
15
Figura 2.3.
Convencional
Promedio
Convencional vs.
Comparacin
Orgnico vs.
vs LCV (p)
LCV (p)
Convencional
0,63
2.50,2
0,58
Valores
0,93 n.s
0,30,1
0,19
0,20,0
K
Ca
4,50,1
0,70,1
0,03*
0,92
4,90,4
0,70,1
constantes
0,1
0,84
0,46 n.s
0,46 n.s
0,78 n.s
16
Mg
0,40,0
S
0,20,1
Micronutrientes ppm
Cu
10,11,1
Fe
123,25,0
Zn
20,73,8
B
28,85,0
Mn
141,825,7
0,18
0,36
0,40,0
0,20,0
0,05
0,75
0,45 n.s
0,45 n.s
0,19
0,03*
0,83
0,18
0,95
14,24,4
145,256,7
16,52,8
25,90,8
106,57,6
0,21
0,21
0,92
0,05*
0,99
0,51 n.s
0,76 n.s
0,47 n.s
0,66 n.s
0,39 n.s
2.6
comnmente utilizado por suero de leche en dosis de 160 a 180 litros por biodigestor de 200
litros, al resultante le denomin lactofermento. Adicionalmente los lactofermentos se
enriquecieron con roca fosfrica y sulfato de manganeso (lactofermento Mn y P); carbonato
de calcio y roca fosfrica (lactofermento Ca y P) y sulfato de magnesio y roca fosfrica
17
Tabla 2.6.
biofermentos
N-NH4 (mg/l)
N-NO3 (mg/l)
Estircol
litros
Melaza
Suero
15
30
45
15
30
45
(g)
0
0
0
0
200
200
200
200
550
(ml)
40
40
250
250
40
40
250
250
40
(ml)
0
1500
0
1500
0
1500
0
1500
0
das
3,98
84,35
55,50
28,65
5,28
29,95
10,85
94,80
15,62
das
3,89
48,40
11,15
67,30
6,37
89,80
10,38
66,10
13,59
das
2,68
10,36
6,85
9,48
3,77
13,50
7,47
41,96
6,81
das
0,74
0,64
3,40
2,98
4,16
2,48
3,74
2,03
7,79
das
0,19
0,01
6,80
2,90
5,32
3,03
7,91
3,35
9,65
das
0,46
0,40
0,48
0,41
0,55
0,23
3,30
3,08
6,06
18
550
550
40
250
1500
0
550
250
1500
Promedios
Tabla 2.7.
99,75
20,15
177,8
71,35
13,10
143,0
23,97
14,08
3,54
12,30
5,29
13,15
2,60
11,36
1
52,22
5
45,37
10,19
12,59
6,09
4,16
7,25
5,40
8,49
3,12
Identificacin
Lactofermento Mn y
P
Lactofermento Ca y
P
Lactofermento Mg y
P
Tabla 2.8.
Ca
Mg
%
Fe
Cu
Zn
Mn
mg/Kg
0,04
20
719
0,02
19
0,04
20
Componente
Slidos Totales
Materia orgnica
Fibra
Nitrgeno
Fsforo
Potasio
Calcio
Azufre
cido indolactico
Giberelinas
Purinas
Tiamina (B1)
Riboflavina (B2)
Piridoxina (B6)
cido nicotnico
cido flico
Cistena
Triptofano
2.7
Unidad
%
%
%
%
%
%
%
%
ug/g
ug/g
ug/g
ug/g
ug/g
ug/g
ug/g
ug/g
ug/g
ug/g
estircol (BE)
5,6
38
20
1,6
0,2
1,5
0,2
0,2
12
9,7
9,3
187,5
83,3
33,1
10,8
14,3
92
56,6
(BEA)
9,9
41,1
26,2
2,7
0,3
2,1
0,4
0,2
67,1
20,5
24,4
302,6
210,1
110,7
35,8
45,6
27,4
127,1
19
Figura 2.4. Dinmica poblacional de los microorganismos en la hojarasca del bosque que se
usa para preparar biofermentos en Alfaro Ruiz, Costa Rica (Samaniego, 2006). Los hongos
y actionomicetes analizados no variaron mayormente su poblacin, las bacterias mostraron
cambios poblacionales ms evidentes.
20
21
Para el caso de bacterias los bacilos Gram + se encuentran en todas las muestras
analizadas, ya sea aislado de forma aerbica y anaerbica. Este grupo de bacterias se
caracteriza por encontrarse en grandes cantidades a nivel del suelo y por ser usados en el
control biolgico como promotoras de crecimiento. Se detecta tambin la presencia de la
bacteria Chryseobacterium indologenes la cual es comn en el suelo y se la ha encontrado
en caldos microbianos preparados a partir de la rizsfera de varios cultivos (Samaniego,
2006).
Microorganismos
Penicillium spp.
Trichoderma spp.
Fusarium spp.
Cladosporium spp.
Aspergillus spp.
Phoma Spp.
Mortierella spp.
Humicola spp.
