Está en la página 1de 42

UNIVERSIDAD DE ORIENTE

NÚCLEO DE ANZOÁTEGUI
ESCUELA DE CIENCIAS DE LA SALUD
DEPARTAMENTO DE CIENCIAS FISIOLÓGICAS
SECCIÓN DE FARMACOLOGÍA

CAMBIOS HISTOLÓGICOS AGUDOS CAUSADOS POR EL
VENENO DE Tityus zulianus (SCORPIONES, BUTHIDAE)
EN RIÑONES DE RATONES C57BL/6

Asesores

Trabajo de Grado presentado por

Adolfo Borges-Strauss
Leonardo De Sousa

Hurtado Boada, Wilfredo José
Silva Álvarez, Leonardo José
Velásquez González, Adriana de los Ángeles

Como requisito parcial para optar al título de Médico-Cirujano

Barcelona, mayo de 2012

UNIVERSIDAD DE ORIENTE
NÚCLEO DE ANZOÁTEGUI
ESCUELA DE CIENCIAS DE LA SALUD
COMISIÓN TRABAJO DE GRADO

DECLARACIÓN JURADA
El Trabajo de Grado presentado por los Estudiantes Universitarios Hurtado Boada, Wilfredo
José C. I. № V-16.667.116, Silva Álvarez, Leonardo José C. I. № V-18.450.607 y Velásquez
González, Adriana de los Ángeles C. I. № V-16.478.207, titulado “CAMBIOS
HISTOLÓGICOS AGUDOS CAUSADOS POR EL VENENO DE Tityus zulianus
(SCORPIONES, BUTHIDAE) EN RIÑONES DE RATONES C57BL/6”, ha sido aprobado
por los miembros del Jurado Evaluador, quienes lo han encontrado correcto en su contenido y
forma de presentación; asimismo, declaran que los datos presentados son responsabilidad
exclusiva de los autores, en fe de lo cual firman:

Prof.
Miembro Principal

Prof.
Miembro Principal

Prof. Adolfo Borges-Strauss
Miembro Principal Asesor

Prof. Leonardo De Sousa
Miembro Principal Asesor

Profa. Rosibel Villegas

Coordinadora Comisión de Trabajos de Grado
Escuela de Ciencias de la Salud

MAYO 2012
RESUMEN
CAMBIOS HISTOLÓGICOS AGUDOS CAUSADOS POR EL VENENO DE Tityus
zulianus (SCORPIONES, BUTHIDAE) EN RIÑONES DE RATONES C57BL/6
Hurtado Boada, Wilfredo José; Silva Álvarez, Leonardo José y Velásquez González, Adriana
de los Ángeles. Asesores: Borges-Strauss, Adolfo y De Sousa, Leonardo. Laboratorio de
Toxinología, Grupo de Investigación en Toxinología Aplicada y Animales Venenosos, Escuela
de Ciencias de la Salud, Núcleo de Anzoátegui, Universidad de Oriente.
En ratones hembras C57BL/6 se administró por via intraperitoneal una DL50 de veneno de
escorpión T. zulianus, equivalente a 14,13 µg.g-1 de ratón. Luego fueron evaluados durante
sesenta minutos, obteniendo una frecuencia de sobrevivencia de 50% (n = 2). El curso
temporal de aparición de los signos de toxicidad aguda experimental inducida por el veneno se
inició con hiperactividad seguida de sialorrea escasa y posteriormente piloerección. En el
espectro medio de toxicidad, moderadamente grave se observó sialorrea abundante, temblores
generalizados, defecación pastosa, convulsiones y signo de Straub; seguidamente
bradipnea/apnea e hipotonía del tren anterior y finalmente la muerte o sobrevivencia de los
animales. Los ratones sobrevivientes fueron sacrificados para evaluar los cambios histológicos
en el tejido renal causados por efecto tóxico del veneno de T. zulianus sobre los riñones.
Los animales tratados con el veneno de T. zulianus presentaron alteraciones histológicas del
parénquima renal. Cambios degenerativos generalizados, tanto en corteza como médula renal.
Los corpusculos renales presentaron capilares dilatados con material fibroso en la capsula de
Bowman; la cual se observó aumentada de tamaño con engrosamiento de la lamina parietal.
Los túbulos distales mostraron algunos cambios degenerativos. Los contorneados proximales
estuvieron poco afectados, conservando su ribete en cepillo. No se observó respuesta
inflamatoria.

AGRADECIMIENTO
iii
A la Universidad de Oriente y Escuela de Ciencias de la Salud, Núcleo de Anzoátegui, por ser
nuestra segunda casa y brindarnos la oportunidad de formar parte de su gran Comunidad
Académica.
Al Laboratorio de Toxinología y Grupo de Investigación en Toxinología Aplicada y Animales
Venenosos, Secciones de Fisiología, Bioquímica y Farmacología, Departamento de Ciencias
Fisiológicas, Escuela de Ciencias de la Salud, Núcleo Anzoátegui, por permitirnos el
desempeño y elaboración de nuestro Trabajo de Grado.
A nuestros tutores Dr. Adolfo Borges-Strauss y Dr. Leonardo De Sousa por su dedicación,
colaboración, apoyo, paciencia, sabiduría, conocimientos, inteligencia y pedagogía en la
elaboración de nuestro proyecto de investigación.
A la Dra. Iraida Daboin por su incalculable ayuda en el desarrollo de este trabajo.
A la Dra. María Josefina Moreno de Marval por su especial colaboración en la culminación de
esta tesis.
Al personal de apoyo, Profesores Mercedes Matos, Aleikar Vásquez-Suárez y Stefano Bónoli,
Laboratorio de Toxinología, Grupo de Investigación en Toxinología Aplicada, Secciones de
Bioquímica y Fisiología, Departamento de Ciencias Fisiológicas, Escuela de Ciencias de la
Salud, Universidad de Oriente, Núcleo Anzoátegui.
Este trabajo fue parcialmente financiado por el Fondo Nacional de Ciencia, Tecnología e
Innovación (FONACIT) a través del Proyecto de Investigación en Red Nacional de
Producción de Antivenenos Nº 2007000672: Subproyecto 1, “Caracterización epidemiológica
de los envenenamientos ofídicos y escorpiónicos en Venezuela, con taxonomía de las especies
asociadas y bancos de venenos” y Subproyecto 2, “Bioensayos para el estudio de la diversidad
de toxinas de la fauna venenosa del país”, de los cuales esta propuesta forma parte.
A todas aquellas personas que de una u otra forma contribuyeron en la realización del presente
trabajo, nuestros agradecimientos con mucho aprecio. Fueron días de angustias, noches de
desvelo; pero al final lo logramos.

Leonardo José Velásquez González. RESUMEN DEDICATORIA DEDICATORIA DEDICATORIA AGRADECIMIENTOS LISTA DE TABLAS LISTA DE FIGURAS iii iv v vi vii viii ix vii INTRODUCCIÓN JUSTIFICACIÓN OBJETIVOS General Específicos MATERIALES Y MÉTODOS Fuente del veneno de escorpión Extracción y purificación parcial del veneno Designación de una DL50 como controlada del veneno de Tityus zulianus Evaluación de los signos de toxicidad aguda experimental y su curso temporal de aparición Descripción de los cambios histopatológicos agudos en riñones de ratones C57BL/6.Hurtado Boada. causados por la inyección intraperitoneal del veneno de Tityus zulianus RESULTADOS Curso temporal de toxicidad aguda experimental Hallazgos histológicos Descripción histológica del tejido renal posterior a la inyección de una DL50 del veneno de Tityus zulianus en ratones de la cepa C57BL/6 DISCUSIÓN Cepa C57BL/6 como modelo funcional para evaluar los venenos de escorpiones del género Tityus Cambios histopatológicos encontrados en el riñón de los ratones hembra C57BL/6 Alcances de los resultados y su contribución a la elaboración del mapa de letalidad de la escorpiofauna venezolana de importancia médica CONCLUSIONES 1 6 7 7 7 8 8 8 9 10 11 12 12 15 17 21 21 21 26 27 . Wilfredo José Silva Álvarez. Adriana de los Ángeles ÍNDICE Pág.

