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INPE 4010: GENERALIDADES

Laboratorios 2
2--3
• Más de 120 años
• Método Oficial
ANÁLISIS PROXIMAL • Sencillo y bajo costo

(ESQUEMA DE • Equipo poco especializado


• Trata de cuantificar el contenido
WEENDE) de los principales nutrientes
• Serias limitaciones, especialmente
para el análisis de forrajes

E. Riquelme. Alimentación y Nutrición Animal LAB-2 - 1 E. Riquelme. Alimentación y Nutrición Animal LAB-2 - 2

ESQUEMA GENERAL MATERIA SECA


• Eliminar toda el agua
• Métodos evaporativos:
–Horno secador (105 °C)
Horno de convección (55 – 65 °C)
–Horno C)
–Horno al vacío
• Otros métodos:
–Liofilización
–Karl Fisher

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DETERMINACIÓN DE
MATERIA SECA MATERIA SECA (MS)
Concepto Peso (g)
• Importancia:
–Agua es un nutriente Bolsa húmeda 36.5 4
–Diluye
Diluye el resto de los nutrientes Bolsa + Muestra húmeda 159 54
159.54
–Alta densidad ($) Muestra húmeda 123.00
–Dificulta el almacenamiento
Bolsa + muestra seca 103.70
–Afecta el consumo (volumen)
–Propiedades solventes Bolsa seca 33.62
Muestra seca 70.08
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RESULTADOS CENIZAS
• Residuo Inorgánico
• % de MS: • Calcinación de la muestra
–% MS = (Peso seco/Peso húmedo) x 100 (seca) a 550 – 600 °C
–%
% MS = (70.08/123.00)
(70 08/123 00) x 100 = 56.97
56 97 • Contiene
C los minerales
• % de Humedad: • Algunos se volatilizan
–% H = 100 - % MS
• Determinación cuantitativa
–% H = 100 – 56.97 = 43.03
• Impurezas, contaminación,
adulteración
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MATERIA ORGÁNICA DETERMINACIÓN
• Contiene los nutrientes Concepto Peso (g)
orgánicos (mayoría) Peso del crisol seco 6.546
• Se obtiene por diferencia
Crisol + Muestra seca 8.237
• Dependiendo del material,
material puede
incluir minerales que se Peso muestra seca 1.691
volatilizan a altas temperaturas
Crisol + Cenizas 6.985
• Se correlaciona directamente
con el contenido energético del Peso de las Cenizas 0.439
alimento Peso de la Materia Orgánica 1.252

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RESULTADOS (BS) BASES DE


COMPARACIÓN
• % de Cenizas: • Base húmeda o fresca:
– Contenido de nutrientes expresado
–% CEN = (Peso cenizas/Peso muestra) como porcentaje del peso de la muestra
x 100 en su estado original.
–% CEN = (0.439/1.691) x 100 = 25.96 • Base seca:
• % de Mat. Orgánica: – Contenido de nutrientes expresado
como porcentaje del peso de la muestra
–% MO = 100 - % CEN seca.
–% MO = 100 – 25.96 = 74.04 • Base seca al aire:
–% MO = (Peso MO/Peso Muestra) x 100 – Contenido de nutrientes expresado
como porcentaje del peso de la muestra
–% MO = (1.252/1.691) x 100 = 74.04 con 90 % de materia seca seca.

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EQUIVALENCIAS CONVERSIONES

100%
90%
• De BS a BH (valor numérico
80% HUM disminuye)
70% CEN
60%
ELN
50%
40%
EE % Nutr. (BS) * % MS
30% FB % Nutr. (BH) =
20% PB 100
10%
0%
BH BS

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EJEMPLO CONVERSIONES
• De BH a BS (valor numérico
• MS = 40.0 %; FB = 16.0 % (BS)
aumenta)
16.0 * 40.0
% FB
F (BH)
( )=
100 % Nutr. (BH) * 100
% Nutr. (BS) =
% MS
% FB (BH) = 6.40 %

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EJEMPLO ALTERNATIVA

• MS = 40.0 %; FB = 6.4 % (BH) • Utilizando el factor de dilución


(FD)
6.40 * 100 FD = 100/% MS
% FB (BS) =
40.0 % Nutr. (BS)
% Nutr. (BH) =
FD
% FB (BS) = 16.0 %
% Nutr. (BS) = % Nutr. (BH) * FD