No identificado
Hojarasca
MM slido
MM lquido
Biofermento
Unidades formadoras de colonias (UFC)
47
216
80
12
17
0
0
1
3
0
0
16
2
126
3
0
18
0
0
0
17
0
0
1
36
0
0
0
3
0
5
0
18
0
1
6
Los biofermentos realizados sin utilizar estircol en cuyo reemplazo se agrega suero de
leche, denominados lactofermentos, muestran tambin un apreciable contenido de
microorganismos comparado con el biofermento testigo realizado utilizando estircol (forma
tradicional). Destacan los bajos niveles de coliformes y el muy superior conteo de
Lactobacillus en los lactofermentos (Tabla 2.11). Este microorganismo est asociado a la
inhibicin de patgenos como Erwinia spp, debido posiblemente al efecto de la nisina que es
un antibitico producido por algunas bacterias lcticas, Fusarium spp y Rhizoctonia spp
(Obregn, 2000 y Quiroz et al, 2004 citados por Pacheco, 2006).
22
2.8
Bacteria
Shyngomonas paucimobilis
Chryseobacterium indolegenes
Bacilo Gram+
Bacilo Gram+
Bacilo Gram+
Bacilo Gram+ esporulado
Chryseobacterium indolegenes
Bacilo Gram+
Bacilo Gram+
Bacilo Gram+
Chryseobacterium indolegenes
Chryseobacterium indolegenes
Chryseomonas luteola
Bacilo Gram+
Pasteurella pneumotropica
Comamonas testosteroni
Bacilo Gram+
Bacilo Gram+
Bacilo Gram+
Aislamiento
Aerbico
Anaerbico
Anaerbico
Aerbico
Anaerbico
Anaerbico
Anaerbico
Aerbico
Anaerbico
Anaerbico
Aerbico
Anaerbico
Anaerbico
Aerbico
Anaerbico
Aerbico
Aerbico
Anaerbico
Aerbico
23
Tabla 2.11.
Frmula
Lactofermento
Mn y P
Lactofermento
Ca y P
Lactofermento
Mg y P
Biofermento
testigo
Bacteria
Bacillus
Lactobacillus
s UFC/g
UFC/g
UFC/g
Hongo
s
UFC/g
Coliforme
s totales
NMP/100
ml
Coliformes
Fecales
NMP/100 ml
5,2x107
1,0x106
1,1x108
3,0x105
13
<2
2,8x106
1,5x107
4,8x108
< 103
13
<2
8,5x106
1,5x107
4,8x108
< 103
<2
2,0x104
1,0x104
3,0x105
3,0x105
<2
Bacterias
Bacillus
Lactobacillus
Hongos
UFC/g
UFC/g
UFC/g
UFC/g
2,0 x 10
1,0 x 10
3,0 x 10
3,0 x 10
Coliformes
Coliformes
totales
Fecales
NMP/100 ml
5
NMP/100 ml
<2
24
de coliformes fecales es menor a dos. Estas cifras reflejen la inocuidad en abonos bien
manejados- que utilicen excretas de animales rumiantes (Pacheco, 2006).
El ptimo pH para el desarrollo de las bacterias patognicas del gnero Salmonella spp., es
de 6,2 a 7,2. Para prevenir el desarrollo de dicha bacteria patognica y la recontaminacin,
el material digerido resultante debera ser esterilizado (Voca, et. al, 2005).
Una opcin a la esterilizacin, es mantener el pH del tanque lo suficientemente cido para
inhibir el desarrollo de Salmonella spp; esto ocasionara una reduccin en la emisin de
metano, y la consiguiente disminucin por parte de las metanognicas de los subproductos
generados en la hidrlisis, fermentacin y acidognesis (cidos orgnicos, azcares,
aminocidos, H2, etc), mismos que quedaran en el medio y resultaran muy beneficiosos al
aplicarlos en plantas.
Lo anterior coincide con lo expuesto por Uribe (2003), donde menciona que es probable que
el pH bajo (3,83 en promedio) y las condiciones de anaerobiosis hayan sido los
responsables de la ausencia de coliformes en los fertilizantes orgnicos fermentados
analizados en varios de sus trabajos.
Para la determinacin de la calidad de los biofertilizantes a nivel de campo se consideran
parmetros cualitativos como el olor, mismo que debe ser agradable de fermentacin
alcohlica. Se considera como otro parmetro positivo la formacin sobre la superficie de los
tanques de una nata blanca, misma que tomar ms fuertemente esa tonalidad cuando
mayor sea el tiempo de proceso. El color del biofermentos debe ser mbar brillante y
traslcido y en el fondo se debe encontrar algn sedimento. Los biofertilizantes sern de
mala calidad cuando tengan un olor putrefacto y la espuma que se forma en la superficie
tienda hacia un color verde azulado u obscuro, entonces es mejor descartarlo (Pinheiro,
2000).
25
CAPTULO 3.
3.1
MATERIALES Y MTODOS
26
Tabla 3.1.