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS 28 LISTA DE TABLAS Pág. 1 Comparación de los cambios histológicos agudos observados en riñones de ratones C57BL/6 inyectados con una DL50 del veneno de Tityus zulianus (este trabajo) y una DL50 del veneno de Tityus discrepans (Salomón. 25 . 2009).

1 xiii Determinación de la dosis letal cincuenta (DL50) del veneno de Tityus zulianus por vip en ratones de la cepa C57BL/6 2 Curso temporal de aparición de los signos de toxicidad aguda experimental inducidos por el veneno de Tityus zulianus administrado por vip en ratones C57BL/6 13 3 Comparación de un ratón C57BL/6 control con uno sobreviviente inyectado. con el veneno de Tityus tenuicauda mostrando algunos signos de toxicidad aguda 14 4 Tejido renal correspondiente a un ratón control C57BL/6 15 5 Sección de corteza renal correspondiente a ratón control C57BL/6 16 6 Tejido renal de ratón C57BL/6 inyectado con una DL 50 del veneno de Tityus zulianus 17 7 Tejido renal de ratón C57BL/6 inyectado con una DL 50 del veneno de Tityus zulianus 18 8 Tejido renal de ratón C57BL/6 inyectado con una DL 50 del veneno de Tityus zulianus 19 9 Tejido renal de ratón C57BL/6 inyectado con una DL 50 del veneno de Tityus zulianus 20 10 Tejido renal de ratón C57BL/6 inyectado con una DL 50 del veneno de Tityus nororientalis 23 11 Tejido renal de ratón C57BL/6 inyectado con una DL 50 del veneno de Tityus nororientalis 24 9 . por vip.LISTA DE FIGURAS Pág.

En este territorio. 2005). 1996. debido a que su veneno es capaz de provocar la muerte en humanos (Lourenço y Cuellar. Gómez y col.. incluyendo 17 géneros y 202 especies descritas hasta el año 2008 (Rojas‐Runjaic y De Sousa..... 1996. 2005). Borges y De Sousa.. Así. 2009).. Venezuela es uno de los países de Sur América con mayor incidencia de escorpionismo (Borges y De Sousa. 2007. 1996). de las 20 familias existentes en el Orden Scorpiones (Prendini y Wheeler. 2009. en el continente americano. 1996. De Sousa y col. al mismo tiempo. Otero y col. Dentro de los bútidos existen. Saldarriaga y Otero. Clase Arachnida. 2007) representando un problema de salud pública en México (Dehesa‐ Dávila. 2004) y Venezuela (Borges. Chactidae.. Borges y De Sousa. 2000. De Sousa y Borges. 2002. Este orden está conformado por 20 familias agrupando más de 1500 ix especies (Prendini y Wheeler. Borges y col. 2006). Lourenço y col. Borges y De Sousa. solo cinco están presentes (Buthidae. Colombia (Otero y col. 2000. 2000. la cual cuenta con 80 géneros. dos géneros de importancia clínico‐epidemiológica. 1996). Euscorpiidae. Spirandeli-Cruz. Gómez y Otero. debidos a envenenamiento escorpiónico (Borges. De Sousa y col.INTRODUCCIÓN Los escorpiones pertenecen al Phylum Arthropoda. especialmente en niños. Brasil (Biondi‐Queiroz y col. Orden Scorpiones (González-Sponga. De Sousa y col. 1998. 2009. 2006. 1995.. algunos taxa pertenecientes a Centruroides Marx (México y sureste de Estados Unidos de América) y Tityus Koch (parte de Centroamérica. 2006. 2010a).. La familia Buthidae... 1999. posee las especies de mayor importancia médica. 2000. 1989). 1996. . De Sousa y col. islas del Caribe y Suramérica hasta el norte de Argentina) han producido casos graves y fatalidades. Hemiscorpiidae y Scorpionidae). Biodi-Queiroz y col. tiene la mayor distribución geográfica mundial y. Borges y De Sousa.

De Sousa y col.. 2002. T. 2 2004. perijanensis González‐Sponga (Sierra de Perijá. pittieri González‐Sponga. De Sousa y col. . 1995.b). perteneciente a la familia Buthidae (Fet y Lowe. discrepans Karsch (Región Centro‐ Norte Costera). T. Guinand y col. De Sousa y col. nororientalis González‐Sponga... 2007. Rojas‐Runjaic y Becerra. T. en las regiones más densamente pobladas del país: T... 1994.. T. González‐Sponga 1996.. con 58 especies (Borges y De Sousa 2006.. 1997.. De Sousa y col. 1 falconensis González‐Sponga (Región Centro‐Occidental. T... quirogae De Sousa et al. 2006. De los 58 Tityus venezolanos. T. Rojas‐Runjaic y De Sousa 2007. 2008).. 1994. T. T. breweri González‐Sponga (Borges y col. neoespartanus González‐Sponga (Región Nororiental e Insular) (Borges y De Sousa. es el más diverso. 2005. valerae Scorza (Región Andina y sur del Lago de Maracaibo). once han sido incriminados como responsables de accidentes graves y/o fatales. zulianus González‐Sponga. T. Mejias y col. 2010b). y T. De Sousa y col. Porras y col.. Borges y col. 2000. 2010a).. caripitensis Quiroga et al.. isabelceciliae González‐Sponga. 2006). Borges y col. a los cuales se suma recientemente T. De Sousa y col. El género Tityus. De Sousa y col.. Borges y De Sousa 2006. en el Macizo Coriano). De Sousa y col.2 2007. 2000) y de comprobada trascendencia en el país (Mota y col. 2008a.. Rojas‐Runjaic y Becerra 2008.. occidente del estado Zulia). 1996. De Sousa y col. 2007. 1999.

mientras que en la noche salen a capturar su alimento (Manzanilla y De Sousa. Falcón. (2) la Centro-Occidental (estados Lara y Falcón). Sucre. 1997.. Trujillo y zona sur del lago de Maracaibo. Táchira. Lara y Distrito Capital (Borges. Mérida. 1996. 2006. 2001. finalmente (7) la GuayanoAmazónica. Zulia. Otero. (4) la macroregión Nororiental [conformada por los estados Anzoátegui. 2010. por lo cual se desarrolla la complicación más temible (por ser eventualmente irreversible) que es el desarrollo de bradiarritmias. Carabobo. GonzálezSponga. en especial con los niños. En el hábitat domiciliario humano se localizan en sitios equivalentes a los de sus refugios en la naturaleza (Reyes-Lugo y Rodríguez-Acosta. 1996.Existen estados potencialmente peligrosos como Anzoátegui. 2000). (3) la Centro-Norte-Costera (norte de los estados Carabobo y de Aragua.. De Sousa y col. 2010.. 2000.. De Sousa y col. 2004a). los escorpiones poseen mayores hábitos nocturnos que diurnos. predominan los signos y síntomas colinérgicos y en la esfera cardiovascular el tono adrenérgico: en los casos graves el tono adrenérgico evoluciona a la instalación de tono colinérgico (indicando mal pronóstico). Gómez y col. en el envenenamiento por escorpiones. 2005). Monagas y Sucre. De Sousa y colaboradores (2000) y Borges y De Sousa (2006) han sugerido la existencia de grandes áreas (macroregiones) endémicas de escorpionismo debidas al género Tityus: (1) la Andina (estados Táchira. Las consecuencias clínicas seguidas del envenenamiento humano por Tityus dependen de la especie de escorpión involucrada (Borges y col. insuficiencia . (6) la Deltana (estado Delta Amacuro). Miranda. Estas características condicionan un incremento del posible contacto con el hombre.. estados Miranda. durante el día se ocultan en sitios oscuros y en una variedad de microclimas.. abarcando los estados Amazonas (Subregión Amazónica) y Bolívar (Subregión Guayanesa). Clínicamente. Trujillo. Vargas y Distrito Capital). 2007. 2003). 3 En general. y. De Los Ríos. Gómez y col. 2009). abarcando el macizo Oriental (sistema montañoso de Paria y la serranía de Turimiquire. y fundamentalmente al inicio de la estación lluviosa (Machado-Allison y Rodríguez-Acosta. (5) la Serranía de Perijá (estado Zulia). Monagas. con sus áreas de piedemonte) e Insular (estado Nueva Esparta). De Sousa y col. Mérida. Gómez y Otero.