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EJEMPLO RESULTADOS (BH)


• MS = 56.9 %
• Si MS = 40 %:
• % de Cenizas (25.96 % BS):
FD = 100/40.0 = 2.50 –% CEN BH = (% CEN BS * % MS)/100
–% CEN BH = (25
(25.96
96 * 56.9)/100
56 9)/100 = 14.77
14 77
16.0 • % de Mat. Orgánica (74.04 %BS):
% FB (BH) = = 6.40
2.50 –% MO BH = % MS - % CEN BH
–% MO = 56.9 – 14.77 = 42.13 %
% FB (BS) = 6.40 * 2.50 = 16.00 –% MO BH = (% MO BS * % MS)/100
–% MO BH = (74.04 * 56.9)/100 = 42.13 %
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RESULTADOS (BH) PROTEÍNA BRUTA

•MS = 56.9 % ; FD = 1.757 • Se determina Nitrógeno Total


•% de Cenizas: • Método Kjeldahl
–% CEN BH = (% CEN BS /FD • Oxidación de la Materia
–% CEN BH = (25.96/1.757) = 14.77 O á
Orgánica con un á
ácido fuerte
•% de Mat. Orgánica: • Proteína bruta se estima
aplicando un coeficiente de
–% M0 BH = 56.90 – 14.77 = 42.13 %
conversión de N-Total a PB
–% MO BH = (% MO BS/FD)
–% MO BH = (74.04/1.757)= 42.13 % • Varias limitaciones
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PROTEÍNA BRUTA PROTEÍNA BRUTA


•Digestión:
™Pesar muestra (0.15 g) •Digestión:
–El carbono se oxida a CO2
™Agregar 4 - 6 ml H2SO4 (Ácido Sulfúrico)

concentrado –El
El nitrógeno se reduce a NH3 (AMONIACO) y
por estar en medio ácido se mantiene
™Agregar catalizador (Mezcla de en solución como NH4+ (AMONIO)
CuSO4 y K2SO4 ;
(SULFATO DE COBRE) (SULFATO de potasio)

0.5 g)
N en M.O. + H2SO4 + Cat. = CO2 + SO2 + (NH4)2 SO4
™Digerir a 350°C hasta que la
solución esté transparente
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PROTEÍNA BRUTA PROTEÍNA BRUTA
• Destilación:
– Adicionar agua •Titulación:
– Hacer el medio alcalino por la Adición de
NaOH (Hidróxido de sodio) (40%) y tiosulfato de –Debido a que la relación de NH3/BO3–
sodio es 1/1,, el NH3 se determina
– El Na desplaza al NH4+ del sulfato y lo indirectamente titulando el BO3– (A. bórico)
libera como NH3 con HCl (a. clorhidrico) estándar
– El NH3 liberado se colecta en una
solución de HBO3 que lo retiene como
NH4+
BO3-- + H+Cl-- = HBO3 + Cl--
(NH4)2 SO4 + 2 NaOH = 2 NH3 + Na2 SO4 + H2O
NH3 + HBO3 = NH4+ + BO3--
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PROTEÍNA BRUTA PROTEÍNA BRUTA

Cálculos: Limitantes:
• No todo el N está en proteínas
V (ml) x N (Meq/ml) x 14.01 (g/Eq) • No se relaciona con contenido
%N= X 100 de AA
1000 (mg/g) x peso muestra (g)
• No se relaciona con
disponibilidad
PB (%) = N (%) x 6.25
• El coeficiente 6.25 no es
El contenido promedio de nitrógeno en las proteínas es 16%. Así, el porcentaje aplicable a todas las proteínas
de proteína en un alimento es calculado como el porcentaje de nitrógeno
multiplicado por 6.25 (100/16 = 6.25).