Material
Estircol bovino
Melaza
Suero de leche
IB
Hojarasca de bosque
Contenido ruminal
Estircol bovino
C (%)
8.468
40.767
0,350
2,011
3,973
10,713
8.468
N (%)
0.360
0.245
0,409
0,012
0,022
0,160
0.360
C/N
25.5
166.2
0,85
165.3
183.9
66.8
25.5
Tabla 3.2. Origen de los inculos utilizados en la presente investigacin y cantidad utilizada
de los mismos por digestor de 200 litros.
Inculo
Hojarasca de bosque
Contenido ruminal
Inoculante para biol (IB)
Estircol bovino
Origen
Bosquete cercano, Daule, provincia del
Cantidad
Guayas
Camal Municipal de Daule, provincia del
Guayas
Laboratorio Agrodiagnostic, Quito,
Ecuador
Hda. Jess Mara, rea de produccin
lechera, Daule, provincia del Guayas
4 Kilos
4 Kilos
2 litros
40 kilos
En el presente estudio se evaluaron dos relaciones C/N y cuatro inoculantes. Las relaciones
C/N a probar fueron 25/1 y 30/1; los inculos son detallados en la Tabla 3.2.
De la combinacin de los diferentes inculos a utilizar con las dos relaciones C/N previstas,
se obtuvieron las ocho diferentes frmulas en estudio a nivel de biodigestores mismas que
se describen en la Tabla 3.3, cada una de las frmulas se la elabor con tres repeticiones.
C/N
25:1
25:1
Inculo
Hojarasca de bosque
Contenido Ruminal
27
3
4
5
6
7
8
25:1
25:1
30:1
30:1
30:1
30:1
IB
Estircol bovino
Hojarasca de bosque
Contenido Ruminal
IB
Estircol bovino
Para el establecimiento de la relacin C/N se utiliz una metodologa sencilla a fin de que
sea fcilmente transferida a los productores en un futuro. Esta consisti en calcular la masa
en kilos de carbono y nitrgeno de cada uno de los ingredientes utilizando para ello los
anlisis mencionados en la Tabla 3.1 y aplicando la siguiente frmula:
C/N=
Donde:
EB: cantidad de estircol bovino expresado en Kilos
CEB: contenido de carbono del estircol bovino en porcentaje
NEB: contenido de nitrgeno del estircol bovino en porcentaje
M: cantidad de melaza expresado en Kilos
CM: contenido de carbono de la melaza en porcentaje
NM: contenido de nitrgeno de la melaza en porcentaje
SL: cantidad de suero de leche expresado en litros
CSL: contenido de carbono del suero de leche en porcentaje
NSL: contenido de nitrgeno del suero de leche en porcentaje
I: cantidad de inoculante utilizado expresado en Kilos para slidos y litros para lquidos
CI: contenido de carbono del inoculante en porcentaje
NI: contenido de nitrgeno del inoculante en porcentaje
U: cantidad de rea en gramos (si corresponde utilizar)
CU: contenido de carbono de la rea en porcentaje
NU: contenido de nitrgeno de la rea en porcentaje
3.2
28
Una vez tomadas las muestras fueron enviadas inmediatamente al laboratorio respectivo.
Los laboratorios encargados de realizar los anlisis fueron los siguientes: Anlisis
microbiolgicos: Agrodiagnostic (Quito, provincia de Pichincha) y anlisis qumico Dr. Jorge
Fuentes (Guayaquil, provincia de Guayas). Se promediaron los resultados de cada
repeticin obteniendo un solo dato por tratamiento (o frmula) y se analiz su desviacin
estndar. Todos los resultados del anlisis nutricional se correlacionaron estadsticamente
con el rendimiento en campo tanto de arroz como de maz obtenidos por la aplicacin de
cada frmula del biofermento.
Para el caso de los resultados de los anlisis microbiolgicos, se report solamente la
presencia de algunos grupos de microorganismos en cada uno de los biofermentos
evaluados. Esto debido a lo dinmico de las poblaciones de microorganismos presentes en
los biofermentos donde puede resultar impreciso cuantificarlos.
3.3
29
13% de humedad. La unidad experimental estuvo compuesta por seis hileras de cinco
metros separadas a 0.8 m entre s. La separacin entre plantas fue de 0.20 m.
La fertilizacin qumica se mantuvo intacta en ambos cultivos con niveles de 140-46-90
Kg/Ha de NPK en arroz y 120-46-90 Kg/Ha de NPK en maz.
A nivel de campo se utiliz un diseo de Bloques Completos al Azar con tres repeticiones,
que junto con el testigo sin aplicacin generaron 25 tratamientos para cada cultivo.
Los datos de rendimiento de ambos cultivos luego de transformados
(transformacin
arcoseno) fueron analizados utilizando anlisis de varianza con la ayuda del programa
estadstico Infostat. Para la separacin de medias se utiliz la prueba de Duncan al 5%. Se
analizaron las interacciones entre los factores: fuente de inculo, relacin C/N y dosis de
aplicacin.
Adicionalmente se hicieron anlisis de correlaciones simples y mltiples entre el rendimiento
y los resultados de los anlisis qumicos de los biofermentos en cada cultivo.
CAPTULO 4.