Arocha‐Sandoval y Villalobos‐Perozo. 2003). Leipold y col.. Borges y col. Tsushima y col. 1995. 2004). De Sousa y col.. 2007. la coagulopatía intravascular diseminada con hemorragia pulmonar bilateral puede presentarse como causa de muerte (De Sousa y col. 1997.. 2006b). una elevada cantidad de aminoácidos aromáticos y la ausencia de metionina. 2004a. Este último. cuya acción modula el ritmo . entre 6 500 y 9 000 de masa molar (Borges y De Sousa... El sistema nervioso en vertebrados es el principal blanco de las toxinas escorpiónicas y se divide en: Sistema Nervioso Central y Sistema Nervioso Autonómico o Periférico. se atribuye principalmente a las proteínas básicas que 4 contienen entre 58 y 78 aminoácidos unidos por cuatro puentes disulfuro.. 2005). 1997.. siendo éstos sus blancos de acción molecular (Borges y col. Barona y col. 2004b. La composición del veneno de los escorpiones es compleja.. Borges y col. 2009). Borges y col.. Borges y col. Borges y col. comprende los sistemas nerviosos simpático y parasimpático. o como un accidente cerebrovascular isquémico con déficit motor o una polineuropatía tóxica) (De Sousa y col. de los neurotransmisores acetilcolina y noradrenalina. 2006.. Harvey y col. a nivel de sus terminaciones pre y post-ganglionares. consiste en una mezcla de compuestos peptídicos de baja masa molar... 2007)..cardiaca congestiva con edema agudo de pulmón y shock cardiogénico intratable (especialmente aquellos pacientes que no reciben a tiempo el tratamiento específico con el suero antiescorpiónico) (Mazzei de Dávila y col. 2006. Raramente puede manifestarse como un cuadro neurológico grave (cursando con afasia y hemiparesia. 2006.. cuya estimulación determina la producción. 2006b. Borges y col. 2008). como en animales de experimentación. 1999. 1998. 2006a. Borges y Rojas-Runjaic. 1974) o diabetes tóxica (Ghersy de Nieto y col. Becerril y col. La administración precoz del antiveneno disminuye la posibilidad de instalación de manifestaciones cardiovasculares graves (Borges y De Sousa. o como miocarditis (López‐Nouel y Trejo‐Bastidas.. Su toxicidad. respectivamente.. 2002. Excepcionalmente. Estas proteínas constituyen uno de los compuestos más potentes que se han aislado del veneno de estos organismos y son herramientas esenciales para entender la dinámica de los canales iónicos.. tanto en humanos. 1990.

. 1999 . La región Andina. en el Laboratorio de Biología Molecular Sección de Biomembranas. las regiones Nororiental y Andina poseen el más alto nivel de mortalidad. Universidad Central de Venezuela (UCV). Becerril y col. donde prevalece la especie Tityus zulianus (De Sousa y col.... 2007. 2004b. 2000. 2006). 1995.. Universidad de Oriente. lo que en consecuencia produce tal liberación de neurotransmisores (Possani y col. Harvey y col. Barona y col.. se optimiza un método para determinar la actividad biológica del veneno de varias especies de escorpiones. Borges y col.. 1997. y particularmente el estado Mérida. encabeza la casuística nacional de fatalidades por escorpionismo. Núcleo de Anzoátegui. Tsushima y col. Borges y col. Barona y col. Becerril y col. 1998. 1999). 2008). y en el Laboratorio de Toxinología Grupo de Investigación en Toxinología Aplicada y Animales Venenosos (GITAAV)... 2006). Borges y col. . Borges y De Sousa.. 2004.fisiológico de los tejidos inervados por ambos sistemas (Borges y col.. 1990. los cuales pueden estar relacionados con las complicaciones respiratorias asociadas al cuadro clínico del envenenamiento por Tityus zulianus (Borges y col. El envenenamiento por Tityus zulianus puede producir paro respiratorio y la muerte por edema agudo de pulmón (Borges y De Sousa. Borges y Rojas-Runjaic. 5 De las siete macroregiones endémicas de escorpionismo identificadas en Venezuela. 1999. produciendo despolarización sostenida a consecuencia de un aumento en la permeabilidad para Na+ y K+. Los componentes más letales de los venenos de escorpión de importancia médica actúan a nivel de las membranas de los tejidos excitables.. Instituto de Medicina Experimental. 2004a. 2006b. Borges y col. 2006. 2004a).. revelaron la presencia de componentes con elevada toxicidad a nivel pancreático de estos mamíferos. se estudia la diversidad de toxinas producidas por el género Tityus. Actualmente. Facultad de Medicina. Los datos de la evaluación de la pancreatotoxicidad inducida por Tityus zulianus en ratones BALB/c. en Venezuela.. Borges y col..

2008. causados como efecto tóxico del envenenamiento agudo experimental con el veneno de Tityus zulianus (macroregión Andina). 6 JUSTIFICACIÓN El veneno de los arácnidos amerita interés médico y de investigación en nuestro país (Borges. 2007. 2010a). De Sousa y col. 1996. El escorpionismo es de carácter endémico y un problema de salud pública regionalizado. 2000. se utilizaron los órganos de ratones hembra de la cepa C57BL/6. 2000. Borges y col.. Kiriakos y col.. 2008).Este estudio tuvo como objetivo determinar los posibles cambios histopatológicos in vivo en riñones de ratones de la cepa C57BL/6.. como dosis controlada del veneno de Tityus zulianus. 1997. Borges y De Sousa.. Borges y De Sousa. En gran parte de la macrorregión endémica de escorpionismo en el piedemonte andino del lago de . ubicado fundamentalmente en la franja norte del país. Machado-Allison y RodríguezAcosta. De Sousa y Borges. 2009). Borges y De Sousa. en ella. 1996. 2006. 2006. De Sousa y col. 2009. previamente inyectadas por vía intraperitoneal con una DL50 determinada (en trabajos previos) por el método secuencial de Dixon y Mood (1948) modificado por Sevcik (1987) en ratones hembra C57BL/6 (Cova. Para tal fin. donde se sitúa una alta densidad poblacional humana y. adicionalmente se localizan varias especies de Tityus de relevancia médica por ser los responsables de envenenamientos humanos graves asociados fundamentalmente a complicaciones del sistema cardiorrespiratorio (Borges.. De Sousa y col.

en la adquisición de un valioso cuerpo de información en el área histopatológica que permitiría comprender de forma integral el escorpionismo en la región centro-norte-costera venezolana. 7 OBJETIVOS Generales Evaluar los cambios histológicos agudos en riñones de ratones hembra. inyectado por vía intraperitoneal. Determinar la DL50. como consecuencia del efecto tóxico del envenenamiento agudo experimental con el veneno de Tityus zulianus. Borges y De Sousa. por lo cual. causados como respuesta de toxicidad aguda experimental a una dosis controlada del veneno de Tityus zulianus. de la cepa C57BL/6. 2006). El desarrollo de este trabajo se justificó con base en la inexistencia de investigaciones experimentales previas sobre la evaluación de alteraciones histológicas agudas desarrolladas en tejido renal de ratones C57BL/6. . la realización del presente proyecto. del veneno de Tityus zulianus para la cepa de ratón C57BL/6.Maracaibo se distribuye Tityus zulianus (De Sousa y col. el estudio de su veneno adquiere trascendencia para establecer el cuadro de toxicidad de los escorpiones de importancia médica en el país. Por este motivo fue de gran interés para el Laboratorio de Toxinología del GITAAV. Específicos 1. 2000.. como dosis controlada.

71º43¨W. 3. piedemonte andino del lago de Maracaibo. durante sesenta minutos. Determinar los cambios histológicos agudos como efecto de toxicidad aguda experimental del veneno de Tityus zulianus en riñones de ratones C57BL/6. 4. en el interior de troncos en proceso de descomposición y en la base de plantas de cafeto (Coffea arabica). 8 METODOLOGÍA Fuente del veneno de escorpión Para la ejecución de la presente investigación se capturó la especie Tityus zulianus en la localidad de Santa Cruz de Mora y sus alrededores (8º22´N. ayudado con lámparas portátiles de luz ultravioleta. Durante el día los escorpiones fueron localizados bajo troncos. discrepans y el de T. Los escorpiones fueron . estado Mérida. T. nororientalis.2. Durante la noche se siguió el procedimiento de captura similar. los signos clínicos de toxicidad aguda experimental y su curso temporal de aparición. inducidos como efecto tóxico de la inyección intraperitoneal de una dosis controlada de veneno de Tityus zulianus. en el interior de la corteza parcialmente desprendida de los árboles. Comparar en la cepa C57BL/6 los cambios histológicos observados en tejido renal entre el veneno de Tityus zulianus. Evaluar. 622 msnm). municipio Antonio Pinto Salinas. en la cepa de ratón C57BL/6.