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DETERMINACIÓN EXTRACTO ETÉREO
Concepto Valor • Fracción
Fracción de la materia orgánica
Peso muestra seca (g) 0.1486 que es soluble en éter dietílico
Volumen ácido utilizado (ml) 3.80 anhidro
Normalidad del ácido 0.048 • Se
S consideraba sinónimo
ó del
% de N (BS) 1.7197 contenido de grasas
% de N (BH) (56.9 % MS) 0.9785 • Alto valor energético
% de PB (BS) 10.7481 • Fuente de ácidos grasos
% de PB (BH) (56.9 % MS) 6.1157 indispensables
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EXTRACTO ETÉREO DETERMINACIÓN


• Procedimiento: Concepto Valor
–Pesar la muestra seca (1.0 g) Peso dedal seco (g) 12.4356
–Ponerla en un dedal de celulosa o Peso dedal y muestra seca (g) 13.3487
cerámica porosa
Peso neto muestra seca (g) 0.9131
–Hacer circular éter por 4 – 16
horas P. dedal y muestra post-extr. (g) 13.3246

–Evaporar el éter Peso neto grasa (g) 0.0241


–Pesar el residuo y expresarlo como % de EE (BS) 2.6394
porcentaje de la muestra % de EE (BH) (23.54 % MS) 0.6213
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EXTRACTO ETÉREO FIBRA BRUTA
• Modificaciones: • Fracción de la materia orgánica
–Acetona en vez de éter que es insoluble en ácido y álcali
• Objeciones: débil
–El residuo incluye: • Se consideraba
e un indicador del
e
•Grasas contenido de CHO’s
•Ceras
estructurales (celulosa)
•Vitaminas liposolubles
•Pigmentos • Se relaciona con alto volumen,
•Terpenos baja digestibilidad y bajo valor
•Otros compuestos energético
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FIBRA BRUTA DETERMINACIÓN


• Procedimiento: Concepto Valor
–Muestra seca y libre de grasa 1. Peso MSLG (g) 0.9743
(MSLG) 2. Peso crisol gooch seco (g) 46.3487
–Digestión (30 m) en ácido diluido 3. Peso crisol y residuo seco (g) 46.4639
(H2SO4 0.255 N)
4. Peso crisol y cenizas (g) 46.3246
–Filtrar y enjuagar
5. Peso neto Fibra Bruta (g) (3-4) 0.1398
–Digestión (30 m) en álcali diluido
(NaOH 0.313 N) 6. % FB en MSLG (5*100/1) 14.30
–Filtrar, enjuagar, secar y pesar 7. % FB en MS (92.44 % MSLG) 13.22
–Incinerar y pesar las cenizas
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FIBRA BRUTA FIBRA BRUTA
• Objeciones: • Implicaciones:
– Fibra bruta (FB) no está definida –No detecta todos los CHO’s
estructurales ni sustancias
químicamente asociadas
–Contiene: –Poca
Poca relación entre contenido de
•Celulosa fibra bruta y digestibilidad
•Hemicelulosa insoluble en ácido –Sobre-estima el valor de los
diluido forrajes
•Lignina insoluble en álcali diluido –Más útil para evaluar alimentos
concentrados y estimar valor
•Otras sustancias insolubles en ácido y nutricional para no rumiantes
álcali diluidos
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EXTRACTO LIBRE DE EXTRACTO LIBRE DE


NITRÓGENO NITRÓGENO
• No se determina; se obtiene por • OBJECIONES:
diferencia –Recolecta todos los errores de las
ELN = MO – PB – EE – FB determinaciones de PB, FB y EE
–Contiene:
• Se
S relaciona con el contenido de
•CHO’s no estructurales
CHO’s no estructurales
•Hemicelulosa soluble en ácido diluido
–Alta digestibilidad •Lignina soluble en álcali diluido
–bajo volumen –Dependiendo del alimento, puede
–Alto contenido energético ser poco digerible

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COMENTARIOS EJEMPLO DE
FINALES CÁLCULOS
bh = 9.6
• Método oficial bh = 40
PB
HUM
bs = 16.0
• Metodología fácil y accesible bs = 0
bh = 2.4
• Amplia base de datos bh = 54.0 EE
bh = 100
• Adecuado para granos y MH
MO bs = 4.0
bs = 90.0
concentrados bs = n/a bh = 4.8
• No adecuado para forrajes FB
bh = 60 bs = 8.0
• Útil al conocer sus ventajas y MS bh = 6.0 bh = 37.2
desventajas bs = 100 CEN ELN
bs = 10.0 bs = 62.0
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