4.1
RESULTADOS Y DISCUSIN
30
En funcin a los anlisis realizados a cada uno de los componentes de la frmula base as
como de los inoculantes y con la aplicacin de la frmula para el clculo de la relacin C/N
mencionada en la metodologa, se determin las cantidades precisas en las que se debe
utilizar cada ingrediente para alcanzar la relacin C/N motivo del estudio.
Tabla 4.1.
Unidad
Estircol bovino
Melaza
Suero de leche
rea
IB
Rizsfera de
Kilo
Kilo
litro
gramo
litro
bosque
Contenido
Kilo
Kilo
ruminal
Estircol bovino
Kilo
Relacin C/N calculada
T1
40
2
4
57
T2
40
2
4
31
T3
40
2
4
10
2
200 litros
T4
T5
40
40
2
3,9
4
4
7
0
T6
40
3,6
4
0
T7
40
4,2
4
0
2
T8
40
4,3
4
0
4
4
*
*
25,03 25,01 25,03 25,02 30,13 30,14 30,13 30,12
experimento al mnimo dicha variacin, se asegur la misma alimentacin del ganado, igual
momento de recoleccin e idnticas labores de manejo del hato.
Los ingredientes utilizados en esta investigacin son similares a los recomendados por
varios autores. Ito (2006), encontr que la mayora de agricultores utilizan estircol fresco en
la elaboracin de abonos fermentados, la utilizacin de estircol es por encima de 30 Kg por
tanque de 200 litros. El uso de melaza como fuente de energa para los microorganismos
que realizan el proceso es generalizado, por lo general en elevadas cantidades, en
31
promedio de nueve litros por tanque de 200 litros. El suero de leche funciona como un
controlador de pH, es as que se encontr correlacin negativa significativa entre suero y
pH, adems correlaciones significativas positivas entre suero y CE; suero y P; y suero y CO.
Su uso flucta entre 10 a 180 litros por tanque de 200 litros. El agua se utiliza hasta
completar el 90% de la capacidad del tanque.
4.2
Tabla 4.2. Resultados de los anlisis qumicos practicados a cada frmula estudiada y su
desviacin estndar (Laboratorio Dr. Jorge Fuentes, Guayaquil, Ecuador).
Frmu
las
T1
T2
CE
CO
pH
mmhos/c
7,20
m
6,83
2,32
4,01
0,18
1,39
5,93
0,55
6,53
0,40
1,96
0,69
3,38
0,03
0,15
(%)
MO (%)
(%)
(%)
K (%)
C/N
0,05
0,11
13,15
0,02
0,05
0,02
0,11
0,53
13,10
32
T3
T4
T5
T6
T7
T8
0,59
6,53
0,31
6,20
0,22
1,82
0,38
3,14
0,02
0,14
0,01
0,05
0,01
0,12
0,02
12,80
0,53
5,60
0,13
6,20
0,23
1,88
0,01
3,25
0,01
0,14
0,01
0,05
0,35
0,12
0,01
13,05
0,17
5,63
0,17
5,87
0,16
1,93
0,27
3,33
0,01
0,15
0,01
0,05
0,00
0,12
0,03
13,06
0,06
6,73
0,15
5,57
0,39
1,78
0,67
3,07
0,03
0,14
0,01
0,05
0,01
0,13
0,04
13,06
1,00
6,20
1,01
5,90
0,23
1,95
0,39
3,37
0,02
0,15
0,01
0,05
0,01
0,13
0,02
13,05
1,04
6,27
0,36
5,47
012
1,67
0,20
2,88
0,01
0,15
0,02
0,05
0,02
0,12
0,01
11,06
1,15
0,21
0,31
0,55
0,02
0,01
0,02
3,10
Ito (2006), obtuvo conductividades elctricas en biofermentos de entre 10,1 a 25,6 mS/cm (o
mmhos/cm) pero con la adicin de rocas molidas y sulfatos en las frmulas. En el mismo
estudio, se encontr una significativa correlacin positiva entre la CE y el uso de suero de
leche, en ese caso se utilizaron cantidades de suero de leche de hasta 180 litros por
digestor de 200 litros
Los niveles de P y K son muy similares en todas las frmulas; el nitrgeno vara entre 0,14 y
0,18%. En las diferentes investigaciones consultadas se detectan variaciones importantes
en el contenido de N, P y K ya que estos dependen mucho de la cantidad, tipo y origen de
las materias primas (Ito, 2006; Balden 2009; Gomero 2005).
El contenido de CO fue en promedio de 1,92%, apenas inferior al encontrado por Ito, 2006,
en varios biofermentos que fue de 1,93%.
La relacin C/N final de los biofermentos es muy similar excepto en la frmula 8 donde baja
hasta 11,06. La reduccin en la relacin C/N desde la inicial (que era de 25 y 30 segn la
frmula) hasta la final que esta entre 11 y 13, demuestra el nivel de consumo de carbono y
el incremento de biomasa por parte de los microorganismos responsables del proceso. Los
resultados completos del anlisis qumico se detalla en el anexo 2.
A cada una de las unidades experimentales a nivel de biodigestores se les practicaron
sendos anlisis microbiolgicos. La presencia de algunos microorganismos fue recurrente
en varias de las unidades experimentales como se demuestra en la Tabla 4.3.