Para detalles del método consultar a De Sousa y col. fue determinada (en trabajos previos) por el método secuencial de Dixon y Mood (1948) modificado por Sevcik (1987) en ratones hembra C57BL/6 (Cova. Designación de una DL50 como dosis controlada del veneno de Tityus zulianus La DL50 del veneno de Tityus zulianus. transferido a tubos Eppendorf de 1. DC.mantenidos en cautiverio. para una hora de experimentación. 2009). según técnica descrita por Shulov y Zlotkin (1969). Posteriormente. . Universidad Central de Venezuela. en condiciones de bioterio. con alimentación e hidratación ad libitum.5 mL. Se realizaron diluciones del veneno. en el Laboratorio de Biología Molecular de Toxinas y Receptores. fue liofilizado (a -50ºC y 80 mBar de presión) (Labconco-Freezer DrySistem/Freezone® 4. 1/5. El veneno. Facultad de Medicina. Sección de Biomembranas. modelo Z180M) por 20 minutos para separar restos celulares de la fase soluble que contiene las proteínas con actividad farmacológica.. fue suspendido en 1 mL de agua bidestilada y agitado en vortex (Super-Mixer®). para la extracción de su veneno. Consecutivamente se centrifugó a 14 000 g (Labnet para tubos Eppendorf®. Extracción y purificación parcial del veneno El veneno de los escorpiones se obtuvo mediante estimulación manual del telson. 2009. 2008) (Fig. en agua bidestilada como paso previo a 9 la cuantificación de las proteínas contenidas en el veneno (De Sousa y col. Instituto de Medicina Experimental.. 1). Venezuela. Caracas.5) y almacenado a -20ºC hasta el momento de su uso. 1/10 o 1/20.

fueron inyectados por vía intraperitoneal con una DL50.58 y 22. del lote existente. cuatro ratones hembra de cada cepa C57BL/6.Figura 1. adquiridas en el Bioterio del Instituto Venezolano de Investigaciones Científicas (IVIC) y disponibles10en el área del Laboratorio de Toxinología.g-1 de ratón.13 µg. En tal sentido. La flecha indica el punto de inflexión e inicio de los datos válidos para el cálculo de la DL50.13 (13. hidratados y alimentados ad libitum. del veneno de Tityus zulianus. Determinación de la dosis letal cincuenta (DL 50) del veneno de Tityus zulianus por vip en ratones de la cepa C57BL/6.36-14. fueron observados meticulosamente durante los 60 minutos de experimentación y tabulados .g-1 de ratón.72 g fueron inyectados vip con el veneno de Tityus zulianus. Los signos clínicos expresados como efecto de toxicidad aguda experimental inducida por la inyección intraperitoneal de la dosis controlada del veneno de Tityus zulianus.22) μg. Evaluación de los signos de toxicidad aguda experimental y su curso temporal de aparición Se escogió al azar. como dosis controlada. El resultado se presenta como la mediana y sus límites (entre paréntesis) para un 95% de confianza: DL50 = 14. Ratones hembra cepa C57BL/6 con pesos entre 17. a cada uno de los cuatro ratones C57BL/6 se les administró una dosis de veneno de 14.

. Luego de fijados los órganos. Se utilizaron animales testigo a los cuales se les administrará solución fisiológica en volúmenes similares a los del grupo experimental (De Sousa y col. adicionalmente se registró el resultado final de sobrevivencia o muerte. Seguidamente se practicó incisión en la línea medio esternal y abdominal y se extrajeron las vísceras en bloque. durante tres días. 80%. luego dos períodos en xilol de 15 minutos cada uno. se procedió a la separación de los riñones (envenenados y controles) para colocarlos individualmente en cajetillas de inclusión para su posterior tratamiento. . los animales sobrevivientes fueron elegidos para evaluar los cambios histológicos agudos causados por el veneno de T. causados por la inyección intraperitoneal del veneno de Tityus zulianus Una vez cumplido el tiempo de sesenta minutos de exposición al tratamiento. Las piezas se lavaron con agua corriente. zulianus. con microtomo. ácido peryódico de Shiff (PAS) o tricrómicro. para ello. en estufa. y se fijaron mediante inmersión en formalina al 10% (v/v).. el tejido se fijó con xilol (solución 50%-50% v/v de alcohol-xilol) por 15 minutos. Posteriormente. a concentraciones crecientes (v/v). 2009. Los 11 cortes fueron colocados en portaobjetos rotulados. entre 50 y 55°C durante 20 a 30 minutos. Una vez enfriados se procedió a fijar y colorear los cortes con Hematoxilina-Eosina (H-E). Finalmente observados en microscopio de luz. Descripción de los cambios histológicos agudos en riñones de ratones C57BL/6. Posteriormente se deshidrataron con etanol. fueron sacrificados mediante dislocación cervical. de un espesor de 3 micras. Posteriormente se realizó su secado. Similarmente se procedió con el ratón control.cronológicamente. De Sousa y col. luego se dejaron a temperatura ambiente. para eliminar la formalina. previamente tratados con albúmina de Mayer. por quince minutos. Cada paso de deshidratación duró 30 minutos. 2010). 95% y finalmente 100%. Finalmente fueron incluidos en bloques de parafina para realizar los cortes. iniciando al 70%.

se obtuvo una frecuencia de 50% (n = 2) de sobrevivencia.12 RESULTADOS Curso temporal de toxicidad aguda experimental Luego de la exposición. zulianus en ratones. durante sesenta minutos. en la cepa C57BL/6. En la figura 2 se presenta el curso temporal de aparición de los signos de toxicidad aguda experimental inducidas por el veneno de T. hembra. La toxicidad . al tratamiento conformado por una DL 50. como dosis controlada.

Los ratones que evolucionaron al exitus letalis presentaron apnea prolongada y finalmente convulsiones con parálisis espástica. . Algunos efectos relevantes de toxicidad aguda se presentan en la figura 3 (fotografías cortesía de Cornejo. secreción ocular y defecación pastosa). moderadamente grave. Luego distensión abdominal. ocurrió secreción ocular. En el espectro medio de toxicidad. la toxicidad grave se expresó como hipotonía del tren posterior seguidamente de bradipnea/apnea y finalmente la muerte (precedida por exoftalmos y convulsiones tónico-clónicas con parálisis espástica) o sobrevivencia de los animales. marcha atáxica y sialorrea abundante. piloerección e inicio de sialorrea. En todos los casos. zulianus sobre los riñones.se inició con hiperactividad seguida por taquipnea. signo de Straub. signos de estimulación muscarínica (sialorrea. Los signos antes de morir fueron los periodos de bradipnea/apnea (con cianosis peribucal). convulsiones y disnea (caracterizada por respiración forzada abdominal). Otros signos observados: Signo de Straub. 2008): facies tóxica y piloerección. evacuación pastosa y limpieza de nariz/boca. convulsiones e hipotonía muscular. Los ratones sobrevivientes fueron sacrificados para evaluar los cambios histológicos causados por el efecto tóxico del veneno de T.

13 Figura 2. Curso temporal de aparición de los signos de toxicidad aguda experimental inducidos por el veneno de Tityus zulianus administrado por vip en ratones C57BL/6. 14 .

(b).a b c d e f Figura 3. Estas fotos se obtuvieron después de administrar una DL 50 del veneno de Tityus tenuicauda. (f) Defecación líquida (tomado de Cornejo. (a) Ratón testigo (sano). 15 Hallazgos histológicos . con el veneno de Tityus tenuicauda mostrando algunos signos de toxicidad aguda. nótese exoftalmo bilateral (e) Hipotonía. Comparación de un ratón C57BL/6 control con uno sobreviviente inyectado. (c) y (d) Secreción ocular evidente. defecación pastosa y distensión abdominal). En (c y d). 2008). por vip.

Corteza renal. 10x. de ratones C57BL/6. 40x. 10x. a b c d Figura 4. . (a). túbulos. H-E. H-E. 40x. H-E. caracterizada por la integridad de los corpúsculos renales. Tejido renal correspondiente a un ratón control C57BL/6. (b). Sección de médula renal. observese las caracteristicas nucleo-citoplásma y la presencia del ribete en cepillo de los túbulos contorneados proximales. Médula renal. vasos sanguíneos y tejido intersticial. (d). muestran imágenes de tejido renal normal. (c). Notese túbulos renales mostrando la integridad de su pared. todos descansando 16 sobre una membrana basal continua PAS positiva.Las figuras (4 y 5). mostrando la integridad de las asas de Henle.

Detállese las caracteristicas normales de los corpúsculos y túbulos renales. claramente PAS positiva. Observese la nitidez de las hojas parietal y visceral de la cápsula de Bowman y la membrana basal. Coloracion PAS 100x. 17 .Figura 5. Sección de corteza renal correspondiente a ratón control C57BL/6.

se observó congestión glomerular acentuada con cambios isquémicos tubulares leves. dilatación y ectasia vascular moderada. El túbulo contorneado distal muestra alteraciones celulares leves con pérdida de elementos nucleares compatibles con 18 degeneración celular. zulianus. PAS. 250x . Dilatación de la capsula de Bowman con esclerosis del tejido glomerular.Descripción histológica del tejido renal posterior a la inyección de una DL 50 de veneno de Tityus zulianuss en ratones de la cepa C57/BL6 En el tejido renal de los ratones C57/BL6 inyectados con una DL 50 de veneno de T. El túbulo contorneado proximal mantiene su ribete en cepillo. fibrosis intersticial leve con atrofia tubular focal. Tejido renal de ratón C57BL/6 inyectado con una DL 50 del veneno de Tityus zulianus. En el tejido renal no se observó inflamación ni necrosis (Figuras 6 a 9). Figura 6.

PAS. Dilatación de la capsula de Bowman. Túbulo contorneado distal con daños más acentuados. vaso sanguíneo renal mostrando pared disgregada. 400x. PAS 400x. fundamentalmente en la capa media. con membrana basal (hoja parietal) engrosada. PAS. (c). Depósitos de material hialino. 400x. (a). (d).a b c d Figura 7. Túbulo contorneado proximal con menor daño. 100x. Tejido renal de ratón C57BL/6 inyectado con una DL 50 del veneno de Tityus zulianus. Degeneración intersticial intertubular. Panorámica de corteza renal. Gomérulos dilatados. 19 . (b). H-E.

Tricrómico. (d). Glomérulo sustituido por material fibroso. 100x.a b c d Figura 8. Glomérulo sustituido por material fibroso. (a). 100x. Dilatación de la capsula de Bowman con fibrosis glomerular. (b). 400x. vaso sanguíneo con congestión vascular. Tricrómico. 20 . Tejido renal de ratón C57BL/6 inyectado con una DL 50 del veneno de Tityus zulianus. (c). vaso sanguíneo mostrando congestión vascular. Fibrosis intersticial. Tricrómico. 400x. Túbulos renales con discreta alteración de la estructura tubular. Tricrómico.

250x. capilares congestionados. 100x.a b c Figura 9. Panorámica de médula renal. Tricrómico. Asas gruesas mantienen sus características aparentemente normales. (b). 400x. Médula renal. Tricrómico. Capilares glomerulares sustituidos por tejido fibroso. Tricrómico. Tejido renal de ratón C57BL/6 inyectado con una DL50del veneno de Tityus zulianus. 21 . (c). (a).

demostraron respectivamente cambios histológicos causados por el veneno de T. en lo posible. entre las tres cepas. incorporando elementos clínicos (acompañados del curso temporal de toxicidad aguda) y de ensayos de letalidad. sugiere que ésta es 3.07 μg. Este trabajo ratifica los hallazgos anteriores y. fue significativamente menor en ratones C57BL/6 (DL50 = 8. 22 .g-1 de ratón) que el obtenido en ratones hembra NMRI (DL50 = 28. del veneno de esta especie del oriente venezolano. Por los resultados anteriores. menor que el obtenido en los BALBc (DL 50 = 40. zulianus.g-1 de ratón). nororientalis en tejido cardiaco. y éste. los autores proponen la utilidad de la cepa de ratones C57BL/6 como modelo funcional de bioensayo para evaluar los venenos de escorpiones venezolanos. La relación DL50/DL50.18 μg. Salomón (2009) y Laucho y López (2011). Al respecto. Albornoz y colaboradores (2009). indicaron que el índice letal cincuenta. los correlaciona con las alteraciones histopatológicas en el parénquima renal causadas por el veneno de T.75 veces más reducida que en BALBc. Cambios histopatológicos encontrados en el riñón de los ratones hembra C57BL/6 En este estudio los ratones C57BL/6 inyectados con una DL 50 del veneno de T. nororientalis.g-1 de ratón).34 veces menor en C57BL/6 que en NMRI y 4.43 μg. renal y pulmonar. Posteriormente. Las alteraciones fueron más evidentes en algunos de los componentes celulares y en la arquitectura general del tejido. cualitativamente con daños más severos en los tejidos provenientes de las cepas homocigotas (C57BL/6 y BALBc) que de la heterocigota albina NMRI.DISCUSIÓN Cepa C57BL/6 como modelo funcional para evaluar los venenos de escorpiones del género Tityus Hurtado y colaboradores (2008) demostraron mayor sensibilidad de la cepa C57BL/6 al efecto tóxico del veneno de T. zulianus mostraron diversos cambios histopatológicos en el parénquima renal en comparación con los controles.

en las cepas homocigóticas (BALBc y C57BL/6) y. discrepans (evidenciados en esta investigación). la necrosis celular fue más acentuada. se evidenció desprendimiento de la pared con signos de necrosis y (3) degeneración de los vasos venosos y arteriales. En este caso. 2009) y con el de T. observados en glándula suprarrenal de ratones C57BL/6. Los resultados observados por Salomón (2009) indicarían que el tejido renal de los ratones C57/BL6 inyectados con una DL50 de veneno de T. demostró que. nororientalis. aun cuando los daños microscópicos encontrados en el tejido renal de las cepas estudiadas fueron similares. especialmente con la presencia de material hialino en el área subyacente al endotelio arterial. discrepans. quienes demostraron que el veneno de T. zulianus posee mayor poder pancreatotóxico que el de T. 23 . (2000) demostraron que los daños ultraestructurales inducidos por el veneno de T. en apariencia. discrepans. mostró mayor afectación degenerativa que los encontrados en este trabajo con el veneno de T. en la C57BL/6. (2) en los túbulos contorneados (proximales y distales) y en los colectores. nororientalis sugiriendo tal mecanismo especie-específico. particularmente. en parte. discrepans. Adicionalmente. fueron causados en apariencia por alteraciones iónicas. especialmente relacionadas con el ión calcio asociado a sistemas de transporte activo. discrepans y T. se presenta la comparación de los cambios histológicos agudos observados en riñones con el veneno de T. nororientalis (Salomon.Salomón (2009) en los ratones C57BL/6 observó perdida de la citoarquitectura tanto a nivel de la corteza como de la médula con afectación de los tres elementos (Figuras 10 y 11): (1) en los glomérulos los capilares se observaron congestionados. se establecería diferencias en toxicidad histológica entre los venenos de T. Rodríguez-Acosta y col. sugiriendo mecanismos especie-específicos relacionados con la especie. En la tabla 1. Los resultados hallados en este trabajo confirmarían los hallazgos de Borges y colaboradores (2004a).