33
Tabla 4.3.
Biodigestores
Biodigestores con
encontrados
Bacillus spp.
evaluados
24
presencia positiva
24
100%
Lactobacillus. spp.
24
17
71%
Sacharomyces spp
24
18
75%
Pseudomonas spp
24
13
54%
Trichoderma spp.
24
11
46%
Penicillium spp.
24
10
42%
Aspergillus spp.
24
10
42%
En todas las muestras analizadas se encontr bacterias del gnero Bacillus spp., estas
bacterias estn fuertemente asociadas a la descomposicin de la materia orgnica tanto en
medios aerbicos como anaerbicos (Jinn-Chyi y Hsi-Hua, 2001; Samaniego, 2006). Las
etapas iniciales del proceso son en donde se reporta mayor actividad de Bacillus spp., sin
embargo, en el presente estudio lo estamos reportando hasta el final del proceso.
Lactobacillus spp., el cual es constantemente mencionado como componente importante del
proceso de biofermentacin se reporta en el 71% de las muestras. Ito, 2006, en estudios
que realiz con biofertilizantes lquidos, encontr Lactobacillus en todos los preparados
estudiados y en el 58,3% se contabiliz ms de 30000 UFC/ml. Tampoco encontr
correlaciones estadsticamente significativas entre suero de leche o leche cruda y presencia
de Lactobacillus.
Por la actividad de Lactobacillus puede darse una disminucin de pH debido a la produccin
de cidos como el cido lctico y los cidos grasos de cadenas cortas. Debido a ello puede
pensarse que Lactobaccillus juega un papel importante en el control de pH (Ishikawa, et al.,
2002, citado por Ito, 2006).
En el 75% de las muestras se hallan levaduras del gnero Sacharomyces. Dichas levaduras
son frecuentemente encontradas en procesos de digestin anaerbica y juegan un papel
preponderante durante la etapa de hidrlisis y fermentacin (Samaniego, 2006). Las
bacterias del gnero Pseudomonas se encuentran en el 54% de las muestras.
34
Dentro del grupo de los hongos se encontr Trichoderma en el 46% de las muestras,
Penicillium en el 42% y Aspergillus en el 42%. Se reporta frecuentemente la presencia de
estos hongos en los biofermentos pese a que su funcin especfica en el proceso no est
completamente definida (Samaniego, 2006).
4.3
Tabla 4.4. Rendimiento alcanzado con cada una de las frmulas y dosis de biofertilizantes
en el cultivo de arroz y su coeficiente de variacin (CV).
Trat.
Inculo
C/N
1
2
3
4
5
6
7
Suelo de bosque
Suelo de bosque
Suelo de bosque
25
25
25
25
25
25
25
Rmen
Rmen
Rmen
ME
Dosis
(l/Ha/ciclo)
60
90
120
60
90
120
60
CV
0,14
1,38
1,03
0,28
1,44
0,58
0,38
2,6%
23,9%
18,7%
4,6%
24,3%
9,2%
6,0%
35
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
0
ME
ME
Estircol
Estircol
Estircol
Suelo de
25
25
25
25
25
90
120
60
90
120
5,19
5,36
6,21
7,33
5,81
6,10
4,98
7,15
6,29
7,22
6,19
7,11
6,59
6,70
6,33
5,82
5,82
6,65
6,77
6,45
0,55
1,14
0,47
0,52
0,71
9,5%
19,5%
7,1%
7,7%
11,1%
30
60
7,30
5,66
6,64
6,53
0,82
12,6%
30
90
6,36
7,24
6,05
6,55
0,62
9,4%
30
120
6,09
bosque
Rmen
30
60
5,86
Rmen
30
90
5,94
Rmen
30
120
6,44
ME
30
60
6,53
ME
30
90
5,42
ME
30
120
6,19
Estircol
30
60
6,73
Estircol
30
90
6,68
Estircol
30
120
5,78
Sin aplicacin
6,29
Promedio
6,16
Anlisis de varianza
6,98
6,66
6,58
0,45
6,9%
6,14
5,75
6,69
6,70
6,39
6,20
6,86
4,39
5,57
5,29
6,27
6,77
6,74
6,28
5,33
6,63
6,76
6,49
6,54
6,46
6,34
6,11
6,25
6,14
6,47
6,19
6,15
6,38
6,69
5,87
5,94
5,97
6,18
0,47
0,52
0,20
0,75
0,64
0,33
0,19
1,28
0,46
0,59
0,70
7,5%
8,5%
3,2%
12,1%
10,5%
5,1%
2,8%
21,8%
7,8%
9,8%
11,3%
n.s
bosque
Suelo de
bosque
Suelo de
36
Los rendimientos alcanzados en ambos cultivos superan a los promedios nacionales que
para el caso de arroz es de 4,0 TN/Ha y maz de 2,67 TN/Ha (Inec, 2009). T11 que es el
tratamiento de mejor rendimiento sobrepasa al promedio nacional de arroz en 2,77 TN/Ha y
en maz con 3.83 TN/Ha.