(d). Dilatación glomerular. 100x. H-E. se observa la congestión de los capilares glomerulares con abundante celularidad. En los túbulos contorneados se observa la presencia de “gránulos rojizos” en el citoplasma celular. Tejido renal de ratón C57BL/6 inyectado con una DL 50 del veneno de Tityus nororientalis (Salomón. (b). (a). la mayoría de las células muestran cambios degenerativos severos. H-E. 2009). Sección de corteza. Imagen aumentada de la figura 10c. 24 . pérdida de epitelio de algunos túbulos. Los túbulos contorneados proximales y distales están caracterizados por pérdida de la arquitectura normal. fragmentación citoplasmática y núcleos vacuolizados y rotos.a b c d Figura 10. 100x. 40x. ruptura de otros. H-E. Sección de corteza renal. Se observa con mayor detalle las alteraciones citoplasmáticas y nucleares de los túbulos renales descritos en la figura anterior. 10x. H-E. (c).

25 . 2009). la cual se caracteriza por la ausencia de fibras musculares normales. Sección de médula renal mostrando asas de Henle con alteración en su epitelio. 100x. Apréciese la degeneración de la pared arterial. los cuales presentan pérdida de sus elementos celulares.a b Figura 11. asi como la hialinización de la misma. (a). (b). 100x. H-E. Tejido renal de ratón C57BL/6 inyectado con una DL 50del veneno de Tityus nororientalis (Salomón.Vista de una arteria observada en tejido renal de un ratón C57BL/6. H-E. la mayoría de ellos muestran sólo la silueta de los que fueron células de su pared.

g-1 de ratón Dilatación de la capsula de Bowman Todos los túbulos colectores y contorneados proximales y distales mostraron alteración de su citoaqrquitectura.22 µg. rotos e irregularmente descamados. Vaso sanguíneo renal mostrando congestión vascular y pared disgregada. Tityus discrepans DL50. tal deterioro se caracterizó por fragmentación del citoplasma. El túbulo contorneado proximal con menor daño mantiene su ribete en cepillo.g-1 de ratón Dilatación de la capsula de Bowman con membrana basal (hoja parietal) engrosada y esclerosis del tejido glomerular. Túbulos renales con discreta alteración de la estructura tubular. que fue más evidente en los túbulos contorneados distales. Degeneración del epitelio tubular. vacuolización nuclear y cromatolisis. Comparación de los cambios histológicos agudos observados en riñones de ratones C57BL/6 inyectados con una DL50 del veneno de Tityus zulianus (este trabajo) y una DL50 del veneno de Tityus discrepans (Salomón. en la túnica media se aprecian fibras musculares en degeneración con gran vacuolización.Tabla 1. discrepans. Presencia de “gránulos rojizos” en el citoplasma de las celulas epiteliales tubulares. células con citoplasma fragmentado y núcleos con vacuolización y cromatólisis. 2009). produjo alteraciones inmunohistoquímicas detectadas en la matriz extracelular de . vip = 11. túbulos necróticos. Ruptura de la capa íntima de los vasos sanguíneos. inyectado por vía subcutánea. fundamentalmente en la capa media. vip = 14. Depósitos de material hialino. Túbulos proximales con pérdida del ribete en cepillo. Fibrosis intersticial (degeneración intersticial intertubular). El túbulo contorneado distal con daños más acentuados muestra alteraciones celulares leves con pérdida de elementos nucleares compatibles con degeneración celular.13 µg. La coloración PAS demostró el engrosamiento de algunas membranas basales y el contenido de los túbulos fue PAS negativo lo que sugiere que su contenido era material de desecho y no producto de la secreción D´Suze y colaboradores (2004) demostraron que el veneno de T. Tityus zulianus DL50.

En el sitio de inyección evidenciaron infiltración masiva neutrofílica alrededor de los nervios y vasos sanguíneos. inmunológicas. para una demarcación del país en “Provincias Toxinológicas” planteada por Borges y De Sousa (2006) y por Borges y colaboradores (2010b) para una comprensión integral del escorpionismo en el país. con sus variaciones estructurales y/o funcionales sugeridas por Cova (2008). (2008). principalmente las interleucinas 6. similarmente han asociado los cambios histopatológicos. hígado. especialmente en el lumen de las venas y vénulas localizaron agregación de masas de aspecto fibrinoide con signos de vasculitis. Otros autores. monocitos y macrófagos). Cova 2008). (2008) y Hurtado y col. Los autores relacionaron estos cambios con la liberación de citoquinas. intestino. más recientemente. bioquímicas y fisiológicas ya disponibles que indican que los venenos de estos artrópodos son altamente complejos relacionados.. incorporando nuevos elementos de evaluación histopatológica a los componentes clínicos (acompañados del curso temporal de toxicidad aguda) y de ensayos de letalidad al conjunto de evidencias moleculares. Por lo pronto. estos resultados vienen a reforzar los criterios que contribuyen con la elaboración del mapa de letalidad de las especies de Tityus propuesto por Borges (1996) y. 27 . páncreas. bazo y pulmón de carneros. causados por el veneno de otras especies de escorpiones. leukcotrienos (B4) y los tromboxanos (A2). 2006a. Las alteraciones se caracterizaron por infiltración celular (neutrófilos. propone la utilidad de la cepa de ratones C57BL/6 como un excelente modelo funcional de bioensayo para evaluar los venenos de escorpiones venezolanos. 2004b. pero también supeditado de la cepa de ratón utilizada para evaluar la toxicidad de los venenos. Por lo cual. con la liberación (en parte) de varios mediadores inflamatorios (tipo autacoides) como prostaglandinas (E2). 8 y 10. Alcances de los resultados y su contribución con la elaboración del mapa de letalidad de la escorpiofauna venezolana de importancia médica De manera característica. el presente trabajo reconfirma que el síndrome del envenenamiento por escorpiones del género Tityus en vertebrados es especie-específico (Borges y col. Da Camara y col. posiblemente.26 piel.

produjo alteraciones histológicas en el tejido renal de los ratones de experimentación. El veneno de T.CONCLUSIONES 1. 2. 4. vacuolización e hialinización de la túnica media y en algunos casos se evidencio ligero infiltrado perivascular. glomérulos. En los vasos sanguíneos se evidenciaron alteraciones estructurales de su pared. 3. Las alteraciones consistieron principalmente en degeneración de los tres elementos básicos. Las manifestaciones colinérgicas predominaron en el cuadro neurotóxico agudo. 28 . 6. zulianus a una DL50. túbulos contorneados (distales) y vasos sanguíneos. En los glomérulos renales se evidenciaron grandes signos degenerativos consistentes en ovillos capilares dilatados en su mayoría y amplias capsulas de Bowman con contenido fibroso en su interior 5. En los ratones utilizados como control no se evidenció ninguna alteración histopatológica. consistentes en ruptura de la túnica interna.

. inmunológica y epidemiológica para su estudio. Becerril. Cedeño. J. Borges. S. R. L. J. E. Cloning of genes encoding scorpion toxins: an interpretative review. y Possani. En: Enfoques y Temáticas en Entomología. 16: 65-75. Batista. Caracas. A. 1764: 76-84. 31: 44-49. (eds). y Rojas-Runjaic. Albornoz. y Gilglio. M. Sitientibus. Borges.. Escorpionismo en Venezuela: una aproximación molecular. A. y Possani. y De Sousa.REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS Arocha-Sandoval F. y Pereira.. . Toxicon. Universidad de Oriente. Biochimica et Biophysica Acta. B.. D. García. Págs. A. L. 14:339 – 357. Cambios histopatológicos agudos causados por el veneno de Tityus nororientalis (Scorpiones: Buthidae) en miocardio de ratones NMRI. García-Santana. Manifestaciones neurológicas tardías de un emponzoñamiento por escorpión. M. F.. 15: 273-285.. I. Borges. E. Biondi-Queiroz. L.. Journal of Toxicology and Toxins Review. L. Wanke. A. y Herrera. y Rodrigues. Trabajo de Pregrado.. (1995).Revista de la Facultad de Farmacia (UCV).Toxicon. Otero. Brasil. (2006).. C. Kasmera. BALBc y C57BL/6. Gómez-Lagunas. Estudo retrospectivo do escorpionismo na Região Metropolitana de Salvador (RSM)-Bahia. Marangoni. J. (2009). 35: 821-835. Toxicon. Escorpionismo en Venezuela. M. L. Arantes. (1997). El Souki. Corona. V. B. 137-153. Toxins isolated from scorpions of the genus Tityus. Barcelona Barona. 69: 15-27. Ediciones Astrodata.. (1996). (2006). Reporte de un caso. Villalobos-Perozo R. O. Zamudio. (2003). 28: 10111017. Isolation and characterization of toxic proteins from the venenom of the Venezuela scorpion Tityus discrepans (Karsch). Bolívar. Proteomic analysis of the venom and characterization of toxins specific for Na + and K+ channels from the Colombian scorpion Tityus pachyurus. (2007). B. Acta Biológica Venezuelica. y De Sousa.. (1990). E. C. y Possani. Una aproximación multidisciplinaria para el estudio del envenenamiento por arácnidos en Venezuela. Tityus perijanensis González-Sponga (Scorpiones: Buthidae): Molecular assessment of its geographical distribution and venom lethality of Venezuelan populations. (1996). Becerril.. F. F. Borges. Departamento de Ciencias Fisiológicas.. L. A. Borges. 29 Arrivillaga. (2009). 50: 1005-1010..

De Sousa. García. Pancreatic toxicity in mice elicited by Tityus zulianus and Tityus discrepans scorpion venom. Toxicon.. Buthidae) en el estado Mérida. 1107: 49-68. Borges. 51: 66-79. (2002). D.. 25: 76-79. Diversity of long-chain toxins in Tityus zulianus and Tityus discrepans venoms (Scorpiones: Buthidae): Molecular. western Venezuela.. Rojas-Runjaic.Borges. Envenomation by the scorpion Tityus breweri in the Guayana Shield. L. Wilderness and EnvironmentalMedicine. Southeast Venezuela: Report of a case. Faks.. Borges. Alfonso M. 21: 282-290.. y Op den Camp. Investigación Clínica. (1999). Arandia J. Zootaxa.. Tsushima. N... F. y Heinemann. C. Cova. y De Sousa. E. J. and mass spectral analyses. reactivity towards antivenom and proposal for a toxinological partitioning of the Venezuelan scorpion fauna. A. 55: 436-454.. M. A. Borges.. Vargas. (2008).. De Sousa.. 142: 240-252. molecular cloning and functional characterization of a novel β-toxin from the Venezuelan scorpion. Santos.. Jowers. L. H. 30 Departamento de Bioanálisis. E. Op den Camp. y Manzanilla. Winand. P. A. J. Diez.. Borges. Description of a New Tityus species (Scorpiones: Buthidae) from Sierra de Portuguesa. A. 37: 868-881. based on morphological and mitochondrial DNA evidence. 45: 269-276. Revista Facultad de Medicina (Caracas). Venezuela. Universidad de Oriente. Antibodies against Tityus discrepans venom do not abolish of Tityus serrulatus venom on the rat sodium and potassium channels. J. M. S. Vargas A. Hernández. Bermingham. Lugo. Colmenares-Árias Z. Cumaná. Céspedes... Isolation. Buthidae). N. Alfonzo.. A. Borges. García. (2010a). Comparative Biochemistry and Physiology. Y.. (2004b). y Backx. C. N. M. Espinoza.. y Alfonzo. .. Evaluación de la actividad biológica del veneno de tres especies venezolanas de importancia médica del género Tityus (Scorpiones.Toxicon. Toxicon.. R.. A. M. Characterization of Tityus scorpion venoms using synaptosome binding assays and reactivity towards Venezuelan and Brazilian antivenoms. immunological. Tityus zulianus. A.. E. H.. Borges. G.. Toxicon. Leipold. Borges A.. Trejo. C. Valadares. (2004a). Borges. (2006a). E. M.. Herrera. y Sanjur. Molecular systematics on the neotropical scorpion genus Tityus (Buthidae): The historical biogeography and venom antigenic diversity of toxic Venezuelan species. A. A. A. Alfonzo.. (2006b).. 43: 671-684. Caracterización epidemiológica y toxicológica del envenenamiento por Tityus zulianus (Scorpiones. (2008). L. Alfonzo. (2010b). Trabajo de Pregrado. O. R. y Chávez-Olórtegui.

7: 7-14. Mortalidad en humanos por envenenamientos causados por invertebrados y vertebrados en el estado Monagas. J. Parrilla.... Valdivieso. E.. Boadas. 5: 111... Vázquez.. M.. Mirabal. Revista de Biología Tropical. M. C. Trabajo de Pregrado. L. An epidemiological review of scorpion sting in Venezuela. Caracas. y Parrilla-Álvarez... Revista do Instituto de Medicina Tropical de São Paulo. L. Scorpionism due to Tityus neoespartanus (Scorpiones. A. y Parrilla. De Sousa. Venezuela: geographic distribution. 6: 127-165. Departamento de Ciencias Fisiológicas. 40: 681-685. E. Rodríguez. A. De Sousa. P. Venezuela. L.. J..The northeastern region. De Sousa. y Quiroga. Escorpiones y escorpionismo en Venezuela. Ledezma. J.. (2006). Valecillos. P. B. Buthidae) in Margarita Island. L. (2005). (1996). Vázquez. Nueva especie de Tityus (Scorpiones: Buthidae) del Turimiquire. P.. De Sousa. M. J. 13: 4551. Ledezma. D. Kiriakos. De Sousa. (eds).. y Quiroga.. (2009). P. Rojas.. northeastern Venezuela. De Sousa. L. S. J. A. Jorquera. L. D. (2006). M. Arrivillaga. M.. (2007). Manzanilla. Herrera. A. M. Salazar. Marcano. The proposal of a new endemic macroregion for scorpionism in Venezuela. R. M. D. De Sousa. Saber. En: Enfoques y Temáticas en Entomología. ParrillaÁlvarez. El Souki. Jiménez. . Boadas. Kiriakos. I.. J. 46: 246-254. S. Parrilla-Álvarez. M. Journal of Venomous Animals and Toxins. D. Págs. L.. y Quiroga. 154-165. Jorquera. M. y Quiroga. D. Bónoli.. Ediciones Astrodata. Michelli. A.. Parrilla-Álvarez. y Quiroga.. 38: 147-152. Barcelona.. De Sousa. Cadernos de Saúde Pública. Accidente cerebrovascular isquémico por emponzoñamiento escorpiónico: observación clínica.. Alacranes con hábitos de invasión del ambiente antrópico depositados en la Colección de Escorpiones del Centro de Investigaciones en Ciencia de la Salud. Turkali. Part I: characterization of some epidemiological aspects. (1997). y De Los Ríos. Universidad de Oriente. L. (2000). (1999). Bónoli. y Borges. L.Reviewarticle. P. Venezuela... Journal of Venomous Animals and Toxins.. L. Quiroga. Scorpion poisoning in the Acosta and Caripe counties of Monagas State. Revista da Sociedade Brasileira de Medicina Tropical..De Los Ríos. Borges. Investigación Clínica.. Tillero. 54:489-504. D. M. (1995). De Sousa. P.. Scorpion sting in Montes Municipality of the State of Sucre. J..