Tabla 4.5. Rendimiento alcanzado con cada una de las frmulas y dosis de biofertilizantes
en el cultivo de maz y su coeficiente de variacin (CV).
Trat.
Inculo
C/N
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
Suelo de bosque
Suelo de bosque
Suelo de bosque
25
25
25
25
25
25
25
25
25
25
25
25
45
68
90
45
68
90
45
68
90
45
68
90
30
45
6,64
6,19
5,40
6,08
0,63
10,3%
30
68
6,25
5,90
5,02
5,72
0,63
11,1%
13
14
Rmen
Rmen
Rmen
ME
ME
ME
Estircol
Estircol
Estircol
Suelo de
bosque
Suelo de
bosque
Dosis
(l/Ha/ciclo)
CV
0,96
0,77
0,31
0,34
0,74
1,41
0,29
0,87
0,21
0,59
0,80
0,35
22,4%
14,0%
5,2%
5,8%
13,3%
25,2%
5,1%
13,7%
3,2%
10,6%
12,3%
5,6%
37
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
0
Suelo de
30
90
6,82
bosque
Rmen
30
45
6,30
Rmen
30
68
6,13
Rmen
30
90
4,77
ME
30
45
4,08
ME
30
68
5,02
ME
30
90
5,98
Estircol
30
45
5,73
Estircol
30
68
5,47
Estircol
30
90
4,93
Sin aplicacin
4,79
Promedio
5,75
Anlisis de varianza
4,85
5,39
5,69
1,02
17,9%
4,75
5,76
6,21
6,67
5,56
5,97
4,05
5,38
5,92
5,25
5,58
4,38
6,88
5,87
4,93
5,17
6,63
5,63
5,21
5,12
5,00
5,65
5,14
6,26
5,62
5,23
5,25
6,20
5,14
5,35
5,33
5,01
5,66
1,02
0,57
0,76
1,32
0,28
0,38
0,94
0,13
0,53
0,23
0,79
19,8%
9,2%
13,5%
25,4%
5,4%
6,1%
18,4%
2,5%
9,9%
4,6%
13,9%
n.s
Tabla 4.6. Resumen de los rendimientos alcanzados a nivel de campo con cada uno de los
parmetros estudiados y su diferencia numrica respecto al testigo en toneladas por
hectrea.
Factores en estudio
Hojarasca de bosque
Contenido ruminal
Inoculante para Biol
Estircol bovino
Testigo sin aplicacin
25
30
Testigo sin aplicacin
Baja
Media
Alta
Testigo sin aplicacin
Con biofermento
Sin aplicacin
Arroz
Rendimiento
Diferencia
Tn/Ha
Tn/Ha
Fuentes de inculo
6,08
0,11
6,17
0,20
6,10
0,13
6,40
0,42
5,97
0,00
Relacin C/N
6,07
0,09
6,31
0,34
5,97
0,00
Dosis de aplicacin*
6,26
0,29
6,13
0,15
6,18
0,20
5,97
0,00
Aplicacin del biofermento
6,19
0,22
5,97
0,00
Maz
Rendimiento
Diferencia
Tn/Ha
Tn/Ha
5,54
5,68
5,84
5,69
5,01
0,53
0,67
0,83
0,68
0,00
5,79
5,58
5,01
0,78
0,57
0,00
5,38
5,81
5,87
5,01
0,37
0,80
0,86
0,00
5,69
5,01
0,68
0,00
* Las dosis baja media y alta en arroz corresponden a 60, 90 y 120 litros/Ha/ciclo respectivamente; en
maz son 45, 68 y 90 litros/Ha/ciclo para baja, media y alta.
4.3.1
38
Es de gran inters el estudio de las interacciones entre los factores estudiados como lo son
la fuente de inculo, la relacin C/N y la dosis de aplicacin en campo, dichos anlisis se
detallan en la Tabla 4.7.
En el caso de arroz no se encontraron diferencias entre los inculos utilizados, relaciones
C/N iniciales probadas, dosis de aplicacin a nivel de campo, ni en las interacciones entre
los factores (Tabla 4.7). En el caso de maz, hubo interaccin positiva solo entre fuente de
inculo y relacin C/N (P=0,03). En esta misma interaccin pero en el caso de arroz, el valor
de P estuvo muy cercano al nivel de significancia (P=0,05). Para cotejar los factores de
dicha interaccin tanto en arroz como en maz se utiliz la prueba Duncan al 5% (Tabla 4.8).
Tabla 4.7. Anlisis de los factores en estudio y sus interacciones en el cultivo de arroz y
maz.
Factores e interacciones
Fuente de inculo
Relacin C/N
Dosis de aplicacin en campo
Inculo x Relacin C/N
Inculo x Dosis de aplicacin
C/N x Dosis de aplicacin
Fuente inculo x Relacin C/N x Dosis
P (arroz)
0,55
0,18
0,84
0,05
0,90
0,83
0,95
P (maz)
0,68
0,23
0,06
0,03
0,85
0,60
0,16
En el caso de arroz, las mejores frmulas resultan del uso de estircol bovino en relacin
C/N de 25 y rizsfera de bosque con relacin C/N de 30 (Tabla 4.8). En el caso de maz,
donde la interaccin fue ms fuerte, se detectaron diferencias estadsticas en el rendimiento
con el inculo IB en relacin C/N de 25 y estircol bovino con relacin C/N de 25 (Tabla 4.9).