J. Picaduras por escorpión Tityus asthenes en Mutatá. Dehesa-Dávila.. J. Journal of the American Statistical Association. M. L.. (2008b). A. Núñez. y Gregoriani.. 54-286. Vásquez-Suárez A. Borges. (2009). P.. 1837. P. De Sousa. T. Zootaxa. (2002). M. RomeroBellorín M. Op den Camp H. (Eds). Fernández. V. C. Sissom. pp. (2000).. Manzanilla.. R. MEDUNAB.. Saldarriaga.. M. Revista de la Facultad Nacional de Salud Pública. Arbeláez.. clínicos y epidemiológicos del envenenamiento producido por el escorpión Tityus fuhrmanniKraepelin.. J.. Gutierrez. Urbina. I. Quintana. H. 25: 50-60. W. V. A. MT. Lowe. 1: 61-70.. Cornejo-Escobar. Journal of Venom Research. Differences in venom toxicity and antigenicity between females and males of the scorpion Tityus nororientalis (Buthidae). Gómez. Borges A. W.. A. 27: 281-285. 30: 126-139. Biomédica. R.. Pino-García O. 43: 109-126. De Sousa L.. (2010). (1948). Silva.. G. M. E. (1996). Ghersy de Nieto. Colombia: Aspectos epidemiológicos.. Silva. . Dixon. L. Pérez Di Gaeta. J. L. (2008a).. 2009. Ecoepidemiología de los escorpiones de importancia médica en Colombia. Díaz. Chadee-Burgos R. Saber. y Avellaneda. Catalog of the Scorpions of the World (1758-1998). Epidemiological characteristics of scorpion sting in Leon.. J. J. y Quiroga. Koch.. G.. (2007). Aspectos toxinológicos.. P. M.. Fet. New York Entomological Society. A method for obtaining and analyzing sensitivity data. y Mood. Sevcik. y Velásquez. J. northeastern Venezuela. Gómez. A... y Lowe. Manzanilla. R.. Buthidae) en el modelo C57BL/6. J. Borges. Toxicon. J. M. Gómez. y Otero. 16(1): 14-19. (2004). InFet. New York. Biondi.. Otero. (1989).. V. Romero. Mexico. Salazar. clínicos y toxinológicos.. Braunwalder. De Sousa-Insana L.. 5: 159-165. D´Suze.. Discovery and description of the male of Tityus uquirensis (Scorpiones: Buthidae) from Paria Peninsula.. De Sousa. J. Medicina Crítica Venezolana.. V. Second record of Tityusbahiensis from Venezuela: Epidemiological implications. G.31 De Sousa.. Guía para identificar escorpiones de Venezuela Cuaderno lagoven. Otero. Barona. L. Guanajuato.14: 170-177. (2010). 21: 50-62. Caracas. Family Buthidae C. González-Sponga. Evaluación de la actividad biológica del veneno de Tityus gonzalespongai (Scorpiones. V. P.. Diabetes inducida por emponzoñamiento escorpiónico grave en un lactante de un año. Journal of Venomous Animals and Toxins including Tropical Diseaases. 1828: 57-68. Parrilla-Álvarez. y Pardo R.

P. Mejias-R.. Miocarditis tóxica por picadura de alacrán. A. 40: 1339-1346. Fuenmayor. Borges.. Universidad Central de Venezuela. A. R. y Eduarte. (2003). G. N. Y.Toxicon.32 Guinand. Parra. 2: 121-134. Z. FirstreportofhumanLatrodectism in Venezuela... R.. Pratt. 70: 340-347. A. Caracas: Editora LITOPAR. Dávila. Sevcik. (1996). y Barboza. What can toxins tell us for drug discovery?. Toxicon. C.. JA. A. Saber.. (2007).. Manzanilla. D. Ocurrencia de escorpionismo en los distritos sanitarios del estado Mérida. Ecología y distribución de Rhopalurus laticaudaThorell. 42: 202-204.. A.. Gaceta Médica (Caracas). Cloudsley-Thompson. von Eickstedt. Barraviera. KN. 21: 37-46. (2006). López-Nouel.The evolution of scorpionism in Brazil in recent years. M. Lourenço. antivenin administration and cardiovascular manifestations of scorpion envenomation. y Heinemann. W. Review article. Medina. Lourenço. G. Mazzei de Dávila. Harvey. Escorpionismo del género Tityus en la sierra falconiana y su correlación con la liberación de mediadores inflamatorios y enzimas cardíacas. L.. Bradley. (1997).. J. Leipold. (1998). Núñez.... Acta Médica Venezolana. González. A.. Salgar. P. Árias. Donis. L.. CDCH. Yánez. y Luna. de Árias. Cochran. y Jerusalinsky. y Cuellar. scorpionism. B.. y De Sousa. Machado-Allison. V. J. (2002). S. y Rodríguez-Acosta. Journal Venomous Animals Toxins. Z. 35: 1459-1462.. 1: 51-62. 112(2): 131-138.. life history strategies and parthenogenesis. Revista da Sociedade Brasileira de Medicina Tropical. J. y Trejo-Bastidas. Parababire. Hansel. 1876 (Scorpiones: Buthidae) en Venezuela. J. M. 48: 147153. C. H. Mejias-R. M. García. Cortes. . (2004). L. W. González-Sponga. EG. Rowan. Toxicon... 15: 3-14. R. D. O. Molecular Pharmacology. DA. A. y De Sousa. D´Suze. J. C. V. Arata-Bellabarba.. Venezuela. (1974). y Dávila. R. E. y Knox.. JA. 36: 1635-1640. D. Cuéllar O. Subtype specificity of scorpion toxin Tz1 interaction with voltage-gated sodium channels is determined by the pore loop of domain-3. p 45-111. Journal of Venomous Animals and Toxins. (2008).. Mazzei de Dávila. Sympathetic nervous system activation.. Primer caso reportado en Venezuela. Quillfeldt.. Díaz. (1995). Investigación Clínica.. C.. G. Scorpions. M.. Animales venenosos y ponzoñosos de Venezuela. Scorpionen venomation in Mérida. (1997).. SA.. M. Villarreal. Kiriakos.

J. L. B. 3: 17-23.33 Mota.30: 35–40. 98: 742-750. Valderrama. Matallana.. C. y De Sousa. Arsuza. J.. Diversidad y distribución geográfica de la escorpiofauna del estado Zulia.. F. A. 25: 779-783. Scorpion envenoming by Tityus discrepans Pocock. Navio. Prendini. A. (2005).. Becerril. Rodríguez.. Catálogo de los escorpiones de Venezuela (Arachnida: Scorpiones). Actualizaciones Pediátricas. (1998). L. A. FJM.. Los Escorpiones: aspectos ecológicos. (1987). L. Moscoso. E. Porras. Rosillo-González. Biomédica. .. Med-UNAB. (1999). L.. Rodríguez. F. y Sierra. (1994). Zuleta. M. Venezuela. Uribe. M. Transactions of the Royal Society of Tropical Medicine and Hygiene. M. (2007). Revista Científica FCV-LUZ. J. Reyes-Lugo. 11: 412-417. J. Otero.. M. M. Rodríguez. Scorpion higher phylogeny and classification. Maturana... y Becerra-R. Núñez. L. y Lourenço. L. Boletín de la Sociedad Entomológica Aragonesa. y Otero. R.. Accidentes por artrópodos venenosos.. y Tytgat. Saldarriaga.. (2004). García.. W.. Rojas-Runjaic. E. J. Boletín del Hospital de Niños (Caracas). O.. Quintana. taxonomic anarchy.. Sevcik.. 40: 281-307. 42(4): 461-477. R. Toxicon.. R.. 264: 287-300. and standards for peer review in online publishing. Flórez. Lozano. F. R. Delepierre. y Freytez. M. Escorpionismo por Tityus discrepans. Cárdenas. y Rodríguez-Acosta. (2008). Possani. Mesa. Paniagua. DL50 determinations: Objections to the method of Beccari as modified by Molinengo. M. Otero. J.. J. Scorpion envenoming in two regions of Colombia: clinical. Rojas-Runjaic. R. Boletín del Centro de Investigaciones Biológicas. 1897 in the northern coastal region of Venezuela. y Wheeler. (2009). M. 8: 88-92. C.. 57: 98-105. J. W.. S... (2000). Emponzoñamiento escorpiónico: clínica y laboratorio usando antivenina. Fernández. Envenenamiento escorpiónico en niños.. J. Gómez. Díaz. R.. J. y Guirado-Pastor. Scorpion toxins specific for Na+channels. Otero... O. Núñez. biológicos y toxinológicos. 29: 33-34. J. Duque. (2001). Barona. Martínez. epidemiological and therapeutic aspects. Archivos Venezolanos de Pediatría y Puericultura.. Paz. A. Estudio retrospectivo 1983-1986. Beltrán. Saldarriaga.. Escorpiones y escorpionismo en Colombia. M. M... 21: 446-494. N. European Journal of Biochemistry.. Céspedes. Bastardo.. Ghersy de Nieto. L. (1994). Cladistics. Rodas. D. V. M. N. E.

).. 135-150. European Journal of Physiology (Pflügers Archives). P. A simple device for collecting scorpion venom.34 Shulov. En: Venenos: Aspectos clínicos y terapêuticos dos acidentes por animais peçonhentos. y Backx. A. (Ed. Barraviera. EUPB/Editora de Publicações Biomédicas. . Tsushima. Biología dos Escorpioes. E. (1969). E. A. Pp. R. Spirandeli-Cruz. Inactivated state dependence of sodium channel modulation by B-scorpion toxin. B. 437: 661-668. Toxicon. 2: 169-170. (1999). y Zlotkin. Borges. (1999). Rio de Janeiro.