En esta investigacin estamos demostrando la gran importancia que tiene el escoger
adecuadamente la fuente de inculo utilizada y la relacin C/N inicial del proceso.
En ambos cultivos resulta significativa la interaccin del inculo estircol bovino y la relacin
C/N de 25, en las aplicaciones a nivel de campo, los tratamientos que tienen dicho inculo e
interaccin generaron los mayores rendimientos tanto en arroz como en maz. Por otro lado
la interaccin del inculo hojarasca de bosque y relacin C/N de 25 resulta ser el inferior a
las dems en ambos cultivos.
En maz, la dosis de aplicacin (P=0,06) produjo diferencias luego mostradas por el test
Duncan al 5% (Tabla 4.10), donde la dosis de 90 litros/Ha/ciclo resulta estadsticamente
39
Tabla 4.8. Test Duncan al 5% para la interaccin fuente de inculo x relacin C/N en el
cultivo de arroz.
Inculo
Estircol bovino
Hojarasca de bosque
Contenido ruminal
Inoculante para Biol (IB)
Estircol bovino
Contenido ruminal
Inoculante para Biol (IB)
Hojarasca de bosque
C/N
25
30
30
30
30
25
25
25
Medias
6,63
6,55
6,29
6,24
6,17
6,05
5,97
5,61
Rangos
A
A
A
A
A
A
A
B
B
B
B
B
B
Tabla 4.9. Test Duncan al 5% para la interaccin fuente de inculo x relacin C/N en el
cultivo de maz.
Inculo
Inoculante para Biol (IB)
Estircol bovino
Hojarasca de bosque
Contenido ruminal
Contenido ruminal
Inoculante para Biol (IB)
Estircol bovino
Hojarasca de bosque
C/N
25
25
30
25
30
30
30
25
Medias
6,13
6,10
5,83
5,68
5,67
5,56
5,27
5,25
Rangos
A
A
A
A
A
A
B
B
B
B
B
B
Tabla 4.10. Test Duncan al 5% para las dosis de aplicacin de los biofermentos en el cultivo
de maz
Dosis
90 litros/Ha/ciclo
68 litros/Ha/ciclo
45 litros/Ha/ciclo
Medias
5,87
5,81
5,38
4.3.2
Rangos
A
A
B
B
40
Tratamos de establecer correlaciones entre los resultados de los anlisis qumicos de cada
una de las frmulas de biofermentos y el rendimiento alcanzado en cada cultivo, dichos
resultados se mencionan en la Tabla 4.11.
Tabla 4.11. Anlisis de correlacin entre los principales resultados del anlisis qumico de
los biofermentos versus el rendimiento en campo de los cultivos de arroz y maz.
Parmetros
Arroz
Coeficiente de
pH
CE mmhos/cm
CO %
N%
P (%)
K%
C/N
correlacin
-0,820
-0,570
-0,550
-0,690
0,000
0,510
0,010
P
0,010
0,140
0,160
0,060
1,000
0,200
0,980
Maz
Coeficiente de
correlacin
-0,510
0,030
-0,300
-0,710
0,000
0,170
0,290
P
0,190
0,950
0,480
0,050
1,000
0,690
0,430
41
Figura 4.3 y 4.4 Anlisis de correlacin entre el contenido de nitrgeno (%) de las diferentes
frmulas de biofermentos probadas y el rendimiento del cultivo de arroz (izquierda) y maz
(derecha). Similar a lo que sucedi con el pH, el contenido de nitrgeno muestra una
tendencia inversamente proporcional con el rendimiento.
Se realizaron pruebas de correlacin de todos los parmetros registrados en el anlisis
qumico de los fermentos entre s, cuyos resultados se detallan en la Tabla 4.12.
Tabla 4.12. Anlisis de correlacin entre los parmetros registrados en el anlisis qumico de
los fermentos entre s.
42
Parmetros
pH
CE*
pH
CO %**
N%
1,00
0,59
0,34
0,16
CE
0,23
1,00
0,01
0,12
CO %
0,39
0,83
1,00
0,01
N%
0,54
0,59
0,84
1,00
P (%)
0,00
0,00
0,00
0,00
K%
-0,07
-0,77
-0,54
-0,58
C/N
0,00
0,55
0,57
0,07
* CE: conductividad elctrica expresada en mmhos/cm
P%
1,00
1,00
1,00
1,00
1,00
0,00
0,00
K%
0,87
0,03
0,16
0,13
1,00
1,00
-0,04
C/N
0,99
0,16
0,14
0,86
1,00
0,93
1,00
En el anlisis de correlaciones mltiples para el caso del arroz (Figura 4.5) se evidencia
nuevamente la fuerte relacin inversamente proporcional del pH del biofermento sobre el
rendimiento, se demuestra tambin pero en menor intensidad que la anterior, la influencia
negativa del contenido de nitrgeno del biofermento sobre el rendimiento. Los de menor
influencia en el conjunto constituyen el CO (%), K (%) y la CE (mmhos/cm) en su orden.
En la figura 4.5, se reitera grficamente que las frmulas de biofermentos T4 (inculo
estircol bovino y relacin C/N de 25) y T6 (inculo contenido ruminal y relacin C/N de 30)
son las que generan mayor rendimiento en campo, esto debido a su cercana con dicha
variable en el grfico.
43
Figura 4.5. Correlaciones mltiples entre los principales resultados de los anlisis qumicos
de los biofermentos y el rendimiento en el cultivo de arroz. Se evidencia el fuerte efecto
inversamente proporcional del pH sobre el rendimiento. Las dems variables no presentan
un efecto tan pronunciado.
Para el caso del maz, el pH vuelve a ser determinante (Figura 4.6), guarda la mayor
correlacin negativa con el rendimiento. En menor escala aparece la correlacin negativa
del contenido de nitrgeno del biofermento con el rendimiento. Las variables CO (%), CE
(mmhos/cm) y K (%) guardan menor correlacin con el rendimiento.
En la figura 4.6 se comprueba que las frmulas que generan mayor rendimiento para el caso
de maz son T4 (inculo estircol bovino y relacin C/N de 25); T3 (inculo inoculante para
biol IB y relacin C/N de 25) y T5 (inculo hojarasca de bosque y relacin C/N de 30).
En las pruebas de campo realizadas en ambos cultivos, la frmula T4 (inculo estircol
bovino y relacin C/N de 25) es la que genera mayor rendimiento lo cual se aprecia
grficamente en las figuras 4.3 y 4.4. Esa misma frmula en su dosis intermedia de
aplicacin en campo (90 y 68 litros/hectrea/ciclo en arroz y maz respectivamente) produjo
los mayores rendimientos con 6.77 y 6.50 toneladas/hectrea en arroz y maz
respectivamente (tratamiento T11 en pruebas a nivel de campo) lo cual se detalla en las
tablas 4.4 y 4.5.
44
Figura 4.6. Correlaciones mltiples entre los principales resultados de los anlisis qumicos
de los biofermentos y el rendimiento en el cultivo de maz. Nuevamente se evidencia el
efecto inversamente proporcional del pH sobre el rendimiento. En menor escala le sigue el
contenido de N, CO, CE y K en su orden.
45
CAPTULO 5.
-
CONCLUSIONES
Para ejecutar un proceso de fermentacin eficaz se debe partir del anlisis y clculo
de la relacin C/N de cada uno los componentes de la frmula.
Se detect alta correlacin entre inculo y relacin C/N en ambos cultivos. Para arroz
las mejores combinaciones fueron estircol bovino en relacin C/N de 25 y rizsfera
de bosque con relacin C/N de 30. En maz, como inculo Inoculante para Biol en
relacin C/N de 25 y estircol bovino con relacin C/N de 25.
46
49
CAPTULO 6.
-
RECOMENDACIONES
Ajustar los procesos para obtener un pH final bajo de los biofermentos ya que estos
mostraron mayor respuesta sobre el rendimiento.
Poner especial atencin en el anlisis del tipo y contenido de cidos orgnicos de las
mejores frmulas de biofermentos a nivel de campo.
50
CAPTULO 7.
Aparcana, S.
2008.
BIBLIOGRAFA
Estudio sobre el valor fertilizante de los productos del proceso
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Ediciones
Tesis de grado.
Escuela
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Microbiologa Agrcola.
Facultad de
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53
Wong, M y Jimnez, E.
2005.
54
ANEXOS
Anexo 1.
Anlisis qumico del agua utilizada en la investigacin en la etapa de biodigestores.
(Laboratorio del Dr. Jorge Fuentes C.)
Anexo 2.
Anlisis qumico de cada una de las frmulas de fermentos generadas con sus respectivas
repeticiones. (Laboratorio del Dr. Jorge Fuentes C.)
Anexo 3.
Disposicin de la parcelas en campo utilizado tanto en las pruebas de arroz como de maz.
T12
T11
T22
T0
T18
T19
T24
T21
T3
T7
T2
T23
T4
T1
T15
T16 T20
T13
T9
T14
T8
T6
T10
T5
T17
T18 T12
T4
T8
T0
T16
T23
T3
T15
T20
T13
T14 T24
T5
T22
T2
T9
T1
T10
T17
T11
T7
T19
T21
T6
T1
T3
T4
T5
T6
T7
T8
T9
T10
T14
T15
T16 T17
T18
T19
T20 T21
T22
T23
T24
T0
T2
Anexo 4.
Registro fotogrfico del proceso de preparacin de los fermentos
Fotografa 2. Pesaje del estircol bovino para utilizarlo en los diferentes biodigestores segn
corresponda
Fotografa 6. Apariencia del contenido ruminal fresco utilizado como inculo en varios
tratamientos
Fotografa 8. Pesaje de la rea utilizada en algunos tratamientos para bajar la relacin C/N